Способ выявления предраковых изменений в молочной железе


G01N2800/50 - Исследование или анализ материалов путем определения их химических или физических свойств (разделение материалов вообще B01D,B01J,B03,B07; аппараты, полностью охватываемые каким-либо подклассом, см. в соответствующем подклассе, например B01L; измерение или испытание с помощью ферментов или микроорганизмов C12M,C12Q; исследование грунта основания на стройплощадке E02D 1/00;мониторинговые или диагностические устройства для оборудования для обработки выхлопных газов F01N 11/00; определение изменений влажности при компенсационных измерениях других переменных величин или для коррекции показаний приборов при изменении влажности, см. G01D или соответствующий подкласс, относящийся к измеряемой величине; испытание

Владельцы патента RU 2674164:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Новосибирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБОУ ВО НГМУ Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к области медицины и предназначено для выявления предраковых изменений в молочной железе. В супернатанте пробы клеток крови пациента, инкубированных с раково-эмбриональным антигеном (РЭА) и без РЭА, определяют концентрацию IL-1β. Вычисляют индекс влияния (ИВ) РЭА на продукцию IL-1β по формуле. При величине ИВ РЭА IL-1β, не превышающей 13, выявляют предраковые изменения в молочной железе (склерозирующий аденоз или пролифераты молочной железы). Изобретение обеспечивает высокочувствительный и специфичный способ выявления предраковых изменений в молочной железе. 1 ил., 6 пр.

 

Изобретение относится к медицине.

Известны способы выявления патологических изменений в молочной железе, к которым относятся:

1. Тонкоигольная биопсия, заключающаяся во взятии пункции из различных участков молочной железы и изучении клеточного состава пунктата. Результат цитологического исследования во многом зависит от того, каким образом и из каких участков молочной железы взят материал и как он обработан, в связи с чем тонкоигольная биопсия только в 30-54% случаев дает объективный результат, а в 46-70% случаев тонкоигольная биопсия оказывается не состоятельной (Jebsen P.W., Hagmar В.М., Nesland J.M. Metaplastic breast carcinoma. A diagnostic problem in fine needle aspiration biopsy // Acta Cytol. 1991. Vol. 35. P. 396-401). Кроме того, тонкоигольная биопсия вызывает микротравму, которая приводит к ускорению опухолевого роста, если есть опухоль (Збицкая М.А. Роль биопсии в прогрессии рака молочной железы / М.А. Збицкая // Здоровье человека как основа национальной безопасности: материалы Сибирского конгресса. - Красноярск, 2006. - С. 311-313).

2. Тканевая биопсия заключается в заборе образца ткани из молочной железы при подозрении на опухоль. Вырезается небольшой кусочек ткани для более детального исследования. После тщательного анализа врач-патоморфолог делает вывод о доброкачественности или злокачественности опухоли (Семиглазов В.Ф. Хирургическое лечение рака молочной железы, история и современность. Практическая онкология. 2002. Т.3. №.1. С. 21-28; Семиглазов В.Ф. Семиглазов В.В. Скрининг рака молочной железы. Практическая онкология. 2010. Т. 11. №2. С. 60-65). Этот способ является травматичным и технически сложным, а взятие кусочка ткани опухоли, особенно повторно, активирует опухолевый рост и может явиться причиной метастазирования (Збицкая М.А. Влияние биопсий опухоли на прогрессирование процесса у больных раком молочной железы / М.А. Збицкая, Уральский медицинский журнал - 2007. - №2. - С. 67-70).

3. При подозрении на опухолевую патологию молочной железы наиболее часто используют определение в крови или плазме ракового эмбрионального антигена (РЭА), который представляет собой гликопротеин с молекулярной массой 180 кДа. Повышенную концентрацию РЭА в сыворотке крови выявляют у 30-50% больных раком молочной железы (Кишкун А.А. Руководство по лабораторным методам диагностики. - М. ГЭОТАР-Медиа, 2009.-800 с.), т.е. этот показатель не является достаточно чувствительным.

Все перечисленные выше способы не позволяют выявить предраковые изменения в молочной железе, к которым относят склерозирующий аденоз, внутрипротоковый, внутридольковые пролифераты, радиальный рубец (Патологическая анатомия Национальное руководство/ гл. редактор М.А. Пальцев, Л.В. Кактурский, О.В. Зайратьянц. - М. ГЭОТАР Медиа, 2011- 1264 с).

Раскрытие изобретения

Предлагаемый способ выявления предраковых изменений в молочной железе характеризуется тем, что определяют концентрацию интерлейкина 1 beta (IL-1β) в супернатанте пробы клеток крови пациента, инкубированных с раково-эмбриональным антигеном (РЭА) и без РЭА, после чего вычисляют индекс влияния (ИВ) раково-эмбрионального антигена (ИВ РЭА) на продукцию IL-1β (ИВ РЭА IL-lβ) по формуле: ИВ РЭА IL-1β=А/Б, где А - уровень продукции цитокина под влиянием РЭА, Б - уровень спонтанной продукции цитокина, и при величине ИВ РЭА IL-1β, не превышающей 13, выявляют предраковые изменений в молочной железе (склерозирующий аденоз или внутрипротоковый, внутридольковый пролифераты).

Предлагаемое изобретение дает возможность выявлять предраковые изменения в молочной железе, основываясь на определении цитокинпродуцирующей функции иммунокомпетентных клеток крови при влиянии на них раково-эмбрионального антигена (РЭА). Способ позволяет своевременно выявить предраковые изменения и начать адекватное лечение.

Предлагаемый способ является высокочувствительным и специфичным. На обследованных группах пациентов предлагаемый способ показал 100%-ю чувствительность и 92% специфичность.

Перечень фигур иллюстративного материала

Фиг. 1. Показатель ROC-анализа при сравнении группы пациентов с предраковыми состояниями молочной железы и группы пациентов с фиброаденомой (ФАМ) молочной железы. Площадь под кривой равна 0,985, что соответствует отличному качеству модели.

Предлагаемый способ осуществляют следующим образом. Цельную кровь, взятую из вены пациента в количестве 1 мл, помещают в стерильный флакон с 4 мл среды (стерильная питательная среда DMEM), содержащей гепарин 2,5 МЕ/мл и гентамицин 100 мкг/мл. Аккуратно перемешивают содержимое флакона, затем из него в стерильных условиях забирают 0,980 мл разбавленной крови и помещают ее в стерильный флакон, содержащий 0,020 мл РЭА (Canceroembryonic Antigen Human Colon Adenocarcinoma Cell Line) производства Calbiochem, Германия; концентрация РЭА после добавления крови составляет 2 мкг/мл.

Содержимое флакона аккуратно перемешивают и помещают в термостат при 37°С на 24 часа. Параллельно в тех же условиях инкубируют клетки крови в той же питательной среде без РЭА (для определения спонтанной продукции цитокинов).

В течение первого часа инкубации содержимое флаконов аккуратно перемешивают 1 раз. После инкубации путем центрифугирования при 3000 об./мин в течение 10 минут осаждают клетки крови и отбирают супернатант из пробы клеток, инкубированных с РЭА (продукция под влиянием РЭА) и из пробы клеток, инкубированных без РЭА (спонтанная продукция). В супернатантах с помощью твердофазного иммуноферментного анализа определяют концентрацию IL-1β.

ИВ РЭА IL-1β высчитывают по формуле: ИВ РЭА=А/Б, где А - уровень продукции цитокина под влиянием РЭА, Б - уровень спонтанной продукции цитокина.

Определение ИВ РЭА IL-1β проводили у 23 пациентов, у 12 из которых была выявлена доброкачественная опухоль - ФАМ, у 11 - предраковые изменения (у четырех - склерозирующий аденоз и у семи -внутрипротоковый или внутридольковый пролиферат).

Статистический анализ полученных данных проводили по критерию Манна-Уитни. Определяли медиану (Me), процентили (5; 95) и достоверность различия р.

У 12 пациентов с ФАМ Me равнялась 31,81 (8,74; 126,49). У 11 женщин этой группы значение ИВ РЭА IL-1β было выше 13,00.

У 11 женщин со склерозирующим аденозом и внутрипротоковым или внутридольковым пролифератом, относящимся к предраковым изменениям, Me равнялась 2,44 (0,14; 10,28). У всех женщин этой группы значение ИВ РЭА IL-1β было ниже 13,00 условных единиц. Достоверность различий (р) ИВ РЭА IL-1β между группами женщин с ФАМ и с предраковыми изменениями (склерозирующим аденозом и внутрипротоковым или внутридольвым пролифератом) составила 0,0001, что отражает высокую степень различия величин ИВ РЭА IL-1β в этих группах.

Выявлено, что в 100% случаев значения ИВ РЭА IL-1β у пациентов с предраковыми состояниями не превышал 13.

У пациентов с ФАМ значения ИВ РЭА IL-1β в 91,67% случаев превышали 13 условных единиц.

Критерий ϕ согласно угловому методу Фишера равен 0,00001.

Наличие предраковых изменений и доброкачественной опухоли молочной железы контролировали путем тщательного патогистологического исследования биоптатов.

У пациентов с наличием предраковых изменений в молочной железе, установленным в результате патогистологического исследования биоптатов, предлагаемый способ позволяет их выявить в 100% случаев.

Клинические примеры

1. Больная П-а, 48 лет. Заключение патологоанатома: склерозирующий аденоз молочной железы. Величина ИВ РЭА IL-1β составила 0,90.

2. Больная Б-а, 47 лет. Заключение патологоанатома: склерозирующий аденоз молочной железы. Величина ИВ РЭА IL-1β составила 0,14.

3. Больная Ж-а, 46 лет. Заключение патологоанатома: внутрипротоковый пролиферат молочной железы. Величина ИВ РЭА IL-1β составила 5,70.

4. Больная К-о, 57 лет. Заключение патологоанатома: ФАМ молочной железы. Величина ИВ РЭА IL-1β составила 13,38.

5. Больная Г-н, 21 год. Заключение патологоанатома: ФАМ молочной железы. Величина ИВ РЭА IL-1β составила 84,50.

6. Больная С-а, 49 лет. Заключение патологоанатома: ФАМ молочной железы. Величина ИВ РЭА IL-1β составила 126,49.

Способ выявления предраковых изменений в молочной железе, характеризующийся тем, что определяют концентрацию интерлейкина 1 beta (IL-1β) в супернатанте пробы клеток крови пациента, инкубированных с раково-эмбриональным антигеном (РЭА) и без РЭА, после чего вычисляют индекс влияния (ИВ) раково-эмбрионального антигена (ИВ РЭА) на продукцию IL-1β (ИВ РЭА IL-1β) по формуле: ИВ РЭА IL-1β = А/Б, где А - уровень продукции цитокина под влиянием РЭА, Б - уровень спонтанной продукции цитокина, и при величине ИВ РЭА IL-1β, не превышающей 13, выявляют предраковые изменения в молочной железе (склерозирующий аденоз или пролифераты молочной железы).



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к детектируемой матрице, содержащей подложку со множеством поверхностей для связывания одного или более аналитов, при этом каждая поверхность независимо содержит: одно или более покрытий подложки на поверхности для прикрепления одной или более макромолекул к поверхности подложки; и одну или более макромолекул, прикрепленных к по меньшей мере части одного или более покрытий подложки, при этом каждая макромолекула содержит полимер из мономеров, где мономеры, содержащиеся в полимере из мономеров, выбраны из группы, состоящей из акриламида, 2-карбоксиэтилакрилата, акриловой кислоты, N-[трис(гидроксиметил)метил]акриламида, гидроксипропилакрилата и его изомеров, 4-гидроксибутилакрилата, N-гидроксиэтилакриламида, N,N,-диметилакриламида, N-(1,1-диметил-3-оксобутил)акриламида, N-изопропилакриламида, (мет)акрилатов, акрилата простого фенилового эфира этиленгликоля, N-трет-октилакриламида, 1-(акрилоилокси)-3-(метакрилоилокси)-2-пропанола, бис-акриламида, триметилолпропантриакрилата и их комбинаций, при этом одна или более макромолекул расположены в определенном порядке на покрытии подложки и содержат множество ненаправленных сайтов связывания для связывания множества аналитов; при этом одно или более покрытий подложки содержит по меньшей мере один силан или по меньшей мере один силоксан; при этом одна или более макромолекул прикреплены к покрытию подложки посредством полимеризации функциональной группы на силане или силоксане с образованием основной цепи полимера; где наличие или отсутствие одного или более аналитов, связанных с каждой из множества поверхностей, обнаруживается посредством множества способов обнаружения.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложены способ и набор для диагностики молекулярного фенотипа больных, страдающих заболеванием, сопровождающимся хроническими воспалениями, с отнесением их к подгруппам «Th2-высокая», «Th2-низкая», «Th1-высокая» или «Th1-низкая».

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложены способы выделения белкового высокомолекулярного комплекса активации каспазы-2 человека, формирующегося в раковых клетках в ответ на обработку ДНК-повреждающим химиотерапевтическим препаратом.

Группа изобретений относится к средствам диагностики хронических патологий головного мозга млекопитающих ишемического генеза. Набор реагентов для диагностики хронических патологий головного мозга млекопитающих ишемического генеза включает гибридный пептид, имеющий по меньшей мере 90% идентичность по всей длине с последовательностью SEQ ID NO:1 и иммобилизованный на твердом носителе, и реагент для определения присутствия аутоантител к упомянутому гибридному пептиду в биологической жидкости млекопитающего, имеющий сродство к иммуноглобулинам млекопитающего.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложены способы иммобилизации активного агента на поверхности субстрата.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложены способы иммобилизации активного агента на поверхности субстрата.

Изобретение относится к области медицины, в частности к офтальмологии, и предназначено для прогнозирования скорости прогрессии глаукомной оптической нейропатии. В слезной жидкости определяют концентрации ММР-9 и TIMP-1 методом иммуноферментного анализа и затем рассчитывают величину их отношения.

Изобретение относится к области иммунохимии и биомеханики и может быть использовано при изучении силы межмолекулярных взаимодействий в системах «антиген-антитело», «лиганд-рецептор» с использованием оптического пинцета.

Изобретение относится к области измерительной техники. Представлена система, включающая в себя платформу для выполнения по меньшей мере одного протокола анализа.

Группа изобретений относится к области биотехнологии, в частности к области биосенсоров с металлическими наночастицами в качестве системы передачи сигнала. Биосенсор для визуального детектирования аналита включает распознающую молекулу, способную распознавать целевой аналит, иммобилизованную на теплочувствительной поверхности, и металлическую наночастицу, характеризующуюся полосой поверхностного плазмонного резонанса, функционализированную второй распознающей молекулой, способной распознавать целевой аналит или другие распознающие молекулы.

Изобретение относится к области биотехнологии и производству противоящурных вакцин, а именно к способу определения титра инфекционной активности вируса ящура в неинактивированном сырье для производства вакцины с применением метода ОТ-ПЦР-РВ и разработанной регрессионной моделью зависимости титра инфекционной активности вируса ящура от величины порогового цикла амплификации.

Изобретение относится к медицине, а именно к репродуктологии, андрологии и вспомогательным репродуктивным технологиям, и может быть использовано для оценки качества эякулята по содержанию в нем индивидуальных сперматозоидов с высоким уровнем гидроксиметилирования ДНК.

Изобретение относится к медицине, а именно к репродуктологии, андрологии и вспомогательным репродуктивным технологиям, и может быть использовано для оценки качества эякулята по содержанию в нем индивидуальных сперматозоидов с высоким уровнем гидроксиметилирования ДНК.

Группа изобретений относится к обнаружению мишень-ориентированных лекарственных средств. Способ определения биологического ответа мишени на растворимое исследуемое вещество содержит следующие этапы: - в ламинарный поток буферной жидкости, текущей через дисперсионный канал, вводят растворимое исследуемое вещество с образованием растворенного исследуемого вещества в буферной жидкости, имеющего начальный концентрационный профиль; ламинарным потоком буферной жидкости через дисперсионный канал вышеуказанное растворенное исследуемое вещество диспергируется так, чтобы в буферной жидкости содержался диспергированный концентрационный профиль; направляют ламинарный поток буферной жидкости, содержащей раствор исследуемого вещества, имеющий вышеуказанный профиль, в канал обнаружения так, что в этом канале растворенное исследуемое вещество образует конечный симметричный концентрационный профиль растворенного исследуемого вещества в буферной жидкости; вводят мишень в канал обнаружения для смешения с растворенным исследуемым веществом, имеющим конечный симметричный концентрационный профиль в буферной жидкости таким образом, чтобы получить в буферной жидкости смесь, имеющую объединенный концентрационный профиль, причем указанный профиль содержит мишень, имеющую постоянный концентрационный профиль мишени, смешанную с растворенным исследуемым веществом, имеющим конечный симметричный концентрационный профиль в буферной жидкости; удерживают смесь мишени и растворенное исследуемое вещество в буферной жидкости в канале обнаружения так, чтобы по меньшей мере одна половина объединенного концентрационного профиля удерживалась в этом канале; и производят оптическое сканирование смеси мишени и растворенного исследуемого вещества, содержащейся в буферной жидкости, удержанной в канале обнаружения и содержащей по меньшей мере, одну половину объединенного концентрационного профиля, для обнаружения при различных концентрациях раствора исследуемого вещества, содержащегося в объединенном концентрационном профиле, оптического сигнала, представляющего биологический ответ мишени на растворимое исследуемое вещество.

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для обнаружения злокачественной опухоли, экспрессирующей CAPRIN-1.

Изобретение относится к медицине, а именно к трансфузиологии, и может быть использовано для определения содержания анти-А и анти-В гемагглютининов в препаратах крови человека в реакции прямой гемагглютинации и реакции непрямой гемагглютинации.

Данное изобретение относится к иммунологии. Предложен выделенный пептид-эпитоп, полученный из ассоциированной с кинетохором молекулы 2 (KNTC2) и обладающий способностью к индукции цитотоксических T-лимфоцитов (CTL) в присутствии антигенпрезентирующей клетки (APC), несущей HLA-A*0201.

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным заболеваниям, и может быть использовано для оценки тяжести состояния больного при ВИЧ-инфекции. Для этого проводят обследование пациента с выявлением состояния его отдельных органов и систем и оценкой показателей состояния пациента по балльной системе с последующим выводом о состоянии по значению интегрального показателя.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к проникающим в клетку пептидам, и может быть использовано в медицине путем доставки терапевтической карго-молекулы в клетку млекопитающего.

Изобретение относится к биотехнологии. Описан способ обнаружения множества одномолекулярных анализируемых веществ.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для объективной оценки степени выраженности воспалительного процесса в эндометрии и стадии клинического течения при хроническом эндометрите (ХЭ).
© Патентный поиск, поиск патентов на изобретения - FindPatent.RU 2012-2024
Политика конфиденциальности 2017-10-17 2018-12-12T00:16:50
Наверх