Способ детекции изолятов mycobacterium tuberculosis beijing 94-32-кластера в формате реального времени



Способ детекции изолятов mycobacterium tuberculosis beijing 94-32-кластера в формате реального времени
Способ детекции изолятов mycobacterium tuberculosis beijing 94-32-кластера в формате реального времени
Способ детекции изолятов mycobacterium tuberculosis beijing 94-32-кластера в формате реального времени

Владельцы патента RU 2689800:

федеральное государственное бюджетное учреждение "Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт фтизиопульмонологии" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)
Федеральное бюджетное учреждение науки "Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Пастера" Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (RU)

Изобретение относится к области медицины, в частности к фтизиатрии, и предназначено для детекции изолятов Mycobacterium tuberculosis Beijing 94-32-кластера. Выявляют наличие нуклеотидной замены G>A в гене sigE в позиции 294 с помощью ПЦР в формате реального времени с использованием олигонуклеотидных праймеров и флуоресцентно-меченых зондов. Результаты ПЦР оценивают путем регистрации сигнала флуоресценции по HEX-каналу с длиной волны 555 нм и при экспоненциальном его накоплении судят о принадлежности штамма М. tuberculosis к Beijing 94-32-кластеру. При регистрации сигнала флуоресценции по контрольному FAM-каналу с длиной волны 510 нм судят о принадлежности штамма к другому генотипу М. tuberculosis. Изобретение обеспечивает быструю и надежную детекцию микобактерий туберкулеза генотипа Beijing 94-32-кластер. 3 ил., 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине, а именно к фтизиатрии, и может быть использовано для лабораторного определения микобактерий туберкулеза, относящихся к генотипу Beijing 94-32-кластер.

Возбудитель туберкулеза Mycobacterium tuberculosis характеризуется строго клональной структурой популяции, при этом, отдельные генотипы (семейства, сублинии, клональные кластеры) М. tuberculosis отмечены повышенной вирулентностью, трансмиссивностью, или способностью быстрого развития устойчивости к противотуберкулезным препаратам. Характерной особенностью структуры популяции возбудителя туберкулеза в России и других странах постсоветского пространства является доминирование резистентных штаммов генетического семейства Beijing (также называемого Пекинским генотипом). В свою очередь, популяция Beijing в странах бывшего СССР включает два крупных клональных кластера, Beijing В0 (также называемый успешным российским клоном) и Beijing 94-32 (который можно определить как российско-среднеазиатский генотип М. tuberculosis). Этот последний определяется как тип #94-32 согласно интернет-ресурсу MIRU-VNTRplus.org на основании генотипирования 24 локусов тандемных повторов MIRU-VNTR и имеет числовой профиль 244233352644425153353823 (каждая цифра соответствует количеству повторов в 24 локусах VNTR в порядке расположения по часовой стрелке на хромосоме М. tuberculosis). Геновариант 94-32 и родственные ему производные субтипы образуют дендрограмму со звездной филогенией и их определяют как единому кластеру Beijing 94-32-кластер (Фиг. 1).

Штаммы 94-32-кластера являются заметным компонентом структуры популяции М. tuberculosis в России составляя 40-50% популяции семейства Beijing (Vyazovaya et al., 2015) и преобладают в странах Средней Азии, например, до 90% штаммов Beijing в Казахстане (Skiba et al., 2015). Более того, эти штаммы выявляют у иммигрантов из стран бывшего СССР в странах Европейского Союза, например, в Греции и Испании ( et al., 2016; Ioannidis et al., 2017). Ранее было высказано предположении о происхождении предка генотипа Beijing 94-32 в северо-западном Китае (Yin et al., 2016).

Сравнение с фенотипическими данными показывает ассоциацию штаммов Beijing 94-32-кластера с лекарственной устойчивостью (Merker et al., 2016; Vyazovaya et al., 2015) и, принимая во внимание их распространение в результате глобальных и региональных миграционных потоков, определяет практическое значение разработки способа их быстрой детекции.

Известно определение штаммов Beijing 94-32-кластера на основании анализа 24 локусов VNTR с последующим сравнением с ресурсом www.MIRU-VNTRplus.org. Этот подход ограничен трудоемкостью выполнения анализа, требующего проведения 24 реакций ПЦР с последующим гель-электрофорезом или, при использовании капиллярного секвенатора, ограничен стоимостью оборудования и также страдает достаточной трудоемкостью, как и любой подход на основании мультилокусного VNTR-типирования. Таким образом, разработка быстрого и простого способа детекции эпидемиологически и клинически значимого варианта М. tuberculosis Beijing 94-32-кластер является актуальной задачей программы контроля туберкулеза в России и мире.

Проведенный нами биоинформационный и филогенетический анализ данных полногогеномного секвенирования штаммов Mycobacterium tuberculosis различных генотипов, включая штаммы семейства Beijing и варианта Beijing 94-32-кластер (файлы fastq и vcf) позволил выявить однонуклеотидный полиморфизм (мутация G>A в гене sigE кодон 98CTG>CTA, позиция в гене 294, что соответствует позиции 1364706 в полном геноме референтного штамма H37Rv NC_000962.3), характерный и уникальный для филогенетической ветви, содержащей только штаммы Beijing 94-32-кластера.

Задачей предлагаемого изобретения является разработка способа быстрой и надежной детекции микобактерий туберкулеза генотипа Beijing 94-32-кластер.

Задача реализуется за счет того, что определяют нуклеотидную замену G>A в гене sigE в позиции 294 с помощью ПЦР в формате реального времени для дискриминации дикого и мутантного аллелей с использованием олигонуклеотидных праймеров FOR (5'-GTCCTGGGATGAGCTGGTC), REV (5'-CGACCGGAACACCCTGATAA) и флуоресцентно-меченых зондов WT (FAM-5'-CGGCTGGCTTATCGGC-BHQ1) и MUT (НЕХ-5'-GTACCGGCTAGCTTATCG-BHQ2), с оценкой результатов ПЦР между 15-35 циклами путем регистрации сигнала флуоресценции по НЕХ-каналу с длиной волны 555 нм судят о принадлежности штамма к генотипу М. tuberculosis Beijing 94-32-кластер, а при регистрации экспоненциального роста сигнала флуоресценции по FAM-каналу с длиной волны 510 нм судят о принадлежности штамма М. tuberculosis к любому другому генотипу.

Аллель-специфическая ПЦР основана на использовании сконструированных нами двух праймеров - прямого и обратного (по отношению к специфической мутации для генотипа Beijing 94-32-кластер) и двух флуоресцентно-меченых зондов для выявления наличия аллеля дикого типа G или мутантного аллеля А в геномной позиции 1364706 G>A (согласно хромосоме референтного штамма H37Rv NC_000962.3). Преимущества предлагаемого способа: 1. быстрота (меньше одного дня от момента выделения ДНК); 2. простая и однозначная интерпретация результатов; 3. возможность быстрого анализа больших коллекций штаммов М. tuberculosis для оценки их принадлежности к кластеру Beijing 94-32 с диагностической целью и при популяционных исследованиях, 4. Возможность выявления контаминации и микс-инфекции.

Изобретение поясняется чертежами, где Фиг. 1 - Филогенетическое древо профилей 24-MIRU-VNTR штаммов М. tuberculosis на котором кластер Beijing 94-32 выделен серым фоном, Фиг. 2 - Схема ПЦР (не в масштабе), где тонкие стрелки - позиции праймеров и зондов в геноме референс-штамма H37Rv; а широкая стрелка обозначает позицию нуклеотидной замены G>A в гене sigE в позиция 294 (кодон 98). Фиг. 3 - накопление сигнала флуоресценции: (а) по специфическому (HEX) каналу детекции, на М. tuberculosis Beijing 94-32-кластер и (б) контрольному (FAM) каналу детекции, на штамм другого генотипа М. tuberculosis. Вода служит отрицательным контрольным образцом.

Способ осуществляется следующим образом. Выделение ДНК из культуры М. tuberculosis, выращенной на среде Левенштейна-Иенсена, проводят по van Embden et al. [1993]: суспендируют 1 стандартную бактериологическую петлю культуры в 400 мкл буфера ТЕ x1 и инкубируют 20 мин при 85°С. Дальнейшую обработку проводят с использованием лизоцима, протеиназы К, додецилсульфата натрия и цетилтриметиламмонийбромида. Полученный клеточный лизат обрабатывают смесью фенол-хлороформ-изоамиловый спирт (25:24:1), центрифугируют, осаждают изопропанолом, промывают 70% этанолом, осадок высушивают и растворяют в 30-50 мкл ТЕ x1.

Были использованы следующие сконструированные нами праймеры и зонды для ПЦР в реальном времени (Фиг. 2) для проведения реакции ПЦР и детекции флуоресценции по двум каналам в одной пробирке одновременно: FOR (5'-GTCCTGGGATGAGCTGGTC), REV (5'-CGACCGGAACACCCTGATAA) и флуоресцентно-меченых зондов WT (FAM-5'-CGGCTGGCTTATCGGC-BHQ1) и MUT (HEX-5'-GTACCGGCTAGCTTATCG-BHQ2).

Для детекции штамма генотипа Beijing 94-32-кластер служил зонд MUT (Фиг. 2), детекцию сигнала проводили по НЕХ-каналу детекции (длина волны 555 нм) (Фиг. 3а).

Для детекции штамма любого другого генотипа М. tuberculosis служил зонд WT (Фиг. 2); детекцию сигнала проводили по FAM-каналу (длина волны 510 нм) (Фиг. 3б).

Очищенная ДНК (0.1-0.5 мкл) добавляется к смеси ПЦР (конечный объем 30 мкл) содержащей 1,5 mM MgCl2, 1 U Taq ДНК полимеразы для ПЦР в реальном времени в режиме «горячего старта», 200 μМ каждого из дНТФ, праймеры и зонды (по 5 пмоль каждый). ПЦР проводили в термоциклере RotorGene6000 (Corbette Research) в следующих условиях: 95°С, 10 мин; далее 40 циклов 94°С, 15 с; 60°С, 40 с. Считывание сигнала флуоресценции - при 60°С по каналам 510 и 555 нм.

Оценка результатов.

Полученные данные - кривые накопления флуоресцентного сигнала между 15-35 циклом по двум каналам - анализируют с помощью программного обеспечения прибора, используемого для проведения ПЦР в формате реального времени. По каналу HEX (длина волны 555 нм) - регистрируется накопление продукта амплификации фрагмента ДНК, специфического для генотипа М. tuberculosis Beijing 94-32-кластер (Фиг. 3а), по каналу FAM (длина волны 510 нм) - фрагмента ДНК, специфического для любого другого генотипа М. tuberculosis (Фиг. 3б).

При отсутствии сигнала флуоресценции по обоим каналам (510 и 555 нм) делается вывод о недостаточном количестве и/или качестве ДНК или ингибировании реакции ПЦР и невозможности какого-либо вывода о наличии или отсутствии ДНК штамма Beijing 94-32-кластера в образце.

Обязательная амплификация одного или другого продукта ПЦР является контролем качества: при отсутствии сигнала судят о деградированной ДНК или ингибировании реакции, при наличии сигнала по обоим каналам делают вывод о микс-образце (контаминация на каком-либо из этапов исследования или выделение двух штаммов от одного больного).

Способ был апробирован на коллекциях ДНК клинических изолятов М. tuberculosis из коллекции лаборатории молекулярной микробиологии ФБУН НИИЭМ им. Пастера, представляющих страны с различными популяциями возбудителя и различной долей штаммов Beijing и Beijing 94-32-кластер, что показано на примерах ниже. Все изоляты были ранее генотипированы методом мультилокусного VNTR-анализа позволяющим точно определить принадлежность штамма

Пример 1 Анализ ДНК изолятов М. tuberculosis из Северо-Запада России, региона с известным и достаточно высоким уровнем Beijing 94-32 в популяции (~50% от всех Beijing) (Vyazovaya et al., 2015).

Всего было проверено 80 образцов ДНК изолятов М. tuberculosis генотипа Beijing, выделенных от больных туберкулезным спондилитом, находившихся на лечении в Санкт-Петербургском НИИ фтизиопульмонологии в 2009-2012 годах. Все образцы ДНК М. tuberculosis были охарактеризованы методом 24-MIRU-VNTR типирования (Supply et al., 2006) с последующим сравнением с базой данных MIRU-VNTRplus.org. Далее ДНК всех штаммов была протестирована предлагаемым способом ПЦР в формате реального времени для выявления штаммов Beijing 94-32-кластера. В результате проведения ПЦР было установлено, что 35 изолятов относились к Beijing 94-32-кластеру, что полностью соответствовало результатам 24-MIRU-VNTR анализа.

Пример 2. Анализ ДНК изолятов М. tuberculosis из Казахстана, страны с известным доминированием варианта Beijing 94-32 (примерно 90% от всех Beijing и 47% от всей популяции) (Skiba et al., 2015).

Изучено 130 изолятов М. tuberculosis разных генотипов (Beijing, LAM, CAS, Ural, New-1) от больных туберкулезом легких из Казахстана. Все образцы ДНК М. tuberculosis были охарактеризованы методом сполиготипирования (Kamerbeek et al., 1997) и 24-MIRU-VNTR типирования (Supply et al., 2006) с последующим сравнением с базой данных MIRU-VNTRplus.org. Далее ДНК всех штаммов была протестирована предлагаемым способом ПЦР в формате реального времени для выявления штаммов Beijing 94-32-кластера. В результате проведения ПЦР было установлено, что 69 изолятов относились к Beijing 94-32-кластеру, что полностью соответствовало результатам 24-MIRU-VNTR анализа.

Пример 3. Анализ ДНК изолятов М. tuberculosis из Китая, страны с крайне незначительной долей российских и среднеазиатских вариантов М. tuberculosis Beijing 94-32 (Yin et al., 2016).

Изучено 67 изолятов M. tuberculosis генотипа Beijing от больных туберкулезом легких из северного Китая (Пекин и соседние провинции).

Все образцы ДНК М. tuberculosis были охарактеризованы методом сполиготипирования (Kamerbeek et al., 1997) и 24-MIRU-VNTR типирования (Supply et al., 2006) с последующим сравнением с базой данных MIRU-VNTRplus.org. Далее ДНК всех штаммов была протестирована предлагаемым способом ПЦР в формате реального времени для выявления штаммов Beijing 94-32-кластера. В результате проведения ПЦР, изолятов Beijing 94-32-кластера выявлено не было, что полностью соответствовало результатам 24-MIRU-VNTR анализа.

Литература

Ioannidis Р, van Soolingen D, Mokrousov I, et al. Multidrug-resistant/extensively drug-resistant tuberculosis in Greece: predominance of Mycobacterium tuberculosis genotypes endemic in the Former Soviet Union countries. Clin Microbiol Infect. 2017 Jul 8. pii: S1198-743X(17)30357-9. doi: 10.1016/j.cmi.2017.07.002. [Epub ahead of print]

Jiao WW, Mokrousov 1, Sun GZ, et al. Evaluation of new variable-number tandem-repeat systems for typing Mycobacterium tuberculosis with Beijing genotype isolates from Beijing, China. J Clin Microbiol. 2008; 46(3): 1045-9.

Kamerbeek J, Schouls L, Kolk A, et al. Simultaneous detection and strain differentiation of Mycobacterium tuberculosis for diagnosis and epidemiology. J Clin Microbiol 1997; 35: 907-14.

Merker, M. Feuerriegel S., Cox H., et al. 2016. Anticipating the second-line antibiotic era: drug resistant tuberculosis strain drives epidemic in Central Asia. 37th Annual Congress of the European Society of Mycobacteriology. Scientific Program including Abstract. Agency KONSENS Ltd. p. 48-49.

L, M, S, et al. Urgent Implementation in a Hospital Setting of a Strategy To Rule Out Secondary Cases Caused by Imported Extensively Drug-Resistant Mycobacterium tuberculosis Strains at Diagnosis. J Clin Microbiol. 2016; 54(12):2969-2974.

Skiba Y, Mokrousov I, Ismagulova G, et al. Molecular snapshot of Mycobacterium tuberculosis population in Kazakhstan: a country-wide study. Tuberculosis (Edinb). 2015; 95(5):538-46.

Supply P, Allix C, Lesjean S, et al. Proposal for standardization of optimized mycobacterial interspersed repetitive unit-variable-number tandem repeat typing of Mycobacterium tuberculosis. J Clin Microbiol. 2006; 44(12):4498-510.

Vyazovaya, A. Mokrousov I, Solovieva N, et al. Tuberculous spondylitis in Russia and prominent role of multidrug-resistant clone Mycobacterium tuberculosis Beijing B0/W148. Antimicrob. Agents Chemother. 2015; 59: 2349-57.

Yin QQ, Liu HC, Jiao WW, Li QJ, Han R, Tian JL, Liu ZG, Zhao XQ, Li YJ, Wan KL, Shen AD, Mokrousov I. Evolutionary History and Ongoing Transmission of Phylogenetic Sublineages of Mycobacterium tuberculosis Beijing Genotype in China. Sci Rep.2016; 6:34353.

Способ детекции изолятов Mycobacterium tuberculosis Beijing 94-32-кластера в формате реального времени, отличающийся тем, что выявляют наличие нуклеотидной замены G>A в гене sigE в позиции 294 с помощью ПЦР в формате реального времени с использованием олигонуклеотидных праймеров FOR (5'- GTCCTGGGATGAGCTGGTC), REV (5'-CGACCGGAACACCCTGATAA) и флуоресцентно-меченых зондов WT (FAM-5'-CGGCTGGCTTATCGGC-BHQ1) и MUT (HEX-5'-GTACCGGCTAGCTTATCG-BHQ2) и оценивают результаты ПЦР между 15-35 циклами путем регистрации сигнала флуоресценции по HEX-каналу с длиной волны 555 нм и при экспоненциальном его накоплении судят о принадлежности штамма М. tuberculosis к Beijing 94-32-кластеру, а при регистрации сигнала флуоресценции по контрольному FAM-каналу с длиной волны 510 нм судят о принадлежности штамма к другому генотипу М. tuberculosis.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области медицины, в частности к педиатрии, нефрологии, и может быть использовано для прогнозирования нефросклероза при хроническом пиелонефрите у детей.

Настоящее изобретение относится к аналитическому способу измерения содержания мыла в черном щелоке. Аналитический способ включает первый этап, на котором заданное количество черного щелока помещают в цилиндрически симметричную емкость, второй этап, на котором черный щелок в аналитической емкости центрифугируют и мыльный концентрат собирается в верхней части аналитической емкости, третий этап, на котором определяют количество мыльного концентрата, и четвертый этап, на котором рассчитывают содержание мыла.

Предложенная группа изобретений относится к области фармакогенетики и персонализированной медицины. Предложен способ анализа полиморфных маркеров в генах VKORC1, CYP4F2, CYP2C9, CYP2C19, АВСВ1, ITGB3 для определения индивидуальной чувствительности к противосвертывающим препаратам и набор олигонуклеотидных зондов, используемый в данном способе.
Изобретение относится к биотехнологии, гистологии и может быть использовано для количественного определения коллагена в ткани. Способ определения количества коллагена в ткани заключается в многократной гомогенизации материала, полученного путем замораживания, лиофильного высушивания, измельчения предварительно взвешенного кусочка ткани, с последующим ресуспендированием материала с помощью дозатора и центрифугированием, далее подготовленный материал замораживают при -80°С и лиофильно высушивают, полученный безводный материал взвешивают, определяют массу материала m1, разводят материал в 900 мкл буферного раствора с рН 7,0 и добавляют 100 мкл раствора коллализина, который заранее приготовляют путем растворения содержимого одной ампулы коллализина, содержащей коллагеназу в виде лиофилизата в количестве 1000 КЕ, в 2 мл буферного раствора с рН 7,0, пробирку с содержимым перемешивают в течение 2 часов, три раза проводят цикл гомогенизации, центрифугирования при 13400 оборотов в минуту и ресуспендирования материала, материал замораживают при -80°С, лиофильно высушивают и взвешивают, определяют массу материала m2, по разнице масс m1-m2 определяют массу коллагена..

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике. Способ определения персонифицированного криопротектора по лейкоцитарной кислой фосфатазе (ЛКФ) консервированной крови заключается в том, что у пациента до начала компонентной трансфузионной терапии эксфузируют порцию свежей аутокрови, стабилизируют раствором цитрата натрия, делят в пробирки на равные части, в контрольной пробе (КП) добавки криопротекторов исключают, в опытные пробы (ОП) добавляют по одной равной дозе тестируемых криопротекторов, перемешивают при плюс 37°С в течение 4 ч, капли приготовленных биологических жидкостей из ОП и КП наносят в объеме 4 мкл на предметные стекла, делают 2-3 мазка, высушивают на воздухе, фиксируют в 10% спирт-формалиновой смеси, лейкоциты окрашивают на кислую фосфатазу по методике азосочетания Берстона в модификации Ю.Ф.

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике. Способ определения оптимального криопротектора по цитохимическому показателю содержания сукцинатдегидрогеназы в лейкоцитах аутокрови заключается в том, что у больного до начала криогемотрансфузионной терапии получают порцию венозной крови, делят на равные части в пробирки, в одной из которых контрольная проба крови (КП) не содержит криопротектора, в другие добавляют по одной равной дозе тестируемых криопротекторов - опытные пробы (ОП), капли ОП и КП наносят в объеме 4 мкл на предметные стекла, из них делают тонкие мазки, высушивают на воздухе, готовят препараты по методике Нахласа в модификации Р.П.

Изобретение относится к области медицинской диагностики, может быть использовано для прогнозирования неразвивающейся беременности. Способ прогнозирования неразвивающейся беременности включает выделение РНК из эпителиальных клеток цервикального канала на сроке 6-10 недель беременности, проведение обратной транскрипции с получением кДНК, определение экспрессии TLR2, TLR10 и IDO с помощью количественной полимеразной цепной реакции, оценку возраста начала менархе и прогноз вероятности развития неразвивающейся беременности на основании уравнений, полученных по результатам дискриминантного анализа: где x1 – уровень экспрессии мРНК TLR2 (отн.ед.), x2 - уровень экспрессии мРНК TLR10 (отн.ед.), x3 - уровень экспрессии мРНК IDO (отн.ед.), х4 – возраст менархе, при этом, если y1 больше y2, прогнозируют высокий риск развития неразвивающейся беременности, и если y1 меньше y2, то прогнозируют нормальное течение беременности.

Группа изобретений относится к области диагностики в ветеринарии, в частности, к тесту для обнаружения антител против CSFV. Раскрыт способ обнаружения антител против вируса классической чумы свиней (CSFV) дикого типа в тестируемом образце, где указанный образец также может содержать антитела против мутантного эпитопа TAVSPTTLR из CSFV E2, где способ включает стадию совместной инкубации указанного тестового образца с иммобилизованным носителем, который содержит эпитоп TAVSPTTLR из CSFV E2 и с носителем, который содержит мутантный эпитоп TAVSPTTLR из CSFV E2.

Изобретение относится к пищевой промышленности и может быть использовано для определения сроков годности натуральных рыбных консервов. Для этого натуральные рыбные консервы хранят при температуре 30-55°С, периодически определяя по балльной системе органолептические показатели, кислотное число жира и содержание амино-аммиачного азота.

Изобретение относится к исследованию низкотемпературных свойств нефтепродуктов путем пропускания через них ультразвуковых волн и может быть использовано для экспрессного контроля температуры застывания и текучести в аналитических лабораториях нефтехимических предприятий, университетов и научно-исследовательских центров.

Группа изобретений относится к области диагностики в ветеринарии, в частности, к тесту для обнаружения антител против CSFV. Раскрыт способ обнаружения антител против вируса классической чумы свиней (CSFV) дикого типа в тестируемом образце, где указанный образец также может содержать антитела против мутантного эпитопа TAVSPTTLR из CSFV E2, где способ включает стадию совместной инкубации указанного тестового образца с иммобилизованным носителем, который содержит эпитоп TAVSPTTLR из CSFV E2 и с носителем, который содержит мутантный эпитоп TAVSPTTLR из CSFV E2.

Группа изобретений относится к области диагностики в ветеринарии, в частности, к тесту для обнаружения антител против CSFV. Раскрыт способ обнаружения антител против вируса классической чумы свиней (CSFV) дикого типа в тестируемом образце, где указанный образец также может содержать антитела против мутантного эпитопа TAVSPTTLR из CSFV E2, где способ включает стадию совместной инкубации указанного тестового образца с иммобилизованным носителем, который содержит эпитоп TAVSPTTLR из CSFV E2 и с носителем, который содержит мутантный эпитоп TAVSPTTLR из CSFV E2.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ получения биомассы бруцелл вакцинных штаммов.

Изобретение относится к области биотехнологии. Описано получение рекомбинантного антигена вирусного капсида цирковируса свиней 2 (PCV-2) и его модификации путем экспрессии в прокариотической системе, очистки в мономерной форме, выделения вирусоподобных частиц (ВПЧ) и его применение в композициях вакцин, диагностических наборах и системе для количественной оценки антигена PCV-2 в партиях вакцин путем анализа с помощью (антиген)захватывающего ELISA.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к моноклональному антителу, которое специфически связывает полипептид KIR3DL2, а также к фармацевтической композиции для лечения рака или воспалительного или аутоиммунного нарушения, его содержащей.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к моноклональному антителу, которое специфически связывает полипептид KIR3DL2, а также к фармацевтической композиции для лечения рака или воспалительного или аутоиммунного нарушения, его содержащей.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к получению иммуногенного полипептида, обеспечивающего формирование иммунного ответа против инфекции, вызываемой спирохетами комплекса Borrelia burgdorferi sensu lato, и может быть использовано для серодиагностики клещевого боррелиоза.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к полинуклеотидам, которые кодируют CDR3 в генах TCR-[альфа] и TCR-[бета] цепей CD4+ хелперных Т-клеток, которые специфичны к хелперному пептиду WT1322, и может быть использовано в медицине для индукции иммунного ответа против WT1322-экспрессирующей злокачественной опухоли.

Изобретение относится к ветеринарной микробиологии, в частности к лабораторной диагностике возбудителей инфекционных заболеваний, а именно к средствам диагностики инфекции у животных.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен набор для обнаружения РНК вируса болезни Гамборо, где указанный набор включает олигонуклеотиды, имеющие следующие последовательности: SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2 и SEQ ID NO:3.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложены способ и набор для обнаружения мутации Q61R в белке NRAS в образце опухолевой ткани человека.

Изобретение относится к области медицины, в частности к фтизиатрии, и предназначено для детекции изолятов Mycobacterium tuberculosis Beijing 94-32-кластера. Выявляют наличие нуклеотидной замены G>A в гене sigE в позиции 294 с помощью ПЦР в формате реального времени с использованием олигонуклеотидных праймеров и флуоресцентно-меченых зондов. Результаты ПЦР оценивают путем регистрации сигнала флуоресценции по HEX-каналу с длиной волны 555 нм и при экспоненциальном его накоплении судят о принадлежности штамма М. tuberculosis к Beijing 94-32-кластеру. При регистрации сигнала флуоресценции по контрольному FAM-каналу с длиной волны 510 нм судят о принадлежности штамма к другому генотипу М. tuberculosis. Изобретение обеспечивает быструю и надежную детекцию микобактерий туберкулеза генотипа Beijing 94-32-кластер. 3 ил., 3 пр.

Наверх