Производное пиридоксина для лечения эпилепсии



Производное пиридоксина для лечения эпилепсии
Производное пиридоксина для лечения эпилепсии
Производное пиридоксина для лечения эпилепсии
Производное пиридоксина для лечения эпилепсии
Производное пиридоксина для лечения эпилепсии
Производное пиридоксина для лечения эпилепсии
Производное пиридоксина для лечения эпилепсии

Владельцы патента RU 2650523:

федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Казанский (Приволжский) федеральный университет" (ФГАОУ ВО КФУ) (RU)

Изобретение относится новому соединению на основе пиридоксина формулы 1:

Заявленное соединение проявляет высокий уровень противоэпилептической активности. 1 з.п. ф-лы, 2 ил., 5 пр.

 

Изобретение относится к физиологически активным веществам - производным пиридоксина, а именно, соединению формулы 1, обладающего противоэпилептической активностью.

Эпилепсия - одно из наиболее распространенных в мире хронических заболеваний нервной системы, которым страдают как дети, так и взрослые. По данным ВОЗ, эпилепсией страдают около 50 млн человек, что составляет порядка 0,5-1% населения планеты. Ежегодно в мире диагностируется примерно 2,5 млн новых случаев. 30% больных эпилепсией являются фармакорезистентными.

Из исследованного уровня техники заявителем не выявлены технические решения - аналоги заявленного технического решения по химической структуре.

Из исследованного уровня техники заявителем выявлены известные технические решения - аналоги заявленного технического решения по назначению, а именно - противоэпилептические препараты.

В соответствии с современной международной практикой все имеющиеся в настоящее время противоэпилептические препараты (ПЭП) подразделяют на:

- старые (фенобарбитал и дифенин);

- промежуточные (сукцинимиды и бензодиазепины);

- базовые (вальпроаты и карбамазепин);

- новые (ламотриджин, топирамат, окскарбазепин, леветирацетам, тиагабин, габапентин, фелбамат, прегабалин, зонисамид).

Из перечисленных выше препаратов препараты вальпроевой кислоты (вальпроаты) и препараты группы карбамазепина в настоящее время применяют наиболее часто и считают препаратами «первого выбора» (базовые препараты).

Известен препарат Депакин (Sanofi-Aventis, Франция). Активное вещество: вальпроевая кислота. Показания к применению: генерализованные эпилептические приступы - клонические, тонические, тонико-клонические, абсансы, миоклонические, атонические; синдром Леннокса-Гасто; парциальные эпилептические приступы с вторичной генерализацией или без нее (в монотерапии или в комбинации с другими противоэпилептическими средствами). Допускается применение в педиатрии.

Недостатком известного препарата являются следующие побочные эффекты: сонливость, расстройства желудочно-кишечного тракта, гепатотоксичность, панкреотоксичность, тошнота, набор веса [Stevens G.M. Pharmacology / G.М. Stevens, С.W. Brenner - Philadelphia: Elsevier/Saunders, 2013. - 519 c. (https://books.google.ru/books?id=Cd39SN6OBiMC&pg=PA204&redir_esc=y#v=onepage&q&f=false)]. Острая токсичность на мышах (вальпроат натрия) при пероральном введении LD50: 977 мг/кг, при внутрибрюшинном введении LD50: 470 мг/кг (http://datasheets.scbt.com/sc-202378.pdf).

Известен препарат Финлепсин (AWD.pharma, Германия). Активное вещество: карбамазепин. Показания к применению: эпилепсия - парциальные припадки с элементарной симптоматикой (фокальные припадки), парциальные припадки со сложной симптоматикой, психомоторные припадки, большие судорожные припадки в основном фокального генеза (большие судорожные припадки во время сна, диффузные большие судорожные припадки), смешанные формы эпилепсии; невралгия тройничного нерва; идиопатическая невралгия языкоглоточного нерва; боли при диабетической полиневропатии; эпилептиформные судороги при рассеянном склерозе, спазмы лицевых мышц при невралгии тройничного нерва, тонические судороги, пароксизмальная дизартрия и атаксия, пароксизмальные парестезии и приступы боли; синдром алкогольной абстиненции (тревога, судороги, гипервозбудимость, нарушения сна); психотические расстройства (аффективные и шизоаффективные расстройства, психозы, нарушения функции лимбической системы). Допускается применение в педиатрии.

Недостатком известного препарата являются следующие побочные эффекты: сонливость, заторможенность и прочие признаки угнетения центральной нервной системы, атаксия, тошнота, редко - апластическая анемия [Stevens G.M. Pharmacology / G.M. Stevens, С.W. Brenner - Philadelphia: Elsevier/Saunders, 2013. - 519 c. (https://books.google.ru/books?id=Cd39SN6OBiMC&pg=PA204&redir_esc=y#v=onepage&q&f=false)]. Острая токсичность на мышах (карбамазепин) при пероральном введении LD50: 529 мг/кг, при внутрибрюшинном введении LD50: 114 mg/kg (http://datasheets.scbt.com/sc-202518.pdf).

Известен препарат Фенобарбитал (ОАО Дальхимфарм, Россия). Активное вещество: фенобарбитал. Показания к применению: эпилепсия - генерализованные тонико-клонические припадки, фокальные приступы у взрослых и детей; хорея; спастические параличи; различные судорожные реакции; в качестве успокаивающего в малых дозах в сочетании с другими препаратами (спазмолитики, сосудорасширяющие средства) при нейровегетативных расстройствах; как снотворное средство. Допускается применение в педиатрии.

Недостатком известного препарата являются следующие побочные эффекты: атаксия, снижение умственных способностей, сонливость, головокружение, развитие зависимости, сыпь, угнетение дыхания [Stevens G.M. Pharmacology / G.M. Stevens, С.W. Brenner - Philadelphia: Elsevier/Saunders, 2013. - 519 c. (https://books.google.ru/books?id=Cd39SN6OBiMC&pg=PA204&redir_esc=y#v=onepage&q&f=false)]. Острая токсичность на крысах (фенобарбитал) при пероральном введении LD50: 163 мг/кг (http://www.sciencelab.com/msds.php?msdsId=9926461).

Известен препарат Дифенин (Усолье-Сибирский ХФЗ, Россия). Активное вещество: фенитоин. Показания к применению: эпилепсия (большие судорожные припадки); эпилептический статус с тонико-клоническими припадками; эпилептические припадки в нейрохирургии (профилактика и лечение); желудочковые аритмии (в т.ч. при гликозидной интоксикации или связанные с интоксикацией трициклическими антидепрессантами); невралгия тройничного нерва (в качестве средства второго ряда или в комбинации с карбамазепином). Допускается применение в педиатрии.

Недостатком известного препарата являются следующие побочные эффекты: нарушения пищеварения, гиперплазия десен, мегалобластная анемия и прочие проявления недостаточности красных кровяных телец, остеомаляция, психиатрические проявления [Stevens G.M. Pharmacology / G.M. Stevens, С.W. Brenner - Philadelphia: Elsevier/Saunders, 2013. - 519 c. (https://books.google.ru/books?id=Cd39SN6OBiMC&pg=PA204&redir_esc=y#v=onepage&q&f=false)]. Острая токсичность на мышах (фенитоин натрия) при пероральном введении LD50: 165 мг/кг (http://www.pfizer.com/system/files/products/material_safety_data/PHENYTOIN%20SODIUM%20SOLN.pdf).

Известен препарат Суксилеп (Delpharm Lille S.a.S., Франция). Активное вещество: этосуксимид. Показания к применению: приступы пикнолептических абсансов; сложные и атипичные судорожные припадки; миоклонико-астатические малые припадки; юношеские миоклонические припадки (импульсивные малые припадки). Не рекомендуется к применению для детей до 6 лет.

Недостатком известного препарата являются следующие побочные эффекты: сонливость, головокружение, нарушения пищеварения, вялость и тошнота [Stevens G.M. Pharmacology / G.M. Stevens, С.W. Brenner - Philadelphia: Elsevier/Saunders, 2013. - 519 c. (https://books.google.ru/books?id=Cd39SN6OBiMC&pg=PA204&redir_esc=y#v=onepage&q&f=false)]. Острая токсичность на мышах (этосуксимид) при пероральном введении LD50: 1530 мг/кг (http://www.pfizer.com/files/products/material_safety_data/ETHOSUXIMIDE%20CAPSULES.pdf).

Известен препарат Ламитор (Torrent Pharmaceuticals, Индия). Активное вещество: ламотриджин. Показания к применению: эпилепсия - парциальные и генерализованные припадки, включая тонико-клонические судороги, а также припадки при синдроме Леннокса-Гасто в составе комбинированной терапии или монотерапии. Допускается применение в педиатрии.

Недостатком известного препарата являются следующие побочные эффекты: атаксия, диплопия, головокружение, сонливость, головная боль, тошнота, сыпь, синдром Стивенса-Джонсона [Stevens G.M. Pharmacology / G.М. Stevens, С.W. Brenner - Philadelphia: Elsevier/Saunders, 2013. - 519 c. (https://books.google.ru/books?id=Cd39SN6OBiMC&pg=PA204&redir_esc=y#v=onepage&q&f=false)]. Острая токсичность на мышах (ламотриджин) при пероральном введении LD50: 269 мг/кг (http://www.msds-gsk.com/GetSdsFile.ashx?fileId=5508).

Известен препарат Топирамат (АЛСИ Фарма, Россия). Активное вещество: топирамат. Показания к применению: монотерапия у взрослых и детей с 6 лет с парциальными (с вторичной генерализацией или без) или первично генерализованными тонико-клоническими судорогами; комплексная терапия у взрослых и детей старше 3 лет с парциальными с вторичной генерализацией или без или генерализованными тонико-клоническими судорогами, а также для лечения судорог, обусловленных синдромом Леннокса-Гасто; профилактика приступов мигрени у взрослых.

Недостатком известного препарата являются следующие побочные эффекты: атаксия, головокружение, сонливость, нистагм, парестезия, психомоторные нарушения [Stevens G.M. Pharmacology / G.M. Stevens, С.W. Brenner - Philadelphia: Elsevier/Saunders, 2013. - 519 c. (https://books.google.ru/books?id=Cd39SN6OBiMC&pg=PA204&redir_esc=y#v=onepage&q&f=false)]. Острая токсичность на крысах (топирамат) при пероральном введении LD50: 3570 мг/кг (https://fagron.com/sites/default/files/document/msds_coa/97240-79-4_(USA).pdf).

Известен препарат Леветинол (Actavis hf., Исландия). Активное вещество: леветирацетам. Показания к применению: парциальные судороги с вторичной генерализацией или без нее у пациентов с 16 лет с впервые диагностированной эпилепсией; миоклонические судороги у пациентов с ювенильной миоклонической эпилепсией с 12 лет; первично генерализованные тонико-клонические судороги у пациентов с идиопатической генерализованной эпилепсией с 12 лет.

Недостатком известного препарата являются следующие побочные эффекты: сонливость, слабость и головокружение [Stevens G.M. Pharmacology / G.M. Stevens, С.W. Brenner - Philadelphia: Elsevier/Saunders, 2013. - 519 c. (https://books.google.ru/books?id=Cd39SN6OBiMC&pg=PA204&redir_esc=y#v=onepage&q&f=false)]. Острая токсичность на мышах (леветирацетам) при пероральном введении LD50: >5000 мг/кг (http://www.akorn.com/documents/catalog/msds/50383-241-16.pdf) при внутривенном введении LD50: 1081 мг/кг (https://www.caymanchem.com/msdss/9001820m.pdf).

Известен препарат Тебантин (Gedeon Richter, Венгрия). Активное вещество: габапентин. Показания к применению: парциальные судороги с вторичной генерализацией или без нее у взрослых и детей старше 12 лет в качестве монотерапии или дополнительной терапии; парциальные судороги с вторичной генерализацией или без нее у детей от 3 до 12 лет в качестве дополнительной терапии; нейропатические боли у больных старше 18 лет.

Недостатком известного препарата являются следующие побочные эффекты: атаксия, сонливость, головокружение, нистагм и дрожание конечностей [Stevens G.M. Pharmacology / G.М. Stevens, С.W. Brenner - Philadelphia: Elsevier/Saunders, 2013. - 519 c. (https://books.google.ru/books?id=Cd39SN6OBiMC&pg=PA204&redir_esc=y#v=onepage&q&f=false)]. Острая токсичность на мышах (габапентин) при пероральном введении LD50: >5000 мг/кг; при внутривенном введении LD50: 1000-2000 мг/кг (http://www.pfizer.com/system/files/products/material_safety_data/PZ01158.pdf).

Известен препарат Лирика (Pfizer Manufacturing Deutschland, Германия). Активное вещество: прегабалин. Показания к применению: нейропатическая боль у взрослых; эпилепсия (в качестве дополнительной терапии у взрослых с парциальными судорожными приступами, сопровождающимися или не сопровождающимися вторичной генерализацией); генерализованное тревожное расстройство у взрослых; фибромиалгия у взрослых. Не применяется в педиатрии.

Недостатком известного препарата являются следующие побочные эффекты: сонливость, нарушения зрения, набор веса, нарушение координации движений [Stevens G.M. Pharmacology / G.M. Stevens, С.W. Brenner - Philadelphia: Elsevier/Saunders, 2013. - 519 c. (https://books.google.ru/books?id=Cd39SN6OBiMC&pg=PA204&redir_esc=y#v=onepage&q&f=false)]. Острая токсичность на крысах (габапентин) при пероральном введении LD50: >5000 мг/кг; при внутривенном введении LD50: >300 мг/кг (http://www.pfizer.com/system/files/products/material_safety_data/PZ01158.pdf).

Известен препарат Зонегран (Eisai Co. Ltd., Япония). Активное вещество: зонисамид.. Показания к применению: монотерапия у пациентов с парциальными эпилептическими приступами с вторичной генерализацией или без, с впервые диагностированной эпилепсией; в составе дополнительной терапии у взрослых, подростков и детей с 6 лет с парциальными эпилептическими приступами с вторичной генерализацией или без.

Недостатком известного препарата являются следующие побочные эффекты: головная боль, головокружение, сонливость, анорексия, тошнота, в раннем возрасте - метаболический ацидоз [Stevens G.M. Pharmacology / G.М. Stevens, С.W. Brenner - Philadelphia: Elsevier/Saunders, 2013. - 519 c. (https://books.google.ru/books?id=Cd39SN6OBiMC&pg=PA204&redir_esc=y#v=onepage&q&f=false)]. Острая токсичность на мышах (зонисамид) при пероральном введении LD50: 1829 мг/кг, при внутрибрюшинном введении LD50: 699 mg/kg (http://datasheets.scbt.com/sc-203316.pdf).

Таким образом, общими недостатками известных препаратов являются: наличие существенных побочных эффектов, невосприимчивость симптомов болезни к лечению, а также высокая стоимость лечения. На сегодняшний день велика потребность в создании и внедрении в клиническую практику новых, эффективных и безопасных препаратов для лечения эпилепсии.

Задачей заявленного технического решения является получение нового соединения, обладающего высокой противоэпилептической активностью и не имеющего аналогов в мире по химической структуре.

Техническим результатом предлагаемого изобретения является новое противоэпилептическое соединение на основе пиридоксина, обладающее способностью эффективно купировать эпилептические припадки.

Задача решается и указанный технический результат достигается получением заявленного нового соединения формулы 1, обладающего способностью эффективно снижать эпилептическую активность мозга.

Заявленное соединение получают посредством трехстадийного синтеза из исходного 6-гидроксиметильного производного пиридоксина 2 согласно нижеприведенной схеме:

Структуры полученных соединений подтверждены методами масс-спектрометрии, 1H и 13C ЯМР-спектроскопии. Спектры ЯМР регистрируют на приборе Bruker AVANCE-400. Химический сдвиг определяют относительно сигналов остаточных протонов дейтерированных растворителей (1H и 13C). Температуры плавления определяют с помощью прибора Stanford Research Systems МРА-100 OptiMelt. Контроль за ходом реакций и чистотой соединений проводят методом ТСХ на пластинах Sorbfil Plates. Эксперимент ВЭЖХ/МС сверхвысокого разрешения проведен с использованием масс-спектрометра TripleTOF 5600, АВ Sciex (Германия).

В качестве препаратов, вызывающих эпилептические припадки, брали пенициллин и коразол, которые, как известно из уровня техники, способны вызывать эпилептические припадки при попадании в центральную нервную систему [Миронов А.Н., Бунатян Н.Д. и др. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств].

Заявленное техническое решение иллюстрируется Фиг. 1 и Фиг. 2.

На Фиг. 1 представлена Таблица 1, в которой приведены данные по противоэпилептическим свойствам соединения 1 на пенициллиновой модели эпилепсии на крысах.

На Фиг. 2 представлена Таблица 2, в которой приведены данные по противоэпилептическим свойствам соединения 1 на коразоловой модели эпилепсии на крысах.

Заявленное техническое решение поясняется следующими примерами конкретного выполнения.

Пример 1. Синтез (5-гидрокси-3,4-бис(гидроксиметил)-6-метилпиридин-2-ил)метансульфокислоты (1).

Соединение 1 получают в 3 стадии из исходного соединения (2).

1 стадия. Навеску 100.0 г (0.418 моль) 6-(гидроксиметил)-3,3,8-триметил-1,5-дигидро-[1,3]диоксепино[5,6-с]пиридин-9-ола (2) [Штырлин, Н.В. Новый метод синтеза 6-метил-2,3,4-трис(гидроксиметил)пиридин-5-ола / Н.В. Штырлин, А.Д. Стрельник, Л.П. Сысоева, О.А. Лодочникова, Е.Н. Климовицкий, Ю.Г. Штырлин // Журн. орг. химии. - 2009. - Т. 45, Вып. 8. - С. 1274-1275.] суспендируют в 1000 мл дихлорметана. К полученной суспензии при перемешивании одной порцией добавляют 145.0 мл (1.045 моль) триэтиламина, затем по каплям 74.2 мл (1.045 моль) ацетилхлорида. Реакционную смесь перемешивают 2 часа при комнатной температуре. После этого раствор промывают три раза по 500 мл воды. Органическую фракцию сушат над сульфатом магния, профильтровывают и упаривают на роторном испарителе с получением 132.0 г (98%) (9-ацетокси-3,3,8-триметил-1,5-дигидро-[1,3]диоксепино[5,6-с]пиридин-6-ил)метилацетата (3).

2 стадия. Навеску (9-ацетокси-3,3,8-триметил-1,5-дигидро-[1,3]диоксепино[5,6-с]пиридин-6-ил)метилацетата (3) из предыдущей стадии (132.0 г, 0.408 моль) растворяют в 700 мл метилового спирта. Отдельно готовят раствор 127.0 г (1.225 моль) сульфита натрия в 900 мл воды. Полученные растворы сливают вместе и перемешивают при комнатной температуре в течение 4 часов. После чего смесь нейтрализуют соляной кислотой до pH 7.0 и упаривают на роторном испарителе. Сухой кубовый остаток экстрагируют 600 мл горячего н-пропилового спирта и фильтруют. Из фильтрата при охлаждении выпадает продукт, который отфильтровывают, промывают 3 раза по 50 мл холодным н-пропанолом и сушат с получением 75.9 г (57%) (9-гидрокси-3,3,8-триметил-1,5-дигидро-[1,3]диоксепино[5,6-с]пиридин-6-ил)метансульфоната (4) натрия. Т. пл. 197°C с разл. ЯМР 1H (400 МГц, ДМСО-d6), δ, м.д.: 1.38 (с, 6Н, C(CH3)2); 2.30 (с, 3H, CH3); 3.82 (с, 2Н, CH2-S); 4.79 (с, 2Н, CH2); 4.90 (с, 2Н, CH2). ЯМР 13C {1H} (100 МГц, ДМСО-d6), δ, м.д.: 19.28; 23.73; 57.47; 59.11; 60.97; 101.45; 132.07; 134.18; 140.97; 143.25; 146.78. HRMS-ESI: найдено [M+H]+ 326.0669, [M+Na]+ 348.0488, C12H16NNaO6S, вычислено [M+H]+ 326.0669, [M+Na]+ 348.0488.

3 стадия. Навеску (9-гидрокси-3,3,8-триметил-1,5-дигидро-[1,3]диоксепино[5,6-с]пиридин-6-ил)метансульфоната (4) натрия из предыдущей стадии (75.9 г, 0.233 моль) растворяют в 500 мл воды. Полученный раствор доводят до pH 1 концентрированной соляной кислотой. Реакционную смесь оставляют на 3 часа при комнатной температуре, после чего упаривают на роторном испарителе. Сухой остаток экстрагируют 200 мл холодной соляной кислоты и отфильтровывают. К фильтрату добавляют 700 мл изопропанола. Из смеси на холоду выпадает кристаллический осадок, который отфильтровывают и промывают 3 раза по 30 мл холодным изопропанолом и сушат с получением целевого продукта - 60.8 г (95%) (5-гидрокси-3,4-бис(гидроксиметил)-6-метилпиридин-2-ил)метансульфокислоты (1). Т. разл. 250°C. ЯМР 1H (400 МГц, ДМСО-d6), δ, м.д.: 2.56 (с, 3H, CH3); 4.27 (с, 2Н, CH2-S); 4.70 (с, 2Н, CH2); 4.90 (с, 2Н, CH2). ЯМР 13C {1H} (100 МГц, ДМСО-d6), δ, м.д.: 14.74; 51.57; 55.52; 56.19; 136.44; 138.79; 141.50; 142.95; 151.62. HRMS-ESI: найдено [M+H]+ 264.0536, C9H13NO6S, вычислено [M+H]+ 264.0536.

Пример 2. Исследование влияния соединения 1 на электрическую активность мозга при эпилептических приступах (на примере пенициллиновой модели эпилепсии).

Эксперименты проводили на самцах крыс линии Вистар массой тела 180-250 г.

Под изофлурановым наркозом (1.5%) проводят операционную подготовку к эксперименту. Для анестезии на время эксперимента используют уретан (1,5 мг/кг). Далее фиксируют животное в стереотаксической установке. В черепе животных просверливают отверстия 2×2 мм над симметричными областями сенсомоторной коры головного мозга и устанавливают 16-ти канальный зонд на кремниевой основе (Neuronexus) с шагом 100 мкм между регистрирующими электродами для отведения электрической активности с указанных областей. Хлорсеребряный электрод, который служит объединенным заземленным и электродом сравнения, вводят в мозжечок или зрительную кору на глубину 2-3 мм.

Для создания очага эпилептической активности параллельно соматосенсорным зонам в области зрительной коры просверливают отверстия 2×2 мм, куда апплицируют 10 мкл раствора натриевой соли бензилпенициллина в концентрации 40000 МЕ/мл.

Соединение 1 в дозе 100 мг/кг, 50 мг/кг, 25 мг/кг вводят внутрибрюшинно (в/б) на фоне устойчивой эпилептиформной активности через 30 минут после аппликации пенициллина. Оценивают амплитудно-частотные характеристики эпилептиформной активности.

В качестве вещества сравнения используют вальпроат натрия 600 мг/кг, который вводят в/б на фоне устойчивой эпилептиформной активности.

При статистической обработке экспериментальных данных используют статистические программы Origin 8.5 и IBM SPSS Statistics.

Достоверность различий между популяциями оценивают по U-критерию Манна-Уитни.

Результаты экспериментов заявителя по Примеру 2 показывают следующее.

Через 2-3 минуты после внутричерепной аппликации пенициллина наблюдают появление на электроэнцефалограмме острых высокоамплитудных волн (1000-20000 мкВ) с частотой от 20 до 70 мин-1. Высокоамплитудные электрические разряды (ВЭР), вызываемые пенициллином, наблюдают на протяжении трех часов регистрации. Их наличие, частота и амплитуда являются характеристическими показателями эпилептической активности головного мозга.

Эффект пенициллина через 30 минут действия приравнен к 100% и назван «точкой отсчета», начиная с которой вводят исследуемые соединения (заявленное соединение и препарат сравнения - вальпроат натрия).

Характеристики ВЭР через 5, 30 и 60 минут после точки отсчета приведены в Таблице 1 на Фиг. 1.

Из данных Таблицы 1 видно, что введение заявленного соединения 1 приводит к снижению амплитуды и частоты ВЭР, полностью подавляя ВЭР у животного через 60 минут после введения.

Введение вальпроата натрия не приводит к полному подавлению ВЭР.

Из вышеизложенного можно сделать вывод, что противоэпилептический эффект заявленного соединения 1 в дозе 25, 50, 100 мг/кг выражен значительно сильнее, чем у препарата сравнения - вальпроата натрия, так как введение вальпроата натрия даже в дозе 600 мг/кг не приводит к полному подавлению ВЭР. Таким образом, противоэпилептический эффект заявленного соединения выше, по сравнению с вальпроатом натрия, не менее чем в 6-24 раза.

Пример 3. Исследование влияния соединения 1 на развитие судорог (на примере коразоловой модели эпилепсии).

Эксперименты проводили на самцах крыс линии Вистар массой тела 180-250 г.

Коразол в дозе 80 мг/кг вводят подкожно в область шейного отдела спины. Животные наблюдались в течение 60 мин после инъекции коразола с регистрацией основного показателя - первых генерализованных клонических судорог с утратой рефлекса переворачивания.

Интенсивность развития судорожного приступа изучали по 6-балльной шкале:

- 0 - отсутствие судорожной активности;

- 1 - гиперкинезия;

- 2 - дрожание, подергивание, чрезмерный груминг, стереотипные движения;

- 3 - клонические судороги передних лап с подъемом на задние лапы;

- 4 - выраженные тонико-клонические судороги, падение животного набок, наличие фазы тонической экстензии;

- 5 - повторные тонико-клонические судороги, утрата позы;

- 6 - полный тонический приступ с апноэ, гибель животного.

Для исследования влияния заявленного соединения 1 на развитие судорог, вызванных коразолом, соединение 1 растворяют в физиологическом растворе и вводят следующим образом:

- в дозах 25 мг/кг, 100 мг/кг внутрибрюшинно (в/б) за 30 минут до индукции судорог коразолом;

- в дозах 100 мг/кг, 200 мг/кг, 250 мг/кг внутрижелудочно за 1 час до индукции судорог коразолом.

Развитие судорожного синдрома оценивают по следующим показателям:

- время до начала судорог (мин);

- продолжительность судорог (сек);

- интенсивность судорог по 6-балльной шкале;

- число животных с повторными судорогами;

- число погибших животных в группе.

При статистической обработке экспериментальных данных используют статистические программы Origin 8.5 и IBM SPSS Statistics.

Достоверность различий между популяциями оценивают по U-критерию Манна-Уитни.

Результаты исследования влияния соединения 1 на развитие судорог, вызванных коразолом, приведены в Таблице 2 на Фиг. 2.

Как видно из данных, приведенных в Таблице 2, результаты эксперимента по Примеру 3 показывают выраженную противоэпилептическую активность соединения 1 на коразоловой модели эпилепсии на крысах как при пероральном, так и в/б путях введения, которая выражается в дозозависимом снижении продолжительности и интенсивности судорог.

Кроме того, во всех дозировках соединение 1 сильно снижает вероятность возникновения повторных судорог, а также полностью предотвращает летальные исходы.

Наилучшие результаты по уменьшению развития судорожного приступа после введения коразола наблюдают при пероральном введении соединения 1 в дозе 250 мг/кг. В концентрациях 100 и 200 мг/кг эффект заявленного соединения 1 выражен несколько меньше.

Пример 4. Определение острой токсичности на мышах при пероральном введении.

Исследование проводили на мышах линии CD-1 (ICR) (6-8 недель, вес не менее 18 г, самки). Используют двукратное внутрижелудочное (пероральное) введение соединения 1 в объеме не более 0.5 мл/30 г живой массы тела мыши с применением желудочного зонда.

Введение осуществляют животным, лишенным корма (на промежуток времени не менее 8 часов) со свободным доступом к воде. Объем введения рассчитывают индивидуально для каждого животного, основываясь на массе тела, зарегистрированной непосредственно перед введением вещества. Доступ к воде и корму возобновляют через час после введения.

Для приготовления дозы 5000 мг/кг для введения мышам взвешивают навеску 1.5 г соединения 1 в полистироловой лодочке на весах Vibra (Shinko Denshi, Япония), переносят в мерную колбу класса точности А на 10 мл объема, растворяют в дистиллированной воде и доводят до метки. По причине недостаточной растворимости соединения 1, к полученному объему раствора добавляют еще 10 мл дистиллированной воды.

Клинический осмотр животных проводят индивидуально после введения на протяжении 30 минут, затем не реже одного раза в час на протяжении 4 часов, далее ежедневно 1 раз в день в течение 14 дней. Массу тела регистрируют непосредственно перед введением препарата для расчета объема введения, далее 1 раз в два дня.

На основании проведенных исследований обнаружено, что соединение 1 является малотоксичным, поскольку параметр ЛД50 при пероральном применении у крыс превышает 5000 мг/кг массы тела.

Пример 5. Определение острой токсичности на мышах при внутрибрюшинном введении.

Исследование проводили на мышах линии CD-1 (ICR) (6-8 недель, вес не менее 18 г) обоего пола. Использовали однократное внутрибрюшинное введение соединения 1 в дозах 1000 мг/кг и 2000 мг/кг в объеме 1 мл на 40 г массы тела мыши с применением инсулинового шприца. Объем введения рассчитывали индивидуально для каждого животного, основываясь на массе тела, зарегистрированной непосредственно перед введением вещества.

Для приготовления дозы 2000 мг/кг для введения мышам взвешивают навеску 800 мг соединения 1 в полистироловой лодочке на весах Vibra (Shinko Denshi, Япония), переносят в мерную колбу класса точности А на 10 мл объема, растворяют в физиологическом растворе и доводят до метки. Раствор фильтруют шприцевыми насадками с размером пор 0.22 мкм (Jet Biofil).

Для приготовления дозы 1000 мг/кг для введения мышам взвешивают навеску 400 мг соединения 1 в полистироловой лодочке на весах Vibra (Shinko Denshi, Япония), переносят в мерную колбу класса точности А на 10 мл объема, растворяют в физиологическом растворе и доводят до метки. Раствор фильтруют шприцевыми насадками с размером пор 0.22 мкм (Jet Biofil).

Клинический осмотр животных проводят индивидуально после введения на протяжении 30 минут, затем не реже раза в час на протяжении 4 часов, далее ежедневно 1 раз в день в течение 14 дней. Массу тела регистрируют непосредственно перед введением препарата для расчета объема введения, далее 1 раз в два дня.

На основании проведенных исследований обнаружено, что соединение 1 является малотоксичным, поскольку параметр ЛД50 при внутрибрюшинном введении у крыс превышает 2000 мг/кг массы тела.

Таким образом, из вышеизложенного можно сделать вывод, что заявленное соединение проявляет высокий уровень противоэпилептической активности.

Так, в дозах 25, 50 и 100 мг/кг соединение 1 полностью подавляет эпилептическую электрическую активность мозга в течение часа после внутрибрюшинного введения крысам на пенициллиновой модели эпилепсии.

На коразоловой модели эпилепсии на крысах показано снижение интенсивности и продолжительности судорог при введении соединения 1 в дозах 25 и 100 мг/кг внутрибрюшинно и 100 и 200 мг/кг перорально, а также полное предотвращение развития судорог в отдельных случаях при дозировке 250 мг/кг при пероральном введении.

При этом соединение 1 является малотоксичным, поскольку параметр ЛД50 у крыс превышает 2000 и 5000 мг/кг массы тела при внутрибрюшинном и пероральном введении соответственно.

В целом можно констатировать, что заявителем выполнены поставленные задачи и достигнут заявленный технический результат, а именно - получено новое соединение, обладающее высокой противоэпилептической активностью и не имеющего аналогов в мире по химической структуре. Полученный препарат потенциально позволит существенно повысить качество и продолжительность жизни пациентов.

Заявленное техническое решение соответствует критерию «новизна», предъявляемому к изобретениям, так как из исследованного уровня техники не выявлены технические решения, обладающие заявленной совокупностью отличительных признаков, обеспечивающих достижение заявленных результатов.

Заявленное техническое решение соответствует критерию «изобретательский уровень», предъявляемому к изобретениям, так как не является очевидным для специалиста в данной области науки и техники.

Заявленное техническое решение соответствует критерию «промышленная применимость», т.к. может быть реализовано на любом специализированном предприятии с использованием стандартного оборудования, известных отечественных материалов и технологий.

1. Соединение на основе пиридоксина, формулы 1:

2. Соединение по п. 1, обладающее противоэпилептической активностью.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к соединениям формулы (I): где L означает одинарную связь; R1 означает (C1-C4) алкил; R2 и R3 индивидуально означают водород или метил; n является целым числом от 0 до 3; Y означает (C1-C4)галоалкил, F, Cl, Br или I; X1 необязателен и означает О, когда присутствует; X2 означает NO2, CN или CONH2; и R4 означает (C1-С3) алкил; и их применению в борьбе с насекомыми и другими беспозвоночными.

Изобретение относится к применению производных 4-((пиридин-2-ил)диазенил)фенилсульфокислот и их солевых форм общей формулы I: ,где R1=R2=Н, или R1 и R2 вместе образуют заместитель вида CR3R4, где R3=Н, СН3, R4=Н, СН3, С2Н5, i-C3H7, С7Н15, C8H17, или R4 R5 вместе образуют спироциклоалкильную группу, где R3, R4 = цикло-C5H8, цикло-С6Н10; Х+=Н, катионы щелочных и щелочноземельных металлов, такие как Na+, K+, Mg2+, Са2+ и др., NH4+ и другие фармацевтически приемлемые катионы органической и неорганической природы, в качестве ингибиторов образования конечных продуктов гликирования (далее КПГ).

Изобретение относится к соединениям формулы (I) или их фармацевтически приемлемым солям. Технический результат: получены новые, которые могут быть использованы в качестве лигандов эстрогеновых рецепторов.

Изобретение относится к применению соединения формулы для стабилизации индуцируемого гипоксией фактора-2 альфа (HIF-2α), для понижающей регуляции фосфоглицераткиназы (PGK) в клетке и для повышающей регуляции секретируемого из клетки растворимого рецептора-1 сосудистого эндотелиального фактора роста (sVEGF-1).

Изобретение относится к кристаллогидрату 4-аминопиридина (C5H6N2), охарактеризованному посредством порошковой рентгенограммы, имеющей дифракционные максимумы пиков при значениях 2θ, составляющих 12,523°, 13,761°, 22,525°, 24,383°, 25,455°, 30,632°, 34,050° (λ=1.5406 Å), а также к способу получения кристаллогидрата 4-аминопиридина, фармацевтической композиции, содержащей кристаллогидрат 4-аминопиридина, и применению ее для лечения рассеянного склероза.

Изобретение относится к способу получения гидрохлорида трет-бутилового сложного эфира (4-фтор-3-пиперидин-4-ил-бензил)-карбаминовой кислоты (I). Способ включает восстановление трет-бутилового сложного эфира (4-фтор-3-пиридин-4-ил-бензил)-карбаминовой кислоты в условиях восстановительной гидрогенизации и затем обработку HCl с выходом гидрохлорида трет-бутилового сложного эфира (4-фтор-3-пиперидин-4-ил-бензил)-карбаминовой кислоты.

Изобретение относится к улучшенному способу получения 2-хлор-5-гидроксиметилпиридина, который включает активацию карбоксильной группы 6-хлорникотиновой кислоты и восстановление 6-хлорникотиноилхлорида.

Изобретение относится к способу борьбы с заражением полезных растений фитопатогенными микроорганизмами или его предупреждения, в котором соединение формулы I или композицию, включающую это соединение в качестве активного ингредиента, наносят на растения, на их части или место их произрастания, где соединение формулы I представляет собой заместители являются такими, как определено в пункте 1 формулы изобретения.

Изобретение относится к органическому соединению, представленному общей формулой (1). .
Изобретение относится к медицине, а именно к детской неврологии, может быть использовано для лечения эпилептических спазмов. Для этого внутривенно капельно вводят метилпреднизолон в дозе 30 мг/кг/сут в течение трех дней, затем один день в дозе 20 мг/кг, затем один день в дозе 10 мг/кг с последующим переходом на пероральный прием препарата в дозе 2 мг/кг/сут в течение одной недели, затем в дозе 1,5 мг/кг/сут в течение трех месяцев, а далее уменьшают еженедельно дозу на 4 мг каждую последующую неделю до отмены препарата.

Изобретение относится к производным O-R-оксимов 4-бензоилпиридина общей формулы: где R может быть: а также: где R может быть: X: щавелевая кислота или другие органические или минеральные кислоты, или отсутствует, которые проявляют противосудорожную активность, и к способам их получения.

Изобретение относится к применению соединения формулы (I), где R1 представляет собой алкильную группу, имеющую основную цепь из 7-11 атомов углерода, возможно разветвленную в любом положении атома углерода в основной цепи, где разветвление представляет собой боковую C1-6 алкильную группу, причем алкильная группа основной цепи и/или боковые алкильные группы возможно содержат один или более гетероатомов, причем указанное соединение выбрано из 4-этилоктановой кислоты, 2-бутилоктановой кислоты, 4-метилнонановой кислоты и 3-метилундекановой кислоты или его фармацевтически приемлемая соль, амид или эфир, для лечения или профилактики заболевания или биомедицинского состояния, выбранного из расстройств, связанных с судорогами.

Изобретение относится к соединению, представленному формулой (IA), где X1 и X2 являются одинаковыми или разными и означают атом азота или группу СН; Y означает любую структуру из следующей группы формул (а); n означает 1 или 2; R1 означает атом водорода, атом галогена или C1-6 алкильную группу; R2 означает триазолильную группу или пиримидинильную группу; R3 означает атом водорода или атом галогена; и R4 означает атом водорода или C1-6 алкильную группу; или его фармацевтически приемлемой соли.

Изобретение относится к соединению, представленному формулой (I), или его фармацевтически приемлемым солям, которые могут найти применение для лечения заболеваний, выбранных из шизофрении, тревожного расстройства, депрессивного синдрома, биполярного расстройства, эпилепсии и т.д.

Группа изобретений относится к фармакологии и медицине. Предложен способ лечения парциальных припадков у пациента, страдающего абсансами или восприимчивого к абсансам, включающий введение безопасного и эффективного количества эсликарбазепина ацетата (или введение включающей его фармацевтической композиции – вариант), где парциальные припадки сопровождаются или не сопровождаются вторичной генерализацией, где пациентом, восприимчивым к абсансам, является ребенок или подросток (варианты).

Изобретение относится к фармацевтической композиции для предупреждения или лечения эпилепсии, содержащей в качестве активного ингредиента фармацевтически эффективное количество фенилкарбаматного соединения, представленного химической формулой 1, его фармацевтически приемлемой соли, рацемата или энантиомера, где X представляет собой галоген; n означает целое число от 1 до 5; R1 представляет собой линейную или разветвленную алкильную группу С1-С4; А представляет собой карбамоильное производное, представленное формулой -С(О)NHR2, и В представляет собой Н; или А представляет собой Н и В представляет собой карбамоильное производное, представленное формулой –C(O)NHR3; и R2 и R3 могут быть одинаковыми или разными и независимо выбраны из группы, состоящей из водорода, линейной или разветвленной алкильной группы С1-С4, циклоалкильной группы С3-С8 и бензильной группы.

Группа изобретений относится к области фармацевтики. Описана твердая фармацевтическая композиция, содержащая эсликарбазепина ацетат и вспомогательные вещества, в виде гранул.

Новые индансульфамидные производные, или их фармацевтически приемлемая соль, такие как N-[(1S)-2,2,5,7-тетрафтор-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил]сульфамид, N-[(1S)-2,2,4,7-тетрафтор-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил]сульфамид, (+)-N-(2,2,4,6,7-пентафтор-2,3-дигидро-1H-инден-1-ил)сульфамид, характеризуются действием улучшения индекса тяжести припадка (балл) на мышиной модели киндлинга.

Изобретение относится к способу получения средства, обладающего седативной, противосудорожной и нейромодуляторной антиалкогольной активностью. Указанный способ включает экстрагирование растительного сырья - травы марьянника лесного 50% этанолом, методом реперколяции с равной загрузкой сырья, с законченным циклом в батарее из четырех перколяторов в соотношении сырье:экстрагент - 1:2, при настаивании на каждой ступени экстракции в течение шести часов, далее объединенные извлечения отстаивают, фильтруют, декантируют, упаривают до сухого остатка в ротационном вакуумном испарителе.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к соединениям общей формулы I, где R1 представляет собой атом водорода, низший алкил, атом галогена или низший алкил, замещенный по меньшей мере тремя атомами галогена; R2 представляет собой атом водорода или атом галогена; X1 представляет собой N или СН; X2 представляет собой N или СН; при условии, что только один из X1 или X2 представляет собой N; X3 представляет собой C(R) или N; и R представляет собой атом водорода, низший алкил, атом галогена, низший алкил, замещенный по меньшей мере тремя атомами галогена, низший алкокси или SO2-низший алкил.
© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2017-07-24 2018-04-24T17:45:24
Наверх