Способ прогнозирования тяжелой степени сухого керататоконъюнктивита при синдроме шегрена, ассоциированном с ревматоидным артритом

Авторы патента:

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

G01N33/48 - биологических материалов, например крови, мочи (G01N 33/02-G01N 33/14,G01N 33/26,G01N 33/44,G01N 33/46 имеют преимущество; определение всхожести семян A01C 1/02); приборы для подсчета и измерения клеток крови (гемоцитометры) (подсчет клеток крови, распределенных по поверхности, путем сканирования этой поверхности G06M 11/02)

C12Q1/686 - Способы измерения или испытания, использующие ферменты или микроорганизмы (устройства для измерения или испытания при работе с ферментами или микроорганизмами, например счетчики колоний C12M 1/34); составы для них; способы получения подобных составов

C12Q1/68 - использующие нуклеиновые кислоты

Владельцы патента RU 2679799:

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение "Научно-исследовательский институт глазных болезней" (RU)

Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии, и предназначено для прогнозирования тяжелой степени сухого керататоконъюнктивита (СКК) при синдроме Шегрена, ассоциированном с ревматоидным артритом. Проводят идентификацию предрасполагающих генотипов ТТ и АА полиморфных маркеров rs7947461 (С/Т) и rs4144331 (С/А) гена TRIM21 соответственно. При их обнаружении прогнозируют тяжелую степень сухого керататоконъюнктивита при синдроме Шегрена, ассоциированном с ревматоидным артритом. Использование изобретения обеспечивает прогнозирование тяжелой степени тяжести СКК при синдроме Шегрена, ассоциированного с РА, для возможности выбора адекватного способа профилактики сухого кератоконъюнктивита, а также формирования групп риска. 3 табл., 3 пр.

Предлагаемое изобретение относится к офтальмологии и предназначено для прогнозирования тяжелой степени сухого керататоконъюнктивита при синдроме Шегрена, ассоциированном с ревматоидным артритом.

Ревматоидный артрит (РА) - хроническое, прогрессирующее, воспалительное системное заболевание. На долю РА приходится 10% от общего числа ревматических болезней, а ежегодный прирост новых случаев заболевания составляет около 0,02%. РА является одним из наиболее распространенных хронических воспалительных заболеваний человека, частота которого в популяции, согласно данным ВОЗ, составляет от 0,6 до 1,3%, а у близких родственников она достигает 3-5%. Женщины болеют значительно чаще по сравнению с мужчинами (соотношение 3:1). [М. Feldmann, F.М. Brennan, R.N. Maini. Rheumatoid arthritis. 1996; 85(3): 307-310). Aletaha D, Neogi T, Silman AJ, et al. 2010 Rheumatoid arthritis classification criteria: An American College of Rheumatology / European League Against Rheumatism collaborative initiative. Arthritis Rheum. 2010; 62(9): 2569-258].

При PA возникают патологические изменения иммунного ответа с дисбалансом количественного и качественного состава иммунокомпетентных клеток, с нарушением их функциональной активности и клеточной кооперации. Результатом взаимодействия макрофагов, Т- и В-лимфоцитов является выработка AT, которые при соединении с АГ образуют иммунные комплексы, запускающие каскад иммуновоспалительных реакций. Это приводит к быстрой трансформации острой воспалительной реакции в хроническое прогрессирующее воспаление, которое является неотъемлемой частью РА. Клинически РА характеризуется суставными и внесуставными проявлениями, такими как перекардит, плеврит, синдром Фелти, невропатии, поражение органа зрения, гломерулонефрит, различные типы васкулитов, например, кожный [Fujita М, Igarashi Т, Kurai Т, et al. Correlation between dry eye and rheumatoid arthritis activity. Am J Ophthalmol. 2005; 140(5): 808-813]. Изменения офтальмологического статуса при РА встречается у 27,2% больных, в 13% - периферический язвенный кератит, в 5,06% - эписклерит, в 2,06% - склерит, в 0,45% - васкулит сосудов сетчатки [ G., D., S., М., J., М. Ocular manifestation of rheumatoid arthritis-diff erent forms and frequency. Bosn Basic J Med Sci. 2010; 10(4): 323-327].

He установлено связи между офтальмологическими проявлениями стадией и/или прогрессированием PA [Markovitz Е, Perry ZH, Tsumi Е, Abu-Shakra M. Ocular involvement and manifestations in rheumatoid arthritis patients. Harefuah. 2011; 150(9): 713-75].

Риск возникновения PA приблизительно в 16 раз выше у кровных родственников больных. По данным генеалогических исследований среди родственников 1-й степени родства, примерно 10% страдают РА, а появление ревматоидного фактора и других аутоантител, распространенность тяжелых форм заболевания в 4 раза выше, чем среди населения в целом. У однояйцовых близнецов конкордантность по данному заболеванию также в 4 раза выше, чем у двуяйцовых близнецов или родных братьев и сестер. У однояйцовых близнецов она составляет всего 15-20%. Эти данные свидетельствует о том, что в патогенезе заболевания играют важную роль не только генетические факторы, но и носительство мутаций [Raychaudhuri S., Sandor С., Stahl Е.А., Freudenberg J., Lee H.S., Jia X., Alfredsson L., Padyukov L., Klareskog L., Worthington J., Siminovitch K.A., Bae S.C., Plenge R.M., Gregersen P.K., de Bakker P.I. Five amino acids in three HLA proteins explain most of the association between MHC and seropositive rheumatoid arthritis. Nat. Genet. 2012; 44(3): 291-296. https://doi.org/10.1038/ng.1076]. Для изучения этиологии и патогенеза СШ, ассоциированном с РА проводят молекулярно-генетические, иммуногенетические, популяционно-генетические, близнецовые и генеалогические методы исследования. В 11,6% - 50% случаев при РА развивается сухой кератоконъюнктивит, при котором патологические изменения затрагивают эпителий роговицы и конъюнктивы с трансформацией в плоскоклеточную метаплазию и потерю бокаловидных клеток. [Бржеский В.В., Сомов Е.Е. Синдром «сухого глаза»]. У 15-25% больных РА ассоциирован с синдромом Шегрена, что повышает риск вовлечения в патологический процесс роговицы с высоким риском развития осложнений (перфорации роговицы) [Сафонова Т.Н.. Васильев В.И., Лихванцева В.Г. Синдром Шегрена. Руководство для врачей. М:. 2013. 600 с].

Учитывая иммуноопосредованный характер поражения глазной поверхности при СШ, ассоциированном с РА, представляет интерес исследование гена-кандидата TRIM21, для прогноза течения СКК, так как мутации в этом гене, встречаются наиболее часто и коррелируют со степенью тяжести основного заболевания [Lee AYS. A review of the role and clinical utility of anti-Ro52/TRIM21 in systemic autoimmunity. Rheumatol Int. 2017; 37(8): 1323-1333]. Трехсторонний мотив-содержащий белок 21, также известный как Е3 убиквитин-белковая лигаза TRIM21, представляет собой белок, который у человека кодируется геном TRIM21. TRIM21 является эффектором внутриклеточного антитела во внутриклеточном антитело-опосредованном пути протеолиза. Он распознает Fc домен и связывается с иммуноглобулином G и М на антителах. TRIM21 является частью рибонуклеопротеина Ro/SSA, который включает в себя один полипептид и одну из четырех небольших молекул РНК. Частица Ro/SSA локализуется как в цитоплазме, так и в ядре. Ro/SSA взаимодействует с аутоантигенами у пациентов с СШ, ассоциированном с PA [Kamiyama R, Yoshimi R, Takeno M, Iribe Y, Tsukahara T, Kishimoto D, Kunishita Y, Sugiyama Y, Tsuchida N, Nakano H, Minegishi K, Tamura M, Asami Y, Kirino Y, Ishigatsubo Y, Ozato K, Nakajima H. Dysfunction of TRIM21 in interferon signature of systemic lupus erythematosus. Mod Rheumatol. 2018; 23: 1-11]. Недавние исследования выявили перекрестную реакцию TRIM21 с TRIM38-реактивными аутоантителами. Обнаружение Anti-TRIM38 коррелировало с наличием анти-Ro60, анти-Ro52, анти-La, ревматоидного фактора и гипергаммаглобулинемией. Аффинно очищенные антитела к доменам TRIM38-CortBP-2 и TRIM38-B30.2/SPRY подвергаются взаимодействию с TRIM21. Определение анти-TRIM38 специфично для пациентов с БШ, и коррелирует со степенью тяжести заболевания. Клинически, наличие анти-TRIM38 ассоциировано с более выраженной эпителиопатией глазной поверхности, гиполакримией и уменьшением количества малых слюнных желез. [Wolska N, Rybakowska Р, Rasmussen А, Brown М, Montgomery С, Klopocki A, Grundahl K, Scofield RH, Radfar L, Stone DU, Anaya JM, Ice JA, Lessard CJ, Lewis DM, Rhodus NL, Gopalakrishnan R, Huang AJ, Hughes PJ, Rohrer MD, Weisman MH, Venuturupalli S, Guthridge JM, James JA, Sivils KL, Bagavant H, Deshmukh US. Brief Report: Patients With Primary Syndrome Who Are Positive for Autoantibodies to Tripartite Motif-Containing Protein 38 Show Greater Disease Severity. Arthritis Rheumatol. 2016; 68(3): 724-9].

Известен способ прогнозирования течения синдрома «сухого глаза» по повышению концентрации биохимических маркеров оксидативного стресса, в частности класса гидропероксидов в бульбарной конъюнктиве и слезной жидкости больных с синдромом Шегрена. Способ характеризуется тем, что проводят тест Schirmer, измерение времени разрыва слезной пленки, пробы с витальными касителями, конфокальную микроскопию конъюнктивы, количественное определения гексаноил-лизина в слезе (HEL), иммунохимический метод ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) и цитологию конъюнктивы с окрашиванием иммуногистохимическим методом (IHC).

Однако способ требует высокотехнологичного оборудования для проведения количественное определения гексаноил-лизина в слезе (HEL), процесс сбора которой трудоемок из-за отсутствия секреции при тяжелой степени сухого кератоконъюнктивита, иммунохимический метод ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay) и цитологию конъюнктивы с окрашиванием иммуногистохимическим методом (IHC). [Wakamatsu ТН, Dogru М, Matsumoto Y, Kojima Т, Kaido М, Ibrahim ОМ, Sato ЕА, Igarashi A, Ichihashi Y, Satake Y, Shimazaki J, Tsubota K. Evaluation of lipid oxidative stress status in syndrome patients. Invest Ophthalmol Vis Sci. 2013 Jan 7; 54(1): 201-10. doi: 10.1167/iovs.12-10325].

Нами не обнаружены источники информации, содержащие сведения о прогнозировании степени тяжести СКК при синдроме Шегрена, ассоциированного с РА.

Задачей предлагаемого изобретения является разработка молекулярно-генетического способа прогнозирования степени тяжести СКК при синдроме Шегрена, ассоциированного с РА.

Технический результат предлагаемого изобретения состоит в прогнозировании тяжелой степени СКК при синдроме Шегрена, ассоциированного с РА для возможности выбора адекватного способа профилактики сухого кератоконъюнктивита, а также формирования групп риска.

Технический результат достигается за счет идентификации предрасполагающих генотипов ТТ и АА полиморфных маркеров rs7947461 (С/Т) и rs4144331 (С/А) гена TRIM21, соответственно. Аллели полиморфного маркера rs7947461 (С/Т) и rs4144331 (С/А) гена TRIM21 выявляли с помощью анализа кривых плавления ДНК (High Resolution Melting Point Analysis (HRM). При работе использовали набор qPCRmix-HS SYBR, предназначенный для ПЦР в реальном времени с интеркалирующим красителем SYBR Green I, в соответствии с протоколом производителя (Евроген, Россия). В состав qPCRmix-HS SYBR входят следующие компоненты: HS Taq ДНК полимераза, краситель SYBR Green I, смесь нуклеотидтрифосфатов, Mg2+, реакционный буфер. Реакционный буфер оптимизирован для специфичной работы HS Taq ДНК полимеразы, а также для длительного хранения и многократного замораживания-размораживания смеси. Концентрация ионов магния в 1× реакционной смеси - 3 мМ, концентрация каждого нуклеотидтрифосфата - 0,2 мМ. ПЦР проводили в 25 мкл реакционной смеси, содержащей 1× qPCRmix-HS SYBR, по 0.4 мкМ каждого праймера TRIM21-6030-F: ТССС AGAAACCTCAACCACCTACCT, TRIM21-6030-R: AAGCTTTGGG AATGGAGGTATTGGTAC, TRIM21-9448-F: CCCCTCTAACCCTCTGTCCACTGAAT, TRIM21-9448-R: GCTAAAGCTCGCTTGCTGGGATC, 50-100 нг ДНК матрицы; в 96-луночных планшетах «Optical Reaction Plate» на амплификаторе BioRad CFX96 qPCR System (Bio-Rad, США) по следующей программе: предварительная денатурация: 1 цикл, 95°С, 5 мин; ПЦР: 40 циклов (95°С - 30 с; 58°С - 30 с; 72°С - 30 с). Плавление продуктов амплификации проводили в диапазоне 55-95°С с увеличением температуры на 0.5°С каждые 10с (рис 2). Обработку полученных данных проводили в программной среде Precision Melt Analysis Software (Bio-Rad).

При проведении исследований было проанализировано распределение частот генотипов полиморфных маркеров rs7947461 (C/T), rs4144331 (С/А) гена TRIM21 у больных СКК (37 пациентов) и контрольной группы (35 человек), найдены статистически значимые различия. Распределение частот аллелей и генотипов полиморфных маркеров rs4144331 (С/А) и rs7947461 (C/T) гена TRIM21 в контрольной группе и группе больных с СКК представлено на рисунке 1.

Для предрасполагающего генотипа (ТТ) полиморфного маркера rs7947461 гена TRIM21 выявлена ассоциация с риском развития СКК. Его частота в исследуемой группе в 2,6 раза превышала показатели в группе контроля (χ²=6.34), а относительный риск развития СКК был повышен в 3,6 раза (OR=3.65, CI_95%=(1.15-11.61), p=0.04). Частота предрасполагающего аллеля в группе больных с СКК была статистически выше, чем в группе контрольной (χ²=7.27; OR=2.5, CI_95%=(1.27-4.89), p=0.007).

Выявлена ассоциация полиморфного маркера rs4144331 этого гена с риском развития СКК. В исследуемой группе, частота предрасполагающего аллеля оказалась выше в 3,0 раза, по сравнению с группой контроля (χ²=8.71), относительный риск развития СКК оказался повышен в 3,81 раза (OR=3.81, CI_95%=(1.51-9.62), p=0.003). Предрасполагающий генотип АА полиморфного маркера rs4144331 гена TRIM21 был обнаружен только в исследуемой группе пациентов с СКК (χ²=7.74; OR=17.46, CI_95%=(1.96-318.38), р=0.02).

Способ осуществляют следующим образом. У пациента производят забор венозной крови в пробирку с ЭДТА, кровь замораживают при температуре не выше -20 С. Идентифицируют предрасполагающие генотипы ТТ и АА полиморфных маркеров rs7947461 (С/Т) и rs4144331 (С/А) гена TRIM21, соответственно, и при их обнаружении прогнозируют тяжелую степень СКК тяжести при синдроме Шегрена, ассоциированного с РА.

Пример 1.

Пациентка Б., 1947 г.р. впервые обратилась в НИИ глазных болезней в 2008 г. с жалобами на боли в глазах, выраженную светобоязнь, блефароспазм, покраснение глаз. Из анамнеза известно, что с 2005 г. наблюдается в НИИ ревматологии им. В.А. Насоновой, где был поставлен диагноз: Синдром Шегрена. Серопозитивный ревматоидный артрит, поздняя стадия, активность умеренная. Ксеростомия III ст. Рекомендовано лечение: Метипред - 4 мг/день, Циклофосфан - 5 мг. через день. В 2008 г. офтальмологом был диагностирован сухой кератоконъюнктивит на фоне синдрома Шегрена. В качестве локальной терапии применяла слезозаменительные препараты. Процесс характеризовался медленно-прогрессирующим течением с периодическими обострениями.

При обращении в НИИ глазных болезней пациенту были проведены стандартное (визометрия, тонометрия, периметрия, биомикроскопия) и дополнительное офтальмологическое обследование: тест Ширмера I, II, проба Норна, определение осмолярности слезы («Tearlab Osmolality system», USA), тесты с витальными красителями, которые оценивали по Оксфордской шкале, лазерную сканирующую конфокальную микроскопию (HRT III RCM, Germany), ОСТ с менискометрией (RTVue 100-2/СА «Optovue», USA), посев с конъюнктивы на микрофлору.

В результате обследования установлено: острота зрения ОД составила 0,3 с коррекцией 0,5-0.6; OS - 0,6 с коррекцией 0,9-1,0. ВГД 17,0; 17,1 мм рт.ст. соответственно. При биомикроскопии отмечали выраженную смешанную инъекцию, эпителиопатию по всей поверхности роговицы, которая окрашивалась флюоресцеином. Снижение слезопродукции по тесту Ширмера: ОД = базальная 2,0 мм, рефлекторная 3,0 мм, суммарная 5,0 мм; OS = базальная 1,0 мм, рефлекторная 4,0 мм, суммарная 5,0 мм. Показатель пробы Норна OU составил 4,0 с. Осмолярность слезы ОД=318 мОсм/л OS=323 мОсм/л

Анализ данных IIRT показал, уменьшение плотности и извитости суббазальных нервных сплетений, наличие клеток Лангерганса. По данным ОСТ с менискометрией, отмечено уменьшение высоты слезного мениска OU до 123 мкм.

На основании проведенного обследования был поставлен диагноз: OU - Сухой кераконъюнктивит (нитчатый кератит). Гиполакримия III степени.

У пациента произвели забор венозной крови 7 мл. в пробирку с ЭДТА, кровь была заморажена при температуре -20 С. С помощью метода анализа кривых плавления идентифицировали аллели ТТ и АА полиморфных маркеров rs7947461 (С/Т) и rs4144331 (С/А) гена TRIM21, соответственно (Таб. 1). Выявлена ассоциация этих полиморфных маркеров с риском развития тяжелой степени СКК. На фоне системной терапии, слезозамещающей терапии и кератопротекторов субъективные ощущения стали менее выраженными, появилась зеркальность роговицы, исчезли эпителиальные нити. За период наблюдения до июня 2018 г. происходили периодические обострения РА с эрозированием роговицы. Пациентке рекомендовано постоянное наблюдение офтальмолога, ношение лечебных контактных линз на фоне инсталляций Рестасиса 2 раза в день, слезозаместительиые и репаративные препараты, применение системной терапии.

Пример 2.

Пациентка З., 1968 г.р. направлена в НИИ глазных болезней в 2017 г. Офтальмологических жалоб не предъявляет. Из анамнеза известно, что с 2014 г. наблюдается в ЛИИ ревматологии им. В.А. Насоновой, где был поставлен диагноз: Болезнь Шегрена. Рекомендовано лечение: Метипред - 4 мг/день. Наблюдается у офтальмолога с периодичностью раз в 6 месяцев. Офтальмологических проявлений заболевания не выявлено.

В результате обследования установлено: острота зрения ОД составила 0,8 с коррекцией 1,0; OS - 0,7 с коррекцией 1,0. ВГД 16,0; 15,0 мм рт.ст. соответственно. При биомикроскопии роговица прозрачная, влажная, сферичная, конъюнктива спокойна, тесты с витальными красителями отрицательные. Слезопродукция по тесту Ширмера: ОД = базальная 14,0 мм, рефлекторная 9,0 мм, суммарная 23,0 мм; OS = базальная 15,0 мм, рефлекторная 9,0 мм, суммарная 24,0 мм. Показатель пробы Норна OU составил 12,0 с. Осмолярность слезы ОД=285 мОсм/л OS=301 мОсм/л.

Анализ данных HRT показал, что плотность и извитость суббазальных нервных сплетений в пределах нормы, наличие единичных клеток Лангерганса. По данным ОСТ с менискометрией, высоты слезного мениска в пределах нормы OU до 298 мкм.

На основании проведенного обследования, данных за сухой кераконъюнктивит не выявлено.

У пациента произвели забор венозной крови 7 мл в пробирку с ЭДТА, кровь была заморожена при температуре -20 С. С помощью метода анализа кривых плавления идентифицировали аллели СС и СС полиморфных маркеров rs7947461 (С/Т) и rs4144331 (С/А) гена TRIM21, соответственно (Таб. 2), которые являются диким типом (норма). Выявлено, что у пациентов с отсутствием проявлений СКК предрасполагающие полиморфные маркеры не определяются. Т.о. можно предположить отсутствие прогрессирования офтальмологических проявлений заболевания. Пациенту рекомендовано динамическое наблюдение офтальмолога, продолжение системной терапии.

Пример 3.

Пациентка С., 1968 г.р. наблюдается в НИИ глазных болезней с 2014 г. Офтальмологических жалоб не предъявляет. Из анамнеза известно, что с 20014 г. наблюдается в НИИ ревматологии им. В.А. Насоновой, где был поставлен диагноз: Синдром Шегрена. Ксеростомия I ст. Рекомендовано лечение: Метипред - 3,5 мг/день. Наблюдается у офтальмолога по поводу гиполакримии I ст. В качестве локальной терапии применяла слезозаменительпые препараты.

При обращении в НИИ глазных болезней пациенту были проведены стандартное (ви юметрия, тонометрия, периметрия, биомикроскопия) и дополнительное офтальмологическое обследование: тест Ширмера I, И, проба Норна, определение осмолярности слезы («Tearlab Osmolarity system», USA), тесты с витальными красителями, которые оценивали по Оксфордской шкале, лазерную сканирующую конфокальную микроскопию (HRT III RCM, Germany), ОСТ с менискометрией (RTVue 100-2/СА «Optovue», USA), посев с конъюнктивы на микрофлору.

В результате обследования установлено: острота зрения ОД составила 0,6 с коррекцией 1,0; OS - 0,7 с коррекцией 1,0. ВГД 14,0; 13,0 мм рт.ст. соответственно. При биомпкроскопии роговица прозрачная, влажная, сферичная, конъюнктива спокойна, тесты с витальными красителями отрицательные. Слезопродукция по тесту Ширмера: ОД = базальная 9,0 мм, рефлекторная 5,0 мм, суммарная 14,0 мм; OS = базальная 10,0 мм, рефлекторная 4,0 мм, суммарная 14,0 мм. Показатель пробы Норна ОД=8,0 с. OS=9,0. Осмолярность слезы ОД=275 мОсм/л, OS=289 мОсм/л.

Анализ данных HRT показал, уменьшение плотности, извитости и увеличение сечения суббазальных нервных сплетений, наличие единичных лейкоцитов и клеток Лангсрганса. По данным ОСТ с менискометрией, отмечено уменьшение высоты слезного мениска OU до 186 мкм.

На основании проведенного обследования был поставлен диагноз: OU-Гиполакримия I степени.

У пациента произвели забор венозной крови 7 мл. в пробирку с ЭДТА, кровь была заморожена при температуре -20 С. С помощью метода анализа кривых плавления идентифицировали аллели ТТ и СС полиморфных маркеров rs7947461 (С/Т) и rs4144331 (С/А) гена TRIM21, соответственно (Таб. 3). Выявлена ассоциация полиморфного маркера ТТ с возможным прогрессированисм гиполакримии, что подтверждено данными функциональных методов и развитием тяжелой степени СКК. Аллель СС является диким типом (вариант нормы). Пациенту рекомендована слезозаместителыгая терапия, динамическое наблюдение офтальмолога, применение системной терапии.

Таким образом, предложенный способ позволяет с помощью генетических методов прогнозировать тяжелое течение сухого кератоконъюнктивита при болезни Шегрена для определения необходимости адекватных профилактических мероприятий и включения таких пациентов в группу риска.

Таблица 1

Таб. 2

Таб. 3

Способ прогнозирования тяжелой степени сухого керататоконъюнктивита при синдроме Шегрена, ассоциированном с ревматоидным артритом, включающий проведение идентификации предрасполагающих генотипов ТТ и АА полиморфных маркеров rs7947461 (С/Т) и rs4144331 (С/А) гена TRIM21 соответственно и при их обнаружении прогнозирование тяжелой степени сухого керататоконъюнктивита при синдроме Шегрена, ассоциированном с ревматоидным артритом.

Изобретение относится к области медицины, а именно к диагностике и гинекологии, и предназначено для выявления риска развития сочетания генитального эндометриоза и гиперпластических процессов эндометрия у женщин русской национальности, уроженок Центрального Черноземья.

Способ прогнозирования риска развития ишемического инсульта с учетом генетических и средовых факторов // 2679635

Изобретение относится к области медицинской диагностики и предназначено для прогнозирования риска развития ишемического инсульта. У индивидуумов русской национальности, являющихся жителями Центрального Черноземья, выделяют ДНК из венозной крови и проводят анализ полиморфизмов генов цитокинов rs1061624 TNFR2 и rs767455 TNFR1.

Способ прогнозирования риска развития гипертонической болезни на основании молекулярно-генетических данных // 2679401

Изобретение относится к области медицинской диагностики и предназначено для прогнозирования риска развития гипертонической болезни. У индивидуумов русской национальности, являющихся жителями Центрального Черноземья, выделяют ДНК из периферической венозной крови и проводят анализ полиморфизмов генов цитокинов rs1800469 TGFβ-1 и rs833061 VEGFА.

Картридж и устройство для подготовки биологического образца // 2679226

Изобретение относится к картриджу для обработки биологического образца. Картридж содержит корпус с реакционной камерой, системой подачи текучей среды и системой отвода текучей среды.

Способ прогнозирования типа раннего ремоделирования левого желудочка у пациентов с острым инфарктом миокарда // 2679126

Изобретение относится к области медицины, в частности к кардиологии, и предназначено для прогнозирования типа раннего ремоделирования левого желудочка (РЛЖ) у больных острым инфарктом миокарда.

Способ диагностики степени тяжести хронического генерализованного пародонтита у беременных женщин // 2677655

Изобретение относится к области медицины и предназначено для диагностики степени тяжести хронического генерализованного пародонтита (ХГП) у беременных женщин. У беременной женщины во втором триместре производят забор ротовой и десневой жидкости.

Способ прогнозирования степени тяжести атопического дерматита у детей // 2677481

Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии, педиатрии, аллергологии и иммунологии, и касается способа прогнозирования течения атопического дерматита у детей.

Способ прогнозирования исхода инфекционного эндокардита // 2677469

Изобретение относится к медицине, а именно к терапии, кардиологии и хирургии, и может быть использовано для прогнозирования исхода инфекционного эндокардита. Способ прогнозирования исхода инфекционного эндокардита включает забор образцов венозной крови, выделение геномной ДНК, аллель-специфическую полимеразную цепную реакцию с целью генотипирования по полиморфному локусу MTHFR Ala222Val(С677Т) гена метилентетрагидрофолатредуктазы лиц группы риска и у носителей генотипа MTHFR А1а222А1а(С677С) прогнозируют благоприятный исход заболевания, а у носителей генотипов MTHFR Ala222Val(C677T)/MTHFR Val222Val(T677T) прогнозируют 12,33-кратный риск летального исхода.

Способ прогнозирования тяжелого течения механической желтухи доброкачественного генеза // 2677468

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ диагностики тяжелого течения механической желтухи доброкачественного генеза, отличающийся тем, что методом непрямой иммунофлюоресценции в крови определяют абсолютное количество pan-маркеров Т-лимфоцитов и естественных киллеров (NK-клеток), а в сыворотке крови методом иммуноферментного анализа определяют уровни иммуноглобулина IgG и цитокинов - интерлейкина-10 (ИЛ-10) и фактора некроза опухоли-альфа (TNF-α), спектрофотометрическим методом в эритроцитах определяют содержание малонового диальдегида (MDA) и активность дуплекса ферментов супероксиддисмутазы и каталазы (SOD-CAT) и при абсолютном количестве раn-маркеров Т-лимфоцитов ниже 0,47×109/л, NK-клеток ниже 0,14×109/л, уровне IgG выше 5 г/л, ИЛ-10 выше 30 пг/мг, TNF-α выше 2 пг/мл, MDA выше 40 нмоль/1 г Нb, активности SOD ниже 600 ед./мин /1 г Hb, CAT ниже 0,8 ммоль/с/1 г Нb прогнозируют тяжелое течение механической желтухи доброкачественного генеза.

Способ определения содержания фумаровой и малеиновой кислот в плазме крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии // 2677341

Изобретение относится к санитарной токсикологии и может быть использовано для определения содержания фумаровой и малеиновой кислот в плазме крови методом высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ).

Способ прогнозирования врастания плаценты при беременности // 2679641

Изобретение относится к области акушерства и гинекологии и предназначено для прогнозировании врастания плаценты при беременности. Способ включает иммуноферментный анализ сыворотки крови беременных женщин в сроке 20 недель и позже.

Способ оздоровления организма человека // 2679608

Изобретение относится к медицине, а именно к реабилитологии и диетологии, и может быть использовано для оздоровления организма человека. Для этого предварительно определяют показатели ИФР-1, интерлейкина 6, С-реактивного белка и индекса инсулинорезистентности (HOMA-IR) с последующим обеспечением субъекта рационом с низким содержанием белков в течение 5-7 дней, причем количество калорий, получаемых от белков, не превышает 8-12%, при этом рацион состоит из свежих и обработанных и приготовленных овощей, фруктов, орехов, семян и растительных жиров, калорийность рациона определяется следующим образом: в 1-й день 50-60% от рекомендуемой калорийности, рассчитанной по формуле Миффлина-Сент-Жеор, а со 2-го по 5-7-й день - 30-40%.

Флуориметрический анализатор биологических микрочипов // 2679605

Изобретение относится к количественной люминесцентной микроскопии, применяемой в приборах, предназначенных для регистрации взаимодействий между биологическими молекулами, помеченными красителем, флуоресцирующим в видимой или инфракрасной области спектра, и молекулярными зондами, иммобилизованными в ячейках биологического микрочипа.

Способ прогнозирования формирования развернутой астматической триады у больных полипозным риносинуситом после полипотомии // 2679414

Изобретение относится к медицине, а именно к аллергологии, иммунологии и оториноларингологии, и может быть использовано для прогнозирования формирования развернутой астматической триады у больных полипозным риносинуситом после полипотомии.

Способ получения диагностической информации по запаху кожи // 2679409

Изобретение относится к медицинской диагностике и может быть использовано для установления изменений и особенностей легколетучих метаболитов, выделяемых кожей и детектируемых набором химических газовых сенсоров.

Способ раннего прогноза развития нефрита в индуцированной модели аутоиммунного заболевания системной красной волчанки in vivo // 2679320

Изобретение относится к способу прогнозирования системных воспалительных состояний в организме животного, способных привести к развитию нефрита в индуцированной модели аутоиммунного заболевания системной красной волчанки.

Устройство для изготовления диагностического набора и диагностический набор, изготовленный с его помощью // 2679129

Группа изобретений относится к изготовлению диагностического набора с вложенной диагностической полоской в легковесной упаковке, сконфигурированного для массового производства.

Способ прогнозирования риска развития сочетания миомы матки и гиперпластических процессов эндометрия // 2678970

Изобретение относится к области медицинской диагностики, в частности к способу прогнозирования риска развития сочетания миомы матки и гиперпластических процессов эндометрия.

Способ дифференциальной диагностики типов воспаления дыхательных путей у больных бронхиальной астмой и хронической обструктивной болезнью легких // 2678577

Изобретение относится к медицине и представляет собой способ дифференциальной диагностики типов воспаления дыхательных путей у больных бронхиальной астмой (БА) и хронической обструктивной болезнью легких (ХОБЛ), отличающийся тем, что осуществляют комплексную математическую оценку показателей по формуле: у=0,0206×x1-0,0583×x2+0,0205×x3-0,0011×x4+0,582, где у - тип воспаления дыхательных путей; x1 - содержание эозинофилов в индуцированной мокроте, %; x2 - количество нейтрофилов в крови, 109/л; x3 - количество эозинофильного катионного протеина в крови, нг/мл; x4 - количество нейтрофильной эластазы в крови, нг/мл; при значении у=0-0,4 диагностируют нейтрофильный тип воспаления дыхательных путей у больных БА и ХОБЛ, а при значении у=0,6 и выше диагностируют эозинофильный тип воспаления дыхательных путей у больных БА и ХОБЛ.