Способ прогнозирования терапевтического эффекта для пациента с колоректальным раком, у которого повышена экспрессия белка tk1

Настоящее изобретение относится к способу лечения пациента с колоректальным раком и способу прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5, в отношении пациента с колоректальным раком, включающему следующие стадии: (1) детекцию экспрессии белка TK1 способом иммуногистохимического окрашивания в опухолевых клетках, содержащихся в биологическом образце, полученном от пациента; (2) классификацию опухолевых клеток на положительные клетки и отрицательные клетки с учетом результатов детекции, полученных на стадии (1), и вычисление процентной доли положительных клеток среди опухолевых клеток; и (3) с учетом результатов вычисления, полученных на стадии (2), прогнозирование того, что, когда процентная доля составляет 30% или более, пациент будет отвечать на химиотерапию с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5. Изобретение обеспечивает химиотерапию с обеспечением более значимых эффектов пролонгирования выживаемости для пациентов с колоректальным раком (в частности, пациентов с колоректальным раком, устойчивым или не переносящим стандартную терапию, менее отвечающим на противоопухолевые средства и имеющим меньший выбор противоопухолевых средств для значимого пролонгирования их выживаемости). 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 1 пр., 2 табл.

 

Область техники

Перекрестная ссылка на родственную заявку

По настоящей заявке испрашивается приоритет по патентной заявке Японии № 2013-105082, поданной 17 мая 2013 года, полное содержание которой включено в настоящее описание посредством ссылки.

Настоящее изобретение относится к способу прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин (далее в настоящем описании также обозначаемый как "FTD") и типирацил гидрохлорид (далее в настоящем описании также обозначаемый как "TPI") в молярном отношении 1:0,5, а также относится к противоопухолевому средству и набору.

Предшествующий уровень техники

Стандартную терапию для лечения пациентов с колоректальным раком осуществляют, как правило, с помощью химиотерапии с использованием противоопухолевых средств на основе фторпиримидина (например, комбинации 5-фторурацила (5-FU) и лейковорина (LV)) и, необязательно, с помощью мультилекарственной химиотерапии (FOLFIRI, FOLFOX или т.п.), в которой дополнительно используют иринотекан или оксалиплатин. С помощью таких способов достигают конкретного терапевтического эффекта (NPL 1). Однако если пациент с колоректальным раком становится устойчивым или не переносит эти стандартные способы терапии с использованием 5-FU, иринотекана или оксалиплатина, выбор противоопухолевого средства, которое может значимо продлевать его выживаемость, является очень ограниченным.

При этом, комбинированное лекарственное средство, содержащее FTD и TPI в молярном отношении 1:0,5 (далее в настоящем описании также обозначаемое как "комбинированное лекарственное средство "FTD-TPI"), находится в стадии разработки в качестве нового противоопухолевого средства против колоректального рака. Комбинированное лекарственное средство FTD-TPI является противоопухолевым средством, содержащим FTD, являющийся активным ингредиентом, обладающим противоопухолевым эффектом, и TPI, являющийся компонентом, подавляющим деградацию FTD тимидинфосфорилазой (TP), в молярном отношении 1:0,5. Известно, что это средство проявляет противоопухолевые эффекты в результате ингибирования тимидилатсинтазы (TS) FTD и встраивания FTD, фосфорилированного тимидинкиназой 1 (TK1), в ДНК (NPL 2). Кроме того, т.к. в крупномасштабных клинических тестах, направленных на пациентов с колоректальным раком, устойчивых или не переносящих стандартную терапию, подтверждали исключительное повышение общей выживаемости с помощью комбинированного лекарственного средства FTD-TPI, прогнозируют использование лекарственного средства в качестве противоопухолевого средства против колоректального рака (NPL 3).

Кроме того, благодаря механизму действия комбинированного лекарственного средства FTD-TPI, ожидают, что TK1 и т.д. будут служить факторами для прогнозирования терапевтического эффекта комбинированного лекарственного средства FTD-TPI. Однако при анализе экспрессии белка TK1 способом H-score, являющимся иммуногистохимическим способом оценки, в клиническом тестировании комбинированного лекарственного средства FTD-TPI, направленном на пациентов с колоректальным раком, устойчивых или не переносящих стандартную терапию, не наблюдали корреляцию между экспрессией белка TK1 и общей выживаемостью (NPL 4). "Способ H-score" является способом оценки на основе H-score, определяемого по следующей расчетной формуле: H-score = Σ(интенсивность окрашивания × процентная доля положительных клеток (%)) (интенсивность окрашивания 0: неокрашенные; интенсивность окрашивания 1: слабое окрашивание; интенсивность окрашивания 2: умеренное окрашивание; интенсивность окрашивания 3: сильное окрашивание) (J Clin Pathol. 1995; 48: 876-878).

Как объяснено выше, несмотря на интенсивное развитие химиотерапии для пациентов с колоректальным раком, ее терапевтические эффекты все еще являются недостаточными. В частности, по существу, не разработаны эффективные способы химиотерапии для пациентов с колоректальным раком, устойчивых или не переносящих стандартную терапию.

Список цитирования

Непатентная литература

NPL 1: NCCN Clinical Practice Guidelines in Oncology (NCCN Guidelines™); Colon cancer (3 Version, 2011), Rectal Cancer (4 Version, 2011)

NPL 2: Int J Mol Med. 2004; 13(2): 249-55.

NPL 3: Eur J Cancer. 2011; 47 (Suppl.1): 392, #6005.

NPL 4: Eur J Cancer. 2011; 47 (Suppl.1): 421, #6099.

Сущность изобретения

Техническая проблема

Целью настоящего изобретения является предоставление химиотерапии для пациентов с колоректальным раком, химиотерапии, обеспечивающей значимый эффект пролонгирования выживаемости и имеющей меньше побочных эффектов.

Решение проблемы

В условиях отсутствия корреляции между экспрессией белка TK1 и терапевтическим эффектом комбинированного лекарственного средства FTD-TPI, как указано выше, авторы настоящего изобретения сфокусировались на взаимосвязи между процентной долей положительных клеток (в частности, клеток, оцениваемых с баллами 2+ или 3+ с помощью иммуногистохимического способа) среди всех опухолевых клеток в биологическом образце и терапевтическим эффектом комбинированного лекарственного средства FTD-TPI и обнаруживали, что комбинированное лекарственное средство FTD-TPI, более вероятно, имеет достоверный эффект в отношении пациентов с колоректальным раком, у которых процентная доля положительных клеток составляла 30% или более, по сравнению с пациентами, у которых процентная доля положительных клеток составляла менее 30%. Таким образом, осуществляли настоящее изобретение.

Известно, что пациенты со злокачественными новообразованиями с высокой экспрессией TK1, как правило, имеют неблагоприятный прогноз. Для специалистов в этой области поразительно высокий терапевтический эффект комбинированного лекарственного средства FTD-TPI, когда процентная доля положительных клеток составляет 30% или более, является неожиданным результатом.

Конкретно, настоящее изобретение относится к следующим способам, противоопухолевым средствам и набору.

Пункт 1. Способ прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5, в отношении пациента с колоректальным раком, включающий следующие стадии (1)-(3):

(1) детекцию экспрессии белка TK1 иммуногистохимическим способом в опухолевых клетках, содержащихся в биологическом образце, полученном от пациента;

(2) классификацию опухолевых клеток на положительные клетки и отрицательные клетки с учетом результатов детекции, полученных на стадии (1), и вычисление процентной доли положительных клеток среди опухолевых клеток; и

(3) с учетом результатов вычисления, полученных на стадии (2), прогнозирование того, что, когда процентная доля составляет 30% или более, пациент, вероятно, в достаточной степени будет отвечать на химиотерапию с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5.

Пункт 2. Способ по п. 1, где положительные клетки оценивают как 2+ или 3+ с учетом интенсивности окрашивания.

Пункт 3. Способ по п. 1 или 2, где пациент с колоректальным раком является устойчивым или не переносит стандартную терапию.

Пункт 4. Противоопухолевое средство, содержащее трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5, для пациента с колоректальным раком, где то, что пациент, вероятно, в достаточной степени будет отвечать на химиотерапию с использованием противоопухолевого средства, прогнозируют способом, включающим следующие стадии (1)-(3):

(1) детекцию экспрессии белка TK1 иммуногистохимическим способом в опухолевых клетках, содержащихся в биологическом образце, полученном от пациента;

(2) классификацию опухолевых клеток на положительные клетки и отрицательные клетки с учетом результатов детекции, полученных на стадии (1), и вычисление процентной доли положительных клеток среди опухолевых клеток; и

(3) с учетом результатов вычисления, полученных на стадии (2), прогнозирование того, что, когда процентная доля составляет 30% или более, пациент, вероятно, в достаточной степени будет отвечать на химиотерапию с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5.

Пункт 5. Набор для прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5, в отношении пациента с колоректальным раком, содержащий антитело, специфически распознающее белок TK1, в качестве реагента, где терапевтический эффект прогнозируют посредством следующих стадий (1)-(3):

(1) детекции экспрессии белка TK1 способом иммуногистохимического окрашивания в опухолевых клетках, содержащихся в биологическом образце, полученном от пациента;

(2) классификации опухолевых клеток на положительные клетки и отрицательные клетки с учетом результатов детекции, полученных на стадии (1), и вычисления процентной доли положительных клеток среди опухолевых клеток; и

(3) с учетом результатов вычисления, полученных на стадии (2), прогнозирования того, что, когда процентная доля составляет 30% или более, пациент, вероятно, в достаточной степени будет отвечать на химиотерапию с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5.

Пункт 6. Способ лечения пациента с колоректальным раком, включающий следующие стадии (1)-(4):

(1) детекцию экспрессии белка TK1 способом иммуногистохимического окрашивания в опухолевых клетках, содержащихся в биологическом образце, полученном от пациента;

(2) классификацию опухолевых клеток на положительные клетки и отрицательные клетки с учетом результатов детекции, полученных на стадии (1), и вычисление процентной доли положительных клеток среди опухолевых клеток;

(3) с учетом результатов вычисления, полученных на стадии (2), прогнозирование того, что, когда процентная доля составляет 30% или более, пациент, вероятно, в достаточной степени будет отвечать на химиотерапию с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5; и

(4) введение противоопухолевого средства пациенту, который, как прогнозируют, вероятно, будет в достаточной степени отвечать на химиотерапию на стадии (3).

Пункт 7. Противоопухолевое средство, содержащее трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5, где противоопухолевое средство предназначено для применения в лечении пациента с колоректальным раком, который, вероятно, будет в достаточной степени отвечать на химиотерапию с использованием противоопухолевого средства, как прогнозируют способом, включающим следующие стадии (1)-(3):

(1) детекцию экспрессии белка TK1 иммуногистохимическим способом в опухолевых клетках, содержащихся в биологическом образце, полученном от пациента;

(2) классификацию опухолевых клеток на положительные клетки и отрицательные клетки с учетом результатов детекции, полученных на стадии (1), и вычисление процентной доли положительных клеток среди опухолевых клеток; и

(3) с учетом результатов вычисления, полученных на стадии (2), прогнозирование того, что, когда процентная доля составляет 30% или более, пациент, вероятно, в достаточной степени будет отвечать на химиотерапию с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5.

Настоящее изобретение дополнительно включает следующие варианты осуществления.

- Способ тестирования терапевтического эффекта химиотерапии с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5, в отношении пациента с колоректальным раком, включающий следующие стадии (1)-(3):

(1) детекцию экспрессия белка TK1 иммуногистохимическим способом в опухолевых клетках, содержащихся в биологическом образце, полученном от пациента;

(2) классификацию опухолевых клеток на положительные клетки и отрицательные клетки с учетом результатов детекции, полученных на стадии (1), и вычисление процентной доли положительных клеток среди опухолевых клеток; и

(3) с учетом результатов вычисления, полученных на стадии (2), прогнозирование того, что, когда процентная доля составляет 30% или более, пациент, вероятно, в достаточной степени будет отвечать на химиотерапию с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5.

- Способ оценки того, имеет ли химиотерапия с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5, терапевтический эффект в отношении пациента с колоректальным раком, включающий следующие стадии (1)-(3):

(1) детекцию экспрессии белка TK1 иммуногистохимическим способом в опухолевых клетках, содержащихся в биологическом образце, полученном от пациента;

(2) классификацию опухолевых клеток на положительные клетки и отрицательные клетки с учетом результатов детекции, полученных на стадии (1), и вычисление процентной доли положительных клеток среди опухолевых клеток; и

(3) сравнение результатов вычисления, полученных на стадии (2), со стандартом, если процентная доля составляет 30% или более, пациент, вероятно, в достаточной степени будет отвечать на химиотерапию 5 с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5.

Полезные эффекты изобретения

С помощью способа прогнозирования по настоящему изобретению можно обеспечивать химиотерапию, обеспечивающую более значимые эффекты пролонгирования выживаемости для пациентов с колоректальным раком (в частности, пациентов с колоректальным раком, устойчивым или не переносящим стандартную терапию, менее отвечающим на противоопухолевые средства и имеющим меньший выбор противоопухолевых средств для значимого пролонгирования их выживаемости).

Описание вариантов осуществления

Способ прогнозирования по настоящему изобретению предназначен для прогнозирования, тестирования или исследования того, проявляет ли химиотерапия с использованием противоопухолевого средства, содержащего FTD и TPI в молярном отношении 1:0,5, достаточный терапевтический эффект в отношении пациента с колоректальным раком с учетом процентной доли TK1-положительных клеток в опухолевых клетках.

Белок TK1, используемый в настоящем изобретении в качестве индекса, является ферментом, синтезирующим дезокситимидинмонофосфат посредством фосфорилирования тимидина, и известно, что он участвует в синтезе пиримидина, необходимого для синтеза ДНК. Кроме того, как сообщают, высокая экспрессия белка TK1 ассоциирована с озлокачествлением опухоли во многих типах злокачественных новообразований.

Целевыми пациентами по настоящему изобретению являются пациенты с колоректальным раком. В настоящем изобретении, термин "колоректальный рак" относится к злокачественной опухоли, образующейся в толстой кишке или прямой кишке, включая первичный колоректальный рак, местно-рецидивирующий колоректальный рак и колоректальный рак, распространяющийся в другие ткани (например, печень). "Пациенты с колоректальным раком" включают не только пациентов, в настоящее время имеющих опухолевую ткань колоректального рака, но также и пациентов, которых подвергали резекции опухолевой ткани колоректального рака. Таким образом, в настоящем описании терапевтический эффект химиотерапии включает уменьшение размеров колоректального рака, супрессию пролиферации, пролонгирование выживаемости пациентов, а также супрессию рецидивирования колоректального рака после резекции опухолевой ткани.

Кроме того, анамнез лечения пациентов с колоректальным раком по настоящему изобретению, в частности, не ограничен до той степени, что пациенты могут переносить введение указанного выше противоопухолевого средства; однако, целевые пациенты, предпочтительно, являются пациентами с колоректальным раком, устойчивыми или не переносящими стандартную терапию, в терминах точности прогнозирования по настоящему изобретению. В настоящем описании термин "стандартная терапия" относится к химиотерапии, общепринято используемой для лечения колоректального рака, и в которой используют противоопухолевое средство на основе фторпиримидина (например, 5-фторурацил (5-FU)), иринотекан или оксалиплатин. Ее конкретные примеры включают химиотерапию, в которой используют противоопухолевое средство на основе фторпиримидина (например, комбинацию 5-фторурацил (5-FU) и лейковорина (LV)), и комбинированную химиотерапию (FOLFIRI, FOLFOX и т.д.), в которой используют иринотекан или оксалиплатин в дополнение к противоопухолевому средству на основе фторпиримидина. В настоящем описании состояние "устойчивости или непереносимости стандартной терапии" относится к состоянию, в котором пациент не отвечает на стандартную терапию (включая случаи, когда наблюдают прогрессирование (PD) в течение стандартной терапии, случаи, когда обнаруживают рецидивирование злокачественного новообразования в течение стандартной терапии, проводимой в качестве послеоперационной адъювантной химиотерапии, или в пределах 6 месяцев после нее и т.п.), состоянию, в котором пациент не способен переносить введение стандартного количества противоопухолевого средства по причине ухудшения заболевания или побочных эффектов или т.п. Состояние "устойчивости или непереносимости стандартной терапии" также можно выражать как "затруднение проведения стандартной терапии".

Противоопухолевое средство по настоящему изобретению содержит трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5, и известно, что оно проявляет противоопухолевые эффекты, в основном, в отношении солидных злокачественных новообразований, таких как колоректальный рак, при пероральном введении (WO96/30346).

"Трифлуридин" (синоним: α,α,α-трифтортимидин) является известным производным нуклеиновой кислоты, в котором метильную группу в положении 5 тимидина заменяют трифторметильной группой, и известно, что он имеет противоопухолевый эффект благодаря своему ингибиторному действию в отношении синтеза ДНК (J. Am. Chem. Soc. 84: 3597-3598, 1962; J. Med. Chem., 7: 1-5, 1964; Biochemistry, 33: 15086-15094, 1994). Трифлуридин представлен следующей химической формулой (1):

"Типирацил гидрохлорид" (химическое название: 5-хлор-6-[(2-иминопирролидин-1-ил)метил]пиримидин-2,4(1H,3H)-дион гидрохлорид) является известным соединением, имеющим ингибирующее действие в отношении активности тимидинфосфорилазы, и известно, что он обладает следующими эффектами: повышение противоопухолевых эффектов (WO96/30346), ингибирование метастазирования (WO98/13045), облегчение желудочно-кишечных нарушений, вызываемых противоопухолевыми средствами (WO00/56337), и потенцирование лучевой терапии (W02008001502). Типирацил гидрохлорид представлен следующей химической формулой (2):

Противоопухолевое средство по настоящему изобретению можно предоставлять в виде комбинированного лекарственного средства (препарата, содержащего множество активных ингредиентов), составляя трифлуридин и типирацил гидрохлорид в лекарственной форме для однократного введения (тип одного состава); или его можно предоставлять в виде препаратов с одним активным ингредиентом, составляя активные ингредиенты во множестве лекарственных форм (тип множественных составов). Из них предпочтительным является комбинированное лекарственное средство трифлуридина и типирацила гидрохлорида.

Лекарственная форма противоопухолевых средств, в частности, не ограничена, и ее можно соответствующим образом выбирать в зависимости от цели лечения. Ее конкретные примеры включают пероральные препараты (такие как таблетки, таблетки, покрытые оболочкой, порошки, гранулы, капсулы и жидкости), инъекционные препараты, суппозитории, пластыри и мази. Из них комбинированное лекарственное средство, содержащее трифлуридин и типирацил гидрохлорид, предпочтительно, находится в форме перорального препарата. Каждое противоопухолевое средство можно получать общеизвестным способом с использованием одного или нескольких фармакологически приемлемых носителей в соответствии с каждой лекарственной формой. Примеры носителей включают те, которые широко используют в общепринятых лекарственных средствах, такие как эксципиенты, связывающие средства, дезинтегрирующие средства, смазочные средства, дилюенты, солюбилизаторы, суспендирующие средства, средства регуляции тоничности, регуляторы pH, буферы, стабилизаторы, красители, подсластители и ароматизаторы.

Термин "химиотерапия с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5" в настоящем изобретении относится к химиотерапии, при которой вводят, по меньшей мере, противоопухолевое средство по настоящему изобретению; она включает химиотерапию с использованием комбинированного лекарственного средства FTD-TPI в отдельности и химиотерапию с использованием противоопухолевого средства по настоящему изобретению и других противоопухолевых средств в комбинации.

Режим проведения химиотерапии соответствующим образом выбирают в соответствии с условиями, такими как возраст пациента, пол, стадия заболевания, наличие или отсутствие метастазов и анамнез лечения. Например, предпочтительно повторять следующий 4-недельный курс введения. В каждом курсе противоопухолевое средство по настоящему изобретению вводят со дня 1 по день 5 и со дня 8 по день 12, от 2 до 4 раз в день в количестве FTD от 20 до 80 мг/м2 (на площадь поверхности тела)/день, предпочтительно - от 2 до 3 раз в день в количестве FTD от 50 до 70 мг/м2 (на площадь поверхности тела)/день, более предпочтительно - 2 раза в день в количестве FTD 70 мг/м2 (на площадь поверхности тела)/день. Частота введения в сутки, в частности, не ограничена и составляет от 2 до 4 раз, предпочтительно - 2 или 3 раза, более предпочтительно - 2 раза.

Химиотерапия по настоящему изобретению может являться предоперационной адъювантной химиотерапией, где химиотерапию осуществляют до резекции опухоли, или послеоперационной адъювантной химиотерапией, в которой химиотерапию осуществляют после резекции опухоли.

Производство и продажа противоопухолевого средства, содержащего FTD и TPI в молярном отношении 1:0,5, одобрена в Японии под названием "Lonsurf combination tablet".

В настоящем изобретении "терапевтический эффект" можно оценивать с учетом эффекта уменьшения размеров опухоли, эффекта супрессии рецидивирования, эффекта пролонгирования выживаемости и т.д., как описано выше. Эффект супрессии рецидивирования может представлять собой увеличение безрецидивной выживаемости или степень улучшения частоты рецидивов. Эффект пролонгирования выживаемости может представлять собой степень увеличения медианы общей выживаемости или выживаемости без прогрессирования. Термин "достаточно отвечает на химиотерапию с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5" означает превосходный терапевтический эффект в результате введения противоопухолевого средства по настоящему изобретению, включая значимое увеличение выживаемости и значимую супрессию рецидивирования по сравнению с лечением без введения противоопухолевого средства по настоящему изобретению.

Способ прогнозирования по настоящему изобретению включает стадии (1)-(3), описываемые выше.

Стадия (1) является стадией детекции экспрессии белка TK1 иммуногистохимическим способом в опухолевых клетках, содержащихся в биологическом образце, полученном от пациента с колоректальным раком.

Биологический образец, в частности, не ограничен при условии, что его получают от пациента с колоректальным раком, и он содержит опухолевые клетки. Его примеры включают физиологические жидкости (такие как кровь и моча), ткань, их экстракты и культуры из полученной ткани; ткань, содержащая опухолевые клетки, является предпочтительной. Способ получения биологического образца можно соответствующим образом выбирать в соответствии с типом биологического образца.

Способ детекции экспрессии белка TK1 в настоящем изобретении, в частности, не ограничен при условии, что он является иммуногистохимическим способом, делающим возможной полуколичественную оценку экспрессии белка TK1 для каждой опухолевой клетки в виде оценочного балла на основе интенсивности окрашивания. Можно использовать известный способ детекции. Оценочный балл на основе интенсивности окрашивания в настоящем изобретении предпочтительно является двухступенчатой оценкой, включающей 0 (неокрашенный) и 1+ (окрашивание), или четырехступенчатой оценкой, включающей 0 (неокрашенный), 1+ (слабое окрашивание), 2+ (умеренное окрашивание) и 3+ (сильное окрашивание). Четырехступенчатую оценку можно осуществлять, например, в соответствии с четырехступенчатой оценкой интенсивности экспрессии белка HER2 по Histopathology 2008; 52: 797-805.

Биологический образец получают в виде образцов тканевых срезов из тканей или органов, полученных биопсией, подвергая способу, подходящему для способа детекции. Кроме того, образцы тканевых срезов могут являться, например, свежими, замороженными, или фиксированными формалином, спиртом, ацетоном или иным образом и/или погруженными в парафин и депарафинизированными. Предпочтительно, один из серийных срезов из фиксированных формалином, погруженных в парафин блоков окрашивают гематоксилином и эозином (HE) заранее, злокачественные клетки отличают от нормальных клеток с учетом формы клеток, и только части опухолевых клеток используют для оценки по настоящему изобретению. В качестве отрицательных или положительных контролей интенсивности окрашивания можно использовать фиксированные формалином, погруженные в парафин клеточные линии (несколько типов линий, уровни экспрессии белка в которой известны заранее). В отсутствие контрольных образцов одновременно оценивают множество образцов для подтверждения общего распределения интенсивности окрашивания образцов, а затем можно устанавливать интенсивность окрашивания. Что касается оцениваемых участков, желательно оценивать целый образец; однако, можно оценивать только одно репрезентативное поле.

Используемое для оценки антитело, специфически распознающее белок TK1, может являться моноклональным антителом или поликлональным антителом или может являться фрагментом антитела, таким как Fab-фрагмент или F(ab')2-фрагмент. Вид хозяина антитела, в частности, не ограничен.

Кроме того, это антитело, как правило, можно получать известным способом с учетом информации об аминокислотной последовательности (GenBank ID: AAH07986) известного TK1 человека (например, Current protocols in Molecular Biology edit. Ausubel et al. (1987), Publish. John Wiley and Sons. Section 11.12-11.13). Например, если антитело по настоящему изобретению является поликлональным антителом, его можно получать, иммунизируя тестируемое животное указанным выше полипептидом, экспрессирующимся в E. coli и очищенным общепринятым способом, или полипептидом, синтезированным таким образом, что он имеет частичную аминокислотную последовательность указанного выше полипептида, общепринятым способом; и получая антитело из сыворотки иммунизированного животного общепринятым способом. Наоборот, например, если антитело по настоящему изобретению является моноклональным антителом, его можно получать, иммунизируя тестируемое животное указанным выше полинуклеотидом, экспрессирующимся в E. coli и т.д. и очищенным общепринятым способом, или полипептидом, синтезированным таким образом, что он имеет частичную аминокислотную последовательность указанного выше полинуклеотида, общепринятым способом; подвергая слиянию клетку селезенки, полученную из тестируемого животного, и миеломную клетку для синтеза гибридомной клетки; и получая антитело из гибридомной клетки. Альтернативно, можно использовать известное антитело против TK1 человека (Hybridoma. 2001; 20(1): 25-34).

Стадия (2) является стадией классификации оцениваемых опухолевых клеток на положительные клетки и отрицательные клетки с учетом результатов детекции на стадии (1) и вычисления процентной доли положительных клеток среди опухолевых клеток.

В настоящем изобретении положительные клетки относятся к опухолевым клеткам, в которых экспрессию белка TK1 подтверждают иммуногистохимическим способом. Конкретно, положительные клетки относятся к опухолевым клеткам, оцениваемым как 1+ в случае двухступенчатой оценки, или 2+ или 3+ в случае четырехступенчатой оценки, с учетом интенсивности окрашивания для каждой опухолевой клетки, полученной на стадии (1).

Стадия (3) является стадией прогнозирования того, что, когда процентная доля положительных клеток в опухолевых клетках составляет 30% или более, пациент, вероятно, в достаточной степени будет отвечать на химиотерапию с использованием противоопухолевого средства по настоящему изобретению, с учетом результатов вычисления, полученных на стадии (2). В настоящем изобретении порог (точка отсечения) процентной доли положительных клеток, используемый в качестве диагностического критерия, составляет 30%. Анализ, осуществляемый с использованием различных точек отсечения, включая представленные ниже примеры, показал, что эффект стратификации являлся наибольшим, когда точка отсечения составляла 30%, в терминах точности прогнозирования и терапевтического эффекта (увеличения общей выживаемости и т.д.).

Таким образом, можно прогнозировать терапевтический эффект химиотерапии с использованием противоопухолевого средства по настоящему изобретению в отношении пациента с колоректальным раком.

Настоящее изобретение также относится к терапевтическому способу, демонстрирующему исключительные терапевтические эффекты химиотерапии, такие как уменьшение размеров колоректального рака, супрессия пролиферации, пролонгирование выживаемости пациентов, а также супрессия рецидивирования колоректального рака после резекции опухолевой ткани, посредством введения противоопухолевого средства по настоящему изобретению пациенту, который, вероятно, в достаточной степени будет отвечать на химиотерапию с использованием противоопухолевого средства, как прогнозируют способом прогнозирования по настоящему изобретению. Настоящее изобретение относится к такому терапевтическому способу и форме применения противоопухолевого средства по настоящему изобретению.

Настоящее изобретение также относится к набору для прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с использованием противоопухолевого средства по настоящему изобретению в отношении пациента с колоректальным раком. Набор по настоящему изобретению соответствующим образом применяют для прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии способом прогнозирования по настоящему изобретению, описываемым выше.

Набор по настоящему изобретению отличается тем, что он содержит в качестве реагента антитело, специфически распознающее белок TK1. Набор по настоящему изобретению может содержать другие реагенты и/или оборудование для осуществления иммуногистохимического способа, такие как средства детекции антител, специфически распознающих белок TK1 (т.е. первичное антитело), отрицательные или положительные контроли интенсивности окрашивания и т.п. Например, можно использовать вторичное антитело в качестве средства для детекции первичного антитела. Вторичное антитело, при необходимости, можно метить ферментом, таким как пероксидаза или щелочная фосфатаза; флуоресцентным или люминесцентным веществом, таким как флуоресцеинизотиоцианат (FITC) или карбоксиметилиндоцианин (Cy3); или т.п. Если второе антитело метят ферментом, набор по настоящему изобретению, предпочтительно, дополнительно содержит хромогенный субстрат, такой как 3,3'-диаминобензидин (DAB) или 3,3',5,5'-тетраметилбензидин (TMB). Набор по настоящему изобретению может дополнительно содержать инструкции по применению, руководства или т.п., в которых описывают процедуры осуществления способа прогнозирования по настоящему изобретению.

Примеры

Ниже представлены примеры для более подробного иллюстрирования настоящего изобретения. Разумеется, настоящее изобретение не ограничено этими примерами.

Пример 1

Пациентов с прогрессирующим рецидивирующим колоректальным раком (169 случаев), являющихся устойчивыми или не переносящих стандартную терапию, включающую 5-FU, иринотекан и оксалиплатин, и имеющих анамнез лечения по меньшей мере из 2 схем лечения, разделяли на группу (112 случаев), которой вводили противоопухолевое средство, содержащее FTD и TPI в молярном отношении 1:0,5 (далее в настоящем описании обозначаемое как "группа введения комбинированного лекарственного средства FTD-TPI"), и группу плацебо (57 случаев). Не наблюдали значимых фоновых различий между этими двумя группами (включая процентную долю пациентов-мужчин (группа введения комбинированного лекарственного средства FTD-TPI: 57,1%; группа плацебо: 49,1%), средний возраст (группа введения комбинированного лекарственного средства FTD-TPI: 63; группа плацебо: 62), ECOG PS (Eastern Cooperative Oncology Group Performance Status) (группа введения комбинированного лекарственного средства FTD-TPI: 64,3%; группа плацебо: 61,4%) и процентную долю пациентов, имеющих анамнез лечения из 3 или более схем лечения (группа введения комбинированного лекарственного средства FTD-TPI: 84,8%; группа плацебо: 77,2%)). В группе введения комбинированного лекарственного средства FTD-TPI в течение 4-недельного курса введения комбинированное лекарственное средство FTD-TPI вводили дважды в сутки в количестве FTD 35 мг/м2 (на площадь поверхности тела)/дозу, т.е. 70 мг/м2 (на площадь поверхности тела)/день всего в сутки, со дня 1 по день 5 и со дня 8 по день 12. Этот режим введения считают одним курсом, и курс осуществляли повторно. С другой стороны, группе плацебо не вводили противоопухолевое средство, включая комбинированное лекарственное средство FTD-TPI.

Во всех случаях оценивали общую выживаемость (OS). Кроме того, получали поврежденные ткани для 145 случаев (группа введения комбинированного лекарственного средства FTD-TPI: 95 случаев, группа плацебо: 50 случаев) из всех случаев в качестве биологических образцов до введения лекарственного средства. После фиксации формалином осуществляли заливку в парафин и нарезали образцы на срезы 3-4 пм. После высушивания нарезанных образцов в устройстве для плавления парафина в течение ночи образцы депарафинизировали в ксилоле и этаноле. Кроме того, эндогенную пероксидазу блокировали обработкой 0,3% пероксида водорода/метанола и активировали антиген обработкой в автоклаве (в течение 10 минут) в 1 мМ ЭДТА (pH 8,0). После промывания водопроводной водой и промывания PBS (-) проводили реакцию с первичным антителом (поликлональным антителом кролика против TK1, распознающим аминокислотную последовательность на С-конце белка TK1 человека, представленную в SEQ ID NO: 1 (FKKASGQPAGPDNKENC); производимым Taiho Pharmaceutical Co., Ltd.) при комнатной температуре в течение ночи. Кроме того, после промывания PBS (-) проводили реакцию с полимерным реагентом, связанным с вторичным антителом и пероксидазой (Simple Stain MAX-PO (R), производимый Nichirei Biosciences Inc.), при комнатной температуре в течение 30 минут с последующим промыванием PBS (-). После проявления окраски с использованием раствора Simple Stain DAB (производимого Nichirei Biosciences Inc.), центральную часть окрашивали раствором гематоксилина Карраччи с последующей дегидратацией и пермеабилизацией, и образцы заключали в Malinol. Таким образом, получали TK1-окрашенные образцы.

Затем два патолога раздельно оценивали экспрессию белка TK1 в каждой опухолевой клетке под микроскопом в зависимости от интенсивности окрашивания цитоплазмы опухолевых клеток с использованием четырехступенчатой оценки, включающей 0 (неокрашенный), 1+ (слабое окрашивание), 2+ (умеренное окрашивание) и 3+ (сильное окрашивание). Для каждого случая вычисляли процентную долю опухолевых клеток, оцениваемых как 2+ или 3+, среди всех опухолевых клеток.

В таблице 1 показано количество случаев в каждой группе, если в качестве точки отсечения для классификации случаев на группу высокой экспрессии TK1 (высокой) и группу низкой экспрессии TK1 (низкой) использовали 20% или 30%. Кроме того, в таблице 2 показана медиана общей выживаемости и отношение рисков (HR) в группах высокой и низкой экспрессии при каждой точке отсечения. Значения P для оценки значимых различий между группами высокой и низкой экспрессии вычисляли с помощью логарифмического рангового критерия.

Если точка отсечения составляла 20%, медиана общей выживаемости группы высокой экспрессии TK1 в группе плацебо составляла 5,9 месяцев, в то время как медиана общей выживаемости группы высокой экспрессии TK1 в группе введения комбинированного лекарственного средства FTD-TPI составляла 7,8 месяцев. Наблюдали небольшое различие отношения рисков между группой введения комбинированного лекарственного средства FTD-TPI и группой плацебо. Наоборот, если точка отсечения составляла 30%, медиана общей выживаемости группы высокой экспрессии TK1 в группе плацебо составляла 7,7 месяцев, в то время как медиана общей выживаемости группы высокой экспрессии TK1 в группе введения комбинированного лекарственного средства FTD-TPI составляла 10,4 месяцев. Наблюдали значимое различие отношения рисков между группой введения комбинированного лекарственного средства FTD-TPI и группой плацебо.

Таблица 1
Точка
отсечения = 20%
Точка
отсечения = 30%
Всего
Высокая Низкая Высокая Низкая
Комбинированное лекарственное средство FTD-TPI 43 56 27 72 99
Плацебо 21 30 13 38 51
Всего 64 86 40 110 150

Таблица 2
Точка
отсечения = 20%
Точка
отсечения = 30%
Высокая Низкая Высокая Низкая
Комбинированное лекарственное средство FTD-TPI (N=99) 7,8 vs 9,0
HR=0,98
95%Cl [0,57, 1,68]
(p=0,93)
10,4 vs 7,7
HR=0,51
95%Cl [0,27, 0,97]
(p=0,04)
Плацебо (N=51) 5,9 vs 6,9
HR=1,16
95%Cl [0,59, 2,31]
(p=0,66)
4,9 vs 7,2
HR=1,56
95%Cl [0,63, 3,89]
(p=0,34)

Указанные результаты показали, что, хотя комбинированное лекарственное средство FTD-TPI являлось клинически применимым для пациентов с колоректальным раком независимо от экспрессии белка TK1, комбинированное лекарственное средство FTD-TPI, в частности, демонстрировало значимый исключительный терапевтический эффект в отношении пациентов, у которых процентная доля опухолевых клеток, оцениваемых как 2+ или 3+ в соответствии с экспрессией белка TK1, среди всех опухолевых клеток составляла 30% или более. Как правило, известно, что пациенты со злокачественными новообразованиями с высокой экспрессией TK1 имеют неблагоприятный прогноз, и этот терапевтический эффект является неожиданным результатом для специалиста в этой области.

1. Способ прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5, в отношении пациента с колоректальным раком, включающий следующие стадии (1)-(3):

(1) детекцию экспрессии белка TK1 способом иммуногистохимического окрашивания в опухолевых клетках, содержащихся в биологическом образце, полученном от пациента;

(2) классификацию опухолевых клеток на положительные клетки и отрицательные клетки с учетом результатов детекции, полученных на стадии (1), и вычисление процентной доли положительных клеток среди опухолевых клеток;

где положительные клетки оценивают как 2+ или 3+ на основании интенсивности окрашивания, а интенсивность окрашивания представляет собой четырехступенчатую оценку, включающую 0 (неокрашенный), 1+ (слабое окрашивание), 2+ (умеренное окрашивание) и 3+ (сильное окрашивание); и

(3) с учетом результатов вычисления, полученных на стадии (2), прогнозирование того, что, когда процентная доля составляет 30% или более, пациент будет отвечать на химиотерапию с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5.

2. Способ по п.1 или 2, где пациент с колоректальным раком является устойчивым к стандартной терапии или не переносит ее.

3. Способ лечения пациента с колоректальным раком, включающий:

(1) детекцию экспрессии белка TK1 способом иммуногистохимического окрашивания в опухолевых клетках, содержащихся в биологическом образце, полученном от пациента;

(2) классификацию опухолевых клеток на положительные клетки и отрицательные клетки с учетом результатов детекции, полученных на стадии (1), и вычисление процентной доли положительных клеток среди опухолевых клеток;

где положительные клетки оценивают как 2+ или 3+ на основании интенсивности окрашивания, а интенсивность окрашивания представляет собой четырехступенчатую оценку, включающую 0 (неокрашенный), 1+ (слабое окрашивание), 2+ (умеренное окрашивание) и 3+ (сильное окрашивание); и

(3) с учетом результатов вычисления, полученных на стадии (2), прогнозирование того, что, когда процентная доля составляет 30% или более, пациент будет отвечать на химиотерапию с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5; и

(4) введения противоопухолевого средства пациенту, который, как прогнозируют, вероятно, в достаточной степени будет отвечать на химиотерапию, на стадии (3).

4. Способ по п.3, где пациент с колоректальным раком является устойчивым к стандартной терапии или не переносит ее.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к медицине и касается способа на основе составленной с избыточностью комбинации данных для проверки присутствия или отсутствия агрессивного рака предстательной железы (PCa) у индивидуума, включающего этапы получения у указанного индивидуума биологического образца; анализа биомаркеров PCa и SNP, ассоциированных с PCa (SNPpc), в указанном биологическом образце; комбинирования полученных данных; определения корреляции указанного комбинированного значения с присутствием или отсутствием агрессивного PCa у указанного индивидуума.

Изобретение относится к медицине и предназначено для прогнозирования развития метастазов у больных раком молочной железы (РМЖ) на основе анализа экспрессии генов MAGEA2, MAGEB1 и XAGE3.

Изобретение относится к медицине, а именно к хирургии, онкологии, и может быть использовано для дифференциальной диагностики кистозных неоплазий поджелудочной железы.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к прогнозированию или мониторингу будущего или текущего ответа пациента, страдающего раком, на лечение агонистом TLR-9.

Изобретение относится к медицине и касается способа прогнозирования риска возникновения рака молочной железы или рака легких у женщины, которая не страдает раком, включающего определение уровня проэнкефалина или его фрагментов, состоящих по меньшей мере из 5 аминокислот, в общей воде организма, взятой у указанной женщины, и установление корреляции между указанным уровнем проэнкефалина (PENK) или его фрагментов и риском возникновения рака молочной железы или рака легких.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины, в частности, к онкологии и молекулярной биологии. Предложены набор реагентов и планшет для определения риска возникновения рецидива онкологических заболеваний молочной железы, включающие праймеры и зонды, специфичные по отношению к генам-маркерам ELOVL5, IGFBP6, TXNDC9.

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для обнаружения злокачественной опухоли, экспрессирующей CAPRIN-1.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложены способ и набор для определения наличия рака у субъекта, включающий определение концентрации Hsp90α в образце плазмы субъекта.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложены способ и набор для определения наличия рака у субъекта, включающий определение концентрации Hsp90α в образце плазмы субъекта.

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложены антитело и его антигенсвязывающий фрагмент, способные к специфическому связыванию с фолатным рецептором человека 1 (FOLR1).

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, а также к репродуктологии и может быть использовано для прогнозирования эффективности программ ЭКО.
Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, и касается оценки вклада плодовой тромбофилии в формирование суб- и декомпенсированных форм плацентарной недостаточности.

Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, и касается способа прогнозирования риска формирования суб- и декомпенсированной плацентарной недостаточности с исходом задержки роста плода.
Изобретение относится к медицине, а именно к ревматологии, и может быть использовано для диагностики поражения почек у больных системной красной волчанкой (СКВ). Для этого одновременно определяют уровень антител к ксантиноксидазе (анти-КО) в сыворотке крови и рассчитывают коэффициент КО/КДГ (активность ксантиноксидазы/активность ксантиндегидрогеназы).
Изобретение относится к медицине и раскрывает способ прогнозирования риска раннего развития профессиональной бронхиальной астмы. Способ характеризуется тем, что осуществляют определение в сыворотке крови уровня эозинофильного катионного протеина (ЭКП), выделение генетического материала, проведение полимеразной цепной реакции со специфическими праймерами, амплификацию последовательности в промоторной области гена супероксиддисмутазы MnSOD Т-58С и гена эпоксидгидролазы ЕРНХ1 Tyr-113His и при одновременном обнаружении неблагоприятной аллели С гена MnSOD Т-58С и неблагоприятной аллели С гена ЕРНХ1 Tyr-113His и уровня ЭКП выше 10 мкг/л прогнозируют риск развития профессиональной бронхиальной астмы у работника в течение 5-ти лет от начала работы с вредными производственными факторами сенсибилизирующего и раздражающего действия.
Изобретение относится к медицине и применимо в клинической нефрологии. Способ ранней диагностики повреждения почек у больных с начальной стадией хронической болезни почек путем определения в моче биомаркеров повреждения проксимальных канальцев NGAL и KIM-1 отличается тем, что прирост NGAL мочи более чем в 2,5 раза или прирост KIM-1 мочи более чем в 2 раза по сравнению с нормальными значениями может быть диагностическим маркером раннего повреждения проксимальных канальцев и тубулоинтерстиции почек у больных с хронической болезнью почек.

Изобретение относится к области медицины, в частности к способу прогнозирования индивидуального риска развития ожирения у человека на различные по продолжительности периоды жизни.
Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для подбора индивидуальных средств гигиены полости рта. Для осуществления способа индивидуального подбора средств гигиены полости рта у пациента осуществляют забор ротовой жидкости, очищают зубы механически без использования средств гигиены полости рта, определяют гидрофобность эмали зубов пациента методом «сидячей капли», из банка зубов, удаленных по медицинским показаниям, подбирают зубы, гидрофобность эмали которых соответствует гидрофобности эмали зубов пациента, зубы, предназначенные для исследования средств гигиены полости рта, очищают зубной щеткой средней жесткости с использованием соответствующего исследуемого средства гигиены, в качестве контроля используют зуб, не очищенный средством гигиены полости рта, зубы погружают в ротовую жидкость пациента и термостатируют при температуре 37°С, с интервалом исследования 1 час определяют время появления зубной бляшки на зубах и измеряют гидрофобность эмали зубов методом «сидячей капли», об эффективности средства гигиены полости рта судят по времени появления зубной бляшки и значению гидрофобности эмали по сравнению с контролем.
Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для подбора индивидуальных средств гигиены полости рта. Для осуществления способа индивидуального подбора средств гигиены полости рта у пациента осуществляют забор ротовой жидкости, очищают зубы механически без использования средств гигиены полости рта, определяют гидрофобность эмали зубов пациента методом «сидячей капли», из банка зубов, удаленных по медицинским показаниям, подбирают зубы, гидрофобность эмали которых соответствует гидрофобности эмали зубов пациента, зубы, предназначенные для исследования средств гигиены полости рта, очищают зубной щеткой средней жесткости с использованием соответствующего исследуемого средства гигиены, в качестве контроля используют зуб, не очищенный средством гигиены полости рта, зубы погружают в ротовую жидкость пациента и термостатируют при температуре 37°С, с интервалом исследования 1 час определяют время появления зубной бляшки на зубах и измеряют гидрофобность эмали зубов методом «сидячей капли», об эффективности средства гигиены полости рта судят по времени появления зубной бляшки и значению гидрофобности эмали по сравнению с контролем.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к способу выбора реципиента при пересадке трупной почки, включающему выявление антигенов HLA-A, HLA-B и HLA-DR, сопоставление эпитопов антигенов HLA-A и HLA-B потенциального реципиента и донора, а также выбор реципиента по полученным данным.
Изобретение относится к области медицины. Предложено применение композиции, содержащей уридин или фосфат уридина и докозагексаеновую кислоту и/или эйкозапентаеновую кислоту для получения продукта для улучшения памяти и/или лечения или предупреждения нарушения функции памяти, предпочтительно у субъекта с 24, 25 или 26 баллами по краткой шкале оценки психического статуса (MMSE), где композиция содержит фосфолипиды, холин, витамин Е, витамин С, селен, витамин В12, витамин В6 и фолиевую кислоту.

Настоящее изобретение относится к способу лечения пациента с колоректальным раком и способу прогнозирования терапевтического эффекта химиотерапии с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5, в отношении пациента с колоректальным раком, включающему следующие стадии: детекцию экспрессии белка TK1 способом иммуногистохимического окрашивания в опухолевых клетках, содержащихся в биологическом образце, полученном от пациента; классификацию опухолевых клеток на положительные клетки и отрицательные клетки с учетом результатов детекции, полученных на стадии, и вычисление процентной доли положительных клеток среди опухолевых клеток; и с учетом результатов вычисления, полученных на стадии, прогнозирование того, что, когда процентная доля составляет 30 или более, пациент будет отвечать на химиотерапию с использованием противоопухолевого средства, содержащего трифлуридин и типирацил гидрохлорид в молярном отношении 1:0,5. Изобретение обеспечивает химиотерапию с обеспечением более значимых эффектов пролонгирования выживаемости для пациентов с колоректальным раком. 2 н. и 2 з.п. ф-лы, 1 пр., 2 табл.

Наверх