Способ получения растительного средства, обладающего анксиолитическим и антидепрессивным действием

Изобретение относится к области фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства из растительного сырья, обладающего анксиолитическим и антидепрессивным действием. Способ получения средства, обладающего анксиолитическим и антидепрессивным действием, из травы котовника многонадрезанного путем экстрагирования растительного материала, при этом измельченный растительный материал подвергают гидродистилляции для получения эфирного масла в соотношении сырье:вода 1:(8-10) при нагревании в течение 30-40 мин и кипении в течение 60-80 мин, смесь растительного сырья и воды фильтруют и промывают на фильтре дополнительным объемом воды, составляющим 10-12% от взятого на гидродистилляцию, далее остаток растительного материала после гидродистилляции смешивают с 90% этанолом в соотношении сырье: экстрагент 1:(10-12), подвергают смесь ультразвуковой обработке частотой 50 кГц при 70°С в течение 45-60 мин, смесь фильтруют и промывают на фильтре дополнительным объемом 60% этанола, составляющим 20-25% от взятого на этанольную экстракцию, водное и спиртовое извлечения концентрируют в вакууме до 1/4-1/6 от первоначального объема, сконцентрированные этанольное и водное извлечения объединяют, высушивают, измельчают, добавляют эфирное масло, полученное при гидродистилляции, и перемешивают. Вышеописанный способ способствует получению средства из травы котовника многонадрезанного, обладающего повышенным антиоксилитическим и антидепрессивным действием. 7 табл., 3 пр.

 

Изобретение относится к области фармации и касается способа получения средства из растительного сырья, обладающего анксиолитическим и антидепрессивным действием.

Биологически активные соединения растительных видов семейства Lamiaceae обладают широким спектром биологической активности, включая действие на нервную систему (анксиолитическое, антиноцицептивное, антиконвульсантное) [1]. Химической особенностью видов рода Котовник, входящего в данное семейство, является их способность к накоплению отдельных соединений, обладающих анксиолитическим и антидепрессивным действием, в том числе производных лютеолина [2], розмариновой кислоты [3] и пулегона [4]. На территории Восточной Сибири широко распространен котовник многонадрезанный (Nepeta multifida L., синоним Schizonepeta multifida (L.) Briq.), в составе которого присутствуют указанные соединения. К настоящему времени не существует экстракционных препаратов из котовника многонадрезанного, обладающих анксиолитическим и антидепрессивным действием. Данный растительный вид входит в состав 10-компонентного средства «Таблетки для ума» в виде травы (необработанного сырья), что указывает на обедненный состав готового продукта [5]. Также известен способ получения 21-компонентного средства, содержащего котовник многонадрезанный, в виде жидкого экстракта на 20% этаноле, полученного в результате настаивания при комнатной температуре [6]. Использованный способ неинтенсивной экстракции растительного сырья и низкое содержание котовника многонадрезанного в общей растительной смеси свидетельствует о невысоком содержании действующих веществ в готовом продукте.

Задачей изобретения является создание суммарного растительного препарата, содержащего фенольные соединения и монотерпены, а также повышение анксиолитического и антидепрессивного действия средства за счет более высокого содержания действующих веществ.

Техническим результатом изобретения является повышенное анксиолитическое и антидепрессивное действие средства из надземной части котовника многонадрезанного, полученного заявленным способом.

Для достижения указанного технического результата измельченный растительный материал (траву котовника многонадрезанного) помещают в перегонную колбу аппарата для гидродистилляции, приливают воду в соотношении сырье : вода 1:(8-10) и нагревают до кипения в течение 30-40 мин. По истечении указанного времени начинается процесс отгонки эфирного масла, которое собирается в приемник в течение 60-80 мин. После этого смесь растительного сырья и воды из перегонной колбы фильтруют в сборник, промывая остаток растительного сырья на фильтре дополнительным объемом воды (10-12% от взятого на гидродистилляцию). Далее растительное сырье заливают 90% этанолом в соотношении сырье : экстрагент 1:(10-12) и подвергают смесь ультразвуковой обработке частотой 50 кГц при 70°С в течение 45-60 мин. Извлечение фильтруют в сборник, промывая остаток растительного сырья на фильтре дополнительным объемом 60% этанола (20-25% от взятого на этанольную экстракцию). Водное и спиртовое извлечения концентрируют в вакууме до 1/4-1/6 от первоначального объема. Сгущенные экстракты, полученные от водной и этанольной экстракций, объединяют, высушивают в вакуум-сушильном шкафу и измельчают на мельнице пропеллерного типа. После этого к измельченному сухому экстракту добавляют эфирное масло, полученное в результате гидродистилляции, и перемешивают на мельнице пропеллерного типа. Выход готового продукта (сухого экстракта) составляет 34.9-36.2% от массы растительного сырья.

Выявленные отличительные признаки позволяют сделать вывод о соответствии предлагаемого технологического решения критерию “новизна”.

Предложенный способ позволяет получить сухой экстракт (далее - средство) в виде рассыпчатого негигроскопичного порошка темно-коричневого цвета с горьким вкусом и выраженным специфическим запахом. Потеря массы при высушивании - 3-5%.

Способ иллюстрируется нижеследующими примерами.

Пример 1. 39.59 кг цветков котовника многонадрезанного с влажностью 3.1% измельчают на мельнице до размера частиц диаметром 2-3 мм. 39 кг измельченного сырья загружают в перегонную колбу аппарата для гидродистилляции вместимостью 450 л, приливают 312 л воды и нагревают до кипения в течение 30 мин. По истечении указанного времени начинается процесс отгонки эфирного масла, которое собирается в приемник в течение 60 мин. Получают 1.25 кг эфирного масла (3.2% от массы растительного сырья) с плотностью 1.100 г/см3. Смесь растительного сырья и воды из перегонной колбы фильтруют через сукно в сборник, промывая остаток растительного сырья на фильтре 31 л воды. В результате получено 232 л водного экстракта с плотностью 0.992 г/см3, который концентрируют в вакууме до объема 46.4 л (плотность концентрата 1.128 г/см3). Отгон воды объемом 181 л далее может быть повторно использован на стадиях гидродистилляции и экстракции растительного сырья. Растительное сырье после фильтрования переносят в экстракционный аппарат с мешалкой и внешним паровым обогревателем и заливают 468 л 90% этанола. Полученную смесь перемешивают, вносят стержневой ультразвуковой процессор и обрабатывают смесь ультразвуком мощностью 50 кГц в импульсном режиме при температуре 70°С в течение 60 мин. После этого ультразвуковой процессор удаляют и смесь фильтруют через сукно в сборник, промывая остаток растительного сырья на фильтре 94 л 60% этанола. В результате получено 554 л этанольного экстракта с плотностью 0.899 г/см3, который концентрируют в вакууме до объема 92 л (плотность концентрата 1.034 г/см3). Отгон этанола объемом 462 л (плотность 0.850 г/см3) далее может быть повторно использован на стадии экстракции растительного сырья. Полученные концентраты после водной и этанольной экстракций объединяют (объем объединенного концентрата 135 л, плотность 1.067 г/см3), сушат в вакуум-сушильном шкафу при температуре 55°С и давлении 0.1 атм в течение 10 часов и измельчают на мельнице пропеллерного типа. Получают 12.81 кг полупродукта, что составляет 32.8% от массы растительного сырья. Далее к полупродукту добавляют 1.25 кг эфирного масла, полученного методом гидродистилляции. Получают 14.06 кг готового продукта (средства), что составляет 36.0% от массы растительного сырья. Средство представляет собой рассыпчатый негигроскопичный порошок, темно-коричневого цвета, с горьким вкусом и выраженным специфическим запахом. Потеря массы при высушивании составляет 3.1%. Шрот растительного сырья массой 142 кг и влажностью 82.4% далее не используют и направляют в отвал.

Пример 2. 45.72 кг листьев котовника многонадрезанного с влажностью 4.6% измельчают на мельнице до размера частиц диаметром 2-3 мм. 45 кг измельченного сырья загружают в перегонную колбу аппарата для гидродистилляции вместимостью 600 л, приливают 450 л воды и нагревают до кипения в течение 40 мин. По истечении указанного времени начинается процесс отгонки эфирного масла, которое собирается в приемник в течение 80 мин. Получают 0.32 кг эфирного масла (0.71% от массы растительного сырья) с плотностью 1.114 г/см3. Смесь растительного сырья и воды из перегонной колбы фильтруют через сукно в сборник, промывая остаток растительного сырья на фильтре 54 л воды. В результате получено 274 л водного экстракта с плотностью 0.998 г/см3, который концентрируют в вакууме до объема 68.5 л (плотность концентрата 1.122 г/см3). Отгон воды объемом 195 л далее может быть повторно использован на стадиях гидродистилляции и экстракции растительного сырья. Растительное сырье после фильтрования переносят в экстракционный аппарат с мешалкой и внешним паровым обогревателем и заливают 450 л 90% этанола. Полученную смесь перемешивают, вносят стержневой ультразвуковой процессор и обрабатывают смесь ультразвуком мощностью 50 кГц в импульсном режиме при температуре 70°С в течение 45 мин. После этого ультразвуковой процессор удаляют и смесь фильтруют через сукно в сборник, промывая остаток растительного сырья на фильтре 112 л 60% этанола. В результате получено 562 л этанольного экстракта с плотностью 0.871 г/см3, который концентрируют в вакууме до объема 94 л (плотность концентрата 1.039 г/см3). Отгон этанола объемом 465 л (плотность 0.852 г/см3) далее может быть повторно использован на стадии экстракции растительного сырья. Полученные концентраты после водной и этанольной экстракций объединяют (объем объединенного концентрата 162.5 л, плотность 1.091 г/см3), сушат в вакуум-сушильном шкафу при температуре 55°С и давлении 0.1 атм в течение 10 часов и измельчают на мельнице пропеллерного типа. Получают 15.98 кг полупродукта, что составляет 35.5% от массы растительного сырья. Далее к полупродукту добавляют 0.32 кг эфирного масла, полученного методом гидродистилляции. Получают 16.30 кг готового продукта (средства), что составляет 36.2% от массы растительного сырья. Средство представляет собой рассыпчатый негигроскопичный порошок, темно-коричневого цвета, с горьким вкусом и выраженным специфическим запахом. Потеря массы при высушивании составляет 3.6%. Шрот растительного сырья массой 158 кг и влажностью 81.8% далее не используют и направляют в отвал.

Пример 3. 40.6 кг травы котовника многонадрезанного с влажностью 4.3% измельчают на мельнице до размера частиц диаметром 2-3 мм. 40 кг измельченного сырья загружают в перегонную колбу аппарата для гидродистилляции вместимостью 600 л, приливают 360 л воды и нагревают до кипения в течение 35 мин. По истечении указанного времени начинается процесс отгонки эфирного масла, которое собирается в приемник в течение 70 мин. Получают 0.74 кг эфирного масла (1.84% от массы растительного сырья) с плотностью 1.102 г/см3. Смесь растительного сырья и воды из перегонной колбы фильтруют через сукно в сборник, промывая остаток растительного сырья на фильтре 40 л воды. В результате получено 220 л водного экстракта с плотностью 0.995 г/см3, который концентрируют в вакууме до объема 45 л (плотность концентрата 1.125 г/см3). Отгон воды объемом 172 л далее может быть повторно использован на стадиях гидродистилляции и экстракции растительного сырья. Растительное сырье после фильтрования переносят в экстракционный аппарат с мешалкой и внешним паровым обогревателем и заливают 440 л 90% этанола. Полученную смесь перемешивают, вносят стержневой ультразвуковой процессор и обрабатывают смесь ультразвуком мощностью 50 кГц в импульсном режиме при температуре 70°С в течение 50 мин. После этого ультразвуковой процессор удаляют и смесь фильтруют через сукно в сборник, промывая остаток растительного сырья на фильтре 97 л 60% этанола. В результате получено 532 л этанольного экстракта с плотностью 0.882 г/см3, который концентрируют в вакууме до объема 89 л (плотность концентрата 1.035 г/см3). Отгон этанола объемом 441 л (плотность 0.851 г/см3) далее может быть повторно использован на стадии экстракции растительного сырья. Полученные концентраты после водной и этанольной экстракций объединяют (объем объединенного концентрата 134 л, плотность 1.065 г/см3), сушат в вакуум-сушильном шкафу при температуре 55°С и давлении 0.1 атм в течение 10 часов и измельчают на мельнице пропеллерного типа. Получают 13.20 кг полупродукта, что составляет 35.5% от массы растительного сырья. Далее к полупродукту добавляют 0.74 кг эфирного масла, полученного методом гидродистилляции. Получают 13.94 кг готового продукта (средства), что составляет 34.9% от массы растительного сырья. Средство представляет собой рассыпчатый негигроскопичный порошок, темно-коричневого цвета, с горьким вкусом и выраженным специфическим запахом. Потеря массы при высушивании составляет 3.8%. Шрот растительного сырья массой 134 кг и влажностью 80.6% далее не используют и направляют в отвал.

Химический состав средства

На предварительно этапе исследования нами был изучен химический состав средства с применением метода ВЭЖХ-УФ [7]. Идентификацию соединений проводили по данным хроматографической подвижности, спектров поглощения, спектральных отношений и метода добавок. В результате в трех образцах средства, полученных из цветков, листьев и травы котовника многонадрезанного, было установлено присутствие шести флавоноидов - лютеолин-7-О-рутинозида, лютеолин-7-О-глюкуронида, лютеолин-7-О-глюкозида, апигенин-7-О-рутинозида, апигенин-7-О-глюкуронида, апигенин-7-О-глюкозида, и четырех фенилпропаноидов - 3-О-кофеилхинной кислоты, розмариновой кислоты, сальвианоловых кислот А и В. Также в сухом экстракте было выявлено присутствие пулегона - основного компонента эфирного масла. Все упомянутые соединения были ранее обнаружены в растительных видах рода Котовник [8].

Таблица 1

Химический состав средства, мг/г

Соединение Тип растительного сырья
цветки листья трава
лютеолин-7-О-глюкуронид 35.70 ± 0.90 40.17 ± 0.92 38.11 ± 0.92
розмариновая кислота 54.21 ± 1.24 57.98 ± 1.38 55.63 ± 1.29
пулегон 62.23 ± 1.49 19.63 ±0.47 37.14 ± 0.96

С использованием метода количественной ВЭЖХ-УФ было показано, что лютеолин-7-О-глюкуронид, розмариновая кислота и пулегон являются доминирующими компонентами, содержание которых в сухих экстрактах составило 35.70-40.17, 54.21-57.98 и 19.63-62.23 мг/г соответственно (таблица 1).

Количественный анализ и показатели качества средства

Для осуществления химической стандартизации средства разработаны методика количественного анализа лютеолин-7-О-глюкуронида, розмариновой кислоты и пулегона в средстве методом ВЭЖХ-УФ.

Методика количественного анализа лютеолин-7-О-глюкуронида, розмариновой кислоты и пулегона в средстве методом ВЭЖХ. Испытуемый раствор. 20 мг средства помещают в пластиковую пробирку типа Эппендорф вместимостью 2 мл, прибавляют 1 мл 70% этанола и растворяют в ультразвуковой ванне при 30°С в течение 15 мин. Охлаждают и центрифугируют при 3000 об/мин 10 мин. Надосадочную жидкость фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0.45 мкм.

Раствор сравнения. 1 мг лютеолин-7-О-глюкуронида, 1 мг розмариновой кислоты и 1 мг пулегона растворяют в метаноле и доводят до объема 5 мл этим же растворителем.

Условия хроматографирования:

- колонка длиной 75 мм и внутренним диаметром 2 мм, заполненная силикагелем октадецилсилильным для хроматографии с размером частиц 5 мкм;

- температура: 35°С;

- подвижная фаза:

-- подвижная фаза А: 21 г/л лития перхлората раствор в 1 г/л кислоте перхлорной;

-- подвижная фаза В: ацетонитрил;

- спектрофотометрический детектор, длина волны 210 нм;

- время уравновешивания системы: 3 мин перед каждым вводом (5% В);

- объем вводимой пробы: 1 мкл.

- программа градиентного режима элюирования представлена в таблице 2.

Таблица 2

Программа градиентного режима элюирования

Время (мин) Подвижная фаза А (%, об/об) Подвижная фаза В (%, об/об) Скорость подвижной фазы (мкл/мин)
0 - 15 80 → 50 20 → 50 150

Результаты: на хроматограмме должно быть три основных пика, совпадающих по подвижности с веществами в растворе сравнения (лютеолин-7-О-глюкуронид, розмариновая кислота, пулегон).

Порядок выхода пиков раствора сравнения: лютеолин-7-О-глюкуронид → розмариновая кислота → пулегон.

Пригодность хроматографической системы. Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются следующие условия: разрешение между пиками лютеолин-7-О-глюкуронида и розмариновой кислоты не менее 2.

Расчет: содержание соединения в средстве в процентах (X) вычисляют по формуле:

,

где S - площадь пика соединения в исследуемом растворе; m - масса навески средства, г; SS - площадь пика соединения в растворе сравнения; mS - масса навески соединения, г.

Метрологический анализ разработанных методик показал, что относительная ошибка определения лютеолин-7-О-глюкуронида, розмариновой кислоты и пулегона методом ВЭЖХ не превышает 2% (таблица 3). Полученные результаты свидетельствуют об удовлетворительных валидационных параметрах методик, что указывает на возможность их использования в практике фармакопейного анализа для определения показателей качества разработанного средства.

Таблица 3

Метрологические характеристики методик количественного анализа

, мг/г S2 Sx ±Δ, % E, %
Лютеолин-7-О-глюкуронид. ВЭЖХ (n = 5, P = 0.95, tP,f = 2.78)
38.11 0.32 0.25 0.70 1.84
Розмариновая кислота. ВЭЖХ (n = 5, P = 0.95, tP,f = 2.78)
55.63 0.46 0.30 0.85 1.52
Пулегон. ВЭЖХ (n = 5, P = 0.95, tP,f = 2.78)
37.14 0.35 0.26 0.73 1.97

По данным проведенных исследований определены общие показатели качества средства, обобщенные в таблице 4. Для стандартизации средства было предложено определение внешнего вида, подлинности (присутствие изопулегона), потери в массе при высушивании, золы сульфатной, тяжелых металлов, количественное определение лютеолин-7-О-глюкуронида, розмариновой кислоты и пулегона (ВЭЖХ) и микробиологической чистоты.

Таблица 4

Показатели качества средства

Показатель Метод Норма
Описание, внешние признаки Визуальный,
органолептический
Рассыпчатый негигроскопичный порошок, цвет от коричневого до темно-коричневого, запах выраженный специфический, вкус 0.01% водного раствора - выраженный, горький.
Подлинность:
- изопулегон.
ВЭЖХ На хроматограмме должен присутствовать пик, совпадающий по подвижности с таковым изопулегона.
Потеря в массе при высушивании Гравиметрический Не более 5%
Зола сульфатная Гравиметрический Не более 0.1%
Тяжелые металлы Спектро-фотометрический Не более 0.01%
Количественное
определение:
- лютеолин-7-О-глюкуронид;
- розмариновая кислота;
- пулегон.
ВЭЖХ
ВЭЖХ
ВЭЖХ
Не менее 3%
Не менее 5%
Не менее 1.5%
Микробиологическая чистота Бактериологический Категория 3Б
Хранение В защищенном от света месте при температуре 12-15°С
Срок годности 5 лет

Предлагаемый способ, по сравнению с известным, позволяет получить препарат постоянного состава с более выраженной активностью за счет более высокого содержания действующих веществ (фенольных соединений и монотерпеноидов).

Рассчитать экономическую целесообразность предлагаемого способа в настоящее время не представляется возможным, однако вышеуказанные преимущества в сочетании с простой схемой получения способствуют рациональному использованию лекарственного растительного сырья и определяют перспективность внедрения данного способа в фармацевтическую промышленность.

Фармакотерапевтические свойства средства.

Исследования выполнены на белых крысах линии Wistar с исходной массой 180-200 г. Содержание животных соответствовало «Правилам лабораторной практики» (GLP) и Приказу МЗ РФ № 708Н от 23.08.2010 г. «Об утверждении правил лабораторной практики». Перед началом экспериментов животные, отвечающие критериям включения в эксперимент, распределялись на группы с учетом пола, возраста, массы и принципа рандомизации. Экспериментальную работу осуществляли в соответствии с «Правилами проведения работ с использованием экспериментальных животных» (Приложение к приказу МЗ СССР №755 от 12.08.77 г.), «Правилами, принятыми в Европейской конвенции по защите позвоночных животных (Страсбург, 1986). Средство в дозах 50, 100, 200 и 300 мг/кг и валерианы экстракт (препарат сравнения; Дальхимфарм) в дозе 120 мг/кг, вводили животным внутрижелудочно в форме водного раствора в объеме 10 мл/кг один раз в сутки в течение в течение 7 дней, последний раз за 30 мин до тестирования. Анксиолитическое действие средства исследовали согласно методическим указаниям [9] в тестах «приподнятый крестообразный лабиринт», «светлая/темная камера», «конфликтная ситуация в варианте Vogel», антидепрессивное действие - в тесте «поведенческого отчаяния по Порсолту». Статистическая обработка полученных результатов проводилась с помощью пакета программ «Biostat-2006» с использованием t-критерия Стьюдента. Различия между сравниваемыми группами считали статистически значимыми при р ≤ 0.05.

Анксиолитическое действие средства в тесте «приподнятый крестообразный лабиринт». Для проведения исследований животных помещали на центральную площадку приподнятого крестообразного лабиринта и в течение 5 мин регистрировали следующие показатели: время пребывания животных в открытых и закрытых рукавах, а также на центральной площадке, количество заходов в открытые и закрытые рукава, число свещиваний и вертикальных стоек, а также количество актов дефекации. Результаты тестирования животных в приподнятом крестообразном лабиринте показали, что контрольные животные предпочитают большую часть времени проводить в закрытых рукавах, чем открытых (таблица 5). Курсовое введение животным средства в дозах 100, 200 и 300 мг/кг и валерианы экстракта в дозе 120 мг/кг подавляло у крыс чувство страха открытого пространства, в результате чего количество заходов в открытые рукава установки в данных группах увеличилось в 6.0, 8.0, 4.0 и 7.0 раза, а время, проведенное в них в 7.2, 13.3, 1.9 и 12.3 раза, соответственно по сравнению с показателями контрольных животных. У животных данных опытных групп отмечалось статистически значимое увеличение времени нахождения на центральной площадке лабиринта по сравнению с контролем.

Таблица 5

Влияние средства и валерианы экстракта на поведение белых крыс в тесте «приподнятый крестообразный лабиринт»

Показатели Контрольная (Н2О), n=18 Опытная 1 (средство, 50 мг/кг), n=20 Опытная 2 (средство, 100 мг/кг), n=18 Опытная 3 (средство, 200 мг/кг), n=22 Опытная 4 (средство, 300 мг/кг), n=20 Опытная 5 (валерианы экстракт, 120 мг/кг), n=15
Количество заходов
закрытый рукав 1.2±0.1 1.2±0.1 1.8±0.2* 1.9±0.2* 1.6±0.3 1.7±0.2*
открытый рукав 0.1±0.0 0.1±0.0 0.6±0.1* 0.8±0.2* 0.4±0.2 0.7±0.2*
Время пребывания
закрытый рукав 291.4±2.1 290.1±2.7 273.6±6.3* 256.7±10.7* 277.9±8.7 256.2±8.5*
открытый рукав 1.9±1.0 2.4±1.2 13.7±3.7 25.2±8.1* 4.5±2.2 23.3±7.5*

центральная площадка 6.7±1.5 7.6±2.0 12.8±2.4 18.1±3.4* 17.6±6.4 20.5±2.6*
Количество
свешиваний 0 0.1±0.0 0.2±0.0 0.3±0.1 0 0.3±0.1
вертикальных стоек 2.4±0.4 2.5±0.4 3.9±0.6 4.5±0.9 3.9±0.5 4.7±1.1
актов дефекации 1.9±0.1 0.8±0.3 1.2±0.3 0.7±0.2* 0.5±0.2* 0.5±0.2

Примечание: * - различия статистически значимы при р≤0.05 между данными контрольной и опытной групп; n - число животных в группе.

Применение испытуемого средства в дозе 50 мг/кг не вызывало значимых изменений количества заходов в открытые и закрытые рукава лабиринта, при этом у животных первой опытной группы отмечалась тенденция к увеличению времени проведения в открытых рукавах установки. Проведенные исследования показали, что использование средства и валерианы экстракта вызывает увеличение общей двигательной активности животных в данном тесте (таблица 5). Так у животных, получавших средство в дозах 100, 200 и 300 мг/кг и валерианы экстракт в дозе 120 мг/кг, количество заходов в закрытые рукава лабиринта увеличилось на 50, 58, 33 и 42% по сравнению с показателем контрольных животных.

Вертикальная активность у животных на фоне введения средства в дозах 100 и 300 мг/кг повысилась в 1.6 раза, при применении испытуемого средства в дозе 200 мг/кг и валерианы экстракта - в 1.9 раза по отношению к контролю. В опытных групп отмечались свешивания животных с установки, тогда как в контрольной группе ни одно животное не выполняло данное действие. Увеличение исследовательской активности и понижение чувства страха и тревоги у животных опытных групп можно объяснить снижением у них уровня эмоциональности (таблица 5). Так, у животных опытных групп количество актов дефекаций было ниже такового показателя контрольных животных в среднем в 1.6 раза. Таким образом, средство в диапазоне доз 100-300 мг/кг оказывает выраженное анксиолитическое действие в условиях ненаказуемого поведения, увеличивая количество заходов и время пребывания животных в открытых рукавах приподнятого крестообразного лабиринта. Данный эффект сопоставим с таковым у препарата сравнения - валерианы экстрактом.

Анксиолитическое действие средства в тесте «светлая/темная камера». Результаты тестирования животных в тесте «светлая/темная камера» показали, что контрольные животные предпочитают большую часть времени проводить в темном отсеке установки (таблица 6). Курсовое введение животным средства в дозах 50, 100 и 200 мг/кг угнетало чувство страха и тревоги, о чем свидетельствовало увеличение количества переходов между камерами на 69, 54 и 62% и времени пребывания животных в светлом отсеке установки на 56, 58 и 88% соответственно по сравнению с таковыми показателями животных контрольной группы (таблица 6). Таким образом, средство в диапазоне доз 50-200 мг/кг оказывает выраженное анксиолитическое действие в условиях ненаказуемого поведения, увеличивая количество переходов и время пребывания в светлом отсеке «светлой/темной» камеры. Данный эффект сопоставим с таковым у препарата сравнения - валерианы экстрактом.

Таблица 6

Влияние средства и валерианы экстракта на поведение белых крыс в тесте «светлая/темная камера»

Группы животных Показатели
Количество переходов Время пребывания в светлом отсеке, сек
Контрольная (Н2О), n=13 1.3 ± 0.1 39.5 ± 8.7
Опытная 1 (средство, 50 мг/кг), n=12 2.2 ± 0.5 61.5 ± 17.2
Опытная 2 (средство, 100 мг/кг), n=13 2.0 ± 0.3 62.4 ± 17.4
Опытная 3 (средство, 200 мг/кг), n=12 2.1 ± 0.3* 74.1 ± 16.1
Опытная 4 (валерианы экстракт, 120 мг/кг), n=11 2.2 ± 0.6 69.5 ± 13.5

Примечание: * - различия статистически значимы при р≤0.05 между данными контрольной и опытной групп; n - число животных в группе.

Анксиолитическое действие средства в тесте «конфликтная ситуация по Vogel». Конфликтную ситуацию создавали, сталкивая питьевую и оборонительную мотивации, путем подавления болевым электрическим раздражителем питьевого рефлекса при потреблении крысами воды из чашки. Об анксиолитическом влиянии средства судили по числу наказуемых взятий воды животным за 3 мин нахождения в камере. Установлено, что курсовое введение животным средства в диапазоне доз 100-300 мг/кг устраняло чувство тревоги и страха, увеличивая число наказуемых взятий воды в среднем в 3.3 раза по сравнению с таковым показателем у контрольных животных (таблица 7).

Таблица 7

Влияние средства и валерианы экстракта на поведение белых крыс в тесте «конфликтная ситуация по Vogel» (А) и тесте «поведенческого отчаяния по Порсолту» (Б)

Группы животных А: Количество взятий воды Б: Время иммобильности, сек
Контрольная (Н2О), n=12 0.7 ± 0.2 94.9 ± 5.8
Опытная 1 (средство, 50 мг/кг), n=14 1.3 ± 0.2 78.3 ± 3.1
Опытная 2 (средство, 100 мг/кг), n=14 2.4 ± 0.2* 62.7 ± 4.3*
Опытная 3 (средство, 200 мг/кг), n=14 2.2 ± 0.1* 71.4 ± 3.8*
Опытная 4 (средство, 300 мг/кг), n=14 2.0 ± 0.2* -
Опытная 5 (валерианы экстракт, 120 мг/кг), n=14 1.4 ± 0.1 98.1 ± 6.9

Примечание: * - различия статистически значимы при р ≤ 0.05 между данными контрольной и опытной групп; n - число животных в группе.

У животных, получавших средство в дозе 50 мг/кг и препарат сравнения валерианы экстракт, данный показатель повысился по отношению к контролю в 2.0 раза. Таким образом, полученные данные свидетельствуют, что введение животным средства в диапазоне доз 50-300 мг/кг оказывает выраженное анксиолитическое действие в условиях наказуемого поведения, достоверно увеличивая количество взятий воды в методике «конфликтная ситуация по Vogel». При этом средство в дозах 100-300 мг/кг по эффективности превосходит валерианы экстракт.

Антидепрессивное действие средства в тесте «поведенческого отчаяния по Порсолту». Антидепрессивное действие средства исследовали в тесте «поведенческого отчаяния по Порсолту». Определяли время иммобилизации животных в течение 6 мин. Установлено, что введение крысам средства в дозах 50, 100 и 200 мг/кг снижает время иммобилизации животных в тесте «поведенческого отчаяния» на 17, 34 и 25% соответственно по сравнению с аналогичным показателем животных контрольной группы (таблица 7). Использование валерианы экстракта не оказывало влияние на поведение животных в данном тесте. Таким образом, полученные данные позволяют заключить, что средство во всех исследуемых дозах оказывает антидепрессивное действие, превосходящее таковое препарата сравнения.

Источники информации

1. Carović-Stanko K., Petek M., Grdiša M., Šatović Z. Medicinal plants of the family Lamiaceae as functional foods // Czech Journal of Food Sciences. - 2016. - Vol. 34. - P. 377-390. doi: 10.17221/504/2015-CJFS.

2. Trivellini A., Lucchesini M., Maggini R., Mosadegh H., Salomè T. Lamiaceae phenols as multifaceted compounds: bioactivity, industrial prospects and role of “positive-stress” // Industrial Crops and Products. - 2016. - Vol. 83. - P. 241-254. doi: 10.1016/j.indcrop.2015.12.039.

3. Takeda H., Tsuji M., Inazu M., Matsumiya T. Rosmarinic acid and caffeic acid produce antidepressive-like effect in forced swimming test in mice // European Journal of Pharmacology. - 2002. - Vol. 449. - P. 261-267. doi: 10.1016/S0014-2999(02)02037-X.

4. de Sousa D.P., Nóbrega F.F., de Lima M.R., de Almeida R.N. Pharmacological activity of (R)-(+)-pulegone, a chemical constituent of essential oils // Zeitschrift für Naturforschung C. - 2011. - Vol. 66. - P. 353-359. PMID: 21950159.

5. Патент на изобретение RU(11)2429001(13)C1. Средство «Таблетки для ума». Опубликовано: 20.09.2011. Бюл. № 26. - прототип.

6. Патент на изобретение RU(11)2199334(13)C1. Средство "Прасковья". Опубликовано: 27.02.2003. Бюл. № 6. - прототип.

7. Olennikov D.N., Kashchenko N.I., Chirikova N.K. A novel HPLC-assisted method for investigation of the Fe2+-chelating activity of flavonoids and plant extracts // Molecules. - 2014. - Vol. 19. - P. 18296-18316. doi: 10.3390/molecules191118296.

8. Süntar I., Nabavi S.M., Barreca D., Fischer N., Efferth T. Pharmacological and chemical features of Nepeta L. genus: Its importance as a therapeutic agent // Phytotherapy Research. - 2018. - Vol. 32. - P. 185-198. doi: 10.1002/ptr.5946.

9. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. Часть первая / Под ред. А.Н. Миронова. - М.: Гриф и К, 2012. - 944 с.

Способ получения средства, обладающего анксиолитическим и антидепрессивным действием, из травы котовника многонадрезанного путем экстрагирования растительного материала, отличающийся тем, что измельченный растительный материал подвергают гидродистилляции для получения эфирного масла в соотношении сырье:вода 1:(8-10) при нагревании в течение 30-40 мин и кипении в течение 60-80 мин, смесь растительного сырья и воды фильтруют и промывают на фильтре дополнительным объемом воды, составляющим 10-12% от взятого на гидродистилляцию, далее остаток растительного материала после гидродистилляции смешивают с 90% этанолом в соотношении сырье:экстрагент 1:(10-12), подвергают смесь ультразвуковой обработке частотой 50 кГц при 70°С в течение 45-60 мин, смесь фильтруют и промывают на фильтре дополнительным объемом 60% этанола, составляющим 20-25% от взятого на этанольную экстракцию, водное и спиртовое извлечения концентрируют в вакууме до 1/4-1/6 от первоначального объема, сконцентрированные этанольное и водное извлечения объединяют, высушивают, измельчают, добавляют эфирное масло, полученное при гидродистилляции, и перемешивают.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к способу получения вещества, обладающего диуретической и антидепрессантной активностью.

Настоящее изобретение относится к сложному α-азари-лалдегидному эфиру, к способу его получения и к его применению. Химическая структура соответствующего сложного α-азари-лалдегидного эфира представлена формулой I.

Настоящее изобретение относится к производным индолкарбоксамида, которые модулируют нейрогенез, их фармацевтическим композициям и применению для лечения шизофрении, обсессивно-компульсивного расстройства личности, глубокой депрессии, биполярных расстройств, тревожных расстройств, естественного старения, эпилепсии, дегенеративных изменений сетчатки, травматического повреждения головного мозга, травмы спинного мозга, посттравматического стрессового расстройства, панического расстройства, болезни Паркинсона, деменции, болезни Альцгеймера, когнитивной недостаточности, индуцированной химиотерапией когнитивной дисфункции ("химический мозг"), синдрома Дауна, расстройств аутистического спектра, потери слуха, шума в ушах, спиноцеребеллярной атаксии, амиотрофического бокового склероза, рассеянного склероза, болезни Гентингтона, инсульта и нарушений, обусловленных лучевой терапией, хронического стресса или злоупотребления нейроактивными лекарственными средствами, выбранными из спирта, опиатов, метамфетамина, фенциклидина и кокаина.

Изобретение относится к комплексам агомелатина и сульфокислот формулы (I), где х представляет собой 0 или 1 и RSO3H представляет собой 1,5-нафталиндисульфоновую кислоту или бензолсульфоновую кислоту, которые обладают хорошей растворимостью и стабильностью и могут найти применение для лечения нарушений мелатонинергической системы.

Настоящее изобретение относится к способу получения замещенных 4-арил-гексагидро-7H-имидазоло[1,5-b][1,2]оксазин-7-онов общей формулы: проявляющих ингибирующую активность в отношении фосфодиэстеразы подтипа 4.

Группа изобретений относится к медицине и касается конъюгата, включающего по меньшей мере один агент селективности, специфично связывающийся с по меньшей мере одним переносчиком нейромедиатора и выбранный из группы, включающей селективный ингибитор обратного захвата серотонина (СИОЗС), ингибитор обратного захвата норадреналина (ИОЗН), ингибитор обратного захвата норэпинефрина и дофамина (ИОЗНД) и ингибитор обратного захвата серотонина, норэпинефрина и дофамина (ИОЗСНД), и по меньшей мере одну нуклеиновую кислоту, выполненную с возможностью специфично связываться с молекулой-мишенью, экспрессируемой в клетке, в которой экспрессируется переносчик нейромедиатора.

Группа изобретений относится к медицине. Предложены: применение композиции галактоолигосахаридов, содержащей дисахариды Gal (β1-3)-Glc; Gal (β1-3)-Gal; Gal (β1-6)-Gal; Gal (α1-6)-Gal; трисахариды Gal (β1-6)-Gal (β1-4)-Glc; Gal (β1-3)-Gal (β1-4)-Glc; тетрасахарид Gal (β1-6)-Gal (β1-6)-Gal (β1-4)-Glc и пентасахарид Gal (β1-6)-Gal (β1-6)-Gal (β1-6)-Gal (β1-4)-Glc, для профилактики или лечения эмоциональных расстройств при психоневрологических заболеваниях или старении и соответствующий способ профилактики или лечения.

Группа изобретений относится к применению питательной композиции, содержащей пищевое волокно, которое включает ксилан, пептид, имеющий 7 или больше аминокислотных единиц и являющийся источником триптофана, для профилактики или лечения расстройства: отрицательных эмоций и интровертного поведения; к применению комбинации вышеуказанного состава по тому же назначению и к питательной композиции того же состава с энергетической ценностью более 1,67 кДж/г.

Изобретение относится к 3-(2-морфолино-2-оксоэтокси)-7,8,9,10-тетрагидро-6Н-бензо[с]хромен-6-ону. Технический результат: получено новое соединение 3-(2-морфолино-2-оксоэтокси)-7,8,9,10-тетрагидро-6Н-бензо[с]хромен-6-он, обладающий анксиолитическими и антидепрессантными свойствами.

Настоящее изобретение относится к производным аминоциклобутана общей формулы (1) или его фармацевтически приемлемой соли, где X1 представляет собой атом водорода или атом фтора; Х2 представляет собой атом водорода, или атом фтора, или атом хлора; R1 представляет собой атом водорода, или атом фтора, или атом хлора, или метильную группу, или метоксигруппу, или цианогруппу; R2 представляют собой, независимо или оба, метильную группу или этильную группу.

Настоящее изобретение относится к сложному α-азари-лалдегидному эфиру, к способу его получения и к его применению. Химическая структура соответствующего сложного α-азари-лалдегидного эфира представлена формулой I.

Настоящее изобретение относится к производным индолкарбоксамида, которые модулируют нейрогенез, их фармацевтическим композициям и применению для лечения шизофрении, обсессивно-компульсивного расстройства личности, глубокой депрессии, биполярных расстройств, тревожных расстройств, естественного старения, эпилепсии, дегенеративных изменений сетчатки, травматического повреждения головного мозга, травмы спинного мозга, посттравматического стрессового расстройства, панического расстройства, болезни Паркинсона, деменции, болезни Альцгеймера, когнитивной недостаточности, индуцированной химиотерапией когнитивной дисфункции ("химический мозг"), синдрома Дауна, расстройств аутистического спектра, потери слуха, шума в ушах, спиноцеребеллярной атаксии, амиотрофического бокового склероза, рассеянного склероза, болезни Гентингтона, инсульта и нарушений, обусловленных лучевой терапией, хронического стресса или злоупотребления нейроактивными лекарственными средствами, выбранными из спирта, опиатов, метамфетамина, фенциклидина и кокаина.

Изобретение относится к соединению формулы (I), в которой А выбран из замещенного 3-12-членного циклогидрокарбила или гетероциклогидрокарбила или циклического гетерогидрокарбила, где указанный гетероциклогидрокарбил или циклический гетерогидрокарбил содержит 1 или 2 гетероатома в кольце, независимо выбранных из N и S; В выбран из С(=O); X представляет собой одинарную связь; D и L независимо выбраны из СН2; Т представляет собой С; М выбран из C(Y)(R1a), когда Q выбран из C(R1b)(R1c), или М выбран из C(R1b)(R1c), когда Q выбран из C(Y)(R1a); где А выбран из структурного звена, показанного в формуле (A1) или (А2), значения остальных радикалов указаны в формуле изобретения.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и медицине, а именно к созданию нового, малотоксичного (LD50 520 мг/кг), биологически активного вещества, обладающего анксиолитическим и ноотропным действием.

Группа изобретений относится к медицине. Предложены: применение композиции галактоолигосахаридов, содержащей дисахариды Gal (β1-3)-Glc; Gal (β1-3)-Gal; Gal (β1-6)-Gal; Gal (α1-6)-Gal; трисахариды Gal (β1-6)-Gal (β1-4)-Glc; Gal (β1-3)-Gal (β1-4)-Glc; тетрасахарид Gal (β1-6)-Gal (β1-6)-Gal (β1-4)-Glc и пентасахарид Gal (β1-6)-Gal (β1-6)-Gal (β1-6)-Gal (β1-4)-Glc, для профилактики или лечения эмоциональных расстройств при психоневрологических заболеваниях или старении и соответствующий способ профилактики или лечения.

Группа изобретений относится к применению питательной композиции, содержащей пищевое волокно, которое включает ксилан, пептид, имеющий 7 или больше аминокислотных единиц и являющийся источником триптофана, для профилактики или лечения расстройства: отрицательных эмоций и интровертного поведения; к применению комбинации вышеуказанного состава по тому же назначению и к питательной композиции того же состава с энергетической ценностью более 1,67 кДж/г.

Настоящее изобретение относится к пиразолопиридиновым производным формулы (I), в которой А представляет собой арил, выбранный из группы, состоящей из пиридила, фенила, пиразинила, пиридазинила, пиразола, триазола, индолила, бензимидазолила и изохинолинила; -В-С представляет собой -NR2-(C=O) или -(C=O)-NR2-, и остальные силволы и радикалы имеют значения, указанные в формуле изобретения.

Изобретение относится к новому 2-бензоиламино-N-[4-(4,6-диметилпиримидин-2-илсульфамоил)-фенил]-бензамиду формулы (I), обладающему анксиолитическим, актопротекторным и антидепрессивным действием.

Изобретение относится к соединению, представленному формулой (IA), где X1 и X2 являются одинаковыми или разными и означают атом азота или группу СН; Y означает любую структуру из следующей группы формул (а); n означает 1 или 2; R1 означает атом водорода, атом галогена или C1-6 алкильную группу; R2 означает триазолильную группу или пиримидинильную группу; R3 означает атом водорода или атом галогена; и R4 означает атом водорода или C1-6 алкильную группу; или его фармацевтически приемлемой соли.

Изобретение относится к соединениям, обладающим улучшенной эффективностью модулирования активности рецептора НМДА, и их фармацевтически приемлемым солям. Такие соединения предназначены для применения при лечении заболеваний и расстройств, таких как заболевания и расстройства познавательной способности, когнитивной деятельности, и аналгезии, в частности для облегчения и/или уменьшения невропатической боли.

Изобретение относится к области косметической промышленности, а именно к солнцезащитной композиции, содержащей компонент эмульгатора для эмульсий типа «масло в воде», включающий анионный эмульгатор в количестве 0,5-3,0 вес.%, и непрерывную водную фазу, в которой гомогенно распределена дисперсная масляная фаза, включающая солнцезащитный агент, который содержит линейный поглощающий ультрафиолетовое излучение простой полиэфир, химически связанный с УФ-поглощающим хромофором, выбираемый из: ,где ;или ,где ;или продукта реакции тетрадекаглицерилмоностеаратаи .

Изобретение относится к области фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства из растительного сырья, обладающего анксиолитическим и антидепрессивным действием. Способ получения средства, обладающего анксиолитическим и антидепрессивным действием, из травы котовника многонадрезанного путем экстрагирования растительного материала, при этом измельченный растительный материал подвергают гидродистилляции для получения эфирного масла в соотношении сырье:вода 1: при нагревании в течение 30-40 мин и кипении в течение 60-80 мин, смесь растительного сырья и воды фильтруют и промывают на фильтре дополнительным объемом воды, составляющим 10-12 от взятого на гидродистилляцию, далее остаток растительного материала после гидродистилляции смешивают с 90 этанолом в соотношении сырье: экстрагент 1:, подвергают смесь ультразвуковой обработке частотой 50 кГц при 70°С в течение 45-60 мин, смесь фильтруют и промывают на фильтре дополнительным объемом 60 этанола, составляющим 20-25 от взятого на этанольную экстракцию, водное и спиртовое извлечения концентрируют в вакууме до 14-16 от первоначального объема, сконцентрированные этанольное и водное извлечения объединяют, высушивают, измельчают, добавляют эфирное масло, полученное при гидродистилляции, и перемешивают. Вышеописанный способ способствует получению средства из травы котовника многонадрезанного, обладающего повышенным антиоксилитическим и антидепрессивным действием. 7 табл., 3 пр.

Наверх