Имидазопиридазины

Изобретение относится к области органической химии, а именно к гетероциклическому соединению формулы I или к его фармацевтически приемлемой соли, где А представляет собой пиридил, замещенный одним или двумя А'; каждый А' независимо представляет собой С1-6 алкил, С1-6 алкокси, С1-6 галоалкил, пирролидинил, пиперидинил, возможно замещенный одним или двумя С1-6 алкилами; n представляет собой 0 или 1; В представляет собой фенил; каждый R независимо представляет собой -C(=O)R¹, -C(=O)OR¹ или -C(=O)NHR¹; R¹ представляет собой Н или R^1'; R^1' представляет собой С1-6 алкил, фенил, индолил, индазолил, пиридинил С1-6 алкил или морфолинил, возможно замещенный одним или двумя ; каждый представляет собой гидрокси, С1-6 алкил, С1-6 алкокси, карбокси или оксо. Также описываются конкретные производные имидазо[1,2-b]пиридазина. Технический результат: получены новые гетероциклические соединения, полезные в качестве ингибиторов SYK. 2 н. и 6 з.п. ф-лы, 1 табл., 96 пр.

I

 

Протеинкиназы являются одним из самых крупных семейств ферментов человека и регулируют множество различных сигнальных процессов посредством присоединения фосфатных групп к белкам, в частности тирозинкиназы фосфорилируют белки по спиртовой группе тирозина. Семейство тирозинкиназ включает в себя ферменты, которые контролируют клеточный рост, миграцию и дифференцировку клеток. Аномальная активность киназ вовлечена в различные заболевания человека, включая рак, аутоиммунные и воспалительные заболевания. Так, протеинкиназы являются одними из ключевых регуляторов клеточной сигнализации, они являются модуляторами клеточной функции вместе с низкомолекулярными ингибиторами киназной активности и, тем самым, представляют собой хорошие цели при разработке лекарственных препаратов. В дополнение к лечению опосредованных киназами процессов заболевания, селективные и эффективные ингибиторы киназ также полезны для изучения клеточных сигнальных процессов и выявления других клеточных мишеней, интересных с терапевтической точки зрения.

SYK (тирозинкиназа селезенки) представляет собой безрецепторную тирозинкиназу, которая важна для В-клеточной активации через BCR сигналинг. SYK активируется при связывании с фосфорилированным BCR и, таким образом, инициирует ранние сигналинговые события после BCR активации. Мыши, дефицитные по SYK проявляют раннюю блокировку развития В-клеток. Поэтому, в качестве средства для лечения аутоиммунных заболеваний предлагается ингибирование ферментативной активности SYK в клетках посредством его воздействия на продукцию аутоантител.

В дополнение к роли SYK в сигналинге BCR и активации В-клеток, она также играет ключевую роль в FcεRI-опосредованной дегрануляции тучных клеток и активации эозинофилов. Так, SYK вовлечена в аллергические заболевания, включая астму. SYK связывает фосфорилированную гамма-цепь FcεRI через ее SH2-домены и является существенной для нисходящего сигналинга. Дефицитные по SYK тучные клетки показали нарушенную дегрануляцию и секрецию арахидоновой кислоты и цитокинов. Это также было показано для фармацевтических агентов, ингибирующих активность SYK в тучных клетках. Обработка антисмысловыми олигонуклеотидами SYK ингибирует антиген-индуцированную инфильтрацию эозинофилами и нейтрофилами в модели астмы на животных. Эозинофилы, дефицитные по SYK также показали нарушенную активацию в ответ на стимуляцию FcεR. Таким образом, низкомолекулярные ингибиторы SYK будут полезными для лечения вызванных аллергией воспалительных заболеваний, включая астму.

Ввиду многочисленных состояний, для которых ожидается польза при лечении, включающем модуляцию сигнального пути SYK, сразу становится очевидным, что новые соединения, которые модулируют сигнальный путь SYK и способы применения этих соединений должны обеспечить существенные терапевтические улучшения для широкого спектра пациентов. В настоящем изобретении предложены новые соединения для применения при терапевтическом лечении аутоиммунных и воспалительных заболеваний посредством воздействия на сигнальный путь SYK или посредством ингибирования SYK киназы.

В настоящем изобретении предложено соединение Формулы I

где:

А представляет собой пиридил, пирролидинил или пиразолил, замещенный одним или более А';

каждый А' независимо представляет собой низший алкил, низший алкокси, низший галоалкил, гидрокси низший алкил, пирролидинил, пиперидинил, бициклический гетероциклоалкил, возможно замещенный низшим алкилом;

n представляет собой 0, 1 или 2;

В представляет собой фенил, пиридил, пирролидинил, или пиперидинил;

каждый R независимо представляет собой гало, гидрокси, низший алкил, низший алкокси, низший галоалкил, циано, гетероциклоалкил низший алкил, -NH(С=O)R¹, -С(=O)R¹, -С(=O)OR¹, -O(СН₂)_pR¹, CH₂R¹, CH₂NHR¹, или -С(=O)NHR¹;

или два R вместе образуют бициклическую гетероарильную или гетероциклоалкильную кольцевую систему;

R¹ представляет собой Н или R^1';

R^1' представляет собой низший алкил, фенил, индолил, индазолил, гетероарил низший алкил или гетероциклоалкил, возможно замещенный одним или более ;

каждый представляет собой гидрокси, низший алкил, низший алкокси, карбокси, амидо, амино, диалкиламино, или оксо; и

p представляет собой 0, 1 или 2;

или его фармацевтически приемлемая соль.

В настоящем изобретении предложен способ лечения воспалительных или аутоиммунных заболеваний, содержащий введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества соединения Формулы I.

В настоящем изобретении предложена фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество соединения Формулы I, в смеси с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом или разбавителем.

Определения

Указанное в настоящем изобретении единственное число относится также и к множественному числу, например, соединение обозначает одно или более соединений или по меньшей мере одно соединение. Таким образом, единственное число, «один или более» и «по меньшей мере один» могут использоваться в настоящем изобретении взаимозаменяемо.

Фраза «как определено выше» относится к самому широкому определению для каждой группы, как предложено в разделе «Сущность изобретения» или самом широком пункте формулы изобретения. Во всех остальных воплощениях, предложенных далее, заместители, которые могут быть представлены в каждом воплощении и которые не определены явным образом, сохраняют самое широкое определение, данное в разделе «Сущность изобретения».

Как используется в настоящем изобретении, в переходной фразе или в пункте формулы изобретения, термин «содержит» или «содержащий» подразумевает неограничивающее значение. Другими словами, указанный термин является синонимом фраз «имеющий по меньшей мере» или «включающий по меньшей мере». Когда термин «содержащий» используется в контексте способа, он означает, что способ включает по меньшей мере перечисленные стадии, но может также включать дополнительные стадии. Когда термин «содержащий» используется в контексте соединения или композиции, он означает, что соединение или композиция включают по меньшей мере перечисленные признаки или компоненты, но также могут содержать дополнительные признаки или компоненты.

Как используется в настоящем изобретении, если специально не указано другого, слово «или» используется во «включительном» смысле «и/или», а не в альтернативном смысле «тот или иной».

Термин «независимо» используется в настоящем изобретении для обозначения, что варианты применимы к любому отдельному случаю безотносительно к присутствию или отсутствию переменной с таким же значением или разных определений внутри одного и того же соединения. Так, соединение, у которого R'' показано дважды и определено как «независимо углерод или азот», оба R'' могут быть углеродами, оба R'' могут быть азотами, или один R'' может быть углеродом, а другой - азотом.

Когда любые переменные встречаются более одного раза в любом остатке или формуле, обозначающим или описывающим применяемые или охватываемые настоящим изобретением соединения, их определения в каждом случае являются независимыми от определений в любых других случаях. Также, комбинации заместителей и/или переменных являются возможными только в случае, если такие соединения являются стабильными.

Символы "^*" на конце связи или "^------" прорисованные через связь, каждый обозначает точку присоединения функциональной группы или другого химического остатка к остову молекулы, частью которой он является. Так, например:

Связь, изображенная внутри кольцевой системы (в отличие от присоединенных к отдельным вершинам) обозначает, что связь может быть присоединена к любому подходящему кольцевому атому.

Термин "необязательный" или "необязательно" используемый в настоящем изобретении означает, что далее описанные события или обстоятельства могут, но не обязательно, иметь место, при этом описание включает примеры, где события или обстоятельства имеют место, и примеры, где не имеют. Например, «необязательно замещенный» означает, что необязательно замещенный остаток может включать атом водорода или заместитель.

Фраза «необязательная связь» означает, что связь может присутствовать или не присутствовать, и что описание включает простую, двойную или тройную связь. Если заместитель определен как «связь» или «отсутствует», атомы, связанные с данным заместителем тогда являются связанными напрямую.

Термин «около» используется в настоящем изобретении для обозначения приблизительно, в области, примерно или вблизи. Когда термин «около» используется вместе с числовым диапазоном, он изменяет этот диапазон расширением верхней и нижней границы указанных числовых значений. В общем, термин «около» используется в настоящем изобретении для изменения числового значения выше и ниже указанного значения на отклонение в 20%

Некоторые соединения могут проявлять таутомеризм. Таутомерные соединения могут существовать в виде двух или более взаимопереходящих видов. Прототропные таутомеры образуются в результате миграции ковалентно связанного атома водорода между двумя атомами. Таутомеры обычно существуют в равновесии, и попытки изолировать отдельные таутомеры обычно приводят к получению смеси, химические и физические свойства которой соответствуют смеси соединений. Положение равновесия зависит от химических свойств внутри молекулы. Например, у многих алифатических альдегидов и кетонов, таких как ацетальдегид, преобладает кето-форма, в то время как у фенолов преобладает енольная форма. Часто встречающиеся прототропные таутомеры включают кето/енол (-С(=O)-СН- ↔ -С(-ОН)=СН-), амид/имидовая кислота (-С(=O)-NH- ↔ -С(-ОН)=N-) и амидиновые (-С(=NR)-NH- ↔ -С(-NHR)=N-) таутомеры. Последние два особенно распространены в гетероарильных и гетероциклических кольцах, и настоящее изобретение охватывает все таутомерные формы заявленных соединений.

Технические и научные термины, используемые в настоящем изобретении, имеют значение, обычно понимаемое квалифицированным специалистом в данной области техники, к которой относится настоящее изобретение, если не указано иного. Различные способы и материалы, на которые ссылается настоящее изобретение, известны специалистам в данной области техники. Стандартные справочные издания, в которых излагаются общие принципы фармакологии включают Goodman and Gilman's The Pharmacological Basis of Therapeutics, 10^th Ed., McGraw Hill Companies Inc., New York (2001). Любые подходящие материалы и/или способы, известные квалифицированным специалистам могут быть использованы при осуществлении настоящего изобретения. Однако, предпочтительные материалы и способы описаны. Материалы, реагенты и т.п., на которые ссылается следующее описание и примеры могут быть получены из коммерческих источников, если не указано иного.

Определения, описанные в настоящем изобретении, могут соединяться с образованием химически релевантных комбинаций, таких как "гетероалкиларил", "галоалкилгетероарил", "арилалкилгетероциклил", "алкилкарбонил", "алкоксиалкил" и т.п. Когда термин "алкил" используется в качестве суффикса после очередного термина, как в "фенилалкиле" или "гидроксиалкиле", это предназначено для обозначения алкильной группы, как определено выше, замещенной одним или двумя заместителями, выбранными из другой специально обозначенной группы. Так, например, "фенилалкил" относится к алкильной группе, содержащей от одного до двух фенильных заместителей, и, таким образом, включает бензил, фенилэтил и бифенил. "Алкиламиноалкил" представляет собой алкильную группу, имеющую от одного до двух алкиламино заместителей. "Гидроксиалкил" включает в себя 2-гидроксиэтил, 2-гидроксипропил, 1-(гидроксиметил)-2-метилпропил, 2-гидроксибутил, 2,3-дигидроксибутил, 2-(гидроксиметил), 3-гидроксипропил и т.д. Соответственно, используемый в настоящем изобретении термин «гидроксиалкил» используется для обозначения подгруппы гетероалкильных групп, определенных ниже. Термин -(ар)алкил относится как к незамещенным алкильным или аралкильным группам. Термин (гетеро)алкил или (гет)арил относится как к арильным, так и к гетероарильным группам.

Термин "спироциклоалкил", как используется в настоящем изобретении, означает спироциклическую циклоалкильную группу, таку как, например, спиро[3.3]гептан. Термин спирогетероциклоалкил, как используется в настоящем изобретении, означает спироциклический гетероциклоалкил, такой как, например, 2,6-диазаспиро[3.3]гептан.

Термин "ацил", используемый в настоящем изобретении, означает группу формулы -С(=O)R, где R представляет собой водород или низший алкил как определено в настоящем изобретении. Термин "алкилкарбонил", используемый в настоящем изобретении, означает группу формулы С(=O)R, где R представляет собой алкил, как определено в настоящем изобретении. Термин С_1-6 ацил относится к группе -С(=O)R, содержащей 6 атомов углерода. Термин "арилкарбонил", используемый в настоящем изобретении, означает группу формулы С(=O)R, где R представляет собой арильную группу; термин "бензоил", используемый в настоящем изобретении, означает арилкарбонильную группу, где R представляет собой фенил.

Термин «эфир», как используется в настоящем изобретении, обозначает группу формулы -С(=O)OR, где R представляет собой низший алкил, как определено в настоящем изобретении.

Термин "алкил", используемый в настоящем изобретении, означает насыщенный, моновалентный, углеводородный остаток с неразветвленной или разветвленной цепочкой, содержащий от 1 до 10 атомов углерода. Термин "низший алкил" означает углеводородный остаток с неразветвленной или разветвленной цепочкой, содержащий от 1 до 6 атомов углерода. "С_1-10 алкил", используемый в настоящем изобретении, относится к алкилу, состоящему из 1-10 углеродных атомов. Примеры алкильных групп включают, без ограничения, низшие алкильные группы, включая метил, этил, пропил, i-пропил, n-бутил, изобутил, трет-бутил или пентил, изопентил, неопентил, гексил, гептил и октил.

Когда термин "алкил" используется в качестве суффикса со следующим далее термином, как, например, в терминах "фенилалкил" или "гидроксиалкил", он предназначен для обозначения алкильной группы, как определено выше, замещенной от одного до двух заместителей, выбранных из другой специфично названной группы. Так, например, "фенилалкил" обозначает радикал R'R''-, где R' представляет собой фенильный радикал, а R'' представляет собой алкиленовый радикал, как определено в настоящем изобретении, с пониманием того, что точка присоединения фенилалкильного остатка будет на алкиленовом радикале. Примеры арилалкильных радикалов включают, без ограничения, бензил, фенилэтил, 3-фенилпропил. Термины "арилалкил" или "аралкил" интерпретируются одинаково, исключая R' представляет собой арильный радикал. Термины "(гет)арилалкил" или "(гет)аралкил" интерпретируются одинаково, исключая R' представляет собой арильный или гетероарильный радикал.

Термин «галоалкил» или «гало-низший алкил» или «низший алкил» относится к углеводородному остатку с прямой или разветвленной цепочкой, содержащему 1-6 атомов углерода, где один или более атомов замещены одним или более атомами галогена.

Термин "алкилен" или "алкиленил", используемый в настоящем изобретении, означает бивалентный насыщенный линейный углеводородный радикал из от 1 до 10 атомов углерода (например, (СН₂)_n) или разветвленный насыщенный бивалентный углеводородный радикал из 2-10 атомов углерода (например, -СНМе- или -СН₂СН(i-Pr)СН₂-), если не указано иного. За исключением случая с метиленом, открытые валентности алкиленовой группы не присоединены к одному атому. Примеры алкиленовых радикалов включают, без ограничения, метилен, этилен, пропилен, 2-метил-пропилен, 1,1-диметил-этилен, бутилен, 2-этилбутилен.

Термин "алкокси", используемый в настоящем изобретении, означает -О-алкил группу, где алкил является таким, как определено выше, такую как метокси, этокси, n-пропилокси, i-пропилокси, n-бутилокси, i-бутилокси, t-бутилокси, пентилокси, гексилокси, включая их изомеры. "Низший алкокси", используемый в настоящем изобретении, означает алкокси группу с "низшей алкильной" группой, как определено выше. "С_1-10 алкокси", используемый в настоящем изобретении, относится к -О-алкилу, где алкил представляет собой С_1-10.

Термин "PCy₃" относится к фосфину, трехзамещенному тремя циклическими остатками.

Термин "галоалкокси" или "гало-низший алкокси" или "низший галоалкокси" относится к низшей алкоксигруппе, где один или более атомов углерода замещены одним или более атомами галогена.

Термин "гидроксиалкил", используемый в настоящем изобретении, означает алкильный радикал, как определено выше, где от одного до трех атомов водорода на разных атомах углерода заменен(ы) гидроксильной(ыми) группой(ами).

Термин "алкилсульфонил" и "арилсульфонил", как используется в настоящем изобретении, относится к группе формулы -S(=O)₂R, где R представляет собой алкил или арил соответственно, и алкил и арил являются такими, как определено в настоящем изобретении. Термин "гетероалкилсульфонил", как используется в настоящем изобретении, относится к группе формулы -S(=O)₂R, где R представляет собой "гетероалкил", как определено в настоящем изобретении.

Термины «алкилсульфониламино» и "арилсульфониламино", как используется в настоящем изобретении, относится к группе формулы -NR'S(=O)₂R, где R представляет собой алкил или арил соответственно, R' представляет собой водород или С_1-3 алкил, и алкил и арил являются такими, как определено в настоящем изобретении.

Термин "циклоалкил", используемый в настоящем изобретении, относится к насыщенному карбоциклическому кольцу, содержащему от 3 до 8 атомов углерода, например, циклопропил, циклобутил, циклопентил, циклогексил, циклогептил или циклооктил. "С_3-7 циклоалкил", используемый в настоящем изобретении, относится к циклоалкилу, содержащему 3-7 атомов углерода в карбоциклическом кольце.

Термин карбоксиалкил, как используется в настоящем изобретении, относится к алкильному остатку, в котором один атом водорода заменен карбоксилом, с понимание того, что точка присоединения гетероалкильного радикала находится на атоме углерода. Термин "карбокси" или "карбоксил" относится к остатку -CO₂ Ч.

Термины "гетероарил" или «гетероароматический», используемые в настоящем изобретении, означают моноциклический или бициклический радикал из 5-12 кольцевых атомов, имеющий по меньшей мере одно ароматическое или частично ненасыщенное кольцо, содержащее от четырех до восьми атомов на кольцо, включающих один или более гетероатомов N, O или S, остальные кольцевые атомы представляют собой углерод, принимая во внимание, что точка присоединения гетероарильного радикала будет находиться на ароматическом или частично ненасыщенном кольце. Как хорошо известно специалистам в области техники, гетероарильные кольца обладают меньшим ароматичеким характером, чем их полностью углеродные аналоги. Таким образом, для целей изобретения, гетероарильная группа должна обладать только некоторой степенью ароматического характера. Примеры гетероарильных остатков включают моноциклические ароматические гетероциклы с 5-6 кольцевыми атомами и 1-3 гетероатомами, включая, без ограничения, пиридинил, пиримидинил, пиразинил, оксазинил, пирролил, пиразолил, имидазолил, оксазолил, 4,5-дигидро-оксазолил, 5,6-дигидро-4Н-[1,3]оксазолил, изоксазол, тиазол, изотиазола, триазолин, тиадиазол и оксадиаксолин, которые могут быть возможно замещены одним или более, предпочтительно одним или двумя заместителями, выбранными из гидрокси, циано, алкил, алкокси, тио, низший галогеналкокси, алкилтио, гало, низший галогеналкил, алкилсульфинил, алкилсульфонил, галоген, амино, алкиламино, диалкиламино, аминоалкил, алкиламиноалкил и диалкиламиноалкил, нитро, алкоксикарбонил и карбамоил, алкилкарбамоил, диалкилкарбамоил, арилкарбамоил, алкилкарбониламино и арикарбониламино. Примеры бициклических остатков включают, без ограничения, хинолинил, изохинолинил, бензофурил, бензотиофенил, бензоксазол, бензизоксазол, бензотиазол, нафтиридинил, 5,6,7,8-тетрагидро-[1,6]нафтиридинил и бензизотиазол. Бициклические остатки могут быть возможно замещены в любом кольце, однако точки присоединения находятся на кольце, содержащем гетероатом.

Термины «гетероциклил», «гетероциклоалкил» или «гетероцикл», как используется в настоящем изобретении обозначает моновалентный насыщенный циклический радикал, состоящий из одного или более колец, предпочтительно одного или двух колец, включая спироциклические кольцевые системы, из 3-8 атомов на кольцо, включающих один или более кольцевых гетероатомов (выбранных из N, O или S(О)_0-2), и которые возможно могут быть независимо замещены одним или более, предпочтительно одним или двумя заместителями, выбранными из гидрокси, оксо, циано, низший алкил, низший алкокси, низший галогеналкокси, алкилтио, галоген, низший галогеналкил, гидроксиалкил, нитро, алкоксикарбонил, амино, алкиламино, алкилсульфонил, арилсульфонил, алкиламиносульфонил, ариламиносульфонил, алкилсульфониламино, арилсульфониламино, алкиламинокарбонил, ариламинокарбонил, алкилкарбониламино, арилкарбониламино и их ионных форм, если не указано иное. Примеры гетероциклических радикалов включают, без ограничения, морфолинил, пиперазинил, пиперидинил, азетидинил, пирролидинил, гексагидроазепинил, оксетанил, тетрагидрофуранил, тетрагидротиофенил, оксазолидинил, тиазолидинил, изоксазолидинил, тетрагидропиранил, тиоморфолинил, хинуклидинил и имидазолинил и их ионные формы. Примерами могут быть также бициклические, такие как, например, 3,8-диазабицикло[3.2.1]октан, 2,5-диазабицикло[2.2.2]октан или октагидропиразино[2,1-с][1,4]оксазин.

Ингибиторы SYK

В настоящем изобретении предложено соединение Формулы I

где:

А представляет собой пиридил, пирролидинил или пиразолил, замещенный одним или более А';

каждый А' независимо представляет собой низший алкил, низший алкокси, низший галоалкил, гидрокси низший алкил, пирролидинил, пиперидинил, бициклический гетероциклоалкил, возможно замещенный низшим алкилом;

n представляет собой 0, 1 или 2;

В представляет собой фенил, пиридил, пирролидинил, или пиперидинил;

каждый R независимо представляет собой гало, гидрокси, низший алкил, низший алкокси, низший галоалкил, циано, гетероциклоалкил низший алкил, -NH(С=O)R¹, -С(=O)R¹, -С(=O)OR¹, -O(СН₂)_pR¹, CH₂R¹, CH₂NHR¹, или -С(=O)NHR¹;

или два R вместе образуют бициклическую гетероарильную или гетероциклоалкильную кольцевую систему;

R¹ представляет собой Н или R^1';

R^1' представляет собой низший алкил, фенил, индолил, индазолил, гетероарил низший алкил или гетероциклоалкил, возможно замещенный одним или более ;

каждый представляет собой гидрокси, низший алкил, низший алкокси, карбокси, амидо, амино, диалкиламино, или оксо; и

p представляет собой 0, 1 или 2;

или его фармацевтически приемлемая соль.

В настоящем изобретении предложено соединение Формулы I

где:

А представляет собой пиридил, пирролидинил или пиразолил, замещенный одним или более А';

каждый А' независимо представляет собой низший алкил, низший алкокси, низший галоалкил, гидрокси низший алкил, пирролидинил, пиперидинил, возможно замещенный низшим алкилом;

n представляет собой 0, 1 или 2;

В представляет собой фенил, пиридил, пирролидинил, или пиперидинил;

каждый R независимо представляет собой гало, гидрокси, низший алкил, низший алкокси, низший галоалкил, циано, гетероциклоалкил низший алкил, -NH(С=O)R¹, -С(=O)R¹, -С(=O)OR¹, -OR¹, или -С(=O)NHR¹;

или два R вместе образуют бициклическую гетероарильную или гетероциклоалкильную кольцевую систему;

R¹ представляет собой Н или R^1';

R^1' представляет собой низший алкил, фенил, индолил, индазолил, гетероарил низший алкил или гетероциклоалкил, возможно замещенный одним или более и

каждый представляет собой гидрокси, низший алкил, низший алкокси, карбокси, амидо, амино, или оксо;

или его фармацевтически приемлемая соль.

В настоящем изобретении предложено соединение Формулы I, где А представляет собой пиридил, замещенный одним или более А'.

В настоящем изобретении предложено соединение Формулы I, где В представляет собой фенил.

В настоящем изобретении предложено соединение Формулы I, где А' представляет собой пирролидинил, возможно замещенный одним или более низшим алкилом.

В настоящем изобретении предложено соединение Формулы I, где А' представляет собой метилпирролидинил или диметилпирролидинил.

В настоящем изобретении предложено соединение Формулы I, где А' представляет собой низший алкокси.

В настоящем изобретении предложено соединение Формулы I, где R представляет собой С(=O)NHR¹.

В настоящем изобретении предложено соединение Формулы I, где R представляет собой -С(=O)O Ч.

В настоящем изобретении предложено соединение Формулы I, где R представляет собой -NH(С=O)R¹.

В настоящем изобретении предложено соединение Формулы I, где n представляет собой 0 или два R вместе образуют бициклическую гетероарильную или гетероциклоалкильную кольцевую систему.

В настоящем изобретении предложено соединение Формулы I, где R¹ представляет собой фенил, индолил, или индазолил, возможно замещенный одним или более .

В настоящем изобретении предложено соединение, выбранное из группы, состоящей из:

(6-фенил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-(6-трифторметил-пиридин-2-ил)-амина;

(5-этил-пиридин-2-ил)-(6-фенил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-амина;

(6-фенил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-(3,4,5,6-тетрагидро-2H-[1,2']бипиридинил-6'-ил)-амина;

(6-фенил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-(6-пирролидин-1-ил-пиридин-2-ил)-амина;

[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-(6-фенил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-амина;

(1-трет-бутил-1Н-пиразол-3-ил)-(6-фенил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-амина;

8-(2,2-диметил-пирролидин-1-ил)-6-фенил-имидазо[1,2-b]пиридазина;

3-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты метилового эфира;

3-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты;

4-(3-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензоиламино)-бензойной кислоты;

Натрия 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата;

3-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензамида;

(2-метил-3,4,5,6-тетрагидро-2H-[1,2']бипиридинил-6'-ил)-(6-фенил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-амина;

4-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты метилового эфира;

4-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты;

4-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-N-(2-пиридин-4-ил-этил)-бензамида;

4-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензамида;

(6-бензо[1,3]диоксол-5-ил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-амина;

[6-(1H-Индазол-6-ил)-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил]-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-амина;

3-{8-[6-(2-Гидроксиметил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты;

[6-((R)-2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-(6-фенил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-амина;

3-[8-(6-пирролидин-1-ил-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-бензойной кислоты;

3-{8-[6-(3-Аза-бицикло[3.1.0]гекс-3-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты;

2-метил-3-{8-[6-((S)-2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты;

[6-(3-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-(6-фенил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-амина;

4-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-бензойной кислоты;

4-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-N-(2-пиридин-4-ил-этил)-бензамида;

4-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-N-[2-(2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-4-ил)-этил]-бензамида;

[6-(2,5-диметил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-(6-фенил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-амина;

[6-(2-этил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-(6-фенил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-амина;

{1-[6-(6-фенил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-иламино)-пиридин-2-ил]-пирролидин-2-ил}-метанола;

[6-(2,2-диметил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-(6-фенил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-амина;

4-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-N-[2-(1-метил-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-4-ил)-этил]-бензамида;

[6-(3,3-диметил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-(6-фенил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-амина;

[6-(2-Метоксиметил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-(6-фенил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-амина;

3-{8-[6-(2-Метоксиметил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты;

[6-(1Н-Индазол-5-ил)-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил]-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-амина;

3-[8-(3,5-диметил-3,4,5,6-тетрагидро-2H-[1,2']бипиридинил-6'-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-бензойной кислоты;

[6-(3-метокси-фенил)-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил]-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-амина;

N-(2-гидрокси-этил)-3-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензамида;

N-(2-гидрокси-1-метил-этил)-3-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензамида;

(3-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-фенил)-морфолин-4-ил-метанона;

[6-((S)-2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-(6-фенил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-амина;

(5,6-диметокси-пиридин-2-ил)-(6-фенил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-амина;

[6-(2-хлор-фенил)-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил]-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-амина;

N-(2-Диметиламино-этил)-3-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензамида;

[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-(6-о-толил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-амина;

[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-[6-(2-трифторметил-фенил)-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил]-амина;

3-{8-[6-((S)-2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты;

4-{8-[6-((S)-2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензамида;

3-{8-[6-((S)-2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензамида;

(6-Бензотиазол-6-ил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-[6-((S)-2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-амина;

[6-(2,5-диметил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-(6-фенил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-амина;

4-{3-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-бензоиламино}-бензойной кислоты;

3-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-N-(1H-индазол-5-ил)-бензамида;

3-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-N-(1-оксо-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-ил)-бензамида;

4-{3-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-бензоиламино}-2-метокси-бензойной кислоты;

3-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-N-(2-оксо-2,3-дигидро-1Н-индол-5-ил)-бензамида;

3-{8-[6-(3,3-диметил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты;

3-{8-[6-(2,5-диметил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты;

3-[8-(4,4-диметил-3,4,5,6-тетрагидро-2Н-[1,2']бипиридинил-6'-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-бензойной кислоты;

[6-(3,4-диметокси-фенил)-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил]-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-амина;

[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-[6-(1,2,3,4-тетрагидро-хинолин-7-ил)-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил]-амина;

1-(7-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-3,4-дигидро-1Н-изохинолин-2-ил)-этанона;

3-{8-[6-(3-трет-бутил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты метилового эфира;

3-{8-[6-(3-трет-бутил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты;

3-{8-[6-(3-трет-бутил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензамида;

(3-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-фенил)-метанола;

[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-[6-(3-пиперидин-1-илметил-фенил)-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил]-амина;

[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-[6-(3-пирролидин-1-илметил-фенил)-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил]-амина;

[6-(3-хлор-фенил)-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил]-[6-((S)-2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-амина;

N-{1-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-пиперидин-3-ил}-терефталаминовой кислоты;

1-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-пиперидин-3-карбоновой кислоты (1,3-диоксо-2,3-дигидро-1H-изоиндол-5-ил)-амида;

4-({1-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-пиперидин-3-карбонил}-амино)-бензойной кислоты;

4-({1-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-пирролидин-3-карбонил}-амино)-бензойной кислоты;

N-{1-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-пирролидин-3-ил}-терефталаминовой кислоты;

4-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-фенола;

[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-(6-пиридин-3-ил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-амина;

[6-(4-фтор-фенил)-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил]-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-амина;

3-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензонитрила;

[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-(6-пиридин-4-ил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-амина;

[6-(5-метокси-пиридин-3-ил)-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил]-[6-(2-метил-пиррол идин-1-ил)-пиридин-2-ил]-амина;

[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-{6-[4-(2-пирролидин-1-ил-этокси)-фенил]-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил}-амина;

[6-(3-Аминометил-фенил)-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил]-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-амина;

[6-(4-трет-бутил-фенил)-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил]-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-амина;

3-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-фенола;

[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-{6-[3-(2-пиперидин-1-ил-этокси)-фенил]-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил}-амина;

[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-{6-[3-(2-морфолин-4-ил-этокси)-фенил]-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил}-амина;

[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-{6-[4-(2-пиперидин-1-ил-этокси)-фенил]-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил}-амина;

[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-{6-[4-(2-морфолин-4-ил-этокси)-фенил]-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил}-амина;

{6-[3-(2-Диэтиламино-этокси)-фенил]-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил}-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-амина;

{6-[4-(2-Диэтиламино-этокси)-фенил]-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил}-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-амина;

[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-{6-[3-(пиперидин-4-иламинометил)-фенил]-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил}-амина;

[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-ил]-{6-[3-(2-пиперазин-1-ил-этокси)-фенил]-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил}-амина;

3-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-бензойной кислоты; и

3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-N-(4-(метилкарбамоил)фенил)бензамида.

(6-фенил-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-ил)-(6-трифторметил-пиридин-2-ил)-амина;

В настоящем изобретении предложен способ лечения воспалительный или аутоиммунных заболеваний, содержащий введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества соединения Формулы I

В настоящем изобретении предложен вышеуказанный способ, также содержащий введение дополнительного терапевтического средства выбранного из химиотерапевтического или антипролиферативного средства, противовоспалительного средства, иммуномодулятора или иммуносупрессивного средства, нейротрофического фактора, средства для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, средства для лечения диабета или средства для лечения иммунодефицитных состояний.

В настоящем изобретении предложен способ лечения воспалительных заболеваний, содержащий введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества соединения Формулы I.

В настоящем изобретении предложен способ лечения ревматоидного артрита, содержащий введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества соединения Формулы I.

В настоящем изобретении предложен способ лечения астмы, содержащий введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества соединения Формулы I.

В настоящем изобретении предложен способ лечения иммунных нарушений, включая волчанку, рассеянный склероз, ревматоидный артрит, псориаз, сахарный диабет I типа, осложнения трансплантации органов, ксенотрансплантацию, диабет, рак, бронхиальную астму, атопический дерматит, аутоиммунные заболевания щитовидной железы, язвенный колит, болезнь Крона, болезнь Альцгеймера и лейкемию, содержащий введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества соединения Формулы I.

В настоящем изобретении предложен способ лечения воспалительных заболеваний содержащий совместное введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективное количество противовоспалительного соединения в комбинации с терапевтически эффективным количеством соединения Формулы I.

В настоящем изобретении предложен способ лечения иммунного заболевания, содержащий совместное введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективное количество иммуносупрессора в комбинации с терапевтически эффективным количеством соединения Формулы I.

В настоящем изобретении предложена фармацевтическая композиция, содержащая терапевтически эффективное количество соединения Формулы I, смешанное с по меньшей мере одним фармацевтически приемлемым носителем, эксципиентом или разбавителем.

В настоящем изобретении предложена вышеуказанная фармацевтическая композиция, также содержащее дополнительное терапевтическое средство, выбранное из химиотерапевтического или антипролиферативного средства, противовоспалительного средства, иммуномодулятора или иммуносупрессивного средства, нейротрофического фактора, средства для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, средства для лечения диабета и средства для лечения иммунодефицитных состояний.

В настоящем изобретении предложено применение соединения Формулы I для изготовления лекарственного средства, полезного при лечении заболеваний, ассоциированных с Syk.

В настоящем изобретении предложено применение соединения Формулы I для изготовления лекарственного средства, полезного при лечении ревматоидного артрита.

Соединение, способ или композиция, как здесь описано.

Примеры индивидуальных соединений, охватываемых настоящим изобретением и находящихся в его объеме, представлены в следующей таблице. Эти примеры и способы приведены далее для более четкого понимания и осуществления настоящего изобретения квалифицированными специалистами. Они не должны рассматриваться как ограничивающие объем изобретения, а лишь в качестве его иллюстрирования и воплощения.

В основном, номенклатура, использованная в настоящем изобретении основана на AUTONOMTM v.4.0, компьютеризованной системе института Бельштейн, или Struct=Name, приложения CambridgeSoft^® для генерации названий химических соединений по ИЮПАК. Если наблюдается несоответствие между изображенной структурой и названием, данным для этой структуры, изображенная структура обладает более высоким весом. Кроме того, если стереохимия структуры или части структуры не обозначена, например, связью или пунктирной линией, структура или часть структуры должны интерпретироваться как охватывающие все их стереоизомеры.

В Таблице 1 изображены примеры соединений в соответствии с формулой I.

Синтез

Общие схемы

Репрезентативные Общие Схемы синтеза имидазопиридазинового ядра:

Фармацевтические композиции и пути введения

Соединения согласно настоящему изобретению могут быть приготовлены в виде различных лекарственных форм и носителей для перорального введения. Соединения для перорального введения могут быть в форме таблеток, покрытых оболочкой таблеток, драже, твердых и мягких желатиновых капсул, растворов, эмульсий, сиропов или суспензий. Соединения настоящего изобретения являются эффективными при введении другими способами введения, включая непрерывное (внутривенное вливание), местное, парентеральное, внутримышечное, внутривенное, подкожное, трансдермальное (которое может включать средство для улучшения проницаемости), буккальное, назальное введение, ингаляцию и с помощью суппозиториев среди других путей введения. Предпочтительным способом введения, в основном, является пероральное с использованием удобного ежедневного режима дозирования, который может быть скорректирован в зависимости от тяжести заболевания и реакции пациента на активный ингредиент.

Соединение или соединения по настоящему изобретению, а также их фармацевтически полезные соли, вместе с одним или более традиционными эксципиентами, носителями или разбавителями, могут быть в форме фармацевтических композиций и единичных дозированных форм. Фармацевтические композиции и единичные дозированные формы могут состоять из обычных ингредиентов в обычных пропорциях, с или без дополнительных активных соединений или основ и единичные дозированные формы могут содержать любое подходящее эффективное количество активного ингредиента пропорционально предполагаемому применяемому дневному диапазону дозировки. Фармацевтические композиции могут быть использованы в виде твердых веществ, таких как таблетки или капсулы, полутвердых, порошков, препаратов с замедленным высвобождением или жидкостей, таких как растворы, суспензии, эмульсии, эликсиры или наполненные капсулы для перорального применения, или в виде суппозиториев для ректального или вагинального введения, или в виде стерильных растворов для инъекций для парентерального применения. Типичный препарат будет содержать примерно от 5% до примерно 95% активного соединения или соединений (масс./масс.). Термин «препарат» или «дозированная форма» предназначен для обозначения твердых и жидких лекарственных форм активного соединения и квалифицированному специалисту в данной области техники будет понятно, что активный ингредиент может существовать в различных препаратах в зависимости от органа-мишени или ткани и от желаемого дозы и фармакокинетических параметров.

Термин "эксципиент", используемый в настоящем изобретении, относится к соединению, которое является полезным в приготовлении фармацевтической композиции, обычно безопасному, нетоксичному и не являющемуся ни биологически, ни как либо еще нежелательным, и включает в себя эксципиенты, которые являются приемлемыми для ветеринарного использования, а также для фармацевтического применения для человека. Соединения настоящего изобретения могут быть введены сами по себе, но обычно их вводят в смеси с одним или несколькими подходящими фармацевтическими эксципиентами, разбавителями или носителями, выбранными с учетом предполагаемого способа введения и стандартной фармацевтической практики.

"Фармацевтически приемлемый" означает такой, который полезен в приготовлении фармацевтической композиции, который обычно является безопасным, нетоксичным и не является ни биологически, ни как либо еще нежелательным и включает такие, которые являются приемлемыми для ветеринарного использования, а также для фармацевтического применения для человека.

"Фармацевтически приемлемая соль" является формой активного ингредиента, которая может также изначально придать желательные фармакокинетические свойства активному ингредиенту, которые отсутствовали в не-солевой форме, и которая может положительно влиять на фармакодинамику активного ингредиента в отношении его терапевтической активности в организме. Фраза «фармацевтически приемлемая соль" соединения означает соль, которая является фармацевтически приемлемой и которая обладает требуемой фармакологической активностью исходного соединения. Такие соли включают: (1) кислотно-аддитивные соли, образованные с неорганическими кислотами, такими как соляная кислота, бромистоводородная кислота, серная кислота, азотная кислота, фосфорная кислота и т.п., или образованные с органическими кислотами, такими как уксусная кислота, пропионовая, капроновая кислоты, циклопентанпропионовая кислота, гликолевая кислота, пировиноградная кислота, молочная кислота, малоновая кислота, янтарная кислота, яблочная кислота, малеиновая кислота, фумаровая кислота, винная кислота, лимонная кислота, бензойная кислота, 3-(4-гидроксибензоил)бензойная кислота, коричная кислота, миндальная кислота, метансульфоновая кислота, этансульфоновая кислота, 1,2-этан-дисульфоновая кислота, 2-гидроксиэтансульфоновая кислота, бензолсульфоновая кислота, 4-хлорбензолсульфоновая кислота, 2-нафталинсульфокислота, 4-толуолсульфокислота, камфорсульфокислота, 4-метилбицикло[2.2.2]окт-2-ен-1-карбоновая кислота, глюкогептоновая кислота, 3-фенилпропионовая кислота, три метил уксусная кислота, третбутилуксусная кислота, лаурилсерная кислота, глюконовая кислота, глутаминовая кислоты, гидроксинафтоевая кислота, салициловая кислота, стеариновая кислота, муконовая кислота и т.п., или (2) соли, образованные, когда протон кислоты присутствует в исходном соединении, либо заменен на ион металла, например, ион щелочного металла, ион щелочноземельного металла или ион алюминия, или связан с органическим основанием, таким как этаноламин, диэтаноламин, триэтаноламин, трометамин, N-метилглюкамин и т.п.

Твердые лекарственные препараты включают порошки, таблетки, пилюли, капсулы, саше, суппозитории и диспергируемые гранулы. Твердый носитель может быть одним или несколькими веществами, которые также могут действовать как разбавители, вкусовые добавки, растворители, любриканты, суспендирующие агенты, связующие вещества, консерванты, разрыхлители для таблеток или инкапсулирующий материал. В случае порошков носитель обычно представляет собой мелко измельченное твердое вещество, которое смешано с мелко измельченным активным компонентом. В случае таблеток активный компонент обычно смешан с носителем, имеющим необходимую связывающую способность, в подходящих пропорциях и спрессован в нужную форму нужного размера. Подходящие носители включают, без ограничения, карбонат магния, стеарат магния, тальк, сахар, лактоза, пектин, декстрин, крахмал, желатин, трагакант, метилцеллюлоза, натрий-карбоксиметилцеллюлоза, легкоплавкий воск, масло какао и т.п. Твердые лекарственные препараты могут содержать, в дополнение к активному компоненту, красители, ароматизаторы, стабилизаторы, буферы, искусственные и натуральные подсластители, диспергаторы, загустители, солюбилизирующие агенты и т.п.

Жидкие препараты также являются пригодными для перорального введения включая жидкие композиции, включая эмульсии, сиропы, эликсиры, водные растворы, водные суспензии. Они включают в себя твердые формы препаратов, которые предназначены для превращения в жидкую форму незадолго до использования. Эмульсии могут быть получены в растворах, например, в водном растворе пропиленгликоля или могут содержать эмульгаторы, такие как лецитин, сорбитанмоноолеат или камедь. Водные растворы могут быть получены растворением активного компонента в воде и добавлением подходящих красителей, ароматизаторов, стабилизаторов и загустителей. Водные суспензии могут быть получены диспергированием тонкоизмельченного активного компонента в воде с вязким веществом, таким как природная или синтетическая камедь, смолы, метилцеллюлоза, натрий-карбоксиметилцеллюлоза и другие хорошо известные суспендирующие агенты.

Соединения по настоящему изобретению могут быть приготовлены для парентерального введения (например, путем инъекции, в частности болюсной инъекции или непрерывной инфузии) и могут быть представлены в единичной дозированной форме в ампулах, предварительно заполненных шприцах, инфузионных растворах небольшого объема или в многодозовых контейнерах с добавлением консерванта. Композиции могут быть в таких формах как суспензии, растворы или эмульсии на масляных или водных основах, например, растворы в водном полиэтиленгликоле. Примеры масляных или неводных носителей, разбавителей, растворителей или основ включают пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, растительные масла (например, оливковое масло) и инъекционные органические сложные эфиры (например, этилолеат), и могут содержать вспомогательные вещества, такие как консерванты, увлажнители, эмульгаторы или суспендирующие средства, стабилизирующие и/или диспергирующие агенты. Альтернативно, активный ингредиент может быть в форме порошка, полученного путем асептического выделения стерильного твердого вещества или путем лиофилизации из раствора для разбавления перед использованием с подходящей основой, например, стерильной, апирогенной водой.

Соединения по настоящему изобретению могут быть приготовлены для местного введения в верхний слой кожи в виде мазей, кремов или лосьонов или в виде трансдермального пластыря. Мази и кремы могут, например, быть приготовлены на водной или масляной основе с добавлением подходящих загустителей и/или желатинирующих агентов. Лосьоны могут быть приготовлены на водной или масляной основе и обычно также содержат один или более эмульгаторов, стабилизаторов, диспергирующих агентов, суспендирующих агентов, загустителей или красителей. Препараты, подходящие для местного применения в полости рта, включают лепешки, содержащие активные вещества на ароматизированной основе, как правило, сахарозе и камеди или трагаканте; пастилки, содержащие активный ингредиент на инертной основе, такой как желатин и глицерин или сахароза и камедь, и жидкости для полоскания рта, содержащие активный ингредиент в подходящем жидком носителе.

Соединения по настоящему изобретению могут быть приготовлены для введения в виде суппозиториев. Легкоплавкий воск, такой как смесь глицеридов жирных кислот, или масло какао сначала расплавляют и активный компонент равномерно диспергируют, например, путем перемешивания. Затем расплавленную гомогенную смесь выливают в формы подходящего размера, дают остыть и затвердеть.

Соединения по настоящему изобретению могут быть приготовлены для вагинального введения. Из уровня техники известно, что вагинальные суппозитории, тампоны, кремы, гели, пасты, пены или спреев, содержащие в дополнение к активному ингредиенту такие носители являются подходящими.

Соединения по настоящему изобретению могут быть приготовлены для назального введения. Растворы или суспензии вводят непосредственно в полость носа с помощью обычных средств, например, капельницы, пипетки или спрея. Композиции могут быть представлены в виде одиночной или многодозовой формы. В последнем случае для капельницы или пипетки, это может быть достигнуто путем введения пациенту необходимого, предварительно заданного объема раствора или суспензии. В случае спрея, это может быть достигнуто, например, путем регулирования распыления спреем.

Соединения по настоящему изобретению могут быть приготовлены для аэрозольного введения, в частности, в дыхательные пути, включая интраназальное введение. Соединение обычно имеет небольшой размер частиц, например, порядка пяти (5) микрон или меньше. Такой размер частиц может быть получен с помощью известных в данной области способов, например, путем тонкого измельчения. Активный ингредиент содержится в герметичной упаковке с подходящим пропеллентом, таким как хлорфторуглерод (ХФУ), например, дихлордифторметаном, трихлорфторметаном или дихлортетрафторэтаом или диоксидом углерода или другим подходящим газом. Для удобства, аэрозоль может содержать поверхностно-активные вещества, такие как лецитин. Доза препарата может контролироваться дозирующим клапаном. Кроме того, активные ингредиенты могут быть предоставлены в виде сухого порошка, например порошковой смеси соединения в подходящей порошковой основе, такой как лактоза, крахмал, производные крахмала, такие как гидроксипропилметилцеллюлоза и поливинилпирролидон (ПВП). Порошок-носитель образует гель в носовой полости. Порошковая композиция может быть представлена в виде единичной дозированной формы, например, в капсулах или картриджах, например, желатиновой или блистерной упаковке, из которой порошок может быть введен с помощью ингалятора.

Когда необходимо, композиции могут быть приготовлены с кишечнорастворимой оболочкой, приспособленной для задержанного или контролируемого высвобождения активного ингредиента. Например, соединения настоящего изобретения могут быть приготовлены для устройств трансдермальной или подкожной доставки лекарственных средств. Эти системы доставки обладают преимуществом, когда необходимо задержанное высвобождение соединения и когда соблюдение пациентом режима лечения имеет решающее значение. Соединения в трансдермальных системах доставки часто соединяют с адгезивной по отношению к коже твердой подложкой. Интересующее соединение также может быть объединено с усилителями проницаемости, например, с Azone (1-додецилаза-циклогептан-2-он). Системы доставки с замедленным высвобождением вводятся подкожно в субдермальный слой хирургическим путем или инъекций. Подкожные имплантаты инкапсулируют соединения в жирорастворимой мембране, например, силиконовом каучуке или биоразлагаемом полимере, например, полимолочной кислоте.

Подходящие фармацевтические композиции наряду с фармацевтическими носителями, разбавителями и эксципиентами описаны у Remington: The Science and Practice of Pharmacy 1995, под редакцией E.W. Martin, Mack Publishing Company, 19th edition, Easton, Pennsylvania. Квалифицированный в фармацевтике специалист может изменить композиции в рамках раскрытия изобретения с получением многочисленных препаратов для конкретного пути введения без потери стабильности композициями настоящего изобретения или ущерба для их терапевтической активности.

Модификация соединений настоящего изобретения с целью сделать их более растворимыми в воде или другом носителе, например, может быть легко достигнута путем незначительных изменений (образование соли, этерификация и т.д.), которые известны специалистам в данной области. Также квалифицированным специалистам хорошо известны изменения способа введения и режима дозирования конкретного соединения с целью контроля фармакокинетики соединений настоящего изобретения для максимального положительного эффекта у пациентов.

Термин "терапевтически эффективное количество", используемый в настоящем изобретении, означает количество, требуемое для уменьшения симптомов заболевания у пациента. Доза будет скорректирована с учетом индивидуальных требований в каждом конкретном случае. Это доза может варьироваться в широких пределах в зависимости от многих факторов, таких как тяжесть заболевания, подлежащего лечению, возраста и общего состояния здоровья пациента, других лекарственных средств, которыми пациент лечится, путей и форм введения и предпочтений и опыта лечащего врача. Для перорального введения подходящей должна быть суточная доза примерно от 0,01 до примерно 1000 мг/кг веса тела в день при монотерапии и/или в комбинированной терапии. Предпочтительная суточная доза составляет от приблизительно 0,1 до приблизительно 500 мг/кг массы тела, более предпочтительно от 0,1 до 100 мг/кг массы тела и наиболее предпочтительно 1,0 и 10 мг/кг массы тела в сутки. Таким образом, для введения пациенту с весом 70 кг, диапазон доз будет приблизительно от 7 мг до 0,7 г в день. Суточная доза может быть введена в виде однократной дозы или в виде нескольких доз, как правило, от 1 до 5 доз в день. Как правило, лечение начинают с меньших доз, которые меньше оптимальной дозы соединения. После этого доза увеличивается на малую величину, пока не будет достигнут оптимальный эффект для конкретного пациента. Специалисты в лечении описанных здесь заболеваний смогут без лишних экспериментов на основе личных знаний, опыта и раскрытия настоящего изобретения установить терапевтически эффективное количество соединения по настоящему изобретению для данного заболевания и пациента.

Фармацевтические препараты предпочтительно находятся в единичных дозированных формах. В такой форме препарат разделен на стандартные дозы, содержащие соответствующие количества активного компонента. Единичная дозированная форма может представлять собой упакованный препарат, эта упаковка содержит дискретные количества препарата, такие как упакованные таблетки, капсулы и порошки во флаконах или ампулах. Кроме того, единичная дозированная форма может представлять собой капсулу, таблетку, саше или лепешку сама по себе или может быть соответствующим числом каждого из указанных в упакованном виде.

Композиции

Фармацевтические композиции для доставки различными путями составлены как показано в следующих далее Таблицах. "Активный ингредиент" или "Активное вещество", как используется в Таблицах, означает одно или более соединений Формулы I.

Ингредиенты смешали и заполнили ими капсулы, каждая содержащая примерно 100 мг; одна капсула приблизительно соответствует общей суточной дозе.

Ингредиенты объединили и гранулировали с использованием растворителя, такого как метанол. Затем композицию высушили и сформировали в таблетки (содержащие около 20 мг активного вещества) с использованием подходящего устройства для формирования таблеток.

Ингредиенты смешали с получением суспензии для перорального введения.

Активный ингредиент растворили в части воды для инъекций. Затем добавили достаточное количество хлорида натрия при перемешивании, чтобы сделать раствор изотоническим. Раствор довели до необходимого веса остатком воды для инъекций, профильтровали через мембранный фильтр 0,2 мкм и расфасовали в стерильных условиях.

Ингредиенты расплавили вместе и смешали на паровой бане, и разлили по формам, содержащим общий вес 2.5 г.

Все ингредиенты, за исключением воды, смешивали и нагревали до приблизительно 60°C при перемешивании. Затем добавили достаточное количество воды при температуре около 60°C при интенсивном перемешивании для эмульгирования ингредиентов, и затем добавили воду, необходимую до приблизительно 100 г.

Композиции назального спрея

Несколько водных суспензий, содержащих приблизительно от 0.025-0.5 процентов активного вещества приготовили в виде препаратов назальных спреев. Препараты возможно содержат неактивные ингредиенты, такие как, например, микрокристаллическая целлюлоза, натрийкарбоксиметилцеллюлоза, декстроза и т.п. Соляная кислота может быть добавлена для выравнивания pH. Препараты назального спрея могут быть доставлены посредством дозированного насоса назального спрея, обычно доставляющего около 50-100 мкл препарата на одно срабатывание. Типичный режим дозирования составляет 2-4 применения спрея каждые 4-12 ч.

Показания и способы лечения

Соединения, описанные здесь, являются ингибиторами киназы, в частности ингибиторами SYK. Эти ингибиторы могут быть полезными для лечения одного или более заболеваний, чувствительных к ингибированию киназы, в том числе заболеваний, чувствительных к ингибированию SYK и/или ингибированию пролиферации В-клеток у млекопитающих. Безотносительно какой-либо конкретной теории, полагают, что взаимодействие соединений по изобретению с SYK приводит к ингибированию активности SYK и, таким образом, к фармацевтической полезности этих соединений. Соответственно, настоящее изобретение включает способ лечения млекопитающего, например, человека, имеющего заболевание, чувствительное к ингибированию активности SYK и/или ингибированию пролиферации В-клеток, включающий введение млекопитающему, имеющему такое заболевание, эффективного количества по меньшей мере одного химического соединения, предложенного здесь. Эффективная концентрация может быть установлена экспериментально, например, путем анализа концентрации соединения в крови, или теоретически путем расчета биодоступности. Другие киназы, которые могут быть затронуты в дополнение к SYK включают, без ограничения, другие тирозинкиназы и серин/треонин киназы.

В настоящем изобретении предложен способ лечения воспалительных или аутоиммунных заболеваний, содержащий введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества соединения Формулы I.

В настоящем изобретении предложен вышеуказанный способ, также содержащий введение дополнительного терапевтического средства выбранного из химиотерапевтического или антипролиферативного средства, противовоспалительного средства, иммуномодулятора или иммуносупрессивного средства, нейротрофического фактора, средства для лечения сердечно-сосудистых заболеваний, средства для лечения диабета или средства для лечения иммунодефицитных состояний.

В настоящем изобретении предложен способ лечения воспалительных заболеваний, содержащий введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества соединения Формулы I.

В настоящем изобретении предложен способ лечения ревматоидного артрита, содержащий введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества соединения Формулы I.

В настоящем изобретении предложен способ лечения астмы, содержащий введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества соединения Формулы I.

В настоящем изобретении предложен способ лечения иммунных заболеваний, включая волчанку, рассеянный склероз, ревматоидный артрит, псориаз, сахарный диабет I типа, осложнений трансплантации органов, ксенотрансплантации, диабет, рак, бронхиальную астму, атопический дерматит, аутоиммунные заболевания щитовидной железы, язвенный колит, болезнь Крона, болезнь Альцгеймера, а также лейкемию, содержащий введение нуждающемуся в этом пациенту терапевтически эффективного количества соединения Формулы I.

В настоящем изобретении предложен способ лечения воспалительных заболеваний, содержащий совместное введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества противовоспалительного соединения в комбинации с соединением Формулы I.

В настоящем изобретении предложен способ лечения иммунного заболевания, содержащий совместное введение пациенту, нуждающемуся в этом, терапевтически эффективного количества иммуносупрессора в комбинации с соединением Формулы I.

ПРИМЕРЫ

Аббревиатуры

Обычно используемые сокращения включают: ацетил (Ас), азо-бис-изобутирилнитрил (AIBN), атмосферы (атм), 9-борабицикло[3.3.1]нонан (9-BBN или BBN), 2,2'-бис(дифенилфосфино)-1,1'-бинафтил (BINAP), трет-бутоксикарбонил (Boc), ди-трет-бутилпирокарбонат или boc-ангидрид (BOC2O), бензил (Bn), бутил (Bu), регистрационный номер в системе кодирования в реферативном журнале "Chemical Abstracts" (CASRN), бензилоксикарбонил (CBZ или Z), карбонилдиимидазол (CDI), 1,4-диазабицикло[2.2.2]октан (DABCO), диэтиламиносеры трифторид (DAST), дибензилиденацетон (DBA), 1,5-диазабицикло[4.3.0]нон-5-ен, (DBN), 1,8-диазабицикло[5.4.0]ундец-7-ен (DBU), N,N'-дициклогексилкарбодиимид (DCC), 1,2-дихлорэтан (DCE), дихлорметан (ДХМ), 2,3-дихлор-5,6-дициано-1,4-бензохинон (DDQ), диэтилазодикарбоксилат (DEAD), ди-изо-пропилазодикарбоксилат (DIAD), ди-изо-бутилалюминия гидрид (DIBAL или DIBAL-H), ди-изо-пропилэтиламин (DIPEA), N,N-диметилацетамид (DMA), 4-N,N-диметиламинопиридин (DMAP), N,N-диметилформамид (ДМФ), диметилсульфоксид (ДМСО), 1,1'-бис-(дифенилфосфино)этан (DPPE), 1,1'-бис-(дифенилфосфино)ферроцен (DPPF), 1-(3-диметиламинопропил)-3-этилкарбодиимида гидрохлорид (EDCI), 2-этокси-1-этоксикарбонил-1,2-дигидрохинолин (EEDQ), этил (Et), этилацетат (EtOAc), этанол, (EtOH), 2-этокси-2Н-хинолин-1-карбоновой кислоты этиловый эфир (EEDQ), диэтиловый эфир (Et₂O), этилизопропиловый эфир (EtOiPr), O-(7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония гексафторфосфатуксусная кислота (HATU), уксусная кислота (НОАс), 1-N-гидроксибензотриазол (HOBt), высокоэффективная жидкостная хроматография (ВЭЖХ), изопропанол (IPA), изопропилмагнийхлорид (iPrMgCl), гексаметилдисилазан (HMDS), жидкостная хроматография с масс-спектрометрией (ЖХ-МС), лития гексаметилдисилазан (LiHMDS), мета-хлорпербензойная кислота (m-СРВА), метанол (МеОН), температура плавления (т.пл. или МР), MeSO₂-(мезил или Ms), метил (Ме), ацетонитрил (MeCN), м-хлорпербензойная кислота (МСРВА), масс-спектр (ms или MS), метил-трет-бутиловый эфир (МТВЕ), метил-тетрагидрофуран (МеТГФ), N-бромсукцинимид (NBS), н-бутиллитий (nBuLi), N-карбоксиангидрид (NCA), N-хлорсукцинимид (NCS), N-метилморфолин (НММ), N-метилпирролидон (NMP), хлорхромат (РСС), дихлор-((бис-дифенилфосфино)ферроценил)палладий(II) (Pd(dppf)Cl₂), палладия(II)ацетат (Pd(ОАс)₂), трис(дибензилиденацетон)дипалладий(0) (Pd₂(DBA)₃), дихромат пиридиния (PDC), фенил (Ph), пропил (Pr), изо-пропил (i-Pr), фунт на квадратный дюйм (PSI), пиридин (pyr), 1,2,3,4,5-пентафенил-1-(ди-трет-бутилфосфино)ферроцен (Q-Phos), комнатная температура (собственная температура, кт или КТ), втор-бутиллитий (sBuLi), трет-бутилдиметилсилил или трет-BuMe₂Si (TBDMS), тетра-н-бутиламмония фторид (TBAF), триэтиламин (ТЕА или Et₃N), 2,2,6,6-тетраметилпиперидин-1-оксил (ТЕМРО), триметилсилилэтоксиметил (SEM), трифлат или CF₃SO₂-(Tf), трифторуксусная кислота (ТФУ), 1,1'-бис-2,2,6,6-тетраметилгептан-2,6-дион (TMHD), О-бензотриазол-1-ил-N,N,N',N'-тетраметилурония тетрафторборат (TBTU), тонкослойная хроматография (ТСХ), тетрагидрофуран (ТГФ), триметилсилил или Me₃Si (TMS), р-толуолсульфокислота (TsOH или pTsOH), 4-Ме-C₆H₄SO₂ или тозил (Ts) и N-уретан-N-карбоксиангидрид (UNCA). Обычные номенклатуры, включая префиксы нормальный (N), изо (I-), вторичный (втор-), третичный (трет-) и нео имеют свои обычные значения при использовании их с алкильной частью. (J. Rigaudy и D.Р. Klesney, Nomenclature in Organic Chemistry, IUPAC 1979 Pergamon Press, Oxford).

Общие условия.

Если не указано иное, все температуры, включая температуру плавления (т.е. МР) приведены в градусах Цельсия (°C). Следует понимать, что реакция, с помощью которой получают указанный и/или желаемый продукт, не обязательно непосредственно приводит к нему из комбинации двух реагентов, которые были добавлены первоначально, т.е. могут существовать одно или более промежуточных соединений, которые образуются в смеси, что в конечном итоге приводит к образованию указанного и/или желаемого продукта. Данные выше сокращения могут быть использованы в способах получения и примерах. Все названия были генерированы с помощью Autonom или ChemDraw.

Следующие способы получения и примеры приведены с целью более четкого понимания и осуществления на практике настоящего изобретения специалистами в данной области техники. Их следует рассматривать не как ограничивающие объем изобретение, а только как иллюстрирующие и являющиеся типичными для настоящего изобретения.

Примеры получения

Пример 1: Синтез

6-фенил-N-(6-(трифторметил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида

Стадия 1

4-бромо-6-хлорпиридазин-3-амин

К суспензии 6-хлорпиридазин-3-амина (30 г, 232 ммоль), NaHCO₃ (39 г, 464 ммоль) и метанола (576 мл) добавили Br₂ (11.9 мл, 232 ммоль) по каплям в течение 30 минут при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 16 ч, затем отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 3:1) с получением 4-бромо-6-хлорпиридазин-3-амина (31.5 г, 65%) в виде светло-оранжевого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 207.9, 209.9, t_R=1.189 мин.

Стадия 2

8-бромо-6-хлороимидазо[1,2-b]пиридазин

Раствор 4-бромо-6-хлорпиридазин-3-амина (15.7 г, 75.3 ммоль), 2-хлор-1,1-диэтоксиэтана (13.9 г, 90.3 ммоль) и PTSA (17.2 г, 90.3 ммоль) в изопропаноле (150 мл) нагревали до 80°C в течение 20 ч. После охлаждения до комнатной температуры, раствор сконцентрировали под вакуумом. Получившуюся смесь обработали насыщенным раствором NaHCO₃ (300 мл), экстрагировали дихлорметаном (200 мл × 3), высушили над Na₂SO₄, отфильтровали и сконцентрировали. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 3:1) с получением 8-бромо-6-хлороимидазо[1,2-b]пиридазина (17.2 г, 98%) в виде оранжевого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 231.9, 233.9, t_R=1.46 мин.

Стадия 3

6-хлор-N-(6-(трифторметил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

В раствор 6-(трифторметил)пиридин-2-амина (0.668 г, 4.12 ммоль) в ДМФ (5 мл) добавили NaH (0.10 г, 4.18 ммоль) и перемешивали в течение 0.5 ч. К этой смеси добавили 8-бромо-6-хлороимидазо[1,2-b]пиридазин (0.38 г, 1.65 ммоль) в атмосфере N₂. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. затем добавили 100 мл воды и преципитат собрали посредством фильтрации и промыли водой с получением 6-хлор-N-(6-(трифторметил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.513 г, 99%) в виде светло-коричневого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 314.1, t_R=1.738 мин.

Стадия 4

6-фенил-N-(6-(трифторметил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорид

Смесь 6-хлор-N-(6-(трифторметил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (157 мг, 0.5 ммоль), фенилбороновой кислоты (92 мг, 0.75 ммоль), Pd₂(dba)₃ (29 мг, 0.05 ммоль), X-phos (96 мг, 0.2 ммоль) и K₂CO₃ (208 мг, 1.5 ммоль) в диоксане (10 мл) и воде (1 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 4 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и получившуюся смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 3:1) с получением неочищенного продукта (135 мг), который дополнительно очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/50% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением светло-желтого осадка. Смесь растворили в метаноле, затем добавили три капли концентрированной HCl и смесь перемешивали в течение 5 минут, затем сконцентрировали под вакуумом с получением конечного продукта 6-фенил-N-(6-(трифторметил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида (65 мг, 37%) as a HCl salt. ¹H HMR (300 MHz, CD₃OD): δ 9.40 (s, 1Н), 8.48 (d, 1Н, J=2.1 Hz), 8.21 (d, 1Н, J=2.4 Hz), 8.12-8.06 (m, 3Н), 7.61-7.56 (m, 4 h), 7.48 (d, 1Н, J=8.4 Hz). ЖХ-МС: 356, [М+Н]+, t_R=1.822 мин, ВЭЖХ: 100% при 214 нм, 99.96% при 254 нм, t_R=7.247 мин.

Пример 2: Синтез

N-(5-Этилпиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Стадия 1

6-хлор-N-(5-этилпиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

К раствору 5-этилпиридин-2-амина (394 мг, 3.23 ммоль) в ДМФ (8 мл) добавили NaH (129 мг, 60% дисперсия в минеральном масле, 3.23 ммоль) в атмосфере N2 при комнатной температуре и перемешивали в течение дополнительных 0.5 ч. К этой смеси добавили 8-бромо-6-хлороимидазо[1,2-b]пиридазин (0.3 г, 1.3 ммоль). Через 20 ч перемешивания при комнатной температуре, добавили насыщенный раствор NH₄Cl и реакционную смесь экстрагировали эфиром (200 мл) и промыли водой (2×50 мл), затем солевым раствором (2×50 мл). После высушивания и фильтрации, ее сконцентрировали с получением 6-хлор-N-(5-этилпиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (785 мг, неочищенный) в виде желтого осадка, который использовали сразу без дополнительной очистки. ЖХ-МС: [М+1]⁺=274, t_R=1.726 мин.

Стадия 2

N-(5-Этилпиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Смесь 6-хлор-N-(5-этилпиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (329 мг, 1.21 ммоль), 4,4,5,5-тетраметил-2-фенил-1,3,2-диоксаборолана (221 мг, 1.81 ммоль), Pd₂(dba)₃ (70 мг, 0.121 ммоль), X-Phos (231 мг, 0.484 ммоль) и K₂CO₃ (499 мг, 3.62 ммоль) в диоксане (40 мл) и H₂O (10 мл) нагревали до 110°C в течение 20 ч в атмосфере N₂. Смесь охладили и сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:5) с получением N-(5-этилпиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (84 мг, 22%) в виде желтого осадка. 1Н HMR (300 MHz, CDCl₃): δ 8.69 (d, 1Н), 8.37 (d, 1Н, J=1.8 Hz), 8.24 (s, 1Н), 8.09-8.01 (m, 3Н), 7.68-7.55 (m, 5Н), 7.02 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 2.75 (q, 2Н, J=7.8 Hz), 1.37 (t, 3Н, J=7.8 Hz). ЖХ-МС: 316, [М+Н]+, t_R=1.827 мин, ВЭЖХ: 99.73% при 214 нм, 99.88% при 254 нм, t_R=3.262 мин.

Пример 3: Синтез

6-фенил-N-(6-(пиперидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида

Стадия 1

6-(пиперидин-1-ил)пиридин-2-амин

Суспензию 6-фторпиридин-2-амина (500 мг, 4.4 ммоль), пиперидина (1.4 мл, 14.1 ммоль) в воде (0.5 мл) нагревали до 205°C в микроволновой печи в течение 30 минут. Реакционную смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 3:1) с получением 6-(пиперидин-1-ил)пиридин-2-амина (740 мг, 94%) в виде светло-желтого масла. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 178.1, t_R=0.974 мин.

Стадия 2

6-хлор-N-(6-(пиперидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

К раствору 6-(пиперидин-1-ил)пиридин-2-амина (0.725 г, 4.12 ммоль) в ДМФ (8 мл) добавили NaH (0.11 г, 60% дисперсия в минеральном масле, 4.18 ммоль) и смесь перемешивали в течение 0.5 ч. К этой смеси добавили 8-бромо-6-хлороимидазо[1,2-b]пиридазин (0.384 г, 1.65 ммоль) в атмосфере N₂. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Получившуюся смесь обработали насыщенным раствором NH₄Cl (50 мл), экстрагировали эфиром (80 мл), высушили над Na₂SO₄, отфильтровали и сконцентрировали. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 3:1) с получением 6-хлор-N-(6-(пиперидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.13 г, 24.1%) в виде желтого осадка. ЖХМС: [М+Н]⁺, 329.0, 331.0, t_R=1.912 мин.

Стадия 3

6-Фенил-N-(6-(пиперидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорид

Смесь 6-хлор-N-(6-(пиперидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (130 мг, 0.4 ммоль), фенилбороновой кислоты (74 мг, 0.6 ммоль), Pd₂(dba)₃ (24 мг, 0.04 ммоль), X-phos (76 мг, 0.16 ммоль) и K₂CO₃ (166 мг, 1.2 ммоль) в диоксане (10 мл) и воде (1 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 4 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и получившуюся смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 3:1) с получением неочищенного продукта, который дополнительно очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 40% ацетонитрил/60% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением белого осадка. Его растворили в метаноле и добавили три капли концентрированной HCl. Через 5 минут, смесь сконцентрировали под вакуумом с получением конечного продукта (135 мг, 58.3%) в виде соли HCl. ¹Н HMR (300 MHz, CDCl₃): δ 9.07 (s, 1Н), 8.50 (d, 1Н, J=2.1 Hz), 8.25 (d, 1Н, J=2.1 Hz), 8.14-8.10 (m, 2Н), 7.97-7.94 (m, 1Н), 7.65-7.61 (m, 3Н), 7.29 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 7.20 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 3.78-3.74 (m, 4 h), 2.02-3.00 (m, 4 h), 1.85-1.83 (m, 2Н). ЖХ-МС: 371, [М+Н]+, t_R=2.016 мин, ВЭЖХ: 100% при 214 нм, 100% при 254 нм, t_R=7.5 мин.

Пример 4: Синтез

6-фенил-N-(6-(пирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида

Стадия 1

6-хлор-N-(6-фторпиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

К раствору 6-фторпиридин-2-амина (1.12 г, 10 ммоль) в ДМФ (16 мл) добавили NaH (0.24 г, 60% дисперсия в минеральном масле, 10 ммоль) и смесь перемешивали в течение 0.5 ч. К этой смеси добавили 6-хлор-N-(6-фторпиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин (0.93 г, 4 ммоль) в атмосфере N₂. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, затем разделили между 45 мл насыщенного раствора NH₄Cl и 45 мл эфира. Органический слой промыли водой (30 мл × 3) и насыщенным раствором NaCl (30 мл × 3), высушили над Na₂SO₄, сконцентрировали под вакуумом, и очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 3:1) с получением 6-хлор-N-(6-фторпиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (1.04 г, 99%) в виде светло-коричневого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 264.1, 266.2, t_R=1.601 мин.

Стадия 2

6-хлор-N-(6-(пирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Суспензию 6-хлор-N-(6-фторпиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (132 мг, 0.5 ммоль) и пирролидина (54 мг, 0.75 ммоль) в воде (0.3 мл) нагревали до 205°C в микроволновой печи в течение 30 минут. Реакционную смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, CH₂Cl₂:МеОН=200:1) с получением 6-хлор-N-(6-(пирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (29 мг, 18%) в виде светло-желтого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 315.0, t_R=1.837 мин.

Стадия 3

6-фенил-N-(6-(пирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорид

Смесь 6-хлор-N-(6-(пирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (52 мг, 0.17 ммоль), фенилбороновой кислоты (31 мг, 0.25 ммоль), Pd₂(dba)₃ (10 мг, 0.017 ммоль), X-phos (32 мг, 0.067 ммоль) и K₂CO₃ (69 мг, 0.5 ммоль) в диоксане (5 мл) и воде (0.5 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 4 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и получившуюся смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, CH₂Cl₂:МеОН=180:1) с получением неочищенного продукта в виде желтого осадка. Осадок дополнительно очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 40% ацетонитрил/60% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением светло-желтого осадка. Его растворили в метаноле и добавили три капли концентрированной HCl. Смесь перемешивали в течение 5 минут, затем сконцентрировали под вакуумом с получением конечного продукта 6-фенил-N-(6-(пирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида (46 мг, 78%) в виде соли HCl. 1Н HMR (300 MHz, CD₃OD): δ 8.81 (s, 1Н), 8.31 (s, 1Н), 8.04-7.96 (m, 3Н), 7.56-7.50 (m, 4 h), 6.38 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.20 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 3.54-3.49 (m, 4 h), 2.08-2.03 (m, 4 h). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 357.1, t_R=1-912 мин, ВЭЖХ: 95.34% при 214 нм, 99.67% при 254 нм, t_R=7.083 мин.

Пример 5: Синтез

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Стадия 1

6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Суспензию 6-хлор-N-(6-фторпиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (132 мг, 0.5 ммоль) и 2-метилпирролидина (64 мг, 0.75 ммоль) в воде (0.3 мл) нагревали до 205°C в микроволновой печи в течение 30 минут. Реакционную смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, CH₂Cl₂:МеОН=200:1) с получением 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (105 мг, 63.8%) в виде желтого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 329.1, t_R=2.019 мин.

Стадия 2

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Смесь 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (180 мг, 0.55 ммоль), фенилбороновой кислоты (102 мг, 0.83 ммоль), Pd₂(dba)₃ (33 мг, 0.056 ммоль), X-phos (105 мг, 0.22 ммоль) и K₂CO₃ (226 мг, 1.63 ммоль) в диоксане (10 мл) и воде (1 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 4 ч в атмосфере N₂. Реакционную смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, CH₂Cl₂:МеОН=180:1) с получением неочищенного продукта. Его дополнительно очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 40% ацетонитрил/60% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением светло-желтого осадка. Его растворили в метаноле и добавили три капли концентрированной HCl. Смесь перемешивали в течение 5 минут, затем сконцентрировали под вакуумом с получением светло-желтого осадка (80 мг, 40%) в виде соли HCl. ¹Н HMR (300 MHz, CD₃OD): δ 8.87 (s, 1Н), 8.37 (d, 1Н, J=2.4 Hz), 8.10 (d, 1Н, J=1.8 Hz), 8.01-7.98 (m, 2Н), 7.60-7.53 (m, 4 h), 6.45 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.30 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.28-4.24 (m, 1Н), 3.67-3.47 (m, 2Н), 2.20-1.80 (m, 4 h), 1.20 (d, 1Н, J=6.3 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 371, t_R=1.97 мин, ВЭЖХ: 97.57% при 214 нм, 99.43% при 254 нм, t_R=7.473 мин.

Пример 6: Синтез

N-(6-(1-трет-бутил-1Н-пиразол-3-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида

Стадия 1

1-трет-бутил-1Н-пиразол-3-амин

Смесь трет-бутилгидразина (2.4 г, 27 ммоль), 2-хлоракрилонитрила (2.9 г, 33 ммоль), NaOAc (3.17 г, 38 ммоль) и этанола (30 мл) нагревали до 80°C с перемешиванием в течение 12 ч. Растворитель удалили под вакуумом и получившуюся смесь обработали насыщенным раствором NaHCO₃ (200 мл) и экстрагировали этилацетатом (200 мл × 3). Органические слои высушили над NaSO₄, сконцентрировали под вакуумом, очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 2:1 to 1:2) с получением 1-трет-бутил-1Н-пиразол-3-амина (1.39 г, 37%) в виде коричневого масла. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 140.2, t_R=0.696 мин.

Стадия 2

N-(6-(1-трет-бутил-1Н-пиразол-3-ил)пиридин-2-ил)-6-хлороимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

К раствору 1-трет-бутил-1Н-пиразол-3-амина (0.348 г, 2.5 ммоль) в ДМФ (8 мл) добавили NaH (0.060 г, 60% дисперсия в минеральном масле, 2.5 ммоль) и смесь перемешивали в течение 0.5 ч. К этой смеси добавили 8-бромо-6-хлороимидазо[1,2-b]пиридазин (0.233 г, 1 ммоль) в атмосфере N₂. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, затем разделили между 15 мл насыщенного водн. MH₄Cl и 15 мл эфира. Органический слой промыли водой (10 мл × 3) и насыщенным водн. NaCl (10 мл × 3), высушили над NaSO₄, сконцентрировали под вакуумом, очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 3:1) с получением N-(6-(1-трет-бутил-1Н-пиразол-3-ил)пиридин-2-ил)-6-хлороимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.168 г, 23%) в виде светло-коричневого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 291.1, t_R=1.648 мин.

Стадия 3

N-(6-(1-трет-бутил-1Н-пиразол-3-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорид

Смесь N-(6-(1-трет-бутил-1Н-пиразол-3-ил)пиридин-2-ил)-6-хлороимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (168 мг, 0.58 ммоль), фенилбороновой кислоты (105 мг, 0.86 ммоль), Pd₂(dba)₃ (34 мг, 0.06 ммоль), X-phos (114 мг, 0.24 ммоль) и K₂CO₃ (240 мг, 1.74 ммоль) в диоксане (10 мл) и воде (1 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 4 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и получившуюся смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, CH₂Cl₂:МеОН=180:1) с получением неочищенного продукта. Этот осадок дополнительно очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/50% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением белого осадка. Его растворили в метаноле и добавили три капли концентрированной HCl. Смесь перемешивали в течение 5 минут, затем сконцентрировали под вакуумом с получением конечного продукта N-(6-(1-трет-бутил-1Н-пиразол-3-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида (72 мг, 39%) в виде соли HCl. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.26 (s, 1Н), 8.58 (d, 1Н, J=1.8 Hz), 8.32 (s, 1Н), 7.83-7.79 (m, 2Н), 7.56-7.51 (m, 4 h), 6.62 (s, 1Н), 6.39 (d, 1Н, J=1.5 Hz), 1.61 (s, 9Н). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 333, t_R=1.648 мин, ВЭЖХ: 98.3% при 214 нм, 99.29% при 254 нм, t_R=6.1 мин.

Пример 7: Синтез

8-(2,2-Диметилпирролидин-1-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазина

Стадия 1

6-хлор-8-(2,2-диметилпирролидин-1-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин

К раствору 2,2-диметилпирролидина (0.248 г, 2.5 ммоль) в ДМФ (8 мл) добавили NaH (0.060 г, 60% дисперсия в минеральном масле, 2.5 ммоль) и перемешивали в течение 0.5 ч. К этой смеси добавили 8-бромо-6-хлороимидазо[1,2-b]пиридазин (0.233 г, 1 ммоль) в атмосфере N₂. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Затем ее разделили между 15 мл насыщенного раствора NH₄Cl и 15 мл эфира. Органический слой промыли водой (10 мл × 3) и насыщенным раствором NaCl (10 мл × 3), высушили над NaSO₄, сконцентрировали под вакуумом, и очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 3:1) с получением 6-хлор-8-(2,2-диметилпирролидин-1-ил)имидазо[1,2-b]пиридазина (0.140 г, 22%) в виде светло-коричневого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 251.1, t_R=1.698 мин.

Стадия 2

8-(2,2-Диметилпирролидин-1-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин

Смесь 6-хлор-8-(2,2-диметилпирролидин-1-ил)имидазо[1,2-b]пиридазина (140 мг, 0.56 ммоль), фенилбороновой кислоты (103 мг, 0.84 ммоль), Pd₂(dba)₃ (34 мг, 0.06 ммоль), X-phos (114 мг, 0.24 ммоль) и K₂CO₃ (235 мг, 1.70 ммоль) в диоксане (10 мл) и воде (1 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 4 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и получившуюся смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, CH₂Cl₂:МеОН=200:1) с получением 8-(2,2-диметилпирролидин-1-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазина (65 мг, 40%) в виде светло-желтого осадка. 1Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 7.91-7.87 (m, 3Н), 7.53-7.49 (m, 4 h), 6.54 (s, 1Н), 4.43-4.40 (m, 1Н), 2.08-2.06 (m, 4 h), 1.70 (s, 6Н). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 293, t_R=1.76 мин, ВЭЖХ: 95% при 214 нм, 95.55% при 254 нм, t_R=3.943 мин.

Пример 8: Синтез

Метил 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата

Стадия 1

Метил 3-(6-аминопиридазин-3-ил)бензоат

Смесь 6-хлорпиридазин-3-амина (5 г, 38.6 ммоль), метил 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоата (15.2 г, 58 ммоль), Pd₂(dba)₃ (2.22 г, 3.86 ммоль), X-phos (7.35 г, 15.44 ммоль) и Na₂CO₃ (12.3 г, 115.8 ммоль) в диоксане (150 мл) и воде (15 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 6 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и получившийся остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, CH₂Cl₂:МеОН=20:1) с получением метил 3-(6-аминопиридазин-3-ил)бензоата (7.4 г, 84%) в виде белого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 230.1, t_R=1.111 мин.

Стадия 2

Метил 3-(6-амино-5-бромпиридазин-3-ил)бензоат

В 150 мл круглодонную колбу поместили метил 3-(6-аминопиридазин-3-ил)бензоат (2.29 г, 10 ммоль), NaHCO₃ (1.68 г, 20 моль) и метанол (40 мл). К этой суспензии добавили Br₂ (1.6 г, 10 ммоль) по каплям в течение приблизительно 30 минут при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 16 ч, затем отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 2:1) с получением метил 3-(6-амино-5-бромпиридазин-3-ил)бензоата (1.2 г, 39%) в виде светло-оранжевого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 308.0, t_R=1.377 мин.

Стадия 3

Метил 3-(8-бромимидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоат

Раствор Метил 3-(6-амино-5-бромпиридазин-3-ил)бензоата (1 г, 3.25 ммоль), 2-хлор-1,1-диэтоксиэтана (0.6 г, 3.9 ммоль), PTSA (0.62 г, 3.9 ммоль) в изопропаноле (10 мл) нагревали до 80°C в течение 40 ч. После охлаждения до комнатной температуры, раствор сконцентрировали под вакуумом. Получившуюся смесь обработали насыщенным раствором NaHCO₃ (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (50 мл × 3), высушили над Na₂SO₄, отфильтровали и сконцентрировали. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 3:1) с получением метил 3-(8-бромимидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (0.6 г, 56%) в виде белого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 332.0, 333.9, t_R=1.520 мин.

Стадия 4

Метил 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоат

Смесь метил 3-(8-бромимидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (288 мг, 0.87 ммоль), 6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (230 мг, 1.3 ммоль), Pd₂(dba)₃ (50 мг, 0.087 ммоль), BINAP (217 мг, 0.348 ммоль), Cs₂CO₃ (851 мг, 2.61 ммоль) и диоксана (20 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 16 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и получившуюся смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, CH₂Cl₂:МеОН=100:1) с получением метил 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (240 мг, 64%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CDCl₃): δ 8.72 (s, 1Н), 8.60 (s, 1Н), 8.19-8.08 (m, 3Н), 7.92 (s, 1Н), 7.59-7.54 (m, 2Н), 7.41 (t, 1Н, J=8.1 Hz), 6.20 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.03 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.27-4.23 (m, 1Н), 3.99 (s, 3Н), 3.69-3.63 (m, 1Н), 3.53-3.43 (m, 1Н), 2.15-1.99 (m, 3H), 1.99 (brs, 1Н), 1.21 (d, 3Н, J=6.3 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 429, t_R=2.055 мин, ВЭЖХ: 96.86% при 214 нм, 96.95% при 254 нм, t_R=3.763 мин.

Пример 9: Синтез

3-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты

К раствору метил 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (210 мг, 0.49 ммоль) в диоксане (10 мл) и воде (10 мл) добавили NaOH (150 мг, 3.75 ммоль), смесь нагревали до 40°C с перемешиванием в течение 2 ч. Раствор сконцентрировали под вакуумом, промыли дихлорметаном (10 мл × 3), затем добавили дополнительное количество воды (10 мл) и этот раствор довели до pH=4 посредством добавления концентрированной HCl. Образовавшийся остаток отфильтровали с получением 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (0.160 г, 78%) в виде светло-желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 13.25 (s, 1Н), 9.74 (s, 1Н), 8.85 (s, 1Н), 8.50 (s, 1Н), 8.26-8.08 (m, 3Н), 7.72-7.67 (m, 2Н), 7.53-7.44 (m, 1Н), 6.75 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.09 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.25-4.21 (m, 1Н), 3.62-3.57 (m, 1Н), 2.13-1.98 (m, 3Н), 1.70-1.68 (m, 2Н), 1.12 (d, 3Н, J=6.0 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 415, t_R=1.68 мин, ВЭЖХ: 98.2% при 214 нм, 98.37% при 254 нм, t_R=6.21 мин.

Пример 10: Синтез

4-(3-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)benzamido)бензойной кислоты

Стадия 1

трет-бутил 4-(3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамидо)бензоат

Смесь 3-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (49 мг, 0.12 ммоль), трет-бутил 4-аминобензоата (23 мг, 0.12 ммоль), EDCI (92 мг, 0.48 ммоль), N-метил-имидазола (40 мг, 0.48 ммоль) и дихлорметана (3 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Раствор сконцентрировали под вакуумом и остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, CH₂Cl₂:МеОН=40:1~100:1) с получением трет-бутил 4-(3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамидо)бензоата (43 мг, 61%) в виде желтого масла. [М+Н]⁺, 590.2, t_R=2.283 мин.

Стадия 2

4-(3-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамидо)бензойная кислота

К раствору трет-бутил 4-(3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамидо)бензоата (39 мг, 0.12 ммоль) в дихлорметане (3 мл) добавили ТФУ (3 мл). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Раствор сконцентрировали под вакуумом Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 1:1) с получением 4-(3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамидо)бензойной кислоты (30 мг, 85%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 8.95 (s, 1Н), 8.32 (s, 1Н), 8.29 (s, 1Н), 8.02-7.99 (m, 3Н), 7.90-7.80 (m, 4 h), 7.59 (t, 1Н, J=7.5 Hz), 7.38 (t, 1Н, J=7.5 Hz), 6.18 (d, 1 ч, J=7.8 Hz), 6.03 (d, 1 ч, J=8.1 Hz), 4.05-3.97 (m, 1Н), 3.37 (s, 1Н), 3.19-3.17 (m, 1Н), 1.80-1.71 (m, 3Н), 1.44 (brs, 1Н), 0.92 (d, 3Н, J=6.0 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 534, t_R=1.660 мин, ВЭЖХ: 96.17% при 214 нм, 96.09% при 254 нм, t_R=4.541 мин.

Пример 11: Синтез

Натрия 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата

Раствор NaOH в воде (0.05 моль/л, 1.2 мл) добавили к 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоте (25 мг, 0.06 ммоль) и смесь перемешивали до полного растворения осадка. Раствор сконцентрировали под вакуумом с получением натрия 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (20 мг, 76%) в виде белого осадка. 1Н HMR (300 MHz, D₂O): δ 7.98-7.77 (m, 2Н), 7.55-7.38 (m, 2Н), 7.26-7.05 (m, 3Н), 6.80 (brs, 1Н), 5.50 (brs, 1Н), 5.41-5.33 (m, 1Н), 3.39 (brs, 1Н), 2.91 (brs, 1Н), 2.63 (brs, 1Н), 1.58-1.30 (m, 4 h), 0.60 (s, 3Н).

Пример 12: Синтез

3-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамида

Смесь 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (50 мг, 0.12 ммоль), хлорида аммония (25 мг, 1.44 ммоль), EDCI (36 мг, 0.18 ммоль), HOBT (24 мг, 0.18 ммоль) в дихлорметане (3 мл), ДМФ (0.5 мл) и Et₃N (27 мг, 0.24 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Раствор сконцентрировали под вакуумом, промыли водой (10 мл × 3), очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, CH₂Cl₂:МеОН=20:1) с получением 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамида (24 мг, 48%) в виде желтого масла. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 9.67 (s, 1Н), 8.85 (s, 1Н), 8.45 (s, 1Н), 8.23 (s, 1Н), 8.13-7.99 (m, 3Н), 7.68-7.59 (m, 2Н), 7.49-7.42 (m, 2Н), 6.73 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.08 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.25-4.21 (m, 1Н), 3.60-3.57 (m, 1Н), 3.44-3.38 (m, 1Н), 2.06-1.95 (m, 3Н), 1.67 (s, 1Н), 1.08 (d, 3Н, J=6.0 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 414, t_R=1.633 мин, ВЭЖХ: 98.33% при 214 нм, 97.74% при 254 нм, t_R=5.64 мин.

Пример 13: Синтез

N-(6-(2-Метилпиперидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Стадия 1

6-Фенилпиридазин-3-амин

Смесь 6-хлорпиридазин-3-амина (2 г, 15.4 ммоль), фенилбороновой кислоты (2.83 г, 23.2 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0.89 г, 1.6 ммоль), X-phos (2.94 г, 6.2 ммоль) и Na₂CO₃ (4.91 г, 46.3 ммоль) в диоксане (50 мл) и воде (5 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 6 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и получившуюся смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, CH₂Cl₂:МеОН=20:1) с получением 6-фенилпиридазин-3-амина (2.06 г, 78%) в виде белого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 172.1, t_R=1.04 мин.

Стадия 2

4-бромо-6-фенилпиридазин-3-амин

В 150 мл круглодонную колбу поместили 6-фенилпиридазин-3-амин (2.5 г, 14.5 ммоль), NaHCO₃ (2.44 г, 29 ммоль) и метанол (50 мл), затем к этой суспензии добавили Br₂ (2.317 г, 14.5 ммоль) по каплям в течение приблизительно 30 минут при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 16 ч, затем отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 2:1) с получением 4-бромо-6-фенилпиридазин-3-амина (1.2 г, 33%) в виде светло-оранжевого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 250.0, t_R=1.487 мин.

Стадия 3

8-бромо-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин

Раствор 4-бромо-6-фенилпиридазин-3-амина (1.2 г, 4.8 ммоль), 2-хлор-1,1-диэтоксиэтана (0.884 г, 5.74 ммоль), PTSA (1.09 г, 5.74 ммоль) в изопропаноле (25 мл) нагревали до 80°C в течение 40 ч. После охлаждения до комнатной температуры, раствор сконцентрировали под вакуумом. Получившуюся смесь обработали насыщенным раствором водн. NaHCO₃ (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (50 мл × 3), высушили над Na₂SO₄, отфильтровали и сконцентрировали. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 3:1) с получением 8-бромо-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазина (0.6 г, 46%) в виде белого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 274.0, t_R=1.541 мин.

Стадия 4

6-(2-Метилпиперидин-1-ил)пиридин-2-амин

Суспензию 6-фторпиридин-2-амина (448 мг, 4 ммоль) и 2-метилпиперидина (596 мг, 6 ммоль) в воде (0.5 мл) нагревали до 205°C в микроволновой печи в течение 30 минут. Реакционную смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 10:1) с получением 6-(2-метилпиперидин-1-ил)пиридин-2-амина (376 мг, 49%) в виде коричневого масла. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 192.2, t_R=1.266 мин.

Стадия 5

N-(6-(2-Метилпиперидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Смесь 8-бромо-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазина (125 мг, 0.46 ммоль), 6-(2-метилпиперидин-1-ил)пиридин-2-амина (144 мг, 0.75 ммоль), Pd₂(dba)₃ (29 мг, 0.05 ммоль), BINAP (125 мг, 0.2 ммоль), Cs₂CO₃ (489 мг, 1.5 ммоль) и диоксана (10 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 16 ч в атмосфере N₂. Раствор удалили под вакуумом и получившуюся смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 3:1) с получением неочищенного продукта, который дополнительно очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/50% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением светло-желтого осадка. Его растворили в метаноле, добавили три капли концентрированной HCl, и смесь перемешивали в течение 5 минут, затем сконцентрировали под вакуумом с получением N-(6-(2-метилпиперидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (18 мг, 10%) в виде соли HCl. ¹Н HMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.99 (s, 1Н), 8.44 (s, 1Н), 8.20 (s, 1Н), 8.05-7.98 (m, 3Н), 7.60 (brs, 3Н), 7.46-7.28 (m, 2Н), 4.12 (brs, 1Н), 3.92-3.81 (m, 1Н), 3.65-3.56 (m, 1Н), 2.07-1.66 (m, 6Н), 1.17 (d, 3Н, J=5.7 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 385, t_R=2.081 мин, ВЭЖХ: 99.49% при 214 нм, 99.48% при 254 нм, t_R=3.588 мин.

Пример 14: Синтез

Метил 4-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата

Стадия 1

Метил 4-(6-аминопиридазин-3-ил)бензоат

Смесь 6-хлорпиридазин-3-амина (3.24 г, 25 ммоль), метил 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоата (9.8 г, 37.4 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0.72 г, 1.25 ммоль), X-phos (1.19 г, 2.5 ммоль) и Na₂CO₃ (7.95 г, 75 ммоль) в диоксане (150 мл) и воде (15 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 4 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и получившуюся смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, CH₂Cl₂:МеОН=20:1) с получением метил 4-(6-аминопиридазин-3-ил)бензоата (2.8 г, 48%) в виде белого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 230.1, t_R=1.213 мин.

Стадия 2

Метил 4-(6-амино-5-бромпиридазин-3-ил)бензоат

В 250 мл круглодонную колбу поместили метил 4-(6-аминопиридазин-3-ил)бензоат (2.8 г, 12.2 ммоль), NaHCO₃ (2.05 г, 22.4 ммоль) и метанол (100 мл) и к этой суспензии добавили Br₂ (1.95 г, 12.2 ммоль) по каплям в течение приблизительно 30 минут при комнатной температуре. Смесь перемешивали в течение 16 ч, затем отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 2:1) с получением метил 4-(6-амино-5-бромпиридазин-3-ил)бензоата (1.64 г, 43.6%) в виде светло-оранжевого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 309.9, t_R=1.397 мин.

Стадия 3

Метил 4-(8-бромимидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоат

Раствор метил 4-(6-амино-5-бромпиридазин-3-ил)бензоата (1.64 г, 5.32 ммоль), 2-хлор-1,1-диэтоксиэтана (0.984 г, 6.39 ммоль) и PTSA (1.215 г, 6.39 ммоль) в изопропаноле (50 мл) нагревали до 80°C в течение 40 ч. После охлаждения до комнатной температуры, раствор сконцентрировали под вакуумом. Получившуюся смесь обработали насыщенным раствором NaHCO₃ (50 мл), экстрагировали дихлорметаном (50 мл × 3), высушили над Na₂SO₄, отфильтровали и сконцентрировали. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 3:1) с получением метил 4-(8-бромимидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (640 мг, 36%) в виде белого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 333.9, t_R=1.637 мин.

Стадия 4

Метил 4-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоат

Смесь метил 4-(8-бромимидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (208 мг, 0.63 ммоль), 6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (168 мг, 0.95 ммоль), Pd₂(dba)₃ (37 мг, 0.063 ммоль), BINAP (157 мг, 0.252 ммоль), Cs₂CO₃ (616 мг, 1.89 ммоль) и диоксана (10 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 16 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и получившуюся смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, CH₂Cl₂:МеОН=30:1) с получением метил 4-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (120 мг, 45%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.81 (s, 1Н), 8.09-7.98 (m, 5Н), 7.59 (d, 1Н, J=1.5 Hz), 7.42 (t, 1Н, J=8.4 Hz), 6.27 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.08 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.29-4.21 (m, 1Н), 3.96 (s, 3Н), 3.62-3.58 (m, 1Н), 3.43-3.40 (m, 1Н), 2.16-2.12 (m, 3H), 1.78-75 (m, 1Н), 1.19 (d, 3Н, J=6.3 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 429, t_R=1.989 мин, ВЭЖХ: 94.6% при 214 нм, 96.8% при 254 нм, t_R=5.255 мин.

Пример 15: Синтез

4-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты

К раствору метил 4-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (220 мг, 0.51 ммоль) в диоксане (10 мл) и воде (9 мл) добавили NaOH (200 мг, 5 ммоль), затем смесь нагревали до 40°C с перемешиванием в течение 4 ч. Раствор сконцентрировали до приблизительно 10 мл под вакуумом и промыли дихлорметаном (10 мл × 3). Добавили воду (10 мл) и раствор довели до pH=4 посредством добавления концентрированной HCl. Образовавшийся осадок отфильтровали с получением 4-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (0.185 г, 87%) в виде светло-желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 9.72 (s, 1Н), 8.82 (s, 1Н), 8.23 (s, 1Н), 8.09-8.02 (m, 3Н), 7.69 (s, 1Н), 7.44 (t, 1Н, J=7.5 Hz), 6.73 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.08 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.23-4.20 (m, 1Н), 3.58-3.56 (m, 2Н), 2.08-1.97 (m, 3Н), 1.68 (s, 1Н), 1.12 (d, 1Н, J=6.3 Hz). ЖХМС: [М+Н]⁺, 415, t_R=1.652 мин, ВЭЖХ: 98.19% при 214 нм, 97.87% при 254 нм, t_R=5.967 мин.

Пример 16: Синтез

4-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-N-(2-(пиридин-4-ил)этил)бензамида

Смесь 4-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (41 мг, 0.1 ммоль), 2-(пиридин-4-ил)этанамина (15 мг, 0.12 ммоль), EDCI (77 мг, 0.4 ммоль), N-метил-имидазола (33 мг, 0.4 ммоль), дихлорметан (3 мл) и ДМФ (0.5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Раствор сконцентрировали под вакуумом, тритурировали водой (10 мл × 3), и остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, CH₂Cl₂:МеОН=30:1) с получением 4-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-N-(2-(пиридин-4-ил)этил)бензамида (12 мг, 24%) в виде желтого масла. ¹Н HMR (300 HMz, ДМСО): δ 9.68 (s, 1Н), 8.81 (s, 1Н), 8.74-8.70 (m, 1Н), 8.49-8.47 (m, 2Н), 8.23 (s, 1Н), 8.03-7.95 (m, 4 h), 7.68 (s, 1Н), 7.46 (t, 1Н, J=8.4 Hz), 7.30 (s, 1Н), 7.29 (s, 1Н), 6.75 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.09 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.25-4.21 (m, 1Н), 3.61-3.56 (m, 2Н), 3.47-3.40 (m, 2Н), 2.92 (t, 2Н, J=6.6 Hz), 2.11-1.99 (m, 3Н), 1.71 (s, 1Н), 0.85 (d, 3Н, J=6.6 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 519, t_R=1.333 мин, ВЭЖХ: 100% при 214 нм, 100% при 254 нм, t_R=5.008 мин.

Пример 17: Синтез

4-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамида

Смесь 4-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (45 мг, 0.11 ммоль), 0.5 М раствора аммиака в диоксане (23 мг, 1.3 ммоль), EDCI (32 мг, 0.163 ммоль) и HOBt (22 мг, 0.163 ммоль) в дихлорметане (3 мл), ДМФ (0.5 мл) и Et₃N (22 мг, 0.22 ммоль) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Раствор сконцентрировали под вакуумом, промыли водой (10 мл × 3), и очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, CH₂Cl₂:МеОН=30:1) с получением 4-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамида (13 мг, 29%) в виде желтого масла. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 9.68 (s, 1Н), 8.82 (s, 1Н), 8.44 (s, 1Н), 8.23 (s, 1Н), 8.12-7.99 (m, 5Н), 7.68 (s, 1Н), 7.48-7.43 (m, 2Н), 6.74 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.09 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.26-4.21 (m, 1Н), 3.58-3.40 (m, 2Н), 2.09-2.00 (m, 3Н), 1.74-1.70 (m, 1Н), 1.15 (d, 3Н, J=6.0 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 414, t_R=1.547 мин, ВЭЖХ: 99.34% при 214 нм, 99.33% при 254 нм, t_R=5.357 мин.

Пример 18: Синтез

6-(бензо[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Смесь 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (66 мг, 0.2 ммоль), бензо[d][1,3]диоксол-5-илбороновой кислоты (60 мг, 0.24 ммоль), Pd₂(dba)₃ (12 мг, 0.02 ммоль), X-phos (39 мг, 0.08 ммоль) и Na₂CO₃ (64 мг, 0.6 ммоль) в диоксане (5 мл) и воде (0.5 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 16 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и получившуюся смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, CH₂Cl₂:МеОН=20:1) с получением неочищенного продукта в виде желтого масла, который затем очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 3:1) с получением 6-(диметил[d][1,3]диоксол-5-ил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (62 мг, 75%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 9.58 (s, 1Н), 8.69 (s, 1Н), 8.14 (s, 1Н), 7.61 (s, 1Н), 7.44-7.39 (m, 3Н), 7.06-7.04 (m, 1Н), 6.70 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.11 (s, 2Н), 6.05 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.27-4.20 (m, 1Н), 3.58-3.53 (m, 1Н), 3.41-3.36 (m, 1Н), 2.07-1.99 (m, 3Н), 1.71-1.68 (m, 2Н), 1.14 (d, 1Н, J=6.0 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 415, t_R=1.965 мин, ВЭЖХ: 99.31% при 214 нм, 99.64% при 254 нм, t_R=6.821 мин.

Пример 19: Синтез

6-(1Н-Индазол-6-ил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Смесь 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (120 мг, 0.365 ммоль), 6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-индазола (134 мг, 0.547 ммоль), Pd₂(dba)₃ (21 мг, 0.037 ммоль), X-phos (70 мг, 0.146 ммоль) и Na₂CO₃ (117 мг, 1.1 ммоль) в диоксане (5 мл) и воде (0.5 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 16 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и получившуюся смесь сначала очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, CH₂Cl₂:МеОН=20:1), и затем еще раз (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 3:1) с получением 6-(1Н-индазол-6-ил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (37 мг, 25%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 13.31 (s, 1Н), 9.69 (s, 1Н), 8.87 (s, 1Н), 8.23 (s, 1Н), 8.17 (s, 1Н), 8.03 (s, 1Н), 7.91 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 7.69-7.67 (m, 2Н), 7.45 (t, 1Н, J=7.8 Hz), 6.75 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.08 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.21 (brs, 1Н), 3.58 (brs, 1Н), 3.45-3.38 (m, 1Н), 2.06-1.97 (m, 3Н), 1.69 (brs, 1Н), 1.11 (d, 3Н, J=6.0 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 411, t_R=1.672 мин, ВЭЖХ: 95.88% при 214 нм, 98.36% при 254 нм, t_R=5.913 мин.

Пример 20: Синтез

3-(8-(6-(2-(Гидроксиметил)пирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты

Стадия 1

Метил 3-(8-(6-(2-(гидроксиметил)пирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоат

Смесь метил 3-(8-бромимидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (200 мг, 0.6 ммоль), (1-(6-аминопиридин-2-ил)пирролидин-2-ил)метанола (176 мг, 0.9 ммоль), Pd₂(dba)₃ (36 мг, 0.06 ммоль), BINAP (152 мг, 0.24 ммоль), Cs₂CO₃ (592 мг, 1.8 ммоль) и диоксана (10 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 16 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и получившуюся смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, CH₂Cl₂:МеОН=20:1) с получением метил 3-(8-(6-(2-(гидроксиметил)пирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (185 мг, 69%) в виде желтого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 223.2, [2М+Н]⁺, 445.2, t_R=1.737 мин.

Стадия 2

3-(8-(6-(2-(Гидроксиметил)пирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойная кислота

К раствору метил 3-(8-(6-(2-(гидроксиметил)пирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазол[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (185 мг, 0.416 ммоль) в диоксане (5 мл) и воде (4.5 мл) добавили NaOH (167 мг, 4.16 ммоль), затем смесь нагревали до 40°C с перемешиванием в течение 4 ч. Раствор сконцентрировали под вакуумом, затем добавили воду (10 мл) и раствор промыли дихлорметаном (10 мл × 3). Водный слой довели до pH=4 посредством добавления концентрированной HCl. Образовавшийся остаток отфильтровали с получением 3-(8-(6-(2-(гидроксиметил)пирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (0.096 г, 54%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.84 (s, 1Н), 9.19 (s, 1Н), 8.60 (s, 1Н), 8.51 (s, 1Н), 8.31 (s, 1Н), 8.23 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 8.13 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 7.71 (t, 1Н, J=7.8 Hz), 7.53 (t, 1Н, J=7.8 Hz), 6.72 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.27 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 3.96 (brs, 2Н), 3.61 (brs, 1Н), 3.46-3.37 (m, 2Н), 2.07-1.95 (m, 4 h). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 431, t_R=1.459 мин, ВЭЖХ: 99.27% при 214 нм, 99.49% при 254 нм, t_R=5.08 мин.

Пример 21: Синтез

(R)-N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Стадия 1

(R)-6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амин

Суспензию 6-фторпиридин-2-амина (448 мг, 4 ммоль) и (R)-2-метилпирролидина (511 мг, 6 ммоль) в воде (0.5 мл) нагревали до 205°C в микроволновой печи в течение 30 минут. Реакционную смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 3:1) с получением (R)-6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (581 мг, 82%) в виде светло-желтого масла. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 178.2, t_R=1.049 мин.

Стадия 2

(R)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Смесь 8-бромо-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазина (166 мг, 0.6 ммоль), (R)-6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (160 мг, 0.9 ммоль), Pd₂(dba)₃ (36 мг, 0.06 ммоль), BINAP (152 мг, 0.24 ммоль), Cs₂CO₃ (593 мг, 1.8 ммоль) и диоксана (10 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 16 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и получившуюся смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 3:1) с получением (R)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (78 мг, 35%) в виде белого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 8.76 (s, 1Н), 7.95-7.87 (m, 3Н), 7.55-7.35 (m, 5Н), 6.23 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.02 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.22-4.18 (m, 1Н), 3.57-3.53 (m, 1Н), 3.41-3.36 (m, 1Н), 2.09-1.98 (m, 3Н), 1.72 (brs, 1Н), 1.16 (d, 3Н, J=6.0 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 371, t_R=1.994 мин, ВЭЖХ: 99.27% при 214 нм, 99.26% при 254 нм, t_R=4.72 мин.

Пример 22: Синтез

(R)-3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты гидрохлорида

Стадия 1

(R)-Метил 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоат

Смесь метил 3-(8-бромимидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (200 мг, 0.6 ммоль), (R)-6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (160 мг, 0.9 ммоль), Pd₂(dba)₃ (36 мг, 0.06 ммоль), BINAP (152 мг, 0.24 ммоль), Cs₂CO₃ (592 мг, 1.8 ммоль) и диоксана (10 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 16 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и получившуюся смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 3:1) с получением (R)-метил 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (110 мг, 43%) в виде желтого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 429.1, t_R=2.064 мин.

Стадия 2

(R)-3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты гидрохлорид

К перемешанному раствору (R)-метил 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (78 мг, 0.18 ммоль) в диоксане (5 мл) и воде (5 мл) добавили NaOH (72 мг, 1.8 ммоль), затем смесь нагревали до 40°C. Через 4 ч раствор сконцентрировали под вакуумом. Добавили воду (5 мл) к остатку и смесь промыли дихлорметаном (5 мл × 3). Водный слой довели до pH=4 посредством добавления концентрированной HCl. Образовавшийся остаток собрали фильтрацией. Осадок дополнительно очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/50% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением светло-желтого осадка. Его растворили в метаноле и добавили три капли концентрированной HCl. Смесь перемешивали в течение 5 минут, затем сконцентрировали под вакуумом с получением конечного продукта (R)-3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты гидрохлорида (0.035 г, 46%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.81 (d, 1Н, J=2.7 Hz), 8.58 (s, 1Н), 8.42 (d, 1Н, J=1.8 Hz), 8.25-8.16 (m, 3Н), 7.67-7.58 (m, 2Н), 6.55 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.41 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.26-4.24 (m, 1Н), 3.68-3.63 (m, 1Н), 3.57-3.48 (m, 1Н), 2.21-2.07 (m, 3Н), 1.83-1.79 (m, 1Н), 1.20 (d, 3Н, J=6.3 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 415, t_R=1.625 мин, ВЭЖХ: 100% при 214 нм, 100% при 254 нм, t_R=6.27 мин.

Пример 23: Синтез

3-(8-(6-(3-Аза-бицикло[3.1.0]hexan-3-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты

Стадия 1

3-Бензил-3-аза-бицикло[3.1.0]гексан-2,4-дион

Бензиламин (2.5 мл, 22.3 ммоль) добавили по каплям к охлажденному на льду 3-аза-бицикло[3.1.0]гексан-2,4-диону (2.5 г, 22.3 ммоль), затем смесь нагревали до 170°C с перемешиванием в течение 1.5 ч. После охлаждения до комнатной температуры, получившуюся смесь кристаллизовали из изопропанола с получением 3-бензил-3-аза-бицикло[3.1.0]гексан-2,4-диона (3.72 г, 83%) в виде белого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 202.1, t_R=1.478 мин.

Стадия 2

3-Бензил-3-аза-бицикло[3.1.0]гексан

Red-Al (70% в толуоле) (24 г, 83.2 ммоль) растворили в абсолютном эфире (100 мл) и охладили до 0°C в атмосфере N₂, затем добавили 3-бензил-3-аза-бицикло[3.1.0]гексан-2,4-дион (3.72 г, 18.5 ммоль). Смесь перемешивали при 0°C в течение 30 мин, затем перемешивали при кипении с обратным холодильником в течение 4 ч. Воду (50 мл) добавили к охлажденному раствору и смесь отфильтровали через целит. Органическую фазу высушили над Na₂SO₄, сконцентрировали под вакуумом с получением 3-бензил-3-аза-бицикло[3.1.0]гексана (3.0 г, 94%) в виде светло-красного масла. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 174.2, t_R=0.546 мин.

Стадия 3

3-Аза-бицикло[3.1.0]гексана гидрохлорид

Смесь 3-бензил-3-аза-бицикло[3.1.0]гексана (3.0 г, 17.3 ммоль), Pd(OH)₂ (150 мг, 1.1 ммоль) и метанола (25 мл) перемешивали при комнатной температуре под давлением 4 атмосферы Н₂ в течение 24 ч. Раствор отфильтровали и органический слой барботировали газом HCl до достижения pH=4. Раствор сконцентрировали под вакуумом, получившийся остаток промыли дихлорметаном (10 мл × 2) и высушили с получением 3-аза-бицикло[3.1.0]гексана гидрохлорида (1.83 г, 88%) в виде белого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 84.2, t_R=0.313 мин.

Стадия 4

6-(3-Аза-бицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пиридин-2-амин

Суспензию 6-фторпиридин-2-амина (448 мг, 4 ммоль), 3-аза-бицикло[3.1.0]гексана гидрохлорида (576 мг, 4.8 ммоль) и Et₃N (808 мг, 8 ммоль) в воде (0.5 мл) нагревали до 205°C в микроволновой печи в течение 30 минут. Реакционную смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 10:1) с получением 6-(3-аза-бицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пиридин-2-амина (535 мг, 76%) в виде бесцветного масла. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 176.2, t_R=1.042 мин.

Стадия 5

Метил 3-(8-(6-(3-аза-бицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоат

Смесь метил 3-(8-бромимидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (250 мг, 0.75 ммоль), 6-(3-аза-бицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пиридин-2-амина (198 мг, 1.13 ммоль), Pd₂(dba)₃ (43 мг, 0.075 ммоль), BINAP (187 мг, 0.3 ммоль), Cs₂CO₃ (734 мг, 2.25 ммоль) и диоксана (10 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 16 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и получившуюся смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 3:1) с получением неочищенного продукта, который дополнительно очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 30% ацетонитрил/70% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/50% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением метил 3-(8-(6-(3-аза-бицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (70 мг, 22%) в виде светло-желтого осадка. [М+Н]⁺, 427.1, t_R=1.926 мин.

Стадия 6

3-(8-(6-(3-Аза-бицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойная кислота

К раствору метил 3-(8-(6-(3-аза-бицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (70 мг, 0.16 ммоль) в диоксане (5 мл) и воде (4 мл) добавили NaOH (63 мг, 1.6 ммоль), затем смесь нагревали до 40°C с перемешиванием в течение 4 ч. Раствор сконцентрировали под вакуумом. К остатку добавили воду (10 мл) и промыли дихлорметаном (15 мл × 3). Водный слой довели до pH=4 посредством добавления концентрированной HCl. Образовавшийся остаток собрали посредством фильтрации с получением 3-(8-(6-(3-аза-бицикло[3.1.0]гексан-3-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (0.045 г, 67%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 9.88 (s, 1Н), 8.92 (s, 1Н), 8.54 (s, 1Н), 8.31-8.10 (m, 3Н), 7.80-7.72 (m, 2Н), 7.47 (s, 1Н), 6.76 (s, 1Н), 6.11 (s, 1Н), 3.71-3.54 (m, 4 h), 1.72 (s, 2Н), 0.78 (s, 1Н), 0.22 (s, 1Н). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 413, t_R=1.665 мин, ВЭЖХ: 95.09% при 214 нм, 95% при 254 нм, t_R=5.831 мин.

Пример 24: Синтез

(S)-2-метил-3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты

Стадия 1

(S)-6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амин

Суспензию 6-фторпиридин-2-амина (1.12 г, 10 ммоль) и (S)-2-метилпирролидина (1.03 г, 12 ммоль) в воде (1 мл) нагревали до 205°C в микроволновой печи в течение 30 минут. Реакционную смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 5:1) с получением (S)-6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (1.5 г, 83%) в виде бесцветного масла. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 178.2, t_R=1.066 мин.

Стадия 2

(S)-6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Смесь 8-бромо-6-хлороимидазо[1,2-b]пиридазина (300 мг, 1.3 ммоль), (S)-6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (252 мг, 1.42 ммоль), Pd₂(dba)₃ (75 мг, 0.13 ммоль), BINAP (324 мг, 0.52 ммоль), Cs₂CO₃ (1272 мг, 3.9 ммоль) и диоксана (20 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 16 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и получившуюся смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 3:1) с получением (S)-6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (124 мг, 29%) в виде желтого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 329.0, t_R=1.951 мин.

Стадия 3

(S)-Метил 2-метил-3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоат

Смесь (S)-6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (124 мг, 0.38 ммоль), метил 2-метил-3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоата (124 мг, 0.45 ммоль), Pd₂(dba)₃ (22 мг, 0.038 ммоль), X-phos (73 мг, 0.152 ммоль) и Na₂CO₃ (121 мг, 1.14 ммоль) в диоксане (10 мл) и воде (1 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 16 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и получившуюся смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, CH₂Cl₂:МеОН=20:1) с получением (S)-метил 2-метил-3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (72 мг, 43%) в виде желтого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 443.2, t_R=1.880 мин.

Стадия 4

(S)-2-метил-3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойная кислота

К раствору (S)-2-метил-3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (72 мг, 0.16 ммоль) в диоксане (5 мл) и воде (4 мл) добавили NaOH (64 мг, 1.6 ммоль), затем смесь нагревали до 40°C с перемешиванием в течение 4 ч. Раствор сконцентрировали под вакуумом, добавили воду (10 мл) и раствор промыли дихлорметаном (10 мл × 3). Водный слой довели до pH=4 посредством добавления концентрированной HCl. Образовавшийся остаток собрали посредством фильтрации и очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 40% ацетонитрил/60% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением конечного продукта (S)-2-метил-3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (41 мг, 59%). ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.43 (s, 1Н), 8.72 (s, 1Н), 8.45 (s, 1Н), 8.12 (s, 1Н), 7.90 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 7.62-7.42 (m, 3Н), 6.68 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.10 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.04-4.00 (m, 2Н), 3.40-3.35 (m, 1Н), 3.18-3.15 (m, 1Н), 2.47 (s, 3Н), 1.96-1.88 (m, 2Н), 1.55-1.51 (m, 1Н), 0.86 (d, 3Н, J=6.0 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 429, t_R=1.619 мин, ВЭЖХ: 100% при 214 нм, 99.42% при 254 нм, t_R=5.838 мин.

Пример 25: Синтез

N-(6-(3-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Стадия 1

6-(3-Метилциклопентил)пиридин-2-амин

Суспензию 6-фторпиридин-2-амина (448 мг, 4 ммоль) и 3-метилпирролидина (408 мг, 4.8 ммоль) в воде (0.5 мл) нагревали до 205°C в микроволновой печи в течение 30 минут. Реакционную смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 5:1) с получением 6-(3-метилциклопентил)пиридин-2-амина (630 мг, 89%) в виде бесцветного масла. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 178.2, t_R=1.080 мин.

Стадия 2

6-хлор-N-(6-(3-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Смесь 8-бромо-6-хлороимидазо[1,2-b]пиридазина (300 мг, 1.3 ммоль), 6-(3-метилциклопентил)пиридин-2-амина (277 мг, 1.56 ммоль), Pd₂(dba)₃ (75 мг, 0.13 ммоль), BINAP (324 мг, 0.52 ммоль), Cs₂CO₃ (1272 мг, 3.9 ммоль) и диоксана (20 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 16 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и получившуюся смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 5:1) с получением 6-хлор-N-(6-(3-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (301 мг, 70%) в виде желтого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 329.1, t_R=1.949 мин.

Стадия 3

N-(6-(3-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Смесь 6-хлор-N-(6-(3-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (296 мг, 0.9 ммоль), фенилбороновой кислоты (165 мг, 1.35 ммоль), Pd₂(dba)₃ (52 мг, 0.09 ммоль), X-phos (172 мг, 0.36 ммоль) и Na₂CO₃ (287 мг, 2.7 ммоль) в диоксане (10 мл) и воде (1 мл) нагревали до 100°C с перемешиванием в течение 16 ч в атмосфере N₂. Раствор удалили под вакуумом и получившуюся смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 5:1) с получением N-(6-(3-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (134 мг, 40%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CDCl₃): δ 8.82 (s, 1Н), 8.06-7.93 (m, 3Н), 7.93-7.39 (m, 5Н), 6.20 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 5.98 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 3.86-3.80 (m, 1Н), 3.67-3.62 (m, 1Н), 3.55-3.46 (m, 1Н), 3.14 (t, 1Н, J=9.3 Hz), 2.47-2.37 (m, 1Н), 2.23-2.14 (m, 1Н), 1.75-1.62 (m, 1Н), 1.19 (d, 3Н, J=6.6 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 371, t_R=2.057 мин, ВЭЖХ: 100% при 214 нм, 100% при 254 нм, t_R=4.787 мин.

Пример 26: Синтез

4-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты

Стадия 1

метил 4-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоат

Смесь метил 4-(8-бромимидазо[1,2-и]пиридазин-6-ил)бензоата (0.3 г, 0.904 ммоль), 5,6-диметоксипиридин-2-амина (0.167 г, 1.084 ммоль), Pd₂(dba)₃ (52 мг, 0.09 ммоль), BINAP (225 мг, 0.362 ммоль) и Cs₂CO₃ (0.884 г, 2.712 ммоль) в диоксане (20 мл) нагревали до 100°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N₂. Смесь охладили и сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:3) с получением метил 4-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (0.518 г) в виде желтого осадка, содержащего неидентифицированные примеси. ЖХ-МС: [М+Н]⁺=406, t_R=1.766 мин.

Стадия 2

4-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойная кислота

К перемешанному раствору метил 4-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (0.135 г, 0.333 ммоль) в диоксане (20 мл) и H₂O (10 мл) добавили NaOH (133 мг, 3.33 ммоль) при 25°C. Через 2 ч смесь промыли эфиром (10 мл) и водный слой довели до pH=4 концентрированной HCl, затем ее сконцентрировали и отфильтровали. Осадок промыли эфиром и высушили с получением 4-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (0.101 г, 77%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 9.98 (s, 1Н), 8.57 (s, 1Н), 8.24 (s, 1Н), 8.11-8.03 (m, 4 h), 7.69 (s, 1Н), 7.43 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 7.13 (d, 1Н, J=8.7 Hz), 4.04 (s, 3Н), 3.79 (s, 3Н). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 391.9, t_R=1.454 мин, ВЭЖХ: 98.08% при 214 нм, 95.71% при 254 нм, t_R=3.628 мин.

Пример 27: Синтез

4-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-N-(2-(пиридин-4-ил)этил)бензамида

Смесь 4-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (47 мг, 0.12 ммоль), 2-(пиридин-4-ил)этанамина (16 мг, 0.132 ммоль), HATU (50 мг, 0.132 ммоль), DIPEA (18 мг, 0.144 ммоль), DMAP (18 мг, 0.144 ммоль) и EDCI (28 мг, 0.144 ммоль) в ДМФ (3 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Этилацетат (50 мл) добавили, затем смесь промыли водой (2×2 мл) и солевым раствором (2×2 мл), затем высушили над безводным сульфатом натрия и сконцентрировали под вакуумом. Остаток промыли эфиром и отфильтровали с получением 4-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-N-(2-(пиридин-4-ил)этил)бензамида (43 мг, 72%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 9.96 (s, 1Н), 8.71 (t, 1Н, J=5.4 Hz), 8.53-8.46 (m, 3Н), 8.21 (s, 1Н), 8.03-7.94 (m, 4 h), 7.67 (s, 1Н), 7.42 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 7.29-7.27 (m, 2Н), 7.11 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.01 (s, 3Н), 3.78 (s, 3Н), 3.60-3.54 (m, 2Н), 2.90 (t, 2Н, J=7.2 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 496, t_R=1.226 мин, ВЭЖХ: 98.86% при 214 нм, 98.46% при 254 нм, t_R=3.144 мин.

Пример 28: Синтез

4-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-N-(2-(2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил)этил)бензамида

Смесь 4-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (76 мг, 0.195 ммоль), 4-(2-аминоэтил)пиридин-2(1Н)-она (64 мг, 0.215 ммоль), 1-метил-1Н-имидазола (96 мг, 1.17 ммоль) и EDCI (223 мг, 1.17 ммоль) в дихлорметане (10 мл) и ДМФ (0.5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, затем добавили дихлорметан (20 мл). Смесь промыли водой (2×2 мл) и солевым раствором (2×2 мл), затем высушили над безводным сульфатом натрия и сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, МеОН : дихлорметан = 1:10) с получением 4-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-N-(2-(2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил)этил)бензамида (44 мг, 44%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 11.35 (s, 1Н), 9.94 (s, 1Н), 8.67 (s, 1Н), 8.52 (s, 1Н), 8.19 (s, 1Н), 8.02-7.93 (m, 4 h), 7.66 (s, 1Н), 7.40 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 7.26 (d, 1Н, J=6.6 Hz), 7.10 (d, 1H, J=8.1 Hz), 6.16 (s, 1H), 6.08 (d, 1H, J=6.3 Hz), 4.00 (s, 3H), 3.76 (s, 3H), 3.50-3.40 (m, 2H), 2.69-2.67 (m, 2H). ЖХ-МС: [M+H]⁺, 512, t_R=1.412 мин, ВЭЖХ: 98.19% при 214 нм, 97.49% при 254 нм, t_R=7.244 мин.

Пример 29: Синтез

N-(5-(2,5-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида

Стадия 1

6-(2,5-Диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амин

Смесь 6-фторпиридин-2-амина (0.5 г, 4.46 ммоль) и 2,5-диметилпирролидина (0.664 г, 6.7 ммоль) в воде (0.3 мл) нагревали до 205°C в течение 0.5 ч в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:30) с получением 6-(2,5-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (0.383 г, 45%) в виде желтого масла. ЖХ-МС: [М+1]⁺=192, t_R=1.048 мин.

Стадия 2

N-(5-(2,5-Диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-Фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорид

Смесь 8-бромо-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазина (0.10 г, 0.37 ммоль), 6-(2,5-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (0.084 г, 0.44 ммоль), Pd₂(dba)₃ (21 мг, 0.037 ммоль), BINAP (92 мг, 0.148 ммоль) и Cs₂CO₃ (0.362 г, 1.11 ммоль) в диоксане (10 мл) нагревали до 100°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N2. После концентрирония под вакуумом остаток очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 30% ацетонитрил/70% вода (0.1% ТФУ V/V) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/50% вода (0.1% ТФУ V/V) линейным образом в течение 9 мин) и фракции, содержащие требуемый продукт подкислили посредством добавления концентрированной HCl с получением N-(5-(2,5-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида (40 мг, 26%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.71 (s, 1Н), 9.06 (s, 1Н), 8.55 (s, 1Н), 8.28 (s, 1Н), 7.95-7.92 (m, 2Н), 7.59-7.48 (m, 4 h), 6.69 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.19 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.12 (brs, 2Н), 2.10-2.06 (m, 2Н), 1.75-1.68 (m, 2Н), 1.19 (s, 3Н), 1.17 (s, 3Н). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 385, t_R=2.162 мин, ВЭЖХ: 96.33% при 214 нм, 98.73% при 254 нм, t_R=5.154 мин.

Пример 30: Синтез

N-(6-(2-Этилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида

Стадия 1

6-(2-Этилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амин

Смесь 6-фторпиридин-2-амина (0.5 г, 4.46 ммоль) и 2-этилпирролидина (0.664 г, 6.7 ммоль) в воде (0.3 мл) нагревали до 205°C в течение 0.5 ч в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:30) с получением 6-(2-этилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (0.57 г, 67%) в виде желтого масла. ЖХ-МС: [М+1]⁺=192, t_R=1.100 мин.

Стадия 2

N-(6-(2-Этилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорид

Смесь 8-бромо-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазина (0.10 г, 0.37 ммоль), 6-(2-этилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (0.084 г, 0.44 ммоль), Pd₂(dba)₃ (21 мг, 0.037 ммоль), BINAP (92 мг, 0.148 ммоль) и Cs₂CO₃ (0.362 г, 1.11 ммоль) в диоксане (10 мл) нагревали до 100°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N₂, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 30% ацетонитрил/70% вода (0.1% ТФУ об./об.) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/50% вода (0.1% ТФУ об./об.) линейным образом в течение 9 мин) и подкислили посредством добавления концентрированной HCl с получением N-(5-(2-этилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида (20 мг, 20%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.79 (s, 1Н), 9.15 (s, 1Н), 8.55 (s, 1Н), 8.29 (s, 1Н), 7.94-7.92 (m, 2Н), 7.58-7.48 (m, 4h), 6.66 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.15 (d, 1H, J=8.1 Hz), 3.88 (brs, 1H), 3.62-3.45 (m, 2H), 2.02-1.97 (m, 3H), 1.86-1.84 (m, 1H), 1.65-1.61 (m, 1H), 1.39-1.31 (m, 1H), 0.65 (t, 3H, J=6.6 Hz). ЖХ-МС: [M+H]⁺, 385, t_R=2.064 мин, ВЭЖХ: 98.89% при 214 нм, 98.40% при 254 нм, t_R=8.047 мин.

Пример 31: Синтез

(1-(6-(6-Фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-иламино)пиридин-2-ил)пирролидин-2-ил)метанола гидрохлорида

Стадия 1

(1-(6-Аминопиридин-3-ил)пирролидин-2-ил)метанол

Смесь 6-фторпиридин-2-амина (0.5 г, 4.46 ммоль) и пирролидин-2-илметанола (0.678 г, 6.7 ммоль) в воде (0.3 мл) нагревали до 205°C в течение 0.5 ч в закрытой пробирке в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:3) с получением (1-(6-аминопиридин-3-ил)пирролидин-2-ил)метанола (0.785 г, 91%) в виде желтого масла. ЖХ-МС: [М+1]⁺=194, t_R=0.968 мин.

Стадия 2

(1-(6-(6-Фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-иламино)пиридин-2-ил)пирролидин-2-ил)метанола гидрохлорид

Смесь 8-бромо-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазина (0.10 г, 0.37 ммоль), (1-(6-аминопиридин-3-ил)пирролидин-2-ил)метанола (0.085 г, 0.44 ммоль), Pd₂(dba)₃ (21 мг, 0.037 ммоль), BINAP (92 мг, 0.148 ммоль) и Cs₂CO₃ (0.362 г, 1.11 ммоль) в диоксане (20 мл) нагревали до 100°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N₂, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем; 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 30% ацетонитрил/70% вода (0.1% ТФУ об./об.) первоначально, переходя до 60% ацетонитрил/40% вода (0.1% ТФУ об./об.) линейным образом в течение 9 мин), затем продуктсодержащие фракции подкислили посредством добавления концентрированной HCl с получением (1-(6-(6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-иламино)пиридин-2-ил)пирролидин-2-ил)метанола гидрохлорида (68 мг, 44%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 11.06 (s, 1Н), 9.19 (s, 1Н), 8.58 (d, 1Н, J=2.1 Hz), 8.38 (d, 1Н, J=2.1 Hz), 7.94-7.91 (m, 2Н), 7.57-7.44 (m, 4 h), 6.68 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.22 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 3.94 (brs, 1Н), 3.55-3.32 (m, 4 h), 2.06-1.91 (m, 4 h). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 387, t_R=1.646 мин, ВЭЖХ: 100% при 214 нм, 100% при 254 нм, t_R=3.695 мин.

Пример 32: Синтез

N-(6-(2,2-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорид

Стадия 1

6-(2,2-Диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амин

Смесь 6-фторпиридин-2-амина (0.5 г, 4.46 ммоль) и 2,2-диметилпирролидина (0.67 г, 6.75 ммоль) в воде (0.3 мл) нагревали до 205°C в течение 0.5 ч в закрытой пробирке в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:15) с получением 6-(2,2-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (0.035 г, 4%) в виде желтого масла. ЖХ-МС: [М+1]⁺=192, t_R=1.048 мин.

Стадия 2

N-(6-(2,2-Диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорид

Смесь 8-бромо-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазина (0.042 г, 0.152 ммоль), 6-(2,2-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (0.035 г, 0.183 ммоль), Pd₂(dba)₃ (9 мг, 0.015 ммоль), BINAP (37 мг, 0.06 ммоль) и Cs₂CO₃ (0.15 г, 0.46 ммоль) в диоксане (20 мл) нагревали до 100°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N₂, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 30% ацетонитрил/70% вода (0.1% ТФУ об./об.) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/50% вода (0.1% ТФУ об./об.) линейным образом в течение 9 мин), затем продуктсодержащие фракции подкислили посредством добавления концентрированной HCl с получением N-(6-(2,2-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-р-толилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида (21 мг, 32%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.45 (s, 1Н), 8.89 (s, 1Н), 8.52 (s, 1Н), 8.22 (s, 1Н), 7.93-7.89 (m, 2Н), 7.58-7.45 (m, 4 h), 6.67 (d, 1 ч, J=7.5 Hz), 6.02 (d, 1 ч, J=8.4 Hz), 3.62 (t, 1Н, J=6.9 Hz). 1.92-1.90 (m, 4 h), 1.23 (s, 6Н). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 385, t_R=2.057 мин, ВЭЖХ: 96.85% при 214 нм, 97.34% при 254 нм, t_R=8.063 мин.

Пример 33: Синтез

4-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-N-(2-(1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил)этил)бензамида

Смесь 4-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (50 мг, 0.265 ммоль), 4-(2-аминоэтил)-1-mэтилпиридин-2(1Н)-она гидрохлорида (16 мг, 0.132 ммоль), 1-метил-1Н-имидазола (118 мг, 1.45 ммоль) и EDCI (276 мг, 1.45 ммоль) в дихлорметане (10 мл) и ДМФ (3 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, затем экстрагировали этилацетатом (50 мл). Объединенные экстракты промыли водой (5 мл × 2), затем солевым раствором (5 мл × 2). После высушивания и концентрирования, остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 5 г, 200~300 меш, метанол : дихлорметан = 1:30) с получением 4-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-N-(2-(1-метил-2-оксо-1,2-дигидропиридин-4-ил)этил)бензамида (27 мг, 21%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 9.94 (s, 1Н), 8.67 (s, 1Н), 8.53 (s, 1Н), 8.20 (s, 1Н), 8.03-7.94 (m, 4 h), 7.66 (s, 1Н), 7.58 (d, 1 ч, J=6.6 Hz), 7.41 (d, 1 ч, J=8.4 Hz), 7.11 (d, 1 ч, J=8.4 Hz), 6.23 (s, 1H), 6.13 (d, 1H, J=7.2 Hz), 4.01 (s, 3H), 3.77 (s, 3H), 3.53-3.47 (m, 2H), 3.36 (s, 3H), 2.69 (t, 2H, J=6.6 Hz). ЖХ-МС: [M+H]⁺, 526, t_R=1.367 мин, ВЭЖХ: 98.9% при 214 нм, 99.36% при 254 нм, t_R=4.615 мин.

Пример 34: Синтез

N-(6-(3,3-Диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Стадия 1

6-(3,3-Диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина

Смесь 6-фторпиридин-2-амина (0.5 г, 4.46 ммоль), 3,3-диметилпирролидина гидрохлорида (0.73 г, 5.35 ммоль) и Et₃N (1.08 г, 10.7 ммоль) в воде (0.2 мл) нагревали до 205°C в течение 0.5 ч в закрытой пробирке в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:15) с получением 6-(3,3-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (0.67 г, 78%) в виде желтого масла. ЖХ-МС: [М+1]⁺=192, t_R=1.187 мин.

Стадия 2

N-(6-(3,3-Диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Смесь 8-бромо-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазина (0.10 г, 0.37 ммоль), 6-(3,3-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (0.084 г, 0.44 ммоль), Pd₂(dba)₃ (21 мг, 0.037 ммоль), BINAP (92 мг, 0.148 ммоль) и Cs₂CO₃ (0.362 г, 1.11 ммоль) в диоксане (10 мл) нагревали до 100°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N₂, затем сконцентрировали и остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:10) с получением N-(6-(3,3-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (36 мг, 26%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 9.68 (s, 1Н), 8.87 (s, 1Н), 8.19 (d, 1Н, J=1.2 Hz), 7.95-7.92 (m, 2Н), 7.64 (s, 1Н), 7.53-7.40 (m, 4 h), 6.72 (d, 1 ч, J=7.8 Hz), 6.02 (d, 1 ч, J=8.1 Hz), 3.51 (t, 1Н, J=6.9 Hz). 3.30 (s, 2Н), 1.81 (t, 2Н, J=6.9 Hz), 1.13 (s, 6Н). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 385, t_R=2.099 мин, ВЭЖХ: 96.88% при 214 нм, 97.82% при 254 нм, t_R=8.077 мин.

Пример 35: Синтез

N-(6-(2-(Метоксиметил)пирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида

Стадия 1

6-(2-(Метоксиметил)пирролидин-1-ил)пиридин-2-амин

Смесь 6-фторпиридин-2-амина (0.5 г, 4.46 ммоль) и 2-(метоксиметил)пирролидина (0.617 г, 5.35 ммоль) в воде (0.2 мл) нагревали до 205°C в течение 0.5 ч в закрытой пробирке в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:15) с получением 6-(2-(метоксиметил)пирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (0.68 г, 74%) в виде желтого масла. ЖХ-МС: [М+1]⁺=208, t_R=1.052 мин.

Стадия 2

N-(6-(2-(Метоксиметил)пирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорид

Смесь 8-бромо-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазина (0.10 г, 0.37 ммоль), 6-(2-(метоксиметил)пирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (0.091 г, 0.44 ммоль), Pd₂(dba)₃ (21 мг, 0.037 ммоль), BINAP (92 мг, 0.148 ммоль) и Cs₂CO₃ (0.362 г, 1.11 ммоль) в диоксане (10 мл) нагревали до 100°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N₂, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 35% ацетонитрил/65% вода (0.1% ТФУ об./об.) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/50% вода (0.1% ТФУ об./об.) линейным образом в течение 9 мин), затем продуктсодержащие фракции подкислили посредством добавления концентрированной HCl с получением N-(5-(2-(метоксиметил)пирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-р-толилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида (41 мг, 26%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.92 (s, 1Н), 8.36 (d, 1Н, J=2.1 Hz), 8.11 (d, 1Н, J=2.1 Hz), 8.01-7.98 (m, 2Н), 7.58-7.50 (m, 4 h), 6.45 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.32 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.24 (brs, 1Н), 3.61-3.58 (m, 1Н), 3.52-3.43 (m, 2Н), 3.38-3.35 (m, 1Н), 3.18 (s, 3Н), 2.12-2.00 (m, 4 h). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 401, t_R=1.974 мин, ВЭЖХ: 99.50% при 214 нм, 99.43% при 254 нм, t_R=6.735 мин.

Пример 36: Синтез

3-(8-(6-(2-(метоксиметил)пирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты

Стадия 1

Метил 3-(8-(6-(2-(метоксиметил)пирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоат

Смесь метил 3-(8-бромимидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (0.10 г, 0.3 ммоль), 6-(2-(метоксиметил)пирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (0.083 г, 0.4 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0.019 г, 0.033 ммоль), BINAP (0.083 г, 0.134 ммоль) и Cs₂CO₃ (0.326 г, 1.0 ммоль) в диоксане (20 мл) нагревали до 100°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N2, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:15) с получением метил 3-(8-(6-(2-(метоксиметил)пирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (0.050 г) в виде желтого осадка. ЖХ-МС: [М+1]⁺=459, t_R=1.985 мин. Он содержал некоторое количество неидентифицированных примесей и был использован сразу без дополнительной очистки.

Стадия 2

3-(8-(6-[2-(Метоксиметил)пирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойная кислота

К перемешанному раствору метил 3-(8-(6-(2-(метоксиметил)пирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоат (0.155 г, 0.34 ммоль) в диоксане (10 мл) и H₂O (4 мл) добавили NaOH (135 мг, 3.4 ммоль) при 40°C. Через 4 ч смесь промыли эфиром (10 мл), водный слой довели до рН=4 концентрированной HCl, затем сконцентрировали и отфильтровали. Собранный осадок промыли эфиром и высушили с получением 3-(8-(6-(2-(метоксиметил)пирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (0.037 г, 28% за две стадии) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.80 (s, 1Н), 8.54 (s, 1Н), 8.20-8.08 (m, 3Н), 7.72 (d, 1Н, J=1.5 Hz), 7.59 (t, 1Н, J=7.8 Hz), 7.45 (t, 1Н, J=7.8 Hz), 6.31 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.17 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.21 (brs, 1Н), 3.62-3.58 (m, 1Н), 3.51-3.42 (m, 2Н), 3.34-3.32 (m, 1Н), 3.11 (s, 3Н), 2.10-2.00 (m, 4 h). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 445, t_R=1.714 мин, ВЭЖХ: 95.14% при 214 нм, 95.00% при 254 нм, t_R=5.9 мин.

Пример 37: Синтез

6-(1H-индазол-5-ил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Стадия 1

6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)пиримидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Смесь 8-бромо-6-хлороимидазо[1,2-b]пиридазина (1.0 г, 4.3 ммоль), 6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (0.84 г, 4.73 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0.247 г, 0.43 ммоль), BINAP (0.536 г, 0.86 ммоль) и Cs₂CO₃ (4.21 г, 12.9 ммоль) в диоксане (30 мл) нагревали до 100°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N₂, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:15) с получением 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (1.2 г, 85%) в виде желтого осадка. ЖХ-МС: [М+1]⁺=329, t_R=1-930 мин.

Стадия 2

6-(1H-Индазол-5-ил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Смесь 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.1 г, 0.304 ммоль), 5-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1Н-индазола (0.082 г, 0.33 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0.035 г, 0.061 ммоль), X-phos (0.058 г, 0.122 ммоль) и Na₂CO₃ (0.097 г, 0.912 ммоль) в диоксане (20 мл) и воде (10 мл) нагревали до 100°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N₂, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, метанол : дихлорметан = 1:30) с получением 6-(1Н-индазол-5-ил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (48 мг, 38%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 13.25 (s, 1Н), 9.59 (s, 1Н), 8.87 (s, 1Н), 8.29-8.17 (m, 3Н), 7.96 (dd, 1Н, J1=8.7 Hz, J2=1.8 Hz), 7.67-7.62 (m, 2H), 7.43 (t, 1H, J=7.8 Hz), 6.73 (d, 1H, J=7.5 Hz), 6.06 (d, 1H, J=8.1 Hz), 4.25-4.21 (m, 1H), 3.63-3.58 (m, 1H), 3.44-3.39 (m, 1H), 2.10-2.05 (m, 3H), 1.70 (s, 1H), 1.12 (d, 3H, J=6.0 Hz).. ЖХ-МС: [M+H]⁺, 411, t_R=1.619 мин, ВЭЖХ: 98.4% при 214 нм, 97.91% при 254 нм, t_R=5.848 мин.

Пример 38: Синтез

3-(8-(6-(3,5-Диметилпиперидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты

Стадия 1

6-(3,5-Диметилпиперидин-1-ил)пиридин-2-амин

Смесь 6-фторпиридин-2-амина (0.5 г, 4.46 ммоль) и 3,5-диметилпиперидина (0.61 г, 5.35 ммоль) в воде (0.2 мл) нагревали до 205°C в течение 0.5 ч в закрытой пробирке в микроволновой печи, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:8) с получением 6-(3,5-диметилпиперидин-1-ил)пиридин-2-амина (0.76 г, 83%) в виде желтого масла. ЖХ-МС: [М+1]⁺=206, t_R=1.240 мин.

Стадия 2

Метил 3-(8-(6-(3,5-Диметилпиперидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата гидрохлорид

Смесь метил 3-(8-бромимидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (0.10 г, 0.3 ммоль), 6-(3,5-диметилпиперидин-1-ил)пиридин-2-амина (0.068 г, 0.33 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0.017 г, 0.03 ммоль), BINAP (0.037 г, 0.06 ммоль) и Cs₂CO₃ (0.293 г, 0.9 ммоль) в диоксане (20 мл) нагревали до 100°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N₂, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:20) и затем дополнительно очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 25% ацетонитрил/75% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/50% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин). Продуктсодержащие фракции подкислили посредством добавления концентрированной HCl, затем сконцентрировали с получением метил 3-(8-(6-(3,5-диметилпиперидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата гидрохлорида (0.025 г, 18%) в виде желтого осадка. ЖХ-МС: [М+1]⁺=457, t_R=2.284 мин.

Стадия 3

3-(8-(6-(3,5-Диметилпиперидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойная кислота

К перемешанному раствору метил 3-(8-(6-(3,5-диметилпиперидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоат гидрохлорида (0.025 г, 0.055 ммоль) в диоксане (10 мл) и H₂O (5 мл) добавили NaOH (22 мг, 0.55 ммоль) при 40°C. Через 2 ч смесь промыли эфиром (10 мл) и водный слой довели до pH=4, затем отфильтровали. Осадок промыли эфиром и высушили с получением 3-(8-(6-(3,5-диметилпиперидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (0.017 г, 70%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 9.99 (s, 1Н), 8.67 (s, 1Н), 8.52 (s, 1Н), 8.35 (s, 1Н), 8.19 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 8.09 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 7.84 (s, 1H), 7.71-7.49 (m, 2H), 6.76-6.72 (m, 1H), 6.52-6.48 (m, 1H), 4.22 (d, 1H, J=12.6 Hz), 3.65-3.59 (m, 1H), 3.28-3.21 (m, 1H), 2.33 (t, 1H, J=12.0 Hz), 1.92-1.41 (m, 4 h), 0.80-0.69 (m, 6H). ЖХ-МС: [M+H]⁺, 443, t_R=1.825 мин, ВЭЖХ: 98.43% при 214 нм, 99.05% при 254 нм, t_R=6.85 мин.

Пример 39: Синтез

6-(3-Метоксифенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Смесь 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.05 г, 0.152 ммоль), 3-метоксифенилбороновой кислоты (0.025 g, 0.167 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0.017 г, 0.03 ммоль), X-phos (0.029 г, 0.06 ммоль) и Na₂CO₃ (0.048 г, 0.456 ммоль) в диоксане (20 мл) и воде (5 мл) нагревали до 100°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N2, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:10) с получением 6-(3-метоксифенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (25 мг, 41%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.76 (s, 1Н), 7.95 (s, 1Н), 7.56 (s, 1Н), 7.47-7.32 (m, 4 h), 7.03-6.99 (m, 1Н), 6.23 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.03 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.25-4.21 (m, 1H), 3.86 (s, 3H), 3.62-3.56 (m, 1H), 3.44-3.35 (m, 1H), 2.17-1.99 (m, 3H), 1.74-1.71 (m, 1H), 1.17 (d, 3H, J=6.3 Hz). ЖХ-МС: [M+H]⁺, 401, t_R=1.961 мин, ВЭЖХ: 95.06% при 214 нм, 98.71% при 254 нм, t_R=7.643 мин.

Пример 40: Синтез

N-(2-Гидроксиэтил)-3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамида

Смесь 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (50 мг, 0.121 ммоль), 2-аминоэтанола (8 мг, 0.133 ммоль), 1-метил-1Н-имидазола (40 мг, 0.484 ммоль) и EDCI (92 мг, 0.484 ммоль) в дихлорметане (10 мл) и ДМФ (0.2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, затем экстрагировали этилацетатом (50 мл). Объединенные экстракты промыли водой (2×2 мл), затем солевым раствором (2×2 мл). После высушивания и концентрирования под вакуумом, остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, метанол : дихлорметан = 1:50) и дополнительно очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 40% ацетонитрил/60% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением N-(2-гидроксиэтил)-3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамида (6 мг, 10%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.93 (s, 1Н), 8.49 (s, 1Н), 8.37 (s, 1Н), 8.18 (dd, 1Н, J1=6.6 Hz, J2=1.8 Hz), 8.08 (d, 1Н, J=2.1 Hz), 8.04-8.01 (m, 1H), 7.67 (t, 1H, J=7.8 Hz), 7.60-7.55 (m, 1H), 6.39 (d, 1H, J=7.5 Hz), 6.29 (d, 1H, J=8.7 Hz), 4.30-4.26 (m, 1H), 3.78-3.69 (m, 3H), 3.58-3.49 (m, 3H), 2.21-2.08 (m, 3H), 1.81-1.78 (m, 1H), 1.19 (d, 3H, J=5.1 Hz). ЖХ-МС: [M+H]⁺, 458, t_R=1.52 мин, ВЭЖХ: 96.29% при 214 нм, 96.47% при 254 нм, t_R=5.332 мин.

Пример 41: Синтез

N-(1-Гидроксипропан-2-ил)-3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамида

Смесь 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (50 мг, 0.121 ммоль), 2-аминопропан-1-ола (10 мг, 0.133 ммоль), 1-метил-1Н-имидазола (40 мг, 0.484 ммоль) и EDCI (92 мг, 0.484 ммоль) в дихлорметане (10 мл) и ДМФ (0.2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч, затем экстрагировали этилацетатом (50 мл) и промыли водой (2×2 мл), затем солевым раствором (2×2 мл). После высушивания и концентрирования, остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, метанол : дихлорметан = 1:50) и дополнительно очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 45% ацетонитрил/55% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением N-(1-гидроксипропан-2-ил)-3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамида (8.7 мг, 14%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.91 (s, 1Н), 8.46 (s, 1Н), 8.37 (s, 1Н), 8.17-8.00 (m, 4 h), 7.65 (t, 1Н, J=7.8 Hz), 7.58-7.55 (m, 1H), 6.40 (d, 1H, J=7.5 Hz), 6.28 (d, 1H, J=8.4 Hz), 4.25-4.21 (m, 2H), 3.71-3.58 (m, 3H), 3.54-3.48 (m, 1H), 2.19-2.07 (m, 3H), 1.81 (brs, 1H), 1.29 (d, 3H, J=6.3 Hz), 1.19 (d, 3H, J=6.0 Hz). ЖХ-МС: [M+H]⁺, 472, t_R=1.654 мин, ВЭЖХ: 99.36% при 214 нм, 98.85% при 254 нм, t_R=5.697 мин.

Пример 42: Синтез

(3-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)фенил)(морфолино)метанона

Смесь 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (50 мг, 0.121 ммоль), 2-аминопропан-1-ола (12 мг, 0.133 ммоль), 1-метил-1Н-имидазола (40 мг, 0.484 ммоль) и EDCI (92 мг, 0.484 ммоль) в дихлорметане (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 20 ч, затем сконцентрировали. Остаток очистили посредством препаративной ТСХ (силикагель, 200-300 меш, метанол : дихлорметан = 1:30) с получением (3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)фенил)(морфолино)метанона (30 мг, 51%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CD₃OD): δ 8.84 (s, 1Н), 8.11-8.01 (m, 3Н), 7.61-7.54 (m, 3Н), 7.44 (t, 1Н, J=8.1 Hz), 6.30 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.09 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.27-4.21 (m, 1Н), 3.79-3.44 (m, 10Н), 2.18-2.04 (m, 3Н), 1.79 (brs, 1Н), 1.19 (d, 3Н, J=6.3 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 484, t_R=1.738 мин, ВЭЖХ: 99.76% при 214 нм, 99.56% при 254 нм, t_R=5.698 мин.

Пример 43: Синтез

(S)-N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Смесь 8-бромо-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазина (0.15 г, 0.55 ммоль), (S)-6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (0.107 г, 0.61 ммоль), Pd₂(dba)₃ (32 мг, 0.055 ммоль), BINAP (68 мг, 0.11 ммоль) и Cs₂CO₃ (0.54 г, 1.65 ммоль) в диоксане (20 мл) нагревали до 100°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N2, затем сконцентрировали и остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 20 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:15) с получением (S)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (51 мг, 25%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CD₃OD): δ 8.83 (s, 1Н), 7.99 (s, 1Н), 7.95-7.91 (m, 2Н), 7.59 (s, 1Н), 7.51-7.40 (m, 4 h), 6.29 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.08 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.28-4.24 (m, 1Н), 3.64-3.60 (m, 1Н), 3.48-3.40 (m, 1Н), 2.18-2.10 (m, 3Н), 1.78-1.75 (m, 1Н), 1.19 (d, 3Н, J=6.3 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 371, t_R=2.015 мин, ВЭЖХ: 99.09% при 214 нм, 99.69% при 254 нм, t_R=4.691 мин.

Пример 44: Синтез

N-(5,6-диметоксипиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Смесь 8-бромо-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазина (0.15 г, 0.55 ммоль), 5,6-диметоксипиридин-2-амина (0.092 г, 0.61 ммоль), Pd₂(dba)₃ (32 мг, 0.055 ммоль), BINAP (68 мг, 0.11 ммоль) и Cs₂CO₃ (0.54 г, 1.65 ммоль) в диоксане (20 мл) нагревали до 100°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N2, затем сконцентрировали и остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:6) с получением N-(5,6-диметоксипиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (49 мг, 26%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.56 (s, 1Н), 8.01-7.92 (m, 3Н), 7.60 (s, 1Н), 7.51-7.48 (m, 3Н), 7.35 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 6.73 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.09 (s, 3Н), 3.85 (s, 3Н). ЖХ-МС: [M+H]⁺, 348, t_R=1.735 мин, ВЭЖХ: 98.28% при 214 нм, 98.33% при 254 нм, t_R=5.85 мин.

Пример 45: Синтез

6-(2-Хлорфенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида

Стадия 1

6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Смесь 8-бромо-6-хлороимидазо[1,2-b]пиридазина (1.0 г, 4.3 ммоль), 6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (0.84 г, 4.73 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0.247 г, 0.43 ммоль), BINAP (0.536 г, 0.86 ммоль) и Cs₂CO₃ (4.21 г, 12.9 ммоль) в диоксане (30 мл) нагревали до 100°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N2, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:15) с получением 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (1.2 г, 85%) в виде желтого осадка. ЖХ-МС: [М+1]⁺=329, t_R=1.930 мин.

Стадия 2

6-(2-Хлорфенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорид

Смесь 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.15 г, 0.456 ммоль), 2-хлорфенилбороновой кислоты (0.078 г, 0. 5 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0.058 г, 0.1 ммоль), X-phos (0.095 г, 0.2 ммоль) и Na₂CO₃ (0.145 г, 1.368 ммоль) в диоксане (20 мл) и воде (5 мл) нагревали до 100°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N₂, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:20) и затем дополнительно очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 35% ацетонитрил/65% вода (0.1% ТФУ об./об.) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/50% вода (0.1% ТФУ об./об.) линейным образом в течение 9 мин). Продуктсодержащие фракции подкислили посредством добавления концентрированной HCl и сконцентрировали с получением 6-(2-хлорфенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида (81 мг, 40%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.67 (s, 1Н), 8.42 (d, 1Н, J=1.8 Hz), 8.17 (d, 1Н, J=1.8 Hz), 7.66-7.48 (m, 5Н), 6.48 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.34 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.26-4.22 (m, 1Н), 3.63-3.57 (m, 1Н), 3.44-3.38 (m, 1Н), 2.17-2.04 (m, 3Н), 1.76-1.38 (m, 1Н), 1.09 (d, 3Н, J=6.3 Hz) ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 405, t_R=1.971 мин, ВЭЖХ: 98.88% при 214 нм, 98.93% при 254 нм, t_R=7.63 мин.

Пример 46: Синтез

N-(2-(Диметиламино)этил)-3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамида

Смесь 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (83 мг, 0.2 ммоль), N1,N1-диметилэтан-1,2-диамина (19 мг, 0.22 ммоль), 1-метил-1Н-имидазола (66 мг, 0.8 ммоль) и EDCI (153 мг, 0.8 ммоль) в дихлорметане (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч, затем сконцентрировали. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, метанол : дихлорметан = 1:20) и дополнительно очистили посредством препаративной ТСХ (силикагель, метанол : дихлорметан = 1:10) с получением N-(2-(диметиламино)этил)-3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамида (41 мг, 42%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CD₃OD): δ 8.89 (s, 1Н), 8.48 (s, 1Н), 8.13 (dd, 1Н, J1=6.9 Hz, J2=1.8 Hz), 8.02-7.97 (m, 2Н), 7.65-7.60 (m, 2Н), 7.45 (t, 1Н, J=8.1 Hz), 6.31 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.10 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.29-4.25 (m, 1Н), 3.76-3.72 (m, 2Н), 3.66-3.60 (m, 1Н), 3.54-3.40 (m, 1Н), 3.19-3.15 (m, 2Н), 2.81 (s, 6Н), 2.25-2.00 (m, 3Н), 1.75-1.73 (m, 1Н), 1.17 (d, 3Н, J=6.0 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 485, t_R=1.062 мин, ВЭЖХ: 99.08% при 214 нм, 99.16% при 254 нм, t_R=4.868 мин.

Пример 47: Синтез

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-о-толилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Смесь 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.10 г, 0.304 ммоль), о-толилбороновой кислоты (0.045 г, 0.335 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0.017 г, 0.03 ммоль), X-phos (0.029 г, 0.06 ммоль) и Na₂CO₃ (0.097 г, 0.912 ммоль) в диоксане (20 мл) и воде (5 мл) нагревали до 100°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N₂, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:15) с получением N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-о-толилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (51 мг, 44%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.53 (s, 1Н), 7.95 (s, 1Н), 7.61 (s, 1Н), 7.43-7.25 (m, 5Н), 6.28 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.02 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.10-4.06 (m, 1H), 3.55 (s, 1H), 3.45-3.39 (m, 1H), 3.24-3.21 (m, 1H), 2.37 (s, 3H), 2.03-1.89 (m, 3H), 1.61-1.58 (m, 1H), 0.97 (d, 3H, J=6.3 Hz). ЖХ-МС: [M+H]⁺, 385, t_R=1.95 мин, ВЭЖХ: 99.76% при 214 нм, 100% при 254 нм, t_R=4.68 мин.

Пример 48: Синтез

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(2-(трифторметил)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида

Смесь 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.10 г, 0.305 ммоль), 2-(трифторметил)фенилбороновой кислоты (64 мг, 0.335 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0.035 г, 0.061 ммоль), X-phos (0.058 г, 0.122 ммоль) и Na₂CO₃ (0.097 г, 0.915 ммоль) в диоксане (20 мл) и воде (5 мл) нагревали до 100°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N₂, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:10) и остаток дополнительно очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 30% ацетонитрил/70% вода (0.1% ТФУ об./об.) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/50% вода (0.1% ТФУ об./об.) линейным образом в течение 9 мин). Продуктсодержащие фракции подкислили посредством добавления концентрированной HCl, затем сконцентрировали с получением N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(2-(трифторметил)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида (38 мг, 26%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.88 (s, 1Н), 8.84 (s, 1Н), 8.52 (s, 1Н), 8.27 (s, 1Н), 7.94-7.66 (m, 4 h), 7.48 (t, 1Н, J=7.5 Hz), 6.67 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.08 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 3.95-3.91 (m, 1Н), 3.37-3.28 (m, 1Н), 3.09-3.02 (m, 1Н), 1.92-1.83 (m, 3Н), 1.49-1.41 (m, 1Н), 0.78 (d, 3Н, J=6.0 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 439, t_R=1.91 мин, ВЭЖХ: 98.98% при 214 нм, 99.36% при 254 нм, t_R=6.99 мин.

Пример 49: Синтез

(S)-3-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты

Смесь (S)-6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.10 г, 0.30 ммоль), метил 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоата (0.096 г, 0.36 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0.035 г, 0.061 ммоль), X-phos (0.057 г, 0.122 ммоль) и Na₂CO₃ (0.095 г, 0.912 ммоль) в диоксане (20 мл) и воде (5 мл) нагревали до 100°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N₂, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:10) и дополнительно очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 30% ацетонитрил/70% вода (0.1% ТФУ об./об.) первоначально, переходя до 60% ацетонитрил/40% вода (0.1% ТФУ об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением (S)-3-(8-(6-(2-метил пирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (32 мг, 25%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.97 (s, 1Н), 9.26 (s, 1Н), 8.63 (s, 1Н), 8.48 (s, 1Н), 8.37 (s, 1Н), 8.20 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 8.13-8.11 (m, 1Н), 7.71 (t, 1Н, J=7.8 Hz), 7.51 (t, 1Н, J=7.8 Hz), 6.69 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.16 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.22-4.17 (m, 1Н), 3.63-3.54 (m, 1Н), 3.44-3.39 (m, 1Н), 2.06-1.95 (m, 3Н), 1.67-1.61 (m, 1Н), 1.07 (d, 3Н, J=6.3 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 415, t_R=1.669 мин, ВЭЖХ: 100% при 214 нм, 100% при 254 нм, t_R=6.01 мин.

Пример 50: Синтез

(S)-4-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамида

Стадия 1

(S)-4-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойная кислота

Смесь (S)-6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.08 г, 0.243 ммоль), 4-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензойной кислоты (0.066 г, 0.268 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0.028 г, 0.049 ммоль), X-phos (0.046 г, 0.097 ммоль) и Na₂CO₃ (0.103 г, 0.992 ммоль) в диоксане (20 мл) и воде (5 мл) нагревали до 100°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N₂, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 15 г, 200~300 меш, MeOH : дихлорметан = 1:10) с получением (S)-4-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (90 мг) в виде желтого осадка. ЖХ-МС: [М+1]⁺=415, t_R=1.660 мин. Он содержал неидентифицированные примеси и был использован сразу без дополнительной очистки.

Стадия 2

(S)-4-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамид

Перемешанный раствор (S)-4-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (90 мг), НОВТ (49 мг, 0.365 ммоль), Et₃N (49 мг, 0.486 ммоль) и EDCI (70 мг, 0.365 ммоль) в дихлорметане (20 мл) и диоксане (100 мл) барботировали газообразным NH₃ до насыщения и смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Смесь отфильтровали и фильтрат сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, МеОН : дихлорметан = 1:50) с получением (S)-4-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамида (38 мг, 47%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.74 (s, 1Н), 7.94-7.86 (m, 5Н), 7.49 (s, 1Н), 7.32 (t, 1Н, J=8.1 Hz), 6.18 (d, 1Н, J=6.0 Hz), 5.98 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.17-4.14 (m, 1Н), 3.55-3.49 (m, 1Н), 3.38-3.32 (m, 1Н), 2.07-1.93 (m, 3Н), 1.68 (s, 1Н), 1.10 (d, 3Н, J=6.0 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 414, t_R=1.505 мин, ВЭЖХ: 97.48% при 214 нм, 97.67% при 254 нм, t_R=6.027 мин.

Пример 51: Синтез

(S)-3-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамида

Перемешанный раствор (S)-3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (76 мг, 0.195 ммоль), НОВТ (39 мг, 0.289 ммоль), Et₃N (39 мг, 0.786 ммоль) и EDCI (55 мг, 0.289 ммоль) в дихлорметане (20 мл) и диоксане (10 мл) барботировали газообразным NH₃ до насыщения и смесь перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Реакционную смесь отфильтровали затем фильтрат сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, МеОН : дихлорметан = 1:50) с получением (S)-3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамида (38 мг, 47%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.93 (s, 1Н), 8.47 (s, 1Н), 8.14 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 8.03-7.97 (m, 2Н), 7.63-7.58 (m, 2Н), 7.44 (t, 1Н, J=8.1 Hz), 6.30 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.09 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.32-4.22 (m, 1Н), 3.69-3.61 (m, 1Н), 3.48-3.42 (m, 1Н), 2.17-2.01 (m, 3Н), 1.68 (s, 1Н), 1.17 (d, 3Н, J=6.3 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 414, t_R=1.594 мин, ВЭЖХ: 100% при 214 нм, 100% при 254 нм, t_R=4.417 мин.

Пример 52: Синтез

(S)-6-(бензо[d]тиазол-6-ил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амино

Смесь (S)-6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.15 г, 0.456 ммоль), 6-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)диметил[d]тиазола (0.119 г, 0.456 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0.052 г, 0.09 ммоль), X-phos (0.087 г, 0.18 ммоль) и Na₂CO₃ (0.145 г, 1.368 ммоль) в диоксане (20 мл) и воде (5 мл) нагревали до 100°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N₂, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 15 г, 200~300 меш, этилацетат : петролейный эфир = 1:5) с получением (S)-6-(диметил[d]тиазол-6-ил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (58 мг, 51%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 9.71 (s, 1Н), 9.49 (s, 1Н), 8.91 (s, 1Н), 8.69 (s, 1Н), 8.23-8.08 (m, 3Н), 7.66 (s, 1Н), 7.43 (t, 1Н, J=7.8 Hz), 6.74 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.06 (d, 1H, J=7.8 Hz), 4.26-4.23 (m, 1H), 3.59-3.55 (m, 1H), 3.44-3.40 (m, 1Н), 2.08-1.98 (m, 3Н), 1.69-1.66 (m, 1Н), 1.09 (d, 3Н, J=6.3 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 428, t_R=1.997 мин, ВЭЖХ: 95.07% при 214 нм, 98.34% при 254 нм, t_R=4.349 мин.

Пример 53: Синтез

N-(6-((2S,5S)-2,5-Диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида

Смесь 6-хлор-N-(6-((2S,5S)-2,5-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.668 г, 1.95 ммоль), фенилбороновой кислоты (0.261 г, 2.14 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0.224 г, 0.39 ммоль), X-phos (0.372 г, 0.78 ммоль) и Na₂CO₃ (0.62 г, 5.85 ммоль) в диоксане (30 мл) и воде (10 мл) нагревали до 90°C в течение 16 ч в закрытой пробирке в атмосфере N₂, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/50% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин). Продуктсодержащие фракции подкислили посредством добавления концентрированной HCl и сконцентрировали под вакуумом с получением N-(6-((2S,5S)-2,5-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-фенилимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (57 мг, 9% за две стадии) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 8.87 (s, 1Н), 8.35 (s, 1Н), 7.95-7.92 (m, 3Н), 7.59-7.47 (m, 4 h), 6.48 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.17 (d, 1H, J=8.1 Hz), 4.23 (s, 2H), 2.25 (s, 2H), 1.64-1.62 (m, 2H), 1.09 (s, 3H), 1.07 (s, 3Н). ЖХ-МС: [M+H]⁺, 385, t_R=2.023 мин, ВЭЖХ: 96.85% при 214 нм, 96.97% при 254 нм, t_R=8.147 мин.

Пример 54: Синтез

4-(3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамидо)бензойной кислоты

Стадия 1

трет-бутил 4-(3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамидо)бензоат

Смесь 3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (100 мг, 0.26 ммоль), трет-бутил 4-аминобензоата (50 мг, 0.26 ммоль), 1-метил-1Н-имидазола (85 мг, 1.02 ммоль) и EDCI (200 мг, 1.02 ммоль) в ДМФ (3 мл) перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Добавили этилацетат (10 мл) и воду (10 мл) к этой смеси и органический слой промыли солевым раствором (10 мл × 2) затем высушили над Na₂SO₄. Остаток сконцентрировали и очистили посредством хроматографии (дихлорметан : МеОН = 50:1) с получением трет-бутил 4-(3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамидо)бензоата (80 мг, 55%) в виде желтого осадка. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 567, t_R=1.820 min

Стадия 2

4-(3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамидо)бензойной кислоты

Смесь трет-бутил 4-(3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамидо)бензоата (80 мг, 0.14 ммоль) и ТФУ (3 мл) в дихлорметане (3 мл) перемешивали в течение 2 ч при комнатной температуре. Смесь сконцентрировали и затем тритурировали с МеОН (2 мл) с получением продукта 4-(3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамидо)бензойной кислоты (28 мг, 39%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.71 (s, 1Н), 10.02 (s, 1Н), 8.66 (s, 1Н), 8.55 (s, 1Н), 8.29 (s, 1Н), 8.24 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 8.12 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 7.97-7.93 (m, 2Н), 7.76-7.71 (m, 3Н), 7.44 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 7.13 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.05 (s, 3Н), 3.88 (s, 3Н). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 510.9, t_R=1.505 мин, ВЭЖХ: 97.21% при 214 нм, 99.12% при 254 нм, t_R=6.006 мин.

Пример 55: Синтез

3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-N-(1Н-индазол-5-ил)бензамида гидрохлорида

Смесь 3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (80 мг, 0.2 ммоль), 1Н-индазол-5-амина (27 мг, 0.2 ммоль), 1-метил-1Н-имидазола (67 мг, 0.82 ммоль) и EDCI (156 мг, 0.82 ммоль) в ДМФ (3 мл) перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Добавили этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Органический слой разделили и водную фазу экстрагировали этилацетатом (20 мл). Органические фазы объединили и промыли солевым раствором (10 мл), затем высушили над Na₂SO₄. Остаток сконцентрировали и очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/50% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин). Продуктсодержащие фракции подкислили концентрированной HCl и затем сконцентрировали под вакуумом с получением 3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-N-(1Н-индазол-5-ил)бензамида гидрохлорида (11 мг, 11%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.59 (s, 1Н), 10.44 (s, 1Н), 8.86 (s, 1Н), 8.56 (s, 1Н), 8.46 (s, 1Н), 8.25-8.06 (m, 5Н), 7.75-7.63 (m, 2Н), 7.54 (d, 1Н, J=9.0 Hz), 7.45 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 7.08 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.04 (s, 2Н), 3.77 (s, 3Н). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 506.9, t_R=1.478 мин, ВЭЖХ: 100% при 214 нм, 100% при 254 нм, t_R=3.792 мин.

Пример 56: Синтез

3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-N-(1-оксоизоиндолин-5-ил)бензамида

Смесь 3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (100 мг, 0.26 ммоль), 5-аминоизоиндолин-1-она (38 мг, 0.26 ммоль), 1-метил-1Н-имидазола (84 мг, 1.02 ммоль) и EDCI (196 мг, 1.02 ммоль) в ДМФ (3 мл) перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Добавили этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Органический слой разделили и водную фазу экстрагировали этилацетатом (20 мл). Органические фазы объединили и промыли солевым раствором (10 мл), затем высушили над Na₂SO₄. Остаток сконцентрировали и тритурировали с МеОН (2 мл) с получением 3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-N-(1-оксоизоиндолин-5-ил)бензамида (26 мг, 20%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.68 (s, 1Н), 9.97 (s, 1Н), 8.61 (s, 1Н), 8.52 (s, 1Н), 8.44 (s, 1Н), 8.24-8.08 (m, 4 h), 7.82-7.64 (m, 4 h), 7.41 (d, 1Н, J=8.7 Hz), 7.11 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.39 (s, 2Н), 4.02 (s, 3Н), 3.76 (s, 3Н). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 521.9, t_R=1.434 мин, ВЭЖХ: 96.12% при 214 нм, 96.79% при 254 нм, t_R=3.673 мин.

Пример 57: Синтез

4-(3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамидо)-2-метоксибензойной кислоты

Стадия 1

Метил 4-(3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамидо)-2-метоксибензоат

Смесь 3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (150 мг, 0.38 ммоль), метил 4-амино-2-метоксибензоата (70 мг, 0.38 ммоль), 1-метил-1Н-имидазола (126 мг, 1.53 ммоль) и EDCI (293 мг, 1.53 ммоль) в ДМФ (3 мл) перемешивали в течение 16 ч при комнатной температуре. Добавили этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Органический слой разделили и водную фазу экстрагировали этилацетатом (20 мл). Объединенные органические фразы промыли солевым раствором (10 мл) и высушили над Na₂SO₄. Остаток сконцентрировали и очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, дихлорметан : МеОН = 50:1) с получением метил 4-(3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамидо)-2-метоксибензоата (100 мг, 47%) в виде коричневой жидкости. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 555.1, t_R=1.701 min

Стадия 2

4-(3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамидо)-2-метоксибензойная кислота

Смесь метил 4-(3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамидо)-2-метоксибензоата (100 мг, 0.18 ммоль) и NaOH (100 мг, 2.5 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) и воде (5 мл) перемешивали в течение 2 ч при 50°C. Смесь сконцентрировали и довели до pH=2 с помощью 3М HCl. Преципитат отфильтровали и осадок промыли МеОН (1 мл) и дихлорметаном (1 мл) с получением 4-(3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамидо)-2-метоксибензойной кислоты (24 мг, 25%) as a brown solid. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.62 (s, 1Н), 10.01 (s, 1Н), 8.63 (s, 1Н), 8.53 (s, 1Н), 8.26-8.21 (m, 2Н), 8.09 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 7.75-7.67 (m, 4 h), 7.50 (dd, 1H, J1=8.4 Hz, J2=1.8 Hz), 7.41 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 7.10 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.03 (s, 3Н), 3.84 (s, 3Н), 3.77 (s, 3Н). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 541, t_R=1.548 мин, ВЭЖХ: 95.24% при 214 нм, 95.03% при 254 нм, t_R=7.943 мин.

Пример 58: Синтез

3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-N-(2-оксоиндолин-5-ил)бензамида гидрохлорида

Смесь 3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (100 мг, 0.26 ммоль), 5-аминоиндолин-2-она (38 мг, 0.26 ммоль), 1-метил-1Н-имидазола (84 мг, 1.02 ммоль) и EDCI (196 мг, 1.02 ммоль) в ДМФ (3 мл) перемешивали при 50°C в течение 48 ч. Добавили этилацетат (5 мл) и воду (5 мл). Органический слой разделили и водную фазу экстрагировали этилацетатом (20 мл). Органические фазы объединили и промыли солевым раствором (10 мл), затем высушили над Na₂SO₄. Остаток сконцентрировали и очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 25% ацетонитрил/75% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/50% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением остатка, который обработали 0.5 мл HCl и суспензию перемешивали в течение 5 мин. Концентрирование дало 3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-N-(2-оксоиндолин-5-ил)бензамида гидрохлорид (2.3 мг, 2%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.67 (s, 1Н), 10.36 (s, 1Н), 10.31 (s, 1Н), 8.88 (s, 1Н), 8.51-8.47 (m, 2Н), 8.20-8.12 (m, 3Н), 7.75-7.68 (m, 2Н), 7.54-7.44 (m, 2Н), 7.09 (d, 1 ч, J=8.1 Hz), 6.81 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 4.03 (s, 3Н), 3.78 (s, 3Н), 3.08 (s, 2Н). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 522, t_R=1.48 мин, ВЭЖХ: 99.05% при 214 нм, 96.91% при 254 нм, t_R=5.184 мин.

Пример 59: Синтез

3-(8-(6-(3,3-Диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты

Стадия 1

Метил 3-(8-(6-(3,3-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоат

Смесь метил 3-(8-бромимидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (0.10 г, 0.3 ммоль), 6-(3,3-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (60 мг, 0.3 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0.014 г, 0.03 ммоль), BINAP (0.038 г, 0.06 ммоль) и Cs₂CO₃ (0.3 г, 0.9 ммоль) в диоксане (10 мл) нагревали до 100°C в течение 15 ч в закрытой пробирке в атмосфере N₂, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, дихлорметан : МеОН = 100:1) с получением метил 3-(8-(6-(3,3-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (110 мг, 83%) в виде коричневого осадка. ЖХ-МС: [М+1]⁺=443, t_R=2.065 мин.

Стадия 2

3-(8-(6-(3,3-Диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойная кислота

Смесь метил 3-(8-(6-(3,3-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (170 мг, 0.38 ммоль) и NaOH (170 мг, 4.25 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) и воде (5 мл) перемешивали в течение 2 ч при 40°C. Смесь сконцентрировали до 5 мл и доавели до pH=2 с помощью 2М HCl. Преципитат отфильтровали и полученный осадок очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 40% ацетонитрил/60% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением 3-(8-(6-(3,3-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (27 мг, 17%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.23 (s, 1Н), 9.12 (s, 1Н), 8.53 (s, 1Н), 8.44 (s, 1Н), 8.21 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 8.12 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 8.00 (brs, 1Н), 7.70 (t, 1Н, J=7.8 Hz), 7.50 (t, 1Н, J=8.1 Hz), 6.70 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.70 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 3.61 (s, 2Н), 3.25 (s, 2Н), 1.80-1.75 (m, 2Н), 1.23 (s, 6Н). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 429, t_R=1.73 мин, ВЭЖХ: 98.58% при 214 нм, 98.61% при 254 нм, t_R=6.606 мин.

Пример 60: Синтез

3-(8-(6-(2,5-Диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты

Стадия 1

Метил 3-(8-(6-(2,5-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоат

Смесь метил 3-(8-бромимидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (0.2 г, 0.6 ммоль), 6-(2,5-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (116 мг, 0.6 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0.036 г, 0.06 ммоль), BINAP (0.076 г, 0.12 ммоль) и Cs₂CO₃ (0.59 г, 1.8 ммоль) в диоксане (5 мл) нагревали до 100°C в течение 15 ч в закрытой пробирке в атмосфере N₂, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, дихлорметан : МеОН = 100:1) с получением метил 3-(8-(6-(2,5-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (150 мг, 56%) в виде коричневого осадка. ЖХ-МС: [М+1]⁺=443, t_R=2.092 мин.

Стадия 2

3-(8-(6-(2,5-Диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты

Смесь метил 3-(8-(6-(2,5-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (150 мг, 0.34 ммоль) и NaOH (150 мг, 3.75 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) и воде (5 мл) перемешивали в течение 2 ч при 40°C. Затем смесь сконцентрировали до 5 мл, затем довели до pH=2 с помощью 2М HCl. Преципитат отфильтровали и осадок промыли водой (2 мл) и дихлорметаном (3 мл) с получением 3-(8-(6-(2,5-диметилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (86 мг, 59%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.79 (s, 1Н), 9.13 (s, 1Н), 8.62 (s, 1Н), 8.49 (s, 1Н), 8.32-8.14 (m, 3Н), 7.75 (t, 1Н, J=7.8 Hz), 7.54 (t, 1Н, J=8.1 Hz), 6.74 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.23 (d, 1Н, J=8.7 Hz), 4.12 (s, 2Н), 2.13-2.08 (m, 2Н), 1.74-1.68 (m, 2Н), 1.18 (s, 3Н), 1.16 (s, 3Н). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 429, t_R=1.708 мин, ВЭЖХ: 97.23% при 214 нм, 95.49% при 254 нм, t_R=6.248 мин.

Пример 61: Синтез

3-(8-(6-(4,4-Диметилпиперидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты

Стадия 1

Метил 3-(8-(6-(4,4-диметилпиперидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоат

Смесь метил 3-(8-бромимидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (0.15 г, 0.45 ммоль), 6-(4,4-диметилпиперидин-1-ил)пиридин-2-амина (93 мг, 0.46 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0.026 г, 0.046 ммоль), BINAP (0.057 г, 0.09 ммоль) и Cs₂CO₃ (0.442 г, 1.36 ммоль) в диоксане (5 мл) нагревали до 100°C в течение 15 ч в закрытой пробирке в атмосфере N₂, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 10 г, 200~300 меш, дихлорметан : МеОН = 100:1) с получением метил 3-(8-(6-(4,4-диметилпиперидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (200 мг) в виде коричневой жидкости. ЖХ-МС: [М+1]⁺=457.3, t_R=2.145 мин. Она содержали неидентифицированные примеси и была использована сразу без дополнительной очистки.

Стадия 2

3-(8-(6-(4,4-Диметилпиперидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойная кислота

Смесь метил 3-(8-(6-(4,4-диметилпиперидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (200 мг, 0.44 ммоль) и NaOH (200 мг, 5 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) и воде (5 мл) перемешивали в течение 2 ч при 40°C. Затем смесь сконцентрировали до 5 мл и довели до pH=2 с помощью 2М HCl. Преципитат отфильтровали и очистили посредством препаративной ВЭЖХ с получением 3-(8-(6-(4,4-диметилпиперидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (18 мг, 9%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.53 (s, 1Н), 8.94 (s, 1Н), 8.52 (s, 2Н), 8.18-8.12 (m, 3Н), 7.72 (t, 1Н, J=7.8 Hz), 7.57 (t, 1Н, J=7.8 Hz), 6.76 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.54 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 3.59-3.57 (m, 4 h), 1.38-1.36 (m, 4 h), 0.98 (s, 6Н). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 443, t_R=1.788 мин, ВЭЖХ: 100% при 214 нм, 100% при 254 нм, t_R=6.762 мин.

Пример 62: Синтез

6-(3,4-Диметоксифенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Смесь 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (100 мг, 0.3 ммоль), 3,4-диметоксифенилбороновой кислоты (82 мг, 0.45 ммоль), Pd₂(dba)₃ (0.018 г, 0.03 ммоль), X-phos (0.029 г, 0.06 ммоль) и Na₂CO₃ (0.096 г, 0.9 ммоль) в диоксане (3 мл) и воде (3 мл) нагревали до 100°C в течение 15 ч в закрытой пробирке в атмосфере N₂, затем сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/50% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением 6-(3,4-диметоксифенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (18 мг, 14%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.19 (s, 1Н), 8.93 (s, 1Н), 8.40 (s, 1Н), 8.08 (s, 1Н), 7.50-7.48 (m, 1Н), 7.11 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 6.66 (d, 1Н, J=7.2 Hz), 6.12 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 4.22 (brs, 1Н), 3.85 (s, 6Н), 3.56-3.37 (m, 3Н), 2.07-1.97 (m, 2Н), 1.74-1.70 (m, 1Н), 1.11 (d, 3Н, J=6.3 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 431, t_R=1.769 мин, ВЭЖХ: 98.38% при 214 нм, 99.04% при 254 нм, t_R=7.213 мин.

Пример 63: Синтез

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(1,2,3,4-тетрагидрохинолин-7-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида

Смесь 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (300 мг, 0.91 ммоль), 7-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-1,2,3,4-тетрагидрохинолина (354 мг, 1.37 ммоль), Pd₂(dba)₃ (105 мг, 0.18 ммоль), X-phos (172 мг, 0.36 ммоль) и Na₂CO₃ (290 мг, 2.73 ммоль) в диоксане (5 мл) и воде (5 мл) нагревали до 100°C в течение 15 ч, затем сконцентрировали под вакуумом и очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этилацетат = 1:1) с получением требуемого продукта в виде его свободного основания. 1 мл HCl добавили к остатку и смесь перемешивали в течение 5 мин. Смесь затем сконцентрировали с получением N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(1,2,3,4-тетрагидрохинолин-7-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида (25 мг, 6%). ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.74 (s, 1Н), 9.14 (s, 1Н), 8.55 (s, 1Н), 8.30 (s, 1Н), 7.51 (t, 1Н, J=7.8 Hz), 7.35-7.19 (m, 3Н), 6.67 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.16 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.23-4.20 (m, 2Н), 3.65-3.58 (m, 1Н), 3.42-3.38 (m, 3Н), 2.83-2.79 (m, 2Н), 2.10-1.91 (m, 5Н), 1.72-1.70 (m, 1Н), 1.13 (d, 3Н, J=6.0 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 426, t_R=1.923 мин, ВЭЖХ: 99.64% при 214 нм, 99.62% при 254 нм, t_R=6.052 мин.

Пример 64: Синтез

1-(7-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)этанона

Стадия 1

1-(7-бромо-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)этанон

К смеси 7-бромо-1,2,3,4-тетрагидроизохинолина (500 мг, 2.36 ммоль) и триэтиламина (715 мг, 7.08 ммоль) в дихлорметане (10 мл) добавили ацетилхлорид (221 мг, 2.83 ммоль) при 0°C, затем смесь перемешивали в течение 2 ч при 0°C. Добавили воду (5 мл) и смесь экстрагировали этилацетатом (10 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором (3×10 мл) и высушили над Na₂SO₄. Остаток сконцентрировали, затем очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, петролейный эфир : этил ацетат = 5:1) с получением 1-(7-бромо-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)этанон (500 мг, 83%) в виде желтого масла. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 254, t_R=1.533 мин.

Стадия 2

1-(7-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)этанон

Смесь 1-(7-бромо-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)этанона (300 мг, 1.2 ммоль), 4,4,4',4',5,5,5',5'-октаметил-2,2'-би(1,3,2-диоксаборолана) (450 мг, 1.8 ммоль), Pd(dppf)Cl₂ (123 мг, 0.12 ммоль), KOAc (348 мг, 3.6 ммоль) и ДМФ (10 мл) нагревали до 100°C в течение 15 ч в атмосфере N₂, затем сконцентрировали под вакуумом. Добавили воду (20 мл) и экстрагировали этилацетатом (20 мл). Органическую фазу промыли солевым раствором (3×10 мл), затем высушили над Na₂SO₄. Остаток сконцентрировали и очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, дихлорметан : МеОН = 20:1) с получением 1-(7-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)этанона (300 мг, неочищенный) в виде черного масла. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 301.2, [2М+Н]⁺, 603.4, t_R=1.569 мин. Она содержала неидентифицированные примеси и была использована сразу без дополнительной очистки.

Стадия 3

1-(7-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)этанон

Смесь 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (90 мг, 0.27 ммоль), 1-(7-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)этанона (500 мг, неочищенный), Pd₂(dba)₃ (16 мг, 0.027 ммоль), X-phos (26 мг, 0.054 ммоль) и Na₂CO₃ (86 мг, 0.81 ммоль) в диоксане (5 мл) и воде (5 мл) нагревали до 100°C в течение 15 ч, затем сконцентрировали под вакуумом и очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 40% ацетонитрил/60% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением 1-(7-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-3,4-дигидроизохинолин-2(1Н)-ил)этанона (20 мг, 16%). ¹Н HMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.87-8.83 (m, 1Н), 8.25 (s, 1Н), 7.96 (s, 1Н), 7.83-7.81 (m, 1Н), 7.71-7.48 (m, 2Н), 7.34-7.31 (m, 1Н), 6.30-6.19 (m, 2Н), 4.78-4.74 (m, 2Н), 4.26-4.22 (m, 1Н), 3.81-3.77 (m, 2Н), 3.68-3.62 (m, 1Н), 3.46-3.41 (m, 1Н), 3.01-2.93 (m, 2Н), 2.23 (s, 3Н), 2.18-2.02 (m, 3Н), 1.88-1.83 (m, 1Н), 1.21-1.19 (m, 3Н). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 468, t_R=1.726 мин, ВЭЖХ: 96.93% при 214 нм, 99.52% при 254 нм, t_R=6.04 мин.

Пример 65: Синтез

Метил 3-(8-(6-(3-трет-бутилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата

Стадия 1

6-(3-трет-Бутилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амин

Суспензию 6-фторпиридин-2-амина (500 мг, 4.46 ммоль), 3-трет-бутилпирролидина (730 мг, 4.46 ммоль) в воде (0.5 мл) и триэтиламина (0.9 г, 8.92 ммоль) нагревали до 150°C в микроволновой печи в течение 30 минут. Реакционную смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, дихлорметан : МеОН = 20:1) с получением 6-(3-трет-бутилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (540 мг, 55%) в виде коричневого масла. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 220, t_R=1.228 мин.

Стадия 2

N-(6-(3-трет-бутилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-хлороимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Смесь 8-бромо-6-хлороимидазо[1,2-b]пиридазина (573 мг, 2.47 ммоль), 6-(3-трет-бутилпирролидин-1-ил)пиридин-2-амина (540 мг, 2.47 ммоль), Pd₂(dba)₃ (142 мг, 0.25 ммоль), BINAP (307 мг, 0.50 ммоль), Cs₂CO₃ (2.4 г, 7.41 ммоль) и диоксана (20 мл) нагревали до температуры кипения с обратным холодильником с перемешиванием в течение 15 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и получившуюся смесь очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, дихлорметан : МеОН = 50:1) с получением N-(6-(3-трет-бутилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-хлороимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (400 мг, неочищенный) в виде коричневого масла. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 371.1, t_R=2.23 мин.

Стадия 3

Метил 3-(8-(6-(3-трет-бутилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоат

Смесь N-(6-(3-трет-бутилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-хлороимидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (400 мг, 1.08 ммоль), метил 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоата (425 мг, 1.62 ммоль), Pd₂(dba)₃ (64 мг, 0.11 ммоль), X-phos (105 мг, 0.22 ммоль) и Na₂CO₃ (343 мг, 3.24 ммоль) в диоксане (5 мл) и воде (5 мл) нагревали до температуры кипения с обратным холодильником в течение 15 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и получившуюся смесь очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 25% ацетонитрил/75% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/50% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением метил 3-(8-(6-(3-трет-бутилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (60 мг, 12%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.74 (s, 1Н), 8.55 (s, 1Н), 8.21-8.11 (m, 3Н), 7.86 (s, 1Н), 7.63-7.47 (m, 2Н), 6.27 (d, 1Н, J=5.4 Hz), 6.14 (d, 1Н, J=7.2 Hz), 3.96 (s, 3Н), 3.71-3.68 (m, 1Н), 3.48-3.42 (m, 2Н), 3.19-3.13 (m, 1Н), 2.16-1.98 (m, 2Н), 1.82-1.78 (m, 2Н). 0.93 (s, 9Н). ЖХ-МС: 471, [М+Н]+, t_R=2.275 мин, ВЭЖХ: 96.55% при 214 нм, 96.14% при 254 нм, t_R=5.449 мин.

Пример 66: Синтез

3-(8-(6-(3-трет-Бутилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты

К раствору метил 3-(8-(6-(3-трет-бутилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (55 мг, 0.11 ммоль) в диоксане (5 мл) и воде (5 мл) добавили NaOH (50 мг, 1.25 ммоль), затем смесь нагревали до 40°C с перемешиванием в течение 3 ч. Раствор сконцентрировали под вакуумом, промыли дихлорметаном (10 мл × 3), затем добавили воду (10 мл) и водную фазу довели до pH=2 посредством добавления 2М HCl. Образовавшийся остаток отфильтровали и промыли водой (1 мл) и МеОН (1 мл) с получением 3-(8-(6-(3-трет-бутилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (50 мг, 93%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.22 (s, 1Н), 9.05 (s, 1Н), 8.52 (s, 1Н), 8.45 (s, 1Н), 8.22 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 8.12 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 8.01 (s, 1H), 7.72 (t, 1H, J=7.5 Hz), 7.52 (t, 1H, J=7.8 Hz), 6.72 (d, 1H, J=7.5 Hz), 6.15 (d, 1H, J=8.4 Hz), 3.73-3.68 (m, 1H), 3.52-3.43 (m, 2H), 3.13 (t, 1H, J=10.5 Hz), 2.16-2.12 (m, 1H), 1.98-1.93 (m, 1H), 1.78-1.71 (m, 1H), 0.86 (s, 9H). ЖХ-МС: [M+H]⁺, 457, t_R=1.859 мин, ВЭЖХ: 96.72% при 214 нм, 98.12% при 254 нм, t_R=4.654 мин.

Пример 67: Синтез

3-(8-(6-(3-трет-Бутилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамида

Смесь 3-(8-(6-(3-трет-бутилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (25 мг, 0.106 ммоль), 0.5 М раствора аммония в диоксане (2 мл), EDCI (43 мг, 0.22 ммоль), НОВТ (30 мг, 0.22 ммоль), Et₃N (23 мг, 0.22 ммоль) и дихлорметана (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Раствор сконцентрировали под вакуумом и очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/50% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением 3-(8-(6-(3-трет-бутилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензамида (6 мг, 24%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 9.79 (s, 1Н), 8.91 (s, 1Н), 8.47 (s, 1H), 8.31 (s, 1Н), 8.16-8.02 (m, 3Н), 7.79 (s, 1Н), 7.63 (t, 1Н, J=7.6 Hz), 7.52-7.47 (m, 2Н), 6.72 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.11 (d, 1H, J=8.4 Hz), 3.72-3.66 (m, 1H), 3.52-3.40 (m, 2H), 3.12 (t, 1H, J=10.0 Hz), 2.13-1.94 (m, 2H), 1.78-1.74 (m, 1H), 0.86 (s, 9H). ЖХ-МС: [M+H]⁺, 456, t_R=1.72 мин, ВЭЖХ: 99.11% при 214 нм, 99.64% при 254 нм, t_R=4.22 мин.

Пример 68: Синтез

(3-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)фенил)метанола

Смесь 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (500 мг, 1.52 ммоль), 3-(гидроксиметил)фенилбороновой кислоты (350 мг, 2.28 ммоль), Pd₂dba₃ (100 мг, 0.15 ммоль), X-phos (300 мг, 0.61 ммоль) и K₂CO₃ (625 мг, 4.56 ммоль) растворили в диоксане/water (50 мл/5 мл). Реакционную смесь дегазировали посредством барботирования азотом в течение 5 минут, затем нагревали при 100°C с перемешиванием в течение 3 ч, растворитель удалили под вакуумом, Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, дихлорметан/метанол = 40:1) с получением (3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)фенил)метанола (300 мг, 81%) в виде белого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 9.62 (s, 1Н), 8.77 (s, 1Н), 8.19 (s, 1Н), 7.88 (s, 1Н), 7.81-7.78 (m, 1Н), 7.63 (s, 1Н), 7.49-7.39 (m, 3Н), 6.71 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.05 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 5.31 (t, 1H, J=5.7 Hz), 4.59 (d, 2H, J=5.7 Hz), 4.25-4.20 (m, 1H), 3.58-3.50 (m, 1H), 3.42-3.38 (m, 1H), 2.08-1.97 (m, 3H), 1.70 (brs, 1H), 1.11 (d, 3H, J=6.3 Hz). ЖХ-МС: [M+H]⁺, 401, t_R=1.679 мин, ВЭЖХ: 99.87% при 214 нм, 99.85% при 254 нм, t_R=5.87 мин.

Пример 69: Синтез

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(3-(пиперидин-1-илметил)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Стадия 1

3-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензальдегид

(3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)фенил)метанол (20 мг, 0.05 ммоль) и MnO₂(86 мг, 1.0 ммоль) растворили в дихлорметане (10 мл), реакционную смесь нагревали до 40°C с перемешиванием в течение 24 ч, отфильтровали, промыли дихлорметаном (30 мл) и затем фильтрат сконцентрировали под вакуумом с получением осадка, который очистили посредством хроматографии на оксиде алюминия, элюируя дихлорметаном с получением 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензальдегида (9 мг, 45%) в виде оранжевого осадка. LC-MS: 399 [М+Н]⁺, t_R=1.88 мин.

Стадия 2

N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(3-(пиперидин-1-илметил)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензальдегид (28 мг, 0.070 ммоль) и пиперидин (7 мг, 0.077 ммоль) растворили в 1,2-дихлорэтане (8 мл), перемешивали в течение 1 ч, затем добавили триацетоксиборогидрид натрия (44 мг, 0.21 ммоль) с последующим АсОН (0.1 мл). Через 15 ч растворитель удалили и остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, дихлорметан/метанол 40/1) с получением N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(3-(пиперидин-1-илметил)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (17 мг, 21%) в виде оранжевого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CO3OD): δ 8.80 (s, 1Н), 8.00 (s, 1Н), 7.91-7.84 (m, 2Н), 7.59 (s, 1Н), 7.48-7.41 (m, 3Н), 6.30 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.09 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.30-4.26 (m, 1Н), 3.60-3.43 (m, 4 h), 2.51-2.47 (m, 4 h), 2.15-2.05 (m, 3Н), 1.78 (brs, 1Н), 1.63-1.60 (m, 4 h), 1.51-1.46 (m, 2Н), 1.19 (d, 3Н, J=6.3 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 468, t_R=1.397 мин, ВЭЖХ: 99.52% при 214 нм, 98.65% при 254 нм, t_R=5.76 мин.

Пример 70: Синтез

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(3-(пирролидин-1-илметил)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензальдегид (70 мг, 0.175 ммоль) и пирролидин (14 мг, 0.194 ммоль) растворили в 1,2-дихлорэтане (10 мл), перемешивали в течение 1 ч, затем добавили триацетоксиборогидрид натрия (111 мг, 0.525 ммоль) с последующим АсОН (0.2 мл). Через 15 ч, растворитель удалили и остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, дихлорметан/метанол 90:1) с получением N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(3-(пирролидин-1-илметил)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (18 мг, 23%) в виде оранжевого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.70 (s, 1Н), 8.05 (s, 1Н), 7.91-7.85 (m, 2H), 7.59-7.48 (m, 3Н), 7.38-7.35 (m, 1Н), 6.21 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.01 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 4.25-4.17 (m, 3Н), 3.55 (s, 1Н), 3.37-3.44 (m, 1Н), 3.17 (brs, 4 h), 2.08-1.97 (m, 7Н), 1.72 (brs, 1Н), 1.13 (d, 3Н, J=4.5 Hz).. ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 454, t_R=1.367 мин, ВЭЖХ: 99.54% при 214 нм, 99.89% при 254 нм, t_R=5.164 мин.

Пример 71: Синтез

(S)-6-(3-хлорфенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида

Смесь (S)-6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (200 мг, 0.61 ммоль), 3-хлорфенилбороновой кислоты (79 мг, 0.67 ммоль), Pd₂dba₃ (26 мг, 0.061 ммоль), X-phos (87 мг, 0.24 ммоль) и K₂CO₃ (190 мг, 1.83 ммоль) растворили в диоксане/воде (30 мл/3 мл), реакционную смесь дегазировали барботированием азотом в течение 5 минут, затем нагревали при 100°C с перемешиванием в течение 3 ч. Растворитель удалили под вакуумом, затем очистили посредством хроматографии (силикагель, дихлорметан/метанол 80:1) с получением остатка, который дополнительно очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/50% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением продукта, который растворили в дихлорметане (10 мл), затем медленно добавили концентрированную HCl (2 мл) и перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин. Растворитель удалили под вакуумом с получением (S)-6-(3-хлорфенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида (15 мг, 6%) в виде оранжевого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 9.78 (s, 1Н), 8.88 (s, 1Н), 8.33-8.31 (m, 1Н), 7.96-7.81 (m, 3Н), 7.65-7.46 (m, 3Н), 6.73-6.69 (m, 1Н), 6.13 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.28-4.24 (m, 1Н), 3.63-3.58 (m, 1Н), 3.47-3.41 (m, 1Н), 2.12-2.02 (m, 3Н), 1.74-1.73 (m, 1Н), 1.16 (d, 3Н, J=6.3 Hz). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 405, t_R=2.26 мин, ВЭЖХ: 99.61% при 214 нм, 95.33% при 254 нм, t_R=5.36 мин.

Пример 72: Синтез

4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-3-илкарбамоил)бензойной кислоты

Стадия 1

трет-бутил 1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-3-илкарбамат

Суспензию 6-хлор-N-(5,6-диметоксипиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (1.3 г, 4.24 ммоль) и трет-бутил пиперидин-3-илкарбамата (3.4 г, 16.99 ммоль) нагревали до 160°C в течение 2 ч. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, дихлорметан : МеОН = 120:1) с получением трет-бутил 1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-3-илкарбамата (300 мг, 15%) в виде коричневого осадка. ЖХ-МС: 470 [М+1]⁺, t_R=1.44 min

Стадия 2

6-(3-Аминопиперидин-1-ил)-N-(5,6-диметоксипиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Смесь трет-бутил 1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-3-илкарбамата (300 мг, 0.64 ммоль) и ТФУ (5 мл) в дихлорметане (5 мл) перемешивали при 25°C в течение 6 ч. Остаток сконцентрировали с получением неочищенной трифторацетатной соли 6-(3-аминопиперидин-1-ил)-N-(5,6-диметоксипиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (350 мг, неочищенный) в виде коричневой жидкости, которую использовали сразу без дополнительной очистки. ЖХ-МС: 370 [М+1]⁺, t_R=1.09 мин

Стадия 3

Метил 4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-3-илкарбамоил)бензоат

Смесь 6-(3-аминопиперидин-1-ил)-N-(5,6-диметоксипиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина трифторацетата (350 мг, 0.94 ммоль), 4-(метоксикарбонил)бензойной кислоты (171 мг, 0.94 ммоль), EDCI (725 мг, 3.79 ммоль), триэтиламина (288 мг, 2.84 ммоль) и 1-метил-1Н-имидазола (311 мг, 3.79 ммоль) в дихлорметане (15 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Остаток сконцентрировали под вакуумом, затем очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 40% ацетонитрил/60% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением метил 4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-3-илкарбамоил)бензоата (50 мг, 10%) в виде белого осадка. ЖХ-МС: 532 [М+1]⁺, t_R=1.58 мин.

Стадия 4

4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-3-илкарбамоил)бензойная кислота

Смесь метил 4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-3-илкарбамоил)бензоата (50 мг, 0.09 ммоль) и гидроксида натрия (50 мг, 1.25 ммоль) в 1,4-диоксане (5 мл) и воде (5 мл) перемешивали при 40°C в течение 3 ч. Остаток сконцентрировали под вакуумом до ~5 мл, затем довели pH до 2 с помощью 1М HCl. Остаток сконцентрировали и тритурировали с МеОН с получением продукта 4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-3-илкарбамоил)бензойной кислоты (15 мг, 31%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.36 (s, 1Н), 8.60 (d, 1Н, J=7.2 Hz), 8.19 (s, 2Н), 8.06-7.92 (m, 4 h), 7.45 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 6.95 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.18-4.07 (m, 3Н), 3.99 (s, 3Н), 3.91 (s, 3Н), 3.07-2.99 (m, 2Н), 1.98-1.88 (m, 2Н), 1.70-1.64 (m, 2Н). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 518, t_R=1.295 мин, ВЭЖХ: 95.24% при 214 нм, 95.25% при 254 нм, t_R=4.981 мин.

Пример 73: Синтез

1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-N-(1,3-диоксоизоиндолин-5-ил)пиперидин-3-карбоксамида гидрохлорида

Смесь 1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-3-карбоновой кислоты (500 мг, 1.26 ммоль), 5-аминоизоиндолин-1,3-диона (250 мг, 1.51 ммоль) и пиридина (10 мл) перемешивали при 0°C в течение 2 ч. POCl₃ (20 капель) добавили и перемешивали в течение 10 минут, затем добавили воду (5 мл) и смесь экстрагировали этилацетатом (10 мл). Органический слой промыли солевым раствором (10 мл), затем высушили над Na₂SO₄, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Неочищенный продукт очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/50% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением продукта. HCl (1 мл) добавили и затем смесь сконцентрировали под вакуумом с получением 1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-N-(1,3-диоксоизоиндолин-5-ил)пиперидин-3-карбоксамида гидрохлорида (10 мг, 2%). ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 11.23 (s, 1Н), 10.65 (s, 1Н), 10.21 (s, 1Н), 8.15 (s, 2Н), 7.98 (s, 1Н), 7.86 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 7.77 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 7.43 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 6.93 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.29 (d, 1Н, J=11.7 Hz), 4.14 (d, 1Н, J=12.3 Hz), 3.91 (s, 3Н), 7.56 (s, 3Н), 3.23-3.02 (m, 2Н), 2.73 (s, 1Н), 2.10-2.06 (s, 1Н), 1.82-1.75 (m, 3Н). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 543, t_R=1.406 мин, ВЭЖХ: 98.08% при 214 нм, 98.69% при 254 нм, t_R=5.25 мин.

Пример 74: Синтез

4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-3-карбоксамидо)бензойной кислоты

Стадия 1

1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-3-карбоновая кислота

Суспензию 6-хлор-N-(5,6-диметоксипиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (200 мг, 0.65 ммоль) и метилпиперидин-3-карбоксилата (400 мг, 2.8 ммоль) нагревали при 160°C в течение 2 ч в атмосфере N₂. После охлаждения до комнатной температуры, остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, дихлорметан : МеОН = 20:1) с получением 1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-3-карбоновой кислоты (40 мг, 15%) в виде красного осадка. ЖХ-МС: 399 [М+1]⁺, t_R=1.261 мин.

Стадия 2

трет-бутил 4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-3-карбоксамидо)бензоат

Смесь 1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-3-карбоновой кислоты (100 мг, 0.25 ммоль), трет-бутил 4-аминобензоата (49 мг, 0.25 ммоль), EDCI (192 мг, 1.0 ммоль) и 1-метил-1Н-имидазола (82 мг, 1.0 ммоль) в дихлорметане (3 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Остаток сконцентрировали с получением неочищенного трет-бутил 4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-3-карбоксамидо)бензоата (200 мг, неочищенный) в виде коричневой жидкости, которую использовали сразу без дополнительной очистки. ЖХ-МС: 574 [М+1]⁺, t_R=1-720 мин.

Стадия 3

4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-3-карбоксамидо)бензойная кислота

Смесь трет-бутил 4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-3-карбоксамидо)бензоата (150 мг, 0.26 ммоль) и ТФУ (2 мл) в дихлорметане (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Остаток сконцентрировали под вакуумом. Неочищенный продукт очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 40% ацетонитрил/60% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением 4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пиперидин-3-карбоксамидо)бензойной кислоты (5 мг, 4%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.36 (s, 1Н), 10.25 (s, 1Н), 8.14 (brs, 2Н), 7.90-7.74 (m, 5Н), 7.44 (s, 1Н), 6.97 (s, 1Н), 4.25-4.15 (m, 4 h), 3.91 (s, 3Н), 3.77 (s, 3Н), 2.67 (brs, 2Н), 2.04-1.57 (m, 3Н). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 517.9, t_R=1-366 мин, ВЭЖХ: 95.06% при 214 нм, 95.20% при 254 нм, t_R=4.927 мин.

Пример 75: Синтез

4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пирролидин-3-карбоксамидо)бензойной кислоты

Стадия 1

1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пирролидин-3-карбоновая кислота

Суспензию 6-хлор-N-(5,6-диметоксипиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (1 г, 3.27 ммоль), метилпирролидин-3-карбоксилата (1.69 г, 13.1 ммоль), триэтиламина (1.32 г, 13.1 ммоль) и карбоната цезия (4.26 г, 13.1 ммоль) нагревали до 180°C в течение 2 ч. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, дихлорметан : МеОН = 20:1) с получением 1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пирролидин-3-карбоновой кислоты (80 мг, 6%) в виде красного осадка. ЖХ-МС: 385 [М+1]⁺, t_R=1.258 мин.

Стадия 2

трет-бутил 4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пирролидин-3-карбоксамидо)бензоат

Смесь 1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пирролидин-3-карбоновой кислоты (80 мг, 0.21 ммоль), трет-бутил 4-аминобензоата (40 мг, 0.21 ммоль), EDCI (159 мг, 0.08 ммоль) и 1-метил-1Н-имидазола (68 мг, 0.8 ммоль) в дихлорметане (5 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Остаток сконцентрировали с получением неочищенного трет-бутил 4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пирролидине-3-карбоксамидо)бензоата (200 мг, неочищенный) в виде коричневой жидкости, которую использовали сразу без очистки. ЖХ-МС: 560 [М+1]⁺, t_R=1.510 мин.

Стадия 3

4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пирролидин-3-карбоксамидо)бензойной кислоты

Смесь трет-бутил 4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пирролидин-3-карбоксамидо)бензоата (200 мг, 0.36 ммоль) и ТФУ (2 мл) в дихлорметане (2 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Остаток сконцентрировали под вакуумом. Неочищенный продукт очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 25% ацетонитрил/75% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/50% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением 4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пирролидин-3-карбоксамидо)бензойной кислоты (6 мг, 4%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.54 (s, 1Н), 8.88 (brs, 2Н), 7.95-7.82 (m, 4 h), 7.49-6.69 (m, 3Н), 4.06-3.57 (m, 6Н), 3.19-3.02 (m, 5Н), 2.05 (brs, 2Н). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 504, t_R=1.269 мин, ВЭЖХ: 96.47% при 214 нм, 97.69% при 254 нм, t_R=4.72 мин.

Пример 76: Синтез

4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пирролидин-3-илкарбамоил)бензойной кислоты

Стадия 1

трет-бутил 1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пирролидин-3-илкарбамат

Суспензию 6-хлор-N-(5,6-диметоксипиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (1.5 г, 4.9 ммоль) и трет-бутил пирролидин-3-илкарбамата (3 г, 16 ммоль) нагревали до 160°C в течение 2 ч. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, дихлорметан : МеОН = 30:1) с получением трет-бутил 1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пирролидин-3-илкарбамата (180 мг, 8%) в виде серо-белого осадка. ЖХ-МС: 456 [М+1]⁺, t_R=1.396 мин.

Стадия 2

6-(3-Аминопирролидин-1-ил)-N-(5,6-диметоксипиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Суспензию трет-бутил 1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пирролидин-3-илкарбамата (180 мг, 0.40 ммоль) и ТФУ (2 мл) в дихлорметане (5 мл) перемешивали при 25°C в течение 6 ч. Остаток сконцентрировали с получением 6-(3-аминопирролидин-1-ил)-N-(5,6-диметоксипиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (180 мг, неочищенный) в виде красной жидкости. Ее использовали сразу без очистки. ЖХ-МС: 356 [М+1]⁺, t_R=1.187 мин.

Стадия 3

Метил 4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пирролидин-3-илкарбамоил)бензоат

Смесь 6-(3-аминопирролидин-1-ил)-N-(5,6-диметоксипиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (180 мг, 0.51 ммоль), 4-(метоксикарбонил)бензойной кислоты (92 мг, 0.51 ммоль), EDCI (389 мг, 2.0 ммоль), триэтиламина (103 мг, 1.02 ммоль) и 1-метил-1Н-имидазола (167 мг, 2.0 ммоль) в дихлорметане (10 мл) перемешивали при комнатной температуре в течение 16 ч. Остаток сконцентрировали и очистили посредством хроматографии (силикагель, 200-300 меш, дихлорметан : МеОН = 20:1) с получением 4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пирролидин-3-илкарбамоил)бензойной кислоты (100 мг, 38%) в виде коричневой жидкости. ЖХ-МС: 518 [М+1]⁺, t_R=1.327 мин.

Стадия 4

4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пирролидин-3-илкарбамоил)бензойная кислота

Смесь метил 4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пирролидин-3-илкарбамоил)бензоата (100 мг, 0.19 ммоль) и гидроксида натрия (100 мг) в 1,4-диоксане (5 мл) и воде (5 мл) перемешивали при 40°C в течение 2 ч. Остаток сконцентрировали до ~5 мл под вакуумом и довели до pH=2 с помощью 1М HCl. Неочищенную смесь сконцентрировали и очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 45% ацетонитрил/55% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением 4-(1-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)пирролидин-3-илкарбамоил)бензойной кислоты (9.5 мг, 10%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 10.29 (s, 1Н), 8.80 (d, 1Н, J=5.4 Hz), 8.13 (s, 1Н), 8.00-7.92 (m, 5Н), 7.51-7.40 (m, 2Н), 6.98-6.92 (m, 2Н), 4.58 (brs, 2Н), 3.99 (s, 3Н), 3.85 (s, 3Н), 2.28-1.98 (m, 5Н). ЖХ-МС: [М+Н]⁺, 504, t_R=1.236 мин, ВЭЖХ: 98.3% при 214 нм, 98.4% при 254 нм, t_R=4.52 мин.

Пример 77: Синтез

4-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)фенола

Стадия 1

4-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)фенол

Смесь 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.05 г, 0.15 ммоль), 4-гидроксифенилбороновой кислоты (0.025 г, 4 ммоль), Pd(dba)₂ (0.02 г, 0.035 ммоль), X-Phos (0.02 г, 0.042 ммоль) и Na₂CO₃ (0.032 г, 0.3 ммоль) в диоксане/H₂O (20 mL/2 мл) перемешивали при 95°C в течение 18 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, петролейный эфир/этилацетат 3:1) с получением 4-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)фенола (0.03 г, 51%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 9.85 (s, 1Н), 9.54 (s, 1Н), 8.70 (s, 1Н), 8.14 (s, 1Н), 7.78-7.75 (m, 2Н), 7.62 (s, 1Н), 7.43 (t, 1Н, J=8.0 Hz), 6.91-6.88 (m, 2Н), 6.70 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.07 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.22 (brs, 1H), 3.57 (brs, 2H), 2.08-1.98 (m, 3H), 1.69 (brs, 1H), 1.15 (d, 3H, J=6.3 Hz). LC/MS: 387 [M+H]⁺, 385 [M-H]^-, t_R=1.59 мин. ВЭЖХ: 96.77% при 214 нм, 97.82% при 254 нм, t_R=6.12 мин.

Пример 78: Синтез

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(пиридин-3-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Стадия 1

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(пиридин-3-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Методика:

Смесь 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.05 г, 0.15 ммоль), пиридин-3-илбороновой кислоты (0.022 г, 0.18 ммоль), Pd(dba)₂ (0.02 г, 0.035 ммоль), X-Phos (0.02 г, 0.042 ммоль) и Na₂CO₃ (0.032 г, 0.3 ммоль) в диоксане/H₂O (20 мл/2 мл) перемешивали при 95°C в течение 18 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, петролейный эфир/этилацетат 3:1) с получением N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(пиридин-3-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.025 г, 44%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CDCl₃): δ 9.20 (s, 1Н), 8.74-8.72 (m, 2Н), 8.32-8.19 (m, 2Н), 7.95 (s, 1Н), 7.63 (s, 1Н), 7.47-7.41 (m, 2Н), 6.26 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 6.07 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.27 (t, 1Н, J=6.2 Hz), 3.69-3.64 (m, 1Н), 3.50-3.47 (m, 1Н), 2.17-2.05 (m, 3Н), 1.79 (brs, 1Н), 1.27 (d, 3Н, J=6.0 Hz). LC/MS: 372 [М+Н]⁺, t_R=1.71 мин. ВЭЖХ: 98.37% при 214 нм, 99.69% при 254 нм, t_R=4.70 мин.

Пример 79: Синтез

6-(4-Фторфенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Стадия 1

6-(4-Фторфенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Методика:

Смесь 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.05 г, 0.15 ммоль), 4-фторфенилбороновой кислоты (0.025 г, 0.18 ммоль), Pd(dba)₂ (0.02 г, 0.035 ммоль), X-Phos (0.02 г, 0.042 ммоль) и Na₂CO₃ (0.032 г, 0.3 ммоль) в диоксане/H₂O (20 mL/2 мл) перемешивали при 95°C в течение 18 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, петролейный эфир/этилацетат 3:1) с получением 6-(4-фторфенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.025 г, 43%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CD₃OD): δ 8.85 (s, 1Н), 8.03-7.98 (m, 3Н), 7.63 (s, 1Н), 7.48 (t, 1Н, J=7.9 Hz), 7.30-7.24 (m, 2Н), 6.34 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.13 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.30 (brs, 1Н), 3.65-3.33 (m, 2Н), 2.18-2.05 (m, 3Н), 1.81 (brs, 1Н), 1.24 (d, 3Н, J=6.0 Hz) LC/MS: 389 [М+Н]⁺, t_R=2.03 мин. ВЭЖХ: 95.87% при 214 нм, 99.64% при 254 нм, t_R=4.79 мин.

Пример 80: Синтез 41583-131

3-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензонитрила

Стадия 1

3-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензонитрил

Методика:

Смесь 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.05 г, 0.15 ммоль), 3-cyanoфенилбороновой кислоты (0.026 г, 0.18 ммоль), Pd(dba)₂ (0.02 г, 0.035 ммоль), X-Phos (0.02 г, 0.042 ммоль) и Na₂CO₃ (0.032 г, 0.3 ммоль) в диоксане/H₂O (20 mL/2 мл) перемешивали при 95°C в течение 18 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, петролейный эфир и этилацетат 3:1) с получением 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензонитрила (0.03 г, 50%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CDCl₃): δ 8.77 (s, 1Н), 8.42 (brs, 1Н), 8.26-8.21 (m, 2Н), 7.90 (s, 1Н), 7.75-7.36 (m, 4 h), 6.17 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.04 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.25-4.21 (m, 1H), 3.67-3.63 (m, 1H), 3.51-3.46 (m, 1H), 2.16-2.08 (m, 3H), 1.81-1.76 (m, 1H), 0.98 (d, 3H, J=6.6 Hz). LC/MS: 396 [M+H]⁺, t_R=1.91 мин. ВЭЖХ: 95.63% при 214 нм, 98.93% при 254 нм, t_R=4.59 мин.

Пример 81: Синтез

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(пиридин-4-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Стадия 1

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(пиридин-4-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Методика:

Смесь 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.05 г, 0.15 ммоль), пиридин-4-илбороновой кислоты (0.022 г, 0.18 ммоль), Pd(dba)₂ (0.02 г, 0.035 ммоль), X-Phos (0.02 г, 0.042 ммоль) и Na₂CO₃ (0.032 г, 0.3 ммоль) в диоксане/H₂O (20 мл/2 мл) перемешивали при 95°C в течение 18 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, петролейный эфир/этилацетат 3:1) с получением N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(пиридин-4-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.025 г, 44%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CDCl₃): δ 8.75-8.70 (m, 3Н), 8.15 (brs, 1Н), 7.93 (s, 1Н), 7.86 (d, 1Н, J=5.7 Hz), 7.62 (s, 1Н), 7.41 (t, 1Н, J=7.9 Hz), 6.22 (d, 1H, J=7.5 Hz), 6.05 (of, 1H, J=8.4 Hz), 4.26-4.22 (m, 1H), 3.68-3.63 (m, 1H), 3.49-3.46 (m, 1H), 2.16-2.04 (m, 3H), 1.77 (brs, 1H), 1.24 (t, 3H, J=6.3 Hz). LC/MS: 372 [M+H]⁺, 370 [M-Н]^-, t_R=1.68 мин. ВЭЖХ: 100% при 214 нм, 100% при 254 нм, t_R=4.57 мин.

Пример 82: Синтез

6-(5-Метоксипиридин-3-ил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Стадия 1

6-(5-Метоксипиридин-3-ил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Методика:

Смесь 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.05 г, 0.15 ммоль), 5-метоксипиридин-3-илбороновой кислоты (0.028 г, 0.18 ммоль), Pd(dba)₂ (0.02 г, 0.035 ммоль), X-Phos (0.02 г, 0.042 ммоль) и Na₂CO₃ (0.032 г, 0.3 ммоль) в диоксане/H₂O (20 мл/2 мл) перемешивали при 95°C в течение 18 ч в атмосфере N₂. Растворитель удалили под вакуумом и остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, петролейный эфир/этилацетат 3:1) с получением 6-(5-метоксипиридин-3-ил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (0.03 г, 49%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CD₃OD): δ 8.28 (s, 1Н), 8.72 (s, 1Н), 8.40 (s, 1Н), 8.12 (s, 1Н), 7.98 (s, 1Н), 7.72 (s, 1Н), 7.49 (t, 1Н, J=7.9 Hz), 6.34 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.17 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 4.31-4.27 (m, 1Н), 4.01 (s, 3Н), 3.68-3.63 (m, 1Н), 3.51-3.43 (m, 1Н), 2.20-2.07 (m, 3Н), 1.81 (brs, 1Н), 1.23 (d, 3Н, J=6.0 Hz). LC/MS: 402 [М+Н]⁺, t_R=1.73 мин. ВЭЖХ: 99.91% при 214 нм, 99.92% при 254 нм, t_R=5.59 мин.

Пример 83: Синтез

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(4-(2-(пирролидин-1-ил)этокси)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида

Стадия 1

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(4-(2-(пирролидин-1-ил)этокси)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорид

Методика:

Смесь 4-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)фенола (0.05 г, 0.13 ммоль), 1-(2-бромэтил)пирролидина (0.05 г, 0.26 ммоль) и K₂CO₃ (0.05 г, 0.36 ммоль) в ДМФ (15 мл) перемешивали при 50°C в течение 3 ч. Растворитель удалили под вакуумом и остаток очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 20% ацетонитрил/80% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 50% ацетонитрил/530% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин). Препаративный растворитель довели до pH=2 с помощью 1М HCl перед эвапорацией досуха с получением N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(4-(2-(пирролидин-1-ил)этокси)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида (0.015 г, 24%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CD₃OD): δ 8.78 (s, 1Н), 6.35 (s, 1Н), 8.08-8.02 (m, 3Н), 7.59 (t, 1Н, J=8.1 Hz), 7.24-7.22 (m, 2Н), 6.43 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.30 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.46 (t, 2Н, J=4.8 Hz), 4.30 (brs, 1Н), 3.77-3.71 (m, 5Н), 3.54-3.50 (m, 1Н), 3.30 (brs, 1Н), 2.22-2.07 (m, 8Н), 1.82 (brs, 1Н), 1.23 (d, 3Н, J=6.3 Hz). LC/MS: 484 [М+Н]⁺, t_R=1.10 мин. ВЭЖХ: 100% при 214 нм, 100% при 254 нм, t_R=5.01 мин.

Пример 84: Синтез

6-(3-(Аминометил)фенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида

Стадия 1

6-(3-(Аминометил)фенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорид

К перемешанной смеси LiAlH₄ (0.10 г, 2.6 ммоль) в ТГФ (30 мл), добавили по каплям раствор 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензонитрила (0.12 г, 0.3 ммоль) в ТГФ (10 мл) при комнатной температуре. Через 2 ч, медленно добавили 0.3 мл воды и затем перемешивали в течение дополнительных 30 мин. Смесь отфильтровали и фильтрат сконцентрировали и очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 25% ацетонитрил/75% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 40% ацетонитрил/60% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин). Полученный раствор довели до pH=2 с помощью 1М HCl и затем эвапорировали с получением 6-(3-(аминометил)фенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида (0.07 г, 53%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CD₃OD): δ 8.80 (s, 1Н), 8.43 (s, 1Н), 8.23-8.10 (m, 3Н), 7.72-7.65 (m, 3Н), 6.58 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.43 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.37-4.29 (m, 3Н), 3.76-3.73 (m, 1Н), 3.58-3.55 (m, 1Н), 2.24-2.12 (m, 3Н), 1.87 (brs, 1Н), 1.26 (d, 3Н, J=6.3 Hz). LC/MS: 400 [М+Н]⁺, t_R=1.03 мин. ВЭЖХ: 100% при 214 нм, 100% при 254 нм, t_R=4.72 мин.

Пример 85: Синтез

6-(4-трет-Бутилфенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Стадия 1

6-(4-трет-Бутилфенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Методика:

К раствору 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (60 мг, 0.183 ммоль) и 4-трет-бутилфенилбороновой кислоты (49 мг, 0.274 ммоль) в диоксане/H₂O (10 мл/1 мл) добавили Na₂CO₃ (39 мг, 0.366 ммоль) с последующим Pd(dba)₂ (21 мг) и X-Phos (9 мг) в атмосфере азота при перемешивании. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 15 ч в атмосфере азота. После охлаждения, растворитель сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, дихлорметан : МеОН = 100:1) с получением 6-(4-трет-бутилфенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]pyri-dazin-8-амина (30 мг, 38%) в виде осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CDCl₃): δ 8.70 (s, 1Н), 8.30 (brs, 1Н), 7.90 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 7.60 (s, 1H), 7.51-7.38 (m, 4 h), 6.31 (d, 1H, J=7.2 Hz), 6.03 (d, 1H, J=8.1 Hz), 4.24 (brs, 1H), 3.66 (brs, 1H), 3.49-3.47 (m, 1H), 2.15-2.09 (m, 3H), 1.75 (brs, 1H), 1.38 (s, 9H), 1.23 (d, 3H, J=6.3 Hz). LC/MS: 427 [M+H]⁺, t_R=2.51 мин. ВЭЖХ: 95.63% при 214 нм, 99.19% при 254 нм, t_R=99.79% мин.

Пример 86: Синтез

3-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)фенола

Стадия 1

3-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)фенол

Методика:

К раствору 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (550 мг, 1.68 ммоль) и 4-трет-бутилфенилбороновой кислоты (345 мг, 2.52 ммоль) в диоксане/H₂O (20 мл/2 мл) добавили Na₂CO₃ (356 мг, 3.36 ммоль) с последующим Pd(dba)₂ (193 мг, 0.336 ммоль) и X-Phos (80 мг, 0.168 ммоль) в атмосфере азота при перемешивании. Смесь кипятили с обратным холодильником в течение 16 ч в атмосфере азота. После охлаждения растворитель сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, петролейный эфир : EtOAc = 3:1 to 1:1) с получением 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)фенола (565 мг, 87%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО): δ 9.61 (s, 1Н), 9.58 (s, 1Н), 8.72 (s, 1Н), 8.16 (s, 1Н), 7.62 (s, 1Н), 7.44-7.26 (m, 2Н), 6.90-6.86 (m, 2Н), 6.71 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.05 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 4.22-4.18 (m, 1H), 3.55-3.53 (m, 1H), 3.42-3.37 (m, 1H), 2.10-1.96 (m, 3H), 1.66 (brs, 1H), 1.13 (d, 3H, J=6.0 Hz). LC/MS: 387 [M+H]⁺; 385 [M-H]^-, t_R=1.72 мин. ВЭЖХ: 95.63% при 214 нм, 95.18% при 254 нм, t_R=2.72 мин.

Пример 87: Синтез

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(3-(2-(пиперидин-1-ил)этокси)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Стадия 1

2-(пиперидин-1-ил)этилметансульфонат

Методика:

К раствору 2-(пиперидин-1-ил)этанола (1.29 г, 0.01 моль) и Et₃N (1.52 г, 0.015 mol) в дихлорметане (20 мл) добавили метансульфонилхлорид (1.37 г, 0.012 моль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Смесь промыли солевым раствором. Органический слой сконцентрировали под вакуумом с получением неочищенного продукта, который использовали на следующей стадии без очистки или характеризации. (1.9 г, 91%).

Стадия 2

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(3-(2-(пиперидин-1-ил)этокси)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Методика:

К смеси 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)фенол (40 мг, 0.1 ммоль) и K₂CO₃ (28 мг, 0.2 ммоль) в ДМФ (5 мл) добавили 2-(пиперидин-1-ил)этилметансульфонат (25 мг, 0.12 ммоль). Смесь нагревали при 50°C в течение 16 ч. После охлаждения, смесь влили в воду и экстрагировали EtOAc (8 мл 3). Объединенные органические слои промыли солевым раствором, затем высушили над MgSO₄. После фильтрации и концентрирования, остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, EtOAc) с получением N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(3-(2-(пиперидин-1-ил)этокси)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (20 мг, 40%). ¹Н HMR (300 MHz, CDCl₃): δ 8.67 (s, 1Н), 8.08 (s, 1Н), 7.93 (s, 1Н), 7.60-7.53 (m, 3Н), 7.45-7.37 (m, 2Н), 7.05-7.01 (m, 1Н), 6.23 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.04 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.31-4.21 (m, 3Н), 3.71-3.65 (m, 1H), 3.54-3.48 (m, 1H), 2.85 (t, 2H, J=6.0 Hz), 2.57 (brs, 4 h), 2.17-2.04 (m, 3H), 1.76-1.62 (m, 5H), 1.48 (brs, 2H), 1.26 (d, 3H, J=6.6 Hz). LC/MS: 498 [M+H]⁺, t_R=1.15 мин. ВЭЖХ: 99.14% при 214 нм, 99.51% при 254 нм, t_R=3.97 мин.

Пример 88: Синтез

Стадия 1

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(3-(2-морфолиноэтокси)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Стадия 1

2-Морфолиноэтилметансульфонат

Методика:

К раствору 2-морфолиноэтанола (1.31 г, 0.01 моль) и Et₃N (1.52 г, 0.015 моль) в дихлорметане (20 мл) добавили метансульфонилхлорид (1.37 г, 0.012 моль) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Смесь промыли солевым раствором. Органический слой сконцентрировали под вакуумом с получением неочищенного продукта. Продукт использовали на следующей стадии без очистки или характеризации. (2 г, 95%).

Стадия 2

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(3-(2-морфолиноэтокси)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Методика:

К смеси 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)фенола (40 мг, 0.1 ммоль) и K₂CO₃ (28 мг, 0.2 ммоль) в ДМФ (5 мл) добавили 2-(пиперидин-1-ил)этилметансульфонат (25 мг, 0.12 ммоль). Смесь нагревали при 50°C в течение 16 ч. После охлаждения, смесь влили в воду и экстрагировали EtOAc (10 мл × 3). Объединенные органические слои промыли солевым раствором, затем высушили над MgSO₄. После фильтрации и концентрирования, остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, EtOAc) с получением N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(3-(2-морфолиноэтокси)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (20 мг, 40%). ¹Н HMR (300 MHz, CDCl₃): δ 8.65 (s, 1Н), 8.06 (s, 1Н), 7.93 (s, 1Н), 7.59-7.54 (m, 3Н), 7.45-7.40 (m, 2Н), 7.04-7.02 (m, 2Н), 6.22 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.04 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 4.25-4.20 (m, 3Н), 3.79-3.76 (m, 4 h), 3.68 (brs, 1Н), 3.51-3.48 (m, 1Н), 2.87 (t, 2Н, J=5.7 Hz), 2.64 (brs, 4 h), 2.14-2.06 (m, 3Н), 1.78 (brs, 1Н), 1.67-1.62 (m, 4 h), 1.50-1.48 (m, 2Н), 1.25 (d, 3Н, J=6.3 Hz). LC/MS: 500 [М+Н]⁺, t_R=1.13 мин. ВЭЖХ: 95.85% при 214 нм, 95.41% при 254 нм, t_R=5.12 мин.

Пример 89: Синтез

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(4-(2-(пиперидин-1-ил)этокси)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Стадия 1

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(4-(2-(пиперидин-1-ил)этокси)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Методика:

К смеси 4-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-и]пиридазин-6-ил)фенола (40 мг, 0.1 ммоль) и K₂CO₃ (28 мг, 0.2 ммоль) в ДМФ (5 мл) добавили 2-(пиперидин-1-ил)этилметансульфонат (25 мг, 0.12 ммоль). Смесь нагревали при 50°C в течение 16 ч. После охлаждения, смесь влили в воду и экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором, затем высушили над MgSO₄. После фильтрации и концентрирования, остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, EtOAc) с получением N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(4-(2-(пиперидин-1-ил)этокси)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (20 мг, 40%). ¹Н HMR (300 MHz, CDCl₃): δ 8.63 (s, 1Н), 8.01-7.90 (m, 4 h), 7.57 (s, 1H), 7.42 (t, 1H, J=7.8 Hz), 7.05-7.01 (m, 2H), 6.21 (d, 1H, J=7.8 Hz), 6.04 (d, 1H, J=8.7 Hz), 4.30-4.20 (m, 3H), 3.70-3.64 (m, 1H), 3.53-3.45 (m, 1H), 2.84 (t, 2H, J=6.2 Hz), 2.56 (brs, 4 h), 2.20-2.03 (m, 3H), 1.78 (brs, 1H), 1.67-1.62 (m, 4 h), 1.50-1.48 (m, 2H), 1.27 (d, 3H, J=6.3 Hz). LC/MS: 498 [M+H]⁺, t_R=1.13 мин. ВЭЖХ: 99.24% при 214 нм, 99.34% при 254 нм, t_R=5.70 мин.

Пример 90: Синтез

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(4-(2-морфолиноэтокси)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Стадия 1

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(4-(2-морфолиноэтокси)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Методика:

К смеси 4-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)фенола (40 мг, 0.1 ммоль) и K₂CO₃ (28 мг, 0.2 ммоль) в ДМФ (5 мл) добавили 2-(пиперидин-1-ил)этилметансульфонат (25 мг, 0.12 ммоль). Смесь нагревали при 50°C в течение 16 ч. После охлаждения, смесь влили в воду и экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором, высушили над MgSO₄, отфильтровали и сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, EtOAc) с получением N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(4-(2-морфолиноэтокси)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (40 мг, 80%). ¹Н HMR (300 MHz, CDCl₃): δ 8.63 (s, 1Н), 8.05-7.90 (m, 4 h), 7.57 (s, 1Н), 7.42 (t, 1Н, J=8.0 Hz), 7.04-7.01 (m, 2H), 6.22 (d, 1H, J=7.5 Hz), 6.04 (d, 1H, J=8.4 Hz), 4.30-4.19 (m, 3H), 3.80-3.77 (m, 4 h), 3.70-3.64 (m, 1H), 3.51-3.48 (m, 1H), 2.87 (t, 2H, J=5.7 Hz), 2.65-2.62 (m, 4 h), 2.17-2.05 (m, 3Н), 1.78 (brs, 1Н), 1.26 (d, 3Н, J=6.3 Hz). LC/MS: 500 [М+Н]⁺, t_R=1.11 мин. ВЭЖХ: 99.73% при 214 нм, 99.60% при 254 нм, t_R=99.73% мин.

Пример 91: Синтез

6-(3-(2-Диэтиламино)этокси)фенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Стадия 1

2-(Диэтиламино)этилметансульфонат

Методика:

К раствору 2-(диэтиламино)этанола (1.76 г, 0.015 моль) и Et₃N (2.27 г, 0.00225 моль) в дихлорметане (25 мл) добавили метансульфонилхлорид (2.05 г, 0.018 моль) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Смесь промыли солевым раствором. Органический слой сконцентрировали под вакуумом с получением неочищенного продукта. Продукт использовали на следующей стадии без очистки. (2 г, 69%).

Стадия 2

6-(3-(2-(Диэтиламино)этокси)фенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Методика:

К смеси 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)фенола (40 мг, 0.1 ммоль) и K₂CO₃ (28 мг, 0.2 ммоль) в ДМФ (5 мл) добавили 2-(диэтиламино)этилметансульфонат (30 мг, 0.15 ммоль). Смесь нагревали при 50°C в течение 15 ч. После охлаждения, смесь влили в воду и экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором, высушили над MgSO₄, отфильтровали и сконцентрировали. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, EtOAc) с получением 6-(3-(2-(диэтиламино)этокси)фенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (18 мг, 37%). ¹Н HMR (300 MHz, CDCl₃): δ 8.64 (s, 1Н), 8.04 (s, 1Н), 7.93 (s, 1Н), 7.59-7.53 (m, 3Н), 7.45-7.36 (m, 2Н), 7.28 (s, 1Н), 7.04 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 6.23 (d, 1Н, J=8.1 Hz), 6.04 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.29-4.15 (m, 3Н), 3.68 (brs, 1Н), 3.52-3.49 (m, 1Н), 2.97-2.93 (m, 2Н), 2.72-2.65 (m, 4 h), 2.15-2.04 (m, 3Н), 1.77 (brs, 3Н), 1.26 (d, 3Н, J=6.3 Hz), 1.11 (t, 6Н, J=7.1 Hz). LC/MS: 486 [М+Н]⁺, t_R=1-48 мин. ВЭЖХ: 95.50% при 214 нм, 96.62% при 254 нм, t_R=5.45 мин.

Пример 92: Синтез

6-(4-(2-(Диэтиламино)этокси)фенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина

Стадия 1

6-(4-(2-Диэтиламино)этокси)фенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Методика:

К смеси 4-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)фенола (40 мг, 0.1 ммоль) и K₂CO₃ (28 мг, 0.2 ммоль) в ДМФ (5 мл) добавили 2-(диэтиламино)этилметансульфонат (30 мг, 0.15 ммоль). Смесь нагревали при 50°C в течение 15 ч. После охлаждения, смесь влили в воду и экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором и высушили над MgSO₄. После фильтрации и концентрирования, остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, EtOAc) с получением 6-(4-(2-(диэтиламино)этокси)фенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (20 мг, 40%). ¹Н HMR (300 MHz, CDCl₃): δ 8.59 (s, 1Н), 8.06-7.90 (m, 4 h), 7.58 (s, 1Н), 7.42 (t, 1Н, J=7.6 Hz), 7.03-7.00 (m, 2H), 6.23 (d, 1H, J=7.2 Hz), 6.05 (d, 1H, J=8.1 Hz), 4.57 (brs, 2H), 4.27 (brs, 1H), 3.67 (brs, 1H), 3.52-3.41 (m, 3H), 3.22-3.20 (m, 4 h), 2.16-2.06 (m, 3H), 1.80 (brs, 1H), 1.45 (t, 6H, J=6.9 Hz), 1.28 (d, 3H, J=6.3 Hz). LC/MS: 486 [M+H]⁺, t_R=1.12 мин. ВЭЖХ: 98.72% при 214 нм, 99.10% при 254 нм, t_R=5.46 мин.

Пример 93: Синтез

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(3-((пиперидин-4-иламино)метил)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида

Стадия 1

3-(8-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензонитрил

Методика:

К раствору 6-хлор-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (500 мг, 1.52 ммоль) и 3-цианофенилбороновой кислоты (336 мг, 2.29 ммоль) в диоксане/H₂O (10 мл/2 мл) добавили Na₂CO₃ (322 мг, 3.04 ммоль) с последующим Pd(dba)₂ (175 мг, 0.30 ммоль) и X-Phos (73 мг, 0.15 ммоль) в атмосфере азота при перемешивании. Смесь перемешивали при кипении с обратным холодильником в течение 15 ч в атмосфере азота. После охлаждения, растворитель сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, этилацетат) с получением 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензонитрила (310 мг, 52%) в виде желтого масла. ЖХ-МС: 396.2 [М+Н]⁺, t_R=1.89 мин.

Стадия 2

6-(3-(Аминометил)фенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Методика:

К смеси LiAlH₄ (114 мг, 3 ммоль) в ТГФ (10 мл) по каплям добавили 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензонитрил (235 мг, 0.6 ммоль) в ТГФ (5 мл). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Реакцию погасили водой, и смесь отфильтровали. Фильтрат высушили над Na₂SO₄ и сконцентрировали с получением продукта (210 мг, 88%) в виде масла, которое использовали сразу без очистки. LC/MS: 400.3 [М+Н]⁺, t_R=1.33 мин.

Стадия 3

трет-бутил 4-оксопиперидин-1-карбоксилат

Методика:

К раствору пиперидин-4-она гидрохлорида (1.53 г, 0.01 моль) и (Boc)₂O (2.62 г, 0.012 моль) в МеОН (20 мл) добавили Et₃N (2.02 г, 0.02 моль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель удалили под вакуумом. Остаток разбавили водой и экстрагировали EtOAc (3×15 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором, затем высушили над MgSO₄. После фильтрации и концентрирования трет-бутил 4-оксопиперидин-1-карбоксилат (1.5 г, 75%) получили в виде белого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, CDCl₃): δ 3.71 (t, 4 ч, J=6.2 Hz), 2.44 (t, 4 ч, J=6.3 Hz), 1.49 (s, 9Н).

Стадия 4

трет-бутил-4-(3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензиламино)пиперидин-1-карбоксилат

Методика:

К раствору 6-(3-(аминометил)фенил)-N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (50 мг, 1.52 ммоль), трет-бутил 4-оксопиперидин-1-карбоксилата (38 мг, 0.188 ммоль) и NaBH(OAc)₃ (80 мг, 0.375 ммоль) в дихлорметане (5 мл) добавили НОАс (12 мг). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Растворитель сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, EtOAc) с получением трет-бутил 4-(3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензиламино)пиперидин-1-карбоксилата (35 мг, 48%) в виде желтого масла. LC/MS: 583.3 [М+Н]⁺, t_R=1.52 мин.

Стадия 5

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(3-((пиперидин-4-иламино)метил)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорид

Методика:

трет-бутил-4-(3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензиламино)пиперидин-1-карбоксилат (35 мг, 0.06 ммоль) растворили в газообразном HCl в дихлорметане (5 мл). Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель сконцентрировали под вакуумом с получением N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(3-((пиперидин-4-иламино)метил)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида (35 мг, 109%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО + D₂O): δ 9.18 (s, 1Н), 8.49 (s, 1Н), 8.27 (s, 1Н), 8.17 (s, 1Н), 7.99 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 7.80 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 7.68 (t, 1Н, J=7.5 Hz), 7.53 (t, 1Н, J=7.8 Hz), 6.60 (d, 1Н, J=7.5 Hz), 6.19 (d, 1Н, J=8.4 Hz), 4.28-4.21 (m, 3Н), 3.53-3.38 (m, 5Н), 2.95 (t, 2Н, J=12.3 Hz), 2.31-2.28 (m, 2Н), 2.07-1.68 (m, 6Н), 1.06 (d, 3Н, J=6.0 Hz). LC/MS: 486 [М+Н]⁺, t_R=0.85 мин. ВЭЖХ: 100% при 214 нм, 99.89% при 254 нм, t_R=4.58 мин.

Пример 94: Синтез

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(3-(2-(пиперазин-1-ил)этокси)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорид

Стадия 1

Трет-бутил 4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-карбоксилат

Методика:

К раствору 2-(пиперазин-1-ил)этанола (1.3 г, 0.01 моль) и (Вос)₂O (2.4 г, 0.011 моль) в MeOH (15 мл) добавили Et₃N (1.52 г, 0.015 моль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Растворитель удалили под вакуумом. Остаток разбавили водой и экстрагировали EtOAc (3×20 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором затем высушили над MgSO₄. После фильтрации и концентрирования продукт (2 г, 87%) получили в виде масла. ¹Н HMR (300 MHz, CDCl₃): δ 3.74 (t, 2Н, J=5.3 Hz), 3.56 (t, 4 ч, J=5.0 Hz), 2.72 (t, 2Н, J=5.1 Hz), 2.66 (t, 4 ч, J=5.0 Hz), 1.44 (s, 9Н). ЖХМС: Для необходимой массы не наблюдалось молекулярных ионов.

Стадия 2

трет-бутил 4-(2-(метилсульфонилокси)этил)пиперазин-1-карбоксилат

Методика:

К раствору трет-бутил 4-(2-гидроксиэтил)пиперазин-1-карбоксилата (1.7 г, 7.4 ммоль) и Et₃N (1.12 г, 11.1 ммоль) в дихлорметане (20 мл) добавили метансульфонилхлорид (1 г, 8.87 ммоль) при 0°C. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Смесь промыли солевым раствором. Органический слой сконцентрировали под вакуумом с получением неочищенного трет-бутил 4-(2-(метилсульфонилокси)этил)пиперазин-1-карбоксилата (2.1 г, 94%). Его использовали на следующей стадии без очистки. ¹Н HMR (300 MHz, CDCl₃): δ 4.38 (t, 2Н, J=5.3 Hz), 3.49-3.44 (m, 4 h), 3.09 (s, 3Н), 2.79 (t, 2Н, J=5.1 Hz), 2.58 (t, 4 ч, J=5.0 Hz), 1.49 (s, 9Н). ЖХМС: Для необходимой массы не наблюдалось молекулярных ионов.

Стадия 3

трет-бутил-4-(2-(3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)фенокси)этил)пиперазин-1-карбоксилат

Методика:

К смеси 3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)фенола (50 мг, 0.129 ммоль) и K₂CO₃ (36 мг, 0.258 ммоль) в ДМФ (5 мл) добавили трет-бутил 4-(2-(метилсульфонилокси)этил)пиперазин-1-карбоксилат (48 мг, 0.155 ммоль). Смесь нагревали при 50°C в течение 16 ч. После охлаждения, смесь влили в воду и экстрагировали EtOAc (3×10 мл). Объединенные органические слои промыли солевым раствором и высушили над MgSO₄. После фильтрации и концентрирования, остаток промыли петролейным эфиром с получением трет-бутил-4-(2-(3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)фенокси)этил)пиперазин-1-карбоксилата (25 мг, 33%) в виде неочищенного масла. ЖХ-МС: 599.4 [М+Н]⁺, t_R=1.53 мин.

Стадия 4

N-(6-(2-Метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(3-(2-(пиперазин-1-ил)этокси)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Методика:

Трет-бутил-4-(2-(3-(8-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)фенокси)этил)пиперазин-1-карбоксилат (25 мг, 0.042 ммоль) растворили в дихлорметане (5 мл), затем его сделали насыщенноым посредством барботирования газообразного HCl. Раствор перемешивали при комнатной температуре в течение 2 ч. Растворитель сконцентрировали под вакуумом. Остаток очистили посредством препаративной ВЭЖХ (Gemini 5u С18 150×21.2 мм; вводимый объем: 3 мл/инъекция, скорость потока: 20 мл/мин; длина волны: 214 нм и 254 нм; условия градиента: 10% ацетонитрил/90% вода (0.1% ТФУ, об./об.) первоначально, переходя до 60% ацетонитрил/40% вода (0.1% ТФУ, об./об.) линейным образом в течение 9 мин) с получением N-(6-(2-метилпирролидин-1-ил)пиридин-2-ил)-6-(3-(2-(пиперазин-1-ил)этокси)фенил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина гидрохлорида (15 мг, 71%) в виде желтого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО + D₂O): δ 9.12 (s, 1Н), 8.49 (s, 1Н), 8.21 (s, 1Н), 7.58-7.52 (m, 4 h), 7.27-7.26 (m, 1Н), 6.66 (d, 1Н, J=7.8 Hz), 6.19 (d, 1H, J=8.4 Hz), 4.51 (brs, 2H), 4.25 (brs, 1H), 3.69-3.37 (m, 12H), 2.08-1.99 (m, 3H), 1.72 (brs, 1H), 1.12 (d, 3H, J=6.3 Hz). LC/MS: 499 [M+H]⁺, t_R=1.08 мин. ВЭЖХ: 99.25% при 214 нм, 99.12% при 254 нм, t_R=4.99 мин.

Пример 95: Синтез

3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты

Стадия 1

6-хлор-N-(5,6-диметоксипиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин

Смесь 8-бромо-6-хлороимидазо[1,2-b]пиридазина (2 г, 8.6 ммоль) и 5,6-диметоксипиридин-2-амина (1.39 г, 9.03 ммоль) в ДМФ (72 мл) охладили до 0°C. К этой смеси добавили гидрид натрия (1.1 г, 27.5 ммоль, 60% дисперсия в минеральном масле). Реакционную смесь перемешивали в течение 10 мин, затем нагрели до комнатной температуры. Через 15 ч реакцию погасили насыщенным раствором бикарбоната натрия, и затем разбавили водой и EtOAc. Нерастворимый осадок отфильтровали. Фильтрат разделили и водную фазу промыли EtOAc. Объединенные органические экстракты сконцентрировали под вакуумом и полученный остаток кристаллизовали из метанола с получением 6-хлор-N-(5,6-диметоксипиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амина (2.4 г, 7.85 ммоль, 91.2%) в виде светло-коричневых иголок. ¹Н HMR (300 MHz, CHLOROFORM-в) δ ppm 8.26 (br.s., 1H) 7.95 (s, 1H) 7.81 (s, 1H) 7.55 (s, 1H) 7.15 (d, J=7.93 Hz, 1H) 6.58 (d, J=8.31 Hz, 1H) 4.12 (s, 3H) 3.89 (s, 3H); LC/MS: 305.9 [MH]⁺.

Стадия 2

Этил 3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоат

6-хлор-N-(5,6-диметоксипиридин-2-ил)имидазо[1,2-b]пиридазин-8-амин (611 мг, 2 ммоль), этил 3-(4,4,5,5-тетраметил-1,3,2-диоксаборолан-2-ил)бензоат (828 мг, 3.00 ммоль), фосфат калия (1.06 г, 5.00 ммоль) и X-phos (381 мг, 800 мкмоль) объединили диоксаном (29.4 мл) и водой (2.94 мл) с получением светло-желтой суспензии. Из смеси откачали воздух и заполнили аргоном три раза, затем добавили Pd₂(dba)₃ (183 мг, 200 мкмоль) и смесь нагревали до 125°C в микроволновой печи в течение 60 мин. Смесь отфильтровали и фильтрат сконцентрировали. Остаток очистили посредством хроматографии (силикагель, 160 г, от 20% до 50% EtOAc в гексанах, градиент в течение 20 мин) с получением этил 3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата (284 мг, 677 мкмоль, 34%) в виде серо-белого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ХЛОРОФОРМ-d) δ ppm 8.55-8.68 (m, 2Н) 8.20 (dd, J=13.79, 7.74 Hz, 2Н) 7.96 (d, J=1.51 Hz, 1Н) 7.52-7.71 (m, 2Н) 7.19 (d, J=8.31 Hz, 1Н) 6.73 (d, J=8.31 Hz, 1Н) 4.45 (q, J=7.18 Hz, 2H) 4.20 (s, 3Н) 3.82-3.97 (m, 3Н) 1.44 (t, J=7.18 Hz, 3Н); LC/MS: 420.2 [МН]⁺.

Стадия 3

3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойная кислота

Этил 3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоат (150 мг, 358 мкмоль) растворили в диоксане (18 мл). К нему добавили раствор LiOH (85.6 мг, 3.58 ммоль) в воде (9 мл). Смесь перемешивали в течение 4 ч, подкислили 1н HCl, и сконцентрировали под вакуумом с получением неочищенной кислоты, которую рекристаллизовали из изопропилового спирта и метанола с получением 3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойной кислоты (123 мг, 314 мкмоль, 88%) в виде светло-коричневого порошка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО-d₆) δ ppm 9.97 (s, 1Н) 8.60 (s, 1Н) 8.52 (s, 1Н) 8.17-8.30 (m, 2Н) 8.05 (d, J=7.55 Hz, 1Н) 7.60-7.72 (m, 2Н) 7.41 (d, J=8.31 Hz, 1Н) 7.12 (d, J=8.31 Hz, 1Н) 4.05 (s, 3Н) 3.76 (s, 3Н); LC/MS: 391.8 [МН]⁺.

Пример 96: Синтез

3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-N-(4-(метилкарбамоил)фенил)бензамида

3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензойную кислоту (58 мг, 148 мкмоль), HOBt (34.0 мг, 222 мкмоль) и EDCI (42.6 мг, 222 мкмоль) объединили с ДМФ (10 мл) с получением светло-желтой суспензии. Через 1 ч получили чистый желтый раствор. Добавили DIPEA (47.9 мг, 64.7 мкл, 370 мкмоль) и 4-амино-N-метилбензамид (31.2 мг, 207 мкмоль). Через 15 ч смесь сконцентрировали под вакуумом, затем разбавили водой (10 мл) и отфильтровали. Собранный осадок промыли водой (3×3 мл) и высушили под вакуумом. Очистка посредством хроматографии (силикагель, 50 г, Supelco VersaFlash, 0-5% метанол в дихлорметане, градиент в течение 15 мин) дала остаток, который рекристаллизовали из метанола с получением 3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-N-(4-(метилкарбамоил)фенил)бензамида (22 мг, 42.0 мкмоль, 28%) в виде серо-белого осадка. ¹Н HMR (300 MHz, ДМСО-d₆) δ ppm 10.60 (s, 1Н) 9.98 (s, 1Н) 8.62 (s, 1Н) 8.53 (s, 1Н) 8.36 (d, J=4.91 Hz, 1Н) 8.16-8.27 (m, 2H) 8.10 (d, J=7.93 Hz, 1H) 7.87 (d, J=1.51 Hz, 4H) 7.61-7.76 (m, 2H) 7.42 (d, J=8.31 Hz, 1H) 7.13 (d, J=8.31 Hz, 1H) 4.03 (s, 3H) 3.77 (s, 3H) 2.79 (d, J=4.53 Hz, 3H); LC/MS: 524.1 [MH]⁺.

Биологические Примеры

Данные SYK анализа

Определение значений IC₅₀ ингибирования тирозинкиназы селезенки (SYK):

Анализ SYK киназы представляет собой стандартный киназный анализ, адаптированный для использования в 96 луночных планшетах. Этот анализ проводился в 96-луночных планшетах для определения значений IC₅₀ с 8 образцами, готорые представляют собой десятичные полулогарифмические разведения в 40 мкл реакционном объеме. В анализе измеряется включение радиоактивно меченного ³³P γАТФ в биотинилированный на N-конце пептидный субстрат, полученный из природной фосфоакцепторной консенсусной последовательности (Biotin-11aa DY*E). Фосфорилированный продукт определяли сразу после завершения реакции посредством ЭДТА и добавления покрытых стрептавидином шариков. Результаты представлены в Таблице II выше.

Планшеты для анализа: 96-луночные планшенты MultiScreen с 0.65 мкм фильтром (Millipore Cat. No.: MADVNOB10).

Покрытые стрептавидином шарики: Streptavidin Sepharose TM, суспензия 5.0 мл, в 50 мМ ЭДТА/PBS разведенная (1:100), (Amersham, Cat. No.: 17-5113-01).

Соединения: 10 мМ в 100% диметилсульфоксиде (ДМСО), конечная конц.: соединения 0.003-100 мкМ в 10% ДМСО.

Фермент: SYK RPA очищенная, усеченная конструкция тирозинкиназы селезенки aa 360-635, стоковый раствор 1 мг/мл, MW: 31.2 кДа, конечная конц.: 0.0005 мкМ.

Пептид 1: биотинилированный пептид получили из природной фосфор-акцепторной консенсусной последовательности (Биотин-EPEGDYEEVLE), специальный заказ для QCB, стоковый раствор 20 мМ, конечная конц.: 5.0 мкМ.

АТФ: Аденозин-5'-трифосфат 20 мМ, (ROCHE Cat. No.: 93202720), конечная концентрация: 20 мкМ

Буфер: HEPES: 2-Гидроксиэтил пиперазин-2-этансульфоновая кислота (Sigma, Cat. No.: H-3375) конечная концентрация: 50 мМ HEPES pH7.5

БСА: Бычий сывороточный альбумин, фракция V, свободный от жирных кислот (Roche Diagnostics GmbH, Cat. No. 9100221), разведенный до конечной концентрации 0.1%

ЭДТА: ЭДТА стоковый раствор 500 мМ, (GIBCO, Cat. No.: 15575-038) конечная концентрация: 0.1 мМ

ДТТ: 1,4-дитиотрейтол (Roche Diagnostics GmbH, Cat. No.: 197777), конечная конц.: 1 мМ

MgCl₂×6H₂O: MERCK, Cat. No.: 105833.1000, конечная концентрация: 10 мМ

Буфер для разведения (ADB): 50 мМ HEPES, 0.1 мМ EGTA, 0.1 мМ ванадат Na, 0.1 мМ β-глицерофосфат, 10 мМ MgCl₂, 1 мМ ДТТ, 0,1% БСА, pH 7.5

Буфер для промывки шариков: 10 г/л PBS (фосфатно-солевой буферный раствор) с 2М NaCl + 1% фосфорной кислоты.

Экспериментальный способ:

В объеме 40 мкл, 26 мкл разведенного в ADB, очищенного рекомбинантного человеческого SYK360-635 [0.5 нм] смешали с 4 мкл 10Хконцентрациями тестируемых соединений, [обычно 100 мкМ - 0.003 мкМ] в [10%] ДМСО и смесь инкубировали в течение 10 мин при комнатной температуре.

Киназную реакцию инициировали посредством добавления 10 мкл 4× сбутратной смеси, содержащей DYE пептидный субстрат [0 или 5 мкМ], АТФ [20 мкМ] и ³³PγАТФ [2 мКю/реакция]. После инкубации при 30°C в течение 15 мин, реакцию останавливали переносом 25 мкл реакционного образца в 96 луночные планшеты с мембранами 0.65 мкм Millipore MADVNOB, содержащие 200 мкл 5 мМ ЭДТА и 20% покрытых стрептавидином шариков в PBS.

Несвязавшиеся радионуклеотиды промыли под вакуумом 3×250 мкл 2М NaCl; 2x250 мкл 2М NaCl + 1% фосфорной кислотой; 1×250 мкл H₂O. После последней промывки мембраны/планшеты поместили на адептерный планшет, высушили нагреванием в течение 15 мин при 60°C, и 50 мкл сцинтиляционной смеси добавили в каждую лунку и спустя 4 ч радиактивность была количесвенно подсчитана на сцинтиляционном счетчике.

Процент ингибирования подсчитывали на основе неингибированного уровня фермента:

% ингибирования = 100/(1+(IC₅₀/конц. ингибитора)ⁿ)

Значения IC₅₀ расчитывали с помощью нелинейной апроксимации кривой, используя программное обеспечение XLfit (ID Business Solution Ltd., Guilford, Surrey, UK).

Изложенное выше изобретение было описано в некоторых деталях с целью иллюстрирования и в качестве примера для наглядности и понимания. Для специалиста в данной области очевидно, что в рамках формулы изобретения могут быть осуществлены изменения и модификации. Поэтому следует понимать, что приведенное выше описание предназначено для иллюстрации, а не ограничения. Объем изобретения, следовательно, не должен быть ограничен приведенным выше описанием, но должен определяться с учетом формулы изобретения, наряду с полным объемом эквивалентов, к которым применима указанная формула изобретения.

Все патенты, патентные заявки и публикации, цитируемые в данной заявке, включены в качестве ссылки во всей своей полноте для всех целей в той же степени, как если бы каждый отдельный патент, заявка на патент или публикация были отдельно описаны.

1. Соединение формулы I

где А представляет собой пиридил, замещенный одним или двумя А';

каждый А' независимо представляет собой С1-6 алкил, С1-6 алкокси, С1-6 галоалкил, пирролидинил, пиперидинил, возможно замещенный одним или двумя С1-6 алкилами;

n представляет собой 0 или 1;

В представляет собой фенил;

каждый R независимо представляет собой -C(=O)R¹, -C(=O)OR¹ или -C(=O)NHR¹;

R¹ представляет собой Н или R^1';

R^1' представляет собой С1-6 алкил, фенил, индолил, индазолил, пиридинил С1-6 алкил или морфолинил, возможно замещенный одним или двумя ;

каждый представляет собой гидрокси, С1-6 алкил, С1-6 алкокси, карбокси или оксо;

или его фармацевтически приемлемая соль.

2. Соединение по п.1, где А' представляет собой пирролидинил, возможно замещенный одним или двумя С1-6 алкилами.

3. Соединение по п.1, где А' представляет собой метилпирролидинил или диметилпирролидинил.

4. Соединение по п.1, где А' представляет собой С1-6 алкокси.

5. Соединение по п.1, где R представляет собой C(=O)NHR¹.

6. Соединение по п.1, где R представляет собой -С(=O)ОН.

7. Соединение по п.1, где R¹ представляет собой фенил, индолил или индазолил, возможно замещенный одним или двумя .

8. Соединение, выбранное из группы, состоящей из:

3-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты метилового эфира;

3-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты;

4-(3-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензоиламино)-бензойной кислоты;

натрия 3-(8-(6-(2-метил-пирролидин-1-ил)пиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)бензоата;

3-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензамида;

4-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты метилового эфира;

4-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты;

4-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-N-(2-пиридин-4-ил-этил)-бензамида;

4-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензамида;

3-{8-[6-(2-гидроксиметил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты;

3-[8-(6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-бензойной кислоты;

2-метил-3-{8-[6-((S)-2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты;

4-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-бензойной кислоты;

4-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-N-(2-пиридин-4-ил-этил)-бензамида;

4-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-N-[2-(2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-4-ил)-этил]-бензамида;

4-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-N-[2-(1-метил-2-оксо-1,2-дигидро-пиридин-4-ил)-этил]-бензамида;

3-{8-[6-(2-метоксиметил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты;

3-[8-(3,5-диметил-3,4,5,6-тетрагидро-2Н-[1,2']бипиридинил-6'-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-бензойной кислоты;

N-(2-гидрокси-этил)-3-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензамида;

N-(2-гидрокси-1-метил-этил)-3-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензамида;

(3-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-фенил)-морфолин-4-ил-метанона;

N-(2-Диметиламино-этил)-3-{8-[6-(2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензамида;

3-{8-[6-((S)-2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты;

4-{8-[6-((S)-2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензамида;

3-{8-[6-((S)-2-метил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензамида;

4-{3-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-бензоиламино}-бензойной кислоты;

3-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-N-(1H-индазол-5-ил)-бензамида;

3-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-N-(1-оксо-2,3-дигидро-1Н-изоиндол-5-ил)-бензамида;

4-{3-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-6]пиридазин-6-ил]-бензоиламино}-2-метокси-бензойной кислоты;

3-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-6]пиридазин-6-ил]-N-(2-оксо-2,3-дигидро-1Н-индол-5-ил)-бензамида;

3-{8-[6-(3,3-диметил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты;

3-{8-[6-(2,5-диметил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты;

3-[8-(4,4-диметил-3,4,5,6-тетрагидро-2H-[1,2']бипиридинил-6'-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-бензойной кислоты;

3-{8-[6-(3-трет-бутил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты метилового эфира;

3-{8-[6-(3-трет-бутил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензойной кислоты;

3-{8-[6-(3-трет-бутил-пирролидин-1-ил)-пиридин-2-иламино]-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил}-бензамида;

3-[8-(5,6-диметокси-пиридин-2-иламино)-имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил]-бензойной кислоты и

3-(8-(5,6-диметоксипиридин-2-иламино)имидазо[1,2-b]пиридазин-6-ил)-N-(4-(метилкарбамоил)фенил)бензамида.