Композиции и способы для обработки от вредителей
Изобретение относится к сельскому хозяйству. Биопестицид содержит подходящий с точки зрения сельского хозяйства носитель, пестицидно эффективное количество по меньшей мере одного пестицида на основе грибов, по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество на основе сорбитана и жирной кислоты, а также по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество, представляющее собой сложный эфир этоксилата сорбита. Изобретение позволяет снизить фитотоксичность продукта. 3 н. и 18 з.п. ф-лы, 7 табл., 6 пр.
ОБЛАСТЬ ТЕХНИКИ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ
В настоящем документе раскрыты композиции для контроля насекомых, содержащие энтомопатогенные грибы, а также способы применения таких композиций для контролирования вредителей, повреждающих культуры в сельскохозяйственных средах.
ПРЕДПОСЫЛКИ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ
Вредители, такие как насекомые, Acari (клещи и иксодовые клещи) и нематоды представляют серьезную проблему для сельскохозяйственной отрасли, ограничивая производительность, зачастую значительно. Хотя для контроля вредителей применяют химические пестициды, чрезмерное применение химических пестицидов оставляет в почве, воде и воздухе остаточные вещества, а также оказывает неблагоприятные эффекты на нецелевые организмы и экологическое равновесие. Кроме того, у вредителей может развиваться устойчивость к химическим пестицидам, что ограничивает их эффективность и применение. Общественное беспокойство по поводу потенциальной опасности для здоровья химических пестицидов и увеличение стоимости химических пестицидов также привели к исследованию более экологически безопасных тактик борьбы с вредителями.
Биопестициды разрабатывают для применения в качестве альтернативы, либо в некоторых случаях в качестве дополнения к, химическим пестицидам. Биопестициды представляют собой живые организмы (например, грибы и бактерии), которые вмешиваются в жизненный цикл вредителей (путем уничтожения или приведения к потере активности вредителей). Примеры биопестицидов включают энтомопатогенные грибы Metarhizium anisopliae, которые были зарегистрированы в качестве био-инсектицидов для контроля вредителей-насекомых в Соединенных Штатах Америки и многих других странах. Сообщалось, что Metarhizium anisopliae заражает многие виды насекомых, в том числе подземных термитов (Reticulitermes и Coptotermes spp.), злаковых корневых червей (Diabrotica spp.), скосарей бороздчатых (Otiorhynchus sulcatus), корневых долгоносиков цитрусовых (Diaprepes abbreviatus), японских жуков (Popillia japonica) и личинок европейского жука (Rhizotrogus majalis).
В качестве естественных средств биопестициды предлагают более экологически безопасные решения для контроля вредителей и/или для применения в комбинации с химическим пестицидом. Тем не менее, недостатки использования биопестицидов включают эффективную доставку на территорию, подлежащую обработке, и потенциальные фитотоксические эффекты составов на сельскохозяйственные культуры и растения. Часто биопестициды могут засорять форсунки устройств для доставки и/или прилипать ко внутренним поверхностям емкости для доставки (часто именуемое как ʺобразование пятенʺ), так как некоторые биопестициды (например, Metarhizium spp.) представляют собой нерастворимые гидрофобные частицы. Было решено включать поверхностно-активные вещества в биопестицидные составы; тем не менее, было обнаружено, что множество поверхностно-активных веществ оказывают фитотоксические эффекты на растения - в том числе на те, которые представляют важное сельскохозяйственное значение.
Существует значительная потребность в биопестицидных составах, которые оказывают низкие фитотоксические эффекты на растения и эффективно доставляются, а также не забивают форсунки или не прилипают ко внутренним поверхностям устройств для доставки при их нанесении.
В Европейском патенте № 0406103 раскрывают пестицидные композиции на основе микроорганизмов, способы их получения и их применение в сельском хозяйстве.
В патенте Великобритании № 2255018 раскрывают аэрозоли с энтомопатогенными организмами и способы контроля насекомых.
В публикации заявки на патент США № 2012/0039976 раскрывают применение экстрактов мицелия энтомопатогенных грибов на стадии перед спорообразованием (перед образованием конидии) в качестве аттрактантов для и/или патогенов насекомых и членистоногих.
В опубликованной PCT заявке на патент № WO 95/10597 раскрывают энтомопатогенные составы, которые включают конидии энтомопатогенного гриба и носитель. Описаны способы уничтожения насекомых, как, например, настоящих саранчовых, с применением раскрытых составов.
В опубликованной PCT заявке на патент № WO 08/065413 раскрывают составы энтомопатогенных грибов для контроля насекомых.
В патенте США № 5888989 раскрывают инсектицидные и акарицидные композиции силафлуофена и по меньшей мере одного энтомопатогенного гриба, такого как, например, Beauveria bassiana.
В патенте США № 5512280 раскрывают поддержание и долгосрочная стабилизация грибных конидий с применением поверхностно-активных веществ.
В публикации заявки на Европейский патент № 1884160 раскрывают биопестицидные композиции, содержащие грибные споры, патогенные для иксодовых клещей, полисорбат и парафиновое масло.
В публикации заявки на патент США № 2010/0112060 раскрывают инсектицидные композиции, содержащие споры энтомопатогенных грибов, суспендированные в эмульсиях по типу "масло в воде", содержащих соли жирных кислот, многоатомные спирты и дополнительные эмульгаторы. В публикации дополнительно описывают способы применения композиций для предупреждения и контроля заражения насекомыми животных и природных территорий - в частности, раскрыты заражения иксодовыми клещами.
В публикации заявки на патент Германии № DE 19707178 раскрывают инсектицидные или акарицидные композиции.
В опубликованной PCT заявке на патент № WO 11/099022 раскрывают композиции и способы получения композиции, а также способы получения продуктов на основе грибов из инновационной комбинации покоящейся споры встречающегося в природе гриба Metarhizium anisopliae, Beauveria bassiana и Verticillium lecanii с ферментами, жирами и ускоряющими рост молекулами. Также раскрыты применения для контроля вредителей, подобных тлям, белокрылке, трипсам, клещу, цикадкам настоящим, червецу и гусеницам, а также передающихся через почву насекомых, подобных личинке хруща, термиту и т.п.
В патенте США № 5413784 раскрывают новые и пригодные биопестициды с активностью против вредителей-насекомых, таких как хлопковый долгоносик, белокрылка сладкого картофеля и хлопковый слепняк. Биопестициды содержат энтомопатогенный гриб с вирулентностью против целевых вредителей-насекомых. Предпочтительным грибом является Beauveria bassiana ATCC-7040.
В патенте США № 5939065 раскрывают энтомопатогенный гриб с вирулентностью против насекомых семейства настоящих саранчовых. Гриб представляет собой штамм Beauveria bassiana - в частности, B. bassiana BbGHA1991, ATTC 72450.
В патенте США № 5516513 раскрывают сельскохозяйственный состав вирулентного изолята Beauveria bassiana, который обладает характеристиками ATCC 74040 B. bassiana, который можно применять для эффективного контроля чешуекрылых насекомых. Как было обнаружено, этот штамм гриба является активным против чешуекрылых на стадии яйца. Также показана активность против чешуекрылых на стадиях личинки.
В патенте США № 7241612 раскрывают биопестицидную композицию для контроля насекомых (например, долгоносиков гикори, долгоносиков цитрусового корня, совки травяной, огненных муравьев), содержащая приемлемый с точки зрения сельского хозяйства носитель и эффективное по отношению к насекомому (например, долгоносикам гикори, долгоносикам цитрусового корня, совке травяной, огненным муравьям) биопестицидное количество гриба, выбранного из группы, состоящей из Beauveria bassiana с отличительными характеристиками Beauveria bassiana NRRL 30593, Metarhizium anisopliae с отличительными характеристиками Metarhizium anisopliae NRRL 30594, Beauveria bassiana с отличительными характеристиками Beauveria bassiana NRRL 30601, Beauveria bassiana с отличительными характеристиками Beauveria bassiana NRRL 30600 или их смесей. Также способ контроля насекомых (например, долгоносиков гикори, долгоносиков цитрусового корня, совки травяной, огненных муравьев) включает применение эффективного по отношению к насекомому биопестицидного количества композиции к насекомым или растениям, территориям или субстратам, зараженным насекомыми.
В то время как для контроля различных вредителей-насекомых существует множество решений, остается потребность в составе, который будет не только контролировать вредителей-насекомых, но который может быть эффективно доставлен без оказания на растения фитотоксических эффектов при применении состава. Весьма востребованным является то, что состав можно эффективно применять (например, без засорения и/или прилипания активных веществ и/или других вспомогательных веществ к поверхностям и т.д.) для контроля вредителей, и в то же время он характеризуется минимальными, если таковые имеются, воздействиями на окружающую среду или фитотоксическими эффектами.
СУТЬ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ
Авторы настоящего изобретения обнаружили, что составы с грибными спорами, которые часто являются суспендированными в масле, плохо диспергируются при разбавлении водой. Не будучи связанными какой-либо теорией полагают, что если масляная фаза плохо диспергирована, капельки масла будут увеличиваться в размере, а гидрофобные грибные споры будут притягиваться к капелькам и/или находиться полностью внутри капелек масла. Эти капельки притягиваются ко внутренним стенкам/поверхностям емкостей распыляющих устройств (т. к., в частности, пластиковые контейнеры часто применяют в сельском хозяйстве), приводя к плохому и неэффективному диспергированию активных веществ (например, грибных спор), засорению распылительного оборудования (например, форсунок или шлангов), а также к затруднению в очистке емкостей и другого оборудования для распыления или доставки. Чтобы устранить эту проблему применяли различные системы поверхностно-активных веществ; тем не менее фитотоксичность продолжает оставаться проблемой. Авторы настоящего изобретения на удивление и неожиданно обнаружили, что правильная комбинация поверхностно-активных веществ при определенных соотношениях, часто очень малых количеств одного поверхностно-активного вещества по отношению к другому, уменьшало бы общую фитотоксичность конкретного состава, одновременно преодолевая известные трудности, возникающие при попытке надлежащим образом доставить активные ингредиенты при разбавлении их водой и применении.
Проблема, которая подлежит решению с помощью биопестицидов (т.е. композиций), описанных в настоящем документе, может быть описана соответственно.
Таблица 1. Количество поверхностно-активного вещества, связанного с фитотоксичностью и образованием остаточных веществ.
| Низкий вес. % одного или нескольких поверхностно-активных веществ в биопестициде | Оптимальный вес. % одного или нескольких поверхностно-активных веществ в биопестициде | Высокий вес. % одного или нескольких поверхностно-активных веществ в биопестициде |
| Самая высокая фитотоксичность | Приемлемая фитотоксичность | Самая низкая фитотоксичность |
| Минимальное количество остаточных веществ на пластике, плохая доставка биопестицида | Допустимое количество остаточных веществ на пластике | Наибольшее количество остаточных веществ на пластике |
Соответственно, в настоящем документе раскрыты биопестициды (т.е. композиции) и способы, которые предлагают улучшенный и практичный подход к контролю ущерба, причиненного культурам популяциями вредителей. Биопестициды, описанные в настоящем документе, будут иметь преимущество при контроле вредителей, однако они также будут обладать дополнительными преимуществами в том, что их можно эффективно доставлять в конечном составе (т.е. активные вещества и/или другие вспомогательные вещества не будут оставаться внутри накопительной емкости, например, уменьшенное прилипание/приклеивание активных и/или других вспомогательных веществ ко внутренним поверхностям емкости, либо не будут засорять аппарат для доставки или его части, например, сопла или шланги устройства для доставки), и они будут приводить к минимальным, если таковые имеются, фитотоксическим повреждениям культур, обработанных биопестицидом в конечном составе.
Биопестицид будет содержать подходящий с точки зрения сельского хозяйства носитель, пестицидно эффективное количество по меньшей мере одного пестицида на основе грибов, а также по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество. В конкретном варианте осуществления подходящим с точки зрения сельского хозяйства носителем является масло. В еще более конкретном варианте осуществления масло представляет собой парафиновое масло. Конкретные пестициды на основе грибов включают энтомопатогенные грибы, в том числе виды Ascomycota, Alternaria, Beauveria, Lecanicillium, Metarhizium, Verticillium, Trichoderma, Aspergillus, Nomuraea, Paecilomyces, Isaria, Hirsutella, Fusarium, Cordyceps, Entomophthora, Zoophthora, Pandora, Entomophaga, Entomophthorales и Zygomycota. В конкретном варианте осуществления биопестициды содержат пестицид на основе грибов Metarhizium anisopliae (иногда именуемый как Metarhizium brunneum). Кроме того, описанные в настоящем документе биопестициды содержат по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество, выбранное из сложных эфиров сорбитана и жирных кислот, сложных эфиров этоксилатов сорбита, спиртовых этоксилатов и их комбинаций. В еще более конкретном варианте осуществления по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество включает смесь сорбитанмоностеарата и полиоксиэтиленсорбитгексаолеата. В другом конкретном варианте осуществления по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество может включать смесь сорбитанмоноолеата и полиоксиэтиленсорбитгексаолеата. В другом конкретном варианте осуществления по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество может включать смесь сорбитанмоностеарата, сорбитанмоноолеата и полиоксиэтиленсорбитгексаолеата. В другом конкретном варианте осуществления по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество может включать смесь сорбитанмоностеарата и сорбитанмоноолеата.
Биопестициды, описанные в настоящем документе, могут дополнительно содержать противоосаждающее средство. В конкретном варианте осуществления противоосаждающее средство включает высокодисперсный оксид кремния.
В еще одном варианте осуществления описанный в настоящем документе биопестицид содержит подходящий с точки зрения сельского хозяйства носитель, где носитель включает парафиновое масло, по меньшей мере один пестицид на основе грибов, где по меньшей мере один пестицид на основе грибов включает Metarhizium anisopliae, по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество, где по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество включает смесь сорбитанмоностеарата и полиоксиэтиленсорбитгексаолеата, а также противоосаждающее средство, где противоосаждающее средство включает высокодисперсный оксид кремния. Сорбитанмоностеарат может быть заменен сорбитанмоноолеатом.
В одном варианте осуществления дополнительные полезные с точки зрения сельского хозяйства ингредиенты (например, полезные микроорганизмы, сигнальные молекулы, инсектициды, фунгициды, нематоциды, а также их комбинации), также могут применяться в комбинации с описанными в настоящем документе биопестицидами, в том числе как часть той же композиции, либо применяться в качестве отдельной обработки.
В настоящем документе также раскрыты способы контроля вредителей. В одном варианте осуществления способ включает приведение одного или нескольких вредителей растений в контакт с биопестицидом, содержащим подходящий с точки зрения сельского хозяйства носитель, пестицидно эффективное количество по меньшей мере одного пестицида на основе грибов, а также по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество, где по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество выбрано из сложных эфиров сорбитана и жирных кислот, сложных эфиров этоксилатов сорбита, спиртовых этоксилатов и их комбинаций.
Дополнительно раскрыты семена, покрытые биопестицидом, содержащим подходящий с точки зрения сельского хозяйства носитель, пестицидно эффективное количество по меньшей мере одного пестицида на основе гриба, а также по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество, где по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество выбрано из сложных эфиров сорбитана и жирных кислот, сложных эфиров этоксилатов сорбита, спиртовых этоксилатов и их комбинаций.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ НАСТОЯЩЕГО ИЗОБРЕТЕНИЯ
Раскрытые варианты осуществления относятся к композициям и способам контроля вредителей.
Определения
Подразумевается, что используемая в настоящем документе форма единственного числа включает также форму множественного числа, если из контекста явно не следует иное.
Используемые в настоящем документе термины "активный", "активный ингредиент", "сельскохозяйственный активный ингредиент" и т.д. означают любой биологический организм или химический элемент, молекулу или соединение либо их смесь, которые обладают биологической активностью в семени, растении либо при заболевании или вредителе семени или растения. Такие активные ингредиенты включают без ограничения пестициды, гербициды, удобрения, регуляторы роста растений, лекарственные средства, красители, биологические аттрактанты, приманки и феромоны.
Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин "носитель" относится к "приемлемому с точки зрения сельского хозяйства носителю". Подразумевается, что "приемлемый с точки зрения сельского хозяйства носитель" относится к любому материалу, который можно применять для доставки активных веществ (например, микроорганизмов, описанных в настоящем документе, полезного(ых) с точки зрения сельского хозяйства ингредиента(ов), биологически активного(ых) ингредиента(ов) и т.д.) в растение или часть растения (например, листву растения) и который предпочтительно может применяться (в отношении растения, части растения (например, листвы, семени) или почвы), не оказывая неблагоприятного эффекта на рост растения, структуру почвы, дренаж почвы или т.п.
Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин ʺсовместимый с почвой носительʺ относится к любому материалу, который может быть добавлен в почву без приведения к неблагоприятному эффекту/оказания неблагоприятного воздействия в отношении роста растения, структуры почвы, дренажа почвы или т.п.
Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин "совместимый с семенем носитель" относится к любому материалу, который может быть добавлен к семени без приведения к неблагоприятному эффекту/оказания неблагоприятного воздействия в отношении семени, растения, которое произрастает из этого семени, прорастания семян или т.п.
Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин "совместимый с листвой носитель" относится к любому материалу, который может быть добавлен к растению или части растения без приведения к неблагоприятному эффекту/оказания неблагоприятного воздействия в отношении растения, части растения, роста растения, здоровья растения или т.п.
Используемый в настоящем документе термин ʺпестицид на основе грибовʺ означает грибной организм либо в вегетативном состоянии, либо в состоянии покоя (например, спора), который является патогенным по отношению к целевому вредителю, такому как насекомое, представитель Acari или нематода. Используемый в настоящем документе термин ʺспораʺ имеет свое обычное значение, которое хорошо известно и понятно специалистам в данной области техники и относится к микроорганизму в его состоянии покоя, защищенном состоянии.
Используемый в настоящем документе термин ʺэнтомопатогенныйʺ означает, что пестицид на основе грибов является патогенным по отношению по меньшей мере к одному целевому насекомому. Используемый в настоящем документе ʺэнтомопатогенный грибʺ представляет собой гриб, который способен поражать, инфицировать, уничтожать, приводить к потере активности, вызывать заболевание и/или вызывать повреждение насекомого, и, таким образом, его можно применять в контроле заражения насекомыми за счет оказания отрицательного воздействия на жизнеспособность или рост целевого насекомого.
Используемый в настоящем документе термин ʺакарипатогенныйʺ означает, что пестицид на основе грибов является патогенным по отношению по меньшей мере к одному целевому представителю Acari, как, например, клещу или иксодовому клещу. Используемый в настоящем документе ʺакарипатогенный грибʺ представляет собой гриб, который способен поражать, инфицировать, уничтожать, приводить к потере активности, вызывать заболевание и/или вызывать повреждение представителя Acari, и, таким образом, его можно применять при контроле заражения представителем Acari за счет оказания отрицательного воздействия на жизнеспособность или развитие целевого представителя Acari.
Используемый в настоящем документе ʺразрушающий кутикулу ферментʺ представляет собой фермент, который способен по меньшей мере частично разрушать кутикулу вредителя, как, например, эпикутикулу и/или прокутикулу. Экзогенно применяемый разрушающий кутикулу фермент может повышать эффективность пестицида на основе грибов путем повышения способности пестицида на основе грибов колонизировать и/или проходить через кутикулу вредителя для достижения полости тела вредителя.
Используемый в настоящем документе ʺэкзогенно применяемыйʺ означает, что разрушающий кутикулу фермент применяют независимо (то есть в качестве отдельного ингредиента) от композиций, раскрытых в настоящем документе, а также любого фермента, продуцируемого пестицидом на основе грибов.
ʺЭкзогенно применяемыйʺ разрушающий кутикулу фермент находится в форме композиции ʺвыделенногоʺ фермента.
Термин ʺвыделенныйʺ означает, что фермент находится в форме или окружающей среде, которая не встречается в природе, то есть фермент по меньшей мере частично очищен от одного, или нескольких, или всех из встречающихся в природе составляющих, с которыми он связан в природе. Таким образом, хотя эндогенно продуцируемые пестицидом на основе грибов ферменты будут оказывать воздействие на эффективность, выделенный фермент не включает фермент, эндогенно продуцируемый пестицидом на основе грибов во время обработки вредителя в способах по настоящему изобретению. Выделенный фермент может присутствовать в форме композиции очищенного фермента или образца ферментативного бульона, который содержит фермент.
Термин ʺвредительʺ относится к любому животному научной классификации (типа) Arthropoda, в том числе Insecta (например, белокрылкам, трипсам, долгоносикам) и Arachnida, которые включают без ограничения клещей, иксодовых клещей, паукообразных и других подобных беспозвоночных.
Используемый в настоящем документе термин "контроль" или "контролирование", как, например, во фразе: "контроль" вредителей или популяций вредителей или "контролирование" вредителей или популяций вредителей, либо как во фразе: "контролирование" вредителей, относится к предупреждению, уменьшению, уничтожению, подавлению роста или устранению вредителя или популяции вредителей, которые определены в настоящем документе. В действительности ʺконтрольʺ или "контролирование", используемые в настоящем документе, относятся к любому признаку успеха в предупреждении, уничтожении, подавлении, устранении, снижении или уменьшении интенсивности заражения вредителем или популяцией вредителей.
Используемые в настоящем документе термины ʺэффективное количествоʺ, ʺэффективная концентрацияʺ или ʺэффективная дозаʺ определяются как количество, концентрация или доза пестицида на основе грибов, достаточные для того, чтобы вызвать инфицирование вредителя, которое затем приведет к контролю вредителей. Фактическая эффективная доза по абсолютной величине зависит от факторов, в том числе без ограничения коэффициента смертности целевых вредителей по отношению к уровню, при котором применяют пестицид на основе грибов, синергических или антагонистических взаимодействий между другими активными или инертными ингредиентами, которые могут повышать или понижать активность пестицида на основе грибов, характерной чувствительности стадии жизни и вида вредителя, а также стабильности пестицида на основе грибов в композициях. "Эффективное количество", "эффективная концентрация" или "эффективная доза" пестицида на основе грибов могут быть определены, например, с помощью обычного эксперимента доза-эффект.
Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин "полезный(ые) с точки зрения сельского хозяйства ингредиент(ы)" означает любое средство или комбинацию средств, способных вызывать или обеспечивать положительный и/или полезный эффект в сельском хозяйстве. Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин "полезный(ые) с точки зрения сельского хозяйства микроорганизм(ы)", "полезный с точки зрения сельского хозяйства микроб", "полезные с точки зрения сельского хозяйства бактерии" и т.д. предназначены для обозначения любого микроорганизма (например, бактерии, гриба и т.д. или их комбинации) независимо от того, находится ли микроорганизм в вегетативном состоянии или форме споры, который способен вызывать или обеспечивать положительный и/или полезный эффект в сельском хозяйстве (например, повышение роста растений, обеспечение фунгицидной активности и т.д.).
Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин "азотфиксирующий(ие) организм(ы)" относится к любому организму, способному превращать атмосферный азот (N2) в аммиак (NH3).
Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин "фосфат-солюбилизирующий организм" относится к любому организму, способному превращать нерастворимый фосфат в растворимую форму фосфата.
Используемые в настоящем документе термины ʺспораʺ, ʺспора микроорганизмаʺ и т.д. имеют свои обычные значения, которые хорошо известны и понятны специалистам в данной области техники. Используемые в настоящем документе термины ʺспораʺ и ʺспора микроорганизмаʺ относятся к микроорганизму в его покоящемся состоянии, защищенном состоянии.
Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин "инокулят" означает любую форму клеток микроорганизма или споры, которые способны распространяться на или в грунте, когда условия температуры, влажности и т.д. являются благоприятными для роста микроорганизмов.
Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин "изомер(ы)" включает в себя все стереоизомеры соединений и/или молекул, упомянутых в настоящем документе (например, флаваноиды, LCO, CO, хитиновые соединения, жасмоновые кислоты, линолевые кислоты, линоленовые кислоты, каррикины или производные любых этих молекул и т.д.), в том числе энантиомеры, диастереомеры, а также все конформеры, ротамеры и таутомеры, если не указано иное. Соединения и/или молекулы, раскрытые в настоящем документе, содержат все энантиомеры либо в виде фактически чистой левовращающей или правовращающей формы, либо в виде рацемической смеси, либо в виде любого соотношения энантиомеров. Если в вариантах осуществления раскрывают (D)-энантиомер, этот вариант осуществления содержит также (L)-энантиомер; если в вариантах осуществления раскрывают (L)-энантиомер, этот вариант осуществления содержит также (D)-энантиомер. Если в вариантах осуществления раскрывают (+)-энантиомер, этот вариант осуществления содержит также (-)-энантиомер; если в вариантах осуществления раскрывают (-)-энантиомер, этот вариант осуществления содержит также (+)-энантиомер. Если в вариантах осуществления раскрывают (S)-энантиомер, этот вариант осуществления содержит также (R)-энантиомер; если в вариантах осуществления раскрывают (R)-энантиомер, этот вариант осуществления содержит также (S)-энантиомер. Подразумевается, что варианты осуществления включают любые диастереоизомеры соединений и/или молекул, упомянутые в настоящем документе, в виде диастереоизомерно чистой формы и в форме смесей во всевозможных соотношениях. Если стереохимическая конфигурация явно не указана в химической структуре или химическом названии, подразумевается, что химическая структура или химическое название охватывает все возможные стереоизомеры, конформеры, ротамеры и таутомеры показанных соединений и/или молекул.
Подразумевается, что используемые в настоящем документе термины ʺрастение(ия)ʺ и ʺчасть(ти) растенияʺ относятся ко всем растениям и популяциям растений, таким как желательные и нежелательные дикорастущие растения или культурные растения (в том числе встречающиеся в природе культурные растения). Культурными растениями могут быть растения, которые можно получать с помощью традиционной селекции растений и способов оптимизации, или с помощью способов биотехнологии и генной инженерии, или с помощью комбинации этих способов, в том числе трансгенные растения и в том числе сорта растений, охраняемые или не охраняемые правами растениеводов на созданные ими сорта. Под частями растения следует понимать все части и органы растений над и под землей, такие как побег, лист, цветок и корень, в качестве примеров которых могут быть упомянуты листья, иголки, стебли, черешки, цветки, плодовые тела, плоды, семена, корни, клубни и корневища. Части растения включают также собранный материал и материал для вегетативного и генеративного размножения (например, черенки, клубни, корневища, отростки, а также семена и т.д.).
Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин "листва" означает все части и органы растений, находящиеся над землей. Неограничивающие примеры включают листья, иголки, стебли, черешки, цветки, плодовые тела, плоды и т.д. Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин "некорневое применение", "подвергнутый некорневому применению" и его варианты включают применение активного ингредиента в отношении листвы или находящихся над землей частей растения (например, листьев растения). Применение можно осуществлять посредством любого способа, известного из уровня техники (например, распыления активного ингредиента).
Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин "источник" конкретного элемента означает соединение этого элемента, которое по меньшей мере в рассматриваемых почвенных условиях не делает элемент полностью доступным для поглощения растением.
Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин ʺпитательное(ые) вещество(ва)ʺ относится к любому питательному веществу (например, витаминам, макроминералам, питательным микроэлементам, микроминералам, органическим кислотам и т.д.), которое необходимо для роста растения, здоровья растения и/или развития растения.
Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин "гербицид(ы)" относится к любому средству или комбинации средств, способных к уничтожению сорняков и/или подавлению роста сорняков (при этом подавление при определенных условиях является обратимым).
Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин "фунгицид(ы)" относится к любому средству или комбинации средств, способных к уничтожению грибов и/или подавлению роста грибов.
Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин "инсектицид(ы)" относится к любому средству или комбинации средств, способных к уничтожению одного или нескольких насекомых и/или подавлению роста одного или нескольких насекомых.
Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин "нематоцид(ы)" относится к любому средству или комбинации средств, способных к уничтожению одной или нескольких нематод и/или ингибированию роста одной или нескольких нематод.
Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин "акарицид(ы)" относится к любому средству или комбинации средств, способных к уничтожению одного или нескольких клещей и/или подавлению роста одного или нескольких клещей.
Подразумевается, что используемый в настоящем документе термин "биостимулятор(ы)" относится к любому средству или комбинации средств, способных к улучшению метаболических или физиологических процессов внутри растений и почвы.
Используемые по всему данному описанию выражения "весовые части" или "процентный вес" используют взаимозаменяемо в описании, где весовые проценты каждого из отдельных составляющих указаны в проценте по весу, исходя из общего веса конкретной композиции, часть которой оно образует.
БИОПЕСТИЦИДЫ (КОМПОЗИЦИИ)
Биопестициды (т.е. композиции), применяемые в вариантах осуществления, раскрытых в настоящем документе, содержат подходящий с точки зрения сельского хозяйства носитель, пестицидно эффективное количество по меньшей мере одного пестицида на основе грибов (например, как два или более, как, например, два, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь, девять, десять и т.д.), а также по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество (например, как два или более, как, например, два, три, четыре, пять, шесть, семь, восемь, девять, десять и т.д.). В конкретном варианте осуществления по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество выбрано из сложных эфиров сорбитана и жирных кислот, сложных эфиров этоксилатов сорбита, спиртовых этоксилатов и их комбинаций.
Биопестициды, описанные в настоящем документе, будут иметь преимущество при контроле вредителей, однако они также будут обладать дополнительными преимуществами в том, что их можно эффективно доставлять в конечном составе (т.е. активные вещества и/или другие вспомогательные вещества не будут оставаться внутри накопительной емкости, например, уменьшенное прилипание/приклеивание активных и/или других вспомогательных веществ ко внутренним поверхностям емкости, либо не будут засорять аппарат для доставки или его части, например, сопла или шланги устройства для доставки), и они будут приводить к минимальным, если таковые имеются, фитотоксическим повреждениям культур, обработанных биопестицидом в конечном составе. Используемое в настоящем документе средство является "фитотоксическим", если оно наносит ущерб или повреждение растению или семени, с которыми он вступает в контакт. Повреждение или ущерб в отношении растения и семени включает в себя, например, низкорослость, химический ожог, снижение урожая, порок развития, изменение цвета, отсутствие прорастания, снижение скорости прорастания, смерть и т.п.
Композиции пестицидов на основе грибов, описанные в настоящем документе, могут быть в любой форме при условии, что композиция способна поддерживать необходимую активность (эффективное количество) пестицида на основе грибов независимо от формы (например, вегетативного состояния или состояния покоя), и композицию можно применять для контроля целевого вредителя. Носитель можно использовать для обеспечения окружающей среды для поддержания жизнеспособности по меньшей мере одного гриба, в том числе путем обеспечения подходящих условий окружающей среды и защиты пестицида на основе грибов от вредных условий окружающей среды (например, избыточного кислорода, влажности и/или ультрафиолетового излучения и т.п.). В случае, когда композиции не получают непосредственно перед применением, носитель можно использовать для поддержания активности пестицида на основе грибов во время хранения (например, в контейнере в течение всего срока хранения составленного продукта). Носитель также можно использовать для сохранения активности пестицида на основе грибов после того, как композиции пестицидов на основе грибов, описанных по всему документу, применяют к поверхности для применения. В конкретных вариантах осуществления носитель обеспечивает среду, так что пестицид на основе грибов будет терять не более 1-log исходного жизнеспособного содержимого (перед включением в носитель) в течение периода по меньшей мере в один год. Более того, описанные в настоящем документе пестициды на основе грибов могут быть перенесены с носителя на тело целевого вредителя (например, белокрылок, трипсов, клещей, долгоносиков, иксодовых клещей, клопов-наземников и т.д.).
В определенных вариантах осуществления биопестицид может быть в форме геля, пены, твердого вещества (такого как порошок, гранула, частица и т.п.) или жидкости. В конкретном варианте осуществления биопестицид находится в форме жидкости. В более конкретном варианте осуществления биопестицид находится в форме жидкой суспензии. В еще более конкретном варианте осуществления биопестицид находится в форме жидкой неводной суспензии.
Носитель(и)
Носитель будет иметь требуемые значения (и диапазоны значений) по результатам реологических измерений (например, вязкости, предельного напряжения сдвига, модулей накопления и модулей потерь), чтобы позволить пестициду на основе грибов оставаться эффективным (например, способным к переносу на тело вредителя со степенью для вызова летального исхода, предотвращения осаждения пестицида на основе гриба, предоставления возможности биопестициду быть легко повторно диспергируемым и отмеряемым в емкость, такую как емкость для воды и т.д.) и жизнеспособным сразу после составления.
В одном варианте осуществления в состав биопестицида (т.е. композиции) может входить 0,01 вес. % - 99,99 вес. % носителя. При измерении весового процента носителя могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить от приблизительно 0,01 вес. % до приблизительно 99,99 вес. % носителя. В еще другом варианте осуществления в состав биопестицида может входить 50,00 вес. % - 99,99 вес. % носителя. Опять таки, при измерении весового процента носителя могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить от приблизительно 50,00 вес. % до приблизительно 99,99 вес. % носителя. В еще другом варианте осуществления в состав биопестицида входит 50,00 вес. % - 80,00 вес. % носителя. Опять же, при измерении весового процента носителя могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить от приблизительно 50,00 вес. % до приблизительно 80,00 вес. % носителя. Таким образом, в вариантах осуществления биопестицидов, раскрытых в настоящем документе, общее количество носителя может составлять самое меньшее 0,01 вес. % и самое большее 99,99 вес. % (например, от 0,01 до 99,99 вес. %). В других вариантах осуществления общее количество подходящего/приемлемого с точки зрения сельского хозяйства носителя может составлять приблизительно 57-55 вес. %, 58-54 вес. %, 59-53 вес. %, 60-52 вес. %, 62-50 вес. %, 64-48 вес. %, 66-46 вес. %, 68-44 вес. %, 70-42 вес. %, 72-40 вес. % и т.п.
В конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 80,50 вес. % носителя. При измерении весового процента носителя могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 80,50 вес. % носителя. В другом конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 80,00 вес. % носителя. При измерении весового процента носителя могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 80,00 вес. % носителя. В еще другом конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 78,00 вес. % носителя. При измерении весового процента носителя могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 78,00 вес. % носителя. В еще одном конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 75,50 вес. % носителя. При измерении весового процента носителя могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 75,50 вес. % носителя. В еще одном конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 75,00 вес. % носителя. При измерении весового процента носителя могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 75,00 вес. % носителя. В еще одном конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 73,00 вес. % носителя. При измерении весового процента носителя могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 73,00 вес. % носителя. В другом конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 70,50 вес. % носителя. При измерении весового процента носителя могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 70,50 вес. % носителя. В еще другом конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 70,00 вес. % носителя. При измерении весового процента носителя могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 70,00 вес. % носителя. В еще одном конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 68,00 вес. % носителя. При измерении весового процента носителя могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 68,00 вес. % носителя. В еще одном конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 66,00 вес. % носителя. При измерении весового процента носителя могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 66,00 вес. % носителя. В еще одном конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 64,00 вес. % носителя. При измерении весового процента носителя могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 64,00 вес. % носителя. В другом конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 63,00 вес. % носителя. При измерении весового процента носителя могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 63,00 вес. % носителя. В еще другом конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 61,00 вес. % носителя. При измерении весового процента носителя могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 61,00 вес. % носителя. В еще одном конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 59,00 вес. % носителя. При измерении весового процента носителя могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 59,00 вес. % носителя. В еще одном конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 58,00 вес. % носителя. При измерении весового процента носителя могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 58,00 вес. % носителя. В еще одном конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 56,00 вес. % носителя. При измерении весового процента носителя могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 56,00 вес. % носителя. В других вариантах осуществления биопестицид может быть образован из приблизительно 70, 62, 60, 57, 55, 54, 53, 52, 51, 50, 48, 46, 44, 42 вес. % носителя или т.п. В одном варианте осуществления композиции носитель может представлять собой жидкость (например, водную или неводную). В другом варианте осуществления композиции носитель может представлять собой водную жидкость (например, воду, сахарную воду (т.е. воду, содержащую сахарозу, мальтозу и т.д.) и т.д.).
В конкретном варианте осуществления носитель представляет собой неводную жидкость (например, масло и т.д.). Неводная жидкость может представлять собой биоразлагаемую неводную жидкость. Неводная жидкость может представлять собой ʺлетучие органические соединения с низким давлением пара (LVP-VOC)ʺ, которая представляет собой химическое ʺсоединениеʺ или ʺсмесь соединенийʺ с (1) давлением пара менее 0,1 мм рт. ст. при 20oC, (2) состоящей из химических соединений с более чем 12 атомами углерода, и/или (3) с точкой кипения более 216oC. См. определение LVP-VOC, предоставленное Калифорнийским советом воздушных ресурсов (California Air Resources Board) (CARB). Неводная жидкость может представлять собой биоразлагаемую неводную жидкость LVP-VOC.
Неограничивающие примеры неводных жидкостей, подходящих в качестве носителя для описанных в настоящем документе композиций, включают силиконовые масла, вазелиновые/парафиновые масла, минеральные масла, растительные масла, гексиленгликоль, глицерин, линолевую кислоту, олеиновую кислоту и любые их комбинации. Неограничивающие примеры коммерческих минеральных/вазелиновых масел включают BRITOL 50 (доступное от Sonneborn, Inc., Мава, Нью-Джерси), масло Ultra-Fine Spray (доступное от Sunoco, Petronas Lubricants, Belgium NV), масло SunSpray 6N (доступное от Sunoco, Petronas Lubricants, Belgium NV), масло SunSpray 7E Range (доступное от Sunoco, Petronas Lubricants, Belgium NV), масло SunSpray 7N (доступное от Sunoco, Petronas Lubricants, Belgium NV), масло SunSpray 11E Range (доступное от Sunoco, Petronas Lubricants, Belgium NV), масло SunSpray 11N (доступное от Sunoco, Petronas Lubricants, Belgium NV), масло Banana Spray (доступное от Sunoco, Petronas Lubricants, Belgium NV) и масло BioSpray (доступное от Sunoco, Petronas Lubricants, Belgium NV). Примером силиконового масла является DM Fluid 100 CS (доступное от Shin-Etsu Chemical Co., Ltd., Токио, Япония).
В конкретном варианте осуществления носитель содержит одно или несколько парафиновых масел. В более конкретном варианте осуществления носитель содержит масло SunSpray 6N (доступное от Sunoco, Petronas Lubricants, Belgium NV).
Пестицид(ы) на основе грибов
Можно применять любой пестицид на основе грибов, учитывая целевого вредителя. Пестициды на основе грибов хорошо известны в уровне техники. В одном варианте осуществления пестицид на основе грибов может быть одним или несколькими энтомопатогенными грибами, одним или несколькими акарипатогенными грибами или их комбинацией.
В одном варианте осуществления в состав биопестицида (т.е. композиции) может входить 0,01 вес. % - 30,00 вес. % пестицида на основе грибов. При измерении весового процента пестицида на основе грибов могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить от приблизительно 0,01 вес. % до приблизительно 30,00 вес. % пестицида на основе грибов. В еще одном варианте осуществления в состав биопестицида может входить 1,00 вес. % - 15,00 вес. % пестицида на основе грибов. Опять таки, при измерении весового процента пестицида на основе грибов могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить от приблизительно 1,00 вес. % до приблизительно 15,00 вес. % пестицида на основе грибов. В еще другом варианте осуществления в состав биопестицида входит 5,00 вес. % - 11,00 вес. % пестицида на основе грибов. Опять же, при измерении весового процента пестицида на основе грибов могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить от приблизительно 5,00 вес. % до приблизительно 11,00 вес. % пестицида на основе грибов. Таким образом, в вариантах осуществления биопестицидов, раскрытых в настоящем документе, общее количество пестицида на основе грибов может составлять самое меньшее 0,01 вес. % и самое большее 30,00 вес. % (например, от 0,01 до 30,00 вес. %). В других вариантах осуществления вес. % пестицида на основе грибов может составлять приблизительно 10-12, 8-14, 6-16, 4-18 или т.п.
В конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 11,00 вес. % пестицида на основе грибов. При измерении весового процента пестицида на основе грибов могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 11,00 вес. % пестицида на основе грибов. В других вариантах осуществления вес. % пестицида на основе грибов может составлять приблизительно 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 12, 13, 14, 15, 16, 17 или 18.
Неограничивающие примеры пестицидов на основе грибов, которые можно применять в композициях, раскрытых в настоящем документе, описаны у McCoy, C. W., Samson, R. A., and Coucias, D. G. ʺEntomogenous fungi. В ʺCRC Handbook of Natural Pesticides. Microbial Pesticides, Part A. Entomogenous Protozoa and Fungi.ʺ (C. M. Inoffo, ed.), (1988): Vol. 5, 151-236; Samson, R. A., Evans, H.C., and Latge΄, J. P. ʺAtlas of Entomopathogenic Fungi.ʺ (Springer-Verlag, Berlin) (1988); и deFaria, M. R. and Wraight, S. P. ʺMycoinsecticides and Mycoacaricides: A comprehensive list with worldwide coverage and international classification of formulation types.ʺ Biol. Control (2007), doi: 10.1016/j.biocontrol.2007.08.001.
В одном варианте осуществления неограничивающие примеры пестицидов на основе грибов, которые можно применять в композициях, раскрытых в настоящем документе, включают виды Coelomycidium, Myiophagus, Coelemomyces, Lagenidium, Leptolegnia, Couchia, Sporodiniella, Conidiobolus, Entomophaga, Entomophthora, Erynia, Massospora, Meristacrum, Neozygites, Pandora, Zoophthora, Blastodendrion, Metschnikowia, Mycoderma, Ascophaera, Cordyceps, Torrubiella, Nectria, Hypocrella, Calonectria, Filariomyces, Hesperomyces, Trenomyces, Myriangium, Podonectria, Akanthomyces, Aschersonia, Aspergillus, Beauveria, Culicinomyces, Engyodontium, Fusarium, Gibellula, Hirsutella, Hymenostilbe, Isaria, Metarhizium, Nomuraea, Paecilomyces, Paraisaria, Pleurodesmospora, Polycephalomyces, Pseudogibellula, Sorosporella, Stillbella, Tetranacrium, Tilachlidium, Tolypocladium, Verticillium, Aegerita, Filobasidiella, Septobasidium, Uredinella и их комбинации.
Неограничивающие примеры конкретных видов, которые могут быть полезными в качестве инсектицида на основе грибов в биопестицидах, описанных в настоящем документе, включают Trichoderma hamatum, Trichoderma hazarium, Alternaria cassiae, Fusarium lateritum, Fusarium solani, Lecanicillium lecanii, Aspergillus parasiticus, Verticillium lecanii, Metarhizium anisopliae и Beauveria bassiana. В одном варианте осуществления раскрытые в настоящем документе композиции могут включать любой из представленных выше пестицидов на основе грибов, в том числе любую их комбинацию. В другом варианте осуществления пестицид на основе грибов является стабильным, так что пестицид на основе грибов сохраняет достаточно эффективную активность при его применении. Способы получения стабильных грибных организмов известны в уровне техники. В одном варианте осуществления пестицид на основе грибов присутствует в композиции в виде стабильной споры.
В одном варианте осуществления биопестицид содержит по меньшей мере один пестицид на основе грибов из рода Metarhizium spp., такой как Metarhizium anisopliae (также может называться в уровне техники как Metarrhizium anisopliae, Metarhizium brunneum или ʺзеленая мускардинаʺ). По меньшей мере в одном варианте осуществления пестицид на основе грибов содержит штамм Metarhizium anisopliae. В другом варианте осуществления биопестицид содержит споры штамма Metarhizium anisopliae.
В конкретном варианте осуществления биопестицид содержит по меньшей мере один пестицид на основе грибов, содержащий штамм F52 Metarhizium anisopliae (также известный как штамм 52 Metarhizium anisopliae, штамм 7 Metarhizium anisopliae, штамм 43 Metarhizium anisopliae, BIO-1020, TAE-001 Metarhizium anisopliae и депонированный под номерами DSM 3884, DSM 3885, ATCC 90448, SD 170 и ARSEF 7711), (доступный от Novozymes Biologicals, Inc., США). В еще одном конкретном варианте осуществления биопестицид содержит по меньшей мере один пестицид на основе грибов, включающий споры штамма F52 Metarhizium anisopliae.
В еще одном варианте осуществления биопестицид может дополнительно содержать по меньшей мере один пестицид на основе гриба из рода Beauveria spp., такой как, например, Beauveria bassiana. По меньшей мере в одном варианте осуществления пестицид на основе гриба дополнительно содержит штамм Beauveria bassiana. В другом варианте осуществления биопестицид дополнительно содержит споры штамма Beauveria bassiana.
В конкретном варианте осуществления биопестицид дополнительно содержит по меньшей мере один пестицид на основе грибов, содержащий штамм ATCC-74040 Beauveria bassiana. В другом варианте осуществления биопестицид дополнительно содержит по меньшей мере один пестицид на основе грибов, содержащий споры штамма ATCC-74040 Beauveria bassiana. В другом конкретном варианте осуществления биопестицид дополнительно содержит по меньшей мере один пестицид на основе грибов, содержащий штамм ATCC-74250 Beauveria bassiana. В еще одном конкретном варианте осуществления биопестицид дополнительно содержит по меньшей мере один пестицид на основе грибов, содержащий споры штамма ATCC-74250 Beauveria bassiana. В еще другом конкретном варианте осуществления биопестицид дополнительно содержит по меньшей мере один пестицид на основе грибов, содержащий смесь штамма ATCC-74040 Beauveria bassiana и штамма ATCC-74250 Beauveria bassiana. В еще одном варианте осуществления биопестицид дополнительно содержит по меньшей мере один пестицид на основе грибов, содержащий смесь спор штамма ATCC-74040 Beauveria bassiana и штамма ATCC-74250 Beauveria bassiana.
В еще одном конкретном варианте осуществления биопестициды, описанные в настоящем документе, могут содержать комбинацию грибов. В одном варианте осуществления биопестициды могут содержать два или более пестицидов на основе грибов, которые являются различными штаммами одного и того же вида. В другом варианте осуществления биопестицид содержит по меньшей мере два разных пестицида на основе грибов, которые являются штаммами разных видов. В одном варианте осуществления биопестицид содержит по меньшей мере один пестицид на основе грибов из рода Metarhizium spp. и по меньшей мере один пестицид на основе грибов из рода Beauveria spp. В другом варианте осуществления биопестициды содержат споры Metarhizium spp. и Beauveria spp.
В конкретном варианте осуществления биопестицид содержит по меньшей мере один пестицид на основе грибов, где по меньшей мере одним пестицидом на основе грибов является штамм Metarhizium anisopliae и по меньшей мере одним пестицидом на основе грибов является штамм Beauveria bassiana. В другом варианте осуществления биопестицид содержит по меньшей мере один пестицид на основе грибов, где пестицид на основе грибов содержит споры Metarhizium anisopliae и Beauveria bassiana.
В более конкретном варианте осуществления биопестицид содержит по меньшей мере один пестицид на основе грибов, где по меньшей мере одним пестицидом на основе грибов является штамм F52 Metarhizium anisopliae и по меньшей мере одним пестицидом на основе грибов является штамм штамма ATCC-74040 Beauveria bassiana. В еще другом варианте осуществления биопестицид содержит по меньшей мере один пестицид на основе грибов, где пестицид на основе грибов содержит споры штамма F52 Metarhizium anisopliae и штамма ATCC-74040 Beauveria bassiana.
В еще одном варианте осуществления биопестицид содержит по меньшей мере один пестицид на основе грибов, где по меньшей мере одним пестицидом на основе грибов является штамм F52 Metarhizium anisopliae и по меньшей мере одним пестицидом на основе грибов является штамм штамма ATCC-74250 Beauveria bassiana. В еще другом варианте осуществления биопестицид содержит по меньшей мере один пестицид на основе грибов, где пестицид на основе грибов содержит споры штамма F52 Metarhizium anisopliae и штамма ATCC-74250 Beauveria bassiana.
В еще одном конкретном варианте осуществления биопестицид содержит по меньшей мере один пестицид на основе грибов, где по меньшей мере одним пестицидом на основе грибов является штамм F52 Metarhizium anisopliae, по меньшей мере одним пестицидом на основе грибов является штамм штамма ATCC-74040 Beauveria bassiana, и по меньшей мере одним пестицидом на основе грибов является штамм штамма ATCC-74250 Beauveria bassiana. В еще одном варианте осуществления биопестицид содержит по меньшей мере один пестицид на основе грибов, где пестицид на основе грибов включает споры штамма F52 Metarhizium anisopliae, штамма ATCC-74040 Beauveria bassiana и штамма ATCC-74250 Beauveria bassiana.
Пестицид на основе грибов может быть получен в процессе ферментации в жидких культуральных средах или твердых культуральных средах. Среды могут иметь высокие концентрации углерода и азота для обеспечения более высоких выходов продукта. Неограничивающие примеры подходящих источников азота включают гидролизованный казеин, дрожжевой экстракт, гидролизованный соевый белок, гидролизованный белок семени хлопчатника и гидролизованный клейковинный белок кукурузы. Неограничивающие примеры подходящих источников углерода включают углеводы, в том числе глюкозу, фруктозу и сахарозу, а также глицерин и/или зерна, такие как рис или ячмень.
Способы ферментации можно проводить с использованием традиционных способов ферментации, как, например, техник аэробного культивирования в жидкой среде, культивирования во встряхиваемой колбе, а также микроферментации или ферментации в крупных масштабах (например, непрерывной, периодической, периодической с добавлением субстрата, твердофазной ферментации и т.п.) в лабораторных или промышленных ферментаторах, и такие способы хорошо известны в уровне техники. Несмотря на способ получения, применяемый для получения грибного организма, предполагается, что пестицид на основе грибов можно применять в качестве пестицида непосредственно из культуральной среды (например, риса) либо подвергать очистке и/или дополнительным стадиям обработки (например, способу сушки). В одном варианте осуществления после ферментации грибной организм может быть извлечен с помощью обычных методов (например, фильтрацией, центрифугированием, механическим извлечением (например, вытряхиванием грибного организма из культуральной среды) и т.д.). Как альтернатива, грибной организм может быть высушен (например, воздушной сушкой, лиофильной сушкой или сушкой распылением для снижения уровня влаги и хранением при соответствующей температуре, например, комнатной температуре).
Поверхностно-активное(ые) вещество(а)
Поверхностно-активные вещества хорошо известны в уровне техники и для описанных в настоящем документе биопестицидных композиций может быть использована любая комбинация пригодных поверхностно-активных веществ или систем поверхностно-активных веществ. Не будучи связанными теорией, авторы настоящего изобретения полагают, что поверхностно-активные вещества, пригодные для описанных в настоящем документе биопестицидов (т. е композиций), будут модифицировать свойства носителя для увеличения диспергирования и/или суспендирования биопестицидов в водных растворах (т. е стабилизировать эмульсии типа "масло в воде" при разведении биопестицида водой). Кроме того, предполагается, что путем модифицирования носителя с целью повышения диспергирования и/или суспендирования биопестицидов в водном растворе биопестицид сможет быть эффективно доставлен (например, с помощью распылителя) без активных веществ, прилипающих/приклеивающихся ко внутренним стенкам устройства для доставки или засоряющих детали для доставки (например, форсунки распылителей, трубопровод распылителя и т.д.).
Подходящие поверхностно-активные вещества для раскрытых в настоящем документе биопестицидов будут иметь минимальные, если вообще будут иметь какие-либо отрицательные эффекты, на жизнеспособность пестицидов на основе грибов.
В одном варианте осуществления в состав биопестицида (т.е. композиции) может входить 1,00 вес. % - 50,00 вес. % поверхностно-активного вещества. При измерении весового процента общего содержания поверхностно-активного вещества могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить от приблизительно 1,00 вес. % до приблизительно 50,00 вес. % поверхностно-активного вещества. В еще другом варианте осуществления в состав биопестицида может входить 1,00 вес. % - 40,00 вес. % общего содержания поверхностно-активного вещества. Опять таки, при измерении весового процента общего содержания поверхностно-активного вещества могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить от приблизительно 1,00 вес. % до приблизительно 40,00 вес. % поверхностно-активного вещества. В еще другом варианте осуществления в состав биопестицида входит 2,00 вес. % - 30,00 вес. % общего содержания поверхностно-активного вещества. Опять же, при измерении весового процента общего содержания поверхностно-активного вещества могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить от приблизительно 2,00 вес. % до приблизительно 30,00 вес. % поверхностно-активного вещества. Таким образом, в вариантах осуществления биопестицидов, раскрытых в настоящем документе, общее количество поверхностно-активного вещества может составлять самое меньшее 1,00 вес. % и самое большее 50,00 вес. % общего содержания поверхностно-активного вещества (например, от 1,00 до 50,00 вес. % общего содержания поверхностно-активного вещества). В других вариантах осуществления настоящего изобретения вес. % общего содержания поверхностно-активного вещества может составлять приблизительно 29-31, 28-32, 27-33, 26-34, 25-35, 24-36 или 22-28.
В конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 7,50 вес. % общего содержания поверхностно-активного вещества. При измерении весового процента общего содержания поверхностно-активного вещества могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 7,50 вес. % поверхностно-активного вещества. В другом конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 10,00 вес. % общего содержания поверхностно-активного вещества. При измерении весового процента общего содержания поверхностно-активного вещества могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 10,00 вес. % поверхностно-активного вещества. В еще другом конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 15,00 вес. % общего содержания поверхностно-активного вещества. При измерении весового процента общего содержания поверхностно-активного вещества могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 15,00 вес. % поверхностно-активного вещества. В еще одном конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 20,00 вес. % общего содержания поверхностно-активного вещества. При измерении весового процента общего содержания поверхностно-активного вещества могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 20,00 вес. % поверхностно-активного вещества. В еще другом конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 25,00 вес. % общего содержания поверхностно-активного вещества. При измерении весового процента общего содержания поверхностно-активного вещества могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 25,00 вес. % поверхностно-активного вещества. В еще одном конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 27,75 вес. % общего содержания поверхностно-активного вещества. При измерении весового процента общего содержания поверхностно-активного вещества могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 27,75 вес. % поверхностно-активного вещества. В другом конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 30,00 вес. % общего содержания поверхностно-активного вещества. При измерении весового процента общего содержания поверхностно-активного вещества могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 30,00 вес. % поверхностно-активного вещества. В других вариантах осуществления вес. % общего содержания поверхностно-активного вещества может составлять приблизительно 21, 22, 23, 24, 26, 27, 28, 29, 31, 32, 33, 34, 35, 36, 37, 38, 39 или 40.
Следующее предусматривает несколько неограничивающих примеров поверхностно-активных веществ, которые могут быть пригодными для применения с биопестицидами, описанными в настоящем документе. Выбирают различные виды поверхностно-активных веществ, и они состоят в определенных соотношениях для получения биопестицида с определенными свойствами (например, растворимого в водном растворе, не вредного для активных веществ, с минимальными фитотоксическими эффектами, сниженным прилипанием/приклеиванием к инструментам/устройствам для нанесения составов и т.д.).
Анионные поверхностно-активные вещества
Описанные в настоящем документе биопестициды могут содержать по меньшей мере одно или несколько анионных поверхностно-активных веществ. Анионное(ые) поверхностно-активное(ые) вещество(а) может(могут) представлять собой либо водорастворимые анионные поверхностно-активные вещества, водонерастворимые анионные поверхностно-активные вещества, либо комбинацию водорастворимых анионных поверхностно-активных веществ и водонерастворимых анионных поверхностно-активных веществ.
Неограничивающие примеры водорастворимых анионных поверхностно-активных веществ включают алкилсульфаты, алкилэфирсульфаты, алкиламидэфирсульфаты, алкиларилполиэфирсульфаты, алкиларилсульфаты, алкиларилсульфонаты, моноглицеридсульфаты, алкилсульфонаты, алкиламидсульфонаты, алкиларилсульфонаты, бензолсульфонаты, толуолсульфонаты, ксилолсульфонаты, кумолсульфонаты, алкилбензолсульфонаты, алкилдифенилоксидсульфонат, альфа-олефинсульфонаты, алкилнафталинсульфонаты, парафинсульфонаты, лигнинсульфонаты, алкилсульфосукцинаты, этоксилированные сульфосукцинаты, алкилэфирсульфосукцинаты, алкиламидсульфосукцинаты, алкилсульфосукцинамат, алкилсульфоацетаты, алкилфосфаты, сложный эфир фосфорной кислоты, алкилэфирфосфаты, ацилсаркозинаты, ацилизетионаты, N-ацилтаураты, N-ацил-N-алкилтаураты, алкилкарбоксилаты или их комбинацию.
Коммерчески доступные поверхностно-активные вещества, пригодные для описанных в настоящем документе биопестицидов, включают Ninate 60E. В одном варианте осуществления биопестицид содержит Ninate 60E.
Неионные поверхностно-активные вещества
Описанные в настоящем документе биопестициды могут содержать по меньшей мере одно или несколько неионных поверхностно-активных веществ. Неионное(ые) поверхностно-активное(ые) вещество(а) может(могут) представлять собой либо водорастворимые неионные поверхностно-активные вещества, водонерастворимые неионные поверхностно-активные вещества, либо комбинацию водорастворимых неионных поверхностно-активных веществ и водонерастворимых неионных поверхностно-активных веществ.
Водонерастворимые неионные поверхностно-активные вещества
Неограничивающие примеры водонерастворимых неионных поверхностно-активных средств включают алкильные и арильные эфиры глицерина, гликолевые эфиры, этаноламиды, сульфоаниламиды, спирты, амиды, этоксилаты спиртов, сложные эфиры глицерина, сложные гликолевые эфиры, этоксилаты сложного эфира глицерина и сложных гликолевых эфиров, сахарные алкилполигликозиды, полиоксиэтилированные жирные кислоты, конденсаты алканоламина, алканоламиды, третичные ацетиленовые гликоли, полиоксиэтилированные меркаптаны, сложные эфиры карбоновых кислот, полиоксиэтилированные полиоксипропиленгликоли, сложные эфиры сорбитана и жирных кислот или их комбинации. Также включены блок-сополимеры ЕО/РО (ЕО представляет собой этиленоксид, PO представляет собой пропиленоксид), полимеры и сополимеры EO, полиамины и поливинилпирролидоны.
Коммерчески доступные водонерастворимые неионные поверхностно-активные вещества, которые могут быть пригодны для описанных в настоящем документе биопестицидов, включают Tomadol® 91-2.5, Tomadol® 23-1, Tomadol® 23-3, Span™ 20, Span™ 40, Span™ 60, Span™ 65, Span™ 80, Span™ 85, Arlatone® TV, Atlas® G-1086, Atlas® G-1096, Atlox® 1045A, Cirrasol® G-1086, Cirrasol® G-1096 и их комбинации.
В одном варианте осуществления описанные в настоящем документе биопестициды содержат по меньшей мере одно или несколько водонерастворимых неионных поверхностно-активных веществ. В другом варианте осуществления описанные в настоящем документе биопестициды содержат по меньшей мере одно водонерастворимое неионное поверхностно-активное вещество, выбранное из сложных эфиров сорбитана и жирных кислот, этоксилата сложных эфиров сорбита и их комбинаций. Неограничивающие примеры сложных эфиров сорбита и жирных кислот, которые могут быть пригодны для описанных в настоящем данном документе биопестицидов, включают сорбитанмонолаураты (например, Span™ 20), сорбитанмонопальмитаты (например, Span™ 40), сорбитанмоностеараты (например, Span™ 60), сорбитантристеараты (например, Span™ 65), сорбитанмоноолеаты (например, Span™ 80), сорбитантриолеаты (например, Span™ 85), а также их комбинации. Неограничивающие примеры сложных эфиров этоксилатов сорбита, которые могут быть пригодны для описанных в настоящем документе биопестицидов, включают полиоксиэтилен (40) сорбитолеаты (например, Arlatone® TV), полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеаты (например, Atlas® G-1086, Cirrasol® G-1086), полиоксиэтилен (50) сорбитгексаолеаты, (например, Atlas® G-1096, Cirrasol® G-1096), полиоксиэтилен (30) олеат-лаураты (например, Atlox 1045A), а также их комбинации.
В другом конкретном варианте осуществления биопестицид содержит один или несколько сложных эфиров сорбитана и жирных кислот, выбранных из сорбитанмонолаурата, сорбитанмонопальмитата, сорбитанмоностеарата, сорбитантристеарата, сорбитантриолеата и их комбинаций. В еще одном конкретном варианте осуществления биопестицид содержит один или несколько сложных эфиров этоксилатов сорбита, выбранных из полиоксиэтилен (40) сорбитолеата, полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеата, полиоксиэтилен (50) сорбитгексаолеата, полиоксиэтилен (30) олеат-лаурата и их комбинаций. В еще одном конкретном варианте осуществления биопестицид содержит по меньшей мере один сложный эфир сорбитана и жирной кислоты, где сложный эфир сорбитана и жирной кислоты выбран из сорбитанмонолаурата, сорбитанмонопальмитата, сорбитанмоностеарата, сорбитантристеарата, сорбитанмоноолеата, сорбитантриолеата и их комбинаций, а также сложных эфиров этоксилатов сорбита, где сложный эфир этоксилатов сорбита выбиран из полиоксиэтилен (40) сорбитолеата, полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеата, полиоксиэтилен (50) сорбитгексаолеата, полиоксиэтилен (30) олеат-лаурата и их комбинаций.
В другом варианте осуществления биопестицид содержит сорбитанмоностеарат. В еще одном варианте осуществления биопестицид содержит сорбитанмоноолеат. В еще одном варианте осуществления биопестицид содержит полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеат. В конкретном варианте осуществления биопестицид содержит сорбитанмоностеарат, сорбитанмоноолеат, полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеат и их комбинации. В другом конкретном варианте осуществления биопестицид содержит сорбитанмоностеарат, сорбитанмоноолеат и их комбинации. В еще одном конкретном варианте осуществления биопестицид содержит сорбитанмоностеарат, полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеат и их комбинации. В еще одном конкретном варианте осуществления биопестицид содержит сорбитанмоноолеат, полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеат и их комбинации.
В конкретном варианте осуществления биопестицид содержит Span™ 60. В другом конкретном варианте осуществления биопестицид содержит Span™ 80. В еще другом конкретном варианте осуществления биопестицид содержит смесь Span™ 60 и Span™ 80. В еще другом конкретном варианте осуществления биопестицид содержит Cirrasol® G-1086. В еще одном конкретном варианте осуществления биопестицид содержит Atlas® G-1086. В другом конкретном варианте осуществления биопестицид содержит смесь Cirrasol® G-1086 и Atlas® G-1086. В еще другом конкретном варианте осуществления биопестицид содержит смесь Cirrasol® G-1086 и Span™ 60. В другом конкретном варианте осуществления биопестицид содержит смесь Cirrasol® G-1086 и Span™ 80. В еще другом конкретном варианте осуществления биопестицид содержит смесь Atlas® G-1086 и Span™ 60. В еще другом конкретном варианте осуществления биопестицид содержит смесь Atlas® G-1086 и Span™ 80. В другом конкретном варианте осуществления биопестицид содержит смесь Cirrasol® G-1086, Span™ 60 и Span™ 80. В еще другом конкретном варианте осуществления биопестицид содержит смесь Atlas® G-1086, Span™ 60 и Span™ 80. В еще другом конкретном варианте осуществления биопестицид содержит смесь Atlas® G-1086, Cirrasol® G-1086 и Span™ 60. В еще одном конкретном варианте осуществления биопестицид содержит смесь Atlas® G-1086, Cirrasol® G-1086 и Span™ 80. В еще другом конкретном варианте осуществления биопестицид содержит смесь Atlas® G-1086, Cirrasol® G-1086 и Span™ 60, а также Span™ 80.
В конкретном варианте осуществления биопестицид содержит по меньшей мере один сложный эфир сорбитана и жирной кислоты, а также по меньшей мере сложный эфир этоксилата сорбита, где соотношение сложного эфира сорбита и жирной кислоты и сложного эфира этоксилата сорбита составляет 1:100-100:1. В более конкретном варианте осуществления соотношение сложного эфира сорбитана и жирной кислоты и сложного эфира этоксилата сорбита составляет 1:90-90:1. В другом варианте осуществления соотношение сложного эфира сорбитана и жирной кислоты и сложного эфира этоксилата сорбита составляет 1:80-80:1. В еще другом варианте осуществления соотношение сложного эфира сорбитана и жирной кислоты и сложного эфира этоксилата сорбита составляет 1:70-70:1. В еще одном варианте осуществления соотношение сложного эфира сорбитана и жирной кислоты и сложного эфира этоксилата сорбита составляет 1:60-60:1. В другом варианте осуществления соотношение сложного эфира сорбитана и жирной кислоты и сложного эфира этоксилата сорбита составляет 1:50-50:1. В еще другом варианте осуществления соотношение сложного эфира сорбитана и жирной кислоты и сложного эфира этоксилата сорбита составляет 1:40-40:1. В еще другом варианте осуществления соотношение сложного эфира сорбитана и жирной кислоты и сложного эфира этоксилата сорбита составляет 1:30-30:1. В еще другом варианте осуществления соотношение сложного эфира сорбитана и жирной кислоты и сложного эфира этоксилата сорбита составляет 1:20-20:1. В другом варианте осуществления соотношение сложного эфира сорбитана и жирной кислоты и сложного эфира этоксилата сорбита составляет 1:10-10:1. В еще одном варианте осуществления соотношение сложного эфира сорбитана и жирной кислоты и сложного эфира этоксилата сорбита составляет 1:1.
В конкретном варианте осуществления соотношение сложного эфира сорбитана и жирной кислоты и сложного эфира этоксилата сорбита составляет 5:95 или 95:5. В другом варианте осуществления соотношение сложного эфира сорбитана и жирной кислоты и сложного эфира этоксилата сорбита составляет 10:90 или 90:10. В еще другом варианте осуществления соотношение сложного эфира сорбитана и жирной кислоты и сложного эфира этоксилата сорбита составляет 7,5:92,5 или 92,5:7,5. В еще одном варианте осуществления соотношение сложного эфира сорбитана и жирной кислоты и сложного эфира этоксилата сорбита составляет 15:85 или 85:15.
В конкретном варианте осуществления биопестицид содержит по меньшей мере один сорбитанмоноолеат и по меньшей мере один полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеат, где соотношение сорбитанмоноолеата и полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеата составляет 1:100-100:1. В более конкретном варианте осуществления соотношение сорбитанмоноолеата и полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеата составляет 1:90-90:1. В еще одном варианте осуществления соотношение сорбитанмоноолеата и полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеата составляет 1:80-80:1. В еще одном варианте осуществления соотношение сорбитанмоноолеата и полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеата составляет 1:70-70:1. В еще другом варианте осуществления соотношение сорбитанмоноолеата и полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеата составляет 1:60-60:1. В еще одном варианте осуществления соотношение сорбитанмоноолеата и полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеата составляет 1:50-50:1. В еще одном варианте осуществления соотношение сорбитанмоноолеата и полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеата составляет 1:40-40:1. В еще другом варианте осуществления соотношение сорбитанмоноолеата и полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеата составляет 1:30-30:1. В еще одном варианте осуществления соотношение сорбитанмоноолеата и полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеата составляет 1:20-20:1. В другом варианте осуществления соотношение сорбитанмоноолеата и полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеата составляет 1:10-10:1. В еще одном варианте осуществления соотношение сорбитанмоноолеата и полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеата составляет 1:1.
В конкретном варианте осуществления соотношение сорбитанмоноолеата и полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеата составляет 5:95 или 95:5. В другом конкретном варианте осуществления соотношение сорбитанмоноолеата и полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеата составляет 10:90 или 90:10. В еще одном конкретном варианте осуществления соотношение сорбитанмоноолеата и полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеата составляет 7,5:92,5 или 92,5:7,5. В еще другом конкретном варианте осуществления соотношение сорбитанмоноолеата и полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеата составляет 15:85 или 85:15.
В конкретных вариантах осуществления соотношение сорбитанмоноолеата и полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеата может составлять 0,01, 0,02, 0,03, 0,04, 0,05, 0,06, 0,07, 0,08, 0,09, 0,10, 0,11, 0,12, 0,13, 0,14, 0,15, 0,20, 0,25, 0,30 и т.п.
В конкретном варианте осуществления биопестицид содержит по меньшей мере один Span™ 80 и по меньшей мере один Cirrasol® G-1086, где соотношение Span™ 80 и Cirrasol® G-1086 составляет 1:100-100:1. В более конкретном варианте осуществления соотношение Span™ 80 и Cirrasol® G-1086 составляет 1:90-90:1. В другом варианте осуществления соотношение Span™ 80 и Cirrasol® G-1086 составляет 1:80-80:1. В еще другом варианте осуществления соотношение Span™ 80 и Cirrasol® G-1086 составляет 1:70-70:1. В еще одном варианте осуществления соотношение Span™ 80 и Cirrasol® G-1086 составляет 1:60-60:1. В другом варианте осуществления соотношение Span™ 80 и Cirrasol® G-1086 составляет 1:50-50:1. В еще другом варианте осуществления соотношение Span™ 80 и Cirrasol® G-1086 составляет 1:40-40:1. В еще одном варианте осуществления соотношение Span™ 80 и Cirrasol® G-1086 составляет 1:30-30:1. В еще другом варианте осуществления соотношение Span™ 80 и Cirrasol® G-1086 составляет 1:20-20:1. В другом варианте осуществления соотношение Span™ 80 и Cirrasol® G-1086 составляет 1:10-10:1. В еще другом варианте осуществления соотношение Span™ 80 и Cirrasol® G-1086 составляет 1:1.
В конкретном варианте осуществления соотношение Span™ 80 и Cirrasol® G-1086 составляет 5:95 или 95:5. В другом конкретном варианте осуществления соотношение Span™ 80 и Cirrasol® G-1086 составляет 10:90 или 90:10. В еще другом конкретном варианте осуществления соотношение Span™ 80 и Cirrasol® G-1086 составляет 7,5:92,5 или 92,5:7,5. В еще одном конкретном варианте осуществления соотношение Span™ 80 и Cirrasol® G-1086 составляет 15:85 или 85:15.
В конкретных вариантах осуществления соотношение В конкретных вариантах осуществления соотношение Span™ 60 или Span™ 80 и Cirrasol® Span™ 80 и Cirrasol® G-1086 может составлять 0,01, 0,02, 0,05, 0,10, 0,15, 0,20, 0,25, 0,30, 0,35, 0,40, 0,45 и т п.
Водорастворимые неионные поверхностно-активные вещества
Неограничивающие примеры водорастворимых неионных поверхностно-активных веществ включают этоксилаты спирта сорбитана и жирной кислоты и этоксилаты сложного эфира сорбитана и жирной кислоты. В одном варианте осуществления биопестицид содержит по меньшей мере одно водорастворимое неионное поверхностно-активное вещество, которое является этоксилатом линейного первичного или вторичного, либо разветвленного спирта с формулой: RO(CH2CH2O)nH, где R представляет собой длину углеводородной цепи, а n составляет среднее количество молей окиси этилена. В одном варианте осуществления R может быть этоксилатами линейного первичного или вторичного, либо разветвленного спирта с длиной углеводородной цепи в пределах от C9 до C16, а n находится в пределах от 6 до 13. В другом варианте осуществления биопестицид содержит по меньшей мере один этоксилат спирта, где R представляет собой линейную углеводородную цепь с длиной C9-C11, а n равняется 6. В еще другом варианте осуществления, когда описанные в настоящем документе биопестициды содержат несколько водорастворимых поверхностно-активных веществ, водорастворимые поверхностно-активные вещества характеризуются, по сути, одинаковой длиной углеродной цепи.
Коммерчески доступные водорастворимые неионные поверхностно-активные вещества, которые могут быть пригодны для описанных в настоящем документе биопестицидов, содержат Tomadol® 9-11, Tomadol® 23-7, Tomadol® 91-6, Tween® 20, Tween® 21, Tween® 40, Tween® 60, Tween® 80, Surfonic L24-4 и их комбинации.
В одном варианте осуществления описанные в настоящем документе биопестициды содержат по меньшей мере одно водорастворимое неионное поверхностно-активное вещество, выбранное из группы, состоящей из Tomadol® 9-11, Tomadol® 23-7, Tomadol® 91-6 и их комбинаций.
В конкретном варианте осуществления описанные в настоящем документе биопестициды содержат по меньшей мере один этоксилат сложного эфира сорбитана и жирной кислоты, выбранный из группы, состоящей из Tween® 20, Tween® 21, Tween® 40, Tween® 60, Tween® 80, Surfonic L24-4 и их комбинаций.
В еще другом варианте осуществления описанные в настоящем документе биопестициды содержат по меньшей мере один этоксилат спирта, по меньшей мере один этоксилат сложного эфира сорбитана и жирной кислоты или их комбинацию. В еще другом варианте осуществления описанные в настоящем документе биопестициды содержат по меньшей мере одно водорастворимое неионное поверхностно-активное вещество, выбранное из группы, состоящей из Tomadol® 9-11, Tomadol® 23-7, Tomadol® 91-6, Tween® 20, Tween® 21, Tween® 40, Tween® 60, Tween® 80, Surfonic L24-4 и их комбинаций.
В конкретном варианте осуществления биопестицид содержит Surfonic L24-4.
Комбинация неионных поверхностно-активных веществ
В одном варианте осуществления описанные в настоящем документе биопестициды содержат по меньшей мере одно или несколько неионных поверхностно-активных веществ. В другом варианте осуществления биопестициды содержат одно или несколько водонерастворимых неионных поверхностно-активных веществ. В еще одном варианте осуществления биопестициды содержат одно или несколько водонерастворимых неионных поверхностно-активных веществ и одно или несколько водорастворимых неионных поверхностно-активных веществ.
Другие поверхностно-активные вещества
В другом варианте осуществления описанные в настоящем документе биопестициды могут также содержать противовспениватели на силиконовой основе, применяемые в качестве поверхностно-активных веществ в противовспенивателях на силиконовой основе и на основе минеральных масел.
В другом варианте осуществления описанные в настоящем документе биопестициды могут также содержать соли щелочных металлов жирных кислот (например, водорастворимые соли щелочных металлов жирных кислот и/или водонерастворимые соли щелочных металлов жирных кислот) с длиной более чем 10 атомов углерода. В одном варианте осуществления биопестициды, содержащие соли щелочных металлов жирных кислот, содержат углеродные цепи с более чем 18 атомами углерода в длину или количеством, равным этому. В еще другом варианте осуществления биопестициды, содержащие соли щелочных металлов жирных кислот, содержат углеродные цепи с более чем 20 атомами углерода в длину или количеством, равным этому.
Необязательные ингредиенты
Биопестициды (т.е. описанные в настоящем документе композиции) могут дополнительно содержать один или несколько необязательных ингредиентов, которые физически и/или химически совместимы с биопестицидами, включенными в настоящий документ. Неограничивающие необязательные ингредиенты включают противоосаждающие средства, полезные с точки зрения сельского хозяйства ингредиенты (например, ферменты, полезные сигнальные молекулы растений, полезные микроорганизмы, инсектициды, фунгициды, нематоциды, питательные вещества и т.д.), регуляторы роста насекомых, электростатические носители, консерванты, наполнители, рН-регулирующие средства, стабилизаторы, структурообразователи, буферы, антиоксиданты, водопоглощающие средства, пены, увлажнители, увлажняющие средства, средства защиты от УФ-излучения, растворители, питательные добавки и их комбинации. Такие ингредиенты известны специалистам в данной области техники.
Противоосаждающие средства
По меньшей мере в одном варианте осуществления биопестициды (т.е. описанные в настоящем документе композиции) могут необязательно содержать одно или несколько противоосаждающих средств. Как альтернатива, одно или несколько противоосаждающих средств можно применять либо одновременно, либо последовательно с раскрытыми в настоящем документе биопестицидами. Одно или несколько противоосаждающих средств могут включать любое средство, способное удерживать нерастворимые частицы (т.е. споры пестицида на основе грибов) равномерно взвешенными в жидком растворе (т.е. предупреждать оседание нерастворимых веществ).
В вариантах осуществления в состав биопестицида может входить 0,01 вес. % - 10,00 вес. % противоосаждающего средства. При измерении весового процента противоосаждающего средства могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить от приблизительно 0,01 вес. % до приблизительно 10,00 вес. % противоосаждающего средства. В еще другом варианте осуществления в состав биопестицида может входить 0,01 вес. % - 5,00 вес. % противоосаждающего средства. Опять таки, при измерении весового процента противоосаждающего средства могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить от приблизительно 0,01 вес. % до приблизительно 5,00 вес. % противоосаждающего средства. В еще другом варианте осуществления в состав биопестицида входит 0,01 вес. % - 2,00 вес. % противоосаждающего средства. Опять же, при измерении весового процента противоосаждающего средства могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить от приблизительно 0,01 вес. % до приблизительно 2,00 вес. % противоосаждающего средства. Таким образом, в вариантах осуществления биопестицидов, раскрытых в настоящем документе, общее количество противоосаждающего средства может составлять самое меньшее 1,00 вес. % и самое большее 50,00 вес. % противоосаждающего средства (например, 1,00-50,00 вес. % противоосаждающего средства).
В конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 0,25 вес. % противоосаждающего средства. При измерении весового процента противоосаждающего средства могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 0,25 вес. % противоосаждающего средства. В более конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 0,50 вес. % противоосаждающего средства. При измерении весового процента противоосаждающего средства могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 0,50 вес. % противоосаждающего средства. В другом конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 1,00 вес. % противоосаждающего средства. При измерении весового процента противоосаждающего средства могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 1,00 вес. % противоосаждающего средства. В еще одном конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 3,00 вес. % противоосаждающего средства. При измерении весового процента противоосаждающего средства могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 3,00 вес. % противоосаждающего средства. В еще другом конкретном варианте осуществления в состав биопестицида входит 5,00 вес. % противоосаждающего средства. При измерении весового процента противоосаждающего средства могут иметь место незначительные отклонения, и в состав биопестицида может входить приблизительно 5,00 вес. % противоосаждающего средства. В других вариантах осуществления вес. % противоосаждающего средства может составлять приблизительно 2 или 4.
Неограничивающие примеры противоосаждающих средств, которые могут подходить для описанных в настоящем документе биопестицидов, включают поливинилацетат, поливиниловые спирты с разной степенью гидролиза, поливинилпирролидоны, полиакрилаты, связующие вещества системы нанесения покрытия на основе акрилата, полиола и сложного полиэфира, которые являются растворимыми или диспергируемыми в воде, кроме того, сополимеры двух или более мономеров, таких как акриловая кислота, метакриловая кислота, итаконовая кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, малеиновый ангидрид, винилпирролидон, этиленненасыщенные мономеры, такие как этилен, бутадиен, изопрен, хлоропрен, стирол, дивинилбензол, ot-метилстирол или p-метилстирол, дополнительные винилгалогениды, такие как хлорид винила и винилиденхлорид, в дополнение к этому сложные виниловые эфиры, такие как винилацетат, винилпропионат или винилстеарат, кроме того винилметилкетон или сложные эфиры акриловой кислоты или метакриловой кислоты с одноатомными спиртами или полиолами, такие как метилакрилат, метилметакрилат, этилакрилат, этиленметакрилат, лаурилакрилат, лаурилметакрилат, децилакрилат, N,N-диметиламино-этилметакрилат, 2-гидроксиэтилметакрилат, 2-гидроксипропилметакрилат или глицидилметакрилат, к тому же сложные диэтиловые эфиры или сложные моноэфиры ненасыщенных дикарбоновых кислот, также (мет)акриламидо-N-метилолметиловый эфир, амиды или нитрилы, такие как акриламид, метакриламид, N-метилол(мет)акриламид, акрилонитрил, метакрилонитрил, а также N-замещенные малеираиды и эфиры, такие как винилбутиловый эфир, винилизобутиловый эфир или винилфениловый эфир и их комбинации. В другом варианте осуществления гелеобразователи, которые можно применять, включают гидрофобно модифицированные глины (например, монтмориллонит натрия, где обменные ионы натрия замещены органическими катионными молекулами, такими как алкиламины), поверхностно-модифицированные кремнеземы, высокодисперсные оксиды кремния (например, необработанные или поверхностно-модифицированные) и их комбинации. Коммерчески доступные необработанные высокодисперсные оксиды кремния включают CAB-O-SIL® M-5, CAB-O-SIL® M-7D, CAB-O-SIL® MS-75D PDS, CAB-O-SIL® S-17D, CAB-O-SIL® EH-5, CAB-O-SIL® H-300, CAB-O-SIL® H-5, CAB-O-SIL® LM-150, CAB-O-SIL® MS-35 и т.д. (доступные от Cabot Corporation, Тускола, Иллинойс). Поверхностно-модифицированные высокодисперсные оксиды кремния включают, например, высокодисперсные оксиды кремния, поверхностно-модифицированные с помощью гексаметилдисилазана, диметилдихлорсилана (DiMeDi), полидиметилсилоксана и т.д. Неограничивающие примеры коммерчески доступных поверхностно-модифицированных высокодисперсных оксидов кремния включают CAB-O-SIL® TS-530, CAB-O-SIL® TS-530D, CAB-O-SIL® TS-610, CAB-O-SIL® TS-622, CAB-O-SIL® TS-720 и т.д. (доступных от Cabot Corporation, Тускола, Иллинойс).
В конкретном варианте осуществления биопестицид содержит высокодисперсный оксид кремния. В более конкретном варианте осуществления биопестицид содержит высокодисперсный оксид кремния, где весовой процент биопестицида составляет 5,00 вес. % высокодисперсного оксида кремния. В другом конкретном варианте осуществления биопестицид содержит высокодисперсный оксид кремния, где весовой процент биопестицида составляет 3,00 вес. % высокодисперсного оксида кремния. В еще другом конкретном варианте осуществления биопестицид содержит высокодисперсный оксид кремния, где весовой процент биопестицида составляет 1,00 вес. % высокодисперсного оксида кремния. В более конкретном варианте осуществления биопестицид содержит Cab-O-Sil® M-5, где весовой процент биопестицида составляет 5,00 вес. % Cab-O-Sil® M-5. В еще более конкретном варианте осуществления биопестицид содержит Cab-O-Sil® M-5, где весовой процент биопестицида составляет 3,00 вес. % Cab-O-Sil® M-5. В еще одном более конкретном варианте осуществления биопестицид содержит Cab-O-Sil® M-5, где весовой процент биопестицида составляет 1,00 вес. % Cab-O-Sil® M-5.
Полезные с точки зрения сельского хозяйства ингредиенты
Биопестициды (т.е. описанные в настоящем документе композиции) могут необязательно содержать один или несколько полезных с точки зрения сельского хозяйства ингредиентов. Неограничивающие примеры полезных с точки зрения сельского хозяйства ингредиентов включают один или несколько биологически активных ингредиентов, питательных веществ, биостимуляторов, гербицидов, фунгицидов, инсектицидов или их комбинации.
Биологически активный(е) ингредиент(ы)
Неограничивающие примеры биологически активных ингредиентов включают ферменты, сигнальные молекулы растений (например, липохитоолигосахариды (LCO), хитоолигосахариды (CO), хитиновые соединения, жасмоновую кислоту или ее производные, линолевую кислоту или ее производные, линоленовую кислоту или ее производные, каррикины и т.д.) и полезные микроорганизмы (например, Rhizobium spp., Bradyrhizobium spp., Sinorhizobium spp., Azorhizobium spp., Glomus spp., Gigaspora spp., Hymenoscyphous spp., Oidiodendron spp., Laccaria spp., Pisolithus spp., Rhizopogon spp., Scleroderma spp., Rhizoctonia spp., Acinetobacter spp., Arthrobacter spp, Arthrobotrys spp., Aspergillus spp., Azospirillum spp, Bacillus spp, Burkholderia spp., Candida spp., Chryseomonas spp., Enterobacter spp., Eupenicillium spp., Exiguobacterium spp., Klebsiella spp., Kluyvera spp., Microbacterium spp., Mucor spp., Paecilomyces spp., Paenibacillus spp., Penicillium spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Stenotrophomonas spp., Streptomyces spp., Streptosporangium spp., Swaminathania spp., Thiobacillus spp., Torulospora spp., Vibrio spp., Xanthobacter spp., Xanthomonas spp. и т.д.).
Ферменты
По меньшей мере в одном варианте осуществления биопестициды (т.е. описанные в настоящем документе композиции) могут необязательно содержать один или несколько ферментов. Как альтернатива, один или несколько ферментов можно применять либо одновременно, либо последовательно с раскрытыми в настоящем документе биопестицидами. Описанные в настоящем документе биопестициды могут содержать по меньшей мере один разрушающий кутикулу фермент. Разрушающие кутикулу ферменты хорошо известны в уровне техники и включают как встречающиеся в природе (дикого типа) ферменты, так и вариантные (модифицированные людьми) ферменты. Неограничивающие примеры разрушающих кутикулу ферментов включают протеазы, пептидазы, хитиназы, хитозаназу, кутиназы и липазы. В одном варианте осуществления биопестициды необязательно содержат по меньшей мере один разрушающий кутикулу фермент, выбранный из группы, состоящей из протеазы, пептидазы, хитиназы, хитозаназы, липазы, кутиназы и любой их комбинации. В другом варианте осуществления по меньшей мере одним разрушающим кутикулу ферментом является протеаза. В другом варианте осуществления по меньшей мере одним разрушающим кутикулу ферментом является хитиназа. В еще другом варианте осуществления по меньшей мере одним разрушающим кутикулу ферментом является липаза. В еще другом варианте осуществления по меньшей мере одним разрушающим кутикулу ферментом является кутиназа.
По меньшей мере в одном варианте осуществления описанные в настоящем документе биопестициды содержат комбинацию по меньшей мере двух разрушающих кутикулу ферментов (например, двух разрушающих кутикулу ферментов, трех разрушающих кутикулу ферментов, четырех разрушающих кутикулу ферментов, пяти разрушающих кутикулу ферментов и т.д.). В одном варианте осуществления описанные в настоящем документе биопестициды содержат комбинацию по меньшей мере двух разных типов ферментов (например, протеазу и хитиназу). В еще другом варианте осуществления описанные в настоящем документе биопестициды содержат комбинацию по меньшей мере двух ферментов одинакового типа (например, по меньшей мере две разные протеазы и т.д.). В еще другом варианте осуществления описанные в настоящем документе биопестициды содержат комбинацию по меньшей мере трех разрушающих кутикулу ферментов (например, протеазы, хитиназы, липазы и т.д.).
Ферменты, описанные в настоящем документе, могут иметь одну или несколько разрушающих кутикулу активностей. Разрушающий кутикулу фермент можно получать из любого подходящего источника. В вариантах осуществления разрушающий кутикулу фермент можно получать из микроорганизма (например, бактериального источника или грибного источника). В другом варианте осуществления разрушающий кутикулу фермент является протеазой, описанной в WO 89/06279. Можно также использовать коммерческие протеазы, такие как, например, продукт SAVINASE (доступный от Novozymes A/S).
Описанные в настоящем документе ферменты также могут быть выделены из энтомопатогенного гриба или акарипатогенного гриба.
Неограничивающие примеры разрушающих кутикулу ферментов описаны у Bagga, S., et al. "Reconstructing the diversification of subtilisins in the pathogenic fungus Metarhizium anisopliae." Gene 324 (2004): 159-69; Bidochka, M. J. and M. J. Melzer. "Genetic polymorphisms in three subtilisin-like protease isoforms (Pr1A, Pr1B, and Pr1C) from Metarhizium strains." Canadian Journal of Microbiology 46.12 (2000): 1138-44; Braga, G. U. L., R. Vencovsky, and C. L. Messias. "Estimates of genetic parameters related to chitinase production by the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae." Genetics and Molecular Biology 21.2 (1998): 171-77; Clarkson, J. M. "Molecular biology of fungi for the control of insects." (1996): 123-35; Cole, S. C. J., A. K. Charnley, and R. M. Cooper. "Purification and partial characterization of a novel trypsin- like cysteine protease from Metarhizium-anisopliae." FEMS Microbiology Letters 113.2 (1993): 189-96; Da Silva, M. V., et al. "Cuticle-induced endo/exoacting chitinase CHIT30 from Metarhizium anisopliae is encoded by an ortholog of the chi3 gene." Research in Microbiology 156.3 (2005): 382-92; Dhar & Kaur, ʺProduction of cuticle-degrading proteases by Beauveria bassiana and their induction in different media,ʺ African Journal of Biochemistry Research, Vol. 4(3), 65-72 (2010); Fang, W. G., et al. "Expressing a fusion protein with protease and chitinase activities increases the virulence of the insect pathogen Beauveria bassiana." Journal of Invertebrate Pathology 102.2 (2009): 155-59; Freimoser, F. M., et al. "Expressed sequence tag (EST) analysis of two subspecies of Metarhizium anisopliae reveals a plethora of secreted proteins with potential activity in insect hosts." Microbiology-Sgm 149 (2003): 239-47; Gimenez-Pecci, MdlP, et al. "Characterization of mycoviruses and analyses of chitinase secretion in the biocontrol fungus Metarhizium anisopliae." Current Microbiology 45.5 (2002): 334-39; Hu, G. and R. J. S. Leger. "A phylogenomic approach to reconstructing the diversification of serine proteases in fungi." Journal of Evolutionary Biology 17.6 (2004): 1204-14; Hutwimmer, S., et al. "Algorithm-based design of synthetic growth media stimulating virulence properties of Metarhizium anisopliae conidia." Journal of Applied Microbiology 105.6 (2008): 2026-34; Joshi, L., R. S. S. Leger, and D. W. Roberts. "Isolation of a cDNA encoding a novel subtilisin-like protease (Pr1B) from the entomopathogenic fungus, Metarhizium anisopliae using differential display-RT-PCR." Gene (Amsterdam) 197.1-2 (1997): 1-8; Kim, H. K., et al. "Gene structure and expression of the gene from Beauveria bassiana encoding bassiasin I, an insect cuticle-degrading serine protease." Biotechnology Letters 21.9 (1999): 777-83; Kim, J. S. "A novel biopesticide production: Attagel-mediated precipitation of chitinase from Beauveria bassiana SFB-205 supernatant for thermotolerance." Applied Microbiology and Biotechnology 87.5 (2010): 1639-48; "Relation of aphicidal activity with cuticular degradation by Beauveria bassiana SFB-205 supernatant incorporated with polyoxyethylene-(3)-isotridecyl ether." Journal of Microbiology and Biotechnology 20.3 (2010): 506-09; Kim, J. S., et al. "Influence of two FPLC fractions from Beauveria bassiana SFB-205 supernatant on the insecticidal activity against cotton aphid." Biocontrol Science and Technology 20.1 (2010): 77-81; Kim, J. S., et al. "Correlation of the aphicidal activity of Beauveria bassiana SFB-205 supernatant with enzymes." Fungal Biology 114.1 (2010): 120-28; Ko, H. J., et al. "Optimal production of protease from entomopathogenic fungus Beauveria bassiana." Agricultural Chemistry and Biotechnology 39.6 (1996): 449-54; Ko, H. J., et al. "Purification and characterization of protease from entomopathogenic fungus Beauveria bassiana." Agricultural Chemistry and Biotechnology 40.5 (1997): 388-94; Leal, S. C. M., et al. "Amplification and restriction endonuclease digestion of the Pr1 gene for the detection and characterization of Metarhizium strains." Mycological Research 101.3 (1997): 257-65; Liang et al., ʺThe crystal structures of two cuticle-degrading proteases from nematophagous fungi and their contribution to infection against nematodes,ʺ The FASEB Journal, Vol. 24, 1391-1400, May 2010; Manalil, N. S., et al. "Comparative analysis of the Metarhizium anisopliae secretome in response to exposure to the greyback cane grub and grub cuticles." Fungal Biology 114.8 (2010): 637-45; Mohanty, S. S., K. Raghavendra, and A. P. Dash. "Induction of chymoelastase (Pr1) of Metarhizium anisopliae and its role in causing mortality to mosquito larvae." World Journal of Microbiology and Biotechnology 24.10 (2008): 2283-88; Mustafa, U. and G. Kaur. "Extracellular Enzyme Production in Metarhizium anisopliae Isolates." Folia Microbiologica 54.6 (2009): 499-504; Nahar, P., V. Ghormade, and M. V. Deshpande. "The extracellular constitutive production of chitin deacetylase in Metarhizium anisopliae: possible edge to entomopathogenic fungi in the biological control of insect pests." Journal of Invertebrate Pathology 85.2 (2004): 80-88; Ortiz-Urquiza, A., et al. "Effects of cultural conditions on fungal biomass, blastospore yields and toxicity of fungal secreted proteins in batch cultures of Metarhizium anisopliae (Ascomycota: Hypocreales)." Pest Management Science 66.7 (2010): 725-35; Paterson, I. C., et al. "Regulation of production of a trypsin-like protease by the insect pathogenic fungus Metarhizium-anisopliae." FEMS Microbiology Letters 109.2-3 (1993): 323-27; "Specific induction of a cuticle-degrading protease of the insect pathogenic fungus Metarhizium-anisopliae." Microbiology-Uk 140.Part 1 (1994): 185-89; "Partial characterization of specific inducers of a cuticle- degrading protease from the insect pathogenic fungus Metarhizium-anisopliae." Microbiology-Uk 140.Part 11 (1994): 3153-59; Pinto, F. G., et al. "Genetic variation in the cuticle-degrading protease activity of the entomopathogen Metarhizium flavoviride." Genetics and Molecular Biology 25.2 (2002): 231-34; Qazi, S. S. and G. G. Khachatourians. "Hydrated conidia of Metarhizium anisopliae release a family of metalloproteases." Journal of Invertebrate Pathology 95.1 (2007): 48-59; Rangel, D. E. N., D. G. Alston, and D. W. Roberts. "Effects of physical and nutritional stress conditions during mycelial growth on conidial germination speed, adhesion to host cuticle, and virulence of Metarhizium anisopliae, an entomopathogenic fungus." Mycological Research 112 (2008): 1355-61; Rodriguez, C. ML and B. CE Gongora. "Transformation of Beauveria bassiana Bb9205 with pr1A, pr1J, and ste1 genes of Metarhizium anisopliae and evaluation of the pathogenicity on the coffee berry borer." REVISTA COLOMBIANA DE ENTOMOLOGIA 31.1 (2005): 51-58; Santi, L., et al. "Differential immunoproteomics enables identification of Metarhizium anisopliae proteins related to Rhipicephalus microplus infection." Research in Microbiology 160.10 (2009): 824-28; Santi, L., et al. "Metarhizium anisopliae host-pathogen interaction: differential immunoproteomics reveals proteins involved in the infection process of arthropods." Fungal Biology 114.4 (2010): 312-19; Sasaki, S. D., et al. "BmSI-7, a novel subtilisin inhibitor from Boophilus microplus, with activity toward Pr1 proteases from the fungus Metarhizium anisopliae." Experimental Parasitology 118.2 (2008): 214-20; Screen, S. E., G. Hu, and R. J. Leger. "Transformants of Metarhizium anisopliae sf. anisopliae overexpressing chitinase from Metarhizium anisopliae sf. acridum show early induction of native chitinase but are not altered in pathogenicity to Manduca sexta." Journal of Invertebrate Pathology 78.4 (2001): 260-66; Segers, R., et al. "The subtilisins of the invertebrate mycopathogens Verticillium chlamydosporium and Metarhizium anisopliae are serologically and functionally related." FEMS Microbiology Letters 126.3 (1995): 227-31; Shah, F. A., C. S. Wang, and T. M. Butt. "Nutrition influences growth and virulence of the insect- pathogenic fungus Metarhizium anisopliae." FEMS Microbiology Letters 251.2 (2005): 259-66; Small, C. L. and M. J. Bidochka. "Up-regulation of Pr1, a subtilisin-like protease, during conidiation in the insect pathogen Metarhizium anisopliae." Mycological Research 109 (2005): 307-13; Smithson, S. L., et al. "Cloning and characterization of a gene encoding a cuticle-degrading protease from the insect pathogenic fungus Metarhizium anisopliae." Gene (Amsterdam) 166.1 (1995): 161-65; St Leger, R. J. "The role of cuticle-degrading proteases in fungal pathogenesis of insects." Canadian Journal of Botany 73.SUPPL. 1 SECT. E-H (1995): S1119-S1125; St Leger, R. J., M. J. Bidochka, and D. W. Roberts. "Characterization of a novel carboxypeptidase produced by the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae." Archives of biochemistry and biophysics 314.2 (1994): 392-98; "Germination triggers of Metarhizium anisopliae conidia are related to host species." Microbiology (Reading) 140.7 (1994): 1651-60; St Leger, R. J., R. M. Cooper, and A. K. Charnley. "Distribution of chymoelastases and trypsin-like enzymes in five species of entomopathogenic deuteromycetes." Archives of biochemistry and biophysics 258.1 (1987): 123-31; St. Leger, R. J., L. Joshi, and D. W. Roberts. "Adaptation of proteases and carbohydrates of saprophytic, phytopathogenic and entomopathogenic fungi to the requirements of their ecological niches." Microbiology (Reading, England) 143 ( Pt 6) (1997): 1983-92; St Leger, R. J., J. O. Nelson, and S. E. Screen. "The entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae alters ambient pH, allowing extracellular protease production and activity." Microbiology-Uk 145 (1999): 2691-99; St Leger, R. J. and D. W. Roberts. "Engineering improved mycoinsecticides." Trends in Biotechnology 15.3 (1997): 83-85; St Leger, R. J., M. J. Bidochka, and D. W. Roberts. "Isoforms of the cuticle-degrading pr1 proteinase and production of a metalloproteinase by Metarhizium-anisopliae." Archives of biochemistry and biophysics 313.1 (1994): 1-7; St Leger, R. J., R. M. Cooper, and A. K. Charnley. "Analysis of aminopeptidase and dipeptidylpeptidase iv from the entomopathogenic fungus Metarhizium-anisopliae." Journal of General Microbiology 139.Part 2 (1993): 237-43; St Leger, R. J., et al. "Characterization and ultrastructural-localization of chitinases from Metarhizium-anisopliae, m-flavoviride, and Beauveria-bassiana during fungal invasion of host (manduca- sexta) cuticle." Applied and Environmental Microbiology 62.3 (1996): 907-12; St Leger, R. J., L. Joshi, and D. Roberts. "Ambient pH is a major determinant in the expression of cuticle-degrading enzymes and hydrophobin by Metarhizium-anisopliae." Applied and Environmental Microbiology 64.2 (1998): 709-13; St. Leger, R. J., R. C. Staples, and D. W. Roberts. "Entomopathogenic isolates of Metarhizium-anisopliae, Beauveria-bassiana, and Aspergillus-flavus produce multiple extracellular chitinase isozymes." Journal of Invertebrate Pathology 61.1 (1993): 81-84; St. Leger et al., ʺProduction of Cuticle-degrading Enzymes by the Entomopathogen Metarhizium anisopliae during Infection of Cuticles from Calliphora vomitoria and Manduca sexta,ʺ Journal of General Microbiology, 133, 1371-1382 (1987); St. Leger et al., ʺCuticle-degrading Enzyme of Entomopathogenic Fungi: Regulation of Production of Chitonolytic Enzymes,ʺ General Microbiology, 132, 1509-1517 (1987); St. Leger et al., ʺCuticle-Degrading Enzymes of Entomopathogenic Fungi,ʺ Synthesis in Culture on Cuticle, Journal of Invertebrate Pathology, 48, 85-95 (1986); Todorova, S. I., et al. "Heterogeneity of two Beauveria bassiana strains revealed by biochemical tests, protein profiles and bio-assays on Leptinotarsa decemlineata (Col.: Chrysomelidae) and Coleomegilla maculata lengi (Col.: Coccinellidae) larvae." Entomophaga 39.2 (1994): 159-69; Valadares, M. C. C. and J. L. Azevedo. "Production of amylases and proteases by wild-type and mutant strains of Metarhizium anisopliae var. anisopliae." Revista de Microbiologia 27.4 (1996): 237-41; Valadares-Inglis, M. C. and J. L. Azevedo. "Amylase and protease secretion in recombinant strains of Metarhizium anisopliae var. anisopliae following parasexual crosses." Brazilian Journal of Genetics 20.2 (1997): 171-75; Valadares-Inglis, M. C. and J. F. Peberdy. "Location of chitinolytic enzymes in protoplasts and whole cells of the entomopathogenic fungus Metarhizium anisopliae." Mycological Research 101.11 (1997): 1393-96; Wang, C. S., M. A. Typas, and T. M. Butt. "Detection and characterisation of pr1 virulent gene deficiencies in the insect pathogenic fungus Metarhizium anisopliae." FEMS Microbiology Letters 213.2 (2002): 251-55; Wei, Z., Y. Q. Cao, and Y. X. Xia. "Cloning of the subtilisin Pr1A gene from a strain of locust specific fungus, Metarhizium anisopliae, and functional expression of the protein in Pichia pastoris." World Journal of Microbiology and Biotechnology 24.11 (2008): 2481-88; патент США № 5962765; WO 2008/063011.
Полезные с точки зрения сельского хозяйства микроорганизмы
По меньшей мере в одном варианте осуществления биопестициды (т.е. описанные в настоящем документе композиции) могут необязательно содержать один или несколько дополнительных полезных с точки зрения сельского хозяйства микроорганизмов, отличных от описанных ранее. В качестве альтернативы, один или несколько дополнительных полезных микроорганизмов можно применять либо одновременно, либо последовательно с раскрытыми в настоящем документе биопестицидами. Один или несколько полезных микроорганизмов могут находиться в форме спор, в вегетативной форме или их комбинации. Один или несколько полезных микроорганизмов могут включать любое количество микроорганизмов, обладающих одним или несколькими полезными свойствами (например, продуцировать одну или несколько описанных в настоящем документе сигнальных молекул растений, увеличивать поглощение питательных веществ и воды, стимулировать и/или увеличивать фиксацию азота, усиливать рост, улучшать прорастание семян, улучшать всхожесть проростков, прерывать диапаузу или состояние покоя растения, продуцировать или экспрессировать токсины, которые дополняют и/или повышают активность пестицида на основе грибов (например, δ-эндотоксин, α-экзотоксин, β-экзотоксин и т.д., продуцируемые Bacillus thuringiensis), обеспечивать активность против грибов и т.д.).
В одном варианте осуществления одним или несколькими полезными микроорганизмами являются диазотрофы (т.е. бактерии, которые представляют собой азотфиксирующие бактерии). В еще одном варианте осуществления один или несколько диазотрофов выбраны из родов Rhizobium spp., Bradyrhizobium spp., Azorhizobium spp., Sinorhizobium spp., Mesorhizobium spp., Azospirillum spp. и их комбинаций. В еще одном варианте осуществления один или несколько полезных микроорганизмов представляют собой бактерии, выбранные из группы, состоящей из Rhizobium cellulosilyticum, Rhizobium daejeonense, Rhizobium etli, Rhizobium galegae, Rhizobium gallicum, Rhizobium giardinii, Rhizobium hainanense, Rhizobium huautlense, Rhizobium indigoferae, Rhizobium leguminosarum, Rhizobium loessense, Rhizobium lupini, Rhizobium lusitanum, Rhizobium meliloti, Rhizobium mongolense, Rhizobium miluonense, Rhizobium sullae, Rhizobium tropici, Rhizobium undicola, Rhizobium yanglingense, Bradyrhizobium bete, Bradyrhizobium canariense, Bradyrhizobium elkanii, Bradyrhizobium iriomotense, Bradyrhizobium japonicum, Bradyrhizobium jicamae, Bradyrhizobium liaoningense, Bradyrhizobium pachyrhizi, Bradyrhizobium yuanmingense, Azorhizobium caulinodans, Azorhizobium doebereinerae, Sinorhizobium abri, Sinorhizobium adhaerens, Sinorhizobium americanum, Sinorhizobium aboris, Sinorhizobium fredii, Sinorhizobium indiaense, Sinorhizobium kostiense, Sinorhizobium kummerowiae, Sinorhizobium medicae, Sinorhizobium meliloti, Sinorhizobium mexicanus, Sinorhizobium morelense, Sinorhizobium saheli, Sinorhizobium terangae, Sinorhizobium xinjiangense, Mesorhizobium albiziae, Mesorhizobium amorphae, Mesorhizobium chacoense, Mesorhizobium ciceri, Mesorhizobium huakuii, Mesorhizobium loti, Mesorhizobium mediterraneum, Mesorhizobium pluifarium, Mesorhizobium septentrionale, Mesorhizobium temperatum, Mesorhizobium tianshanense, Azospirillum amazonense, Azospirillum brasilense, Azospirillum canadense, Azospirillum doebereinerae, Azospirillum formosense, Azospirillum halopraeferans, Azospirillum irakense, Azospirillum largimobile, Azospirillum lipoferum, Azospirillum melinis, Azospirillum oryzae, Azospirillum picis, Azospirillum rugosum, Azospirillum thiophilum, Azospirillum zeae и их комбинаций.
В конкретном варианте осуществления один или несколько диазотрофов выбраны из группы, состоящей из Bradyrhizobium japonicum, Rhizobium leguminosarum, Rhizobium meliloti, Sinorhizobium meliloti, Azospirillum brasilense и их комбинаций. В другом варианте осуществления полезный микроорганизм представляет собой Bradyrhizobium japonicum. В другом варианте осуществления полезный микроорганизм представляет собой Rhizobium leguminosarum. В другом варианте осуществления полезный микроорганизм представляет собой Rhizobium meliloti. В другом варианте осуществления полезный микроорганизм представляет собой Sinorhizobium meliloti. В другом варианте осуществления полезный микроорганизм представляет собой Azospirillum brasilense.
В конкретном варианте осуществления один или несколько диазотрофов содержат один или несколько штаммов Rhizobium leguminosarum. В другом конкретном варианте осуществления штамм R. leguminosarum включает штамм SO12A-2-(IDAC 080305-01). В другом конкретном варианте осуществления один или несколько диазотрофов включают штамм Bradyrhizobium japonicum. В еще одном конкретном варианте осуществления штамм Bradyrhizobium japonicum включает штамм B. japonicum USDA 532C, B. japonicum USDA 110, B. japonicum USDA 123, B. japonicum USDA 127, B. japonicum USDA 129, B. japonicum NRRL B-50608, B. japonicum NRRL B-50609, B. japonicum NRRL B-50610, B. japonicum NRRL B-50611, B. japonicum NRRL B-50612, B. japonicum NRRL B-50592 (также депонированный под номером NRRL B-59571), B. japonicum NRRL B-50593 (также депонированный под номером NRRL B-59572), B. japonicum NRRL B-50586 (также депонированный под номером NRRL B-59565), B. japonicum NRRL B-50588 (также депонированный под номером NRRL B-59567), B. japonicum NRRL B-50587 (также депонированный под номером NRRL B-59566), B. japonicum NRRL B-50589 (также депонированный под номером NRRL B-59568), B. japonicum NRRL B-50591 (также депонированный под номером NRRL B-59570), B. japonicum NRRL B-50590 (также депонированный под номером NRRL B-59569), NRRL B-50594 (также депонированный под номером NRRL B-50493), B. japonicum NRRL B-50726, B. japonicum NRRL B-50727, B. japonicum NRRL B-50728, B. japonicum NRRL B-50729, B. japonicum NRRL B-50730 и их комбинации.
В еще более конкретном варианте осуществления один или несколько диазотрофов включают один или несколько штаммов R. leguminosarum, в том числе штамм SO12A-2-(IDAC 080305-01), B. japonicum USDA 532C, B. japonicum USDA 110, B. japonicum USDA 123, B. japonicum USDA 127, B. japonicum USDA 129, B. japonicum NRRL B-50608, B. japonicum NRRL B-50609, B. japonicum NRRL B-50610, B. japonicum NRRL B-50611, B. japonicum NRRL B-50612, B. japonicum NRRL B-50592 (также депонированный под номером NRRL B-59571), B. japonicum NRRL B-50593 (также депонированный под номером NRRL B-59572), B. japonicum NRRL B-50586 (также депонированный под номером NRRL B-59565), B. japonicum NRRL B-50588 (также депонированный под номером NRRL B-59567), B. japonicum NRRL B-50587 (также депонированный под номером NRRL B-59566), B. japonicum NRRL B-50589 (также депонированный под номером NRRL B-59568), B. japonicum NRRL B-50591 (также депонированный под номером NRRL B-59570), B. japonicum NRRL B-50590 (также депонированный под номером NRRL B-59569), NRRL B-50594 (также депонированный под номером NRRL B-50493), B. japonicum NRRL B-50726, B. japonicum NRRL B-50727, B. japonicum NRRL B-50728, B. japonicum NRRL B-50729, B. japonicum NRRL B-50730 и их комбинации.
В другом варианте осуществления один или несколько полезных микроорганизмов содержат один или несколько фосфат-солюбилизирующих микроорганизмов. Фосфат-солюбилизирующие микроорганизмы содержат грибные и бактериальные штаммы. В одном из вариантов осуществления фосфат-солюбилизирующим микроорганизмом являются микроорганизмы, выбранные из родов, включающих Acinetobacter spp., Arthrobacter spp, Arthrobotrys spp., Aspergillus spp., Azospirillum spp., Bacillus spp., Burkholderia spp., Candida spp., Chryseomonas spp., Enterobacter spp., Eupenicillium spp., Exiguobacterium spp., Klebsiella spp., Kluyvera spp., Microbacterium spp., Mucor spp., Paecilomyces spp., Paenibacillus spp., Penicillium spp., Pseudomonas spp., Serratia spp., Stenotrophomonas spp., Streptomyces spp., Streptosporangium spp., Swaminathania spp., Thiobacillus spp., Torulospora spp., Vibrio spp., Xanthobacter spp., Xanthomonas spp., и их комбинаций. В еще одном варианте осуществления фосфат-солюбилизирующий микроорганизм представляет собой микроорганизм, выбранный из группы, состоящей из Acinetobacter calcoaceticus, Arthrobotrys oligospora, Aspergillus niger, Azospirillum amazonense, Azospirillum brasilense, Azospirillum canadense, Azospirillum doebereinerae, Azospirillum formosense, Azospirillum halopraeferans, Azospirillum irakense, Azospirillum largimobile, Azospirillum lipoferum, Azospirillum melinis, Azospirillum oryzae, Azospirillum picis, Azospirillum rugosum, Azospirillum thiophilum, Azospirillum zeae, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus atrophaeus, Bacillus circulans, Bacillus licheniformis, Bacillus subtilis, Burkholderia cepacia, Burkholderia vietnamiensis, Candida krissii, Chryseomonas luteola, Enterobacter aerogenes, Enterobacter asburiae, Enterobacter taylorae, Eupenicillium parvum, Kluyvera cryocrescens, Mucor ramosissimus, Paecilomyces hepialid, Paecilomyces marquandii, Paenibacillus macerans, Paenibacillus mucilaginosus, Penicillium bilaiae (ранее известный как Penicillium bilaii), Penicillium albidum, Penicillium aurantiogriseum, Penicillium chrysogenum, Penicillium citreonigrum, Penicillium citrinum, Penicillium digitatum, Penicillium frequentas, Penicillium fuscum, Penicillium gaestrivorus, Penicillium glabrum, Penicillium griseofulvum, Penicillium implicatum, Penicillium janthinellum, Penicillium lilacinum, Penicillium minioluteum, Penicillium montanense, Penicillium nigricans, Penicillium oxalicum, Penicillium pinetorum, Penicillium pinophilum, Penicillium purpurogenum, Penicillium radicans, Penicillium radicum, Penicillium raistrickii, Penicillium rugulosum, Penicillium simplicissimum, Penicillium solitum, Penicillium variabile, Penicillium velutinum, Penicillium viridicatum, Penicillium glaucum, Penicillium fussiporus и Penicillium expansum, Pseudomonas corrugate, Pseudomonas fluorescens, Pseudomonas lutea, Pseudomonas poae, Pseudomonas putida, Pseudomonas stutzeri, Pseudomonas trivialis, Serratia marcescens, Stenotrophomonas maltophilia, Swaminathania salitolerans, Thiobacillus ferrooxidans, Torulospora globosa, Vibrio proteolyticus, Xanthobacter agilis, Xanthomonas campestres и их комбинаций.
В конкретном варианте осуществления один или несколько фосфат-солюбилизирующих микроорганизмов представляют собой штамм гриба Penicillium. В другом варианте осуществления один или несколько видов Penicillium представляют собой P. bilaiae, P. gaestrivorus или их комбинации. В конкретном варианте осуществления штамм Penicillium включает P. bilaiae NRRL 50169, P. bilaiae ATCC 20851, P. bilaiae ATCC 22348, P. bilaiae ATCC 18309, P. bilaiae NRRL 50162 и их комбинации. В другом конкретном варианте осуществления штамм Penicillium включает штамм P. gaestrivorus NRRL 50170. В еще другом конкретном варианте осуществления штамм Penicillium включает P. bilaiae NRRL 50169, P. bilaiae ATCC 20851, P. bilaiae ATCC 22348, P. bilaiae ATCC 18309, P. bilaiae NRRL 50162, P. gaestrivorus NRRL 50170 и их комбинации.
В другом варианте осуществления полезный микроорганизм представляет собой одну или несколько микориз. В частности, одна или несколько микориз представляют собой эндомикоризу (также называемую везикулярно-арбускулярными микоризами, VAM, арбускулярными микоризами или AM), эктомикоризу или их комбинации.
В одном варианте осуществления одна или несколько микориз представляют собой эндомикоризу из отдела Glomeromycota и родов Glomus и Gigaspora. В еще одном варианте осуществления эндомикориза представляет собой штамм Glomus aggregatum, Glomus brasilianum, Glomus clarum, Glomus deserticola, Glomus etunicatum, Glomus fasciculatum, Glomus intraradices, Glomus monosporum или Glomus mosseae, Gigaspora margarita или их комбинацию.
В другом варианте осуществления одна или несколько микориз представляют собой эктомикоризу из отдела Basidiomycota, Ascomycota и Zygomycota. В еще одном варианте осуществления эктомикориза представляет собой штамм Laccaria bicolor, Laccaria laccata, Pisolithus tinctorius, Rhizopogon amylopogon, Rhizopogon fulvigleba, Rhizopogon luteolus, Rhizopogon villosuli, Scleroderma cepa, Scleroderma citrinum или их комбинацию.
В еще одном варианте осуществления одна или несколько микориз представляют собой эрикоидную микоризу, арбутоидную микоризу или монотропоидную микоризу. Арбускулярная и экто-микоризы образуют эрикоидную микоризу со многими растениями, принадлежащими к порядку Ericales, при этом некоторые представители Ericales образуют арбутоидную и монотропоидную микоризы. Все орхидеи на определенной стадии их жизненного цикла являются микогетеротрофами и образуют орхидные микоризы со множеством базидиальных грибов. В одном варианте осуществления микориза может представлять собой эрикоидную микоризу, предпочтительно из отдела Ascomycota, например, Hymenoscyphous ericae или Oidiodendron sp. В другом варианте осуществления микориза также может представлять собой арбутоидную микоризу, предпочтительно из отдела Basidiomycota. В еще одном варианте осуществления микориза может представлять собой монотропоидную микоризу, предпочтительно из отдела Basidiomycota. В еще одном варианте осуществления микориза может представлять собой орхидную микоризу, предпочтительно из рода Rhizoctonia.
В еще одном варианте осуществления один или несколько полезных микроорганизмов представляют собой микроорганизмы, способные проявлять фунгицидную активность (например, биофунгициды). Неограничивающие примеры биофунгицидов включают Ampelomyces quisqualis (например, AQ 10® от Intrachem Bio GmbH & Co. KG, Германия), Aspergillus flavus (например, AFLAGUARD® от Syngenta, Швейцария), Aureobasidium pullulans (например, BOTECTOR® от bio-ferm GmbH, Германия), Bacillus amyloliquefaciens FZB24 (например, изоляты NRRL B-50304 и NRRL B-50349 TAEGRO® от Novozymes Biologicals, Inc., США), Bacillus subtilis (например, изолят NRRL B-21661 в RHAPSODY®, SERENADE® MAX и SERENADE® ASO от Bayer CropScience, Gustafson), Bacillus pumilus (например, изолят NRRL B-50349 от Bayer CropScience, Gustafson), Bacillus amyloliquefaciens TrigoCor (также известный как ʺTrigoCor 1448ʺ; например, изолят Embrapa № доступа в Trigo 144/88.4Lev, № доступа в Cornell Pma007BR-97 и № доступа в ATCC 202152, от Cornell University, США), Candida oleophila I-82 (например, ASPIRE® от Ecogen Inc., США), Candida saitoana (например, BIOCURE® (в смеси с лизоцимом) и BIOCOAT® от Micro Flo Company, США (BASF SE) и Arysta), хитозан (например, ARMOUR-ZEN от BotriZen Ltd., Новая Зеландия), Chromobacterium subtsugae (например, изолят NRRL B-30655 от Министерства сельского хозяйства США, США), Clonostachys rosea f. catenulata, также называемый Gliocladium catenulatum (например, изолят J1446: PRESTOP® от Verdera, Финляндия), Coniothyrium minitans (например, CONTANS® от Prophyta, Германия), Cryphonectria parasitica (например, Endothia parasitica от CNICM, Франция), Cryptococcus albidus (например, YIELD PLUS® от Anchor Bio-Technologies, Южная Африка), Fusarium oxysporum (например, BIOFOX® от S.I.A.P.A., Италия, FUSACLEAN® от Natural Plant Protection, Франция), Metschnikowia fructicola (например, SHEMER® от Agrogreen, Израиль), Microdochium dimerum (например, ANTIBOT® от Agrauxine, Франция), Paecilomyces fumosoroseus FE991 (в NOFLY® от FuturEco BioScience S.L., Барселона, Испания), Phlebiopsis gigantea (например, ROTSOP® от Verdera, Финляндия), Pseudozyma flocculosa (например, SPORODEX® от Plant Products Co. Ltd., Канада), Pythium oligandrum DV74 (например, POLYVERSUM® от Remeslo SSRO, Biopreparaty, Чехия), Reynoutria sachlinensis (например, REGALIA® от Marrone BioInnovations, США), Talaromyces flavus V117b (например, PROTUS® от Prophyta, Германия), Trichoderma asperellum SKT-1 (например, ECO-HOPE® от Kumiai Chemical Industry Co., Ltd., Япония), T. atroviride LC52 (например, SENTINEL® от Agrimm Technologies Ltd, Новая Зеландия), T. harzianum T-22 (например, PLANTSHIELD® der Firma BioWorks Inc., США), T. harzianum TH 35 (например, ROOT PRO® от Mycontrol Ltd., Израиль), T. harzianum T-39 (например, TRICHODEX® и TRICHODERMA 2000® от Mycontrol Ltd., Israel and Makhteshim Ltd., Израиль), T. harzianum и T. viride (например, TRICHOPEL от Agrimm Technologies Ltd, Новая Зеландия), T. harzianum ICC012 и T. viride ICC080 (например, REMEDIER® WP от Isagro Ricerca, Италия), T. polysporum и T. harzianum (например, BINAB® от BINAB Bio-Innovation AB, Швеция), T. stromaticum (например, TRICOVAB® от C.E.P.L.A.C., Бразилия), T. virens GL-21 (например, SOILGARD® от Certis LLC, США), T. viride (например, TRIECO® от Ecosense Labs. (Индия) Pvt. Ltd., Indien, BIO-CURE® F от T. Stanes & Co. Ltd., Индия), T. viride TV1 (например, TV1 T. viride от Agribiotec srl, Италия), Streptomyces lydicus WYEC 108 (например, изолят ATCC 55445 в ACTINOVATE®, ACTINOVATE AG®, ACTINOVATE STP®, ACTINO-IRON®, ACTINOVATE L&G® и ACTINOGROW® от Idaho Research Foundation, США), Streptomyces violaceusniger WYEC 108 (например, изолят ATCC 55660 в DE-THATCH-9®, DECOMP-9® и THATCH CONTROL® от Idaho Research Foundation, США), Streptomyces WYE 53 (например, изолят ATCC 55750 в DE-THATCH-9®, DECOMP-9® и THATCH CONTROL® от Idaho Research Foundation, США), а также Ulocladium oudemansii HRU3 (например, BOTRY-ZEN® от Botry-Zen Ltd, Новая Зеландия).
Сигнальная(ые) молекула(ы) растений
По меньшей мере в одном варианте осуществления биопестициды (т.е. описанные в настоящем документе композиции) могут необязательно содержать одну или несколько сигнальных молекул растений. Как альтернатива, одна или несколько дополнительных сигнальных молекул растений можно применять либо одновременно, либо последовательно с биопестицидами, раскрытыми в настоящем документе. В одном варианте осуществления биопестициды (т.е. описанные в настоящем документе композиции) могут включать одну или несколько сигнальных молекул растений. В одном варианте осуществления одна или несколько сигнальных молекул растений представляют собой один или несколько LCO. В другом варианте осуществления одна или несколько сигнальных молекул растений представляют собой один или несколько CO. В еще одном варианте осуществления одна или несколько сигнальных молекул растений представляют собой одно или несколько хитиновых соединений. В еще одном варианте осуществления одна или несколько сигнальных молекул растений представляют собой один или несколько нефлавоноидных индукторов nod-генов (например, жасмоновую кислоту, линолевую кислоту, линоленовую кислоту и их производные). В еще одном варианте осуществления одна или несколько сигнальных молекул растений представляют собой один или несколько каррикинов или их производные. В еще одном варианте осуществления одна или несколько сигнальных молекул растений представляют собой один или несколько LCO, один или несколько CO, одно или несколько хитиновых соединений, один или несколько нефлавоноидных индукторов nod-генов и их производные, один или несколько каррикинов и их производные или любую их комбинацию в качестве сигнальных молекул.
LCO
Соединения липохитоолигосахаридов (LCO), также известные из уровня техники как симбиотические Nod-сигналы или Nod-факторы, состоят из олигосахаридной основной цепи остатков N-ацетил-D-глюкозамина ("GIcNAc"), связанных β-l,4-связями с N-связанной ацильной цепью жирной кислоты, конденсированной по невосстанавливающему концу. LCO отличаются количеством остатков GIcNAc в основной цепи, длиной и степенью насыщения ацильной цепи жирной кислоты и замещениями в восстанавливающих и невосстанавливающих остатках сахара. Подразумевается, что LCO включают все LCO, а также их изомеры, соли и сольваты. Пример LCO представлен ниже формулой I:
в которой:
G представляет собой гексозамин, который может быть замещен, например, ацетильной группой по азоту, сульфатной группой, ацетильной группой и/или эфирной группой по кислороду,
R1, R2, R3, R5, R6 и R7, которые могут быть идентичными или различными, представляют собой H, CH3 CO--, CxHyCO--, где x представляет собой целое число от 0 до 17, а y представляет собой целое число от 1 до 35, либо любую другую ацильную группу, например, такую как карбамил,
R4 представляет собой алифатическую цепь с одной, двумя, тремя и четырьмя ненасыщенными связями, содержащую по меньшей мере 12 атомов углерода, а n представляет собой целое число от 1 до 4.
LCO могут быть получены (выделены и/или очищены) из бактерий, таких как Rhizobia, например, Rhizobium spp., Bradyrhizobium spp., Sinorhizobium spp. и Azorhizobium spp. Структура LCO является характерной для каждого такого вида бактерий, и каждый штамм может продуцировать несколько LCO с различными структурами. Например, конкретные LCO из S. meliloti также описаны в патенте США № 5549718 и характеризуются формулой II:
в которой R представляет собой Н или CH3CO--, а n равно 2 или 3.
Еще более специфические LCO включают NodRM, NodRM-1, NodRM-3. При ацетилировании (R=CH3CO--) они превращаются в AcNodRM-1 и AcNodRM-3, соответственно (патент США № 5545718).
LCO из Bradyrhizobium japonicum описаны в патентах США №№ 5175149 и 5321011. В широком смысле они представляют собой пентасахаридные фитогормоны, содержащие метилфукозу. Описан целый ряд этих LCO, полученных из B. japonicum: BjNod-V (C18:1); BjNod-V (AC, C18:1), BjNod-V (C16:1) и BjNod-V (AC, C16:0), при этом "V" указывает на присутствие пяти N-ацетилглюкозаминов; "Ас" означает ацетилирование; число после "C" указывает число атомов углерода в боковой цепи жирной кислоты, а число после ":" указывает на количество двойных связей.
LCO, применяемые в композициях по настоящему изобретению, можно получать (т.е. выделять и/или очищать) из штаммов бактерий, которые продуцируют LCO, таких как штаммы Azorhizobium, Bradyrhizobium (в том числе B. japonicum), Mesorhizobium, Rhizobium (в том числе R. leguminosarum), Sinorhizobium (в том числе S. meliloti), и штаммов бактерий, сконструированных с помощью генной инженерии так, что они продуцируют LCO.
Также настоящее изобретение охватывает композиции, в которых применяют LCO, полученные (т.е. выделенные и/или очищенные) из микоризных грибов, таких как грибы из группы Glomerocycota, например, Glomus intraradicus. Структуры типичных LCO, полученных из этих грибов, описаны в патентных документах WO 2010/049751 и WO 2010/049751 (описанные в этих документах LCO также называются "Myc-факторами").
Кроме того, настоящее изобретение охватывает композиции, в которых применяют синтетические соединения LCO, такие как описанные в WO 2005/063784, и рекомбинантные LCO, полученные посредством генной инженерии. Базовая структура встречающихся в природе LCO может содержать модификации или замены во встречающихся в природе LCO, такие как описанные в Spaink, Crit. Rev. Plant Sci. 54:257-288 (2000) и D'Haeze, et al., Glycobiology 12:79R-105R (2002). Молекулы-предшественники олигосахаридов (CO, которые описаны ниже, также являются пригодными в качестве сигнальных молекул растений по настоящему изобретению) для создания LCO также могут быть синтезированы организмами, сконструированными с помощью генной инженерии, например, как в Samain, et al., Carb. Res. 302:35-42 (1997); Samain, et al., J. Biotechnol. 72:33-47 (1999).
Можно применять LCO с различной степенью чистоты, и их можно применять отдельно или в виде культуры LCO-продуцирующих бактерий или грибов. Способы обеспечения практически чистых LCO предусматривают просто удаление микробных клеток из смеси LCO и микроба или продолжение выделения и очистки молекул LCO посредством разделения фаз LCO-растворителя с последующей HPLC, например, как описано в патенте США № 5549718. Очистку можно улучшать с помощью повторных HPLC, а очищенные молекулы LCO можно высушивать сублимацией для длительного хранения.
CO
Хитоолигосахариды (CO) известны из уровня техники как структуры на основе N-ацетилглюкозаминов, связанных β-1-4-связями, определенные как олигомеры хитина, а также как N-ацетилхитоолигосахариды. CO имеют уникальные и различные фрагменты боковой цепи, которые отличают их от молекул хитина [(C8H13NO5)n, № согласно CAS 1398-61-4] и молекул хитозана [(C5H11NO4)n, № согласно CAS 9012-76-4]. Типичные литературные источники, в которых описаны структура и получение CO, следующие: Van der Holst, et al., Current Opinion in Structural Biology, 11:608-616 (2001); Robina, et al., Tetrahedron 58:521-530 (2002); Hanel, et al., Planta 232:787-806 (2010); Rouge, et al. Chapter 27, "The Molecular Immunology of Complex Carbohydrates" in Advances in Experimental Medicine and Biology, Springer Science; Wan, et al., Plant Cell 21:1053-69 (2009); PCT/F100/00803 (9/21/2000); а также Demont-Caulet, et al., Plant Physiol. 120(1):83-92 (1999). CO могут быть синтетическими или рекомбинантными. Способы получения рекомбинантных CO известны из уровня техники. См., например, Samain, et al. (выше.); Cottaz, et al., Meth. Eng. 7(4):311-7 (2005) и Samain, et al., J. Biotechnol. 72:33-47 (1999). Подразумевается, что СО включают их изомеры, соли и сольваты.
Хитиновые соединения
Хитины и хитозаны, которые являются основными компонентами клеточных стенок грибов и экзоскелетов насекомых и ракообразных, также состоят из остатков GIcNAc. Хитиновые соединения включают хитин (IUPAC: N-[5-[[3-ацетиламино-4,5-дигидрокси-6-(гидроксиметил)оксан-2-ил]метоксиметил]-2-[[5-ацетиламино-4,6-дигидрокси-2-(гидроксиметил)оксан-3-ил]метоксиметил]-4-гидрокси-6-(гидроксиметил)оксан-3-ис]этанамид), хитозан (IUPAC: 5-амино-6-[5-амино-6-[5-амино-4,6-дигидрокси-2(гидроксиметил)оксан-3-ил]окси-4-гидрокси-2-(гидроксиметил)оксан-3-ил]окси-2(гидроксиметил)оксан-3,4-диол) и их изомеры, соли и сольваты.
Эти соединения можно получать коммерчески, например от Sigma-Aldrich, или получать из насекомых, панцирей ракообразных или клеточных стенок грибов. Способы получения хитина и хитозана известны из уровня техники и описаны, например, в патенте США № 4536207 (получение из панцирей ракообразных), Pochanavanich, et al., Lett. Appl. Microbiol. 35: 17-21 (2002) (получение из клеточных стенок грибов) и в патенте США № 5965545 (получение из панцирей крабов и гидролиз коммерческого хитозана). Можно получать деацетилированные хитины и хитозаны, степень деацетилирования которых варьирует от менее 35% до более 90%, и при этом охватывается широкий спектр молекулярных масс, например, олигомеры хитозана с низкой молекулярной массой менее 15 кДа и олигомеры хитина 0,5-2 кДа; хитозан "практической степени чистоты" с молекулярной массой приблизительно 15 кДа и хитозан с высокой молекулярной массой до 70 кДа. Композиции на основе хитина и хитозана, составленные для обработки семян, также являются коммерчески доступными. Коммерческие продукты включают, например, ELEXA® (Plant Defense Boosters, Inc.) и BEYOND™ (Agrihouse, Inc.).
Флавоноиды
Флавоноиды представляют собой фенольные соединения, характеризующиеся общей структурой из двух ароматических колец, соединенных трехуглеродным мостиком. Флавоноиды продуцируются растениями и имеют множество функций, например, в качестве полезных сигнальных молекул и в качестве защиты от насекомых, животных, грибов и бактерий. Классы флавоноидов содержат известные из уровня техники. См., Jain, et al., J. Plant Biochem. & Biotechnol. 11:1-10 (2002); Shaw, et al., Environmental Microbiol. 11:1867-80 (2006). Флавоноидные соединения являются коммерчески доступными, например, от Novozymes BioAg, Саскачеван, Канада; Natland International Corp., Ресерч Траенгл Парк, Северная Каролина; MP Biomedicals, Ирвин, Калифорния; LC Laboratories, Вобурн, Массачусетс. Флавоноидные соединения могут быть выделены из растений или семян, например, как описано в патентах США №5702752, 5990291 и 6146668. Флавоноидные соединения также могут продуцироваться организмами, сконструированными с помощью генной инженерии, такими как дрожжи, как описано в Ralston, et al., Plant Physiology 137:1375-88 (2005). Подразумевается, что флавоноидные соединения включают все флавоноидные соединения, а также их изомеры, соли и сольваты.
Один или несколько флавоноидов могут представлять собой природный флавоноид (т.е. полученный не синтетическим путем), синтетический флавоноид (например, химически синтезированный флавоноид) или их комбинацию. В конкретном варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции содержат флаванол, флавон, антоцианидин, изофлавоноид, неофлавоноид и их комбинации, включая все их изомерные, сольватные, гидратные, полиморфные, кристаллические формы, некристаллические формы и вариации солей.
В варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции могут содержать один или несколько флаванолов. В еще одном варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции могут содержать один или несколько флаванолов, выбранных из группы, состоящей из флаван-3-олов (например, катехина (C), галлокатехина (GC), катехин-3-галлата (Cg), галлокатехин-3-галлата (GCg), эпикатехинов (EC), эпигаллокатехинов (EGC) эпикатехин-3-галлата (ECg), эпигаллокатехин-3-галлата (EGCg) и т.д.), флаван-4-олов, флаван-3,4-диолов (например, лейкоантоцианидина), проантоцианидинов (например, включая димеры, тример, олигомеры или полимеры флаванолов) и их комбинаций. В еще другом варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции могут содержать один или несколько флаванолов, выбранных из группы, состоящей из катехина (C), галлокатехина (GC), катехин-3-галлата (Cg), галлокатехин-3-галлата (GCg), эпикатехинов (EC), эпигаллокатехина (EGC), эпикатехин-3-галлата (ECg), эпигаллокатехин-3-галлата (EGCg), флаван-4-ола, лейкоантоцианидина и их димеров, тримеров, олигомеров или полимеров.
В другом варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции могут содержать один или несколько флавонов. В еще одном варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции могут содержать один или несколько флавонов, выбранных из группы, состоящей из флавонов (например, лютеолина, апигенина, тангеритина и т.д.), флавонолов (например, кверцетина, кверцитрина, рутина, кемпферола, кемпферитрина, астрагалина, софорафлавонолозида, мирицетина, физетина, изорамнетина, пахиподола, рамназина и т.д.), флаванoнов (например, гесперетина, гесперидина, нарингенина, эриодиктиола, гомоэриодиктиола и т.д.) и флаванoнолов (например, дигидрокверцетина, дигидрокемпферола и т.д.). В еще другом варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции могут содержать один или несколько флавонов, выбранных из группы, состоящей из лютеолина, апигенина, тангеритина, кверцетина, кверцитрина, рутина, кемпферола, кемпферитрина, астрагалина, софорафлавонолозида, мирицетина, физетина, изорамнетина, пахиподола, рамназина, гесперетина, гесперидина, нарингенина, эриодиктиола, гомоэриодиктиола, дигидрокверцетина, дигидрокемпферола и их комбинаций.
В еще другом варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции могут содержать один или несколько антоцианидинов. В еще другом варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции могут содержать один или несколько антоцианидинов, выбранных из группы, состоящей из цианидинов, дельфинидинов, мальвидинов, пеларгонидинов, пеонидинов, петунидинов и их комбинаций.
В другом варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции могут содержать один или несколько изофлавоноидов. В еще одном варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции содержат один или несколько изофлавоноидов, выбранных из группы, состоящей из фитоэстрогенов, изофлавонов (например, генистеина, даидзеина, глицитеина и т.д.) и изофлаванов (например, эквола, лонхокапрана, лаксифлорана и т.д.), а также их комбинаций. В еще другом варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции могут содержать один или несколько изофлавоноидов, выбранных из группы, состоящей из генистеина, даидзеина, глицитеина, эквола, лонхокапрана, лаксифлорана и их комбинаций.
В другом варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции могут содержать один или несколько неофлавоноидов. В еще одном варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции могут содержать один или несколько неофлавоноидов, выбранных из группы, состоящей из неофлавонов (например, калофиллолида), неофлавенов (например, далбергихромена), коутареагенинов, далбергинов, ниветинов и их комбинаций. В еще другом варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции могут содержать один или несколько неофлавоноидов, выбранных из группы, состоящей из калофиллолида, далбергихромена, коутареагенина, далбергина, ниветина и их комбинаций.
В другом варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции могут содержать один или несколько флавоноидов, выбранных из группы, состоящей из катехина (C), галлокатехина (GC), катехин-3-галлата (Cg), галлокатехин-3-галлата (GCg), эпикатехинов (EC), эпигаллокатехина (EGC), эпикатехин-3-галлата (ECg), эпигаллокатехин-3-галлата (EGCg), флаван-4-ола, лейкоантоцианидина, проантоцианидинов, лютеолина, апигенина, тангеритина, кверцетина, кверцитрина, рутина, кемпферола, кемпферитрина, астрагалина, софорафлавонолозида, мирицетина, физетина, изорамнетина, пахиподола, рамназина, гесперетина, гесперидина, нарингенина, эриодиктиола, гомоэриодиктиола, дигидрокверцетина, дигидрокемпферола, цианидинов, дельфинидинов, мальвидинов, пеларгонидинов, пеонидинов, петунидинов, генистеина, даидзеина, глицитеина, эквола, лонхокарпана, лаксифлорана, калофиллолида, далбергихромена, коутареагенина, далбергина, ниветина и их комбинаций. В еще одном варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции могут содержать один или несколько флавоноидов, выбранных из группы, состоящей из гесперетина, гесперидина, нарингенина, генистеина, даидзеина и их комбинаций. В конкретном варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции могут содержать флавоноид гесперетин. В другом конкретном варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции могут содержать флавоноид гесперидин. В еще одном конкретном варианте осуществления описанная в настоящем документе композиция может содержать флавоноид нарингенин. В еще другом конкретном варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции могут содержать флавоноид генистеин. В еще другом конкретном варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции могут содержать флавоноид даидзеин.
Нефлавоноидный(ые) индуктор(ы) Nod-генов
Жасмоновую кислоту (JA, [1R-[1α,2β(Z)]]-3-оксо-2-(пентенил)циклопентануксусную кислоту) и ее производные, линолевую кислоту ((Z,Z)-9,12-октадекадиеновую кислоту) и ее производные, а также линоленовую кислоту ((Z,Z,Z)-9,12,15-октадекатриеновую кислоту) и ее производные также можно применять в композициях, описанных в настоящем документе. Подразумевается, что нефлавоноидные индукторы nod-генов включают не только описанные в настоящем документе нефлавоноидные индукторы nod-генов, но также их изомеры, соли и сольваты.
Жасмоновая кислота и ее метиловый сложный эфир, метилжасмонат (MeJA), в совокупности известные как жасмонаты, представляют собой октадеканоидные соединения, которые в естественных условиях встречаются у растений. Жасмоновая кислота продуцируется корнями проростков пшеницы и грибными микроорганизмами, такими как Botryodiplodia theobromae и Gibbrella fujikuroi, дрожжами (Saccharomyces cerevisiae), а также патогенными и непатогенными штаммами Escherichia coli. Линолевая кислота и линоленовая кислота образуются в ходе биосинтеза жасмоновой кислоты. Как сообщается, жасмонаты, линолевая кислота и линоленовая кислота (и их производные) являются индукторами экспрессии nod-гена или продуцирования LCO ризобактериями. См., например, Mabood, Fazli, Jasmonates induce the expression of nod genes in Bradyrhizobium japonicum, May 17, 2001 и Mabood, Fazli, "Linoleic and linolenic acid induce the expression of nod genes in Bradyrhizobium japonicum," USDA 3, May 17, 2001.
Полезные производные линолевой кислоты, линоленовой кислоты и жасмоновой кислоты, которые можно применять в композициях в соответствии с настоящим изобретением, содержат сложные эфиры, амиды, гликозиды и соли. Типичные сложные эфиры представляют собой соединения, в которых карбоксильная группа линолевой кислоты, линоленовой кислоты или жасмоновой кислоты была заменена группой --COR, где R представляет собой группу --OR1, в которой R1 представляет собой алкильную группу, например, C1-C8 неразветвленную или разветвленную алкильную группу, например, метильную, этильную или пропильную группу; алкенильную группу, например, C2-C8 неразветвленную или разветвленную алкенильную группу; алкинильную группу, например, C2-C8 неразветвленную или разветвленную алкинильную группу; арильную группу, содержащую, например, 6-10 атомов углерода; или гетероарильную группу, содержащую, например, 4-9 атомов углерода, где гетероатомы в гетероарильной группе могут представлять собой, например, N, O, P или S. Типичные амиды представляют собой соединения, в которых карбоксильная группа линолевой кислоты, линоленовой кислоты или жасмоновой кислоты была заменена группой --COR, где R представляет собой группу NR2R3, в которой R2 и R3 независимо представляют собой водород; алкильную группу, например, C1-C8 неразветвленную или разветвленную алкильную группу, например, метильную, этильную или пропильную группу; алкенильную группу, например, C2-C8 неразветвленную или разветвленную алкенильную группу; алкинильную группу, например, C2-C8 неразветвленную или разветвленную алкинильную группу; арильную группу, содержащую, например, 6-10 атомов углерода; или гетероарильную группу, содержащую, например, 4-9 атомов углерода, где гетероатомы в гетероарильной группе могут представлять собой, например, N, O, P или S. Сложные эфиры можно получать с помощью известных способов, например, катализируемого кислотой нуклеофильного присоединения, где осуществляют реакцию карбоновой кислоты со спиртом в присутствии каталитического количества минеральной кислоты. Амиды также можно получать с помощью известных способов, как, например, с помощью осуществления реакции карбоновой кислоты с соответствующим амином в присутствии связующего средства, такого как дициклогексилкарбодиимид (DCC), при нейтральных условиях. Подходящие соли линолевой кислоты, линоленовой кислоты и жасмоновой кислоты включают, например, соли присоединения основания. Основания, которые можно применять в качестве реагентов для получения метаболически приемлемых основных солей этих соединений, включают основания, полученные из таких катионов, как катионы щелочных металлов (например, калия и натрия) и катионы щелочно-земельных металлов (например, кальция и магния). Эти соли можно легко получать путем смешивания раствора линолевой кислоты, линоленовой кислоты или жасмоновой кислоты с раствором основания. Эту соль можно осаждать из раствора и собирать с помощью фильтрации, либо ее можно извлекать с помощью других способов, например, с помощью выпаривания растворителя.
Каррикин(ы)
Каррикины представляют собой винилогические 4H-пироны, например, 2Н-фуро[2,3-с]пиран-2-оны, в том числе их производные и аналоги. Подразумевается, что каррикины включают их изомеры, соли и сольваты. Примеры этих соединений представлены следующей структурой:
где Z представляет собой O, S или NR5; каждый из R1, R2, R3 и R4 независимо представляет собой H, алкил, алкенил, алкинил, фенил, бензил, гидрокси, гидроксиалкил, алкокси, фенилокси, бензилокси, CN, COR6, COOR=, галоген, NR6R7 или NO2; и каждый из R5, R6 и R7 независимо представляет собой H, алкил, или алкенил, или их биологически приемлемую соль. Примеры биологически приемлемых солей этих соединений могут включать соли присоединения кислоты, образованные биологически приемлемыми кислотами, примеры которых включают гидрохлорид, гидробромид, сульфат или бисульфат, фосфат или гидрофосфат, ацетат, бензоат, сукцинат, фумарат, малеат, лактат, цитрат, тартрат, глюконат; метансульфонат, бензолсульфонат и п-толуолсульфоновую кислоту. Дополнительные биологически приемлемые соли металлов могут содержать соли щелочных металлов, полученные с основаниями, примеры которых включают натриевые и калиевые соли. Примеры соединений, охваченных данной структурой и которые могут быть подходящими для применения по настоящему изобретению, включают следующие: 3-метил-2Н-фуро[2,3-с]пиран-2-он (где R1=CH3, R2, R3, R4=H), 2Н-фуро[2,3-с]пиран-2-он (где R1, R2, R3, R4=H), 7-метил-2Н-фуро[2,3-с]пиран-2-он (где R1, R2, R4=H, R3=CH3), 5-метил-2Н-фуро[2,3-с]пиран-2-он (где R1, R2, R3=H, R4=CH3), 3,7-диметил-2Н-фуро[2,3-с]пиран-2-он (где R1, R3=CH3, R2, R4=H), 3,5-диметил-2Н-фуро[2,3-с]пиран-2-он (где R1, R4=CH3, R2, R3=H), 3,5,7-триметил-2H-фуро[2,3-с]пиран-2-он (где R1, R3, R4=CH3, R2=H), 5-метоксиметил-3-метил-2Н-фуро[2,3-с]пиран-2-он (где R1=CH3, R2, R3=H, R4=CH2OCH3), 4-бром-3,7-диметил-2Н-фуро[2,3-с]пиран-2-он (где R1, R3=CH3, R2=Br, R4=H), 3-метилфуро[2,3-с]пиридин-2(3Н)-он (где Z=NH, R1=CH3, R2, R3, R4=H), 3,6-диметилфуро[2,3-с]пиридин-2(6H)-он (где Z=N--CH3, R1=CH3, R2, R3, R4=H). См., патент США № 7576213. Эти молекулы также известны как каррикины. См., Halford, "Smoke Signals" в Chem. Eng. News (12 апреля 2010 г.), на страницах 37-38 (где сообщается, что каррикины или бутенолиды, которые содержатся в дыме, действуют как стимуляторы роста и способствуют прорастанию семян после лесного пожара и могут активировать находящиеся на хранении семена, например, кукурузы, разновидностей томата, латука и разновидностей лука). Эти молекулы являются объектом патента США № 7576213.
Метаболиты
По меньшей мере в одном варианте осуществления биопестициды (т.е. описанные в настоящем документе композиции) могут необязательно содержать один или несколько метаболитов. Как альтернатива, один или несколько метаболитов можно применять либо одновременно, либо последовательно с биопестицидами, раскрытыми в настоящем документе. В одном варианте осуществления один или несколько метаболитов можно применять для усиления активности пестицидов на основе грибов по настоящему документу. Неограничивающие примеры метаболитов, которые можно применять в раскрытых в настоящем документе композициях, описаны в Anke, H. ʺInsecticidal and Nematicidal Metabolites from Fungi. Industrial Applications, 2nd ed. The Mycota Xʺ (M. Hofrichter, ed.), (2010): Springer-Verlag Berlin Heidelberg, 151-163. В одном варианте осуществления неограничивающие примеры метаболитов включают алкалоиды, пептиды, циклические пептиды, циклические депсипептиды, производные хинолона, нодулиспоровые кислоты, метаболиты парагерквамида, нафуредин и их комбинации.
Питательное(ые) вещество(а)
По меньшей мере в одном варианте осуществления биопестициды (т.е. описанные в настоящем документе композиции) могут необязательно содержать одно или несколько питательных веществ. Как альтернатива, одно или несколько питательных веществ можно применять либо одновременно, либо последовательно с биопестицидами, раскрытыми в настоящем документе. Неограничивающие примеры питательных веществ для применения в описанных в настоящем документе биопестицидах включают витамины (например, витамин A, витамины группы B (т.е., витамин B1, витамин B2, витамин B3, витамин B5, витамин B6, витамин B7, витамин B8, витамин B9, витамин B12, холин) витамин C, витамин D, витамин E, витамин K, каротиноиды (α-каротин, β-каротин, криптоксантин, лютеин, ликопен, зеаксантин и т.д.), макроэлементы (например, фосфор, кальций, магний, калий, натрий, железо и т.д.), микроэлементы (например, бор, кобальт, хлор, хром, медь, фтор, йод, железо, марганец, молибден, селен, цинк и т.д.), органические кислоты (например, уксусную кислоту, лимонную кислоту, молочную кислоту, яблочную кислоту, таурин и т.д.) и их комбинации. В предпочтительном варианте осуществления биопестициды могут содержать фосфор, бор, хлор, медь, железо, марганец, молибден, цинк или их комбинации.
В некоторых вариантах осуществления, где описанные в настоящем документе биопестициды могут содержать фосфор, предполагается, что может предусматриваться любой подходящий источник фосфора. В одном варианте осуществления фосфор может быть получен из источника. В другом варианте осуществления подходящие источники фосфора включают в себя источники фосфора, способные подвергаться солюбилизации под воздействием одного или нескольких микроорганизмов (например, Penicillium bilaiae и т.д., а также других описанных в настоящем документе фосфатсолюбилизирующих штаммов и т.д.).
В одном варианте осуществления фосфор может быть получен из источника фосфорита. В другом варианте осуществления фосфор может быть получен из удобрений, содержащих один или несколько источников фосфора. Коммерчески доступные готовые фосфатные удобрения подразделяются на множество видов. Некоторые обычные виды представляют собой виды, содержащие фосфорит, моноаммонийфосфат, диаммонийфосфат, монокальцийфосфат, суперфосфат, тройной суперфосфат и/или полифосфат аммония. Все эти удобрения получают путем химической обработки нерастворимых природных фосфоритов на оборудовании для производства удобрений в промышленном масштабе, и этот продукт является дорогостоящим. Посредством настоящего изобретения возможно уменьшение количества этих вносимых в почву удобрений, при сохранении такого же количества поглощаемого из почвы фосфора.
В еще одном варианте осуществления фосфор может быть получен из органического источника фосфора. В другом предпочтительном варианте осуществления источник фосфора может включать органическое удобрение. Органическим удобрением называют почвоулучшитель, полученный из природных источников, который обеспечивает по меньшей мере минимальные процентные содержания азота, фосфата и карбоната калия. Неограничивающие примеры органических удобрений содержат растительные отходы и продукты жизнедеятельности животных, порошки горных пород, морские водоросли, инокулянты и кондиционеры. Эти удобрения зачастую являются доступными в садовых центрах и через садоводческие компании-поставщики. В частности, органический источник фосфора доступен в виде костной муки, мясной муки, навоза, компоста, осадка сточных вод или гуано либо их комбинаций.
В еще одном варианте осуществления фосфор может быть получен из комбинации источников фосфора, включающих без ограничения фосфорит, удобрения, содержащие один или несколько источников фосфора (например, моноаммонийфосфат, диаммонийфосфат, монокальцийфосфат, суперфосфат, тройной супер фосфат, полифосфат аммония и т.д.), один или несколько органических источников фосфора и их комбинации.
Биостимулятор(ы)
По меньшей мере в одном варианте осуществления биопестициды (т.е. описанные в настоящем документе композиции) могут необязательно содержать один или несколько биостимуляторов. Как альтернатива, один или несколько биостимуляторов можно применять либо одновременно, либо последовательно с биопестицидами, раскрытыми в настоящем документе. Биостимуляторы могут улучшить метаболические или физиологические процессы, такие как дыхание, фотосинтез, поглощение нуклеиновой кислоты, поглощение ионов, доставку питательных веществ или их комбинации. Неограничивающие примеры биостимуляторов содержат экстракты морских водорослей (например, Ascophyllum nodosum), гуминовые кислоты (например, гумат калия), фульвокислоты, мио-инозитол, глицин и их комбинации. В другом варианте осуществления композиции содержат экстракты морских водорослей, гуминовые кислоты, фульвокислоты, мио-инозитол, глицин и их комбинации.
Гербицид(ы)
По меньшей мере в одном варианте осуществления биопестициды (т.е. описанные в настоящем документе композиции) могут необязательно содержать один или несколько гербицидов. Как альтернатива, один или несколько гербицидов можно применять либо одновременно, либо последовательно с биопестицидами, раскрытыми в настоящем документе. В конкретном варианте осуществления гербицид может быть довсходовым гербицидом, послевсходовым гербицидом или их комбинацией.
Подходящие гербициды содержат химические гербициды, природные гербициды (например, биогербициды, органические гербициды и т.д.) или их комбинации. Неограничивающие примеры подходящих гербицидов включают бентазон, ацифлуорфен, хлоримурон, лактофен, кломазон, флуазифоп, глюфосинат, глифосат, сетоксидим, имазетапир, имазамокс, фомесаф, флумиклорак, имазаквин и клетодим. Коммерческие продукты, содержащие каждое из этих соединений, являются легкодоступными. Концентрация гербицида в композиции, как правило, будет соответствовать обозначенной норме применения для конкретного гербицида.
Фунгицид(ы)
По меньшей мере в одном варианте осуществления биопестициды (т.е. описанные в настоящем документе композиции) могут необязательно содержать один или несколько фунгицидов. Как альтернатива, один или несколько фунгицидов можно применять либо одновременно, либо последовательно с биопестицидами, раскрытыми в настоящем документе. Фунгициды, применимые в описанных в настоящем документе композициях, могут представлять собой биологические фунгициды, химические фунгициды или их комбинации. Фунгициды можно отбирать таким образом, чтобы они обеспечивали эффективный контроль широкого спектра фитопатогенных грибов, в том числе передающихся через почву грибов, происходящих главным образом из классов Plasmodiophoromycetes, Peronosporomycetes (син. Oomycetes), Chytridiomycetes, Zygomycetes, Ascomycetes, Basidiomycetes и Deuteromycetes (син. Fungi imperfecti). Наиболее распространенные грибные патогены, на которые можно эффективно целенаправленно воздействовать, включают Pytophthora, Rhizoctonia, Fusarium, Pythium, Phomopsis или Selerotinia, а также Phakopsora и их комбинации.
Неограничивающие примеры биологических фунгицидов, которые могут быть подходящими для применения с биопестицидами, раскрытыми в настоящем документе, включают Ampelomyces quisqualis (например, AQ 10® от Intrachem Bio GmbH & Co. KG, Германия), Aspergillus flavus (например, AFLAGUARD® от Syngenta, Швейцария), Aureobasidium pullulans (например, BOTECTOR® от bio-ferm GmbH, Германия), Bacillus amyloliquefaciens FZB24 (например, изоляты NRRL B-50304 и NRRL B-50349 TAEGRO® от Novozymes Biologicals, Inc., США), Bacillus subtilis (например, изолят NRRL B-21661 в RHAPSODY®, SERENADE® MAX и SERENADE® ASO от Bayer CropScience, Gustafson), Bacillus pumilus (например, изолят NRRL B-50349 от Bayer CropScience, Gustafson), Bacillus amyloliquefaciens TrigoCor (также известный как ʺTrigoCor 1448ʺ; например, изолят Embrapa Trigo Accession № 144/88.4Lev, Cornell Accession № Pma007BR-97 и ATCC Accession № 202152 от Cornell University, США), Candida oleophila I-82 (например, ASPIRE® от Ecogen Inc., США), Candida saitoana (например, BIOCURE® (в смеси с лизоцимом) и BIOCOAT® от Micro Flo Company, США (BASF SE) и Arysta), Chitosan (например, ARMOUR-ZEN от BotriZen Ltd., Новая Зеландия), Chromobacterium subtsugae (например, изолят NRRL B-30655 от Министерства сельского хозяйства США), Clonostachys rosea f. catenulata, также именуемый Gliocladium catenulatum (например, изолят J1446: PRESTOP® от Verdera, Финляндия), Coniothyrium minitans (например, CONTANS® от Prophyta, Германия), Cryphonectria parasitica (например, Endothia parasitica от CNICM, Франция), Cryptococcus albidus (например, YIELD PLUS® от Anchor Bio-Technologies, Южная Африка), Fusarium oxysporum (например, BIOFOX® от S.I.A.P.A., Италия, FUSACLEAN® от Natural Plant Protection, Франция), Metschnikowia fructicola (например, SHEMER® от Agrogreen, Израиль), Microdochium dimerum (например, ANTIBOT® от Agrauxine, Франция), Paecilomyces fumosoroseus FE991 (в NOFLY® от FuturEco BioScience S.L., Барселона, Испания), Phlebiopsis gigantea (например, ROTSOP® от Verdera, Финляндия), Pseudozyma flocculosa (например, SPORODEX® от Plant Products Co. Ltd., Канада), Pythium oligandrum DV74 (например, POLYVERSUM® от Remeslo SSRO, Biopreparaty, Чехия), Reynoutria sachlinensis (например, REGALIA® от Marrone BioInnovations, США), Talaromyces flavus V117b (например, PROTUS® от Prophyta, Германия), Trichoderma asperellum SKT-1 (например, ECO-HOPE® от Kumiai Chemical Industry Co., Ltd., Япония), T. atroviride LC52 (например, SENTINEL® от Agrimm Technologies Ltd, Новая Зеландия), T. harzianum T-22 (например, PLANTSHIELD® der Firma BioWorks Inc., США), T. harzianum TH 35 (например, ROOT PRO® от Mycontrol Ltd., Израиль), T. harzianum T-39 (например, TRICHODEX® и TRICHODERMA 2000® от Mycontrol Ltd., Israel and Makhteshim Ltd., Израиль), T. harzianum и T. viride (например, TRICHOPEL от Agrimm Technologies Ltd, Новая Зеландия), T. harzianum ICC012 и T. viride ICC080 (например, REMEDIER® WP от Isagro Ricerca, Италия), T. polysporum и T. harzianum (например, BINAB® от BINAB Bio-Innovation AB, Швеция), T. stromaticum (например, TRICOVAB® от C.E.P.L.A.C., Бразилия), T. virens GL-21 (например, SOILGARD® от Certis LLC, США), T. viride (например, TRIECO® от Ecosense Labs. (Индия) Pvt. Ltd., Indien, BIO-CURE® F от T. Stanes & Co. Ltd., Индия), T. viride TV1 (например, TV1 T. viride от Agribiotec srl, Италия), Streptomyces lydicus WYEC 108 (например, изолят ATCC 55445 в ACTINOVATE®, ACTINOVATE AG®, ACTINOVATE STP®, ACTINO-IRON®, ACTINOVATE L&G® и ACTINOGROW® от Idaho Research Foundation, США), Streptomyces violaceusniger WYEC 108 (например, изолят ATCC 55660 в DE-THATCH-9®, DECOMP-9® и THATCH CONTROL® от Idaho Research Foundation, США), Streptomyces WYE 53 (например, изолят ATCC 55750 в DE-THATCH-9®, DECOMP-9® и THATCH CONTROL® от Idaho Research Foundation, США), а также Ulocladium oudemansii HRU3 (например, BOTRY-ZEN® от Botry-Zen Ltd, Новая Зеландия).
Типичные примеры химических фунгицидов, которые могут быть пригодны для использования в настоящем изобретении, включают:
A) стробилурины:
азоксистробин, куметоксистробин, кумоксистробин, димоксистробин, энестробурин, флуоксастробин, крезоксим-метил, метоминостробин, орисастробин, пикоксистробин, пираклостробин, пираметостробин, пираоксистробин, пирибенкарб, трифлоксистробин, метиловый сложный эфир 2-[2-(2,5-диметил-феноксиметил)-фенил]-3-метокси-акриловой кислоты и 2-(2-(3-(2,6-дихлорфенил)-1-метил-аллилиденаминооксиметил)-фенил)-2-метоксиимино-N-метил-ацетамид;
B) карбоксамиды:
карбоксанилиды: беналаксил, беналаксил-M, беноданил, биксафен, боскалид, карбоксин, фенфурам, фенгексамид, флутоланил, флуксапироксад, фураметпир, изопиразам, изотианил, киралаксил, мепронил, металаксил, металаксил-M (мефеноксам), офурас, оксадиксил, оксикарбоксин, пенфлуфен, пентиопирад, седаксан, теклофталам, тифлузамид, тиадинил, 2-амино-4-метил-тиазол-5-карбоксанилид, N-(4'-трифторометилтиобифенил-2-ил)-3-дифторометил-1-метил-1H-пиразол-4-карбоксамид и N-(2-(1,3,3-триметилбутил)-фенил)-1,3-диметил-5-фтор-1H-пиразол-4-карбоксамид;
морфолиды карбоновой кислоты: диметоморф, флуморф, пириморф;
амиды бензойной кислоты: флуметовер, флуопиколид, флуопирам, зоксамид;
другие карбоксамиды: карпропамид, дицикломет, мандипроамид, окситетрациклин, силтиофам и амид N-(6-метокси-пиридин-3-ил)циклопропанкарбоновой кислоты;
C) азолы:
триазолы: азаконазол, битертанол, бромуконазол, ципроконазол, дифеноконазол, диниконазол, диниконазол-M, эпоксиконазол, фенбуконазол, флуквинконазол, флузилазол, флутриафол, гексаконазол, имибенконазол, ипконазол, метконазол, миклобутанил, окспоконазол, паклобутразол, пенконазол, пропиконазол, протиоконазол, симеконазол, тебуконазол, тетраконазол, триадимефон, триадименол, тритиконазол, униконазол;
имидазолы: циазофамид, имазалил, пефуразоат, прохлораз, трифлумизол;
D) гетероциклические соединения:
пиридины: флуазинам, пирифенокс, 3-[5-(4-хлор-фенил)-2,3-диметил-изоксазолидин-3-ил]-пиридин, 3-[5-(4-метил-фенил)-2,3-диметил-изоксазолидин-3-ил]-пиридин;
пиримидины: бупиримат, ципродинил, дифлуметорим, фенаримол, феримзон, мепанипирим, нитрапирин, нуаримол, пириметанил;
пиперазины: трифорин;
пирролы: фенпиклонил, флудиоксонил;
морфолины: альдиморф, додеморф, додеморф-ацетат, фенпропиморф, тридеморф;
пиперидины: фенпропидин;
дикарбоксимиды: флуоромид, ипродион, процимидон, винклозолин;
неароматические 5-членные гетероциклы: фамоксадон, фенамидон, флутианил, октилинон, пробеназол, S-аллиловый сложный эфир 5-амино-2-изопропил-3-оксо-4-орто-толил-2,3-дигидро-пиразол-1-тиокарбоновой кислоты;
другие: ацибензолар-S-метил, аметоктрадин, амисульбром, анилазин, бластицидин-S, каптафол, каптан, хинометионат, дазомет, дебакарб, дикломезин, дифензокват, дифензокват-метилсульфат, феноксанил, фолпет, оксолиновая кислота, пипералин, проквиназид, пироквилон, квиноксифен, триазоксид, трициклазол, 2-бутокси-6-йод-3-пропилхромен-4-он, 5-хлор-1-(4,6-диметокси-пиримидин-2-ил)-2-метил-1H-бензоимидазол и 5-хлор-7-(4-метилпиперидин-1-ил)-6-(2,4,6-трифторфенил)-[1,2,4]триазол-[1,5-a]пиримидин;
E) другие активные вещества:
гуанидины: гуанидин, додин, свободное основание додина, гуазатин, гуазатин-ацетат, иминоктадин, иминоктадин-триацетат, иминоктадин-трис(албезилат);
антибиотики: касугамицин, касугамицин гидрохлорид-гидрат, стрептомицин, полиоксин, валидамицин A;
производные нитрофенила: бинапакрил, диклоран, динобутон, динокап, нитротал-изопропил, текназен,
органометаллические соединения: соли фентина, такие как фентин ацетат, фентин хлорид или фентин гидроксид;
серосодержащие гетероциклильные соединения: дитианон, изопротиолан;
фосфорорганические соединения: эдифенфос, фосетил, фосетил-алюминий, ипробенфос, фосфорная кислота и ее соли, пиразофос, толклофос-метил;
хлорорганические соединения: хлорталонил, дихлофлуанид, дихлорофен, флусульфамид, гексахлорбензол, пенцикурон, пентахлорфенол и его соли, фталид, квинтозен, тиофанат-метил, толилфлуанид, N-(4-хлор-2-нитро-фенил)-N-этил-4-метил-бензолсульфонамид;
неорганические активные вещества: бордосская смесь, ацетат меди, гидроксид меди, оксихлорид меди, основный сульфат меди и сера.
Коммерческие фунгициды наиболее целесообразно применять согласно инструкциям производителя в рекомендуемых концентрациях.
Инсектицид(ы), акарицид(ы), нематоцид(ы)
По меньшей мере в одном варианте осуществления биопестициды (т.е. описанные в настоящем документе композиции) могут дополнительно содержать один или несколько инсектицидов, акарицидов, нематоцидов или их комбинации. Как альтернатива, один или несколько инсектицидов, акарицидов, нематоцидов можно применять либо одновременно, либо последовательно с биопестицидами, раскрытыми в настоящем документе. Инсектициды, пригодные для описанных в настоящем документе биопестицидов, обладают активностью в отношении широкого спектра насекомых, в том числе без ограничения проволочников, совок, червовидных личинок, кукурузного жука, личинок мухи ростковой, земляных блошек, клопов-наземников, тлей, листоедов, щитников и их комбинаций.
Неограничивающие примеры инсектицидов, акарицидов и нематоцидов, которые могут быть пригодными для раскрытых в настоящем документе биопестицидов, включают акринатрин, альфа-циперметрин, бета-цифлутрин, цигалотрин, циперметрин, дельтаметрин, эсфенвалерат, этофенпрокс, фенпропатрин, фенвалерат, флуцитринат, лямбда-цигалотрин, гамма-цигалотрин, перметрин, тау-флювалинат, трансфлутрин, зета-циперметрин, цифлутрин, бифентрин, тефлутрин, эфлусиланат, фубфенпрокс, пиретрин, ресметрин, имидаклоприд, ацетамиприд, тиаметоксам, нитенпирам, тиаклоприд, динотефуран, клотианидин, имидаклотиз, хлорфлуазурон, дифлубензурон, люфенурон, тефлубензурон, трифлумурон, новалурон, флуфеноксурон, гексафлумурон, бистрифлуорон, новифлумурон, бупрофезин, циромазин, метоксифенозид, тебуфенозид, галофенозид, кромафенозид, эндосульфан, фипронил, этипрол, пирафлупрол, пирипрол, флубендиамид, хлорантранилипрол (Rynaxypyr), циазипир, эмамектин, эмамектин бензоат, абамектин, ивермектин, милбемектин, лепимектин, тебуфенпирад, фенпироксимат, пиридабен, феназаквин, пиримидифен, толфенпирад, дикофол, циенопирафен, цифлуметофен, ацеквиноцил, флуакрипирин, бифеназат, диафентиурон, этоксазол, клофентезин, спиносад, триаратен, тетрадифон, пропаргит, гекситиазокс, бромопропилат, хинметионат, амитраз, пирифлуквиназон, пиметрозин, флоникамид, пирипроксифен, диофенолан, хлорфенапир, метафлумизон, индоксакарб, хлорпирифос, спиродиклофен, спиромезифен, спиротетрамат, пиридалил, спинкторам, ацефат, триазофос, профенофос, фенамифос, 4-{[(6-хлоропирид-3-ил)метил](2,2-дифторэтил)амино}фуран-2(5H)-он, кадусафос, карбарил, карбофуран, этопрофос, тиодикарб, альдикарб, метамидофос, метиокарб, сульфоксафлор, а также продукты на основе Bacillus firmus (I-1582, BioNeem, Votivo) и их комбинации.
В предпочтительном варианте осуществления раскрытые в настоящем документе биопестициды содержат нематоцид. В более конкретном варианте осуществления нематоцидом является микробный нематоцид, более предпочтительно нематофаговый гриб и/или нематофаговая бактерия. В конкретном варианте осуществления микробным нематоцидом является нематофаговый гриб, выбранный из группы, состоящей из Arthrobotrys spp., Dactylaria spp., Harposporium spp., Hirsutella spp., Monacrosporium spp., Nematoctonus spp., Meristacrum spp., Myrothecium spp., Paecilomyces spp., Pasteuria spp., Pochonia spp., Trichoderma spp., Verticillium spp. и их комбинаций. В еще более конкретном варианте осуществления нематофаговый гриб выбран из группы, состоящей из Arthrobotrys dactyloides, Arthrobotrys oligospora, Arthrobotrys superb, Arthrobotrys dactyloides, Dactylaria candida, Harposporium anguillulae, Hirsutella rhossiliensis, Hirsutella minnesotensis, Monacrosporium cionopagum, Nematoctonus geogenius, Nematoctonus leiosporus, Meristacrum asterospermum, Myrothecium verrucaria, Paecilomyces lilacinus, Paecilomyces fumosoroseus, Pasteuria penetrans, Pasteuria usgae, Pochonia chlamydopora, Trichoderma harzianum, Verticillium chlamydosporum и их комбинаций.
В более конкретном варианте осуществления микробным нематоцидом являются нематофаговые бактерии, выбранные из группы, состоящей из Actinomycetes spp., Agrobacterium spp., Arthrobacter spp., Alcaligenes spp., Aureobacterium spp., Azobacter spp., Beijerinckia spp., Burkholderia spp., Chromobacterium spp., Clavibacter spp., Clostridium spp., Comomonas spp., Corynebacterium spp., Curtobacterium spp., Desulforibtio spp., Enterobacter spp., Flavobacterium spp., Gluconobacter spp., Hydrogenophage spp., Klebsiella spp., Methylobacterium spp., Phyllobacterium spp., Phingobacterium spp., Photorhabdus spp., Serratia spp. Stenotrotrophomonas spp., Xenorhadbus spp. Variovorax spp., Streptomyces spp., Pseudomonas spp., Paenibacillus spp. и их комбинаций. В еще более конкретном варианте осуществления микробным нематоцидом являются нематофаговые бактерии, выбранные из группы, состоящей из Chromobacterium subtsugae, Chromobacterium violaceum, Streptomyces lydicus, Streptomyces violaceusniger и их комбинации. В конкретном варианте осуществления штамм Chromobacterium subtsugae представляет собой штамм Chromobacterium subtsugae sp. nov., более предпочтительно штамм Chromobacterium subtsugae sp. nov. имеет номер доступа при депонировании NRRL B-30655. В еще одном конкретном варианте осуществления штамм Streptomyces представляет собой штамм WYEC 108 Streptomyces lydicus, штамм YCED 9 Streptomyces violaceusniger или их комбинацию.
Регуляторы роста насекомых
По меньшей мере в одном варианте осуществления биопестициды (т.е. описанные в настоящем документе композиции) могут необязательно содержать один или несколько регуляторов роста насекомых. Как альтернатива, один или несколько регуляторов роста насекомых можно применять либо одновременно, либо последовательно с биопестицидами, раскрытыми в настоящем документе. Неограничивающие примеры регуляторов роста насекомых содержат пирипроксифен, этофенпрокс, масло семян маргозы холодного отжима, S-гидропрен, ингибиторы синтеза хитина, аналоги ювенильных гормонов (например, метопрен) и их комбинации.
Полимер(ы)
По меньшей мере в одном варианте осуществления биопестициды (т.е. описанные в настоящем документе композиции) могут необязательно содержать один или несколько полимеров. Как альтернатива, один или несколько полимеров можно применять либо одновременно, либо последовательно с биопестицидами, раскрытыми в настоящем документе. Неограничивающие виды применения полимеров в сельскохозяйственной отрасли включают доставку агрохимикатов (например, применение в качестве водного диспергатора), удаление тяжелых металлов, влагоудержание и/или доставку воды и их комбинации. Pouci, et al., Am. J. Agri. & Biol. Sci., 3(1):299-314 (2008). В одном варианте осуществления один или несколько полимеров представляют собой природный полимер (например, агар, крахмал, альгинат, пектин, целлюлозу и т.д.), синтетический полимер, биоразлагаемый полимер (например, поликапролактон, полилактид, поли(виниловый спирт) и т.д.) или их комбинацию.
Неограничивающий список полимеров, применимых в описанных в настоящем документе композициях, представлен в Pouci, et al., Am. J. Agri. & Biol. Sci., 3(1):299-314 (2008). В одном варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции содержат целлюлозу, производные целлюлозы, метилцеллюлозу, производные метилцеллюлозы, крахмал, агар, альгинат, пектин, поливинилпирролидон, полимерные поверхностно-активные вещества и их комбинации.
В конкретном варианте осуществления биопестицид может содержать одно или несколько полимерных поверхностно-активных веществ. Полимерные поверхностно-активные вещества, которые могут быть пригодны для описанных в настоящем документе биопестицидов, могут содержать один или несколько неионных полимерных поверхностно-активных веществ, анионных полимерных поверхностно-активных веществ, амфотерных полимерных поверхностно-активных веществ, катионных полимерных поверхностно-активных веществ и их комбинации. Особенно применимые к описанным в настоящем документе биопестицидам полимерные поверхностно-активные вещества представляют собой полимерные поверхностно-активные вещества, которые способны функционировать в качестве водного диспергатора.
Неионные полимерные поверхностно-активные вещества
Неограничивающие примеры неионных полимерных поверхностно-активных веществ включают полимерные блок-сополимеры полиалкиленоксида, блок-сополимеры бутила, неионные блок-сополимеры, растворы акрилового сополимера, неионные случайные полимерные полимеры, полиоксиэтилен-полиарил-фенолы и неионные полимерные диспергаторы. Коммерчески доступные неионные полимерные поверхностно-активные вещества включают без ограничения Atlas® G-5000, Atlas® G-5002L, Atlox® 4894, Atlox® 4912, Atlox® 4912-SF, Atlox® 4913, Atlox® 4914, Cresplus® DP, Hypermer® B206, Hypermer® B210, Hypermer® B246SF, Zyphrym® PD2206, Zyphrym® PD3315 и Zyphrym® PD7000.
В конкретном варианте осуществления биопестицид содержит один или несколько неионных полимерных поверхностно-активных веществ, выбранных из блок-сополимеров полиалкиленоксида, блок-сополимеров бутила, неионных блок-сополимеров, растворов акрилового сополимера, неионных случайных полимерных полимеров, полиоксиметилен-полиарил-фенолов, неионных полимерных диспергаторов и их комбинаций. В более конкретном варианте осуществления биопестицид содержит один или несколько неионных полимерных поверхностно-активных веществ, выбранных из Atlas® G-5000, Atlas® G-5002L, Atlox® 4894, Atlox® 4912, Atlox® 4912-SF, Atlox® 4913, Atlox® 4914, Cresplus® DP, Hypermer® B206, Hypermer® B210, Hypermer® B246SF, Zyphrym® PD2206, Zyphrym® PD3315, Zyphrym® PD7000 и их комбинаций.
Анионные полимерные поверхностно-активные вещества
Неограничивающие примеры анионных поверхностно-активных веществ включают в себя акриловые полимеры стирола, модифицированные акриловые полимеры стирола и анионные полимерные диспергаторы. Коммерчески доступные анионные полимерные поверхностно-активные вещества включают без ограничения Atlox® Metasperse 100L, Atlox® Metasperse 500L, Atlox® Metasperse 550S и Atlox® LP-1. В варианте осуществления биопестициды содержат одно или несколько анионных поверхностно-активных веществ.
В конкретном варианте осуществления биопестицид содержит одну или несколько анионных поверхностно-активных веществ, выбранных из акриловых полимеров стирола, модифицированных акриловых полимеров стирола, анионных полимерных диспергаторов и их комбинаций. В более конкретном варианте осуществления биопестицид содержит одну или несколько анионных полимерных поверхностно-активных веществ, выбранных из Atlox® Metasperse 100L, Atlox® Metasperse 500L, Atlox® Metasperse 550S, Atlox® LP-1 и их комбинаций.
В еще одном конкретном варианте осуществления биопестицид содержит анионное полимерное поверхностно-активное вещество, в котором анионное полимерное поверхностно-активное вещество содержит один или несколько модифицированных акриловых полимеров стирола. В другом конкретном варианте осуществления биопестицид содержит один или несколько модифицированных акриловых полимеров стирола, выбранных из Atlox® Metasperse 500L, Atlox® Metasperse 550S и их комбинаций. В конкретном варианте осуществления биопестицид содержит Atlox® Metasperse 500L. В другом конкретном варианте осуществления биопестицид содержит Atlox® Metasperse 550S. В еще другом конкретном варианте осуществления биопестицид содержит смесь Atlox® Metasperse 500L и Atlox® Metasperse 550S.
Полимерные амфотерные поверхностно-активные вещества
Полимерные амфотерные поверхностно-активные вещества, пригодные для описанных в настоящем документе биопестицидов, включают без ограничения полимерные амфотерные диспергаторы. Коммерчески доступный полимерный амфотерный диспергатор содержит без ограничения Atlox® 4915. В варианте осуществления биопестицид содержит один или несколько полимерных амфотерных диспергаторов. В конкретном варианте осуществления биопестицид содержит Atlox® 4915.
Катионные полимерные поверхностно-активные вещества
Катионные полимерные поверхностно-активные вещества, пригодные для описанных в настоящем документе биопестицидов, включают без ограничения конденсационные полимеры сложного полиэфира/полиамида. Коммерчески доступные катионные полимерные поверхностно-активные вещества включают Hypermer® KD-1. В варианте осуществления биопестицид содержит один или несколько конденсационных полимеров сложного полиэфира/полиамида. В конкретном варианте осуществления биопестицид содержит Hypermer® KD-1.
Смачивающее(ие) средство(а)
По меньшей мере в одном варианте осуществления биопестициды (т.е. описанные в настоящем документе композиции) могут необязательно содержать одно или несколько смачивающих средств. Как альтернатива, одно или несколько смачивающих средств можно применять либо одновременно, либо последовательно с биопестицидами, раскрытыми в настоящем документе. Смачивающие средства обычно применяются на почвах, в частности гидрофобных почвах, для улучшения инфильтрации и/или проникновения воды в почву. Смачивающим средством может быть вспомогательное средство, масло, поверхностно-активное вещество, буфер, подкислитель или их комбинация. В варианте осуществления смачивающее средство представляет собой поверхностно-активное вещество. В варианте осуществления смачивающим средство представляет собой одно или несколько неионных поверхностно-активных веществ, одно или несколько анионных поверхностно-активных веществ или их комбинацию. В еще одном варианте осуществления смачивающее средство представляет собой одно или несколько неионных поверхностно-активных веществ.
Антифриз(ы)
По меньшей мере в одном варианте осуществления биопестициды (т.е. описанные в настоящем документе композиции) могут необязательно содержать одно или несколько антифризов. Как альтернатива, один или несколько антифризов можно применять либо одновременно, либо последовательно с биопестицидами, раскрытыми в настоящем документе. В одном варианте осуществления описанные в настоящем документе композиции могут дополнительно содержать один или несколько антифризов. Неограничивающие примеры антифризов содержат этиленгликоль, пропиленгликоль, мочевину, глицерин и их комбинации.
Консерванты
По меньшей мере в одном варианте осуществления биопестициды (т.е. описанные в настоящем документе композиции) могут необязательно содержать один или несколько консервантов. Как альтернатива, один или несколько консервантов можно применять либо одновременно, либо последовательно с биопестицидами, раскрытыми в настоящем документе. Используемый в настоящем документе термин ʺконсервантʺ содержит биоцид (т.е. бактериостаты или бактерициды). Неограничивающие примеры биоцидов включают следующие.
Бактерициды
Используемый в настоящем документе "бактерицид" представляет собой средство, которое уничтожает бактерии. Бактерицид может быть дезинфицирующим средством, антисептическим средством или антибиотиком.
Неограничивающими примерами бактерицидных дезинфицирующих средств могут быть:
активный хлор (т.е. гипохлориты, хлорамины, дихлоризоцианурат и трихлоризоцианурат, мокрый хлор, диоксид хлора и т.д.),
активный кислород (пероксиды, такие как перуксусная кислота, персульфат калия, перборат натрия, перкарбонат натрия и пергидрат мочевины),
йод (йодповидон (повидон-йод, бетадин)), раствор Люголя, настой йода, йодированные неионные поверхностно-активные вещества),
концентрированные спирты (в основном этанол, 1-пропанол, называемый также н-пропанол, и 2-пропанол, называемый изопропанолом, и их смеси; дополнительно 2-феноксиэтанол и 1- и 2-феноксипропанолы),
фенольные вещества (такие, как фенол (также называемая "карболовая кислота"), крезолы (называемый "лизол" в комбинации с жидкими калиевыми мылами), галогенированные (хлорированные, бромированные) фенолы, такие как гексахлорофен, триклозан, трихлорфенол, трибромфенол, пентахлорфенол, дибромол и их соли),
катионные поверхностно-активные вещества, такие как некоторые катионы четвертичного аммония (такие как бензалконий хлорид, бромид или хлорид цетилтриметиламмония, дидецилдиметиламмония хлорид, цетилпиридиний хлорид,бензетония хлорид) и другие нечетвертичные соединения, такие как хлоргексидин, глюкопротамин, октенидин дегидрохлорид и т.д.,
сильные окислители, такие как озон и растворы перманганата;
тяжелые металлы и их соли, такие как коллоидное серебро, нитрат серебра, хлорид ртути, соли фенилртути, сульфат меди, хлорид оксида меди и т.д. Тяжелые металлы и их соли являются наиболее токсичными и опасными для окружающей среды бактерицидами, и таким образом их применение сильно ограничено или исключено; кроме того, также
должным образом концентрированные сильные кислоты (фосфорная, азотная, серная, амидосерная, толуолсульфоновая кислоты) и
щелочи (гидроксиды натрия, калия, кальция), такие как с pH <1 или >13, особенно при повышенной температуре (выше 60°C), уничтожают бактерий.
Неограничивающими примерами бактерицидного антисептического средства могут быть:
должным образом разведенные хлорные препараты (например, раствор Дакина, 0,5% раствор гипохлорита натрия или калия, 0,5-1% раствор бензолсульфохлорамида натрия с pH, доведенным до pH 7-8 (хлорамин Б)),
некоторые йодные препараты, такие как йодоповидон в различных галогеновых препаратах (мазь, растворы, пластыри для ран), в прошлом также раствор Люголя,
пероксиды, такие как растворы пергидрата мочевины и pH-буферизированные растворы 0,1-0,25% перуксусной кислоты,
спирты с добавками антисептических средств, применяемые в основном для обеззараживания кожи,
слабые органические кислоты, такие как сорбиновая кислота, бензойная кислота, молочная кислота и салициловая кислота,
некоторые фенольные соединения, такие как гексахлорофен, триклозан и дибромол, а также
катионактивные соединения, такие как 0,05-0,5% бензалконий, 0,5-4% хлоргексидин, 0,1-2% растворы октенидина.
Неограничивающими примерами бактерицидного антибиотика могут быть пенициллин, цефалоспорины и аминогликозидные антибиотики.
Другие бактерицидные антибиотики содержат фторхинолоны, нитрофураны, ванкомицин, монобактамы, ко-тримоксазол и метронидазол.
Предпочтительными бактерицидами являются:
галогенсодержащие соединения, такие как
бронопол - активный 2-бром-2-нитро-1,3-пропандиол,
довисил 75 - активный 1-(3-хлораллил)-3,5,7-триаза-1-азонийадамантанхлорид,
DBNPA - активный дибромнитрилопропионамид;
органические соединения серы, включая изотиазолоны, такие как
проксел (Nipacide) - активный 1,2-бензизотиазолин-3-он,
катон - активный 5-хлор-2-метил-4-изотиазолин-3-он, 2-метил-4-изотиазолин-3-oн;
азотсодержащие соединения, такие как
гермаль II (диазолинидил мочевина),
трис нитро (трис(гидроксиметил)нитрометан);
фенольные смолы, такие как
довицид (о-фенилфенат натрия),
Preventol D2® (бензилгемиформаль);
неорганические вещества, такие как
арсенаты меди,
оксид меди;
металлоорганические соединения, такие как
соединения мышьяка, меди, ртути;
соединения четвертичного аммония.
Бактериостаты
Используемый в настоящем документе "бактериостат" представляет собой средство, как правило химическое, которое предотвращает рост бактерий, но не обязательно уничтожает их или их споры. После удаления бактериостата бактерии, как правило, начинают расти снова.
Неограничивающие примеры бактериостатов включают азид натрия и тимеросол.
СПОСОБЫ
В другом аспекте раскрыты способы применения биопестицидов (т.е. раскрытых в настоящем документе композиций) для контроля одного или нескольких вредителей. В конкретном варианте осуществления способ включает контроль одного или нескольких вредителей растений. Неограничивающие примеры вредителей растений включают следующих.
Вредные насекомые отряда Полужесткокрылые
Равнокрылые цикадовые насекомые (Delphacidae), такие как темная цикадка (Laodelphax striatellus), бурая рисовая цикадка (Nilaparvata lugens), цикадка белоспинная (Sogatella furcifera) и т.п.; цикадки листовые (Deltocephalidae), такие как цикадка зеленая рисовая (Nephotettix cincticeps), цикадка зеленая (Nephotettix virescens) и т.п.; тли (Aphididae), такие как тля бахчевая (Aphis gossypii), тля оранжерейная персиковая (Myzus persicae), тля капустная (Brevicoryne brassicae), тля картофельная большая (Macrosiphum euphorbiae), тля картофельная обыкновенная (Aulacorthum solani), тля черемуховая обыкновенная (Rhopalosiphum padi), тля тропическая цитрусовая (Toxoptera citricidus) и т.п.; клопы-щитники (Pentatomidae), такие как клоп зеленый азиатский (Nezara antennata), бобовый клоп (Riptortus clavetus), клоп рисовый (Leptocorisa chinensis), клоп белый пятнистый колючий (Eysarcoris parvus), клоп коричневый мраморный (Halyomorpha mista), клоп-слепняк (Lyus lineolarxs) и т.п.; белокрылки (Aleyrodidae), такие как белокрылка тепличная (Trialeurodes vaporariorum), белокрылка табачная (Bemisia tabaci), белокрылка магнолиевая (Bemisia argentifolii) и т.п.; кокциды (Coccidae), такие как красная померанцевая щитовка (Aonidiella aurantii), щитовка калифорнийская (Comstockaspis perniciosa), апельсиновая щитовка (Unaspis citri), красная восковая ложная щитовка (Ceroplastes rubens), червец австралийский желобчатый (Icerya purchasi) и т.п.; кружевницы (Tingidae); листоблошки (Psyllidae) и т.д.
Вредные насекомые отряда Чешуекрылые
Огневки (Pyralidae), такие как огневка желтая рисовая (Chilo suppressalis), стеблевая рисовая огневка (Tryporyza incertulas), рисовая листовертка-огневка (Cnaphalocrocis medinalis), огневка хлопковая (Notarcha derogata), южная амбарная огневка (Plodia interpunctella), кукурузный мотылек (Ostrinia furnacalis), огневка кукурузная (Ostrinia nubilaris), огневка капустная (Hellula undalis), огневка мятликовая (Pediasia teterrellus) и т.п.; совки (Noctuidae), такие как азиатская хлопчатниковая совка (Spodoptera litura), совка малая наземная (Spodoptera exigua), совка восточная луговая (Pseudaletia separata), совка капустная (Mamestra brassicae), совка-ипсилон (Agrotis ipsilon), полупяденица свекольная (Plusia nigrisigna), Thoricoplusia spp., Heliothis spp., Helicoverpa spp. и т.п.; белянки (Pieridae), такие как белянка репная (Pieris rapae) и т.п.; листовертки (Tortricidae), такие как Adoxophyes spp., плодожорка восточная персиковая (Grapholita molesta), соевая плодожорка (Leguminivora glycinivorella), листовертка адзуки (Matsumuraeses azukivora), листовертка сетчатая (Adoxophyes orana fasciata), листовертка малая чайная (Adoxophyes spp.), листовертка восточная чайная (Homona magnanima), листовертка яблонная (Archips fuscocupreanus), плодожорка яблонная (Cydia pomonella) и т.п.; моли-пестрянки (Gracillariidae), такие как листовертка чайная (Caloptilia theivora), яблонный листовой минер (Phyllonorycter ringoneella) и т.п.; Carposinidae, такие как плодожорка персиковая (Carposina niponensis) и т.п.; крохотки-моли (Lyonetiidae), такие как Lyonetia spp. и т.п.; волнянки (Lymantriidae), такие как Lymantria spp., Euproctis spp. и т.п.; горностаевые моли (Yponomeutidae), такие как моль капустная (Plutella xylostella) и т.п.; выемчатокрылые моли (Gelechiidae), такие как хлопковая моль (Pectinophora gossypiella), моль картофельная (Phthorimaea operculella) и т.п.; медведки и родственные формы (Arctiidae), такие как американская белая бабочка (Hyphantria cunea) и т.п.; моли настоящие (Tineidae), такие как моль платяная (Tinea translucens), моль комнатная (Tineola bisselliella) и т.д., и т.п.
Вредные насекомые отряда Пузыреногие
Трипсы (Thripidae), такие как западный цветочный трипс (Frankliniella occidentalis), трипс бахчевый (Thrips palmi), индокитайский цветочный трипс (Scirtothrips dorsalis), трипс луковый (Thrips tabaci), трипс обыкновенный (Frankliniella intonsa), трипс табачный (Frankliniella fusca) и т.д. и т.п.
Вредные насекомые отряда Двукрылые
Мухи комнатные (Musca domestica), комар обыкновенный (Culex popiens pallens), слепень (Tabanus trigonus), муха луковая (Hylemya antiqua), муха ростковая (Hylemya platura), камышовый малярийный комар (Anopheles sinensis); минирующие мухи (Agromyzidae), такие как минер рисовый (Agromyza oryzae), ячменный минер (Hydrellia griseola), рисовая стеблевая мушка (Chlorops oryzae), минер американский клеверный (Liriomyza trifolii) и т.п.; муха дынная (Dacus cucurbitae), муха плодовая средиземноморская (Ceratitis capitata) и т.д.
Вредные насекомые отряда Жесткокрылые
Картофельная 28-точечная божья коровка (Epilachna vigintioctopunctata), жук-листоед тыквенный (Aulacophora femoralis), жук-блошка полосатая (Phyllotreta striolata), пьявица рисовая (Oulema oryzae), долгоносик рисовый (Echinocnemus squameus), долгоносик рисовый водяной (Lissorhoptrus oryzophilus), хлопковый долгоносик (Anthonomus grandis), зерновка бобовая китайская (Callosobruchus chinensis), долгоносик-охотник (Sphenophorus venatus), хрущик японский (Popxllia japonica), хрущик медный (Anomala cuprea), западные кукурузные жуки (Diabrotica spp.), колорадский картофельный жук (Leptinotarsa decemlineata), щелкуны (Agriotes spp.), жук табачный (Lasioderma serricorne), кожеед домовой (Anthrenus verbasci), хрущак малый булавоусый (Tribolium castaneum), древогрыз темно-бурый (Lyctus brunneus), бело-пятнистый длиннорогий жук (Anoplophora malasiaca), лубоед большой сосновый (Tomicus piniperda) и т.д.
Вредные насекомые отряда Прямокрылые
Саранча перелетная (Locusta migratoria), медведка африканская (Gryllotalpa africana), кобылка рисовая короткокрылая (Oxya yezoensis), кобылка рисовая японская (Oxya japonica) и т.д.
Вредные насекомые отряда Перепончатокрылые
Пилильщик рапсовый (Athalia rosae), муравей-листорез (Acromyrmex spp.), муравей огненный (Solenopsis spp.) и т.д.
Вредные насекомые отряда Таракановые
Таракан рыжий (Blattella germanica), дымчато-коричневый таракан (Periplaneta fuliginosa), таракан американский (Periplaneta americana), Periplaneta brunnea, таракан черный (Blatta orientalis) и т.д.
Конкретные примеры вышеописанных вредных членистоногих включают тлей (Aphididae), трипсов (Thripidae), минирующих мух (Agromyzidae), волосатиков (Paragordius tricuspidatus), колорадского картофельного жука (Leptinotarsa decemlineata), японского жука (Popillia japonica), хрущика медного (Anomala cuprea), долгоносика хлопкового (Anthonomus grandis), долгоносика рисового водяного (Lissorhoptrus oryzophilus), трипса табачного (Frankliniella fusca), западных кукурузных жуков (Diabrotica spp.), моль капустную (Plutella xylostella), мермитид, соевую плодожорку (Leguminivora glycinivorella) и т.п.
В конкретном варианте осуществления способ включает в себя контроль одного или нескольких вредителей растений посредством биопестицида, включающего приведение вредителя растений в контакт с одним или несколькими из биопестицидов ((т.е. композиций), описанных в настоящем документе. Стадию приведения в контакт можно выполнять с помощью любого способа, известного из уровня техники (например, опрыскивание, опыливание и т.д.). В одном варианте осуществления стадию приведения в контакт повторяют (например, более одного раза, то есть стадию приведения в контакт повторяют два раза, три раза, четыре раза, пять раз, шесть раз, семь раз, восемь раз, девять раз, десять раз и т.д.).
В другом аспекте предложен способ контроля одного или нескольких вредителей посредством биопестицида, включающий приведение в контакт растения или части растения с одним или несколькими из биопестицидов, описанных в настоящем документе. Не будучи связанными какой-либо теорией полагают, что один или несколько вредителей, например, вредителей растений, вступают в контакт с биопестицидами при контакте с обработанным растением или частью растения. В варианте осуществления стадия приведения в контакт может быть выполнена любым способом, известным из уровня техники (в том числе как некорневым, так и отличным от некорневого применением). Неограничивающие примеры обеспечения контакта растения или части растения включают опрыскивание растения или части растения, орошение растения или части растения, капельная обработка растения или части растения, опыление растения или части растения и/или нанесение покрытия на семя посредством биопестицидов, описанных в настоящем документе. В одном варианте осуществления стадию приведения в контакт повторяют (например, более одного раза, то есть стадию обработки повторяют два раза, три раза, четыре раза, пять раз, шесть раз, семь раз, восемь раз, девять раз, десять раз и т.д.). Стадию приведения в контакт можно осуществлять в любой момент времени в процессе роста растения или части растения. В одном варианте приведение растения или части растения в контакт с одним или несколькими из описанных в настоящем документе биопестицидов происходит до того, как растение или часть растения начинает расти. В другом варианте осуществления приведение растения или части растения в контакт с одним или несколькими из описанных в настоящем документе биопестицидов происходит после того, как растение или часть растения начала расти.
В другом аспекте предложен способ контроля одного или нескольких вредителей посредством биопестицида, включающий обработку почвы одним или несколькими из биопестицидов, описанных в настоящем документе. Не будучи связанными какой-либо теорией полагают, что один или несколько вредителей, например, вредителей растений, вступают в контакт с биопестицидами при контакте с обработанной почвой. В варианте осуществления стадия обработки может быть выполнена любым способом, известным из уровня техники (в том числе как некорневым, так и отличным от некорневого применением). Неограничивающие примеры обработки почвы включают опрыскивание почвы, орошение почвы, капельную обработку почвы и/или опыливание почвы одним или несколькими из биопестицидов, описанных в настоящем документе. В одном варианте осуществления стадию обработки повторяют (например, более одного раза, так же, как и стадию обработки, повторяют два раза, три раза, четыре раза, пять раз, шесть раз, семь раз, восемь раз, девять раз, десять раз и т.д.). Стадию обработки можно осуществлять в любой момент времени в процессе роста растения или части растения. В одном варианте осуществления стадию обработки осуществляют до того, как растение или часть растения начинает расти. В другом варианте осуществления стадию обработки осуществляют после того, как растение или часть растения начало расти.
В другом варианте осуществления способ дополнительно включает стадию посадки растения или части растения. Стадия посадки может осуществляться до, после или во время обработки почвы одним или несколькими из биопестицидов, описанных в настоящем документе. В одном варианте осуществления стадию посадки осуществляют до того, как почва обработана одним или несколькими из биопестицидов, описанных в настоящем документе. В другом варианте осуществления стадию посадки осуществляют во время обработки почвы одним или несколькими из описанных в настоящем документе биопестицидов (например, стадию посадки осуществляют практически одновременно со стадией обработки и т.д.). В еще другом варианте осуществления стадию посадки осуществляют после того, как почва обработана одним или несколькими из биопестицидов, описанных в настоящем документе.
В другом варианте осуществления способ дополнительно включает стадию подвергания вредителя, растения или части растения и/или почвы действию одного или нескольких из необязательных ингредиентов, описанных в настоящем документе. Вредитель, растение или часть растения и/или почва могут подвергать действию одного или нескольких из необязательных ингредиентов в качестве части описанных в настоящем документе биопестицидов либо независимо от одного или нескольких биопестицидов (т.е. композиций), описанных в настоящем документе.
В одном варианте осуществления вредитель, растение или часть растения и/или почва подвергаются действию одного или нескольких из необязательных ингредиентов в качестве части биопестицидов (т.е. композиций), описанных в настоящем документе. В другом варианте осуществления вредителя, растение или часть растения и/или почву подвергают действию одного или нескольких из необязательных ингредиентов независимо от одного или нескольких биопестицидов, описанных в настоящем документе.
В одном варианте осуществления подвергание вредителя, растения или части растения и/или почвы действию одного или нескольких необязательных ингредиентов происходит до, во время, после или одновременно со стадиями приведения в контакт и/или обработки. В одном варианте осуществления подвергание вредителя, растения или части растения и/или почвы действию одного или нескольких необязательных ингредиентов происходит до стадий приведения в контакт и/или обработки. В другом варианте осуществления подвергание вредителя, растения или части растения и/или почвы действию одного или нескольких необязательных ингредиентов происходит во время стадий приведения в контакт и/или обработки. В еще одном варианте осуществления подвергание вредителя, растения или части растения и/или почвы действию одного или нескольких необязательных ингредиентов происходит после стадий приведения в контакт и/или обработки. В еще другом варианте осуществления подвергание вредителя, растения или части растения и/или почвы действию одного или нескольких необязательных ингредиентов происходит одновременно со стадиями приведения в контакт и/или обработки.
НАНЕСЕНИЕ ПОКРЫТИЙ НА СЕМЕНА
В другом аспекте семена покрывают одним или несколькими из биопестицидов (т.е. композиций), описанных в настоящем документе. В одном варианте осуществления семена могут быть обработаны композицией, описанной в настоящем документе, несколькими способами, но предпочтительно путем опрыскивания или капельной обработки. Опрыскивание и капельную обработку можно проводить путем составления описанных в настоящем документе биопестицидов и опрыскивания или капельной обработки семени(семян) посредством системы непрерывной обработки (которую калибруют для проведения обработки с предварительно определенной скоростью, пропорциональной непрерывному потоку семян), такой как установка барабанного типа. Также можно применять системы периодической загрузки, в которых предварительно определенный объем партии семян и описанной(ых) в настоящем документе композиции(ий) подают в смеситель. Системы и аппараты для осуществления этих способов являются коммерчески доступными от многочисленных поставщиков, например, Bayer CropScience (Gustafson).
В другом варианте осуществления обработка предусматривает нанесение покрытий на семена. Один такой способ предусматривает нанесение покрытия на внутреннюю стенку сферического контейнера с помощью описанных в настоящем документе биопестицидов, добавление семян, затем вращение контейнера для обеспечения приведения семян в контакт со стенкой и биопестицидами, - способ, известный из уровня техники как "нанесение покрытия с помощью контейнера". На семена можно наносить покрытие с помощью комбинаций способов нанесения покрытия. Замачивание обычно предусматривает применение жидких форм описанных биопестицидов. Например, семена можно замачивать в течение от приблизительно 1 минуты до приблизительно 24 часов (например, по меньшей мере на 1 мин, 5 мин, 10 мин, 20 мин, 40 мин, 80 мин, 3 ч, 6 ч, 12 ч, 24 ч).
НОРМЫ ПРИМЕНЕНИЯ И РАЗБАВЛЕНИЯ
Описанные в настоящем документе биопестициды можно применять при различных концентрациях для осуществления любого из раскрытых способов или к любому из покрытий семян или способов нанесения покрытий на семена, описанных в настоящем документе. В одном варианте осуществления биопестициды разбавляют водой. В конкретном варианте осуществления биопестицид разбавляют водой в количестве 0,01-5,00 г биопестицида на 95,00 г-99,99 г воды.
В конкретном варианте осуществления биопестицид разбавляют водой в количестве 5,00 г биопестицида на 95,00 г воды. В другом конкретном варианте осуществления биопестицид разбавляют водой в количестве 4,00 г биопестицида на 96,00 г воды. В еще одном конкретном варианте осуществления биопестицид разбавляют водой в количестве 3,00 г биопестицида на 97,00 г воды. В еще другом конкретном варианте осуществления биопестицид разбавляют водой в количестве 2,00 г биопестицида на 98,00 г воды. В еще одном конкретном варианте осуществления биопестицид разбавляют водой в количестве 1,00 г биопестицида на 99,00 г воды. В еще одном конкретном варианте осуществления биопестицид разбавляют водой в количестве 0,90 г биопестицида на 99,10 г воды. В другом конкретном варианте осуществления биопестицид разбавляют водой в количестве 0,80 г биопестицида на 99,20 г воды. В еще одном конкретном варианте осуществления биопестицид разбавляют водой в количестве 0,70 г биопестицида на 99,30 г воды. В еще другом конкретном варианте осуществления биопестицид разбавляют водой в количестве 0,60 г биопестицида на 99,40 г воды. В еще одном конкретном варианте осуществления биопестицид разбавляют водой в количестве 0,50 г биопестицида на 99,50 г воды. В еще другом варианте осуществления биопестицид разбавляют водой в количестве 0,40 г биопестицида на 99,60 г воды. В другом конкретном варианте осуществления биопестицид разбавляют водой в количестве 0,35 г биопестицида на 99,65 г воды. В еще одном конкретном варианте осуществления биопестицид разбавляют водой в количестве 0,30 г биопестицида на 99,70 г воды. В еще другом конкретном варианте осуществления биопестицид разбавляют водой в количестве 0,25 г биопестицида на 99,75 г воды. В еще одном конкретном варианте осуществления биопестицид разбавляют водой в количестве 0,20 г биопестицида на 99,80 г воды. В еще одном конкретном варианте осуществления биопестицид разбавляют водой в количестве 0,15 г биопестицида на 99,85 г воды. В другом конкретном варианте осуществления биопестицид разбавляют водой в количестве 0,10 г биопестицида на 99,90 г воды. В еще одном конкретном варианте осуществления биопестицид разбавляют водой в количестве 0,05 г биопестицида на 99,95 г воды. В еще другом конкретном варианте осуществления биопестицид разбавляют водой в количестве 0,01 г биопестицида на 99,99 г воды.
Далее настоящее изобретение будет описано с помощью следующих неограничивающих примеров.
ПРИМЕРЫ
Следующие примеры приведены в иллюстративных целях и не предназначены для ограничения объема изобретения, заявленного в настоящем документе. Любые вариации в иллюстрируемых примерах, которые приходят на ум специалистам в данной области техники, предназначены для включения в объем настоящего изобретения.
Пример 1. Составы биопестицида
Материалы и способы
Парафиновое масло:
SunSpray® 6N
Пирогенный кремнезем:
Cab-O-Sil® M-5
Cab-O-Sil® TS-720
Полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеат:
Cirrasol® G-1086
Сорбитанмоностеарат:
Span® 60
Сорбитанмоноолеат:
Span® 80
Модифицированный акриловый полимер стирола:
Metasperse® 550S
Грибной пестицид (споры):
Споры Metarhizium anisopliae (также именуемый Metarhizium brunneum)
Биопестицидные композиции:
Следующие биопестициды (т.е. композиции) получали следующим образом. Масло Sunspray 6N объединяли с Cab-O-Sil M-5 и перемешивали в течение 3 минут на высокой скорости, применяя лабораторный смеситель Waring Commercial. Полученную жидкость разделяли выливанием 100 мл в отдельные стеклянные графины Ball mason jar. Быстро добавляли остальные компоненты и перемешивали в течение 2 минут. Каждый разливали в 250 бутылок. К каждому образцу добавляли технически чистый порошок спор MET52 и каждый образец встряхивали на встряхивателе Burrell Wrist-Action в течение 10 минут.
В каждом биопестициде (т.е. композиции) количество каждого ингредиента приведено в весовых процентах (вес. %) и отображено в таблице 2.
Таблица 2. Биопестицидные композиции
| Композиции | % SunSpray 6N | % Cab-O-Sil M5 | % Cab-O-Sil TS-720 | % Cirrasol G-1086 | % Span 60 | % Span 80 | % Metasperse 550S | % Met 52 |
| Композиция 1 | 56,00 | 3,00 | 0,00 | 27,75 | 0,00 | 2,25 | 0,00 | 11,00 |
| Композиция 2 | 75,50 | 1,00 | 0,00 | 12,50 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 11,00 |
| Композиция 3 | 70,50 | 1,00 | 0,00 | 12,50 | 0,00 | 0,00 | 5,00 | 11,00 |
| Композиция 4 | 75,50 | 1,00 | 0,00 | 12,34 | 0,16 | 0,00 | 0,00 | 11,00 |
| Композиция 5 | 70,50 | 1,00 | 0,00 | 12,34 | 0,16 | 0,00 | 5,00 | 11,00 |
| Композиция 6 | 80,50 | 1,00 | 0,00 | 7,402 | 0,098 | 0,00 | 0,00 | 11,00 |
| Композиция 7 | 75,50 | 1,00 | 0,00 | 7,402 | 0,098 | 0,00 | 5,00 | 11,00 |
| Композиция 8 | 80,50 | 1,00 | 0,00 | 7,50 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 11,00 |
| Композиция 9 | 75,50 | 1,00 | 0,00 | 7,50 | 0,00 | 0,00 | 5,00 | 11,00 |
| Композиция 10 | 78,00 | 1,00 | 0,00 | 10,00 | 0,00 | 0,00 | 0,00 | 11,00 |
| Композиция 11 | 78,00 | 1,00 | 0,00 | 9,50 | 0,50 | 0,00 | 0,00 | 11,00 |
| Композиция 12 | 78,00 | 1,00 | 0,00 | 9,00 | 1,00 | 0,00 | 0,00 | 11,00 |
| Композиция 13 | 78,00 | 1,00 | 0,00 | 8,50 | 1,50 | 0,00 | 0,00 | 11,00 |
| Композиция 14 | 73,00 | 1,00 | 0,00 | 10,00 | 0,00 | 0,00 | 5,00 | 11,00 |
| Композиция 15 | 73,00 | 1,00 | 0,00 | 9,50 | 0,50 | 0,00 | 5,00 | 11,00 |
| Композиция 16 | 73,00 | 1,00 | 0,00 | 9,00 | 1,00 | 0,00 | 5,00 | 11,00 |
| Композиция 17 | 73,00 | 1,00 | 0,00 | 8,50 | 1,50 | 0,00 | 5,00 | 11,00 |
| Композиция 18 | 68,00 | 1,00 | 0,00 | 10,00 | 0,00 | 0,00 | 10,00 | 11,00 |
| Композиция 19 | 68,00 | 1,00 | 0,00 | 9,50 | 0,50 | 0,00 | 10,00 | 11,00 |
| Композиция 20 | 68,00 | 1,00 | 0,00 | 9,00 | 1,00 | 0,00 | 10,00 | 11,00 |
| Композиция 21 | 68,00 | 1,00 | 0,00 | 8,50 | 1,50 | 0,00 | 10,00 | 11,00 |
| Композиция 22 | 73,00 | 1,00 | 0,00 | 9,00 | 0,00 | 1,00 | 5,00 | 11,00 |
| Композиция 23 | 68,00 | 1,00 | 0,00 | 14,25 | 0,00 | 0,75 | 5,00 | 11,00 |
| Композиция 24 | 68,00 | 1,00 | 0,00 | 12,75 | 0,00 | 2,25 | 5,00 | 11,00 |
| Композиция 25 | 63,00 | 1,00 | 0,00 | 19,00 | 0,00 | 1,00 | 5,00 | 11,00 |
| Композиция 26 | 63,00 | 1,00 | 0,00 | 17,00 | 0,00 | 3,00 | 5,00 | 11,00 |
| Композиция 27 | 68,00 | 1,00 | 0,00 | 8,50 | 0,00 | 1,50 | 10,00 | 11,00 |
| Композиция 28 | 73,00 | 1,00 | 0,00 | 8,50 | 0,00 | 1,50 | 5,00 | 11,00 |
| Композиция 29 | 61,00 | 1,00 | 2,00 | 17,00 | 0,00 | 3,00 | 5,00 | 11,00 |
| Композиция 30 | 68,00 | 1,00 | 0,00 | 18,00 | 0,00 | 2,00 | 0,00 | 11,00 |
| Композиция 31 | 68,00 | 1,00 | 0,00 | 19,00 | 0,00 | 1,00 | 0,00 | 11,00 |
| Композиция 32 | 63,00 | 1,00 | 0,00 | 23,75 | 0,00 | 1,25 | 0,00 | 11,00 |
| Композиция 33 | 58,00 | 1,00 | 0,00 | 28,50 | 0,00 | 1,50 | 0,00 | 11,00 |
| Композиция 34 | 63,00 | 1,00 | 0,00 | 22,50 | 0,00 | 2,50 | 0,00 | 11,00 |
| Композиция 35 | 58,00 | 1,00 | 0,00 | 27,00 | 0,00 | 3,00 | 0,00 | 11,00 |
| Композиция 36 | 66,00 | 3,00 | 0,00 | 18,00 | 0,00 | 2,00 | 0,00 | 11,00 |
| Композиция 37 | 64,00 | 5,00 | 0,00 | 18,00 | 0,00 | 2,00 | 0,00 | 11,00 |
| Композиция 38 | 61,00 | 3,00 | 0,00 | 22,50 | 0,00 | 2,50 | 0,00 | 11,00 |
| Композиция 39 | 59,00 | 5,00 | 0,00 | 22,50 | 0,00 | 2,50 | 0,00 | 11,00 |
| Композиция 40 | 61,00 | 3,00 | 0,00 | 23,125 | 0,00 | 1,875 | 0,00 | 11,00 |
Значения приведены в вес. %.
Пример 2. Добавление и фитотоксичность Span™ 60
Составы с Span™ 60 и без него получали как описано ниже и затем тестировали на фитотоксичность. Цель состояла в том, чтобы определить, может ли фитотоксичность быть сведена к минимуму при сохранении свойств эмульсии состава, а также в сведении к минимуму осаждения остатков масла и спор на пластиковых поверхностях.
Составы, приведенные ниже в таблице 3, получали следующим образом: SunSpray® 6N объединяли с Cab-O-Sil® M-5 и перемешивали в течение 3 минут на высокой скорости с применением лабораторного смесителя Waring Commercial. Полученную жидкость разделяли выливанием 100 мл в отдельные стеклянные графины Ball mason jar. Быстро добавляли остальные компоненты и перемешивали в течение 2 минут. Каждый разливали в 250 бутылок. К каждому образцу добавляли технически чистый порошок спор MET52 и каждый образец встряхивали на встряхивателе Burrell Wrist-Action в течение 10 минут. И наконец, в процессе подготовки к оценке фитотоксичности каждый образец делили между двумя пластиковыми бутылками из LDPE на 50 мл.
Перед оценкой фитотоксичности составы разбавляли в стеклянных колбах Эрленмейера до веса либо 0,8%, либо 1,6% водой, характеризующейся следующими свойствами (K 5,21 мг/л; Са 30,39 мг/л мг; Mg 19,41 мг/л; Na 1,5 мг/л; PO4 0,38 мг/л; SO4 12,78 мг/л; Cl 2,1 мг/л; HCO3 176 мг/л; CO3 - нет данных; NH4-N 0,5 мг/л; NO3-N 0,2 мг/л; рН 7,2; растворимые соли EC 0,32 мг/л; общая щелочность CaCO3 144,27 мг/л; Fe - нет данных; Mn - нет данных; B 0,03 мг/л; Cu 0,01 мг/л; Zn - нет данных; Мо 0,01 мг/л; Al 0,05 мг/л). В колбу добавляли приблизительно ½ от измеренного количества воды. Затем в колбу добавляли требуемое количество состава. После этого в колбу добавляли оставшееся количество измеренной воды и встряхивали. Эти водные суспензии применяли в течение 5 минут после приготовления.
Насадку для аэрозольного орошения применяли для обработки либо 3-недельных гераней Maverick Red, либо 4-недельных огурцов Wisconsin. Для каждого растения делали 6 повторностей. Применения повторяли через 4 дня и окончательную оценку фитотоксичности делали через 7 дней после первого применения. Фитотоксичность оценивали по шкале 1-10, где 10 представляет собой самый значительный наблюдаемый ущерб. Герани проявляли фитотоксичность в виде некротических поражений, а огурцы проявляли фитотоксичность в виде краевого ожога и эпинастии. Сравнивали различия между обработками с применением нового способа множественного сравнения Дункана с уровнем значимости 5%. Множественные сравнения осуществляется только тогда, когда общая F-статистика имеет важное значение на заранее оговоренном значимом уровне (р=0,1). Данные в таблице 3 представляют собой совокупность испытаний, которые включали 29 обработок.
Таблица 3. Сравнение фитотоксичности среди различных составов
| Экспериментальный состав | Масло Sunspray 6N | Cab-O-Sil M-5 | Cirrasol G-1086 |
Span 60 | % NIS в виде Span | Герань при 1,6% составе (вес./вес.) | Огурец при 0,8% составе (вес./вес.) | Огурец при 1,6% составе (вес./вес.) |
| A без | 75,5 | 1 | 12,5 | 0 | 0 | 2,7 de | 4,0 cd | 5,8 b |
| A с | 75,5 | 1 | 12,34 | 0,16 | 1,3 | 1,6 fgh | 2,5 e-j | 4,5 c |
| Различие для A | -1,4 | -1,5 | -1,3 | |||||
| C без | 80,5 | 1 | 7,5 | 0 | 0 | 2,0 efg | 1,9 g-l | 3,6 cde |
| C с | 80,5 | 1 | 7,403 | 0,098 | 1,3 | 1,1 ghi | 1,8 h-l | 2,1 g-k |
| Различие для C | -0,9 | -0,1 | -1,5 | |||||
| LSD (P=0,10) | 0,68 | 0,76 | ||||||
| Среднеквадратическое отклонение | 0,77 | 0,64 | ||||||
| CV | 61,62 | 23,45 | ||||||
| X2 Бартлетта | 96,003 | 35,758 | ||||||
| P (X2 Бартлетта) | 0,001 | 0,058 | ||||||
| Обработка F | 33,258 | 39,916 | ||||||
| Вероятн. обработка (F) | 0,0001 | 0,0001 |
* Означает, что в строках идет одна и та же буква и столбцы для двух норм внесения одного и того же типа растений существенно не отличаются (Р=0,1, Студента-Ньюмена-Кейлса)
** Все составы содержали 11% спор Metarhizium anisopliae по весу.
Эти исследования показывают снижение фитотоксичности составов, когда Span™ 60 применяли в качестве компонента системы поверхностно-активного вещества. В 11 из 16 сравнений добавление Span™ 60 снижало фитотоксичность. Вывод состоит в том, что добавление Span™ 60 к составу снижало фитотоксичность.
Пример 3. Варьирование концентраций Span™ 60
Составы с возрастающими концентрациями Span™ 60, как описано в таблице 4, получали как описано в примере 2.
Проводили тестирование фитотоксичности на огурце и данные анализировали как описано в примере 2, за исключением того, что окончательные оценки повреждений делали через 8 дней, а не через 7 дней после первоначального применения. Данные в таблице 4 представляют собой совокупность данных испытания, которое включало 29 обработок.
Таблица 4. Сравнение фитотоксичности по отношению к огурцу среди различных составов.
| Экспериментальный состав | Масло Sunspray 6N | Cab-O-Sil M-5 | Cirrasol G-1086 |
Span 60 | % NIS в виде Span | Atlox Metasperse 550S | Огурец при 0,8% составе (вес./вес.) | Огурец при 1,6% составе (вес./вес.) |
| Контроль | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 i | 0 i |
| E без | 78 | 1 | 10 | 0 | 0 | 0 | 3,2 b-e | 3,4 bcd |
| E1 с 5%** | 78 | 1 | 9,5 | 0,5 | 5 | 0 | 3,9 d-h | 5,9 a |
| E2 с 10% | 78 | 1 | 9 | 1 | 10 | 0 | 2,35 c-g | 2,6 b-f |
| E3 с 15% | 78 | 1 | 8,5 | 1,5 | 15 | 0 | 2 e-i | 2,6 b-f |
| Различие для E1 | +0,4 | +2,5* | ||||||
| Различие для E2 | -0,85 | -0,8 | ||||||
| Различие для E3 | -1,2 | -0,8 | ||||||
| F без | 73 | 1 | 10 | 0 | 0 | 5 | 2,4 c-g | 2,7 b-f |
| F1 с 5% | 73 | 1 | 9,5 | 0,5 | 5 | 5 | 2,4 d-h | 2,9 b-e |
| F2 с 10% | 73 | 1 | 9 | 1 | 10 | 5 | 1,55 e-i | 1,7 e-h |
| F3 с 15% | 73 | 1 | 8,5 | 1,5 | 15 | 5 | 1 f-i | 0,9 ghi |
| Различие для F1 | 0 | -0,2 | ||||||
| Различие для F2 | -0,85 | -1 | ||||||
| Различие для F3 | -1,4 | -1,8* | ||||||
| G без | 68 | 1 | 10 | 0 | 0 | 10 | 5,05 c-g | 7,1 b-f |
| G1 с 5% | 68 | 1 | 9,5 | 0,5 | 5 | 10 | 3,75 d-h | 3,6 b-e |
| G2 с 10% | 68 | 1 | 9 | 1 | 10 | 10 | 1,65 e-i | 1,6 e-h |
| G3 с 15% | 68 | 1 | 8,5 | 1,5 | 15 | 10 | 1,7 f-i | 1,7 ghi |
| Различие для G1 | -1,3 | -3,5 | ||||||
| Различие для G2 | -3,4 | -5,5 | ||||||
| Различие для G3 | -3,35 | -5,4* |
** Все составы содержали 11% спор Metarhizium anisopliae по весу.
** Выражено в виде процента поверхностно-активного вещества, полученного с помощью Span 60.
Данные показывают, что увеличение содержания Span™ 60 по отношению к общему содержанию анионного поверхностно-активного вещества снижает фитотоксичность. В каждом из тестируемых составов наблюдали тенденцию снижения фитотоксичности, когда уровни Span™ 60 увеличивали.
Пример 4. Сравнение Span™ 60 и Span™ 80
Составы, содержащие Span™ 60 и Span™ 80, как описано в таблице 5, получали как описано в примере 2. Проводили тестирование фитотоксичности на герани и огурце и данные анализировали как описано в примере 2, за исключением того, что окончательные оценки повреждений делали через 8 дней, а не через 7 дней после первоначального применения. Данные в таблице 5 представляют собой совокупность испытаний, которые включали 29 обработок.
Таблица 5. Сравнение фитотоксичности по отношению к герани и огурцу среди различных составов.
| Экспериментальный состав | Масло Sunspray 6N | Cab-O-Sil M-5 | Cirrasol G-1086 |
Span 60 | Span 80 | % NIS в виде Span | Atlox Metasperse 550S | Герань при 0,8% составе (вес./вес.) | Герань при 1,6% составе (вес./вес.) | Огурец при 0,8% составе (вес./вес.) | Огурец при 1,6% составе (вес./вес.) |
| Контроль | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 c | 0 c | 0 c | 0 c |
| H | 78 | 1 | 10 | 0 | 0 | 0 | 0 c | 0,67 bc | 0,17 bc | 0,83 bc | |
| I | 73 | 1 | 9 | 1 | 10 | 5 | 0,33 bc | 0,33 bc | 0,17 bc | 0,5 bc | |
| J | 73 | 1 | 9 | 0 | 1 | 10 | 5 | 0 c | 0 c | 0,83 bc | 1,5 abc |
| K | 68 | 1 | 14,25 | 0 | 0,75 | 5 | 5 | 0,17 c | 0,5 bc | 1 bc | 0,33 bc |
| L | 68 | 1 | 12,75 | 0 | 2,25 | 15 | 5 | 0 c | 0,17 c | 0,5 bc | 0,5 bc |
| M | 63 | 1 | 19 | 0 | 1 | 5 | 5 | 0,17 c | 0,17 c | 1,33 abc | 1,33 abc |
| N | 63 | 1 | 17 | 0 | 3 | 15 | 5 | 0 c | 0 c | 1,67 ab | 0,5 bc |
** Все составы содержали 11% спор Metarhizium anisopliae по весу.
Приведенные в таблице 5 данные показывают, что является возможным переход от Span™ 60 к Span™ 80 и увеличение общего содержания поверхностно-активного вещества с 5% до 20% с сохранением при этом процентного содержания Span™ 80 в составе и с прежним сохранением низкой фитотоксичности.
Эти данные указывают на то, что Span™ 80 можно применять в качестве замены для Span™ 60 и что общее содержание поверхностно-активного вещества в составе может быть увеличено, не вызывая фитотоксичности, если Span™ 80 является компонентом системы поверхностно-активных веществ.
Пример 5. Дополнительные исследования фитотоксичности
Показанные в таблице 6 составы получали и тестировали как описано в примере 2, за исключением того, что окончательные оценки фитотоксичности делали через 8 дней, а не через 7 дней после первоначального применения.
Таблица 6. Сравнение фитотоксичности по отношению к герани и огурцу среди различных составов.
| Экспериментальный состав | Масло Sunspray 6N | Cab-O-Sil M-5 | Cirrasol G-1086 |
Span 80 | % NIS в виде Span | Герань при 0,8% составе (вес./вес.) | Герань при 1,6% составе (вес./вес.) | Огурец при 0,8% составе (вес./вес.) | Огурец при 1,6% составе (вес./вес.) |
| 1 | 56% | 3% | 27,75 | 2,25% | 7,5% | 0 | 0 | 0,00 e | 0,05 c |
| 2 | 56% | 3% | 30% | 0% | 0% | 0 | 0 | 0,00 e | 0,05 c |
| 3 | 56% | 3% | 28,5% | 0,3% | 1% | 0 | 0 | 0,01d | 0,10 b |
| 4 | 56% | 3% | 27,75% | 0,75% | 2,5% | 0 | 0 | 0,05 c | 0,05 c |
| 5 | 56% | 3% | 28,5% | 1,5% | 5% | 0 | 0 | 0,10 b | 0,10 b |
| 6 | 56% | 3% | 27,75% | 2,25% | 7,5% | 0 | 0 | 0,10 b | 0,05 c |
| 7 | 56% | 3% | 27% | 3% | 10% | 0 | 0 | 0,05 c | 0,10 b |
| 8 | 56% | 3% | 25,5% | 4,5% | 15% | 0 | 0 | 0,00 e | 0,10 b |
| 9 | 56% | 3% | 24% | 6% | 20% | 0 | 0 | 0,20 a | 0,20 a |
| 10 | 56% | 3% | 22,5% | 7,5% | 25% | 0 | 0 | 0,05 c | 0,10 b |
| LSD (P=0,10) | 0,000 | ||||||||
| Среднеквадратическое отклонение | 0,000 | ||||||||
| CV | 0,0 | ||||||||
| Bartlett’s X2 | 0,0 | ||||||||
| P (Bartlett’s X2) | |||||||||
| Асимметричность | 0,828 | ||||||||
| Коэффициент эксцесса | 0,3925 | ||||||||
| Обработка F | 0,000 | ||||||||
| Вероятн. обработка (F) | 1,0000 |
* Означает, что в строках идет одна и та же буква и столбцы для двух норм внесения одного и того же типа растений существенно не отличаются (Р=0,05, новый MRT Дункана).
** Все составы содержали 11% спор Metarhizium anisopliae по весу.
Подводя итог исследования фитотоксичности, при более низких концентрациях общего содержания поверхностно-активного вещества фитотоксичность уменьшается, когда относительное количество Span™ 60 или относительное количество Span™ 80 возрастает; в то время как при более высоких концентрациях общего содержания поверхностно-активного вещества фитотоксичность низкая для всех относительных количеств Span™ 60 или Span™ 80.
Пример 6. Образование остатков на пластике
Составы с различными концентрациями Span™ 60 получали как описано в примере 2 и приведено в таблице 7. Составы разбавляли до 0,4% вес./вес. в искусственной жесткой воде. Концентрированный исходный раствор (1 л) жесткой воды (номинально 1500 ppm CaCO3) получали с помощью растворения 1,47 г CaCl2·2H2O (Фишера) и 1,02 г MgCl2·6H2O (Sigma Aldrich) в 997,52 г деионизированной воды. Жесткость воды исходного раствора проверяли с применением тестового набора Hach (модель № HA-71A). Типичная жесткость для исходного раствора составляла 1500 ppm CaCO3. 342 ppm тестового раствора жесткой воды получали с помощью соответствующего разбавления исходного раствора деионизированной водой. Образец 100 мл каждого 0,4% разбавления встряхивали при настройке 10 на встряхивателе модели Burrell 75, имитирующем движение запястья, в горизонтальном положении в течение 15 минут. Затем пять человек ранжировали составы путем присвоения числа 1-14, с 1 для имеющего наименьшее количество остатка на стенке бутылки и 14 для имеющего наибольшее количество остатка на стенке бутылки. Среднее значение этих градаций представлено в таблице 7 как "Остаток на пластике после встряхивания". 100 мл образца каждого 0,4% раствора перемешивали с применением магнитной мешалки в течение 1 часа. Затем пять человек ранжировали составы путем присвоения числа 1-14, с 1 для имеющего наименьшее количество остатка на стенке бутылки и 14 для имеющего наибольшее количество остатка на стенке бутылки. Эти бутылки с образцами также ранжировали по остаткам, остающимся на поверхности воды, с применением тех же оценок 1-14. Среднее значение этих градаций представлено в таблице 7 как ʺОстаток на пластике после перемешиванияʺ и ʺПлавание состава на поверхности водыʺ, соответственно. Среднее из этих трех градаций представлено в таблице 7 как ʺИтоговое сравнение остатковʺ.
Таблица 7. Сравнение остающихся на пластике остатков и распределение среди различных составов.
| Экспериментальный состав | Масло Sunspray 6N | Cab-O-Sil M-5 | Cirrasol G-1086 |
Span 60 | % NIS в виде Span | Atlox Metasperse 550S | Остаток на пластике после встряхивания (1-14) | Остаток на пластике после перемешивания (1-14) |
Плавание состава на поверхности воды (1-14) |
Итоговое сравнение остатков |
| E без | 78 | 1 | 10 | 0 | 0 | 0 | 2,2 | 2,2 | 4,7 | 3,0 |
| E1 с 5%** | 78 | 1 | 9,5 | 0,5 | 5 | 0 | 8,2 | 4,4 | 4,1 | 5,6 |
| E2 с 10% | 78 | 1 | 9 | 1 | 10 | 0 | 7,4 | 8,5 | 10,2 | 8,7 |
| E3 с 15% | 78 | 1 | 8,5 | 1,5 | 15 | 0 | 12,2 | 10,6 | 10,4 | 11,1 |
| F без | 73 | 1 | 10 | 0 | 0 | 5 | 11,4 | 12,2 | 11,5 | 11,7 |
| F1 с 5% | 73 | 1 | 9,5 | 0,5 | 5 | 5 | 4,6 | 5 | 5,4 | 5,0 |
| F2 с 10% | 73 | 1 | 9 | 1 | 10 | 5 | 3,4 | 9,2 | 8,8 | 7,1 |
| F3 с 15% | 73 | 1 | 8,5 | 1,5 | 15 | 5 | 4,8 | 5,8 | 5,5 | 5,4 |
| G без | 68 | 1 | 10 | 0 | 0 | 10 | 9,4 | 5,8 | 6,0 | 7,1 |
| G1 с 5% | 68 | 1 | 9,5 | 0,5 | 5 | 10 | 7 | 7 | 7,2 | 7,1 |
| G2 с 10% | 68 | 1 | 9 | 1 | 10 | 10 | 6,6 | 1,6 | 1,3 | 3,2 |
| G3 с 15% | 68 | 1 | 8,5 | 1,5 | 15 | 10 | 2,6 | 2,6 | 3,3 | 2,8 |
** Все составы содержали 11% спор Metarhizium anisopliae по весу.
** Выражено в виде процента поверхностно-активного вещества, полученного с помощью Span 60.
Эти исследования показывают диапазон остатков для различных составов. Как правило, повышенные количества остатков в виде количества Span™ 60 по отношению к общему количеству неионного поверхностно-активного вещества в составах увеличились.
Кроме того, подобные исследования остатков проводили с составами, показанными в таблице 6. Как правило, данные показали увеличение остатков по мере увеличения концентраций Span™ 80 по отношению к общему количеству неионного поверхностно-активного вещества в составах. Более конкретно, для тестируемых составов, которые содержали 30% общего количества неионного поверхностно-активного вещества, количество остатков заметно увеличивалось, когда содержание Span™ 80 в составе увеличивалось до более 10% от общего содержания неионного поверхностно-активного вещества.
1. Биопестицид, содержащий подходящий с точки зрения сельского хозяйства носитель, пестицидно эффективное количество по меньшей мере одного пестицида на основе грибов, по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество на основе сорбитана и жирной кислоты, а также по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество, представляющее собой сложный эфир этоксилата сорбита.
2. Биопестицид по п. 1, где по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество на основе сорбитана и жирной кислоты включает сорбитанмоностеарат или сорбитанмоноолеат, и по меньшей мере одно поверхностно-активное вещество, представляющее собой сложный эфир этоксилата сорбита, включает полиоксиэтиленсорбитгексаолеат.
3. Биопестицид по п. 2, где сорбитанмоностеарат включает Span™ 60, а сорбитанмоноолеат включает Span™ 80.
4. Биопестицид по п. 2, где полиоксиэтиленсорбитгексаолеат включает полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеат.
5. Биопестицид по п. 2, где полиоксиэтиленсорбитгексаолеат включает Cirrasol® G-1086.
6. Биопестицид по п. 1, где общее количество поверхностно-активного вещества составляет от приблизительно 1 до приблизительно 50 вес. %, от приблизительно 2 до приблизительно 30 вес. %, от приблизительно 24 до приблизительно 36 вес. %, от приблизительно 27 до приблизительно 33 вес. % или от приблизительно 29 до приблизительно 31 вес. % биопестицида.
7. Биопестицид по п. 1, где общее количество поверхностно-активного вещества на основе сорбитана и жирной кислоты составляет от приблизительно 0,5 до приблизительно 7,5 вес. %, а общее количество поверхностно-активного вещества, представляющего собой сложный эфир этоксилата сорбита, составляет от приблизительно 7,5 до приблизительно 30 вес. % биопестицида.
8. Биопестицид по п. 1, где соотношение поверхностно-активного вещества на основе сорбитана и жирной кислоты и поверхностно-активного вещества, представляющего собой сложный эфир этоксилата, составляет от приблизительно 0,02 к 1 до приблизительно 0,25 к 1.
9. Биопестицид по п. 1, где общее количество поверхностно-активного вещества составляет приблизительно 30 вес. % биопестицида, поверхностно-активное вещество на основе сорбитана и жирной кислоты включает сорбитанмоноолеат, поверхностно-активное вещество, представляющее собой сложный эфир этоксилата сорбита, включает полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеат, а соотношение между сорбитанмоноолеатом и полиоксиэтилен (40) сорбитгексаолеатом составляет приблизительно 0,08 к 1.
10. Биопестицид по п. 1, где биопестицид включает противоосаждающее средство.
11. Биопестицид по п. 10, где противоосаждающее средство включает высокодисперсный оксид кремния.
12. Биопестицид по п. 1, где приемлемый с точки зрения сельского хозяйства носитель включает парафиновое масло.
13. Биопестицид по п. 1, который при разведении водой в количестве от приблизительно 5,00 г биопестицида на 95,00 г воды до приблизительно 0,01 г биопестицида на 99,99 г воды хорошо диспергируется, не засоряет аппарат для доставки, при применении биопестицида для приведения в контакт с растением, и вызывает минимальное фитотоксическое повреждение растения.
14. Биопестицид по п. 1, где по меньшей мере один пестицид на основе грибов включает Alternaria cassiae, Fusarium lateritum, Fusarium solani, Verticillium lecanii, Aspergillus parasiticus, Metarhizium anisopliae или Beauveria bassiana.
15. Биопестицид по п. 1, где по меньшей мере один пестицид на основе грибов включает штамм Metarhizium anisopliae с номером доступа при депонировании DSM 3884, с номером доступа при депонировании DSM 3885 или их комбинации.
16. Биопестицид, содержащий подходящий с точки зрения сельского хозяйства носитель, пестицидно эффективное количество штамма Metarhizium anisopliae, поверхностно-активное вещество на основе сорбитана и жирной кислоты, а также поверхностно-активное вещество, представляющее собой сложный эфир этоксилата сорбита;
при этом биопестицид можно разводить в воде до приблизительно 0,8 г биопестицида на 99,2 г воды с получением разведенного биопестицида;
разведенный биопестицид можно доставлять без того, чтобы Metarhizium anisopliae прилипал/приклеивался ко внутренней стенке устройства для доставки и без фитотоксического эффекта в отношении растения при применении разведенного биопестицида к растению.
17. Способ контроля вредителя растений, включающий
приведение вредителя растений в контакт с биопестицидом, который включает подходящий с точки зрения сельского хозяйства носитель, пестицидно эффективное количество по меньшей мере одного пестицида на основе грибов, поверхностно-активное вещество на основе сорбитана и жирной кислоты, а также поверхностно-активное вещество, представляющее собой сложный эфир этоксилата сорбита.
18. Способ по п. 18, где поверхностно-активное вещество на основе сорбитана и жирной кислоты включает сорбитанмоностеарат или сорбитанмоноолеат, а поверхностно-активное вещество, представляющее собой сложный эфир этоксилата сорбита, включает полиоксиэтиленсорбитгексаолеат.
19. Способ по п. 18, где сорбитанмоностеарат включает Span™ 60, сорбитанмоноолеат включает Span™ 80, а полиоксиэтиленсорбитгексаолеат включает Cirrasol® G-1086.
20. Способ по п. 17, включающий, перед стадией приведения в контакт,
разведение биопестицида водой в количестве не более чем 0,8 г биопестицида на 99,2 г воды.
21. Способ по п. 20, где приведение вредителя растения в контакт с разведенным биопестицидом не засоряет аппарат для доставки и вызывает минимальное фитотоксическое повреждение растения.
