Способ оценки эффективности нейроретинопротекции первичной открытоугольной глаукомы на основе определения нейронспецифической энолазы

Авторы патента:

Курбанов Садырбек Абдувакасович (RU)

Габдрахманова Аныя Фавзиевна (RU)

Абизгильдина Гульчачак Шамильевна (RU)

G01N33/50 - химический анализ биологических материалов, например крови, мочи; испытания, основанные на способах связывания биоспецифических лигандов; иммунологические испытания (способы измерения или испытания с использованием ферментов или микроорганизмов иные, чем иммунологические, составы или индикаторная бумага для них, способы образования подобных составов, управление режимами микробиологических и ферментативных процессов C12Q)

G01N2333/988 - Исследование или анализ материалов путем определения их химических или физических свойств (разделение материалов вообще B01D,B01J,B03,B07; аппараты, полностью охватываемые каким-либо подклассом, см. в соответствующем подклассе, например B01L; измерение или испытание с помощью ферментов или микроорганизмов C12M,C12Q; исследование грунта основания на стройплощадке E02D 1/00;мониторинговые или диагностические устройства для оборудования для обработки выхлопных газов F01N 11/00; определение изменений влажности при компенсационных измерениях других переменных величин или для коррекции показаний приборов при изменении влажности, см. G01D или соответствующий подкласс, относящийся к измеряемой величине; испытание

Владельцы патента RU 2681935:

федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Башкирский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и представляет собой способ оценки эффективности нейроретинопротективного лечения первичной открытоугольной глаукомы с применением препарата Ретиналамина, включающий определение содержания нейронспецифической энолазы (neuron specific enolase или NSE) в слезной жидкости, согласно изобретению ее определяют до и после лечения и при снижении содержания NSE не менее чем на 20% от исходного показателя результат нейроретинопротекции оценивают как эффективный. Использование изобретения повышает точность диагностики ПОУГ за счет получения достоверных критериев оценки эффективности нейроретинопротекции. 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для оценки эффективности нейроретинопротекции в консервативном лечении первичной открытоугольной глаукомы (ПОУГ).

Первичная открытоугольная глаукома (ПОУГ) - характеризуется дегенерацией ганглиозных клеток сетчатки. Потеря ганглиозных клеток сетчатки (ГКС) связана с уровнем внутриглазного давления (ВГД), но другие факторы также могут играть определенную роль [Weinreb R.N., Aung Т., and Medeiros F.A. The Pathophysiology and treatment of glaucoma. JAMA. 2014; 311(18):1901-1911]. Биологическая основа глаукомы плохо изучена, и факторы, способствующие ее прогрессированию, не были полностью охарактеризованы [Nickells RW, Howell GR, Soto I, John SW. Under pressure: cellular and molecular responses during glaucoma, a common neurodegeneration with axonopathy. Annu Rev Neurosci. 2012; 35:153-179].

Повышение ВГД при ПОУГ вызывает механическую компрессию и деформацию решетчатой пластинки и прилегающих тканей [Quigley НА, Addicks ЕМ, Green WR, Maumenee АЕ. Optic nerve damage in human glaucoma, II: the site of injury and susceptibility to damage. Arch Ophthalmol. 1981; 99(4):635-649], что приводит к повреждению аксонов и нарушению аксонального переноса, а также прерывает ретроградную доставку основных трофических факторов в ГКС [Burgoyne CF, Downs JC, Bellezza AJ, Suh JK, Hart RT. The optic nerve head as a biomechanical structure: a new paradigm for understanding the role of IOP-related stress and strain in the pathophysiology of glaucomatous optic nerve head damage. Prog Retin Eye Res. 2005; 24(1):39-73]. В связи с вышеизложенным актуальна оценка состояния нейрональной сетчатки на молекулярном уровне при нейроретинопротекторной терапии ПОУГ.

Известен способ оценки прогностической значимости нейронспецифической энолазы (neuron specific enolase или NSE) в диагностике оптических невритов. При этом исследуется содержание NSE в слезной жидкости (СЖ) и в сыворотке крови (СК) у больных с невритом зрительного нерва. Описанная патология также сопровождается повреждением зрительного нерва, но не может в полном объеме охарактеризовать глаукомный процесс [Камилов Х.М., Касимова М.С., Хамраева Г.Х. Специфический маркер нейродегенерации при диагностике оптических невритов // Офтальмология. 2015; 12(2):25-30].

В диссертационной работе Н.А. Юдиной (2013) описано содержание NSE у пациентов с ПОУГ в разных стадиях: в начальной стадии - 5,715 нг/мл, в развитой стадии - 6,989 нг/мл и далекозашедшей стадии - 8,58 нг/мл. В исследовании не измеряли динамику NSE на фоне лечения [Юдина, Н.А. Некоторые патегенетические механизмы первичной открытоугольной глаукомы /Н.А. Юдина// дисс. … канд. мед. наук. Чита. - 2013. С. 111].

Наиболее близким аналогом изобретения является способ определения содержания NSE и аутоантител к ней в слезной и внутриглазной жидкостях у больных ПОУГ [Цыбиков Н.Н., Заиграева Н.А., Харинцева С.В. и др. Содержание нейроспецифической енолазы и аутоантител в слезной и внутриглазной жидкостях у больных с открытоугольной глаукомой (предварительное сообщение) // Вестник офтальмологии. 2012. №2. - с. 49-51]. Однако этот способ не включает определение изменения уровня NSE на фоне лечения.

Задачей настоящего изобретения является разработка способа оценки эффективности нейроретинопротекции ПОУГ.

Технический результат при использовании изобретения - повышение точности диагностики ПОУГ за счет получения достоверных критериев оценки эффективности нейроретинопротекции.

Предлагаемый способ оценки эффективности нейроретинопротекции ПОУГ осуществляется следующим образом. У пациентов с ПОУГ до и после 10-тидневного курса нейроретинопротекции, включавшего местное гипотензивное лечение и внутримышечное введение препарата «Ретиналамин^®» (ООО ГЕРОФАРМ, Санкт-Петербург) согласно инструкции применения препарата, рекомендованной производителем, осуществляют сбор СЖ с обоих глаз. Методом иммуноферментного анализа (ИФА) (Multiskan, Финляндия) с помощью набора реагентов для иммуноферментного определения концентрации нейронспецифической энолазы (АО «Вектор-Бест», Россия) определяют содержание NSE в СЖ. При снижении уровня NSE в слезной жидкости не менее чем на 20% от исходного показателя лечение считают эффективным. При снижении содержания менее чем на 20% от исходного показателя или повышении показателя лечение считают не эффективным.

Обоснованием заявляемого способа являются результаты исследования содержания NSE в СЖ до и после лечения у 25 пациентов (50 глаз) с ПОУГ II и III стадии в возрасте 66,3±10,8 лет. Группу контроля составили здоровые лица в количестве 6 человек (12 глаз). Для статистического анализа данных был использован программный пакет Statistica 12.0. Количественные данные обработаны методами описательной статистики и представлены в виде средней арифметической и ее стандартного отклонения. Достоверность различий между пациентами разных групп наблюдения подтверждена непараметрической статистикой (критерий Манна - Уитни, Уилкоксона). Сопоставимость выборки проверен критерием Шапиро-Уилка. Достоверность различий считалась значимым при р<0,05.

Лечение включало внутримышечное введение «Ретиналамина^®» в дозе 5 мг 1 раз в день в течение 10 дней. Препарат предварительно растворяли в 1-2 мл воды для инъекций. Всем пациентам до и после курса лечения определяли авторефрактометрию, визометрию, тонометрию, периметрию, офтальмоскопию и биомикроскопию на щелевой лампе, а также сбор слезной жидкости для определения содержания NSE. Средние показатели остроты зрения у пациентов без коррекции равнялись 0,51±0,30, максимально корригируемая острота зрения - 0,70±0,34. Средний уровень ВГД у пациентов с ПОУГ составил 19,50±2,52 мм рт.ст. Результаты суммарной периметрии по 8 меридианам равнялась 332±92,7. Все пациенты получали различные виды местной гипотензивной терапии. После проведенной нейроретинопротекторной терапии с препаратом «Ретиналамин^®» отмечалось некоторое статистически недостоверное улучшение показателей остроты зрения, ВГД и поля зрения. Средние показатели остроты зрения у пациентов без коррекции равнялись 0,53±0,21, максимально корригируемая острота зрения - 0,74±0,29. Средний уровень ВГД у пациентов с ПОУГ составил 18,10±2,0 мм рт.ст. Результаты суммарной периметрии по 8 меридианам равнялась 341,0±86,5. После лечения у 72% (36 глаз) больных отмечалась статистически достоверное снижение уровня NSE не менее 20% от исходного (р<0,05). У 4% (2 глаз) пациентов отмечалось снижение менее 20%, а также у 24% (12 глаз) больных установлен статистически недостоверное повышение NSE в слезной жидкости (р>0,05).

Предлагаемый способ иллюстрируется следующими клиническими примерами.

Пример 1. Больная Н., 50 лет, диагноз ПОУГ II а стадии.

Гиперметропия слабой степени.

ВГД (БТ) 20/19 мм рт.ст.

Биомикроскопия: роговица прозрачная, передняя камера средней глубины, зрачок круглый, реакция на свет сохранена. Хрусталик прозрачный, стекловидное тело прозрачное. Глазное дно: OU - диск зрительного нерва бледный, границы четкие, расширение физиологической экскавации, артерии узкие, вены умеренно полнокровные.

Суммарное поле зрения: OD - 330. OS - 340.

Уровень NSE в слезной жидкости до лечения составил OD - 0,823 нг/мл,

OS-1,121 нг/мл.

ВГД (БТ) 18/18 мм рт.ст.

Суммарное поле зрения: OD - 335. OS - 355.

В результате лечения данный показатель снизился до OD - 0,263 нг/мл, (снижение на 68,04%), OS - 0,180 (снижение на 83,94%).

У пациента в динамическом наблюдении через 3, 6 месяцев показатели остроты зрения и поля зрения оставались стабильными.

Авторефрактометрия: OD:+0,25+0,25 ах 9

OS:+0,25+0,0 ax 30

ВГД (БТ) 18/17.

Биомикроскопия: роговица прозрачная, передняя камера средней глубины, зрачок круглый, реакция на свет сохранена. Хрусталик частично - мутный, стекловидное тело прозрачное. Глазное дно: OU - диск зрительного нерва бледноватый, границы четкие, расширение физиологической экскавации, артерии узкие, вены полнокровные.

Суммарное поле зрения: OD - 400. OS - 410.

Уровень NSE в слезной жидкости до лечения составил OD - 1,741 нг/мл,

OS-1,609 нг/мл.

ВГД (БТ) 18/18.

Суммарное поле зрения: OD - 395. OS - 415.

В результате лечения уровень BDNF снизился до OD - 1,502 нг/мл, (снижение на 13,73%), OS - 1,301 (снижение на 19,1%).

В динамическом наблюдении пациента выявлено сужение полей зрения через 6 месяцев, а также фиксировано неоднократное повторное обращение пациента к офтальмологу.

Способ оценки эффективности нейроретинопротективного лечения первичной открытоугольной глаукомы с применением препарата Ретиналамина, включающий определение содержания нейронспецифической энолазы (neuron specific enolase или NSE) в слезной жидкости, отличающийся тем, что ее определяют до и после лечения и при снижении содержания NSE не менее чем на 20% от исходного показателя результат нейроретинопротекции оценивают как эффективный.

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано для оценки эффективности нейроретинопротекции первичной открытоугольной глаукомы.

Способ оценки эффективности нейроретинопротекции первичной открытоугольной глаукомы на основе определения соотношения нейрональных маркеров // 2681654

Способ дифференциальной диагностики острых лейкозов с помощью клеточного биочипа // 2681651

Изобретение относится к медицине, а именно к области диагностики онкогематологических заболеваний, и может быть использовано для дифференциальной диагностики острых лейкозов.

Определение пола, жизнеспособности и/или стадий развития птичьих эмбрионов в яйце // 2681536

Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно способу контроля инкубации птичьего эмбриона в яйце для получения выборки яиц путем определения пола, стадии развития и/или жизнеспособности птичьего эмбриона.

Способ диагностики поражения сердца при инфекционных заболеваниях у детей и подростков // 2680975

Изобретение относится к области медицины, а именно педиатрии, кардиологии, и представляет собой способ диагностики поражения сердца при инфекционных заболеваниях у детей и подростков путем оценки электрокардиографических показателей, отличающийся тем, что определяют атриовентрикулярное проведение в соотношении с частотой сердечных сокращений в перцентилях и маркеры инфекционных заболеваний: при выявлении PQ>75 перцентиля для исключения скрытых нарушений АВ-проводимости проводят нагрузочные пробы или холтеровское мониторирование ЭКГ с определением PQ на различных ЧСС и при постоянной атриовентрикулярной блокаде I степени, выявленных скрытых нарушениях атриовентрикулярной проводимости и маркерах острого или перенесенного инфекционного заболевания диагностируют инфекции-ассоциированное поражение проводящей системы сердца.

Биологическое количественное определение пептидогликанов // 2680885

Изобретение относится к способу количественного определения пептидогликанов (PGN) в образце полимера глюкозы. Способ включает a) обработку образца полимера глюкозы посредством ультразвука, нагревания и/или ощелачивания для фрагментации и разрушения содержащихся в образце PGN и для образования растворимых PGN с размерами между 30 и 5000 кДа; b) приведение обработанного образца в контакт с рекомбинантной клеткой, экспрессирующей экзогенный рецептор TLR2 (Toll-подобный рецептор 2) и репортерный ген при прямой зависимости от сигнального пути, связанного с рецептором TLR2, причем указанный репортерный ген кодирует секретируемую щелочную фосфатазу; c) измерение сигнала репортерного гена и d) определение количества PGN в образце с применением калибровочной кривой на основе зависимости количества PGN от интенсивности сигнала репортерного гена, где калибровочную кривую зависимости количества PGN от интенсивности сигнала репортерного гена стандартизируют или калибруют с использованием трихлоргидрата PAM3Cys-Ser-(Lys)4.

Биологическое количественное определение пептидогликанов // 2680885

Способ количественного определения антиоксидантной активности пептидов // 2680604

Изобретение относится к определениям и испытаниям, а именно к способу определения антиоксидантной активности пептидов животного происхождения. Способ количественного определения антиоксидантной активности пептидов животного происхождения включает спектрофотометрическое определение оптической плотности продукта реакции изучаемых пептидов с 2,2-дифенил-1-пикрилгидразилом (DPPH) в органическом растворителе, выбранном из группы, включающей метанол, этанол, изопропанол, ацетон и метилэтилкетон, определение оптической плотности продукта реакции референтного пептидного антиоксиданта природного происхождения L-глутатиона восстановленного (GSH) с 2,2-дифенил-1-пикрилгидразилом и расчет антиоксидантной активности изучаемых пептидов как глутатионэквивалентной антиоксидантной активности GSHEAC (GSH equivalent antioxidant capacity), представляющей собой отношение концентрации L-глутатиона, при которой прореагировало 50% DPPH, к концентрации изучаемой субстанции, при которой прореагировало 50% DPPH.

Способ получения препаратов субклеточных фракций туляремийного микроба // 2680598

Изобретение относится к способу получения препаратов субклеточных фракций туляремийного микроба, включающему получение путем выращивания культуры Francisella tularensis с последующей ее инактивацией, отделением от низкомолекулярных примесей, выделением целевого продукта.

Способ активации хелперных т-клеток и композиция для применения в данном способе // 2680539

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к активации хелперных Т-клеток, которые специфичны к пептиду WT1, и может быть использовано в медицине для индукции иммунного ответа против WT1-экспрессирующей злокачественной опухоли.

Усовершенствованный амплификатор // 2681914

Изобретение относится к амплификатору, содержащему вращающуюся платформу, имеющую реакционные лунки и/или выполненную с возможностью приема реакционных контейнеров.

Способ определения серы в виде иона сульфата в водной вытяжке из почв и устройство для осуществления способа // 2681855

Изобретение относится к аналитической химии и может быть использовано для определения содержания иона сульфата в почвах сельскохозяйственного назначения. Для этого получают водную вытяжку из почвы, отбирают аликвоту, переносят в другую емкость и добавляют в нее точное количество раствора известной концентрации хлорида бария.

Способ определения линейных ресурсов углеводородных отложений нетрадиционного резервуара юрской высокоуглеродистой формации // 2681801

Изобретение относится к способам и методам петрофизических и геохимических исследований коллекции керна нетрадиционного резервуара юрской высокоуглеродистой формации (ЮВУФ) и может быть использовано при определении линейных ресурсов нефти и газа, технически извлекаемых из ЮВУФ, с учетом их различной степени связанности с матрицей породы и заполнения сообщающихся и/или не сообщающихся пор.

Способ хроматографического анализа смеси углеводородов и газовый хроматограф для его осуществления // 2681665

Изобретение относится к газовой хроматографии и может быть использовано при анализе сложных смесей жидких нефтепродуктов. Способ хроматографического анализа смесей веществ и хроматограф для осуществления этого способа включают применение двух последовательно соединенных хроматографических колонок, при котором пробу анализируемой смеси вводят в поток газа-носителя на вход первой колонки и после перехода легких компонентов смеси, представляющих интерес для анализа, во вторую колонку поток газа-носителя переносят на вход второй колонки, продувают первую колонку частью потока газа-носителя с содержащимися в нем тяжелыми компонентами пробы с входа первой колонки в атмосферу и детектируют выходящие из второй колонки разделенные легкие компоненты смеси, далее после выхода легких компонентов, представляющих интерес для анализа, из второй колонки в детектор и их регистрации объемную скорость части потока газа-носителя, используемого для продувки первой колонки, увеличивают в 10-50 раз по сравнению с первоначальной скоростью продувки, введенная проба анализируемой смеси испаряется в испарителе и разделяется на первой колонке потоком газа-носителя на легкие и тяжелые компоненты, далее легкие и тяжелые компоненты переходят и разделяются на дополнительной третьей колонке, далее поступают в дополнительный детектор и регистрируются, после этого закрывают клапаны, расположенные на входе, и продувают первую и вторую колонку с содержащимися в них компонентами пробы частью потока газа-носителя, проходящего между первой и второй колонками, скорость газа-носителя во время продувки в 2-3 раза больше, чем во время анализа.

Устройство для отбора средней за полёт пробы воздуха от авиационных газотурбинных двигателей при проведении испытаний на летающих лабораториях // 2681192

Изобретение относится к технике отбора образцов проб воздуха, отбираемых от компрессора авиационных газотурбинных двигателей (ГТД). Устройство для отбора средней за полет пробы воздуха от авиационных газотурбинных двигателей при проведении испытаний на летающих лабораториях содержит диффузор с одним внутренним соплом, ориентированным по направлению потока, отбираемого от компрессора газотурбинного двигателя воздуха, пробоотборник с встроенными концентраторами, тройник.

Способ отбора кондиционной пробы пластовой воды с помощью опробователей пластов на кабеле // 2681050

Изобретение относится к нефтегазовой промышленности, к области исследования скважин - способу отбора кондиционных проб пластовой воды современными приборами ОПК (опробователи пластов на кабеле) для дальнейшего изучения физико-химических свойств воды и использования полученных данных при подсчете запасов УВС (углеводородного сырья).

Биологическое количественное определение пептидогликанов // 2680885

Способ диагностики туберкулеза легких // 2680838

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике и фтизиатрии, касается способа диагностики туберкулезной инфекции у взрослых людей.

Способ определения солей фитиновой кислоты в семенах растений // 2680833

Изобретение относится к аналитической химии, предназначено для определения органического соединения фитина в семенах растений. Способ определения солей фитиновой кислоты в семенах растений включает экстракцию фитина из сырья соляной кислотой, проведение дополнительной очистки солянокислой вытяжки добавлением к ней смеси изоамилового спирта с хлороформом (1:24 об.

Устройство для измерения спектра размеров аэрозольных частиц и способ измерения спектра размеров аэрозольных частиц // 2680661

Изобретение относится к исследованию дисперсных характеристик аэрозолей различной природы и может быть использовано в метеорологии, в нанопроизводстве, для контроля нанобезопасности на рабочих местах, для определения ингаляционной дозы при применении аэрозольных форм доставки лекарственных средств.

Композиции антитела к интегрину β1 и способы их применения // 2681994

Настоящее изобретение относится к иммунологии. Предложено гуманизированное антитело или его функциональный фрагмент, которые специфически связываются с интегрином бета-1. Кроме того, представлена молекула нуклеиновой кислоты, кодирующая антитело или его фрагмент, а также экспрессирующий вектор и клетка-хозяин. Рассмотрена фармацевтическая композиция, иммуноконъюгаты, содержащие антитело, связанное с детектируемой или терапевтической группой, способ лечения и способ выявления заболевания, связанного с экспрессией интегрина бета-1. Данное изобретение может найти дальнейшее применение в лечении и диагностике различных видов рака и воспалительных заболеваний. 9 н. и 25 з.п. ф-лы, 32 ил., 3 табл., 10 пр.