Способ оценки характера экзогенных воздействий на сперматогенез у экспериментальных животных

Изобретение относится к области медицины, а именно к области экспериментальной медицины. Способ оценки характера экзогенных воздействий на сперматогенез у экспериментальных животных включает добавление к 0,2 г пробы гомогенизированной ткани семенника с придатком 2 мл физиологического раствора, перемешивание, приливание 1 мл 40%-ного раствора трихлоруксусной кислоты, затем центрифугирование 10 мин при 3000 об/мин, отбор центрифугата и измерение оптических плотностей при 220, 254 и 280 нм в кювете толщиной 1 см. Индекс характера воздействия ИХВ вычисляют по формуле:

где ИХВ - индекс характера воздействия; ΣE(пробы) - сумма экстинкций пробы Е220, Е254, Е280; ΣЕ(конт.) - сумма экстинкций контроля Е220, Е254, Е280 при длинах волн 220, 254 и 280 нм соответственно каждому набору (в у.е.). При значении ИХВ больше 1 судят об отрицательном характере воздействия, при ИХВ меньше 1 судят о положительном характере воздействия, при ИХВ равном 1 - о нейтральном характере воздействия. Изобретение позволяет с высокой точностью оценить характер экзогенных воздействий на сперматогенез у экспериментальных животных. 4 ил., 2 табл., 5 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, а именно к области андрологии, физиологии и биохимии, а также имеет отношение к молекулярной биологии и патофизиологии.

Известны способы цитологической оценки сперматогенеза на основе подсчета количества сперматогенных клеток в гомогенате или биоптате семенников, либо в эякуляте (Мамина В.П., Семенов Д.И. Метод определения количества сперматогенных клеток семенника в клеточной суспензии // Цитология. - 1976. - Т. 18, №7. - С. 913-914; Курило Л.Ф. Способ цитологической диагностики нарушения сперматогенеза: Пат. 2328736 Рос. Федерация, МПК G01N 33/48; патентообладатель Л.Ф. Курило. - №2007103879/15; заявл. 01.02.2007; опубл. 10.07.2008. Бюл. №19).

Способы имеют следующие недостатки:

- подготовка препаратов из тестикулярной ткани - технически трудоемкий процесс;

- для приблизительной оценки тестикулярного сперматогенеза требуется гонадоэктомия (у животных), либо биопсия ткани яичка (у мужчин);

- при оценке характера сперматогенеза на уровне эпидидимиса имеются ограничения, связанные с наличием прочих клеток в эякуляте;

- показатели сперматогенеза в эякуляте не позволяют достоверно характеризовать тестикулярный сперматогенез.

Известны способы оценки сперматогенеза по уровню свободных радикалов в тестикулярной ткани, эякуляте или спермоплазме, заключающиеся в измерении уровней ТБК-активных продуктов, образующихся в результате взаимодействия тиобарбитуровой кислоты (ТБК) с продуктом липоперокси-дации - малоновым диальдегидом (МДА), а также в измерении интенсивности люминесценции (Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты // Современные методы в биохимии / под ред. акад. В.Н. Ореховича. - М.: Медицина, 1977. - С. 66-68; Короткова И.В., Николаева М.А., Божедомов В.А. и др. Уровень генерации свободных радикалов в образцах эякулята бесплодных пациентов // Бюл. экспер. биол. - 2001. - Т. 131, №6. - С. 658-660; Неймарк А.И., Алиев Р.Т., Ноздрачев Н.А. и др. Нарушения сперматогенеза у больных с хроническим абактериальным простатитом / Урология. - 2008. - №1. - С. 40-45). Однако известные способы имеют следующие недостатки:

- требуют значительных количеств реактивов и оборудования;

- конечный результат во многом зависит от качества подготовки гомогенатов тканей (при измерении уровней ТБК-активных продуктов в тестикулярной ткани);

- тиобарбитуровая кислота (ТБК) - сравнительно дорогой реактив.

Известны также способы оценки уровня токсичности экзогенного фактора, заключающиеся в измерении в УФ-диапазоне содержания так называемых «средних молекул» (ТХУ-растворимых метаболитов; ТХУ - трихлоруксусная кислота) в плазме крови (Волчегорский И.Я., Дятлов Д.А., Куликов Л.М. и др. «Средние молекулы» и продукты перекисного окисления липидов как система неспецифических регуляторов гемодинамики у спортсменов-лыжников // Физиология человека. - 1996. - Т. 22, №6. - С. 106-110; Бобров В.М., Шишкин С.А. Молекулы средней массы - показатель интоксикации при гнойно-воспалительных заболеваниях ЛОР-органов // Вестник оториноларингологии. - 1999. - №1. - С. 33-34; Шевченко С.С, Грекова А.И. Оценка уровня молекул средней и низкой массы и пептидов у детей раннего возраста при пневмонии и ОРВИ // Детские болезни. - 2015. - №1. - С. 9-12).

Известные способы имеют недостатки:

- приводимые способы использовались для оценки уровней средних молекул в плазме крови;

- приводимые показатели не позволяют интегрировано оценить содержание средних молекул как пептидной, так и непептидной природы (прочие «среднемолекулярные» метаболиты).

Известен способ-прототип оценки эффектов воздействия внешних факторов на сперматогенез, заключающийся в измерении уровней протеогликанов (ПГ) в семенниках и эпидидимисах крыс с помощью электрофореза на ацетат-целлюлозных пластинах (Николаев А.А., Ветошкин Р.В., Логинов П.В. Изменения протеогликанов семенников крыс в условиях экспериментальной хронической интоксикации серосодержащим газом // Астраханский медицинский журнал. - 2012. - Т. 7, №2. - С. 75-79).

Прототип имеет следующие недостатки:

- сложная техника выполнения исследования и получения конечных результатов;

- заметные и достоверные изменения ПГ происходят в условиях сильных экстремальных воздействий;

- некоторые фракции ПГ трудно идентифицировать.

Предлагаемое изобретение направлено на оценку характера экзогенного воздействия (положительного, отрицательного, нейтрального) на сперматогенез у экспериментальных животных путем определения содержания (в у.е.) ТХУ-растворимых метаболитов («средние молекулы») в гомогенатах семенников и эпидидимисов крыс. Предлагаемым способом также определяется суммарное содержание метаболитов пептидной и непептидной природы.

Указанный технический результат достигается тем, что к 0,2 г пробы гомогенизированной ткани семенника с придатком добавляют 2 мл физиологического раствора, перемешивают, и приливают 1 мл 40%-ного раствора трихлоруксусной кислоты, затем центрифугируют 10 мин при 3000 об/мин, отбирают центрифугат и измеряют оптические плотности при 220, 254 и 280 нм в кювете 1 см, затем вычисляют индекс характера воздействия ИХВ по формуле:

где: ИХВ - индекс характера воздействия; ΣЕ(пробы) - сумма экстинкций пробы Е220, Е254, Е280; ΣЕ(конт.) - сумма экстинкций контроля Е220, Е254, Е280 при длинах волн 220, 254 и 280 нм соответственно каждому набору (в у.е.), и при значении ИХВ больше 1 судят об отрицательном характере воздействия, при ИХВ меньше 1 судят о положительном характере воздействия, при ИХВ равном 1 - о нейтральном характере воздействия.

Средние молекулы (СМ) - эндогенные компоненты, молекулярная масса которых составляет 500-5000 Да. Название «средние молекулы» основано на общности группового признака - величине молекулярной массы. Они занимают промежуточное положение по своей молекулярной массе между простыми веществами (мочевина, креатинин, билирубин и т.д.) и белками. Химический состав группы СМ весьма неоднороден. Она включает пептиды, гликопептиды, аминосахара, полиамины, многоатомные спирты и др. Группа СМ состоит по меньшей мере из 30 пептидов с установленной биологической активностью. Среди них вазопрессин, окситоцин, нейротензин, ангиотензин, АКТГ, глюкагон, кальцитонин, эндорфины, энкефалины и др. Значительная часть СМ образуется в процессе катаболизма белков в организме. Существенная особенность СМ заключается в их высокой биологической активности. При эндогенной интоксикации наблюдается прямая связь между увеличением уровня СМ и ухудшением состояния больного (Шевченко С.С., Грекова А.И. Оценка уровня молекул средней и низкой массы и пептидов у детей раннего возраста при пневмонии и ОРВИ // Детские болезни. - 2015. - №1. - С. 9-12).

Для идентификации средних молекул обычно прибегают к УФ-спектроскопии. Однако далеко не все авторы задумываются о применении тех или иных длин волн для осуществления анализа. Диапазон волн, при которых проводятся измерения, лежит в пределах 220-280 нм. Вместе с тем при 280 нм весьма успешно можно идентифицировать карбонильные соединения (олигосахариды, аминосахара с открытой цепью последнего мономерного звена и др.), при 254 нм помимо всего прочего хорошо идентифицируются полиеновые низкомолекулярные соединения (промежуточные продукты липопероксидации), а при 220-230 нм отчетливо можно определять олигопептиды (Тюкавкина Н.А., Бауков Ю.И. Биоорганическая химия: Учебник для вузов. - 7-е изд-е. - М: Дрофа, 2008. - 542 с). В этой связи нами был предложен интегрированный показатель для оценки уровня СМ, позволяющий учитывать содержание соединений как пептидной, так и непептидной природы. Для этого содержание средних молекул вычисляли по формуле, в которой учитывались экстинкций, получаемые при пропускании пучка УФ-излучения при трех длинах волн, а именно при 220, 254 и 280 нм:

где Е220, Е254, Е280 - экстинкций (оптические плотности) при пропускании пучка УФ-излучения через анализируемые растворы (в у.е.).

Для оценки характера экзогенного воздействия полученные результаты сравнивали с контрольными показателями путем вычисления индекса характера воздействия ИХВ по формуле:

Подставляя в формулу (2) формулу (1) для расчета содержания уровней средних молекул, получаем выражение:

где ΣЕ - сумма экстинкций пробы и контроля Е220, Е254, Е280 при длинах волн 220, 254 и 280 нм соответственно.

Таким образом, при повышении уровня СМ в анализируемом образце (пробе), по сравнению с контрольным показателем, индекс ИХВ будет больше 1; при пониженных уровнях СМ в образцах индекс ИХВ будет ниже 1; в случае нейтрального характера воздействия уровень СМ не будет достоверно изменяться, и в таком случае индекс ИХВ будет равен 1.

С другой стороны, для более глубокого анализа различных фракций среди СМ дополнительно вычисляли соотношение пептидных и непептидных СМ в анализируемых пробах по формуле:

Здесь в знаменателе сумма двух экстинкций показывает суммарное содержание (в у.е.) молекул средней и низкой массы (МСИНМ) преимущественно непептидной природы. Вычисляемое соотношение позволяет более детально проанализировать возможные сдвиги в составе СМ.

Повышение уровня СМ можно ожидать при развитии состояния напряжения в организме, что может быть обусловлено различными токсическими эффектами. В пользу указанного обстоятельства свидетельствуют повышенные уровни продуктов перекисного окисления (ПОЛ) липидов при одновременном измерении уровня ПОЛ и содержания СМ (Волчегорский И.Я., Дятлов Д.А., Куликов Л.М. и др. «Средние молекулы» и продукты перекисного окисления липидов как система неспецифических регуляторов гемодинамики у спортсменов-лыжников // Физиология человека. - 1996. - Т. 22, №6. - С. 106-110).

Создание способа оценки характера экзогенных воздействий на сперматогенез осуществлялось на 50 половозрелых самцах крыс линии Wistar массой 210±10 г на базе кафедры химии ФГБОУ ВО «Астраханский государственный медицинский университет» Минздрава России. Животные были разделены на 5 групп, из которых одна была контрольная (10 шт. ), а четыре другие - опытные по 10 животных в каждой. В первой экспериментальной группе животные подвергались воздействию микроволнового излучения (МВИ) миллиметрового диапазона (λ=7,1 мм, частота f=42 ГГц) в течение 30 дней по 30 минут ежедневно. Для создания электромагнитного поля использовали генератор монохроматических электромагнитных волн Явь-1-7,1 (Россия). Во вторую группу вошли животные, подвергавшиеся воздействию сероводородсодержащим природным газом в концентрации 10 мг/м3 (по H2S) в течение 30 дней по 4 часа ежедневно. В третью экспериментальную группу входили животные, получавшие перорально имбирь в дозе 100 мг/кг массы тела животного в сутки в течение 14 дней. В четвертую группу вошли животные, получавшие имбирь в указанной дозе в течение 14 дней, после чего подвергались воздействию МВИ (λ=7,1 мм, частота f=42 ГГц) в течение 30 дней по 30 минут ежедневно.

Для оценки содержания уровней СМ использовали УФ спектрофотометр ПЭ-5400УФ. Способ осуществляют следующим образом: 1) тщательно измельчают замороженную ткань семенника с придатком; 2) 0,2 г пробы полученного таким образом гомогената смешивают с 2 мл физиологического раствора (в соотношении 1:10), тщательно перемешивают; 3) добавляют 1 мл 40%-ного раствора трихлоруксусной кислоты (ТХУ); 4) центрифугируют 10 минут при 3000 об/мин; 5) отбирают центрифугат (приблизительно 3 мл) и наливают в кювету толщиной 1 см; 6) измеряют величины оптических плотностей при длинах волн 220, 254 и 280 нм против раствора, полученного смешением 2 мл физиологического раствора и 1 мл раствора ТХУ; 7) вычисляют индекс характера воздействия ИХВ относительно установленных контрольных показателей по формуле (3). В гомогенатах тканей семенников и эпидидимисов крыс определяли также уровень МДА (Стальная И.Д., Гаришвили Т.Г. Метод определения малонового диальдегида с помощью тиобарбитуровой кислоты // Современные методы в биохимии / под ред. акад. В.Н. Ореховича. - М.: Медицина, 1977. - С. 66-68). Срезы семенников толщиной 7 мкм изготавливали на микротоме "Microm НМ - 400" (Германия) и окрашивали гематоксилин-эозином. Полученные препараты изучались на универсальном микроскопе "Nu" (Германия), соединенным с цветной телевизионной камерой "Pixera" (США). Исследование препаратов проводили при увеличении 200× (объектив 10, окуляр 20).

В предлагаемом способе достигнуты следующие результаты. Содержание молекул средней и низкой массы (МСИНМ) и пептидов в гомогенатах семенников и эпидидимисов крыс в условиях различных воздействий отражено в таблице 1. В таблице также приводится интегральный показатель СМ, вычисляемый по формуле (1), а также уровень МДА в гомогенатах тканей семенников и эпидидимисов животных. Как следует из таблицы 1, под влиянием МВИ и СВСГ АГКМ достоверно возрастает содержание МСИНМ и пептидов, по сравнению с контролем (P<0,001). Содержание СМ также закономерно возрастает. Вместе с тем имбирь вызвал некоторые изменения в профиле СМ, а именно: содержание МСИНИ уменьшилось, в то время как содержание пептидов имело тенденцию к возрастанию. Так, если в контроле отношение пептидных к непептидным СМ (в соответствии с формулой 4) составляло 0,97, то в присутствии имбиря это соотношение было 1,4. Это означает, что имбирь закономерно вызывает снижение карбонильных соединений в тестикулярной ткани, но вместе с тем стимулирует белковый синтез. Причиной тому может быть активация стероидогенеза, который в условиях снижения липопероксидации возрастает. Это, в свою очередь, ведет к усилению синтеза различных белковых факторов, которые в том числе участвуют в сперматогенезе. В то же самое время содержание СМ в целом снижается, что свидетельствует о положительном влиянии имбиря на функциональное состояние семенников и эпидидимисов животных.

В присутствии имбиря МВИ не оказывает существенного влияния на уровень пептидов и удельное содержание СМ в целом. Содержание пептидов имеет даже тенденцию к снижению. Это можно объяснить следующим образом. Процессы биосинтеза активируются незначительно в условиях разнонаправленного действия двух факторов (имбирь, МВИ). В то же самое время необходимость в синтезе антиперекисных ферментов (супероксиддисмутаза СОД, глутатионпероксидаза ГПО, каталаза) практически отпадает в присутствии такого полифенольного соединения, как имбирь. Таким образом, умеренное содержание антиперекисных ферментов (пептиды) на фоне также умеренного уровня биосинтеза прочих регуляторных пептидов сказывается на почти неотличимом от контроля уровне пептидов в гомогенатах тестикулярной ткани. В целом же эффект сочетанного воздействия имбиря и МВИ оказывается нейтральным.

Выявленные закономерности в уровнях средних молекул соотносятся с уровнем радикалообразования в тестикулярной ткани с придатком. Так, содержание МДА в гомогенатах тканей семенников и эпидидимисов коррелировало с содержанием СМ в соответствии с высоким коэффициентом положительной корреляции r=+0,93 (Р<0,05). Таким образом, в условиях повышенной динамики свободнорадикального окисления возрастают уровни СМ.

Изменения динамики свободнорадикального окисления и уровней СМ соотносятся с морфологическими данными о характере сперматогенеза в извитых канальцах семенников. В контрольной группе животных (Фиг. 1) семенные канальцы имели округлую форму, тесно прилегали друг к другу. Половые клетки располагались упорядоченно в соответствии со стадиями сперматогенного цикла. В условиях воздействия СВСГ АГКМ (Фиг. 2) семенные канальцы располагались на значительном расстоянии друг от друга; внутри них наблюдалось скопление отечной жидкости. Кроме того, имело место отслоение базальной мембраны и дезорганизация сперматогенного эпителия (либо абсолютное запустевание семенных канальцев). В условиях воздействия МВИ (Фиг. 3) наблюдалось хаотичное расположение клеток сперматогенного эпителия, либо неравномерная его высота. Воздействие МВИ на фоне потребляемого имбиря (Фиг. 4) не вызывало заметных деструктивных изменений в структуре извитых семенных канальцев. Высота сперматогенного эпителия была визуально соизмерима с аналогичным контрольным показателем (табл. 2).

Для создания указанного способа полученные результаты успешно прошли апробацию.

Пример 1. Контрольная группа. Экстинкций (средние значения) при длинах волн 220, 254 и 280 нм соответственно: Е220 = 0,37; Е254 = 0,18; Е280 = 0,20. Сумма экстинкций контрольной группы ΣЕ (конт.) = 0,75. В соответствии с формулой (1), содержание средних молекул СМ составляет 0,25. Полученный показатель суммы экстинкций ΣЕ (конт.) будет использоваться в дальнейших расчетах при вычислении индекса ИХВ.

Пример 2. Воздействие микроволнового излучения (МВИ). Экстинкций при длинах волн 220, 254 и 280 нм соответственно: Е220 = 0,59; Е254 = 0,23; Е280 = 0,27. Сумма экстинкций в средней пробе данной группы ΣЕ (пробы) = 1,09. В соответствии с формулой (3),

Полученное значение ИХВ больше 1, что говорит об отрицательном характере данного экзогенного воздействия.

Пример 3. Воздействие сероводородсодержащего газа АГКМ. Экстинкций при длинах волн 220, 254 и 280 нм соответственно: Е220 = 0,89; Е254 = 0,45; Е280 = 0,43. Сумма экстинкций в средней пробе данной группы ΣЕ (пробы) = 1,77. В соответствии с формулой (3),

Полученное значение ИХВ значительно больше 1, что говорит об отрицательном характере данного экзогенного воздействия.

Пример 4. Влияние имбиря. Экстинкций при длинах волн 220, 254 и 280 нм соответственно: Е220 = 0,42; Е254 = 0,12; Е280 = 0,18. Сумма экстинкций в средней пробе данной группы ΣЕ (пробы) = 0,72. В соответствии с формулой (3),

Полученное значение ИХВ меньше 1, что говорит о положительном характере данного экзогенного воздействия.

Пример 5. Воздействие МВИ в сочетании с имбирем. Экстинкций при длинах волн 220, 254 и 280 нм соответственно: Е220 = 0,36; Е254 = 0,16; Е280 = 0,23. Сумма экстинкций в средней пробе данной группы ΣЕ (пробы) = 0,75. В соответствии с формулой (3),

Полученное значение ИХВ равное 1 говорит о нейтральном характере данного комбинированного воздействия. Все приведенные выше примеры представлены в обобщенном виде в таблице 2.

Результаты апробации подтверждаются морфологическими данными тестикулярной ткани, полученными от животных, подвергавшихся указанным воздействиям. Из таблицы 2 следует, что при значениях ИХВ больше 1 высота сперматогенного эпителия была достоверно ниже контрольного показателя (Р<0,001), а при значении ИХВ меньше 1 высота сперматогенного эпителия была достоверно выше контрольного показателя (Р<0,01). При нейтральном характере воздействия (пример 5) высота сперматогенного эпителия не отличалась достоверно от контрольного значения. Кроме того, полученные результаты апробации соотносятся с обнаруженными тенденциями по уровням МДА для каждой из описанных групп (таблица 1).

Таким образом, предлагаемый способ позволяет с высокой точностью качественно оценивать характер экзогенных воздействий на сперматогенез у экспериментальных животных, что можно использовать при анализе аналогичных воздействий на человека. Способ также позволяет комплексно оценивать изменения в содержании уровней средних молекул разного профиля вне зависимости от характера воздействия.

Способ оценки характера экзогенных воздействий на сперматогенез у экспериментальных животных, заключающийся в экстрагировании биологически важных соединений из гомогенатов тканей семенников и эпидидимисов белых крыс, отличающийся тем, что к 0,2 г пробы гомогенизированной ткани семенника с придатком добавляют 2 мл физиологического раствора, перемешивают и приливают 1 мл 40%-ного раствора трихлоруксусной кислоты, затем центрифугируют 10 мин при 3000 об/мин, отбирают центрифугат и измеряют оптические плотности при 220, 254 и 280 нм в кювете 1 см, затем вычисляют индекс характера воздействия ИХВ по формуле:

где ИХВ - индекс характера воздействия; ΣЕ(пробы) - сумма экстинкций пробы Е220, Е254, Е280; ΣЕ(конт.) - сумма экстинкций контроля Е220, Е254, Е280 при длинах волн 220, 254 и 280 нм соответственно каждому набору (в у.е.), и при значении ИХВ больше 1 судят об отрицательном характере воздействия, при ИХВ меньше 1 судят о положительном характере воздействия, при ИХВ равном 1 - о нейтральном характере воздействия.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к способу подготовки образцов поствитальной или пострезекционной костной ткани человека для исследования методом растровой электронной микроскопии.

Изобретение относится к медицине, а именно к патоморфологии, и может быть использовано для определения срока физиологически протекавшей беременности у женщин в I триместре.

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ дифференциальной диагностики грибовидного микоза от хронических дерматозов, включающий проведение у больного конфокальной лазерной сканирующей микроскопии наиболее инфильтрированного участка кожи, выявление патоморфологических признаков и балльную оценку их степени выраженности, характеризующийся тем, что определяют F – суммарный диагностический индикатор указанных патоморфологических признаков по формуле , где p1 – эпидермальная деструкция (от 0 до 3 баллов); р2 – микроабсцессы Потрие (от 0 до 1 балла); р3 – присутствие атипичных лимфоцитов в эпидермисе (от 0 до 3 баллов); р4 – присутствие атипичных лимфоцитов в дермо-эпидермальном соединении (от 0 до 3 баллов); р5 – потеря контура сосочков (от 0 до 3 баллов); р6 – присутствие атипичных лимфоцитов в дерме (от 0 до 3 баллов); и при значении F<5,8 диагностируют хронический дерматоз, при значении 5,9≤F≤6,8 – диагноз не уточнен, а при значении F≥6,9 – грибовидный микоз.

Изобретение относится к области медицины и представляет собой способ дифференциальной диагностики грибовидного микоза от хронических дерматозов, включающий проведение у больного конфокальной лазерной сканирующей микроскопии наиболее инфильтрированного участка кожи, выявление патоморфологических признаков и балльную оценку их степени выраженности, характеризующийся тем, что определяют F – суммарный диагностический индикатор указанных патоморфологических признаков по формуле , где p1 – эпидермальная деструкция (от 0 до 3 баллов); р2 – микроабсцессы Потрие (от 0 до 1 балла); р3 – присутствие атипичных лимфоцитов в эпидермисе (от 0 до 3 баллов); р4 – присутствие атипичных лимфоцитов в дермо-эпидермальном соединении (от 0 до 3 баллов); р5 – потеря контура сосочков (от 0 до 3 баллов); р6 – присутствие атипичных лимфоцитов в дерме (от 0 до 3 баллов); и при значении F<5,8 диагностируют хронический дерматоз, при значении 5,9≤F≤6,8 – диагноз не уточнен, а при значении F≥6,9 – грибовидный микоз.

Изобретение относится к микробиологии и может быть использовано при выявлении протективного действия микроорганизмов на молекулу гемоглобина. Для этого исследуемую культуру микроорганизмов выращивают в жидкой питательной среде, отделяют супернатант от микробных клеток центрифугированием, параллельно с опытной пробой готовят контрольную пробу из жидкой питательной среды.

Изобретение относится преимущественно к области физической химии и биофизикии, может быть использовано в медицине, а также биологии и физиологии человека и животных.

Изобретение относится к области аналитической химии и может быть использовано для определения содержания галогенорганических соединений в волосах человека и касается экологического контроля загрязнения внутренней среды человека.
Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии и клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки эффективности лечения микоза стоп.

Изобретение относится к медицинской диагностике и может быть использовано для установления изменений и особенностей легколетучих метаболитов, выделяемых кожей и детектируемых набором химических газовых сенсоров.
Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для подбора индивидуальных средств гигиены полости рта. Для осуществления способа индивидуального подбора средств гигиены полости рта у пациента осуществляют забор ротовой жидкости, очищают зубы механически без использования средств гигиены полости рта, определяют гидрофобность эмали зубов пациента методом «сидячей капли», из банка зубов, удаленных по медицинским показаниям, подбирают зубы, гидрофобность эмали которых соответствует гидрофобности эмали зубов пациента, зубы, предназначенные для исследования средств гигиены полости рта, очищают зубной щеткой средней жесткости с использованием соответствующего исследуемого средства гигиены, в качестве контроля используют зуб, не очищенный средством гигиены полости рта, зубы погружают в ротовую жидкость пациента и термостатируют при температуре 37°С, с интервалом исследования 1 час определяют время появления зубной бляшки на зубах и измеряют гидрофобность эмали зубов методом «сидячей капли», об эффективности средства гигиены полости рта судят по времени появления зубной бляшки и значению гидрофобности эмали по сравнению с контролем.

Изобретение относится к области медицины, а именно к области экспериментальной медицины. Способ оценки характера экзогенных воздействий на сперматогенез у экспериментальных животных включает добавление к 0,2 г пробы гомогенизированной ткани семенника с придатком 2 мл физиологического раствора, перемешивание, приливание 1 мл 40-ного раствора трихлоруксусной кислоты, затем центрифугирование 10 мин при 3000 обмин, отбор центрифугата и измерение оптических плотностей при 220, 254 и 280 нм в кювете толщиной 1 см. Индекс характера воздействия ИХВ вычисляют по формуле: где ИХВ - индекс характера воздействия; ΣE - сумма экстинкций пробы Е220, Е254, Е280; ΣЕ - сумма экстинкций контроля Е220, Е254, Е280 при длинах волн 220, 254 и 280 нм соответственно каждому набору. При значении ИХВ больше 1 судят об отрицательном характере воздействия, при ИХВ меньше 1 судят о положительном характере воздействия, при ИХВ равном 1 - о нейтральном характере воздействия. Изобретение позволяет с высокой точностью оценить характер экзогенных воздействий на сперматогенез у экспериментальных животных. 4 ил., 2 табл., 5 пр.

Наверх