Способ получения коллагенно-пептидного комплекса из рогов

Авторы патента:

A61K35/32 - кости; сухожилия; зубы; хрящи (костный мозг A61K 35/28)

Владельцы патента RU 2671410:

Закрытое акционерное общество "ФЕРМЕНТ" (RU)

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения коллагенно-пептидного комплекса из рогов. Способ получения коллагенно-пептидного комплекса из рогов, включающий отделение с рогов кожного и волосяного покрова и измельчение полученного сырья, экстракцию сырья этиловым спиртом, подкисленным уксусной кислотой, при нагревании, после первой экстракции производят повторную экстракцию этиловым спиртом, подкисленным уксусной кислотой, при нагревании, после каждой экстракции полученную жидкость сливают и охлаждают, полученный после экстракции жмых промывают от остатков спирта и подвергают ферментации в водном растворе с папаином, далее производят инактивирование ферментов в смеси, полученную смесь охлаждают, отделяют от смеси жидкий гидролизат путем фильтрования и сепарирования, полученные экстракт и гидролизат смешивают, выпаривают, подвергают лиофильной сушке, полученный концентрат размалывают в мелкодисперсный порошок при определенных условиях. Вышеописанный способ позволяет проводить комплексное извлечение биологически активных веществ с высоким содержанием органических веществ, особенно коллагена. 3 з.п. ф-лы.

Изобретение относится к способам получения лекарственных препаратов из рогов.

Известны способы, в которых экстракцию биологически активных веществ из рогов производят с использованием органического растворителя - этанола.

Из а.с. SU 1822785, публикация 23.06.1993, МПК А61К 35/32, известен способ получения экстракта из пантов. Способ включает следующие операции: измельчают панты с меховым чехлом до порошкообразного состояния, проводят трехкратную экстракцию 50% этиловым спиртом при комнатной температуре, объединяют экстракты с подкислением и проводят вымораживание при 20÷30°C в течение 12-24 часов. Такая технология не позволяет в достаточной степени извлекать из пантов биологически активные вещества.

Из патента US 7547761, публикация 16.06.2009, МПК А61К 38/17, известен способ экстракции пептидов из рогов. В данном способе предварительно гомогенизируют сырье. Смешивают его с органическим растворителем, при этом в качестве органического растворителя используют этанол, имеющий концентрацию между 50%-80% этанола, и выдерживают в течение 1-3 часов, при интервале температур 10-30°C. Далее удаляют органический растворитель из гомогенизированной ткани и получают водный раствор, содержащий низкомолекулярную фракцию пептида. Данный способ не позволяет эффективно извлекать широкий спектр биологически активных веществ из рогов.

Известны также способы, в которых экстракцию биологически активных веществ из рогов производят в водном растворе с использованием ферментации пепсином и/или папаином.

В патенте RU 2461384, публикация 20.09.2012, МПК А61К 35/32 описан способ получения биологически активного концентрата из консервированных рогов. В данном способе сырье измельчают до частиц размером 100 мкм, а ферментативный гидролиз осуществляют в две стадии. На первой стадии в водном растворе присутствии фермента пепсина, а на второй стадии водной экстракции подвергается жмых. Сушку всех фильтратов проводят в вакууме при температуре не выше 50°C.

В заявке RU 2014154426, публикация 20.07.2016, МПК А61К 35/32 раскрыт способ получения биологически активного концентрата из сырых пантов. Сырые панты измельчают и проводят последовательную, в три стадии, водную экстракцию при разведении под воздействием ультразвуковых колебаний частотой от 20 до 50 кГц с последующей фильтрацией и вакуумной сушкой гидролизатов. На первой стадии водную экстракцию проводят при температуре не выше 39°C в течение 1-3 часов, на второй стадии экстракцию осуществляют в процессе проведения ферментативного гидролиза жмыха в присутствии фермента пепсина, на третьей стадии проводят экстракцию жмыха в присутствии фермента папаина при длительности процесса на каждой стадии 3-5 часов и концентрации ферментов в субстрате 0,8-1,2%

Наиболее близким аналогом является изобретение по патенту RU 2310344, публикация 20.04.2010, МПК А61К 35/32, в котором раскрыт способ получения биологически активного продукта из рогов. Отбирают рога вместе с меховым чехлом величиной 10-12 см от концов рогов, очищают их от грязи и промывают 30%-ным спиртовым раствором, далее высушивают их при температуре 10-12°C в течение 35 ч до влажности порядка 30%. Полученное сырье измельчают до фракции 3,7-4,69 мкм. Затем осуществляют экстрагирование 50%-ным этиловым спиртом при температуре 17-25°C в течение 15-27 ч с периодическим перемешиванием раствора. После отстаивания извлекают осадок и вновь его подвергают экстрагированию в новом растворе 50%-ного этилового спирта при тех же условиях, повторяя этот процесс по крайней мере три раза. Смешивают полученные полуфабрикаты экстракта, добавляют этанол и уксусную кислоту до получения 50% крепости и кислотности рН 4,3-5,1, выдерживают при Т=-49°C в течение 8-9 ч. Фильтруют при температуре 0-5°C до получения готового продукта в виде экстракта биологически активной добавки. Данный способ не позволяет наиболее полно извлекать биологически активные вещества из рогов.

Техническим результатом, достигаемым в заявляемом изобретении, является комплексное извлечение биологически активных веществ с высоким содержанием органических веществ, особенно коллагена.

Указанный результат достигается тем, что первоначально производят отделение с рогов кожного и волосяного покрова и измельчают полученное сырье до размера 1-4 мм.

Проводят экстракцию сырья 50% этиловым спиртом, подкисленным уксусной кислотой, при нагреве до температуры 52-62°C в течение 5-6 часов. После первой экстракции производят повторную экстракцию 25% этиловым спиртом, подкисленным уксусной кислотой, при нагреве до температуры 78-80°C в течение 5-6 часов. После каждой экстракции полученную жидкость сливают и охлаждают.

Полученный после экстракции жмых промывают от остатков спирта и подвергают ферментации в водном растворе с папаином (2% к весу измельченного сырья) при температуре 36-37°C в течении 7-8 часов. Далее производят инактивирование ферментов в смеси при температуре 80-82°C в течение 1 часа и охлаждают смесь до температуры 37-39°C; отделяют от смеси жидкий гидролизат путем фильтрования и сепарирования. Полученные экстракт и гидролизат смешивают, выпаривают, подвергают лиофильной сушке и затем полученный концентрат размалывают в мелкодисперсный порошок.

Данное изобретение направлено на максимально полное извлечение биологически активных веществ с высоким содержанием органических веществ, особенно коллагена. Это достигается использованием как операциями экстракции измельченного сырья рогов этиловым спиртом, так и ферментации жмыха сырья с папаином. При этом режимы этих операций подобраны для работы в комплексе и таким образом, чтобы обеспечить максимальный выход органических веществ (до 35% от содержащихся в первоначальном веществе рогов), что почти в 10 раз превышает результаты экстракции только этиловым спиртом. Коллаген выделяется слабо спиртовыми растворами без коагуляции белка. Следует заметить, что такой результат достигается точным подбором режимов, как экстракции, так и ферментации. Важны для достижения результата и режимы операций инактивирования, охлаждения и сушки.

В частном случае в процессе измельчения сначала дробят полученное сырье на куски размером 3-5 см и после этого подвергают сырье измельчению в мельнице.

Кроме того, измельченное сырье взвешивают с точностью до 1-2 грамма.

Помимо этого, после повторной экстракции дополнительно проводят третью экстракцию 25% этиловым спиртом, подкисленным уксусной кислотой, при нагреве до температуры 78-80°C в течение 5-6 часов. Дополнительная экстракция позволяет более полно извлечь биологически активные вещества на данном этапе.

В частности, жидкость, полученную после каждой экстракции, охлаждают до температуры 20-30°C.

Кроме того, лиофильную сушку производят путем замораживания до температуры не менее - 35°C и обработке в аппарате для лиофильной сушки.

Помимо этого, полученный концентрат размалывают в мелкодисперсный порошок до размера частиц 250 мкм.

Способ получения коллагенно-пептидного комплекса из рогов выполняется следующим образом.

Первоначально, как правило, вручную, производят отделение с рогов от остатков кожного и волосяного покрова. Полученное сырье первоначально дробят на куски размером 3-5 см и после этого подвергают куски измельчению в мельнице до размера 1-4 мм. Измельченное сырье взвешивают с точностью до 1-2 грамма. Такая точность взвешивания сырья, подготовленного к экстракции, гарантирует, при точном выполнении режимов обработки, имеющих достаточно узкие границы, наиболее полное извлечение коллагенно-пептидного комплекса, особенно коллагена.

Далее производят первую экстракцию сырья 50% этиловым спиртом, подкисленным уксусной кислотой, при нагреве до температуры 52-62°C в течение 5-6 часов в экстракторе. Процесс может сопровождаться перемешиванием сырья. После первой экстракции производят повторную экстракцию 25% этиловым спиртом, подкисленным уксусной кислотой, при нагреве до температуры 78-80°C в течение 5-6 часов. Возможна также третья экстракция 25% этиловым спиртом, подкисленным уксусной кислотой, при тех же температурном и временном режиме, что и вторая экстракция. После каждой экстракции полученную жидкость сливают и охлаждают до температуры 20-30°C.

Полученный после экстракции жмых сначала промывают от остатков спирта. Затем подвергают ферментации в водном растворе с папаином (2% к весу измельченного сырья) при температуре 36-37°C в течении 7-8 часов. Для проведения ферментации экстрагент готовят в отдельной емкости. Экстракция во водном растворе с папаином может производиться в том же экстракторе, где проводилась экстракция этиловым спиртом.

После ферментации жмыха производят инактивирование ферментов в смеси при температуре 80-82°C в течение 1 часа и далее охлаждают смесь до температуры 37-39°C. После чего отделяют от смеси жидкий гидролизат путем фильтрования и сепарирования.

Полученные экстракт и гидролизат смешивают, выпаривают и подвергают лиофильной сушке. Лиофильную сушку производят путем замораживания до температуры не менее - 35°C и обработке в аппарате для лиофильной сушки. Затем полученный концентрат размалывают в мелкодисперсный порошок до размера частиц 250 мкм.

Данный способ позволяет получать концентрат с высоким содержанием органических веществ и особенно коллагена. Предложенный способ может быть осуществлен на имеющемся оборудовании и показал высокую эффективность в получении концентрата биологически активных веществ с высоким содержанием коллагена из рогов.

1. Способ получения коллагенно-пептидного комплекса из рогов, характеризующийся тем что:

- производят отделение с рогов кожного и волосяного покрова и измельчают полученное сырье до размера 1-4 мм;

- проводят экстракцию сырья 50% этиловым спиртом, подкисленным уксусной кислотой, при нагреве до температуры 52-62°С в течение 5-6 часов;

- после первой экстракции производят повторную экстракцию 25% этиловым спиртом, подкисленным уксусной кислотой, при нагреве до температуры 78-80°С в течение 5-6 часов;

- после каждой экстракции полученную жидкость сливают и охлаждают до температуры 20-30°С;

- полученный после экстракции жмых промывают от остатков спирта и подвергают ферментации в водном растворе с папаином, 2% к весу измельченного сырья при температуре 36-37°С в течение 7-8 часов;

- производят инактивирование ферментов в смеси при температуре 80-82°С в течение 1 часа и охлаждают смесь до температуры 37-39°С;

- отделяют от смеси жидкий гидролизат путем фильтрования и сепарирования;

- полученные экстракт и гидролизат смешивают, выпаривают, подвергают лиофильной сушке путем замораживания до температуры не менее - 35°С и обработке в аппарате для лиофильной сушки и затем полученный концентрат размалывают в мелкодисперсный порошок до размера частиц 250 мкм.

2. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что в процессе измельчения сначала дробят полученное сырье на куски размером 3-5 см и после этого подвергают сырье измельчению в мельнице.

3. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что измельченное сырье взвешивают с точностью 1-2 грамма.

4. Способ по п. 1, характеризующийся тем, что после повторной экстракции дополнительно проводят третью экстракцию 25% этиловым спиртом, подкисленным уксусной кислотой, при нагреве до температуры 78-80°С в течение 5-6 часов.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, в частности к способу получения средства, обладающего диуретической активностью. Способ заключается в том, что листья толокнянки обыкновенной экстрагируют 70% этиловым спиртом, осуществляя вначале две экстракции при комнатной температуре в течение 24 ч, а затем при нагревании на кипящей водяной бане в течение 30 мин; объединенное извлечение упаривают под вакуумом, смешивают с силикагелем в соотношении исходной массы сырья и сорбента 3:1 и высушивают на воздухе; высушенный порошок наносят на слой силикагеля, сформированный в виде взвеси в хлороформе, и подвергают хроматографическому разделению с использованием смесей хлороформа и этилового спирта в градиентном режиме с последующим выделением из фракций, полученных при элюировании смесью растворителей хлороформ-спирт этиловый -75:25 и 70:30, 1,3,6-тригаллоилглюкозы - вещества с диуретической активностью.

Средство, обладающее антимикотической активностью на основе цветков трехреберника продырявленного // 2669931

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к средству, обладающему антимикотическим действием. Средство, обладающее антимикотическим действием, содержащее компоненты, извлеченные экстракцией из воздушно-высушенных цветков трехреберника продырявленного в соотношении сырье:экстрагент - 1:10, с использованием в качестве экстрагента водно-спиртового раствора с концентрацией этанола 70-95% путем экстрагирования с обратным холодильником.

Способ получения средства, обладающего антигипоксической активностью // 2669365

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства, обладающего антигипоксической активностью. Способ получения средства, обладающего антигипоксической активностью, для этого измельченный растительный материал, состоящий из серпухи васильковой травы, девясила высокого корневищ с корнями, эхинацеи пурпурной травы, шиповника плодов, бадана толстолистного листьев черных, взятые в определенном соотношении, экстрагируют трехкратно при определенных условиях, далее объединенные водно-спиртовые извлечения фильтруют, упаривают, очищают сепарированием, доупаривают, затем высушивают в вакуум-сушильном аппарате.

Способ получения пропиленгликолевых экстрактов мумие // 2668517

Изобретение относится к способу переработки природного мумиесодержащего сырья, а именно к способу получения пропиленгликолевого экстракта мумие. Способ получения пропиленгликолевого экстракта мумие, включающий экстракцию очищенного мумиесодержащего сырья экстрагентом, представляющим собой пропиленгликоль или смесь пропиленгликоля с водой, при определенных условиях, с последующей фильтрацией экстракта.

Способ получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью // 2665968

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства, обладающего желчегонной, противовоспалительной и антиоксидантной активностью.

Способ получения вещества, обладающего антибактериальной и противогрибковой активностью // 2665167

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к способу получения вещества, обладающего антибактериальной и противогрибковой активностью.

Способ получения меланиновых веществ из лузги подсолнечника // 2665166

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения меланиновых веществ, получаемых из отходов маслоэкстракционного производства - лузги подсолнечника.

Способ выделения биологически активных проантоцианидинов // 2664709

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой способ выделения биологически активных проантоцианидинов, характеризующийся тем, что измельченные листья голубики (Vaccinium uliginosum) экстрагируют метанолом в течение 3-х часов при температуре 30-35°С, упаривают спиртовой раствор до 1/10 первоначального объема, разбавляют 4-кратным количеством воды и экстрагируют последовательно хлороформом, эфиром и этилацетатом, после чего полученный водный раствор упаривают и хроматографируют на колонке с силикагелем с размером частиц 0,040-0,063 мм, используя в качестве элюента смесь хлористого метилена с метанолом, взятых в соотношении 1:1, и выделяют биологически активную фракцию с Rf 0,29.

Способ производства сухих экстрактов из сырья растительного происхождения // 2664148

Изобретение относится к производству сухих экстрактов из растительного сырья, обладающих высокой пищевой ценностью и высокой биологической активностью, предназначенных для использования в пищевой, фармацевтической, косметической и других отраслях промышленности.

Способ производства сухих экстрактов из сырья растительного происхождения // 2664148

Гидролизат коллагена и его применение // 2671401

Изобретение относится к гидролизату коллагена. Гидролизат коллагена для изготовления в качестве биологически активной добавки, полученный ферментативным гидролизом костного желатина типа В, состоящий из пептидов, имеющих молекулярный вес от 1.500 до 13.500 Да, средний молекулярный вес которых находится в пределах от 4.500 до 6.000 Да.

Биорезорбируемый биологический матрикс для замещения дефектов костной ткани и способ его получения // 2665962

Группа изобретений относится к медицине, а именно к биотехнологии, и может быть использована для получения биорезорбируемого биологического матрикса для замещения дефектов костной ткани из ксеногенной или аллогенной костной ткани.

Способ лечения деструктивных форм периодонтита // 2665137

Изобретение относится к медицине, в частности к стоматологии, и может быть использовано для лечения хронического деструктивного периодонтита. Способ лечения деструктивных форм периодонтита заключается в том, что предварительно смешивают костнопластический материал «Оргамакс» с пастообразным материалом для пломбирования каналов зубов, в составе которых содержится гидроокись кальция, в соотношении 10:1.

Средство для коррекции десинхроноза, вызванного нарушением светового режима // 2660578

Изобретение относится к медицине и касается средства для коррекции десинхроноза, вызванного нарушением светового режима, содержащего композицию синергетически действующих компонентов: дельта-сон индуцирующий пептид с последовательностью Trp-Ala-Gly-Gly-Asp-Ala-Ser-Gly-Glu, высокоочищенный биологически активный комплекс, извлеченный из пантов северных оленей методом экстракции и гидролиза, дипептид карнозин и аминокислота глицин при массовом соотношении 1:(1-10000):(1-10000):(1-10000) соответственно.

Концентрированная фармацевтическая композиция и способ ее получения // 2657775

Группа изобретений относится к области химико-фармацевтической промышленности, а именно к концентрированной фармацевтической композиции и способу ее получения. Способ получения композиции заключается в том, что жидкую фракцию 2 антисептика стимулятора Дорогова наливают тонким слоем в поддон, изготовленный из неподверженного коррозии материала, помещают поддон на греющую поверхность, сушат в течение нескольких часов, после чего сливают в приемную емкость.

Способ переработки пантов оленей // 2651026

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения биологически активных продуктов из пантов. Способ получения биологически активных продуктов из пантов характеризуется тем, что в качестве сырья используют свежесрезанные панты и кожу или консервированные основу и кожу, при этом сырье подвергают переработке, сначала путем ферментативного гидролиза каждого вида сырья отдельно под воздействием ультразвуковых колебаний, сначала под действием фермента СГ-50 и далее фермента папаина, гидролизаты каждого сырья после ферментативного гидролиза фильтруют, а жмыхи направляют на дальнейшую переработку, где каждый жмых отдельно подвергают спиртовой экстракции, после чего проводят фильтрацию и экстракты от каждого вида сырья объединяют с экстрактами, полученными после ферментативного гидролиза, а жмыхи по отдельности подвергают высокотемпературной водной экстракции, а после фильтрации каждого экстракта их объединяют с экстрактами от предыдущих стадий переработки, причем жмыхи от переработки основы панта сушат в вакууме и измельчают, а жмых от переработки кожи утилизируют, при определенных условиях.

Порошкообразная фармацевтическая композиция и способ ее получения // 2649815

Группа изобретений относится к области химико-фармацевтической промышленности, а именно к порошкообразной фармацевтической композиции и способу ее получения. Способ получения порошкообразной фармацевтической композиции заключается в том, что жидкую фракцию 2 антисептика стимулятора Дорогова смешивают с карбонатом аммония в массовом соотношении 1:0,5–1:2,0 и с порошкообразным сорбентом в массовом соотношении 1:0,04–1:0,1, после чего сушат.

Способ имплантации искусственного зуба // 2649452

Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для имплантации искусственного зуба. Для этого осуществляют обработку альвеолы и вводят в неё искусственный зуб, выполненный из гидроксиапатита, на корень которого предварительно наносят слой питательной среды с цементобластами.

Гемостатическое, ранозаживляющее и остеопластическое средство // 2645072

Изобретение относится к области медицины, в частности к фармакологии, и раскрывает гемостатическое, ранозаживляющее и остеопластическое средство. Указанное средство характеризуется тем, что содержит не более трех волокнистых резорбируемых полимеров природного и/или синтетического происхождения, гетерофазные фосфаты кальция, представляющие собой соединения с молярным соотношением Са : PO4 от 1,0 до 2,0, а также лекарственные вещества в объеме не более 4% весовых единиц в суммарном исчислении, выбираемые из группы: антибиотики, антисептики, иммуномодуляторы, стимуляторы репаративных процессов, причем массовое соотношение волокнистых полимеров к гетерофазным фосфатам кальция составляет (1-10):(1-99).

Способ получения искусственного зачатка зуба in vitro и полученный им искусственный зачаток зуба // 2638783

Группа изобретений относится к области медицины, а именно стоматологии. Предлагаемый способ получения искусственного зачатка зуба in vitro включает этапы: a) получения выделенных мезенхимальных клеток пульпы зуба; b) культивирования мезенхимальных клеток пульпы зуба в монослое на поверхностях для адгезивных клеток; и c) культивирования мезенхимальных клеток пульпы зуба в неадгезивных условиях в культуральных сосудах с культуральной поверхностью, обладающей ультранизким прикреплением клеток, для формирования клеточного агрегата, представляющего собой искусственный зачаток зуба.

Состав для стимуляции иммунометаболических процессов и профилактики диарейного синдрома новорожденных телят // 2671635

Изобретение относится к ветеринарии и может быть использовано в животноводстве для стимуляции пищеварения, метаболизма, системы иммунитета, профилактики диарейного синдрома новорожденных телят. Состав для стимуляции иммунометаболических процессов и профилактики диарейного синдрома новорожденных телят включает в 100 мл раствора: 1,0 г янтарной кислоты; 4 мл АСД второй фракции; 50 мкг цианкобаламина; 30 мл глицерина; 2 г хлорида натрия; вода питьевая – остальное. Изобретение обеспечивает клинически выраженный эффект стимуляции процессов пищеварения, метаболизма, системы иммунитета, профилактику желудочно-кишечных заболеваний телят молочного периода выращивания. 4 табл., 3 пр.