Пакет для расфасовки разбавленной спермы животного, приемлемой для искусственного осеменения, в частности, животных семейства свиней, и содержащая его система
Изобретение относится к ветеринарии, в частности к пакету и системе для расфасовки разбавленной спермы животного, приемлемой для искусственного осеменения. Пакет содержит два гибких листа, скрепленных друг с другом зоной сварки, ограничивающей полость, имеющую заданный объем после заполнения пакета. Полость выполнена с возможностью содержания дозы разбавленной спермы животного, имеющей упомянутый заданный объем. Причем каждый гибкий лист имеет поверхность, обращенную к полости, которая составляет часть слоя термопластичного материала, пригодного для сварки. Пакет в одном или предпочтительно в каждом из листов слой термопластичного материала, пригодного для сварки, содержит триклозан, а соотношение между заданным объемом полости и суммой площадей поверхностей листов, обращенных к полости, находится в интервале от 0,3 до 0,5 мл/см2. Система содержит пакеты и разбавляющую среду без антибиотиков. Использование изобретения позволит уменьшить использование антибиотиков. 2 н. и 10 з.п. ф-лы, 10 ил., 7 табл., 3 пр.
Изобретение относится, в общем случае, к хранению разбавленной спермы животного, приемлемой для искусственного осеменения, в частности, животных семейства свиней.
Известно, что в случае этого вида животных в интервале между забором свежей спермы и осеменением свежую сперму смешивают с разбавляющей средой для получения разбавленной спермы и затем разбавленную сперму расфасовывают по индивидуальным дозам, каждая из которых содержит заданный объем, приемлемый для осуществления искусственного осеменения, причем каждая доза расфасована в приемник, в котором она будет храниться до осуществления искусственного осеменения.
Для расфасовки индивидуальных доз разбавленной спермы известны, в частности, из европейской заявки EP 0605406, из заявки PCT WO 01/13818, из французской заявки 2813784 или из французской заявки 2848812 пакеты, состоящие из двух листов из гибкого термопластичного материала, скрепленных друг с другом зоной сварки, ограничивающей полость, имеющую заданный объем после заполнения пакета, причем указанная полость предназначена для вмещения дозы разбавленной спермы животного, имеющей этот заданный объем.
В общем случае, листы из гибкого термопластичного материала являются двухслойными, причем внутренний слой (слой, имеющий поверхность, параллельную другому листу и прилежащую к полости) выполнен из термопластичного материала, приемлемого для сварки, с целью обеспечения реализации зоны сварки, а внешний слой в общем случае является газонепроницаемым и имеет температуру плавления более высокую, чем температура плавления приемлемого для сварки термопластичного материала, образующего внутренний слой.
Зона сварки в общем случае формирует, кроме полости, канал, через который полость наполняется разбавленной спермой животного, и канал, служащий для присоединения пакета к зонду для искусственного осеменения, предназначенному для введения животному дозы, расфасованной в пакет.
Известно, что для сохранения качества спермы во время хранения в разбавляющей среде предусматривают наличие питательных ингредиентов, а также антибактериальных ингредиентов, предпочтительно антибиотиков.
Настоящее изобретение направлено на отказ от применения или в любом случае на значительное уменьшение использования антибиотиков для консервации разбавленной спермы животного.
С этой целью в настоящем изобретении предлагается пакет для расфасовки разбавленной спермы животного, приемлемой для искусственного осеменения, в частности, животных семейства свиней, состоящий из двух гибких листов, скрепленных друг с другом зоной сварки, ограничивающей полость, имеющую заданный объем после заполнения указанного пакета, причем указанная полость предназначается для вмещения дозы разбавленной спермы животного, имеющей заданный объем, причем каждый гибкий лист имеет свою поверхность, прилежащую к полости, которая составляет часть слоя из термопластичного материала, приемлемого для сварки; причем пакет отличается тем, что в одном или предпочтительно в каждом из листов слой из термопластичного материала, приемлемого для сварки, содержит триклозан, а соотношение между заданным объемом полости и суммой площадей поверхностей листов, прилежащих к полости, находится в интервале от 0,3 до 0,5 мл/см2.
Известно, что триклозан имеет брутто-формулу C12H7Cl3O2, соответствующую структурной формуле:
и идентифицирован под номером CAS 3380-34-5.
Известно также, что триклозан представляет собой биоцидное вещество, приемлемое для введения в полимерные материалы для того, чтобы эти материалы в свою очередь проявляли биоцидные свойства, и в принципе триклозан считается также спермицидным агентом (см., например, PCT WO 00/72839).
Хотя это было неожиданно, но работы, проведенные заявителем позволили констатировать, что возможно, в частности соответственно изложенному далее, вводить в слой из термопластичного материала, приемлемого для сварки, триклозан в количестве, достаточно большом для того, чтобы доза разбавленной спермы, содержащейся в пакете, оставалась бактериостатической, и достаточно малом и не вредящем подвижности сперматозоидов, содержащихся в дозе.
Настоящее изобретение основано на наблюдении, что в пакете для хранения разбавленной спермы площадь поверхности зоны контакта дозы разбавленной спермы и листов пакета является особенно высокой по отношению к объему, который может вмещать полость.
Исходя из этого наблюдения, был поставлен вопрос с целью выяснения, может ли действие триклозана из одного или нескольких листов на разбавленную сперму обеспечиваться не благодаря высвобождению триклозана из листов в сперму, а в основном благодаря контакту, в виду значительности площади поверхности, из чего следует, что каждая часть разбавленной спермы, содержащейся в пакете, находится относительно близко к поверхностям листов, прилежащим к полости.
Иными словами, был поставлен вопрос с целью выяснения, является ли достаточным поверхностное (а не объемное) действие для получения бактериостатического эффекта, обеспечивающего консервацию дозы разбавленной спермы.
Этот вопрос была поставлен в предположении, что если триклозан не высвобождается в разбавленную сперму (или по меньшей мере высвобождается в очень малом количестве), то действие триклозана на сперматозоиды будет незначительным и, следовательно, не будет вредить их подвижности, при этом сперма сохранит свою способность к оплодотворению.
Работы, проведенные заявителем, позволили проверить, действительно ли введение в слой из термопластичного материала, приемлемого для сварки, одного или нескольких листов пакета соответствующего количества триклозана, в частности соответственно описанному далее, позволяет получить бактериостатический эффект, требуемый для консервации разбавленной спермы без высвобождения (или по меньшей мере с высвобождением очень малого количества) триклозана в дозу, содержащуюся в пакете, так что при этом сперматозоиды действительно обладают подвижностью, которая остается эффективной по завершении их нахождения в пакете.
В случае пакета согласно настоящему изобретению диапазон значений соотношения между объемом полости после ее заполнения и площадью поверхности одного или нескольких листов, прилежащих к полости, определяли как диапазон, в котором особенно эффективно проявляются указанные ранее комбинированные технические эффекты.
Следует отметить, что благодаря пакету согласно настоящему изобретению, в системе, образованной разбавляющей средой и пакетами для расфасовки, эффект хранения дозы разбавленной спермы в бактериостатических условиях обеспечивается не только разбавляющей средой, что позволяет отказаться от применения или в любом случае в значительной степени уменьшить использование антибиотиков, традиционно предусматриваемых для разбавляющей среды.
Следует заметить также, что в отсутствие высвобождения триклозана в дозу разбавленной спермы, содержащейся в пакете, или в любом случае при почти полном отсутствии высвобождения триклозана в разбавленную сперму животное в случае искусственного осеменения не получает или же получает биоцидное вещество в ничтожном количестве.
Согласно предпочтительным характеристикам:
- заданный объем полости находится в интервале от 50 до 100 мл;
- слой из термопластичного материала, приемлемого для сварки, содержит от 1 до 40 мг/м2 триклозана;
- слой из термопластичного материала, приемлемого для сварки, содержит от 10 до 40 мг/м2 триклозана;
- слой из термопластичного материала, приемлемого для сварки, содержит несколько подслоев, выполненных из сортов, отличающихся от сорта термопластичного материала, приемлемого для сварки, причем один или предпочтительно каждый гибкий лист имеет поверхность, прилежащую к полости, которая составляет часть последнего обращенного внутрь подслоя, при этом только последний обращенный внутрь подслой содержит триклозан;
- в последнем обращенном внутрь подслое содержится от 0,0075 до 0,3 масс.% триклозана;
- последний обращенный внутрь подслой составляет от 12 до 18 масс.% слоя из термопластичного материала, приемлемого для сварки;
- один или предпочтительно каждый гибкий лист, помимо слоя из термопластичного материала, приемлемого для сварки, содержит по меньшей мере один другой слой материала, отличающегося от термопластичного материала, приемлемого для сварки, и покрывающего слой из термопластичного материала, приемлемого для сварки, со стороны, отстоящей от указанной полости, причем только слой из термопластичного материала, приемлемого для сварки, содержит триклозан;
- указанной другой слой материала, отличающегося от термопластичного материала, приемлемого для сварки, представляет собой внешний слой, выполненный из термопластичного материала;
- термопластичный материал, приемлемый для сварки, представляет собой полиэтилен (ПЭ), а термопластичный материал внешнего слоя представляет собой полиэфир (ПЭТ); и/или
- слой из термопластичного материала, приемлемого для сварки, имеет толщину в интервале от 20 до 110 мкм.
Во втором аспекте настоящее изобретение относится также к системе для расфасовки в пакеты разбавленной спермы животного, приемлемой для искусственного осеменения, в частности, животных семейства свиней, причем система включает среду, разбавляющую свежую сперму для получения разбавленной спермы, и пакеты для заполнения разбавленной спермой и отличается тем, что указанные пакеты представляют собой пакеты, описанные ранее, а разбавляющая среда не содержит антибиотиков.
Описание настоящего изобретения далее представляет собой подробное описание вариантов осуществления, приведенных далее в качестве пояснительных и неограничительных примеров со ссылкой на прилагаемые чертежи, на которых:
- фиг. 1 представляет собой вид в плане пакета согласно настоящему изобретению в плоском состоянии, то есть до заполнения;
- фиг. 2 представляет собой сечение в плоскости II-II соответственно фиг. 1;
- фиг. 3 и 4 представляют собой виды, подобные фигурам 1 и 2, но показывающие пакет, заполненный дозой разбавленной спермы;
- фиг. 5 представляет собой увеличенный вид фрагмента V соответственно фиг. 4;
- фиг. 6 представляет собой схематическое отображение стадии получения листа из термопластичного материала, из которого выполняют пакет;
- фиг. 7 представляет собой сечение одной из пленок, показанных на фиг. 6;
- на фиг. 8 показан пакет-сборник, содержащий свежую сперму животного;
- на фиг. 9 показан флакон, содержащий разбавляющую среду, смешиваемую со свежей спермой животного для получения разбавленной спермы животного;
- на фиг. 10 показана покрытая защитным пакетом кружка, содержащая разбавленную сперму животного, полученную смешиванием свежей спермы животного из пакета соответственно фиг. 8 и разбавляющей среды из флакона соответственно фиг. 9.
Пакет 10, показанный на фиг. 1, состоит из двух листов 11 и 12 из гибкого термопластичного материала, скрепленных друг с другом зоной сварки 13, ограничивающей полость 14, канал для заполнения 15 и канал для опорожнения 16.
В зону сварки 13 входят два боковых участка 17 и 18, четыре концевых участка 19, 20, 21 и 22, а также перемычка 23.
Боковые участки 17 и 18 идут параллельно и на расстоянии друг от друга.
Боковой участок 17 присоединен в одной из своих крайних точек к концевому участку 19, в то же время в другой крайней точке он присоединен к концевому участку 20.
Боковой участок 18 присоединен в одной из своих крайних точек к концевому участку 21, в то же время в другой крайней точке он присоединен к концевому участку 22.
Перемычка 23 идет между концевым участком 20 и концевым участком 22.
Канал для заполнения 15 расположен между концевым участком 19 и концевым участком 21.
Канал для опорожнения 16 расположен между концевым участком 20 и концевым участком 22 и в отличие от полости 14 закрыт перемычкой 23.
В данном случае боковые участки 17 и 18 являются относительно узкими, в то время как концевые участки 19, 20, 21 и 22 являются относительно широкими.
В данном случае каждый боковой участок 17 и 18 расположен между полостью 14 и соответствующим краем пакета 10.
В плоском состоянии пакета 10, показанного на фиг. 1 и 2, полость 14 пуста, при этом листы 11 и 12 расположены друг против друга.
Полость 14 имеет в целом прямоугольной контур, большие стороны которого ограничены боковыми участками 17 и 18, а маленькие стороны ограничены концевыми участками 19, 21 и 20, 22.
Канал для заполнения 15 одной крайней точкой выходит в полость 14, а другой крайней точкой выходит в направлении наружу от полости 14.
Канал для опорожнения 16 одной крайней точкой выходит в полость 14, а в другой крайней точке закрыт перемычкой 23.
Кроме листов 11 и 12, скрепленных друг с другом зоной сварки 13, пакет 10 содержит в данном случае канюлю 25, расположенную в канале для опорожнения 16.
Для заполнения пакета 10 и более точно полости 14 этого пакета разбавленную сперму вводят через канал для заполнения 15.
На практике используют наконечник, который вставляют в канал для заполнения 15 для начала заполнения объема пакета 10.
Как только пакет 10 и более точно полость 14 заполняется дозой 27 (фиг. 3 и 4) разбавленной спермы, которая взята в заданном объеме, соответственно которому сформирована полость 14, канал для заполнения 15 закупоривают благодаря свариваемому валику 26 (фиг. 3).
На этом расфасовка дозы 27 разбавленной спермы завершается.
Для осуществления искусственного осеменения дозой 27 разбавленной спермы, содержащейся в пакете 10, освобождают канюлю 25, например, протыкая перемычку 23 концом канюли, отстоящим от полости 14, при этом конец канюли 25, отстоящий от полости 14, высвобождается и его присоединяют к зонду для искусственного осеменения.
За более подробными сведениями о пакете 10 можно обратиться к французской заявке 2813784.
Пакет 10, показанный на фиг. 1-4, предусмотрен для вмещения дозы 27 разбавленной спермы, объем которой составляет 70 мл.
Когда пакет 10 находится в плоском состоянии (фиг. 1 и 2), ширина полости 14 (расстояние между боковыми участками 17 и 18) составляет 5,5 см, а расстояние между концевыми участками 19, 21 и 20, 22 составляет 17,3 см.
Таким образом, площадь поверхности 30 листа 11, прилежащей к полости 14, составляет 95 см2.
Аналогичным образом, площадь поверхности 31 листа 12, прилежащей к полости 14, составляет 95 см2.
Совершенно очевидно, что эта площадь поверхности остается той же и тогда, когда пакет находится в заполненном состоянии, показанном на фиг. 3 и 4.
Таким образом, сумма площадей поверхностей листов 11 и 12, прилежащих к полости 14, составляет 95 см2+95 см2 или 190 см2.
Соотношение между заданным объемом, который вмещается в полость 14, и суммой площадей поверхностей листов 11 и 12, прилежащих к полости 14, составляет, следовательно, 70 мл/190 см2 или 0,37 мл/см2.
Далее со ссылкой на фиг. 5 описывается компоновка листа 11.
Разумеется, это описание равносильно относится к листу 12, который является идентичным.
Лист 11 выполнен из двух материалов: он состоит из внутреннего слоя 35 и внешнего слоя 36. Внутренний слой 35 выполнен из первого термопластичного материала, а внешний слой 36 выполнен из второго термопластичного материала, отличающегося от первого материала.
Поверхность 30, прилежащая к полости 14, составляет часть внутреннего слоя 35.
В данном случае, первый термопластичный материал, из которого выполнен внутренний слой 35, представляет собой полиэтилен (ПЭ), а термопластичный материал, из которого выполнен внешний слой 36, представляет собой полиэфир (ПЭТ).
Известно, что полиэтилен (ПЭ) представляет собой относительно легко свариваемый полимерный материал, причем температура его плавления является относительно низкой и в любом случае ниже температуры плавления полиэфира (ПЭТ).
Таким образом, зона сварки 13 может быть выполнена между листами 11 и 12 электродами, нагретыми до температуры выше температуры плавления полиэтилена (ПЭ) и ниже температуры плавления полиэфира (ПЭТ), так чтобы не происходило плавление внешних слоев 36 листов 11 и 12 во время выполнения зоны сварки 13. Таким образом, внешние стороны листов 11 и 12 сохраняют свой исходный гладкий внешний вид.
Известно также, что полиэфир (ПЭТ) обеспечивает хорошую газонепроницаемость в отличие от полиэтилена (ПЭ), так что листы 11 и 12 являются непроницаемыми не только для жидкости, но также и для газа.
Далее со ссылкой на фиг. 6 описывается изготовление листа 11.
Разумеется, описание, приведенное далее касательно изготовления листа 11, равным образом относится к листу 12, который является идентичным.
Лист 11 получают наложением друг на друга двух пленок 40 и 41, каждая из которых поступает из рулона, в виде которого она хранится, причем накладываемые друг на друга пленки спрессовывают в горячем состоянии парой валков 42 и 43, между которых проходят накладываемые пленки. Таким образом, пленки 40 и 41 взаимно ламинируются. В листе 11 внутренний слой 35 получают из пленки 40, а внешний слой 36 получают из пленки 41.
Пленку 41 получают простым экструдированием полиэфира (ПЭТ) только одного сорта.
Пленку 40 получают коэкструдированием полиэтилена (ПЭ) трех разных сортов, так что пленка 40 содержит три наложенных друг на друга слоя 44, 45 и 46 соответственно фиг. 7.
Подслой 44 представляет собой последний обращенный внутрь подслой. Следовательно, поверхность 30 листа 11 составляет часть подслоя 44.
Подслой 46 представляет собой последний обращенный наружу подслой и, следовательно, покрыт внешним слоем 36.
Подслой 45 представляет собой промежуточный подслой между подслоем 44 и подслоем 46.
Подслой 46 предусмотрен для сцепления между пленками 40 и 41. Для формирования подслоя 46 используют гранулы полиэтилена (ПЭ), сорт которого является приемлемым для осуществления сцепления с полиэфиром (ПЭТ).
Подслой 45 предусмотрен для придания листу 11 заданных механических характеристик. Для формирования подслоя 45 используют гранулы полиэтилена (ПЭ), сорт которого является приемлемым для обеспечения этих механических характеристик.
Последний обращенный внутрь подслой 44 предусмотрен для осуществления сварки с соответствующим подслоем другого листа пакета 10 с целью обеспечения возможности формирования зоны сварки 13. В то же время подслой 44 предусмотрен для взаимодействия с дозой разбавленной спермы 27 через поверхность, прилежащую к полости 14, то есть через поверхность 30.
Для формирования подслоя 44 смешивают, с одной стороны, гранулы полиэтилена, сорт которого является приемлемым для сварки, и, с другой стороны, гранулы с композицией полиэтилена и триклозана, содержащей триклозан в количестве 15 масс.%.
Соотношение смеси гранул соответствует 99 масс.% гранул полиэтилена и 1 масс.% гранул с композицией полиэтилена и триклозана.
Таким образом, полученный смешанный материал содержит 1 масс.% гранул композиции полиэтилена и триклозана. Следовательно, полученный смешанный материал содержит 0,15 масс.% триклозана. Следовательно, подслой 44 содержит 0,15 масс.% триклозана.
Как было указано ранее, пленки 40 и 41 накладывают друг на друга и спрессовывают в горячем состоянии парой валков 42 и 43, между которых они проходят для формирования листа 11.
Следует отметить, что в листе 11 относительно легко констатируется наличие внутреннего слоя 35 и внешнего слоя 36, но по причине прохода между валками 42 и 43 во внутреннем слое 35 трудно различить подслои 44, 45 и 46, которые тем не менее в нем содержатся.
В листе 11 подслой 44 составляет 13% от общей массы листа 11. Следовательно, в листе 11 содержится 0,15% от 13% или 0,02% или, в ином выражении, 20 мг триклозана на 100 г листа 11.
В листе 11, имеющем плотность 92 г/м2, содержится 18 мг триклозана на 1 м2 пленки.
Далее со ссылкой на фиг. 8-10 описывается получение разбавленной спермы, предназначенной для расфасовки в пакет 10.
На фиг. 8 показан пакет-сборник 50, содержащий свежую сперму животного 51, в данном случае сперму хряка.
На фиг. 9 показан флакон 52, содержащий разбавляющую среду 53, смешиваемую со свежей спермой животного, аналогичной сперме 51, для получения разбавленной спермы животного, аналогичной сперме дозы 27. Разбавляющая среда 53 не содержит антибиотиков.
На фиг. 10 показана кружка 54, покрытая защитным пакетом 55.
Комплекс, образованный кружкой 54, покрытой пакетом 55, содержит разбавленную сперму животного 56, полученную смешиванием свежей спермы животного 51 из пакета-сборника 50 с разбавляющей средой 53 из флакона 52.
Разбавленная сперма 56 предназначена для расфасовки по индивидуальным дозам 27 путем заполнения пакета 10.
Далее описывается пример результатов, полученных с пакетом 10 для хранения разбавленной спермы.
Пример 1
Кроме пакета 10 (далее "пакет A") используют пакет (далее "пакет B"), аналогичный пакету 10, в котором листы, аналогичные листам 11 и 12, являются традиционными, то есть не содержат триклозан.
Исходя из одной и той же порции отобранной свежей спермы 51, экстемпорально получают в течение часа и в любом случае не позже двадцати четырех часов сперму 56, разбавленную разбавляющей средой без антибиотика 53 (далее "разбавленная сперма A"), а также получают сперму, разбавленную традиционной разбавляющей средой, содержащей антибиотик (далее "разбавленная сперма B").
Разбавление осуществляют для того, чтобы разбавленная сперма A и разбавленная сперма B имели концентрацию по 35 миллионов сперматозоидов на миллилитр.
Определение бактериальной обсемененности, осуществленное в отобранных пробах, позволило проверить, что разбавленная сперма A и разбавленная сперма B изначально обладали одинаковой бактериальной обсемененностью.
Затем заполняли пакет A дозой разбавленной спермы A, пакет B дозой разбавленной спермы B и пакет B дозой разбавленной спермы A.
Далее пакеты хранили в течение шести суток в традиционных условиях хранения, то есть при 17°C в горизонтальном положении.
Затем разбавленную сперму из каждого пакета анализировали.
При этом определяли, с одной стороны, бактериальную обсемененность, а с другой стороны, оценивали подвижность сперматозоидов.
Аналогичным образом производили испытание с пятью другими отобранными порциями свежей спермы хряка.
В приведенных далее таблицах представлены средние результаты, полученные для шести отобранных проб.
При определении бактериальной обсемененности получены следующие результаты:
| Бактериальная обсемененность, КОЕ/мл | |
| Пакет B с разбавленной спермой A | 5·104 |
| Пакет A с разбавленной спермой A | 3·104 |
| Пакет B с разбавленной спермой B | 1·104 |
Определение бактериальной обсемененности осуществляли в отобранных пробах, которые затем культивировали в чашках Петри, содержащих тритон-соевый агар (Trytone Soja Agar (TSA)), в течение сорока восьми часов при 30°C. Половину проб культивировали в аэробных условиях, а другую половину проб культивировали в анаэробных условиях. Полученные результаты усредняли и выражали в числе колониеобразующих единиц (КОЕ) на миллилитр.
При определении подвижности сперматозоидов получены следующие результаты:
| Подвижность, % | |
| Пакет B с разбавленной спермой A | 65 |
| Пакет A с разбавленной спермой A | 61 |
Анализ подвижности осуществляли в устройстве для анализа спермы, оснащенном компьютером и реализуемом заявителем под названием CASA (Computer Assisted Sperm Analyzis).
Речь идет об анализе изображений, в котором определяли процентную долю подвижных сперматозоидов относительно совокупности сперматозоидов.
Далее описываются два других примера результатов, полученных с пакетами, аналогичными пакету 10, но содержащими разное количество триклозана.
Пример 2
Испытание осуществляли аналогично примеру 1, но с пакетами, в которых подслой, аналогичный подслою 44 листов 11 и 12, выполнен из смеси гранул, в которой соотношение составляет не 99 масс.% гранул полиэтилена и 1 масс.% гранул композиции полиэтилена и триклозана, а 99,5 масс.% гранул полиэтилена и 0,5 масс.% гранул композиции полиэтилена и триклозана.
В этом примере листы пакета A содержат 10 мг триклозана на 100 г листа, то есть около 9 мг триклозана на 1 м2 листа, а последний обращенный внутрь подслой 44 содержит 0,075 масс.% триклозана.
При определении бактериальной обсемененности получены следующие результаты:
| Бактериальная обсемененность, КОЕ/мл | |
| Пакет B с разбавленной спермой A | 5·104 |
| Пакет A с разбавленной спермой A | 0,7·104 |
| Пакет B с разбавленной спермой B | 1·104 |
При определении подвижности получены следующие результаты:
| Подвижность, % | |
| Пакет B с разбавленной спермой A | 65 |
| Пакет A с разбавленной спермой A | 65 |
Пример 3
Испытание осуществляли аналогично примеру 1, но с пакетами, в которых подслой, аналогичный подслою 44 листов 11 и 12, выполнен из смеси гранул, в которой соотношение составляет не 99 масс.% гранул полиэтилена и 1 масс.% гранул композиции полиэтилена и триклозана, а 98,5 масс.% гранул полиэтилена и 1,5 масс.% гранул композиции полиэтилена и триклозана.
В этом примере листы пакета A содержат 29 мг триклозана на 100 г листа, то есть около 27 мг триклозана на 1 м2 листа, а последний обращенный внутрь подслой 44 содержит 0,225 масс.% триклозана.
При определении бактериальной обсемененности получены следующие результаты:
| Бактериальная обсемененность, КОЕ/мл | |
| Пакет B с разбавленной спермой A | 5·104 |
| Пакет A с разбавленной спермой A | 0,04·104 |
| Пакет B с разбавленной спермой B | 1·104 |
При определении подвижности получены следующие результаты:
| Подвижность, % | |
| Пакет B с разбавленной спермой A | 65 |
| Пакет A с разбавленной спермой A | 65 |
Высвобожденное количество триклозана
Далее описываются испытания с пакетом по примеру 3 для определения количества триклозана, высвобождаемого в дозу разбавленной спермы, аналогичной дозе 27 и содержащейся в полости этого пакета, аналогичной полости 14.
Для упрощения испытания в пакете хранили не дозу разбавленной спермы, а только разбавляющую среду.
В данном случае были использованы разбавляющая среда 53 (далее "среда A") и традиционная разбавляющая среда, содержащая антибиотик (далее "среда B").
Один пакет по примеру 3 заполняли дозой среды A, а другой пакет по примеру 3 заполняли дозой среды B.
Далее пакеты хранили в течение пяти суток в традиционных условиях хранения, то есть при 17°C в горизонтальном положении.
Затем анализировали среду, содержащуюся в каждом пакете, для определения концентрации триклозана.
Этот анализ осуществляли жидкофазной хроматографией с тандемным масс-спектроскопическим детектором (способ ЖХ-МС-МС).
Исходя из полученных концентраций, определяли количество триклозана, высвобожденное в полную дозу, предназначенную для хранения в пакете, то есть в 70 мл.
Следует отметить, что масса триклозана, принимаемая в расчет в листах, аналогичных листам 11 и 12 пакета по примеру 3, для расчета высвобожденного количества, не означает массу триклозана, содержащегося в совокупности этих листов, а только в частях, прилежащих к полости, аналогичной полости 14. В данном случае эти части весят около 1,835 г (при определении после обрезания и взвешивания). Поскольку имеется 29 мг триклозана на 100 г листа, то количество триклозана, содержащегося в этих частях, составляет около 532 мкг.
Полученные результаты приведены далее.
| Количество триклозана, высвобожденного в дозу | Содержание триклозана, высвобожденного в дозу | |
| Среда A | 2,7 мкг | 0,5% |
| Среда B | 1,9 мкг | 0,35% |
Далее приведено обсуждение результатов разных анализов, описанных ранее.
В целом, в случае этих разных анализов дисперсия средних значений является малой, так что результаты, приведенные ранее, могут рассматриваться как значимые.
Далее приведено обсуждение результатов касательно количества триклозана, высвобождаемого в разбавляющие среды.
Установлено, что высвобожденные количества являются незначительными (в данном случае, около 1%).
Заявитель полагает, что в случае различных существующих разбавляющих сред высвобожденное количество должно оставаться незначительным, например меньше 2 масс.%
Далее приведено обсуждение результатов касательно определения бактериальной обсемененности.
Следует заметить, что в каждом из примеров численность популяции бактерий по окончании времени хранения является значительно меньшей в случае пакетов согласно настоящему изобретению, то есть в случае пакетов, содержащих разбавленную сперму A, чем в случае сравнительных пакетов, то есть в случае пакетов B, содержащих разбавленную сперму A.
Следует также заметить, что в каждом из примеров численность популяции бактерий по окончании времени хранения является сравнимой в случае пакетов согласно настоящему изобретению и в случае традиционных пакетов, то есть в случае пакетов B, содержащих разбавленную сперму B, а в случае пакетов по настоящему изобретению является даже меньшей.
Следовательно, можно полагать, что пакеты согласно настоящему изобретению обладают способностью сохранять сперму, разбавленную средой без антибиотика (сперма A), в бактериостатических условиях.
Далее приведено обсуждение результатов касательно подвижности сперматозоидов.
Следует заметить, что по окончании времени хранения подвижность является сравнимой в случае пакетов согласно настоящему изобретению (пакеты A) и в случае традиционных пакетов (пакеты B).
Следовательно, можно полагать, что триклозан, содержащийся в пакетах согласно настоящему изобретению, не нарушает подвижность сперматозоидов.
В целом, было определено, что пакет согласно настоящему изобретению обладает хорошими характеристиками тогда, когда соотношение между объемом полости, аналогичной полости 14, и суммой площадей поверхностей, аналогичных поверхностям 30 и 31 листов 11 и 12, прилежащих к указанной полости, находится в интервале от 0,3 до 0,5 мл/см2.
Аналогичным образом, было определено, что пакет согласно настоящему изобретению обладает хорошими характеристиками тогда, когда объем полости, аналогичной полости 14, находится в интервале от 50 до 100 мл.
Было определено также, что пакет согласно настоящему изобретению обладает хорошими характеристиками тогда, когда последний обращенный внутрь подслой, аналогичный подслою 44, составляет от 12 до 18 масс.% внутреннего слоя, аналогичного слою 35 и выполненного из термопластичного материала, приемлемого для сварки.
В поясненном примере внутренний слой, аналогичный слою 35, имеет толщину приблизительно 80 мкм. Было определено также, что пакет согласно настоящему изобретению обладает хорошими характеристиками тогда, когда внутренний слой, аналогичный слою 35, имеет толщину в интервале от 20 до 100 мкм.
Также было определено, что пакет согласно настоящему изобретению обладает хорошими характеристиками тогда, когда внутренний слой, аналогичный слою 35, содержит от 1 до 40 мг/м2 и предпочтительно от 10 до 40 мг/м2 триклозана.
Было определено также, что пакет согласно настоящему изобретению обладает хорошими характеристиками тогда, когда в последнем обращенном внутрь подслое, аналогичном подслою 44, содержится от 0,0075 до 0,3 масс.% и предпочтительно от 0,075 до 0,3 масс.% триклозана.
Далее описывается методика определения количества триклозана, содержащегося в листе 11 или 12.
Следует отметить, что найденное количество выражают в массе, отнесенной к единице поверхности такого листа (в данном случае в мг/м2).
Образец листа 11 или 12 вырезают в области полости 14 пакета 10. Этот образец имеет известную площадь поверхности, равную, например, 1 см2.
Затем образец погружают в ацетон и подвергают обработке ультразвуком в течение 2 ч с целью экстракции триклозана.
Концентрацию триклозана в полученном растворе определяют затем жидкофазной хроматографией аналогично описанному ранее касательно количества высвобожденного триклозана.
Это количественное определение (погружение в ацетон с обработкой ультразвуком и последующее определение концентрации полученного раствора) повторяют с одним и тем же образцом столько раз, сколько требуется до констатации отсутствия триклозана в полученном растворе.
При этом количество триклозана, определенное при каждом анализе, суммировали для получения общего количества триклозана, изначально содержавшегося в образце.
Конечное количество соотносили с поверхностью образца.
Следует отметить, что количество триклозана можно определять только во внутреннем слое 35, удалив перед этим внешний слой 36, например, эрозионной обработкой или отслаиванием. При этом в данном случае, поскольку триклозан во внешнем слое 36 отсутствует, количество триклозана, приходящееся на единицу поверхности не изменяется.
Разумеется, экстракцию триклозана из образца можно осуществлять растворителем, отличающимся от ацетона, например дихлорметаном, необязательно с обработкой ультразвуком и определять концентрацию полученного раствора другим способом, например высокоэффективной жидкостной хроматографией (ВЭЖХ) с УФ-детектором с диодной матрицей ДМД (способ ВЭЖХ-УФ-ДМД).
В поясненных примерах триклозан предусматривался только в последнем обращенном внутрь подслое 44 внутреннего слоя 35, что является особенно экономичным. Впрочем в вариантах, оставленных без пояснения, триклозан содержится как в последнем обращенном внутрь подслое, например в любом внутреннем слое, аналогичном слою 35, и возможно во внешнем слое, аналогичном слою 36, или триклозан содержится только в одном из листов 11 и 12.
В вариантах, оставленных без пояснения, внешний слой 36 из полиэтилена (ПЭТ) заменен слоем из полиамида, слоем из алюминия или слоем из комбинации "EVOH/полипропилен"; при этом чаще всего совместным ламинированием пленок, аналогичных пленкам 40 и 41, листы, аналогичные листам 11 или 12, получают целиком коэкструдированием.
В вариантах, оставленных без пояснения, компоновка пакета отличается, например, одним и тем же каналом, который служит одновременно для наполнения и опорожнения, или же тем, что отсутствует канюля для опорожнения.
В зависимости от обстоятельств возможны многие другие варианты; в этом отношении можно напомнить, что настоящее изобретение не ограничивается описанными и представленными примерами.
1. Пакет для расфасовки разбавленной спермы животного, приемлемой для искусственного осеменения, в частности, животных семейства свиней, содержащий два гибких листа (11, 12), скрепленных друг с другом зоной сварки (13), ограничивающей полость (14), имеющую заданный объем после заполнения пакета (10), причем полость (14) выполнена с возможностью содержания дозы (27) разбавленной спермы животного, имеющей упомянутый заданный объем, причем каждый гибкий лист (11, 12) имеет поверхность (30, 31), обращенную к полости (14), которая составляет часть слоя (35) термопластичного материала, пригодного для сварки, отличающийся тем, что в одном или предпочтительно в каждом из листов (11, 12) слой (35) термопластичного материала, пригодного для сварки, содержит триклозан, а соотношение между заданным объемом полости (14) и суммой площадей поверхностей (30, 31) листов (11, 12), обращенных к полости (14), находится в интервале от 0,3 до 0,5 мл/см2.
2. Пакет по п. 1, отличающийся тем, что заданный объем полости (14) находится в интервале от 50 до 100 мл.
3. Пакет по п. 1 или 2, отличающийся тем, что слой (35) термопластичного материала, пригодного для сварки, содержит от 1 до 40 мг/м2 триклозана.
4. Пакет по п. 3, отличающийся тем, что слой термопластичного материала, пригодного для сварки, содержит от 10 до 40 мг/м2 триклозана.
5. Пакет по любому из пп. 1-4, отличающийся тем, что слой (35) термопластичного материала, пригодного для сварки, содержит несколько подслоев (44, 45, 46), выполненных из сортов, отличающихся от сорта термопластичного материала, пригодного для сварки, причем один или предпочтительно каждый гибкий лист (11, 12) имеет поверхность (30, 31), обращенную к полости (14), которая составляет часть наиболее внутреннего подслоя (44), причем только наиболее внутренний подслой (44) содержит триклозан.
6. Пакет по п. 5, отличающийся тем, что в наиболее внутреннем подслое (44) содержится от 0,0075 до 0,3 масс.% триклозана.
7. Пакет по п. 5 или 6, отличающийся тем, что наиболее внутренний подслой (44) составляет от 12 до 18 масс.% слоя (35) термопластичного материала, пригодного для сварки.
8. Пакет по любому из пп. 1-7, отличающийся тем, что один или предпочтительно каждый гибкий лист (11, 12) содержит, кроме слоя (35) термопластичного материала, пригодного для сварки, по меньшей мере один другой слой (36), выполненный из материала, отличающегося от термопластичного материала, пригодного для сварки, который покрывает слой (35) термопластичного материала, пригодного для сварки, со стороны, противоположной полости (14), причем только слой (35) термопластичного материала, пригодного для сварки, содержит триклозан.
9. Пакет по п. 8, отличающийся тем, что другой слой (36) из материала, отличающегося от термопластичного материала, пригодного для сварки, представляет собой внешний слой, выполненный из термопластичного материала.
10. Пакет по п. 9, отличающийся тем, что термопластичный материал, пригодный для сварки, представляет собой полиэтилен (ПЭ), а термопластичный материал внешнего слоя (36) представляет собой полиэфир (ПЭТ).
11. Пакет по любому из пп. 1-10, отличающийся тем, что слой (35) термопластичного материала, пригодного для сварки, имеет толщину в интервале от 20 до 110 мкм.
12. Система для расфасовки в пакеты разбавленной спермы животного, приемлемой для искусственного осеменения, в частности, животных семейства свиней, причем система включает среду, разбавляющую свежую сперму (51) для получения разбавленной спермы (56), и пакеты для заполнения разбавленной спермой, причем система отличается тем, что пакеты (10) представляет собой пакеты по любому из пп. 1-11, а разбавляющая среда (53) не содержит антибиотиков.
