Способ оценки вклада плодовой тромбофилии в формирование суб- и декомпенсированных форм плацентарной недостаточности

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, и касается оценки вклада плодовой тромбофилии в формирование суб- и декомпенсированных форм плацентарной недостаточности. Сущность способа: проводят молекулярно-генетическое типирование новорожденных и исследование системы гемостаза, при сочетании патологических полиморфизмов генов: PAI-1 675 (5G>4G), ITGA2 807 C>T, MTHFR (677С>Т) у новорожденного и данных коагуляционных тестов вычисляют индекс F по формуле

F=K1×R(мин)+K2×K(мин)+K3×МА(мм)+K4×Х4+K5×Х5+K6×Х6+const,

где R, К, МА - стандартные параметры тромбоэластограммы; Х4 - наличие у новорожденных в генотипе аллеля 4G гена PAI-1 675: если есть -1, если нет - 0; Х5 - наличие у новорожденного в генотипе полиморфного варианта 807 ТТ гена ITGA2 807 C>T: если есть -1, если нет - 0; Х6 - наличие у новорожденного в генотипе полиморфного варианта 677 СТ/ ТТ гена MTHFR С677Т: если есть -1, если нет - 0; К1=0,03, К2=0,6, К3=0,07, К4=-0,4, К5=-0,7, К6=0,6 - коэффициенты; constant=-6,11. При значении F<0 делают заключение о высоком влиянии плодовой тромбофилии на развитие суб- и декомпенсированных форм плацентарной недостаточности, а при значении F≥0 делают заключение о низком влиянии плодовой тромбофилии на развитие суб- и декомпенсированных форм плацентарной недостаточности. Изобретение обеспечивает оценку вклада плодовой тромбофилии в формировании суб- и декомпенсированных форм плацентарной недостаточности на основании вычисления индекса, характеризующего генетическую предрасположенность к тромбофилии плода, и оценки показателей системы гемостаза. 3 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, предназначено для врачей гемостазиологов, акушеров-гинекологов и перинатологов акушерских стационаров, перинатальных центров.

Несмотря на интенсивное использование новейших методов диагностики и лечения ПН остается одной из основных причин перинатальной заболеваемости и смертности [Тезиков Ю.В., Липатов И.С., Агаркова И.А. Факторы риска декомпенсации плацентарной недостаточности. /Казанский медицинский журнал// 2011. Т. 92. №3. С. 372-375.]

По данным различных авторов, распространенность ПН составляет от 7,6% до 38,4%, значительно возрастая до 46-54% при сопутствующей экстрагенитальной патологии и других осложнениях гестации, ПН приводит к формированию синдрома задержки роста плода (СЗРП, который занимает третье место в структуре причин перинатальной заболеваемости и смертности. Перинатальная смертность при ПН достигает 60% [Кулаков, В.И. Рациональная фармакотерапия в акушерстве и гинекологии: монография / В.И. Кулаков, В.Н. Серов. - М.: Литтерра, 2013. - 720 с.; Филиппов, О.С. Плацентарная недостаточность / О.С. Филиппов. - М.: МЕДпресс-информ, 2009. -160 с.].

Учитывая, что плацента является по своей гистогенетической сущности комплексным органом, в образовании которого принимают участие организм матери и плода, в свою очередь процесс коагуляции в зоне контакта материнской крови и трофобласта содружественно регулируется системными факторами свертывания матери и клеточными регуляторными компонентами, экспрессирующимися на поверхности клеток трофобласта, что определяется генами плода [Глуховец, Б.И. Патология последа / Б.И. Глуховец, Н.Г. Глуховец.- СПб.: ГРААЛЬ, 2002 - 448 с.].

В настоящее время в ряде исследований, как отечественных, так и зарубежных, появляются данные о роли плодовой (фетальной) тромбофилии, а также сочетании материнской и плодовой в генезе акушерских осложнений. Пока нет однозначного ответа, является ли риск патологии плаценты более высоким при материнской или плодовой тромбофилии, по раздельности или в сочетании [Андреева М.Д., Макацария А.Д., Пенжоян Г.А., Бицадзе В.О. Влияние материнской и фетальной тромбофилии в развитии репродуктивных потерь. // Гемостаз и репродукция: сборник тезисов Всерос. Конференции с межд. Участием. Санкт-Петербург. - 23-27 марта. 2017. - С. 5-6.].

Известен метод диагностики генетической тромбофилии, основанный на определения генетических мутаций и полиморфизмов генов, кодирующих состояние гемостаза, при помощи методом полимеразной цепной реакции (ПЦР) в режиме реального времени в препаратах ДНК человека [Гущина Н.Н. Генетические маркеры тромбофилии. Медико-социальные проблемы инвалидности. 2017. №2. С. 26-29.]. Однако данный метод с высокой степенью достоверности позволяет определить предрасположенность к тромбозам, но не характеризуют состояние свертывающей системы крови и, следовательно, не определяют риск развития осложнений, ассоциированных с тромбофилией.

Ближайшим аналогом (прототипом) заявляемого изобретения является диагностика состояния системы гемостаза с помощью клоттинговых и «глобальных» (тромбоэластография) тестов, [Ройтман ЕВ. «Проблема гемостаза» в лабораторной диагностике. Лаборатория ЛПУ. 2016. №18. С. 29-36.] Эти исследования позволяют с высокой достоверностью оценивать свертывающий потенциал крови и определять причину коагулопатии.

В настоящее время проводят исследования системы гемостаза и генов, кодирующих состояние гемостаза по отдельности, и нет метода, который оценивает эти параметры в совокупности.

Таким образом, все вышеизложенное позволяет сделать вывод, что на сегодняшний день отсутствует надежный способ оценки вклада клинически значимой тромбофилии плода в формирование суб- и декомпенсированных форм плацентарной недостаточности.

Задача изобретения заключается в разработке математической модели оценки вклада плодовой тромбофилии в формирование суб- и декомпенсированных форм плацентарной недостаточности путем вычисления индекса, отражающего генетически детерминированную патологию гемостаза новорожденного, реализованную на уровне системы мать-плацента-плод.

Технический результат: оценка вклада плодовой тромбофилии в формировании суб- и декомпенсированных форм плацентарной недостаточности на основании вычисления индекса, характеризующего генетическую предрасположенность к тромбофилии плода и оценки показателей системы гемостаза. Способ позволяет с высокой степенью вероятности оценивать роль плодовой тромбофилии в формирование суб- и декомпенсированных форм плацентарной недостаточности.

Заявляется способ оценки вклада плодовой тромбофилии в формирование суб- и декомпенсированных форм плацентарной недостаточности путем проведения молекулярно-генетического типирования и исследования системы гемостаза новорожденного, заключающийся в том, что при сочетании патологических полиморфизмов генов: PAI-1 675 (5G>4G), ITGA2 807 C>Т, MTHFR (677 C> Т) и показателей системы гемостаза: R, К, МА, вычисляют индекс F по формуле:

F=K1×X1+K2×Х2+K3×Х3+К4×Х4+К5×Х5+К6×Х6+ +const

где:

X1 - значение интервала R (мин.)

Х2 - значение интервала К (мин),

Х3 - значение параметра Ма (мм),

(R, К, МА- стандартные параметры тромбоэластограммы)

Х4 - наличие у новорожденных в генотипе аллеля 4G гена PAI-1 675: если есть -1, если нет - 0,

Х5 - наличие у новорожденного в генотипе полиморфного варианта 807 ТТ гена ITGA2 807 С>Т: если есть -1, если нет - 0;

Х6 - наличие у новорожденного в генотипе полиморфного варианта 677 СТ/ ТТ гена MTHFR С677Т: если есть -1, если нет - 0;

К1, К2, К3, К4, К5, Кб, - коэффициенты,

при К1=0,03, К2=0,6, К3=0,07, К4=-0,4, К5=-0,7, К6=0,6

Constant=-6,11

при значении F<0 делают заключение о высоком влиянии плодовой тромбофилии на формирование суб- и декомпенсированных форм плацентарной недостаточности, а при значении F≥0 делают заключение о низком влиянии плодовой тромбофилии на формирование суб- и декомпенсированных форм.

Способ осуществляют следующим образом:

Для достижения поставленной задачи проводят молекулярно-генетическое типирование новорожденных по полиморфным вариантам генов PAI-1 675 (5G>4G), ITGA2 807 C>Т, MTHFR (677С>Т) методом полимеразной цепной реакции в режиме реального времени и исследования системы гемостаза, с определением параметров, R, К, МА с последующим подсчетом прогностического индекса F. Исследование проводят натощак, в утреннее время.

Тромбоэластография цельной крови проводилась на анализаторе «TEG 5000», per. номер ФС №2006/2518, США, расходные материалы для TEG ФС №2006/2519, США. Определялись параметры хронометрической (r, k) и структурной коагуляции (ma) Принцип тромбоэластографии состоит в графической регистрации процессов образования фибрина, его ретракции и фибринолиза.

Для генотипирования образцы ДНК получают из клеток буккального эпителия. Для оценки количества выделенной геномной ДНК используют набор реагентов контроля взятия материала для метода ПЦР (НПО «ДНК-Технология», Россия). Для исследования берут не менее 1,0 нг геномной ДНК на реакцию. Генотипирование образцов по аллельным вариантам исследуемых генов проводят методом аллель-специфичной полимеразной цепной реакции (ПЦР) в «режиме реального времени» со снятием кривых плавления продуктов амплификации. Анализ результатов ПЦР проводят в автоматическом режиме программного обеспечения детектирующего амплификатора ДТ-96 (НПО «ДНК-Технология», Россия).

Индекс получают путем математической обработки (методом распознавания образов дискриминантного анализа) результатов молекулярно-генетического типирования и показателей системы гемостаза по следующей формуле:

F=K1×X1+K2×Х2+K3×Х3+K4×X4+K5×X5+K6×X6+ +const

где:

X1 - значение интервала R (мин.)

Х2 - значение интервала К (мин),

Х3 - значение параметра Ма (мм),

(R, К, МА- стандартные параметры тромбоэластограммы)

Х4 - наличие у новорожденных в генотипе полиморфного варианта 5G4G/4G4G гена PAI-1 675 5G>4G: если есть -1, если нет - 0,

Х5 - наличие у новорожденного в генотипе полиморфного варианта 807 ТТ гена ITGA2 807 С>Т: если есть -1, если нет - 0;

Х6 - наличие у новорожденного в генотипе полиморфного варианта 677 СТ/ ТТ гена MTHFR С677Т: если есть -1, если нет - 0;

К1, К2, К3, К4, К5, К6 - коэффициенты,

при К1=0,03, К2=0,6, К3=0,07, К4=-0,4, К5=-0,7, К6=0,6

Constant=-6,11

Если значение F<0, то влияние плодовой тромбофилии на формирование суб- и декомпенсированных форм плацентарной недостаточности высокое.

Если значение F≥0, то влияние плодовой тромбофилии на формирование суб- и декомпенсированных форм плацентарной недостаточности низкое.

Чувствительность правила прогноза составляет 86%, специфичность 905%, эффективность 88%.

Клинический пример 1.

Новорожденный Н., родившийся от 1 -ой беременности, осложненной субкомпенсированной плацентарной недостаточности по данным УЗИ- СЗРП II степени, НМПК II степени). Девочка родилась в сроке 38 недель, способ операции кесарево сечение массой 1700 грамм 45 см., с оценкой по шкале Апгар 6/7 баллов. Проведено молекулярно-генетическое типирование, при котором выявлено: наличие наличие патологической гомозиготы гена PAI-1 675 (4G4G) (1), нормальной гомозиготы гена ITGA2 807 (СС) (0), и гена MTHFR 677 (СС) (0); r-5,2, k-2,8, Ма-53,5. По формуле определен индекс F:

F=0,03×5.2+0,6×2,8+0,07×53,5+(-0,4×1)+(-0,7×0)+0,56×0-6,11=-0,94

F<0, т.е. влияние плодовой тромбофилии на формирование субкомпенсированной плацентарной недостаточности в данном случае высокое.

Клинический пример 2.

Новорожденный К., родившийся от 4-ой беременности, у женщины с привычным невынашиванием (3 регрессирующие беременности). Данная беременность осложнилась субкомпенсированной плацентарной недостаточностью (по данным УЗИ-СЗРП II степени, НМПК IA степени). Девочка родилась в сроке 37 недель, способ операции кесарево сечение массой 1890 грамм 42 см., с оценкой по шкале Апгар 6/7 баллов. Проведено молекулярно-генетическое типирование, при котором выявлено: наличие наличие патологической гомозиготы гена PAI-1 675 (4G4G) (1), гомозиготы гена ITGA2 807 (ТТ) (1), и гетерозиготы гена MTHFR 677 (СТ) (1); r-2,9, k-1,8, Ма-52. По формуле определен индекс F:

F=0,03×5.2+0,6×2,8+0,07×53,5+(-0,4×1)+(-0,7×1)+0,56×1-6,11=-2,3

F<0, т.е. влияние плодовой тромбофилии на формирование субкомпенсированной плацентарной недостаточности в данном случае высокое.

Клинический пример 3.

Новорожденный М., родившийся от 2-ой беременности от женщины без отягощенного акушерско-гинекологического анамнеза. Данная беременность протекала без осложнений. Мальчик родился в сроке 40 недель массой 3650 грамм 52 см., с оценкой по шкале Апгар 8/9 баллов, роды прошли per vias naturalis, без осложнений. Проведено молекулярно-генетическое типирование, при котором выявлено: наличие наличие гетерозиготных вариантов гена PAI-1 675 (5G4G) (1) и гена ITGA2 807 (ТС) (0),

нормальной гомозиготы гена MTHFR (677СС) (0); r-6,8, k-3,5, Ма-55. По формуле определен индекс F:

F=0,03×6,8+0,6×3,5+0,07×55+(-0,4×1)+(-0,7×0)+0,56×0-6,11=0,54

F>0, т.е. влияние плодовой тромбофилии на формирование субкомпенсированной плацентарной недостаточности в данном случае низкое.

Способ оценки вклада плодовой тромбофилии в формирование суб- и декомпенсированных форм плацентарной недостаточности путем проведения молекулярно-генетического типирования новорожденных и исследования системы гемостаза, заключающийся в том, что при сочетании патологических полиморфизмов генов: PAI-1 675 (5G>4G), ITGA2 807 C>Т, MTHFR (677 C>Т) у новорожденного и данных коагуляционных тестов вычисляют индекс F по формуле

F=K1×R(мин)+K2×K(мин)+K3×МА(мм)+K4×Х4+K5×Х5+K6×X6+const,

где

R, К, МА - стандартные параметры тромбоэластограммы;

Х4 - наличие у новорожденных в генотипе аллеля 4G гена PAI-1 675: если есть - 1, если нет - 0;

Х5 - наличие у новорожденного в генотипе полиморфного варианта 807 ТТ гена ITGA2 807 С>Т: если есть - 1, если нет - 0;

Х6 - наличие у новорожденного в генотипе полиморфного варианта 677 СТ/ТТ гена MTHFR С677Т: если есть - 1, если нет - 0;

К1=0,03, К2=0,6, К3=0,07, К4=-0,4, К5=-0,7, К6=0,6 - коэффициенты;

constant=-6,11;

при значении F<0 делают заключение о высоком влиянии плодовой тромбофилии на развитие суб- и декомпенсированных форм плацентарной недостаточности, а при значении F≥0 делают заключение о низком влиянии плодовой тромбофилии на развитие суб- и декомпенсированных форм плацентарной недостаточности.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, и касается способа прогнозирования риска формирования суб- и декомпенсированной плацентарной недостаточности с исходом задержки роста плода.
Изобретение относится к медицине, а именно к ревматологии, и может быть использовано для диагностики поражения почек у больных системной красной волчанкой (СКВ). Для этого одновременно определяют уровень антител к ксантиноксидазе (анти-КО) в сыворотке крови и рассчитывают коэффициент КО/КДГ (активность ксантиноксидазы/активность ксантиндегидрогеназы).
Изобретение относится к медицине и раскрывает способ прогнозирования риска раннего развития профессиональной бронхиальной астмы. Способ характеризуется тем, что осуществляют определение в сыворотке крови уровня эозинофильного катионного протеина (ЭКП), выделение генетического материала, проведение полимеразной цепной реакции со специфическими праймерами, амплификацию последовательности в промоторной области гена супероксиддисмутазы MnSOD Т-58С и гена эпоксидгидролазы ЕРНХ1 Tyr-113His и при одновременном обнаружении неблагоприятной аллели С гена MnSOD Т-58С и неблагоприятной аллели С гена ЕРНХ1 Tyr-113His и уровня ЭКП выше 10 мкг/л прогнозируют риск развития профессиональной бронхиальной астмы у работника в течение 5-ти лет от начала работы с вредными производственными факторами сенсибилизирующего и раздражающего действия.
Изобретение относится к медицине и применимо в клинической нефрологии. Способ ранней диагностики повреждения почек у больных с начальной стадией хронической болезни почек путем определения в моче биомаркеров повреждения проксимальных канальцев NGAL и KIM-1 отличается тем, что прирост NGAL мочи более чем в 2,5 раза или прирост KIM-1 мочи более чем в 2 раза по сравнению с нормальными значениями может быть диагностическим маркером раннего повреждения проксимальных канальцев и тубулоинтерстиции почек у больных с хронической болезнью почек.

Изобретение относится к области медицины, в частности к способу прогнозирования индивидуального риска развития ожирения у человека на различные по продолжительности периоды жизни.
Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для подбора индивидуальных средств гигиены полости рта. Для осуществления способа индивидуального подбора средств гигиены полости рта у пациента осуществляют забор ротовой жидкости, очищают зубы механически без использования средств гигиены полости рта, определяют гидрофобность эмали зубов пациента методом «сидячей капли», из банка зубов, удаленных по медицинским показаниям, подбирают зубы, гидрофобность эмали которых соответствует гидрофобности эмали зубов пациента, зубы, предназначенные для исследования средств гигиены полости рта, очищают зубной щеткой средней жесткости с использованием соответствующего исследуемого средства гигиены, в качестве контроля используют зуб, не очищенный средством гигиены полости рта, зубы погружают в ротовую жидкость пациента и термостатируют при температуре 37°С, с интервалом исследования 1 час определяют время появления зубной бляшки на зубах и измеряют гидрофобность эмали зубов методом «сидячей капли», об эффективности средства гигиены полости рта судят по времени появления зубной бляшки и значению гидрофобности эмали по сравнению с контролем.
Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для подбора индивидуальных средств гигиены полости рта. Для осуществления способа индивидуального подбора средств гигиены полости рта у пациента осуществляют забор ротовой жидкости, очищают зубы механически без использования средств гигиены полости рта, определяют гидрофобность эмали зубов пациента методом «сидячей капли», из банка зубов, удаленных по медицинским показаниям, подбирают зубы, гидрофобность эмали которых соответствует гидрофобности эмали зубов пациента, зубы, предназначенные для исследования средств гигиены полости рта, очищают зубной щеткой средней жесткости с использованием соответствующего исследуемого средства гигиены, в качестве контроля используют зуб, не очищенный средством гигиены полости рта, зубы погружают в ротовую жидкость пациента и термостатируют при температуре 37°С, с интервалом исследования 1 час определяют время появления зубной бляшки на зубах и измеряют гидрофобность эмали зубов методом «сидячей капли», об эффективности средства гигиены полости рта судят по времени появления зубной бляшки и значению гидрофобности эмали по сравнению с контролем.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу выбора реципиента при пересадке трупной почки, включающему выявление антигенов HLA-A, HLA-B и HLA-DR, сопоставление эпитопов антигенов HLA-A и HLA-B потенциального реципиента и донора, а также выбор реципиента по полученным данным.

Изобретение относится к области медицины, а именно к судебной медицине, и может быть использовано для посмертного определения факта мгновенно наступившей смерти при проведении судебно-медицинской экспертизы.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для выявления эффективного криопротектора по цитохимическому показателю содержания лейкоцитарной щелочной фосфатазы (ЛЩФ) аутокрови.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, а также к репродуктологии и может быть использовано для прогнозирования эффективности программ ЭКО. Способ включает курс лечения и лабораторное исследование сыворотки крови. В рамках подготовки к программе ЭКО проводят комплексную терапию хронического эндометрита, включающую иммунокоррекцию препаратом Ликопид по 10 мг в сутки per os в течение 10 дней. Затем в день пункции фолликулов в программе ЭКО получают образец сыворотки крови, в котором методом твердофазного иммуноферментного анализа определяют содержание ЛФ и ИЛ-8. При концентрации ЛФ до 1,8 мкг/мл и ИЛ-8 до 10 пкг/мл или изолированном повышении концентрации ЛФ до 2,5 мкг/мл при уровне ИЛ-8 до 10 пкг/мл прогнозируют высокую вероятность положительного результата ЭКО и переносят в полость матки свежий эмбрион. При одновременном повышении концентрации ЛФ более 2 мкг/мл и ИЛ-8 более 10 пкг/мл прогнозируют высокую вероятность негативного результата ЭКО, рекомендуют криоконсервацию и отсроченный перенос эмбриона для проведения дополнительного курса антибактериальной, а также противовоспалительной терапии. При концентрации ЛФ менее 1 мкг/мл при одновременном отсутствии в крови ИЛ-8 прогнозируют высокий риск негативного результата ЭКО, рекомендуют криоконсервацию и отсроченный перенос эмбриона для проведения курса дополнительной противовирусной и иммунокорригирующей терапии. Способ позволяет прогнозировать исход программы ЭКО за счет дополнительного определения эффективности применяемого иммунокорректора до переноса эмбрионов и последующей индивидуализации подготовки к переносу эмбриона. 3 пр., 1 табл.

Настоящее изобретение относится к способу лечения пациента с колоректальным раком и способу прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5, в отношении пациента с колоректальным раком, включающему следующие стадии: (1) детекцию экспрессии белка TK1 способом иммуногистохимического окрашивания в опухолевых клетках, содержащихся в биологическом образце, полученном от пациента; (2) классификацию опухолевых клеток на положительные клетки и отрицательные клетки с учетом результатов детекции, полученных на стадии (1), и вычисление процентной доли положительных клеток среди опухолевых клеток; и (3) с учетом результатов вычисления, полученных на стадии (2), прогнозирование того, что, когда процентная доля составляет 30% или более, пациент будет отвечать на химиотерапию с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5. Изобретение обеспечивает химиотерапию с обеспечением более значимых эффектов пролонгирования выживаемости для пациентов с колоректальным раком (в частности, пациентов с колоректальным раком, устойчивым или не переносящим стандартную терапию, менее отвечающим на противоопухолевые средства и имеющим меньший выбор противоопухолевых средств для значимого пролонгирования их выживаемости). 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 1 пр., 2 табл.
Наверх