Способ оценки состояния микробиоты кишечника

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для оценки состояния микробиоты кишечника. Для этого осуществляют взятие пробы крови. Проводят центрифугирование крови при 1500 об/мин в течение 15 минут. После чего на пластинку Сорбфил ПТСХ-АХ-В-УФ отдельно наносят 2 пробы: 0,1 мкл плазмы крови и 1,0 мкл стандартной смеси деконъюгированных желчных кислот. Затем пластинку помещают в камеру с концентрированной уксусной кислотой. По окончании элюирования пластинку вынимают и вентилируют в течение 20 мин при 100°C. Обрабатывают водным аэрозолем и выдерживают до появления белых пятен на прозрачном фоне пластинки. По длине пробега пятна пробы в сравнении с длиной пробега пятна стандартной смеси идентифицируют деконъюгированные желчные кислоты в пробе. Контуры пятен обрисовывают и рассчитывают их площади, по величинам которых устанавливают количественное содержание деконъюгированных желчных кислот. При их величине, равной и менее 15,8±1,56 нг/л, состояние микробиоты кишечника оценивают сбалансированным. Способ позволяет установить избыточный рост патогенной микрофлоры и оценить состояние микробиоценоза кишечника. 1 табл., 3 пр.

 

Предлагаемое изобретение относится к области медицины, а именно к биохимии, и может быть использовано для оценки состояния микробиоценоза кишечника и прогнозирования воспалительного процесса в нем.

Известно, что основой воспалительного процесса в кишечнике являются продукты жизнедеятельности микрофлоры. Дисбактериоз кишечника рассматривается как клинико-лабораторный синдром, возникающий при ряде заболеваний и клинических ситуаций и характеризующийся изменением качественного и/или количественного состава нормальных микроорганизмов, их избыточным или недостаточным ростом, следствием чего являются метаболические, иммунологические нарушения и различные клинические проявления.

Известен способ оценки воспалительного процесса путем определения С - реактивного белка (СРБ) в сыворотке крови. Определение СРБ основано на его способности образовывать иммунные комплексы с антителами, содержащимися в специфической сыворотке. Это приводит к увеличению абсорбции раствора, которую измеряют на спектрофотометре при длине волны 340 нм. (Камышников B.C. - Справочник по клинико-биохимическим исследованиям и лабораторной технике М.: МЕДпресс-информ., - 2004. - с. 208).

В норме содержание СРБ в сыворотке крови составляет 0,06-5,0 мг/л. Уровень 5-10 мг/л - признак вялотекущего воспалительного процесса, связанного с высоким риском сердечно-сосудистых заболеваний и их осложнений, таких как инфаркт миокарда, инсульт (Дати Ф., Метцманн Э. Белки. Лабораторные тесты и клиническое применение. М.: Лабо-ра, 2007. - с 63-64).

Недостатком данного способа является отсутствие специфичности СРБ, т.к. он повышается при инфекциях, травмах, опухолях, ожогах, активном ревматоидном процессе и не отражает состояние микробиоценоза кишечника. Следует так же учитывать, что высокая вариабельность СРБ зависит от многих факторов, как в сторону увеличения - ожирение, понижение уровня ЛПВП, повышение уровня триглицеридов, курение, так и уменьшения - снижение массы тела, прием лекарственных препаратов - аспирина, производных никотиновой кислоты, статинов, фибратов.

Наиболее близким по технической сущности к предлагаемому является определение метаболических нарушений в организме больного при эндогенной интоксикации путем определения окисленных метаболитов триптофана - токсических продуктов, которые вызывают глубокие, вплоть до поражения различных органов и систем, изменения (Пат. 2249219 Российская Федерация, МПК G01N 33/68, G01N 30/90. Способ определения окисленных метаболитов триптофана при эндогенной интоксикации / Горохова В.Г., Кузнецова Э.Э., Горохов А.Г., Рунович А.А.; заявитель и патентообладатель НЦ РВХ ВСНЦ СО РАМН. - №2003107548/15; заявл. 19.03.2003; опубл. 27.03.2005, Бюл. №9).

Известный способ осуществляют следующим образом. У пациента берут пробу венозной крови, которую центрифугируют, супернатант наносят на бумажный фильтр и высушивают. Затем фильтр погружают в раствор, содержащий ароматический альдегид, ацетон и концентрированную соляную кислоту, взятые в соотношении 70:5:1, выдерживают в течение 2-3 минут. После чего повторно высушивают и по интенсивности и цветовым оттенкам определяют качественное и полуколичественное содержание окисленных метаболитов триптофана.

К недостаткам известного способа, как и аналогичного, следует отнести невозможность определения состояния микробиоценоза кишечника, т.к. окисленные продукты триптофана являются не только продуктами жизнедеятельности кишечной микрофлоры, но и промежуточными, а также и конечными продуктами нарушения обменных процессов в организме.

Кроме этого известный способ не достаточно точен, т.к. позволяет определить только качественный и полуколичественный состав метаболитов триптофана в пробе.

Задачей заявляемого технического решения является разработка способа оценки состояния микробиоты кишечника, основанного на определении основных продуктов ферментативной жизнедеятельности микрофлоры - деконъюгированных желчных кислот (ДЖК).

Техническим результатом предлагаемого способа является повышение точности и специфичности оценки состояния микробиоценоза кишечника за счет определения в крови количественного содержания деконъюгированных желчных кислот - маркеров дисбаланса состава кишечной микрофлоры.

Технический результат достигается тем, что способ оценки состояния микробиоты кишечника включает взятие пробы крови и ее центрифугирование.

К отличительным приемам заявляемого способа относят то, что центрифугирование проводят при 1500 об/мин в течение 15 минут. Затем на пластинку Сорбфил ПТСХ-АХ-В-УФ отдельно наносят 2 пробы: 0,1 мкл плазмы крови и 1,0 мкл стандартной смеси деконъюгированных желчных кислот, после чего пластинку помещают в камеру с концентрированной уксусной кислотой. По окончанию элюирования пластинку вынимают и вентилируют в течение 20 мин при 100°С. Далее пластинку обрабатывают водным аэрозолем и выдерживают до появления белых пятен на прозрачном фоне пластинки. По длине пробега пятна пробы, в сравнении с длиной пробега пятна стандартной смеси, идентифицируют наличие деконьюгированных желчных кислот в пробе. Контуры пятен обрисовывают и рассчитывают их площади, по величинам которых устанавливают количественное содержание деконьюгированных желчных кислот в пробе. При их величине равной и менее 15,8±1,56 нг/л состояние микробиоты кишечника оценивают сбалансированным. При содержании дегидроксилированых желчных кислот в пробе более 15,8±1,56 нг/л устанавливают нарушение микробиоценоза кишечника.

Проведенный сопоставительный анализ с прототипом показал, что предлагаемый способ отличается от известного вышеперечисленными приемами и, следовательно, соответствует критерию изобретения «новизна».

Анализ патентной и специальной литературы выявил, что предлагаемый способ имеет признаки, отличающие его не только от прототипа, но и от других технических решений в данной и смежных областях биохимии и медицины. В доступной литературе авторами предлагаемого технического решения не установлено способа оценки состояния микробиоты кишечника вышеприведенными приемами.

Известно, что в основе воспалительного процесса в кишечнике лежит нарушение его микробиоценоза и накопление таких аминокислот, как глицин и таурин, которые являются продуктами жизнедеятельности микроорганизмов. При этом глицин и таурин являются составной частью первичных (конъюгированных) желчных кислот. Благодаря действию ферментов кишечной микрофлоры, связанному с отщеплением от молекулы первичных желчных кислот глицина и таурина, а также дегидроксилированию, образуются вторичные желчные кислоты (деконъюгированные). Последние медленнее всасываются в кишечнике, угнетают развитие полезной микробиоты, приводя к нарушению образования мицелл и всасыванию жира, витамина В12. Это провоцирует избыточный бактериальный рост грамположительных анаэробных палочек семейства Lactobacilleae. Процесс сопровождается увеличением содержания деконъюгированных желчных кислот в биосредах организма (Джулай Г.С, Щелоченков С.В.. Микробиота желудочно-кишечного тракта в развитии неалкогольной жировой болезни печени // Верхневолжский медицинский журнал. - 2015. - Т. 14, - вып. 3. - с. 36-41).

Для определения содержания деконъюгированных желчных кислот авторы предлагаемого способа предложено использовать высокоэффективную тонкослойную хроматографию на пластинках Сорбфил ПТСХ-АХ-В-УФ, применяя в качестве элюента концентрированную уксусную кислоту. Появление белых пятен на прозрачном фоне пластинки свидетельствует о наличии деконъюгированных желчных кислот в плазме, идентификация которых была проведена авторами и химическими методами: экстракцией, хроматографией, УФ и ИК-спектроскопиями. Это позволило установить содержание деконъюгированных желчных кислот в крови.

На основании проведенных исследований авторами установлено, что у клинически здоровых людей количество ДЖК в плазме крови составляет 15,8±1,56 нг/л и менее, что свидетельствует о сбалансированном микробиоценозе кишечника. Так же авторами установлено, что увеличение содержания ДЖК указывает на нарушение состояния микробиоценоза кишечника.

Следовательно, отличительные приемы заявляемого способа обеспечивают возможность получения указанного технического результата - повышение точности и специфичности оценки состояния микробиоценоза кишечника. Изложенное позволяет сделать вывод о соответствии технического решения критерию « изобретательский уровень».

Способ, составляющий заявляемое изобретение, предназначен для использования в медицине, а именно в биохимии, физиологии, микробиологии. Возможность его осуществления подтверждена описанными в заявке приемами и средствами, следовательно, предлагаемое решение соответствует критерию «промышленная применимость».

Предлагаемый способ осуществляют следующим образом.

Утром (натощак) у пациента забирают кровь из локтевой вены в пробирку, содержащую 3,8% раствор цитрата натрия, центрифугируют при 1500 об/мин в течение 15 минут, получают плазму. На пластинку Сорбфил ПТСХ-АХ-В-УФ микропипеткой отдельно наносят 0,1 мкл плазмы больного и 1,0 мкл стандартной смеси деконъюгированных желчных кислот. Пластинку помещают в камеру с концентрированной уксусной кислотой на 10-15 мин под контролем за финишем элюента (примерно 1 см от верхнего края пластинки). После окончания элюирования пластинку вынимают, просушивают, вентилируют в течение 20 мин при 100°С. Далее пластинку обрабатывают водным аэрозолем и выдерживают до появления белых пятен на прозрачном фоне пластинки. Появление белых пятен на прозрачном фоне пластинки относят к фракции деконъюгированных желчных кислот. Контуры пятен обрисовывают и рассчитывают их площади, по величинам которых устанавливают количественное содержание ДЖК в пробе. При величине равной и менее 15,8±1,56 нг/л состояние микро-биоценоза кишечника оценивают сбалансированным. Среднее время анализа составляет около 1,5 часов.

Предлагаемый способ оценки состояния микробиоты кишечника поясняется примерами конкретного выполнения.

Пример 1. Клинически здоровый пациент - донор. Утром у пациента-донора (натощак) была забрана кровь из локтевой вены. Кровь была забрана в пробирку, содержащую 3,8% раствор цитрата натрия. Плазму крови от форменных элементов отделили центрифугированием в течение 15 минут при 1500 об/мин. На пластинку Сорбфил ПТСХ-АХ-В-УФ микропипеткой нанесли 0,1 мкл плазмы крови и 1,0 мкл стандартной смеси деконъюгированных желчных кислот. Затем пластинку поместили в камеру с концентрированным раствором уксусной кислоты.

После окончания элюирования - при финише элюента примерно 1 см от верхнего края пластинки, пластинку вынули из этой камеры и вентилировали в течение 20 минут при 100°С. После чего пластинку осторожно обработали водным аэрозолем. Появление белых пятен на прозрачном фоне пластинки было отнесено к фракции ДЖК. Контуры пятен были обрисованы и проведен расчет их площадей. Площадь пятна стандартной смеси деконъюгированных кислот составила 3,15 мм2, содержание ДЖК - 2,17 нг/л; площадь пятна пациента-донора - 21,7 мм2, что составило 14,9 нг/л. Это свидетельствовало о сбалансированном состоянии микрофлоры кишечника.

Пример. 2. Больной А., Диагноз: язвенный колит впервые выявленный, острая атака.

При поступлении пациента А. в стационар содержание ДЖК было определено по предлагаемому способу и составило 48 нг/л, что в 3,03 раза превысило их уровень у клинически здоровых людей, что указывало на нарушение микробиоты кишечника, сопровождающееся тяжестью клинического состояния больного: температура тела 38,0, боли в животе, неоформленный стул с примесью крови, частота стула 5-7 раз в сутки, уменьшение массы тела, выраженная общая слабость. Эндоскопически установлено: отек слизистой оболочки, гиперемия, наличие эрозий, контактная кровоточивость, фибринозный налет на стенке кишечника. Бактериологический анализ слизистой оболочки биоптата толстой кишки показал преобладание анаэробной микрофлоры над аэробной (12:6, при норме 1:10), снижение содержания бифидобактерий до 10%, лактобацилл до 6%, бактероидов до 8%, нарастание условно-патогенной микрофлоры до 70%, появление энтеротоксической E. Coli и клостридий.

После проведенной стандартной терапии состояние больного улучшилось. Содержание ДЖК составило 28 нг/л. Микробный пейзаж также изменился: увеличилось содержание бифидобактерий до 19%, лактобацилл до 13%, бактероидов до 17%, снизилось содержание условно-патогенной флоры.

Следовательно, определение уровня ДЖК позволило провести лабораторный мониторинг состояния микрофлоры кишечника и подтвердить эффективность проводимой терапии.

Пример 3. Больная В., диагноз: распространенный гнойный перитонит. Содержание ДЖК в плазме крови при поступлении составило 42 нг/л, что в 2,6 раза выше, чем в контроле. Это указывало на избыточный бактериальный рост и нарушение микробиоценоза кишечника и сопровождалось тяжелым клиническим состоянием больной.

Авторами предлагаемого способа было исследовано 50 образцов крови пациентов, проходивших лечение в Иркутской ОКБ, из них: 20 пациентов с распространенным гнойным перитонитом, панкреонекрозом - 15, воспалительными заболеваниями кишечника (ВЗК) - 15. Группу клинически здоровых людей (контроль) составили 15 человек. Полученные данные представлены в таблице.

Представленные патологии проявляются дисбиотическими нарушениями, которые характеризуются изменением соотношения между аэробной и анаэробной флорой, снижением содержания бифидобактерий, лактобацилл. бактероидов, энтеротоксических штаммов, увеличением численности условно-патогенных бактерий.

Авторами предлагаемого способа на основании проведенных исследований установлено, что у клинически здоровых людей содержание деконъюгированных желчных кислот составляет 15,8±1,56 нг/л, что свидетельствует о сбалансированном состоянии микробиоты кишечника. Так же авторами установлено, что увеличение уровня ДЖК указывает на избыточный бактериальный рост микрофлоры в кишечнике.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет с более высокой точностью и специфичностью оценить состояние микробиоценоза кишечника. Повышенное содержание деконьюгированных желчных кислот служит маркером дисбаланса состава кишечной микрофлоры и приводит к развитию разных патологий.

Способ оценки состояния микробиоты кишечника, включающий взятие пробы крови и ее центрифугирование, отличающийся тем, что центрифугирование проводят при 1500 об/мин в течение 15 мин, после чего на пластинку Сорбфил ПТСХ-АХ-В-УФ отдельно наносят 2 пробы: 0,1 мкл плазмы крови и 1,0 мкл стандартной смеси деконъюгированных желчных кислот, затем пластинку помещают в камеру с концентрированной уксусной кислотой, по окончании элюирования пластинку вынимают и вентилируют в течение 20 мин при 100°C, далее обрабатывают водным аэрозолем и выдерживают до появления белых пятен на прозрачном фоне пластинки, по длине пробега пятна пробы, в сравнении с длиной пробега пятна стандартной смеси, идентифицируют деконъюгированные желчные кислоты в пробе, контуры пятен обрисовывают и рассчитывают их площади, по величинам которых устанавливают количественное содержание деконъюгированных желчных кислот в пробе и при их величине, равной и менее 15,8±1,56 нг/л, состояние микробиоты кишечника оценивают сбалансированным.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии, акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования состояния микрофлоры кишечника у новорожденных детей.

Группа изобретений относится к области определения концентрации глюкозы. Способ определения концентрации глюкозы в крови содержит этапы, на которых: вставляют тест-полоску в разъем порта полоски измерительного устройства для соединения по меньшей мере двух электродов; инициируют последовательность измерения после нанесения образца.
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для определения высвобождения аденозинтрифосфорной кислоты из эритроцитов in vitro.
Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для скринингового определения высокой вероятности наличия аллергического характера воспаления при бронхолегочных заболеваниях у детей старше 2 лет с повышенным уровнем в крови интерлейкина-8.

Группа изобретений относится к медицине и предназначена для диагностики и лечения синдрома раздраженного кишечника (СРК). Описаны способы, анализы и системы для диагностики, выбора терапии и лечения СРК на основании уровня антител к винкулину и к CdtB у субъекта.

Изобретение относится к медицине, кардиологии, оценке индивидуального риска развития отдаленных (более 5 лет после чрескожного коронарного вмешательства, ЧКВ) фатальных сердечных и цереброваскулярных событий.

Изобретение относится к области медицины, а именно к хирургии, и предназначено для прогнозирования течения репаративного процесса лапаротомной раны при остром перитоните.

Изобретение относится к медицине, а именно к медицинской диагностике, и может быть использовано для диагностики хламидийной урогенитальной инфекции у мужчин на основе оценки уровней цитокинов.

Изобретение относится к области исследования характеристик крови и ее компонентов, в частности их свертываемости. Устройство для исследования пространственного свертывания крови и ее компонентов содержит термостатируемую камеру с узлом термостабилизации, внутри которой размещена емкость с исследуемым образцом и активатором, светодиоды, и регистрирующий модуль с видеокамерой.

Настоящее изобретение относится к способу измерения гемолиза или гематокрита в образце крови, включающему: a) измерение проводимости образца крови по меньшей мере на трех многочастотных входах переменного тока; b) вычисление значения иммиттанса за каждый из по меньшей мере трех многочастотных входов переменного тока; и c) подвергание каждого значения иммиттанса, вычисленного на этапе b), одной из (1) функции, которая отображает значения иммиттанса к уровням лизированной крови, и определение уровня лизированной крови в образце, или (2) функции, которая отображает значения иммиттанса к уровням гематокрита, и определение уровня гематокрита в образце, в то же время компенсируя уровень электролита образца.

Изобретение относится к области медицины, а именно к хирургии, и предназначено для прогнозирования течения репаративного процесса лапаротомной раны при механической желтухе неопухолевого происхождения. У больного сразу же после операции и через двое суток после нее по показателям периферической крови определяют выраженность нарушений функционального состояния печени по уровню общего билирубина, общей и эффективной концентрации альбумина и определяют активность оксидативного стресса по уровню малонового диальдегида. Рассчитывают индекс прогнозирования течения процесса заживления лапаротомной раны (ИППЗТ) по формуле ,где ОКАн – общая концентрация альбумина в крови в норме, ОКА1 – общая концентрация альбумина в крови после операции, ОКА2 – общая концентрация альбумина в крови через двое суток после операции, ЭКАн – эффективная концентрация альбумина в крови в норме, ЭКА1 – эффективная концентрация альбумина в крови после операции, ЭКА2 – эффективная концентрация альбумина в крови через двое суток после операции, ОБн – уровень общего билирубина в крови в норме, ОБ1 – уровень общего билирубина в крови после операции, ОБ2 – уровень общего билирубина в крови через двое суток после операции, МДАн – уровень малонового диальдегида в крови в норме, МДА1 – уровень малонового диальдегида в крови после операции, МДА2 – уровень малонового диальдегида в крови через двое суток после операции. Значение ИППЗТ более 17,1 свидетельствует о низкой степени вероятности нарушения процесса заживления тканей послеоперационной раны. Значение ИППЗТ от 13,1 до 17,0 констатирует среднюю степень вероятности нарушения процесса заживления тканей послеоперационной раны. Значение ИППЗТ менее 13,0 констатирует высокую степень вероятности нарушения процесса заживления тканей послеоперационной раны. Использование изобретения позволяет повысить точность прогнозирования течения процесса заживления лапаротомной раны при механической желтухе неопухолевого происхождения. 4 табл., 3 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для подбора оптимального криопротектора по содержанию гликогена в лейкоцитах консервированной крови. Для этого у больного до начала криогемотрансфузионной терапии получают порцию венозной крови, делят на равные части в пробирки, в одной из которых контрольная проба (КП) крови не содержит криопротектора, в другие добавляют по одной равной дозе тестируемых криопротекторов - опытные пробы (ОП). Пробирки герметизируют пробками, содержимое перемешивают на шейкере при температуре плюс 37°C в течение 4 ч, капли ОП и КП наносят в объеме 4 мкл на предметные стекла, делают 2-3 мазка, быстро высушивают на воздухе при комнатной температуре, фиксируют в 10% спирт-формалиновой смеси, окрашивают на гликоген по методу Шабадаша, лейкоциты микроскопируют в проходящем свете. Проводят сравнительное исследование среднего цитохимического коэффициента (СЦК) сегментоядерных (с/я) нейтрофилов и лимфоцитов ОП и КП; при равности показателей СЦК ОП и СЦК КП тестируемый криопротектор оценивают как оптимальный для конкретного больного и пригодный к использованию; при значениях СЦК ОП, отличных от СЦК КП, делают заключение как о непригодном к использованию криопротекторе. Изобретение обеспечивает возможность индивидуального подбора оптимального криопротектора на доклиническом этапе криогемотрансфузионной терапии. 1 табл., 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к фармакологии и токсикологии, может быть использовано для количественного определения 4-амино-1-(3-нитро-2-оксо-1-фенил-1,2-дигидро-1,6-нафтиридин-5-ил)пиридиний хлорида в биологических средах. Способ включает экстракцию определяемого вещества ацетонитрилом при кислом значении рН среды с добавлением натрия хлорида с последующим определением его методом высокоэффективной жидкостной хроматографии с градиентным режимом элюирования с использованием в качестве подвижной фазы смеси 0,5% раствора калия фосфорнокислого однозамещенного, подкисленного до рН 4,0 ортофосфорной кислотой, и метанола при градиенте концентрации последнего от 5 до 75%. 2 пр., 5 ил., 2 табл.
Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, клинической лабораторной диагностике и гематологии. Способ определения резистентности к антиагрегантным препаратам у пациентов с ишемической болезнью сердца, принимающих лекарственные средства группы антиагрегантов не менее 6 месяцев, заключается во взятии крови в пробирку с 3,8% цитратом натрия в соотношении 9:1, разделении центрифугированием на плазму и эритроциты с получением богатой и бедной тромбоцитами плазмы, определении индивидуально пациенту значений светопропускания с графической регистрацией в течение 5 мин с постоянным перемешиванием и температурой 37°С, добавлении к суспензии тромбоцитов в соотношении 10:1 индуктора агрегации тромбоцитов коллагена однократно на 10 секунде регистрации агрегации тромбоцитов на лазерном агрегометре в концентрации 2 мкмоль/л, при этом дополнительно вносят к богатой тромбоцитами плазме индуктор коллаген в соотношении 2:1 по 2 мкмоль/л на 1, 2, 3 и 4 минутах исследования и при получении значений агрегации тромбоцитов в диапазоне от 45 до 100% определяют резистентность к антиагрегантным препаратам. 3 пр.

Изобретение относится к области медицины, а именно к офтальмологии и эндокринологии, и предназначено для ранней диагностики активной фазы эндокринной офтальмопатии (ЭОП). Для ранней диагностики активности ЭОП пациентам определяют в сыворотке крови содержание антител к рецептору тиреотропного гормона (TSAbs - thyroid stimulating antibodies), интерлейкина 17 (IL-17 - interleukin-17), ВВ-изоформы тромбоцитарного фактора роста (PDGF-BB - platelet-derived growth factor - BB) и матриксной металлопротеиназы 13 (ММР-13 - matrix metalloproteinases-13) с использованием иммуноферментного анализа. Рассчитывают значения дискриминантных функций f1 и f2 по формулам:f1=-2,68+0,11×x1+0,19×x2+0,002×x3+0,06×x4f2=-26,67+0,74×x1+0,46×x2+0,007×x3+0,19×x4,где цифровые показатели - константа и коэффициенты регрессии, x1 - уровень TSAbs, x2 - уровень IL-17, x3 - уровень PDGF-BB, x4 - уровень ММР-13. При значении f1<f2 диагностируют активную фазу ЭОП, а при значении f1>f2 - неактивную ЭОП. Использование изобретения позволяет осуществить раннюю диагностику активной фазы ЭОП, когда признаки заболевания еще не достигли клинической манифестации, и определить дальнейшую индивидуальную терапевтическую тактику. 2 табл., 3 пр.

Изобретение относится к медицине и ветеринарии и касается способа прижизненной дифференциальной диагностики туберкулеза и микобактериозов крупного рогатого скота. Для этого используют индуцированную люминолзависимую хемилюминесценцию, в качестве объекта исследований используют сыворотку от положительно реагирующего на ППД-туберкулин крупного рогатого скота хозяйств с неясной эпизоотической ситуацией. В качестве основного индуктора используют комплексный аллерген из атипичных микобактерий (КАМ), а в качестве дополнительного индуктора используют аллерген туберкулезный рекомбинантный (АТР). Изобретение позволяет ускорить и повысить достоверность прижизненной дифференциальной диагностики туберкулеза и микобактериозов крупного рогатого скота за счет использование аллергенов in vitro, предотвратить необоснованный убой продуктивных животных в хозяйствах различных форм собственности, в том числе фермерских и личных подсобных. 3 табл., 2 пр.

Изобретение относится к области аналитической химии. Способ подготовки пробы мочи для определения монофталатов методом ВЭЖХ/масс-спектрометрии включает центрифугирование пробы мочи 10 мин со скоростью 2000 об/мин., затем в пробу вносят концентрированную уксусную кислоту до достижения pH смеси 4,8., далее к 5 см3 подкисленного образца добавляют 0,2 см3 водного раствора фермента β-глюкуронидазы (Helix Pomatia). Полученную смесь инкубируют при температуре +37°С в течение 24 часов, охлаждают и доводят до pH 7, добавляя 40%-ный раствор гидроксида натрия. Смесь центрифугируют 10 мин со скоростью 2000 об/мин. и отбирают верхний слой в количестве 5 см3. Используя этот верхний слой, проводят ТФЭ на картридже Oasis HLB 5сс в два этапа: на первом этапе пропускают через него последовательно 1 см3 метанола и 1 см3 дистиллированной воды, полученные сливы удаляют, наносят на картридж, отобранный после центрифугирования верхний слой жидкости в количестве 5 см3, промывают картридж 1 см3 5%-ным раствором метанола и пропускают через картридж 0,5 см3 ацетонитрила, собирая экстракт. На втором этапе этот же картридж вначале последовательно промывают 1 см3 0,4%-ным раствором натрия гидроокиси, 1 см3 5%-ного раствора метанола и полученный слив удаляют, затем пропускают через указанный картридж 0,5 см3 ацетонитрила, присоединяя полученный при этом экстракт к экстракту, полученному на первом этапе. Объединенный экстракт фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,2 мкм, получая подготовленную для исследования пробу мочи. Изобретение обеспечивает повышение степени экстракции монометилфталата (ММФ) до 100%, моноэтилфталата (МЭФ) до 94%, монобутилфталата (МБФ) - 96%, монобензилфталата (МБзФ) - 92%, моноэтилгексилилфталата (МЭГФ) - 100% с погрешностью извлечения ± 10% и позволяет расширить диапазон измеряемых концентраций монофталатов от 10-4 до 10-1 мг/дм3. 1 ил. , 8 табл.

Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования тяжести геморрагической лихорадки с почечным синдромом. Для этого пациенту проводят общее и биохимическое исследование крови, определяют: определяют гематокрит, относительное содержание сегментоядерных и палочкоядерных лейкоцитов и моноцитов, концентрацию креатинина и С-реактивного белка. Вычисляют значения функций классификации степеней тяжести ГЛПС по формулам: где KF1 - значение функции классификации легкой формы ГЛПС; KF2 - значение функции классификации среднетяжелой формы ГЛПС; KF3 - значение функции классификации тяжелой формы ГЛПС; x1 - гематокрит, %; х2 - относительное содержание сегментоядерных лейкоцитов, %; х3 - относительное содержание палочкоядерных лейкоцитов, %; x4 - относительное содержание моноцитов, %; x5 - концентрация креатинина, мкмоль/л; x6 - концентрация C-реактивного белка, мг/л, определяют степень тяжести ГЛПС, за которую принимают индекс функции классификации с наибольшим значением. Использование данного способа позволяет прогнозировать тяжесть геморрагической лихорадки с почечным синдромом, что дает возможность оптимизировать лечебную тактику данных больных. 3 пр., 1 табл.

Изобретение относится к системам динамического контроля (или мониторинга) газовых сред и устройствам неинвазивного контроля состояния энергетического обмена организма человека в условиях чрезмерных или разнонаправленных физических, психологических, стрессовых нагрузок в течение продолжительного времени. Предлагаемая система отбора проб выдыхаемого воздуха для мониторинга энергетических затрат организма человека предусматривает решение нескольких задач: а) создание системы измерения энергетических затрат организма в экстремальных условиях, не требующей зависимости от энергоисточников, б) динамичность исследований, позволяющая в режиме мониторинга производить отбор проб воздуха через короткие промежутки времени при частой смене непродолжительных видов деятельности в экстремальных условиях; в) доставка множества проб воздуха к единым центрам оценки газового состава и определения энерготрат, находящимся дистанционно на удалении в стационарных и мобильных пунктах измерения; г) низкое сопротивление дыханию (не более 30 мм вод.ст.) и снижение ошибки при оценке легочной вентиляции за счет малоинерционных волюметров и использования двух легких (до 100 г) мешков из плотной ткани объемом 5 л каждый - аналогов дыхательных мешков портативных дыхательных мешков, используемых ранее на ВМФ (ПДУ-1 и ПДУ-2); д) снижение объемных характеристик и массы системы забора проб, позволяющей проводить исследования в малогабаритных автономных объектах и помещениях и снижающей ошибку за счет весовых характеристик; учет всех необходимых поправок и коэффициентов (давление, температура, влажность), оказывающих влияние на конечные величины газообмена и энерготрат; е) возможность проводить мониторинг (многоразовый забор проб) динамики энерготрат, не снимая с испытателя предлагаемую систему и проводя заборы проб воздуха в специальные камеры, что позволяет более объективно отражать или моделировать реальные нагрузки при отдельных видах профессиональной деятельности в экстремальных условиях; ж) возможность комплектации системы из элементов существующих приборов и средств измерения; з) расширение и повышение объективности методической базы. 1 ил.

Изобретение относится к области медицины, а именно к лабораторным методам исследования, и предназначено для обучения студентов глюкозооксидазному методу количественного определения глюкозы в моче с использованием смесей, имитирующих нормальную и патологическую мочу человека. Для этого в качестве смесей, имитирующих мочу, используют натрий-фосфатный буфер (рН 6,0-7,0), подкрашенный 1% раствором титанового желтого до цвета, аналогичного цвету нормальной мочи, без или с добавлением порошка глюкозы (декстрозы) до 0,5-2,0% (28-112 ммоль/л) от объема имитирующей мочу смеси, соответственно. По результатам выполненного глюкозооксидазного метода устанавливают наличие или отсутствие у потенциального пациента глюкозурии. Использование изобретения обеспечивает 100%-ную точность определения уровня глюкозы в имитаторе мочи, позволяет многократно и самостоятельно выполнить обучающие методики за счет их безопасности, простоты, воспроизводимости, однозначности интерпретации, низкой стоимости для освоения и закрепления умений и навыков по количественному определению глюкозы в моче глюкозооксидазным методом. 1 табл., 1 пр.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для оценки состояния микробиоты кишечника. Для этого осуществляют взятие пробы крови. Проводят центрифугирование крови при 1500 обмин в течение 15 минут. После чего на пластинку Сорбфил ПТСХ-АХ-В-УФ отдельно наносят 2 пробы: 0,1 мкл плазмы крови и 1,0 мкл стандартной смеси деконъюгированных желчных кислот. Затем пластинку помещают в камеру с концентрированной уксусной кислотой. По окончании элюирования пластинку вынимают и вентилируют в течение 20 мин при 100°C. Обрабатывают водным аэрозолем и выдерживают до появления белых пятен на прозрачном фоне пластинки. По длине пробега пятна пробы в сравнении с длиной пробега пятна стандартной смеси идентифицируют деконъюгированные желчные кислоты в пробе. Контуры пятен обрисовывают и рассчитывают их площади, по величинам которых устанавливают количественное содержание деконъюгированных желчных кислот. При их величине, равной и менее 15,8±1,56 нгл, состояние микробиоты кишечника оценивают сбалансированным. Способ позволяет установить избыточный рост патогенной микрофлоры и оценить состояние микробиоценоза кишечника. 1 табл., 3 пр.

Наверх