Производное на основе дигидропиримидо-кольца в качестве ингибитора hbv
Изобретение относится к новому производному дигидропиримидиниевого соединения формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли. Соединения обладают свойствами ингибитора HBV и могут быть использованы для лечения вируса гепатита В. В формуле (I)
(I)
0-2 из D11-14 отдельно и независимо выбраны из одинарной связи, -C(=O)N(Rd3)-, -N(Rd4)-, -S(=O)2N(Rd6)-, -S(=O)N(Rd7)-, -O-, -S-, -C(=O)O-, -C(=O)- или -S(=O)2-, а остальные выбраны из -C(Rd1)(Rd2)-; L выбран из одинарной связи, -S-, -NH-, -S(=O)-, -S(=O)2-, -N(Rd4)-, -[C(Rd1)(Rd2)]0-6; R2 выбран из
;
D21 выбран из одинарной связи, -N(Rd4)-, -О-, причем Rd4 представляет собой водород; R21 независимо выбран из Н, С1-4алкила, который необязательно замещен R01, причем каждый из R01 независимо выбран из F, Cl, Br, I, C1-10алкила; R3 отдельно и независимо выбран из следующих групп, необязательно замещенных R01: 6-10-членной ароматической кольцевой группы или 5-6-членной гетероароматической кольцевой группы, содержащей атом серы или атом азота в качестве гетероатома, причем каждый из R01 независимо выбран из F, Cl, Br, I, C1-10алкила; R4 отдельно и независимо выбран из следующих групп, необязательно замещенных R01: C1-10алкила или 5-6-членной гетероароматической кольцевой группы, содержащей атомы азота и серы или атом азота в качестве гетероатома, причем каждый из R01 независимо выбран из F, Cl, Br, I, C1-10алкила; R3' выбран из Н, С1-4алкила; Rd3 и Rd6-7 отдельно и независимо выбраны из Н, CN, С1-4алкила, бензила, необязательно замещенных C1-10алкокси; Rd4 выбран из Н, С1-4алкила, CN, или выбран из следующих групп, необязательно замещенных R01: -С(=O)O-С1-4алкила, -S(=O)2NH-C1-4алкила, -С(=O)-С1-4алкила, -S(=O)2-С1-4алкила, -С(=O)NH-С1-4алкила, 3-6-членного гетероциклилкарбонила, где гетероциклил имеет кислород в качестве гетероатома, -С(=O)-C3-6циклоалкила, С1-4алкил-5-6-членного гетероарила с 1-2 гетероатомами, выбранными из азота или кислорода или азота и кислорода, -S(=O)2-C3-6циклоалкила, -С1-4алкил-С(=O)NH2, -С1-4алкилфенила, -С1-4алкил-С(=O)O-С1-4алкила, -С1-4алкил-С(=O)ОН, 3-6-членного гетероциклила с кислородом в качестве гетероатома и -C(=S)NH-C1-4алкила, причем R01 независимо выбран из NH2, С1-4алкила, С1-4алкокси; Rd1-2 отдельно и независимо выбраны из Н, CN, ОН, NH2, СООН, или выбраны из следующих групп, необязательно замещенных R01: C1-4алкила, С1-4алкилфенила, С0-4алкил-3-6-членного гетероциклила с 1-4 гетероатомами, выбранными из азота или кислорода или азота и кислорода, 3-6-членного гетероциклилкарбонила, где гетероциклил имеет 1-4 гетероатома, выбранных из азота или кислорода, или азота и кислорода, или атома азота и серы или ее сульфоксида, бензолсульфонамидо или гетероциклилсульфонамидо, где гетероциклил имеет 1-4 гетероатома, выбранных из азота или кислорода, или азота и кислорода, -D01-D02-D03-H,
;
причем каждый из R01 независимо выбран из F, Cl, Br, I, CN, ОН, NH2, С0-4алкил-С(=O)ОН, С1-4алкила, С1-4алкокси,
,
C0-4алкил-С(=O)O-С1-4алкила; причем D01 выбран из одинарной связи, -C1-4алкил-; D02 выбран из О, S, NH, -С(=O)-, -S(=O)2-, -С(=O)O-, -C(=O)NH-, -C(=S)NH-, -S(=O)2NH-, -S(=O)NH-, -NHC(=O)O-, -NHC(=O)NH-, -NHC(=NH)NH-, -NHS(=O)2NH-, -C(=O)NHS(=O)2-, -NHS(=O)NH-, -C(=O)NHS(=O)-, -C(=N)-, -NH-C(=N)-; D03 выбран из одинарной связи, -C1-4алкил-, -С2-4алкенил-, -C3-6циклоалкил-, -3-6-членного гетероциклоалкил-, где гетероциклил имеет 1-2 гетероатома, выбранных из азота или кислорода, или азота и кислорода, фенила, 5-6-членного гетероарила с 1-4 гетероатомами, выбранными из азота или азота и кислорода; необязательно R3 и R3' вместе присоединены к одному и тому же атому углерода с образованием 9-членного бициклического кольца, которое необязательно замещено F. 12 з.п. ф-лы, 3 табл., 226 пр.
Область техники, к которой относится изобретение
Настоящее изобретение относится к производному на основе дигидропиримидо-кольца в качестве ингибитора HBV и, в частности, к соединению, представленному формулой (I), или его фармацевтически приемлемой соли.
Предшествующий уровень техники
Вирус гепатита B принадлежит к семейству Hepadnaviridae. Он может вызывать острые и/или постоянные/прогрессирующие хронические заболевания. Вирус гепатита B также может являться причиной многих других клинических проявлений патоморфологии, в частности хронического воспаления печени, цирроза печени и развития гепатоцеллюлярной карциномы. Кроме того, коинфекцирование гепатитом D приведет к негативным последствиям во время развития заболевания.
Общепринятые лицензированные лекарственные препараты для лечения хронического гепатита включают в себя интерферон и ламивудин. Тем не менее, интерферон обладает лишь умеренной активностью, но относительно высокотоксичным побочным действием; несмотря на то, что ламивудин обладает хорошей активностью, лекарственная устойчивость к нему стремительно возрастает во время терапии и часто возникают эффекты возобновления симптомов после прекращения терапии, и значение IC50 для ламивудина (3-TC) составляет > 300 нМ (Science, 299 (2003), 893-896).
Deres et al описали тип гетероароматически замещенных дигидропиримидиновых (HAP) соединений, представленных Bay41_4109, Bay39_5493, и этот тип соединений может играть роль в ингибировании репликации HBV путем предотвращения образования нормальных нуклеокапсидов. Bay41-4109 продемонстрировало лучшие метаболические характеристики лекарственного средства во время клинических исследований (Science, 299 (2003), 893-896). В исследованиях относительно его механизмов действия было обнаружено, что гетероароматически замещенные дигидропиримидиновые (HAP) соединения изменяют угол между димерами, которые образуют нуклеокапсид путем взаимодействия с аминокислотными остатками 113-143 капсидного белка, приводя к образованию нестабильного увеличенного нуклеокапсида и ускоряя разрушение капсидного белка (Biochem.Pharmacol.66 (2003), 2273-2279).
Bay41_4109
В настоящее время все еще существует необходимость в новом соединении, которое может эффективно действовать в качестве противовирусного лекарственного средства, в частности лекарственного препарата при лечении и/или предупреждении гепатита B.
Суть изобретения
Одной целью настоящего изобретения является обеспечение соединения, представленного формулой (I), или его фармацевтически приемлемой соли,
(I),
где
0-2 из D11-14 отдельно и независимо выбраны из одинарной связи, -C(=O)N(Rd3)-, -N(Rd4)-, -C(=NRd5)-, -S(=O)2N(Rd6)-, -S(=O)N(Rd7)-, -O-, -S-, -C(=O)O-, -C(=O)-, -C(=S)-, -S(=O)- или -S(=O)2-, а остальные выбраны из -C(Rd1)(Rd2)-;
L выбран из одинарной связи, -O-, -S-, -NH-, -C(=O)-, -C(=S)-, -S(=O)-, -S(=O)2-, -C(=O)N(Rd3)-, -N(Rd4)-, -[C(Rd1)(Rd2)]0-6;
R2 выбран из 
, 
, 
;
D21 выбран из одинарной связи, -C(=O)N(Rd3)-, -N(Rd4)-, -C(=NRd5)-, -S(=O)2N(Rd6)-, -S(=O)N(Rd7)-, -O-, -S-, -[C(Rd1)(Rd2)]0-6;
R3, R4 отдельно и независимо выбраны из следующих групп, необязательно замещенных R01: C1-10алкила или гетероалкила, 3-6-членного циклоалкила или гетероциклоалкила, 6-10-членной ароматической кольцевой группы или гетероароматической кольцевой группы;
R3', R21, Rd1-8 отдельно и независимо выбраны из H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, -COOH или выбраны из следующих групп, необязательно замещенных R01: C1-4алкила, -C0-4алкилфенила, -C0-4алкил-3-6-членного гетероциклила, 3-6-членного гетероциклилацил-, бензолсульфонамидо или гетеробензолсульфонамидо, -D01-D02-D03-H, 
;
D01 выбран из одинарной связи, -C1-4алкил-;
D02 выбран из O, S, NH, -C(=O)-, -S(=O)2-, -C(=O)O-, -C(=O)NH-, -C(=S)NH-, -S(=O)2NH-, -S(=O)NH-, -NHC(=O)O-, -NHC(=O)NH-, -NHS(=O)2NH-, -C(=O)NHS(=O)2-, -NHS(=O)NH-, -C(=O)NHS(=O)-, -NHS(=O)2O-, -NHS(=O)O-, -C(=N)-, -NH-C(=N)-;
D03 выбран из одинарной связи, -C1-4алкил-, -C2-4алкенил-, -C3-6циклоалкил-, -3-6-членного гетероциклоалкил-, 5-6-членного арила, 5-6-членного гетероарила;
необязательно R3 и R3' вместе присоединены к одному и тому же атому углерода или гетероатому с образованием 3-12-членного кольца, которое необязательно замещено;
“гетеро'' представляет собой гетероатом или гетероатомную группу, которые выбраны из -C(=O)N(Rd3)-, -N(Rd4)-, -C(=NRd5)-, -S(=O)2N(Rd6)-, -S(=O)N(Rd7)-, -O-, -S-, =O, =S, -C(=O)O-, -C(=O)-, -C(=S)-, -S(=O), -S(=O)2- или/и -P(=O)(ORd8)2;
R01 выбран из F, Cl, Br, I, CN, OH, SH, NH2, CHO, COOH, =NH, =O, =S или из следующих групп, необязательно замещенных R001: C1-10алкила, C1-10алкиламино, N,N-ди(C1-10алкил)амино, C1-10алкокси, C1-10алкилацила, C1-10алкоксикарбонила, -С1-5алкил-С(=О)О-С1-5алкила, C1-10алкилсульфонила, C1-10алкилсульфинила, 3-10-членного циклоалкила, 3-10-членного циклоалкиламино, 3-10-членного гетероциклоалкиламино, 3-10-членного циклоалкокси, 3-10-членного циклоалкилацила, 3-10-членного циклоалкоксикарбонила, 3-10-членного циклоалкилсульфонила, 3-10-членного циклоалкилсульфинила;
R001 выбран из F, Cl, Br, I, CN, ОН, N(CH3)2, NH(CH3), NH2, СНО, СООН, =NH, =O, =S, тригалогенметила, дигалогенметила, моногалогенметила, аминометила, гидроксиметила, метила, метокси, формила, метоксикарбонила, метилсульфонила, метилсульфинила;
при этом в любом из описанных выше случаев количество R01, R001 отдельно и независимо выбрано из 0, 1, 2 или 3, а количество гетероатомов или гетероатомных групп отдельно и независимо выбрано из 1, 2 или 3.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения описанное выше соединение или его фармацевтически приемлемая соль имеют структуру, показанную в виде формулы (II):
где R31-32 отдельно и независимо выбраны из Н, F, Cl, Br, I, ОН, NH2, CN, -СООН или выбраны из следующих групп, необязательно замещенных 1, 2 или 3 R01: С1-4алкила, -С0-4алкилфенила, -С0-4алкил-3-6-членного гетероциклила, 3-6-членного гетероциклилацил-, бензолсульфонамидо или гетеробензолсульфонамидо, -D01-D02-D03-H, 
;
D01 выбран из одинарной связи, -С1-4алкил-;
D02 выбран из О, S, NH, -С(=O)-, -S(=O)2-, -С (=O)O-, -C(=O)NH-, -C(=S)NH-, -S(=O)2NH-, -S(=O)NH-, -NHC(=O)O-, -NHC(=O)NH-, -NHS(=O)2NH-, -C(=O)NHS(=O)2-, -NHS(=O)NH-, -C(=O)NHS(=O)-, -NHS(=O)2O-, -NHS(=O)O-, -C(=N)-, -NH-C(=N)-;
D03 выбран из одинарной связи, -С1-4алкил-, -С2-4алкенил-, -С3-6циклоалкил-, -3-6-членного гетероциклоалкил-, 5-6-членного арила, 5-6-членного гетероарила;
m, n отдельно и независимо выбраны из 1 или 2;
представляет собой одинарную связь или двойную связь.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения описанный выше -D03-H выбран из: Н, Me, Et, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R01 выбран из галогена, CN, =NH, =O, =S, COOH или из следующих групп, необязательно замещенных 1, 2 или 3 R001: гидроксила, амино, C1-4алкила, C1-4алкокси, C0-4алкил-C(=O)O-C1-4алкила;
в частности, R01 выбран из F, Cl, Br, I, OH, CN, NH2, =NH, =O, =S, -SMe, Me, Et, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения описанные выше R3', R21, Rd1-d8, R31-32 отдельно и независимо выбраны из H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, -COOH или выбраны из следующих групп, необязательно замещенных 1, 2 или 3 R01: CH3, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения описанные выше R3', R21, Rd1-d8 и R31-32 отдельно и независимо выбраны из: H, F, Cl, Br, I, OH, NH2, CN, -COOH, CH3, 
, 
, -
, -
, 
, 
, 
, 
, 
, 
; 
, 
, 
, 
, 
, , , , 
, 
; 
, 
, 
, 
; 
, 
, 
, , , , 
, , 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, , 
, 
, 
, , , , , 
, 
, , , , , 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, , 
, 
, , 
, 
, , , , 
, 
, 
, 
, , , , , , , , 
, , 
, 
, , 
, 
, 
, 
, 
, 
, , , 
, 
, 
, 
, 
, , 
, , , , 
, , 
, , , 
, 
, , 
, 
, 
, 
, 
, , .
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения структурная единица 
выбрана из: 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения описанная выше структурная единица 
выбрана из: , 
, 
, , 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, , 
, 
, 
, 
, , 
, 
, , 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, , 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, , 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, , 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, , , , , 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, .
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения описанные выше L и D21 выбраны из одинарной связи, -O-, -NH-; или R21 выбран из C1-4алкила, C1-4алкиламино, N,N-ди(C1-4алкил)амино, C1-4алкиламино-C1-4алкил-, N,N-ди(C1-4алкил)амино-C1-4алкил-, C1-4алкокси, C1-4алкокси-C1-4алкил-, галогенC1-4алкил-, дигалогенC1-4алкил-, аминооксиC1-4алкил-, замещенного гидроксилом C1-4алкилокси-, замещенного гидроксилом C1-3алкиламино-.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения описанный выше R21 выбран из метила, этила, н-пропила, изопропила, метиламино, этиламино, пропиламино, диметиламино, диэтиламино, дипропиламино, метиламиноэтила, этиламиноэтила, пропиламиноэтила, диметиламиноэтила, диэтиламинометила, диметиламинометила, диэтиламиноэтила, метоксиметила, метоксиэтила, метоксипропила, этоксиметила, пропоксиметила, этоксиэтила, пропоксипропила, фторметила, фторэтила, фторпропила, дифторметила, дифторэтила, дифторпропила, аминооксиметила, аминооксиэтила, аминооксипропила, гидроксиметилокси, гидроксиэтилокси, гидроксипропокси.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения описанная выше структурная единица выбрана из 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения описанная выше структурная единица 
выбрана из 
.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения описанный выше R3 или R4 отдельно и независимо выбран из следующих групп, необязательно замещенных 1, 2 или 3 R001: фенила, пиридила, хинолинила, изохинолинила, тиазолила, тиенила, оксазолила, изоксазолила, пиразолила, изотиазола, фурила, пирролила, пирролидинила, 1,3-диоксоланила, 2-пиразолинила, пиразолидинила, имидазолила, 1,2,3-азолила, 1,2,3-триазолила, 1,2,4-триазолила, 1,3,4-тиадиазолила, пиперидила, 1,4-диоксанила, морфолинила, пиперазинила, пиперидила, пиримидинила, пиразинила, 1,3,5-тритианила, 1,3,5-триазинила, инденила, нафтила, бензофуранила, бензотиенила, индолила, бензимидазолила, бензотиазолила, бензопентила, циклопропила;
или структурная единица 
выбрана из бензопентила, инденила, необязательно замещенных 1, 2 или 3 R001;
R001 определен выше.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R3 выбран из 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
; 
.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения R4 выбран из 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
, 
.
В некоторых вариантах осуществления настоящего изобретения описанная выше структурная единица выбрана из: 
, 
, 
, 
.
В частности, соединение по настоящему изобретению выбрано из:
.
Соответствующие определения
Если не указано иное, предполагается, что следующие термины и выражения, используемые в данном документе, имеют следующие значения. Конкретный термин или выражение при отсутствии точного определения следует понимать в его общепринятом значении, а не рассматривать в качестве неопределенного или неясного. Предполагается, что торговое наименование, представленное в данному документе, относится к соответствующему коммерческому продукту или к его активному компоненту.
C1-12 выбран из C1, C2, C3, C4, C5, C6, C7, C8, C9, C10, C11 и C12; C3-12 выбран из C3, C4, C5, C6, C7, C8, C9, C10, C11 и C12.
C1-12алкил или гетероалкил, C3-12циклическая группа или гетероциклическая углеводородная группа, C1-12алкил или гетероалкил, замещенные C3-12циклической углеводородной группой или гетероциклической углеводородной группой, включают, но без ограничения:
C1-12алкил, C1-12алкиламино, N,N-ди(C1-12алкил)амино, C1-12алкокси, C1-12алкилацил, C1-12алкоксикарбонил, C1-12алкилсульфонил, C1-12алкилсульфинил, C3-12циклоалкил, C3-12циклоалкиламино, C3-12гетероциклоалкиламино, C3-12циклоалкокси, C3-12циклоалкилацил, C3-12циклоалкоксикарбонил, C3-12циклоалкилсульфонил, C3-12циклоалкилсульфинил, 5-12-членный арил или гетероарил, 5-12-членный арилалкил или гетероарилалкил;
метил, этил, н-пропил, изопропил, -CH2C(CH3)(CH3)(OH), циклопропил, циклобутил, пропилметилен, циклопропионил, бензокси, трифторметил, аминометил, гидроксиметил, метокси, формил, метоксикарбонил, метилсульфонил, метилсульфинил, этокси, ацетил, этилсульфонил, этоксикарбонил, диметиламино, диэтиламино, диметиламинокарбонил, диэтиламинокарбонил;
N(CH3)2, NH(CH3), -CH2CF3, -CH2CH2CF3, -CH2CH2F, -CH2CH2S(=O)2CH3, -CH2CH2CN, -CH2CH(OH)(CH3)2, -CH2CH(F)(CH3)2, -CH2CH2F, -CH2CF3, -CH2CH2CF3, -CH2CH2NH2, -CH2CH2OH, -CH2CH2OCH3, -CH2CH2CH2OCH3, -CH2CH2N(CH3)2, -S(=O)2CH3, -CH2CH2S(=O)2CH3; и
фенил, тиазолил, бифенил, нафтил, циклопентил, фурил, 3-пирролинил, пирролидинил, 1,3-диоксанил, пиразолил, 2-пиразолинил, пиразолидинил, имидазолил, оксазолил, тиазолил, 1,2,3-азолил, 1,2,3-триазолил, 1,2,4-триазолил, 1,3,4-тиадиазолил, 4H-пиранил, пиридил, пиперидил, 1,4-диоксанил, морфолинил, пиридазинил, пиримидинил, пиразинил, пиперазинил, 1,3,5-тритианил, 1,3,5-триазинил, бензофуранил, бензотиенил, индолил, бензимидазолил, бензотиазолил, пуринил, хинолил, изохинолил, циннолинил или хиноксалинил.
Термин «фармацевтически приемлемый», как используется в данном документе, предназначен для тех соединений, материалов, композиций и/или составов, которые, в рамках объективного врачебного мнения, подходят для применения по отношению к тканям людей и животных, но без чрезмерных токсичности, раздражения, аллергических реакций или других проблем или осложнений, и также соответствуют обоснованному отношению польза/риск.
Термин «фармацевтически приемлемая соль» относится к соли соединения по настоящему изобретению, которую получают из соединения при помощи конкретных заместителей, раскрытых в настоящем изобретении, и относительно нетоксичной кислоты или щелочи. Если соединение по настоящему изобретению содержит относительно кислотную функциональную группу, соль присоединения щелочи можно получить путем приведения соединения в нейтральной форме в контакт с достаточным количеством щелочи в чистом растворе или подходящем инертном растворителе. Фармацевтически приемлемая соль присоединения щелочи включает соль натрия, калия, кальция, аммония, органического аммиаката или магния или т.п. Если соединение по настоящему изобретению содержит относительно щелочную функциональную группу, соль присоединения кислоты можно получить путем приведения соединения в нейтральной форме в контакт с достаточным количеством кислоты в чистом растворе или подходящем инертном растворителе. Примеры фармацевтически приемлемой соли присоединения кислоты включают соль неорганической кислоты, причем неорганическая кислота включает кислоты, такие как хлористоводородная кислота, бромистоводородная кислота, азотная кислота, угольная кислота, бикарбонат, фосфорная кислота, гидрофосфат, дигидрофосфат, серная кислота, бисульфат, йодистоводородная кислота, фосфористая кислота и т.д; и соль органической кислоты, причем органическая кислота включает кислоты, такие как уксусная кислота, пропионовая кислота, изомасляная кислота, малеиновая кислота, малоновая кислота, бензойная кислота, янтарная кислота, субериновая кислота, фумаровая кислота, молочная кислота, миндальная кислота, фталевая кислота, фенилсульфоновая кислота, п-толуолсульфоновая кислота, лимонная кислота, винная кислота, метилсульфоновая кислота и т.п; и также включают соль аминокислоты (например, аргинина и т.д.), и соли органических кислот, таких как глюкуроновая кислота и т.п. (см. Berge et al., "Pharmaceutical Salts", Journal of Pharmaceutical Science 66: 1-19 (1977)). Некоторые конкретные соединения по настоящему изобретению содержат как щелочную, так и кислотную функциональные группы и, таким образом, могут быть превращены в любую из соли присоединения щелочи или присоединения кислоты.
Предпочтительно нейтральную форму соединения восстанавливают путем приведения соли в контакт с основанием или кислотой традиционным способом, а затем отделения исходного соединения. Разница между исходной формой соединения и различными солевыми формами заключается в определенных физических свойствах, как, например, растворимости в полярном растворителе.
«Фармацевтически приемлемая соль», как используется в данном документе, относится к производным соединения по настоящему изобретению, где исходное соединение модифицировано путем образования соли с помощью кислоты или щелочи. Примеры фармацевтически приемлемой соли включают, но без ограничения, соль неорганической кислоты или органической кислоты и щелочи, такой как амин, щелочной металл, или органическую соль кислотного радикала, такого как карбоновой кислоты и т.п. Фармацевтически приемлемая соль включает традиционные нетоксичные соли или соли четвертичного аммония исходного соединения, такие как соль, образованная с помощью нетоксичной неорганической кислоты или органической кислоты. Традиционная нетоксичная соль включает, но без ограничения, те соли, полученные из неорганической кислоты и органической кислоты, причем неорганическая кислота или органическая кислота выбраны из 2-ацетоксибензойной кислоты, 2-изэтионовой кислоты, уксусной кислоты, аскорбиновой кислоты, фенилсульфоновой кислоты, бензойной кислоты, бикарбоната, угольной кислоты, лимонной кислоты, этилендиаминтетрауксусной кислоты, этандисульфоновой кислоты, этансульфоновой кислоты, фумаровой кислоты, глюкогептозы, глюконовой кислоты, глутаминовой кислоты, гликолевой кислоты, бромистоводородной кислоты, хлористоводородной кислоты, гидройодата, гидроксила, гидроксинафтойной кислоты, изэтионовой кислоты, молочной кислоты, лактозы, додекансульфоновой кислоты, малеиновой кислоты, яблочной кислоты, миндальной кислоты, метансульфоновой кислоты, азотной кислоты, щавелевой кислоты, памоевой кислоты, пантотеновой кислоты, фенилуксусной кислоты, фосфорной кислоты, полигалактуронана, пропионовой кислоты, салициловой кислоты, стеариновой кислоты, фолиновой кислоты, янтарной кислоты, аминосульфоновой кислоты, п-аминобензолсульфоновой кислоты, серной кислоты, дубильной кислоты, винной кислоты и п-толуолсульфоновой кислоты.
Фармацевтически приемлемая соль по настоящему изобретению может быть получена посредством традиционного химического способа с помощью исходного соединения, содержащего кислотную или щелочную группу. В общем, способ получения таких солей включает получение в воде или органическом растворителе или смеси обоих, приведение этих соединений, которые находятся в форме свободных кислот или щелочей, в реакцию со стехиометрическим количеством подходящих щелочей или кислот. В общем, предпочтительными являются неводные среды, такие как простой эфир, этилацетат, этанол, изопропанол или ацетонитрил и т.п.
В дополнение к солевой форме, соединение, предоставленное в настоящем изобретении, также находится в форме пролекарства. Пролекарство соединения, описанное в данном документе, легко подвергается химическим изменениям в физиологических условиях и, таким образом, превращается в соединение по настоящему изобретению. Кроме того, пролекарство можно превращать в соединение по настоящему изобретению посредством химического или биохимического способа в окружающей среде in vivo.
Определенные соединения по настоящему изобретению могут находиться в несольватной или сольватной форме, в том числе гидратной форме. В общем, сольватная форма подобна несольватной форме, обе из которых включены в объем настоящего изобретения. Некоторые соединения по настоящему изобретению могут существовать в поликристаллической или аморфной форме.
Некоторые соединения по настоящему изобретению могут содержать асимметрический атом углерода (оптический центр) или двойную связь. Все рацемические изомеры, диастереомеры, геометрические изомеры и одинарные изомеры включены в объем настоящего изобретения.
Графические представления рацемического изомера, амбискалемического и скалемического или энантиомерно чистого соединения в данном документе взяты из Maehr, J. Chem. Ed. 1985, 62: 114-120. 1985, 62: 114-120. Если не указано иное, абсолютная конфигурация стереоцентра представлена клиновидными и пунктирными линиями. Если соединение, описанное в данном документе, содержит олефиновую двойную связь или другой геометрический асимметрический центр, если не указано иное, включены E-, Z-геометрические изомеры. Подобным образом, все таутомерные формы включены в объем настоящего изобретения.
Соединение по настоящему изобретению может существовать в виде конкретного геометрического или стереоизомерного изомера. Настоящее изобретение предусматривает, что все соединения такого класса, в том числе цис- и транс-изомеры, (-)- и (+)-энантиомеры, (R)- и (S)-энантиомеры, диастереомеры, (D)-изомер, (L)-изомер, а также рацемические смеси и другие смеси, такие как энантиомерно или диастереомерно обогащенные смеси, и все такие смеси включены в объем настоящего изобретения. Другие асимметричные атомы углерода могут находиться в заместителях, таких как алкил. Все эти изомеры и их смеси включены в объем настоящего изобретения.
Оптически активные (R)- и (S)-изомеры, а также (D)- и (L)-изомеры могут быть получены посредством асимметричного синтеза, или хиральных реагентов, или других обычных методик. При необходимости, энантиомер соединения по настоящему изобретению может быть получен посредством асимметричного синтеза или путем получения производных хиральными вспомогательными веществами, в которых полученные в результате диастереомерные смеси выделяют, и вспомогательные группы расщепляют с получением чистого необходимого энантиомера. Или, если молекула содержит щелочную функциональную группу (такую как амино) или кислотную функциональную группу (такую как карбоксил), то диастереомерная соль образована с соответствующей оптически активной кислотой или щелочью, с последующим расщеплением диастереомеров посредством фракционной кристаллизации или хроматографического способа, известных в данной области, и последующего восстановления с получением чистого энантиомера. Кроме того, разделение энантиомера и диастереомера обычно осуществляют посредством хроматографии, при этом в хроматографии используют хиральную стационарную фазу, необязательно в комбинации с химическим способом получения производных (например, получение карбамата из амина).
Один или более атомов, из которых состоит соединение по настоящему изобретению, могут содержать неестественное соотношение атомных изотопов. Например, соединение может быть мечено радиоактивным изотопом, таким как тритий (3H), йод-125(125I) или C-14(14C). Все варианты в изотопной композиции соединения по настоящему изобретению, вне зависимости от радиоактивности, включены в объем настоящего изобретения.
Термин «фармацевтически приемлемый носитель» относится к любому составу или несущей среде, способным доставлять эффективное количество активного вещества по настоящему изобретению, без противодействия биологической активности активного вещества и без каких-либо токсичных побочных эффектов на хозяина или пациента, и типичная несущая среда включает в себя воду, масло, растительного происхождения и минерального происхождения, основу для крема, основу для лосьона, основу для мази и т.д. Эти основы содержат суспендирующее средство, загуститель, усилитель для проникновения через кожу и т.д. Их составы хорошо известны специалисту в области косметических или локальных лекарственных средств. В отношении других данных о носителе можно ссылаться на Remington: The Science and Practice of Pharmacy, 21st Ed., Lippincott, Williams & Wilkins (2005), содержание которого включено в данный документ посредством ссылки.
Термин «вспомогательное средство» обычно относится к носителю, разбавителю и/или среде, необходимым для получения эффективной фармацевтической композиции.
В отношении лекарственного средства или фармакологического активного средства, термин «эффективное количество» или «терапевтически эффективное количество» относится к количеству лекарственного средства или состава, достаточному для достижения необходимых эффектов без токсичности. В отношении состава по настоящему изобретению для перорального применения «эффективное количество» активного вещества в композиции относится к количеству, необходимому для достижения необходимых эффектов в комбинации с другим активным веществом в композиции. Определение эффективного количества отличается для каждого человека и зависит от возраста и общего состояния реципиента, также от конкретного активного вещества. В отдельном случае подходящее эффективное количество может быть определено специалистом в данной области техники согласно традиционным тестам.
Термин «активный ингредиент», «терапевтическое средство», «активное вещество» или «активное средство» относится к химическому структурному элементу, который может эффективно лечить нарушение, болезнь или заболевание у целевого субъекта.
Термин «замещенный» относится к любому одному или более атомам водорода на конкретном атоме, который необязательно заменен заместителем, в том числе дейтерием и вариантом водорода, при условии, что валентное состояние конкретного атома является нормальным и замещенное соединение стабильным. Если заместитель представляет собой кетогруппу (т.е. =O), это означает, что два атома водорода заменены. Замещение кетогруппы не произойдет на ариле. Термин «необязательно замещенный» означает, что он может быть замещенным или не быть замещенным, если не указано иное, тип и число заместителей могут быть произвольными при допущении химической пригодности.
Если любой параметр (например, R) встречается более одного раза в композиции или в структуре соединения, то его определение в каждом случае является независимым. Следовательно, например, если группа замещена 0-2 R, группа может быть необязательно замещенной не более чем двумя R, и R имеет независимый вариант в каждом случае. Кроме того, комбинация заместителей и/или их вариантов возможна, только если такая комбинация приведет к стабильному соединению.
Если связь заместителя может быть поперечно соединена с двумя атомами кольца, то заместитель может быть связан с любым атомом кольца. Если не указано, посредством какого атома перечисленный заместитель соединен с общей структурной формулой, включая соединение, которое конкретно не упомянуто, заместитель может быть связан посредством любого из его атомов. Комбинация заместителей и/или их вариантов возможна, только если такая комбинация приведет к стабильному соединению. Например, структурная единица 
или 
представляет, что замещение может произойти в любом положении циклогексила или циклогексадиена.
Заместитель алкильной и гетероалкильной групп, как правило, относится к «алкильному заместителю», который может быть, но без ограничения, выбран из группы, включающей -R', -OR', =O, =NR', =N-OR', -NR'R'', -SR', галоген, -SiR'R''R''', OC(O)R', -C(O)R', -CO2R', -C(=O)NR'R'', -OC(O)NR'R'', -NR''C(O)R', NR' C(O)NR''R''', -NR''C(O)2R', -NR'''''-C(NR'R''R''')=NR'''', NR'''' C(NR'R'')=NR''', -S(O)R', -S(O)2R', -S(O)2NR'R'', NR''SO2R', -CN, -NO2, -N3, -CH(Ph)2 и фтор(C1-C4)алкил, и количество заместителей составляет от 0 до (2m'+1), где m' представляет общее количество атомов углерода в группе. Каждый из R', R'', R''', R'''' и R''''' предпочтительно и независимо выбран из H, замещенного или незамещенного гетероалкила, замещенного или незамещенного арила (например, арила, замещенного 1-3 атомами галогена), замещенного или незамещенного алкила, алкокси, тиоалкокси или арилалкила. Если соединение по настоящему изобретению включает в себя, например, более одной группы R, то каждая из групп R независимо выбрана также, как каждая из групп R', R'', R''', R'''' и R''''', когда встречается более одной. Если R' и R'' присоединены к одному и тому же атому азота, они могут образовывать 5-, 6- или 7-членное кольцо вместе с атомом азота. Например, подразумевается, что -NR'R'' включает в себя, но без ограничения, 1-пирролидинил и 4-морфолинил. Согласно вышеизложенному обсуждению заместителей, специалист в данной области сможет понять, что термин «алкил» предназначен для включения группы, образованной связыванием атома углерода с неводородной группой, такой как галогеналкил (например, -CF3, -CH2CF3) и ацил (например, -C(O)CH3, -C(O)CF3, -C(O)CH2OCH3 и т. д.).
Подобно заместителю алкильной группы, заместитель арильной и гетероарильной групп, как правило, относится к «арильному заместителю», выбранному, например, из -R', -OR', -NR'R'', -SR', -галогена, -SiR'R''R''', OC(O)R', -C(O)R', -CO2R', -CONR'R'', -OC(O)NR'R'', -NR''C(O)R', NR' C(O)NR''R''', -NR''C(O)2R', -NR'''''-C(NR'R''R''')=NR'''', NR'''' C(NR'R'')=NR''', -S(O)R', -S(O)2R', -S(O)2NR'R'', NR''SO2R', -CN, -NO2, -N3, -CH(Ph)2, фтор(C1-C4)алкокси и фтор(C1-C4)алкила и т. д., и количество заместителей варьирует от 0 до общей открытой валентности ароматического кольца; где R', R'', R''', R'''' и R''''' независимо и предпочтительно выбраны из H, замещенного или незамещенного алкила, замещенного или незамещенного гетероалкила, замещенного или незамещенного арила и замещенного или незамещенного гетероарила. Если соединение по настоящему изобретению включает в себя, например, более одной группы R, то каждая из групп R независимо выбрана также, как каждая из групп R', R'', R''', R'''' и R''''', когда встречается более одной.
Два заместителя, присоединенные к соседним атомам арильного или гетероарильного кольца, могут необязательно быть замещены заместителем с общей формулой -T-C(O)-(CRR')q-U-, где T и U независимо выбраны из -NR-, -O-, CRR'- или одинарной связи, q представляет собой целое число от 0 до 3. В качестве альтернативы, два заместителя, присоединенные к смежным атомам арильного или гетероарильного кольца, могут необязательно быть замещены заместителем с общей формулой -A (CH2)r B-, где A и B независимо выбраны из -CRR'-, -O-, -NR-, -S-, -S(O)-, S(O)2-, -S(O)2NR'- или одинарной связи, r представляет собой целое число от 1 до 4. Необязательно, одинарная связь нового кольца, образованная таким образом, может быть заменена двойной связью. В качестве альтернативы, два заместителя, присоединенные к смежным атомам арильного или гетероарильного кольца, необязательно могут быть замещены заместителем с общей формулой -A (CH2)r B-, где s и d отдельно и независимо выбраны из целого числа от 0 до 3, X представляет собой -O-, -NR', -S-, -S(O)-, -S(O)2- или -S(O)2NR'-. Заместители R, R', R'' и R''' отдельно, независимо и предпочтительно выбраны из водорода и замещенного или незамещенного (C1-C6)алкила.
Если не указано иное, термин «галоген» или «галогенид» сам по себе или как часть другого заместителя относится к атому фтора, хлора, брома или йода. Кроме того, подразумевается, что термин «галогеналкил» включает моногалогеналкил и полигалогеналкил. Например, подразумевается, что термин «галоген(C1-C4)алкил» включает, но без ограничения, трифторметил, 2,2,2-трифторэтил, 4-хлорбутил и 3-бромпропил и т.д.
Примеры галогеналкила включают, но без ограничения, трифторметил, трихлорметил, пентафторэтил и пентахлорэтил. «Алкокси» представляет собой алкильную группу, как описано выше, с конкретным числом атомов углерода, которая присоединена с помощью кислородного мостика. C1-6алкокси включает C1, C2, C3, C4, C5 и C6алкокси. Примеры алкокси включают, но без ограничения, метокси, этокси, н-пропокси, изопропокси, н-бутокси, втор-бутокси, трет-бутокси, н-пентилокси и S-пентилокси. «Циклоалкил» включает в себя насыщенную циклическую группу, такую как циклопропил, циклобутил или циклопентил. 3-7 циклоалкил включает в себя C3, C4, C5, C6 и C7 циклоалкил. «Алкенил» включает в себя линейную или разветвленную углеводородную цепь, где одна или более одной двойной связи C-C присутствуют в любом стабильном положении в цепи, такую как винил и пропенил.
Термин «галоген» или «галогенид» относится к фтору, хлору, брому и йоду.
Если не указано иное, термин «гетеро» относится к гетероатому или гетероатомной группе (т.е. группе, содержащей гетероатом), в том числе атомам, отличным от атома углерода (C) и водорода (H), и группам, содержащим эти гетероатомы, например, включая кислород (O), азот (N), серу (S), кремний (Si), германий (Ge), алюминий (Al), бор (B), -O-, -S-, =O, =S, -C(=O)O-, -C(=O)-, -C(=S)-, -S(=O), -S(=O)2- и необязательно замещенные -C(=O)N(H)-, -N(H)-, -C(=NH)-, -S(=O)2 N(H)- или -S(=O) N(H)-.
Если не указано иное, «кольцо» относится к замещенному или незамещенному циклоалкилу, гетероциклоалкилу, циклоалкенилу, гетероциклоалкенилу, циклоалкинилу, гетероциклоалкинилу, арилу или гетероарилу. Так называемое кольцо включает одинарное кольцо, соединительное кольцо, спирокольцо, конденсированное кольцо или кольцо с внутренним мостиком. Число атомов в кольце обычно определено как член кольца, например «5-7-членное кольцо» представляет собой кольцо с замкнутой структурой с 5-7 атомами. Если не указано иное, кольцо необязательно содержит 1-3 гетероатома. Следовательно, «5-7-членное кольцо» включает в себя, например, фенил, пиридин и пиперидинил; с другой стороны, термин «5-7-членный гетероциклоалкил» включает пиридил и пиперидинил, но не включает фенил. Термин «кольцо» также включает кольцевую систему, содержащую по меньшей мере одно кольцо, где каждое из «колец» независимо выбрано согласно вышеуказанному определению.
Если не указано иное, термин «гетероцикл» или «гетероциклил» относится к стабильной моноциклической, бициклической или трициклической группе, содержащей гетероатом или гетероатомную группу, которые могут быть насыщенными, частично ненасыщенными или ненасыщенными (ароматическими), и содержит атомы углерода и 1, 2, 3 или 4 гетероатома в кольце, независимо выбранные из группы, включающей N, O и S, где любой из вышеуказанных гетероциклов может быть конденсирован до бензольного кольца с образованием бициклического кольца. Гетероатомы азота и серы могут быть необязательно окислены (т.е. NO и S(O)p). Атом азота может быть замещенным или не замещенным (т.е. N или NR, где R представляет собой H или другой заместитель, определенный в данном документе). Гетероцикл может быть присоединен к боковой группе любого гетероатома или атома углерода с образованием стабильной структуры. Если полученное соединение является стабильным, то гетероцикл, описанный в данном документе, может быть замещен при атоме азота или углерода. Атом азота в гетероцикле необязательно является кватернизированным. В качестве предпочтительного варианта осуществления, если общее количество атомов S и O, содержащихся в гетероцикле, превышает 1, то эти гетероатомы не являются смежными друг с другом. В качестве другого предпочтительного варианта осуществления общее количество атомов S и O в гетероцикле не превышает 1. Как используется в данном документе, термин «ароматический гетероциклил» или «гетероарил» относится к стабильному ароматическом кольцу 5-, 6-, 7-членного моноциклического или бициклического или 7-, 8-, 9- или 10-членного бициклического гетероциклила, который содержит атомы углерода и 1, 2, 3 или 4 гетероатома в кольце, независимо выбранных из группы, включающей N, O и S. Атом азота может быть замещенным или незамещенным (т.е. N или NR, где R представляет собой H или другой заместитель, определенный в данном документе). Гетероатомы азота и серы могут быть необязательно окислены (т.е. NO и S(O)p). Следует отметить, что общее количество атомов S и O в гетероароматическом кольце не превышает 1. Кольца с внутренними мостиками также включены в определение гетероцикла. Если один или более одного атома (т.е. C, O, N или S) присоединены к двум несмежным атомам углерода или атомам азота, то происходит образование кольца с внутренним мостиком. Предпочтительное кольцо с внутренним мостиком включает в себя, но без ограничения, один атом углерода, два атома углерода, один атом азота, два атома азота и одну группу углерод-азот. Следует отметить, что мостик всегда превращает моноциклическое кольцо в трициклическое кольцо. В кольце с внутренним мостиком заместитель в кольце также может находиться на мостике.
Примеры гетероциклического соединения включают, но без ограничения, акридинил, азоцинил, бензимидазолил, бензофуранил, бензомеркаптофуранил, бензомеркаптофенил, бензоксазолил, бензоксазолинил, бензотиазолил, бензотриазолил, бензотетразолил, бензоизоксазолил, бензоизотиазолил, бензоимидазолинил, карбазолил, 4aH-карбазолил, карболинил, хроманил, хромен, циннолинила декагидрохинолил, 2H,6H-1,5,2-дитиазинил, дигидрофуро[2,3-b]тетрагидрофуранил, фуранил, фуразанил, имидазолидинил, имидазолинил, имидазолил, 1H-индазолил, индоалкенил, индолинил, индолизинил, индолил, 3H-индолил, изатиногруппу, изобензофуранил, изоиндолил, изоиндолинил, изохинолил, изотиазолил, изоксазолил, метилендиоксифенил, морфолинил, нафтиридинил, октагидроизохинолил, оксадиазолил, 1,2,3-оксадиазолил, 1,2,4-оксадиазолил, 1,2,5-оксадиазолил, 1,3,4-оксадиазолил, оксазолидинил, оксазолил, гидроксилиндил, пиримидил, фенантридинил, фенантролинил, феназин, фенотиазин, бензоксантинил, феноксазинил, фталазинил, пиперазинил, пиперидил, пиперидинонил, 4-оксопиперидинил, пиперонил, птеридил, пуринил, пиранил, пиразинил, пиразолидинил, пиразолинил, пиразолил, пиридазинил, оксазолопиридин, пиридоимидазол, пиридотиазол, пиридил, пирролидинил, пирролинил, 2H-пирролил, пирролил, хиназолил, хинолил, 4H-хинолизинил, хиноксалинил, хинуклидинил, тетрагидрофурил, тетрагидроизохинолил, тетрагидрохинолил, тетразолил, 6H-1,2,5-тиадиазинил, 1,2,3-тиадиазолил, 1,2,4-тиадиазолил, 1,2,5-тиадиазолил, 1,3,4-тиадиазолил, тиантренил, тиазил, изотиазолилтиенил, тиенил, тиофеноксазолил, тиофенотиазолил, тиофеноимидазолил, триазинил, 1,2,3-триазолил, 1,2,4-триазолил, 1,2,5-триазолил, 1,3,4-триазолил и ксантенил. Конденсированные и спироциклические соединения также включены.
Если не указано иное, термин «углеводородная группа» или его конкретное представление (такое как алкил, алкенил, алкинил, фенил и т.д.) само по себе или как часть другого заместителя представляет собой линейную, разветвленную или циклическую углеводородную группы или их комбинацию, которые могут быть полностью насыщенными, моно- или полиненасыщенными, могут быть монозамещенными, дизамещенными или полизамещенными, могут быть одновалентными (как, например, метил), бивалентными (как, например, метилен) или многовалентными (как, например, метенил), могут включать в себя бивалентные или многовалентные атомные группы с конкретным числом атомов углерода (как, например, C1-C10 относится к группе, имеющей 1-10 атомов углерода). «Углеводородная группа» включает в себя, но без ограничения, алифатическую углеводородную группу и ароматическую углеводородную группу, причем алифатическая углеводородная группа включает линейные и циклические структуры, конкретно в том числе, но без ограничения, алкил, алкенил, алкинил, и ароматическая углеводородная группа включает в себя, но без ограничения, 6-12-членную ароматическую углеводородную группу, такую как бензол, нафталин и т.п. В некоторых вариантах осуществления термин «алкил» относится к линейной или разветвленной группам или их комбинации, которые могут быть полностью насыщенными, моно- или полиненасыщенными, могут включать в себя дивалентные и поливалентные группы. Примеры насыщенной углеводородной группы включают в себя, но без ограничения, гомолог или изомер группы, такой как метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил, изобутил, втор-бутил, изобутил, циклогексил, (циклогексил)метил, циклопропилметил и н-пентил, н-гексил, н-гептил, н-октил и т.п. Ненасыщенный алкил имеет одну или более одной двойной или тройной связи, примеры которого включают в себя, но без ограничения, винил, 2-пропенил, бутенил, кротил, 2-изопентенил, 2-бутадиенил, 2,4-(пентадиенил), 3-(1,4-пентадиенил), ацетенил, 1- и 3-пропинил, 3-бутинил, и гомологи, и изомеры более высокого уровня.
Если не указано иное, термин «гетероуглеводородная группа» или его конкретные представления (такие как гетероалкил, гетероалкенил, гетероалкинил, гетероарил и т.д.) сам по себе или в комбинации с другим термином относится к стабильной линейной, разветвленной или циклической углеводородной группам или их комбинациям, которые образованы конкретным числом атомов углерода и по меньшей мере одного гетероатома. В некоторых вариантах осуществления термин «гетероалкил» сам по себе или в комбинации с другим термином относится к стабильной линейной, разветвленной углеводородной группам или их комбинациям, которые образованы конкретным числом атомов углерода и по меньшей мере одного гетероатома. В типичном варианте осуществления гетероатом выбран из группы, включающей B, O, N и S, в которой атомы азота и серы необязательно окислены, и атом азота необязательно кватернизован. Гетероатом или гетероатомная группа могут быть размещены в любом внутреннем положении углеводородной группы (включая положение, в котором углеводородная группа присоединена к остальной части молекулы). Примеры включают, но без ограничения, -CH2-CH2-O-CH3, -CH2-CH2-NH-CH3, -CH2-CH2-N(CH3)-CH3, -CH2-S-CH2-CH3, -CH2-CH2, -S(O)-CH3, -CH2-CH2-S(O)2-CH3, -CH=CH-O-CH3, -CH2-CH=N-OCH3 и -CH=CH-N(CH3)-CH3. Не более чем два гетероатома могут быть последовательными, как, например, -CH2-NH-OCH3.
Термины «алкокси», «алкиламино» и «алкилтио» (или тиоалкокси) принадлежат к обычным выражениям и относятся к тем алкильным группам, которые присоединены к остальной части молекулы через атом кислорода, аминогруппу или атом серы соответственно.
Если не указано иное, термин «циклоуглеводородная группа», «гетероциклоуглеводородная группа» или их конкретные понимания (такие как арил, гетероарил, циклоалкил, гетероциклоалкил, циклоалкенил, гетероциклоалкенил, циклоалкинил, гетероциклоалкинил и т.д.) сам по себе или в комбинации с другими терминами, соответственно, относится к циклической «углеводородной группе», «гетероуглеводородной группе». Кроме того, в отношении гетероуглеводородной группы или гетероциклоуглеводородной группы (такой как гетероалкил, гетероциклоалкил), гетероатомы могут занимать положение, в котором гетероциклическое кольцо присоединено к остальной части молекулы. Примеры циклоалкила включают, но без ограничения, циклопентил, циклогексил, 1-циклогексенил, 3-циклогексенил, циклогептил и т.д. Неограниченные примеры гетероцикла включают 1-(1,2,5,6-тетрагидропиридинил), 1-пиперидил, 2-пиперидил, 3-пиперидил, 4-морфолинил, 3-морфолинил, тетрагидрофуран-2-ил, тетрагидрофуранилиндол-3-ил, тетрагидротиофен-2-ил, тетрагидротиофен-3-ил, 1-пиперазинил и 2-пиперазинил.
Если не указано иное, термин «арил» относится к полиненасыщенному ароматическому углеводородному заместителю, который может быть монозамещенным, дизамещенным или многозамещенным, может быть одновалентным, бивалентным или многовалентным и может быть моноциклическим или полициклическим (например, 1-3 кольца, где по меньшей мере одно кольцо является ароматическим). Они конденсированы вместе или соединены посредством ковалентной связи. Термин «гетероарил» относится к арилу (или кольцу), содержащему 1-4 гетероатома. В типичном варианте осуществления гетероатом выбран из группы, включающей B, N, O и S, в которой атомы азота и серы необязательно окислены, и атом азота необязательно кватернизован. Гетероарильная группа может быть присоединена к остальной части молекулы посредством гетероатома. Неограниченные примеры арила или гетероарила включают фенил, 1-нафтил, 2-нафтил, 4-бифенил, 1-пирролил, 2-пирролил, 3-пирролил, 3-пиразолил, 2-имидазолил, 4-имидазолил, пиразинил, 2-оксазолил, 4-оксазолил, 2-фенил-4-оксазолил, 5-оксазолил, 3-изоксазолил, 4-изоксазолил, 5-изоксазолил, 2-тиазолил, 4-тиазолил, 5-тиазолил, 2-фурил, 3-фурил, 2-тиенил, 3-тиенил, 2-пиридил, 3-пиридил, 4-пиридил, 2-пиримидинил, 4-пиримидинил, 5-бензотиазолил, пуринил, 2-бензоимидазолил, 5-индолил, 1-изохинолил, 5-изохинолил, 2-хиноксалил, 5-хиноксалил, 3-хинолил и 6-хинолил. Заместитель любой описанной выше арильной и гетероарильной кольцевой системы выбран из приемлемых заместителей, описанных ниже.
В целях краткости при использовании в комбинации с другими терминами (например, арилокси, арилтио, аралкил) арил включает определение арильного и гетероарильного кольца, как определено выше. Следовательно, подразумевается, что термин «арилалкил» включает в себя те группы, в которых арил присоединен к алкилу (например, бензил, фенилэтил, пиридилметил), в том числе те алкилы, где атом углерода (такой как метилен) заменен, например, атомом кислорода, таким как феноксиметил, 2-пиридилоксиметил-3-(1-нафтокси)пропил и т.д.
Термин «уходящая группа» относится к функциональной группе или атому, которые могут быть заменены с помощью другой функциональной группы или атома посредством реакции замещения (например, реакции нуклеофильного замещения). Например, иллюстративные уходящие группы включают в себя трифлат; хлор, бром, йод; сульфонат, как, например, мезилат, тозилат, п-бромбензолсульфонат, п-тозилат и т.д.; ацилокси, как, например, ацетокси, трифторацетокси и т.п.
Термин «защитная группа» включает в себя, но без ограничения, «амино-защитную группу», «гидрокси-защитную группу» или «меркапто-защитную группу». Термин «амино-защитная группа» относится к защитной группе, подходящей для предупреждения побочных реакций, происходящих в положении атома азота аминогруппы. Иллюстративная амино-защитная группа включает в себя, но без ограничения, формил; ацил, такой как алканоил (такой как ацетил, трихлорацетил или трифторацетил); алкоксикарбонил, такой как трет-бутоксикарбонил (Boc); арилметоксикарбонил, такой как бензоксикарбонил (Cbz) и 9-фторенилметоксикарбонил (Fmoc); арилметил, такой как бензил (Bn), трифенилметил (Tr), 1,1-бис-(4'-метоксифенил)метил; силил, такой как триметилсилил (TMS) и трет-бутилдиметилсилил (TBS) и т.д. Термин «гидрокси-защитная группа» относится к защитной группе, подходящей для предупреждения побочных реакций гидроксигруппы. Иллюстративная гидрокси-защитная группа включает в себя, но без ограничения, алкил, такой как метил, этил и трет-бутил; ацил, такой как алканоил (такой как ацетил); арилметил, такой как бензил (Bn), п-метоксибензил (PMB), 9-флуоренилметил (Fm) и дифенилметил (дифенилметил, DPM); силил, такой как триметилсилил (TMS) и трет-бутилдиметилсилил (TBS) и т.д.
Соединение по настоящему изобретению можно получить посредством многих способов синтеза, хорошо известных специалисту в данной области техники, включая конкретные варианты осуществления, перечисленные далее, и их комбинацию с другими химическими способами синтеза и эквивалентными альтернативными способами, известными специалисту в данной области техники, и предпочтительные варианты осуществления включают в себя, но без ограничения, примеры по настоящему изобретению.
Растворители, используемые в настоящем изобретении, могут быть получены коммерческим путем.
В данном документе используются следующие сокращения: водн. означает воду; HATU означает O-7-азабензотриазол-1-ил)-N,N,N',N'-тетраметилурония гексафторфосфат; EDC означает N-(3-диметиламинопропил)-N'-этилкарбодиимида гидрохлорид; m-CPBA означает 3-хлорпербензойную кислоту; экв. означает эквивалент, равноколичественный; CDI означает карбонилдиимидазол; DCM означает дихлорметан; PE означает петролейный эфир; DIAD означает диизопропилазодикарбоксилат; DMF означает N,N-диметилформамид; DMSO означает диметилсульфоксид; EtOAc означает этилацетат; EtOH представляет собой этанол; MeOH представляет собой метанол; CBz представляет собой бензоксикарбонил, амино-защитную группу; BOC представляет собой трет-бутоксикарбонил, амино-защитную группу; HOAc означает уксусную кислоту; NaCNBH3 означает натрия цианоборогидрид; к.т. означает комнатную температуру; O/N означает в течение ночи; THF означает тетрагидрофуран; Boc2O означает ди-трет-бутилдикарбонат; TFA означает трифторуксусную кислоту; DIPEA означает диизопропилэтиламин; SOCl2 означает тионилхлорид; CS2 означает сероуглерод; TsOH означает п-толуолсульфоновую кислоту; NFSI означает N-фторбензолсульфонимид; NCS означает N-хлорсукцинимид; n-Bu4NF означает тетрабутиламмония фторид; iPrOH означает 2-пропанол; NBS означает N-бромсукцинимид; AIBN означает 2,2'-азобисизобутиронитрил; BTC означает трифосген; т.пл. означает температуру плавления.
Соединения называют вручную или с помощью программного обеспечения ChemDraw®, и коммерчески доступные соединения называют в соответствии с каталогами поставщиков.
Целевые соединения конкретных примеров и заключения об их ингибирующем действии по отношению к ДНК HBV.
Определение биоактивности: A: EC50 ≤100 нМ; B: 100 нМ＜EC50 ≤500 нМ; C: 500 нМ＜EC50 ≤1000 нМ; D: 1000 нМ＜ EC50 ≤5000 нМ.
Заключение: соединение по настоящему изобретению демонстрирует значительное ингибирующее действие по отношению к ДНК HBV.
Перечень целевых соединений примеров и их ингибирующее действие по отношению к ДНК HBV (биоактивность такая же, как в таблице 2)
| ПРИМЕР | СТРУКТУРНАЯ ФОРМУЛА | СТЕРЕОХИМИЯ | БИОАКТИВНОСТЬ |
| 1 |
|
рацемическое | B |
| 2 |
|
рацемическое | D |
| 3 |
|
цис-рацемическое | B |
| 4 |
|
рацемическое | B |
| 5 |
|
оптически чистое | B |
| 6 |
|
оптически чистое | A |
| 7 |
|
оптически чистое | B |
| 8 |
|
цис-рацемическое | B |
| 9 |
|
транс-рацемическое | B |
| 10 |
|
рацемическое | D |
| 11 |
|
транс-рацемическое | D |
| 12 |
|
цис-рацемическое | B |
| 13 |
|
оптически чистое | B |
| 14 |
|
оптически чистое | C |
| 15 |
|
оптически чистое | B |
| 16 |
|
оптически чистое | D |
| 17 |
|
транс-рацемическое | D |
| 18 |
|
цис-рацемическое | D |
| 19 |
|
оптически чистое | D |
| 20 |
|
оптически чистое | D |
| 21 |
|
оптически чистое | D |
| 22 |
|
оптически чистое | D |
| 23 |
|
рацемическое | D |
| 24 |
|
оптически чистое | C |
| 25 |
|
оптически чистое | D |
| 26 |
|
транс-рацемическое | C |
| 27 |
|
цис-рацемическое | B |
| 28 |
|
транс-рацемическое | B |
| 29 |
|
цис-рацемическое | B |
| 30 |
|
оптически чистое | B |
| 31 |
|
оптически чистое | B |
| 32 |
|
оптически чистое | D |
| 33 |
|
оптически чистое | D |
| 34 |
|
оптически чистое | B |
| 35 |
|
оптически чистое | D |
| 36 |
|
оптически чистое | C |
| 37 |
|
оптически чистое | D |
| 38 |
|
оптически чистое | A |
| 39 |
|
оптически чистое | A |
| 40 |
|
оптически чистое | D |
| 41 |
|
оптически чистое | D |
| 42 |
|
рацемическое | A |
| 43 |
|
оптически чистое | B |
| 44 |
|
оптически чистое | A |
| 45 |
|
рацемическое | A |
| 46 |
|
оптически чистое | B |
| 47 |
|
оптически чистое | A |
| 48 |
|
рацемическое | B |
| 49 |
|
оптически чистое | B |
| 50 |
|
оптически чистое | D |
| 51 |
|
рацемическое | B |
| 52 |
|
оптически чистое | C |
| 53 |
|
оптически чистое | A |
| 54 |
|
рацемическое | A |
| 55 |
|
оптически чистое | A |
| 56 |
|
оптически чистое | A |
| 57 |
|
рацемическое | A |
| 58 |
|
оптически чистое | A |
| 59 |
|
оптически чистое | A |
| 60 |
|
рацемическое | A |
| 61 |
|
оптически чистое | A |
| 62 |
|
оптически чистое | A |
| 63 |
|
оптически чистое | B |
| 64 |
|
оптически чистое | B |
| 65 |
|
оптически чистое | B |
| 66 |
|
оптически чистое | B |
| 67 |
|
рацемическое | B |
| 68 |
|
рацемическое | D |
| 69 |
|
рацемическое | B |
| 70 |
|
рацемическое | B |
| 71 |
|
рацемическое | B |
| 72 |
|
рацемическое | C |
| 73 |
|
рацемическое | D |
| 74 |
|
рацемическое | D |
| 75 |
|
рацемическое | D |
| 76 |
|
рацемическое | D |
| 77 |
|
рацемическое | D |
| 78 |
|
рацемическое | D |
| 79 |
|
рацемическое | D |
| 80 |
|
рацемическое | D |
| 81 |
|
рацемическое | D |
| 82 |
|
оптически чистое | B |
| 83 |
|
рацемическое | D |
| 84 |
|
оптически чистое | B |
| 85 |
|
оптически чистое | B |
| 86 |
|
рацемическое | C |
| 87 |
|
рацемическое | C |
| 88 |
|
оптически чистое | C |
| 89 |
|
оптически чистое | D |
| 90 |
|
оптически чистое | B |
| 91 |
|
оптически чистое | B |
| 92 |
|
оптически чистое | A |
| 93 |
|
оптически чистое | B |
| 94 |
|
оптически чистое | D |
| 95 |
|
рацемическое | B |
| 96 |
|
рацемическое | D |
| 97 |
|
рацемическое | D |
| 98 |
|
оптически чистое | D |
| 99 |
|
оптически чистое | D |
| 100 |
|
оптически чистое | D |
| 101 |
|
оптически чистое | C |
| 102 |
|
оптически чистое | C |
| 103 |
|
оптически чистое | B |
| 104 |
|
рацемическое | D |
| 105 |
|
рацемическое | C |
| 106 |
|
оптически чистое | D |
| 107 |
|
рацемическое | B |
| 108 |
|
рацемическое | D |
| 109 |
|
рацемическое | D |
| 110 |
|
рацемическое | D |
| 111 |
|
рацемическое | D |
| 112 |
|
рацемическое | D |
| 113 |
|
оптически чистое | B |
| 114 |
|
оптически чистое | B |
| 115 |
|
оптически чистое | B |
| 116 |
|
оптически чистое | A |
| 117 |
|
оптически чистое | A |
| 118 |
|
оптически чистое | B |
| 119 |
|
оптически чистое | A |
| 120 |
|
оптически чистое | A |
| 121 |
|
оптически чистое | A |
| 122 |
|
оптически чистое | D |
| 123 |
|
оптически чистое | A |
| 124 |
|
оптически чистое | A |
| 125 |
|
оптически чистое | A |
| 126 |
|
оптически чистое | A |
| 127 |
|
оптически чистое | A |
| 128 |
|
оптически чистое | A |
| 129 |
|
оптически чистое | A |
| 130 |
|
оптически чистое | A |
| 131 |
|
оптически чистое | D |
| 132 |
|
оптически чистое | A |
| 133 |
|
оптически чистое | B |
| 134 |
|
оптически чистое | D |
| 135 |
|
оптически чистое | C |
| 136 |
|
оптически чистое | C |
| 137 |
|
оптически чистое | D |
| 138 |
|
оптически чистое | A |
| 139 |
|
оптически чистое | D |
| 140 |
|
оптически чистое | C |
| 141 |
|
оптически чистое | C |
| 142 |
|
оптически чистое | B |
| 143 |
|
оптически чистое | B |
| 144 |
|
оптически чистое | A |
| 145 |
|
оптически чистое | C |
| 146 |
|
оптически чистое | D |
| 147 |
|
оптически чистое | D |
| 148 |
|
оптически чистое | B |
| 149 |
|
оптически чистое | A |
| 150 |
|
оптически чистое | B |
| 151 |
|
оптически чистое | A |
| 152 |
|
оптически чистое | B |
| 153 |
|
оптически чистое | A |
| 154 |
|
оптически чистое | B |
| 155 |
|
оптически чистое | A |
| 156 |
|
оптически чистое | A |
| 157 |
|
оптически чистое | A |
| 158 |
|
оптически чистое | A |
| 159 |
|
оптически чистое | A |
| 160 |
|
оптически чистое | A |
| 161 |
|
оптически чистое | A |
| 162 |
|
оптически чистое | B |
| 163 |
|
оптически чистое | A |
| 164 |
|
оптически чистое | D |
| 165 |
|
оптически чистое | A |
| 166 |
|
оптически чистое | A |
| 167 |
|
оптически чистое | A |
| 168 |
|
оптически чистое | B |
| 169 |
|
оптически чистое | A |
| 170 |
|
оптически чистое | A |
| 171 |
|
оптически чистое | A |
| 172 |
|
оптически чистое | A |
| 173 |
|
оптически чистое | A |
| 174 |
|
оптически чистое | B |
| 175 |
|
оптически чистое | D |
| 176 |
|
оптически чистое | D |
| 177 |
|
оптически чистое | A |
| 178 |
|
оптически чистое | B |
| 179 |
|
оптически чистое | B |
| 180 |
|
оптически чистое | A |
| 181 |
|
оптически чистое | A |
| 182 |
|
оптически чистое | A |
| 183 |
|
оптически чистое | A |
| 184 |
|
оптически чистое | B |
| 185 |
|
оптически чистое | A |
| 186 |
|
оптически чистое | D |
| 187 |
|
оптически чистое | A |
| 188 |
|
оптически чистое | A |
| 189 |
|
оптически чистое | A |
| 190 |
|
оптически чистое | B |
| 191 |
|
оптически чистое | A |
| 192 |
|
оптически чистое | A |
| 193 |
|
оптически чистое | A |
| 194 |
|
оптически чистое | D |
| 195 |
|
оптически чистое | D |
| 196 |
|
оптически чистое | D |
| 197 |
|
оптически чистое | D |
| 198 |
|
оптически чистое | A |
| 199 |
|
оптически чистое | A |
| 200 |
|
оптически чистое | A |
| 201 |
|
оптически чистое | A |
| 202 |
|
оптически чистое | B |
| 203 |
|
оптически чистое | B |
| 204 |
|
оптически чистое | A |
| 205 |
|
оптически чистое | A |
| 206 |
|
оптически чистое | A |
| 207 |
|
оптически чистое | A |
| 208 |
|
оптически чистое | A |
| 209 |
|
оптически чистое | A |
| 210 |
|
оптически чистое | A |
| 211 |
|
оптически чистое | A |
| 212 |
|
оптически чистое | B |
| 213 |
|
оптически чистое | A |
| 214 |
|
оптически чистое | A |
| 215 |
|
оптически чистое | A |
| 216 |
|
оптически чистое | A |
| 217 |
|
оптически чистое | D |
| 218 |
|
оптически чистое | A |
| 219 |
|
оптически чистое | B |
| 220 |
|
оптически чистое | A |
Варианты осуществления
Следующие примеры были предоставлены для описания изобретения более подробно, но объем изобретения не был ними ограничен.
Примеры 1, 2
Стадия 1 (синтез соединения 1-2)
Соединение 1-1 (12,5 г, 100 ммоль) растворяли в метаноле (30 мл) и THP (12,6 г, 150 ммоль), p-TsOH (250 мг, 1,3 ммоль) добавляли при комнатной температуре, перемешивая при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и затем очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (PE:EtOAc = 30:1) с получением продукта 1-2, выход: 80%.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 4,68 (t, J=3,6 Гц, 1Н), 4,03 (td, J=6,4, 11,2 Гц, 1Н), 3,90 (ddd, J=3,0, 8,4, 11,2 Гц, 1Н), 3,73-3,82 (m, 1Н), 3,45-3, 58 (m, 3Н), 1,80-1,91 (m, 1Н), 1,70-1,79 (m, 1Н), 1,51-1,63 (m, 4Н).
Стадия 2 (синтез соединения 1-4)
Гидрид натрия (4,0 г, 100 ммоль) растворяли в безводном тетрагидрофуране (30 мл) и 1-3 (9,4 г, 72 ммоль) добавляли при -40°С, перемешивая при -20°С в течение 30 минут. При поддержании постоянной температуры по каплям медленно добавляли раствор н-бутиллития (40 мл, 2,5 н.), после добавления, по каплям перемешивая при 0°С в течение 30 минут. Соединение 1-2 (10 г, 48 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (100 мл) и раствор медленно по каплям добавляли к реакционной смеси. Реакционную смесь перемешивали при 0°С в течение 2 часов и повышали температуру до комнатной температуры, перемешивая в течение ночи. Реакционную смесь гасили с помощью насыщенного водного раствора хлорида аммония (1000 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (1000 мл × 3). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (1000 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 20:1) с получением 7,0 г продукта 1-4, выход: 56%.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 4,50-4,61 (m, 1Н), 4,20 (q, J=7,2 Гц, 2Н), 3,69-3,89 (m, 2Н), 3,32-3,57 (m, 4Н), 2,58-2,75 (m, 2Н), 1,91 (q, J=6,4 Гц, 2Н), 1,75-1,84 (m, 1Н), 1,63-1,75 (m, 2Н), 1,51-1,57 (m, 3Н), 1,23-1,33 (m, 3Н).
Стадия 3 (синтез соединения 1-7)
Соединение 1-4 (4,3 г, 27 ммоль) растворяли в этаноле (20 мл) и добавляли соединение 1-5 (7,0 г, 27 ммоль), соединение 1-6 (8,8 г, 54 ммоль), ацетат натрия (6,6 г, 81 ммоль). Температуру реакционной смеси медленно повышали до температуры возврата флегмы и реакционную смесь перемешивали с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и затем экстрагировали при помощи EtOAc (500 мл × 3). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (1000 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 5,0 г продукта 1-7 (желтое твердое вещество), выход: 61%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 508,0 [М+Н+].
Стадия 4 (синтез соединения 1-8)
Соединение 1-7 (5,0 г, 10 ммоль) растворяли в этаноле (250 мл) и p-TsOH (5,5 г, 30 ммоль) добавляли при комнатной температуре, перемешивая при комнатной температуре в течение 30 мин. Реакционную смесь нейтрализовали насыщенным водным раствором бикарбоната натрия (200 мл), экстрагировали при помощи EtOAc (500 мл × 3). Органическую фазу промывали водой (300 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 5,5 г неочищенного соединения 1-8, выход: 85%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 423,9 [М+Н+].
Стадия 5 (синтез примера 1)
Соединение 1-8 (5,5 г, 13 ммоль) растворяли в безводном DCM (5 мл) и добавляли триэтиламин (6,5 г, 65 ммоль), метансульфонилхлорид (7,4 г, 39 ммоль) при 0°С. После добавления температуру смеси повышали до комнатной температуры и перемешивали в течение 3 часов. Реакционную смесь выливали в 300 мл воды и экстрагировали при помощи DCM (500 мл × 3). Органические фазы объединяли, промывали последовательно водой (50 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (100 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:l) с получением 2,0 г примера 1, выход: 47%.
Данные ЯМР примера 1: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,81 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,37 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,28-7,32 (m, 1H), 7,12 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,92 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,19 (s, 1H), 4, 20-4,45 (m, 2H), 4,01-4,11 (m, 2H), 3,40 (ddd, J=3,6, 8,4, 18,0 Гц, 1H), 3,06 (td, J=9,2, 18,0 Гц, 1H), 1,93-2,29 (m, 2H), 1,14 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 405,9 [M+H+].
Стадия 6 (синтез соединения 2-1)
Соединение 1 (800 мг, 1,96 ммоль) растворяли в тетрахлорметане (20 мл) и при комнатной температуре добавляли NBS (528 мг, 3,0 ммоль) и AIBN (3,2 мг, 0,02 ммоль). После добавления смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь концентрировали под давлением и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 400 мг продукта 2-1, выход: 42%.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,77-7,88 (m, 1Н), 7,34-7,48 (m, 2Н), 7,08-7,18 (m, 1Н), 6,87-7,00 (m, 1Н), 6,17-6,25 (m, 1Н), 6,00-6,08 (m, 1Н), 4,99-5,12 (m, 1Н), 4,19-4,32 (m, 1Н), 4,02-4,17 (m, 2Н), 2,37-2,47 (m, 2Н), 1,08-1,18 (m, 3Н).
Стадия 7 (синтез примера 2)
Соединение 2-1 (150 мг, 0,3 ммоль) растворяли в этаноле (5 мл) и при комнатной температуре добавляли соединение 2-2 (69 мг, 0,9 ммоль), карбонат калия (123 мг, 0,9 ммоль). После добавления температуру смеси повышали до 60°С и перемешивали в течение 3 часов. Реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и экстрагировали при помощи DCM (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (50 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (100 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 47 мг примера 2, выход: 33%.
Данные ЯМР примера 2: 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 7,81 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,38 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,26-7,31 (m, 1H), 7,13 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,93 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,29 (s, 1H), 4,92 (br. s., 1H), 4,38 (d, J=9,2 Гц, 2H), 4,04 (q, J=7,2 Гц, 2H), 3,54-3,79 (m, 2H), 3,28-3,35 (m, 1H), 2,52-2,58 (m, 2H), 2,74 (br. s., 1H), 2,31 (s., 3H), 2,01 (s, 1H), 1,02-1,12 (m, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 479,0 [M+H+].
Пример 3
Стадия 1 (синтез соединения 3-1)
Соединение 2-1 (150 мг, 0,31 ммоль) растворяли в N,N-диметилформамиде (3 мл) и добавляли NaCN (54 мг, 2,2 ммоль), перемешивая при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь экстрагировали с помощью EtOAc (10 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (10 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (10 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 50 мг соединения 3-1, выход: 37%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 430,9 [М+Н+].
Стадия 2 (синтез примера 3)
Соединение 3-1 (50 мг, 0,11 ммоль) растворяли в безводном этаноле (0,8 мл) и добавляли DMSO (0,2 мл), раствор NaOH (0,1 мл, 5 н.), оксидол (0,1 мл), перемешивая при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и затем экстрагировали при помощи DCM (30 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (20 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (20 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 10 мг примера 3, выход: 19%.
Данные ЯМР примера 3: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,83 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,45 (br. s., 1H), 7,38 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,30 (d, J=6,4 Гц, 1H), 7,16 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,95 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,21 (s, 1H), 5,34 (br. s., 1H), 4,61 (d, J=7,6 Гц, 1H), 4,51-4,59 (m, 1H), 4,34-4,44 (m, 1H), 4,00-4,17 (m, 2H), 2,72 (dd, J=6,0, 12,4 Гц, 1H), 2,09-2,23 (m, 1H), 1,12 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 449,1 [M+H+].
Пример 4
Пример 4 получали согласно способу, который описан в примере 1.
Данные ЯМР примера 4: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,79 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,35 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,30 (dd, J=2,8, 8,4 Гц, 1H), 7,26 (d, J=6, 4 Гц, 1H), 6,95 (dt, J=2,8, 8,4 Гц, 1H), 6,15 (s, 1H), 4,19-4,43 (m, 2H), 3,97-4,10 (m, 2H), 3,40 (ddd, J=3,6, 8,4, 18,0 Гц, 1H), 3,06 (td, J=9,2, 18,0 Гц, 1H), 1,97-2,21 (m, 2H), 1,13 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 449,9 [M+H+].
Пример 5
Пример 5 готовили согласно способу, который описан в примере 1, и получали путем разделения посредством препаративной SFC.
Данные ЯМР примера 5: 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 7,79 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,35 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,30 (dd, J=2,8, 8,4 Гц, 1H), 7,26 (d, J=6, 0 Гц, 1H), 6,95 (dt, J=2,8, 8,4 Гц, 1H), 6,15 (s, 1H), 4,19-4,43 (m, 2H), 3,97-4,10 (m, 2H), 3,40 (ddd, J=3,6, 8,4, 18,0 Гц, 1H), 3,06 (td, J=9,2, 18,4 Гц, 1H), 1,97-2,21 (m, 2H), 1,13 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 449,9 [M+H+].
Примеры 6, 7
Стадия 1 (синтез соединения 1-6)
Соединение 6-1 (6,0 г, 54,5 ммоль) растворяли в метаноле (20 мл), и при комнатной температуре порциями добавляли метоксид натрия (2,9 г, 54,5 ммоль), перемешивая при комнатной температуре в течение 3 часов. К реакционной смеси порциями добавляли хлорид аммония (11,7 г, 218 ммоль). После добавления температуру медленно повышали до температуры возврата флегмы и реакционную смесь перемешивали с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали при пониженном давлении с получением продукта 1-6 в виде белого твердого вещества, продукт непосредственно использовали на следующей стадии реакции без очищения, выход: 80%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 128,2 [М+Н+].
Стадия 2 (синтез соединения 6-4)
Соединение 1-6 (2,0 г, 12,2 ммоль) растворяли в этаноле (50 мл), и добавляли соединение 6-2 (0,98 мл, 9,8 ммоль), соединение 6-3 (2,0 г, 9,8 ммоль), ацетат натрия (1,0 г, 12,2 ммоль). Температуру реакционной смеси медленно повышали до температуры возврата флегмы, перемешивая с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и затем добавляли EtOAc (100 мл). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (100 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) и разделяли посредством SFC с получением соединения 6-4 в виде желтого твердого вещества, выход: 40%.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 9,88 (s, 1Н), 7,95 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,86 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,53 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,34 (dd, J=6,4, 8,8 Гц, 1H), 7,22 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 5,95 (s, 1H), 3,92 (q, J=7,2 Гц, 2H), 2,45 (s, 3H), 1,06-0,97 (m, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 425, 8 [M+H+].
Стадия 3 (синтез соединения 6-5)
Соединение 6-4 (2,08 г, 4,9 ммоль) растворяли в тетрахлорметане (30 мл) и добавляли NBS (920 мг, 5,2 ммоль) и AIBN (81 мг, 0,49 ммоль) при комнатной температуре. После добавления температуру смеси повышали до 50°С и перемешивали до завершения реакции 6-4. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали под давлением и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением продукта 6-5 в виде желтого твердого вещества, выход: 64%.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,83 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,52 (d, J=3,2 Гц, 2Н), 7,39 (dd, J=6,0, 8,4 Гц, 1Н), 7,31 (dd, J=2,4, 8,0 Гц, 1Н), 7,01 (dt, J=2,4, 8,0 Гц, 1Н), 6,06 (d, J=2,4 Гц, 1Н), 4,92 (d, J=8,4 Гц, 1Н), 4,58 (d, J=8,4 Гц, 1H), 4,10 (q, J=7,2 Гц, 2H), 1,14 (t, J=7,2 Гц, 3H).
Стадия 4 (синтез соединения 6-7)
Соединение 6-6 (1,27 г, 7,94 ммоль) растворяли в безводном N',N-диметилформамиде (100 мл) и порциями добавляли гидрид натрия (238 мг, 5.96 ммоль) при комнатной температуре, перемешивая при комнатной температуре в течение 15 минут. Добавляли соединение 6-5 (2,00 г, 3.97 ммоль) и перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь гасили с помощью насыщенного водного раствора хлорида аммония (50 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (100 мл × 3). Органическую фазу промывали водой (50 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 1,76 г соединения 6-7, выход: 76%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 583, 7 [М+Н+].
Стадия 5 (синтез соединения 6-8)
Соединение 6-7 (1,76 г, 3,02 ммоль) растворяли в безводном тетрагидрофуране (50 мл) и медленно добавляли борогидрид натрия (571 мг, 15,1 ммоль) при 0°С. После добавления температуру повышали до 60°С и на реакционную смесь воздействовали 60°С в течение 18 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и экстрагировали с помощью DCM (100 мл × 3). Органическую фазу промывали водой (60 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (DCM:метанол = 20:1) с получением продукта в виде 780 мг соединения 6-8, выход: 39%.
LC/MS (ESI) масса/заряд: 521,7 [M+Na+].
Стадия 6 (синтез соединения 6-9)
Соединение 6-8 (780 мг, 1,57 ммоль) растворяли в безводном DCM (40 мл) и при 0°С добавляли триэтиламин (318 мг, 3,14 ммоль), метансульфонилхлорид (270 мг, 2,36 ммоль). Температуру сохраняли прежней, смесь перемешивали в течение 2 часов, а затем температуру повышали до комнатной температуры, перемешивали в течение 6 часов. Реакционную смесь выливали в воду (30 мл) и экстрагировали при помощи DCM (30 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (10 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (10 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением продукта в виде 34 0 мг соединения 6-9, выход: 39%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 481,8 [М+Н+].
Стадия 7 (синтез соединений 6, 7)
Соединение 6-9 (340 мг) разделяли посредством препаративной SFC с получением хирально чистых 47 мг примера 6, 34 мг примера 7.
Данные ЯМР примера 6: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,81 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,38 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,32 (dd, J=2,8, 8,4 Гц, 1H), 7,29 (s, 1H), 6.96 (dt, J=2,8, 8,4 Гц, 1H), 6,16 (s, 1H), 4,45 (dd, J=7,2, 11,6 Гц, 1H), 4,31 (dd, J=3,2, 11,6 Гц, 1H), 4,01-4,11 (m, 2H), 3,73-3,80 (m, 1H), 3,64-3,72 (m, 1H), 3,23-3,29 (m, 2H), 2,68 (d, J=3,2 Гц, 1H), 1,67 (t, J=5,2 Гц, 1H), 1,15 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 481,8 [M+H+].
Данные ЯМР примера 7: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,81 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,38 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,33 (dd, J=2,8, 8,4 Гц, 1H), 7,25 (s, 1H), 6.97 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,16 (s, 1H), 4,43 (dd, J=7,6, 11,2 Гц, 1H), 4,23 (dd, J=7,6, 11,2 Гц, 1H), 4,00-4,10 (m, 2H), 3,78-3,86 (m, 1H), 3,72 (br. s., 1H), 3,47 (dd, J=8,0, 18,0 Гц, 1H), 2,95 (dd, J=8,4, 18,0 Гц, 1H), 2,63-2,74 (m, 1H), 1,83 (br. s., 1H), 1,15 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 481,8 [M+H+].
Примеры 8, 9
Примеры 8, 9 готовили согласно способу, который описан в примерах 6, 7, и получали путем разделения посредством HPLC.
Данные ЯМР примера 8: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,81 (d, J=3,0 Гц, 1Н), 7,37 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,29-7,34 (m, 1H), 7,26 (br. s., 1H), 6,96 (dt, J=2,5, 8,2 Гц, 1H), 6,16 (s, 1H), 4,45 (dd, J=7,2, 11,5 Гц, 1H), 4,31 (dd, J=2., 11,5 Гц, 1H), 4,06 (q, J=6, 6 Гц, 2H), 3,62-3,81 (m, 2H), 3,22-3,28 (m, 2H), 2,61-2,73 (m, 1H), 1,66 (t, J=5 Гц, 1H), 1,15 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 479,8 [M+H+].
Данные ЯМР примера 9: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,81 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,38 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,33 (dd, J=2,5, 8,2 Гц, 1H), 7,29 (br. s., 1H), 7,25 (s, 1H), 6,94-7,01 (m, 1H), 6,16 (s, 1H), 4,42 (dd, J=7,5, 11,0 Гц, 1H), 4,23 (dd, J=7,8, 11,29 Гц, 1H), 4,01-4,10 (m, 2H), 3,79-3, 86 (m, 1H), 3, 68-3,77 (m, 1H), 3,47 (dd, J=8,0, 18,08 Гц, 1H), 2,95 (dd, J=8,5, 18,0 Гц, 1H), 2,64-2, 76 (m, 1H), 1,11-1,18 (m, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 479,8 [M+H+].
Пример 10
Стадия 1 (синтез соединения 10-2)
Соединение 10-1 (тот же способ синтеза, что и для соединения 6-8) (200 мг, 0,40 ммоль) растворяли в безводном DCM (5 мл) и при комнатной температуре добавляли триэтиламин (406 мг, 4,01 ммоль), метансульфонилхлорид (460 мг, 4,01 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и экстрагировали с помощью DCM (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (30 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (30 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 150 мг соединения 10-2.
LCMS (ESI) масса/заряд: 557,6 [М+Н+].
Стадия 2 (синтез примера 10)
Соединение 10-2 (100 мг, 0,18 ммоль) растворяли в безводном метаноле (3 мл) и добавляли метоксид натрия (48 мг, 0,90 ммоль) при комнатной температуре. Реакционную смесь перемешивали с обратным холодильником в течение ночи, концентрировали при пониженном давлении, а затем экстрагировали с помощью DCM (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (30 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (30 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ: EtOAc=3:1) с получением 6 мг примера 10, выход: 7%.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,81 (d, J=3,0 Гц, 1Н), 7,37 (d, J=3,0 Гц, 1Н), 7, 28-7, 35 (m, 2Н), 6,96 (dt, J=2,5, 8,2 Гц, 1Н), 6,14 (s, 1Н), 4,44-4,56 (m, 1Н), 4,22 (dd, J=2,5, 11,5 Гц, 1Н), 3,62 (s, 3Н), 3,41-3,56 (m, 2Н), 3,40 (s, 3Н), 3,17-3,30 (m, 2Н), 2,72 (br. s., 1Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 479, 8 [М+Н+].
Примеры 11, 112
Соединение 10-2 (30 мг, 0,05 ммоль) растворяли в безводном DMF (0,5 мл) и добавляли NaCN (4,0 мг, 0,08 ммоль). Температуру повышали до 80°С, реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение ночи и затем экстрагировали с помощью EtOAc (10 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (10 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (10 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 12 мг примера 11, 8 мг примера 12, выход: 70%.
Данные ЯМР примера 11: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,82 (d, J=3,0 Гц, 1Н), 7,39 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,33 (dd, J=2,2, 8,2 Гц, 1H), 7,22-7,26 (m, 1H), 6,97 (dt, J=2,5, 8,2 Гц, 1H), 6,16 (s, 1H), 4,66 (dd, J=7,2, 11,2 Гц, 1H), 4,15 (dd, J=8,5, 11,0 Гц, 1H), 4,07 (dq, J=3,6, 7,0 Гц, 2H), 3,68 (dd, J=7,8, 17,8 Гц, 1H), 2,94 (dd, J=9,0, 17,6 Гц, 1H), 2,75-2,86 (m, 1H), 2,64 (d, J=6,4 Гц, 2H), 1,15 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 488,9 [M+H+].
Данные ЯМР примера 12: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,82 (d, J=3,6 Гц, 1Н), 7,39 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,33 (dd, J=2,5, 8,0 Гц, 1H), 7,29 (br. s., 1H), 7,00 (dt, J=2,4, 8,2 Гц, 1H), 6,17 (s, 1H), 4,63 (dd, J=7,0, 11,6 Гц, 1H), 4,30 (dd, J=3,7, 11,8 Гц, 1H), 4,06 (q, J=7,0 Гц, 2H), 3,40-3,48 (m, 1H), 3,25 (dd, J=4,2, 18,3 Гц, 1H), 2,86 (d, J=3,6 Гц, 1H), 2,55-2,61 (m, 2H), 1, 14 (t, J=7, 0 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 488,9 [M+H+].
Примеры 113, 14
Соединение 13-1 (тот же способа синтеза, что и для 11, 12) (137 мг, 0,28 ммоль) растворяли в безводном этаноле (3 мл) и добавляли 5 н. водн. раствор серной кислоты (2 мл). Температуру повышали до 110°С, реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 3 часов, а затем охлаждали до комнатной температуры, нейтрализовали водн. раствором карбоната натрия до рН=5, экстрагировали с помощью EtOAc (10 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (10 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (10 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1), и затем разделяли посредством SFC с получением 1 мг примера 13, 2 мг примера 14, выход: 2%.
Данные ЯМР примера 13: 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 7,94 (d, J=3,0 Гц, 1Н), 7,85 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,53-7,57 (m, 1H), 7,31-7,38 (m, 1H), 7,26 (d, J=9,2 Гц, 1H), 5,98 (s, 1H), 4,41-4,48 (m, 1H), 3, 98-4,03 (m, 1H), 3,94 (d, J=4,0 Гц, 2H), 3,26 (d, J=7,8 Гц, 2H), 2,92-3,02 (m, 2H), 1,94-2,04 (m, 1H), 1,04 (t, J=7,0 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 508,0 [M+H+].
Данные ЯМР примера 14: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 7,93 (br. s., 1Н), 7,85 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,55 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,40 (br. s., 1H), 7,22 (d, J=7,5 Гц, 1H), 5,96 (s, 1H), 4,53 (br. s., 1H), 3,95 (d, J=6,8 Гц, 2H), 3,78 (t, J=9,6 Гц, 1H), 3,50 (d, J=9,8 Гц, 2H), 2,68 (d, J=15,0 Гц, 2H), 1,93-2, 03 (m, 1H), 1,05 (br. s., 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 508,0 [М+Н+].
Примеры 15, 16
Соединение 15-1 (тот же способ синтеза, что и для соединения 10-2) (80 мг, 0,14 ммоль) растворяли в ацетонитриле (3 мл) и добавляли карбонат калия (39 мг, 0,29 ммоль), морфолин (125 мг, 1,53 ммоль). Температуру повышали до 80°С, реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение ночи и затем экстрагировали с помощью EtOAc (30 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (20 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (20 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, концентрировали при пониженном давлении и затем разделяли посредством SFC с получением 6 мг примера 15, 15 мг примера 16, выход: 35%.
Примеры 15, 16 отдельно растворяли в 1 мл EtOAc и затем добавляли 4 мл раствора НС1 в EtOAc соответственно. Смеси перемешивали при 20°С в течение 30 минут, концентрировали при пониженном давлении и лиофилизировали с обеспечением примера 15 и примера 16 соответственно.
Данные ЯМР примера 15: 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 10,94 (br. s., 1Н), 7,91-8,02 (m, 2H), 7,57 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,47 (dd, J=6,2, 8,4 Гц, 1H), 7,20-7,31 (m, 1H), 6,00 (s, 1H), 4,57 (dd, J=7,4, 11,2 Гц, 1H), 4,18 (dd, J=5,2, 11,2 Гц, 2H), 3,91-4,03 (m, 5H), 3,78-3,91 (m, 3H), 3,31 (br. s., 2H), 2,93-3,19 (m, 4H), 1,06 (t, J=7,0 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 549,1 [M+H+].
Данные ЯМР примера 16: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 11,19 (br. s., 1H), 7,89-7,98 (m, 2H), 7,57 (dd, J=2,5, 8,4 Гц, 1H), 7,45 (dd, J=6,5, 8,4 Гц, 1H), 7,22 (dt, J=2,5, 8,5 Гц, 1H), 5,97 (s, 1H), 4,64 (dd, J=7,8, 10,4 Гц, 1H), 4,14-4,32 (m, 1H), 3,93-4,03 (m, 4H), 3,82-3,92 (m, 3H), 3,66 (dd, J=7,5, 17,4 Гц, 2H), 3,33-3,37 (m, 2H), 2,96-3,15 (m, 3H), 2,84 (dd, J=10,2, 17,4 Гц, 1H), 1,08 (t, J=7,0 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 549,1 [M+H+].
Примеры 115, 18
Примеры 17, 18 готовили согласно способу, который описан в примерах 15, 16, и получали путем разделения посредством HPLC.
Данные ЯМР примера 17: 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 7,96 (d, J=3,6 Гц, 1Н), 7,85 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,54 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7,38-7,45 (m, 1H), 7,20 (t, J=8,2 Гц, 1H), 5,96 (s, 1H), 4, 37-4, 45 (m, 1H), 3,96 (q, J=7,0 Гц, 2H), 3,83-3,89 (m, 1H), 3,58 (br. s., 4H), 2,65-2,75 (m, 3H), 2,30-2,44 (m, 6H), 1,06 (t, J=7,0 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 549,1 [M+H+].
Данные ЯМР примера 18: 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 7,95 (d, J=3,0 Гц, 1Н), 7,85 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,55 (d, J=6,4 Гц, 1H), 7,21-7,33 (m, 2H), 5,97 (s, 1H), 4,32 (dd, J=7,2, 10,8 Гц, 1H), 4,09 (d, J=8,0 Гц, 1H), 3,95 (q, J=7,0 Гц, 2H), 3,58 (br. s., 4H), 3,18 (dd, J=8,0, 18,0 Гц, 1H), 2, 98-3, 08 (m, 1H), 2,67 (br. s., 1H), 2,26-2,44 (m, 6H), 1,06 (t, J=7,0 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 549, 1 [M+H+].
Примеры 19, 20
Примеры 19, 20 готовили согласно способу, который описан в примерах 15, 16, и получали путем разделения посредством SFC.
Данные ЯМР примера 19: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,82 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,36 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,32 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,23 (dd, J=6,4, 8,8 Гц, 1H), 6,97 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,15 (s, 1H), 4,46 (dd, J=6,4, 11,6 Гц, 1H), 4,20 (dd, J=2,8, 11,6 Гц, 1H), 4,14 (q, J=7,2 Гц, 2H), 4,06 (dq, J=1,6, 7,2 Гц, 2H), 3,26-3,40 (m, 2H), 3,17-3,24 (m, 2H), 2,54-2,75 (m, 3H), 2,45 (s, 3H), 1,24 (t, J=7,2 Гц, 3Н), 1,15 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 580, 9 [M+H+].
Данные ЯМР примера 20: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,82 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,36 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,29-7,34 (m, 1H), 7,24-7,29 (m, 1H), 6,97 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,15 (s, 1H), 4,50 (dd, J=6,8, 11,6 Гц, 1H), 4,18 (q, J=7,2 Гц, 2H), 3,94-4,11 (m, 3H), 3,52 (dd, J=7,2, 17,6 Гц, 1H), 3, 27-3,40 (m, 2H), 2, 58-2, 87 (m, 4H), 2,46 (s, 3H), 1,25 (t, J=7,2 Гц, 3Н), 1,14 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 580,9 [M+H+].
Примеры 116, 22
Примеры 21, 22 готовили согласно способу, который описан в примерах 15, 16, и получали путем разделения посредством SFC.
Данные ЯМР примера 21: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,83 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,36 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,27-7,34 (m, 2H), 6,97 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,15 (s, 1H), 4,52 (dd, J=7,2, 11,2 Гц, 1H), 3,93-4,15 (m, 3H), 3, 64-3, 80 (m, 3H), 3,54 (dd, J=7,2, 17,6 Гц, 1H), 3,26 (dd, J=8,4, 14,0 Гц, 2H), 2, 70-2, 94 (m, 2H), 2,53-2,69 (m, 2H), 2,47 (q, J=7,6 Гц, 1H), 2,04-2,22 (m, 1H), 1,80-2,03 (m, 3H), 1,14 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 592,9 [M+H+].
Данные ЯМР примера 22: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,80 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,36 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,33 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,19-7,26 (m, 1H), 7,00 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,15 (s, 1H), 4,41 (dd, J=6,8, 11,6 Гц, 1H), 3,99-4,18 (га, 3H), 3,66 (s, 3H), 3,38-3,51 (m, 1H), 3,29 (dd, J=5,2, 8,4 Гц, 1H), 3,09-3,22 (m, 2H), 2,71-2,83 (m, 1H), 2, 40-2, 64 (m, 3H), 2,12 (d, J=4,4 Гц, 1H), 1, 92-2, 04 (m, 2H), 1,85 (d, J=7,6 Гц, 1H), 1,15 (t, J=7, 2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 592,9 [M+H+].
Пример 23
Стадия 1 (синтез соединения 23-3)
Соединение 23-2 (680 мг, 6 ммоль) растворяли в безводном N,N-диметилформамиде (50 мл) и медленно добавляли гидрид натрия (2 00 мг, 5 ммоль) при 0°С, поддерживая температуру и перемешивая в течение 30 минут, с последующим добавлением соединения 23-1 (тот же способ синтеза, что и для соединения 6-5) (2 г, 4 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов, концентрировали при пониженном давлении и затем экстрагировали с помощью DCM (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (30 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (30 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением продукта в виде 1,6 г соединения 23-3, выход: 75%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 536,6 [М+Н+].
Стадия 2 (синтез соединения 23-4)
Соединение 23-3 (1,2 г, 2,24 ммоль) растворяли в безводном метаноле (30 мл) и медленно добавляли борогидрид натрия (426 мг, 11,2 ммоль) при 0°С, поддерживая температуру и перемешивая в течение 30 минут. Смесь концентрировали при пониженном давлении и затем экстрагировали при помощи DCM (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (30 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (30 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением продукта в виде 800 мг соединения 23-4, выход: 74%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 494, 7 [М+Н+].
Стадия 3 (синтез соединения 23-5)
Соединение 23-4 (800 мг, 1,6 ммоль) растворяли в безводном DCM (40 мл) и медленно добавляли триэтиламин (240 мг, 2,4 ммоль), метансульфонилхлорид (27 6 мг, 2,4 ммоль) при 0°С. Температуру повышали до комнатной температуры, реакционную смесь перемешивали в течение ночи и затем экстрагировали с помощью DCM (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (30 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (30 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 5 60 мг соединения 2 3-5, выход: 74%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 476,7 [М+Н+].
Стадия 4 (синтез соединения 23-6)
Соединение 23-5 (180 мг, 0,38 ммоль) растворяли в безводном метаноле (5 мл) и при комнатной температуре медленно добавляли метоксид натрия (426 мг, 11,2 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение ночи, концентрировали при пониженном давлении и затем экстрагировали с помощью DCM (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (30 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (30 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 200 мг соединения 23-6, выход: 90%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 509,0 [М+Н+].
Стадия 5 (синтез примера 23)
Соединение 23-6 (200 мг, 0,39 ммоль) растворяли в диметиловом эфире этиленгликоля (3 мл) и добавляли воду (3 мл), серную кислоту (0,3 мл), смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Затем температуру повышали до 80°С, на реакционную смесь воздействовали этой температуре в течение 6 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали при пониженном давлении и затем экстрагировали при помощи DCM (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (30 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (30 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 6,6 мг примера 23, выход: 4%.
Данные ЯМР примера 23: 1Н ЯМР (400 МГц, MeOD-d4) δ: 8, 39-8, 29 (m, 2Н), 7,77 (dd, J=6,0, 8,4 Гц, 1Н), 7,56 (dd, J=2,0, 8,0 Гц, 1H), 7,28 (t, J=6, 8 Гц, 1H), 6,35 (s, 1H), 4,72-4,61 (m, 1H), 4,61-4,50 (m, 1H), 4,24-4,09 (m, 2H), 3,85-3,72 (m, 1H), 3,72-3,45 (m, 2H), 1,19 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 494,0 [M+H+].
Примеры 24, 25
Примеры 24, 25 готовили согласно способу, который описан в примере 23-5, и получали путем разделения посредством SFC.
Данные ЯМР примера 24: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,86-7,80 (m, 1Н), 7,40 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,23 (dd, J=6,0, 8,8 Гц, 1H), 7,13 (dd, J=2,4, 8,8 Гц, 1H), 6,91 (dt, J=2,8, 8,4 Гц, 1H), 6,18 (s, 1H), 4,83 (dd, J=7,6, 11,6 Гц, 1H), 4,56 (dd, J=8,4, 11,6 Гц, 1H), 4,06 (q, J=7,2 Гц, 2H), 3,80 (dd, J=7,6, 17,6 Гц, 1H), 3,50-3,27 (m, 2H), 1,21-1,08 (m, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 431,0 [М+Н+].
Данные ЯМР примера 25: ХН ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,84 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,53 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,48-7,44 (m, 1H), 7,41 (dd, J=6,0, 8,8 Гц, 1H), 7,16-7,12 (m, 1H), 6,98 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,16-6,06 (m, 1H), 6,01 (s, 1H), 5,98 (s, 1H), 4,12-4,06 (m, 2H), 4, 06-4, 00 (m, 1H), 3,96-3,87 (m, 1H), 1,13 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 431,0 [M+H+].
Примеры 26, 27
Примеры 2 6, 27 получали разделением 23-5 посредством HPLC.
Данные ЯМР примера 26: 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 7,98 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,89 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,57 (dd, J=8,4, 2,4 Гц, 1H), 7,46 (dd, J=8,4, 6,4 Гц, 1H), 7,12-7,30 (m, 1H), 6,00 (s, 1H), 4, 63-4, 74 (m, 1H), 4,42-4,52 (m, 1H), 3,99 (q, J=7,2 Гц, 2H), 3, 64-3,82 (m, 2H), 3,29-3,33 (m, 1H), 1,08 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 476, 8 [M+H+].
Данные ЯМР примера 27: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 7,97 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,90 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,53-7,67 (m, 1H), 7,37-7,45 (m, 1H), 7,23 (t, J=8,4 Гц, 1H), 6,01 (s, 1H), 4,48-4,64 (m, 2H), 3,95-4,06 (га, 2H), 3, 72-3,84 (m, 1H), 3,41-3,60 (m, 1H), 3, 32-3, 34 (m, 1H), 1,09 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 476,8 [М+Н+].
Примеры 28, 29
Соединение 23-5 (80 мг, 0,16 ммоль) растворяли в безводном этаноле (1 мл), добавляли DMSO (0,1 мл), раствор NaOH (0,05 мл, 5 н.), оксидол (0,06 мл), перемешивая при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и затем экстрагировали при помощи DCM (30 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (20 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (20 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, разделяли препаративной HPLC с получением 15 мг примера 28, 11 мг примера 2 9, выход: 35%.
Данные ЯМР примера 28: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,81 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,38 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,33 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,23-7,26 (m, 1H), 6,97 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,17 (s, 1H), 5,83 (br. s., 1H), 5,62 (br. s., 1H), 4,67 (dd, J=8,4, 11,2 Гц, 1H), 4,47 (dd, J=8,4, 11,2 Гц, 1H), 3,99-4,14 (m, 2H), 3,69 (dd, J=8,4, 18,0 Гц, 1H), 3,34-3,47 (m, 1H), 3,21 (q, J=8,4 Гц, 1H), 1,15 (t, J=7,2 Гц, 3Н). LCMS (ESI) масса/заряд: 493,0 [M+H+].
Данные ЯМР примера 29: гН ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,80 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,48 (dd, J=6,0, 8,4 Гц, 1H), 7,38 (d, J=3,6 Гц, 1H), 7,31 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,01 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,17 (s, 1H), 5,60 (br. s., 1H), 5,46 (br. s., 1H), 4,71 (dd, 3=1,6, 11,6 Гц, 1H), 4,51 (dd, J=3,6, 11,6 Гц, 1H), 3,99-4,13 (m, 2H), 3,67 (dd, J=3,6, 18,0 Гц, 1H), 3, 33-3, 43 (m, 1H), 3,18 (tt, J=3,6, 8,0 Гц, 1H), 1,15 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 493, 0 [M+H+].
Примеры 30, 31
Примеры 30, 31 готовили согласно способу, который описан в примерах 28, 29, и получали путем разделения посредством SFC.
Данные ЯМР примера 31: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,83 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,41 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,29 (dd, J=6,0, 8,8 Гц, 1H), 7,12 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,92 (m, 1H), 6,19 (s, 1H), 5, 97-5, 59 (m, 2H), 4,65 (dd, J=8,4, 11,6 Гц, 1H), 4,47 (dd, J=8,4, 11,6 Гц, 1H), 4,13-3,98 (m, 2H), 3,67 (dd, J=8,4, 18,0 Гц, 1H), 3,45-3,33 (m, 1H), 3,21 (quin, J=8,4 Гц, 1H), 1,15 (t, J=7, 2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 449,0 [M+H+].
Пример 32
Соединение 24 (50 мг, 0,11 ммоль), TBAF (15 мг, 0,06 ммоль), TMSN3 (134 мг, 1,16 ммоль) добавляли в пробирку для проведения реакций под воздействием микроволнового излучения и позволяли вступать в реакцию при 110°С под воздействием микроволнового излучения в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры с последующим добавлением EtOAc (10 мл), 5% водного раствора карбоната натрия (10 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (10 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (10 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (10 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и затем разделяли посредством HPLC с получением продукта в виде 16 мг примера 32, выход: 2 9%.
1Н ЯМР (400 МГц, MeOD-d4) δ: 8,08 (br. s., 1Н), 7,93 (br. s., 1H), 7,65 (br. s., 1H), 7,15 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,08 (br. s., 1H), 6,25 (s, 1H), 4,80 (br. s., 1H), 4,68 (br. s., 1H), 4,33 (br. s., 1H), 4,07 (q, J=7,2 Гц, 2H), 4,01-3,84 (m, 1H), 3,31 (br. s., 1H), 1,13 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 474,1 [M+H+].
Пример 33
Пример 33 получали согласно способу, который описан в примере 32.
Данные ЯМР примера 33: 1H ЯМР (400 МГц, MeOD-d4) δ: 8,39-8,29 (m, 2Н), 7,84 (dd, J=6,0, 8,4 Гц, 1Н), 7,58 (dd, J=2, 4, 8,4 Гц, 1Н), 7,31 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1Н), 6,39 (s, 1Н), 4,88-4,72 (m, 2Н), 4, 43-4, 29 (m, 1Н), 4,16 (dq, J=4,4, 7,2 Гц, 2Н), 4,07 (dd, J=8,0, 18,0 Гц, 1Н), 3,60 (dd, J=8,0, 18,0 Гц, 1H), 1,19 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 520,0 [М+Н+].
Примеры 34, 35
Стадия 1 (синтез соединения 34-2)
Соединение 34-1 (80 г, 600 ммоль) растворяли в безводном этаноле (500 мл) и добавляли тионилхлорид (100 мл, 1,5 ммоль) при 0°С, смесь перемешивали при 0°С в течение 20 минут. Затем температуру повышали до комнатной температуры, реакционную смесь перемешивали в течение ночи, концентрировали при пониженном давлении и затем экстрагировали с помощью EtOAc (1000 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (500 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (500 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 20:1) с получением продукта в виде 113 г соединения 34-2, выход: 99%.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 4,47 (q, J=4,8 Гц, 1Н), 4,26 (dq, J=2,4, 7,2 Гц, 2H), 4,16 (q, J=7,2 Гц, 2H), 3,28 (d, J=4,8 Гц, 1H), 2, 72-2, 89 (m, 2H), 1,20-1,34 (m, 6H).
Стадия 2 (синтез соединения 34-3)
Соединение 34-2 (30 г, 158 ммоль) растворяли в безводном тетрагидрофуране (400 мл) и при комнатной температуре медленно добавляли по каплям раствор борана в диметилсульфиде (16,5 мл, 165 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа, охлаждали до 0°С, добавляли борогидрид натрия (300 мг, 8 ммоль), интенсивно перемешивали в течение 30 минут и затем температуру повышали до комнатной температуры, перемешивали в течение ночи. Затем добавляли безводный этанол (80 мл), p-TsOH (450 мг, 4 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение еще получаса. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 1:1) с получением продукта в виде 13,6 г соединения 34-3, выход: 60%.
Стадия 3 (синтез соединения 34-4)
Соединение 34-3 (15 г, 100 ммоль) растворяли в ацетоне (200 мл) и при комнатной температуре медленно по каплям добавляли 2,2-диметоксипропан (21 г, 200 ммоль) и p-TsOH (350 мг, 2 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и затем концентрировали при пониженном давлении, очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением продукта в виде 12 г соединения 34-4, выход: 64%.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 4,48 (q, J=6,4 Гц, 1Н), 4,09-4,24 (m, 3Н), 3,66 (dd, J=6,4, 8,4 Гц, 1Н), 2,72 (dd, J=6,4, 15,6 Гц, 1Н), 2,52 (dd, J=7,2, 15,6 Гц, 1Н), 1,42 (s, 3Н), 1,37 (s, 3Н), 1,27 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
Стадия 4 (синтез соединения 34-5)
Соединение 34-4 (6,2 г, 32,9 ммоль) растворяли в 2 н. растворе NaOH (33 мл) в бане с водой со льдом и затем температуру повышали до комнатной температуры. Реакционную смесь перемешивали в течение 3 часов и затем экстрагировали при помощи DCM (50 мл × 3). Водные слои сохраняли и к водным слоям добавляли EtOAc (50 мл), 2 н. водн. раствор NaHSO4 (50 мл). Смесь интенсивно перемешивали в течение 15 минут и экстрагировали с помощью EtOAc (100 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (50 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (50 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 4,2 г неочищенного соединения 34-5, выход: 79%.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 4,49 (q, J=6,4 Гц, 1Н), 4,18 (dd, J=6,0, 8,4 Гц, 1Н), 3,68 (dd, J=6,4, 8,4 Гц, 1Н), 2,70-2,80 (га, 1Н), 2,54-2,64 (m, 1Н), 1,44 (s, 3Н), 1,37 (s, 3Н).
Стадии 5, 6 (синтез соединения 34-7)
Соединение 34-5 (1,0 г, 6,24 ммоль) растворяли в растворе безводного тетрагидрофурана (17 мл) в бане с водой со льдом и добавляли дикарбонилимидазол (1,21 г, 7,49 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в атмосфере азота в течение 4 часов с последующим добавлением МgСl2 (594 мг, 6,24 ммоль), этил-2-формиатацетата калия (2,12 г, 12,48 ммоль), триэтиламина (1,26 г, 12,49 ммоль) в атмосфере азота. После добавления реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и затем подкисляли 1 н. раствором НС1 до рН=5, экстрагировали при помощи EtOAc (100 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (50 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (50 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 5:1) с получением продукта в виде 33 6 мг соединения 34-7, выход: 23%.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 4,48 (q, J=6,4 Гц, 1Н), 4,16-4,25 (га, 3Н), 3,57 (dd, J=6,8, 8,4 Гц, 1Н), 3,49 (s, 2Н), 3,00 (dd, J=6,0, 17,2 Гц, 1Н), 2,75 (dd, J=7,2, 17,2 Гц, 1Н), 1, 39-1, 44 (m, 3Н), 1, 33-1,38 (m, 3Н), 1,27-1,32 (m, 3Н).
Стадия 7 (синтез соединения 34-8)
Соединение 34-7 (438 мг, 2,76 ммоль) растворяли в растворе безводного этанола (25 мл) и добавляли соединение 1-5 (636 мг, 2,76 ммоль), соединение 1-6 (542 мг, 3,31 ммоль), ацетат натрия (566 мг, 6,91 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в атмосфере азота, и нагревали с обратным холодильником в течение ночи, и затем концентрировали при пониженном давлении, экстрагировали с помощью EtOAc (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (30 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (30 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 3:1) с получением продукта в виде 720 мг соединения 34-8, выход: 54%.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,77 (br. s., 1Н), 7,82 (br. s., 1H), 7,37-7,48 (m, 2H), 7,13 (d, J=8,4 Гц, 1H), 6,94 (d, J=7,2 Гц, 1H), 6,22 (s, 1H), 4, 42-4, 56 (m, 1H), 4,19 (t, J=7,2 Гц, 1H), 3,98-4,08 (m, 2H), 3,78 (t, J=7,2 Гц, 1H), 3,61 (d, J=15,6 Гц, 1H), 3,04 (dd, J=7,6, 14,4 Гц, 1H), 1, 47-1, 57 (m, 3H), 1, 38-1,44 (m, 3H), 1,13 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 480, 0 [M+H+].
Стадия 8 (синтез соединения 34-9)
Соединение 34-8 (340 мг, 0,71 ммоль) растворяли в растворе безводного метанола (7 мл) и добавляли p-TsOH (81 мг, 0,43 ммоль), воду (2 мл). Реакционную смесь перемешивали с обратным холодильником в течение ночи и затем концентрировали при пониженном давлении, экстрагировали с помощью EtOAc (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (30 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (30 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (DCM:метанол = 20:1) с получением 214 мг соединения 34-9, выход: 69%.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7, 80-7,90 (m, 1Н), 7,56 (br. s., 1Н), 7,42 (dd, J=6,4, 8,4 Гц, 1H), 7,16 (d, J=7,6 Гц, 1H), 6,90-7,05 (m, 1H), 6,08-6,25 (m, 1H), 4,66 (br. s., 1H), 4,17-4,29 (m, 1H), 4,07 (d, J=7,2 Гц, 2H), 3,71 (br. s., 2H), 3,30-3,53 (m, 1H), 2,88-3,26 (m, 2H), 1,15 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 440, 0 [M+H+].
Стадия 9 (синтез примеров 34, 35)
Соединение 34-8 (199 мг, 0,45 ммоль) растворяли в растворе безводного DCM (5 мл) и при 0°С добавляли триэтиламин (69 мг, 0,68 ммоль), метансульфонилхлорид (52 мг, 0,45 ммоль). Смесь перемешивали при той же температуре в течение 1,5 часа. Температуру повышали до комнатной температуры и смесь перемешивали в течение ночи, а затем экстрагировали при помощи DCM (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (30 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (30 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 1:1) с получением 3 мг примера 34, 10 мг примера 35, выход: 6,8%.
Данные ЯМР примера 34: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,82 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,38 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,28-7,32 (m, 1H), 7,12 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,92 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,21 (s, 1H), 4,59-4,72 (m, 2H), 4,29 (dd, J=4,4, 12,4 Гц, 1H), 4,04 (dt, J=5,2, 6,8 Гц, 2H), 3, 38-3,50 (m, 1H), 3,25-3,37 (m, 1H), 1,12 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 422, 0 [M+H+].
Данные ЯМР примера 35: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,81 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,34-7,43 (m, 2H), 7,13 (dd, J=2,8, 8,8 Гц, 1H), 6,92 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,21 (s, 1H), 4,70 (br. s., 1H), 4, 34-4, 49 (m, 2H), 4,00-4,14 (m, 2H), 3,56 (d, J=18,0 Гц, 1H), 3,14 (dd, J=5,3, 18,4 Гц, 1H), 1,17 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 422, 0 [M+H+].
Примеры 36, 37
Стадия 1 (синтез соединения 36-2)
Соединение 36-1 (15,9 г, 119,2 ммоль) растворяли в безводном N',N-диметилацетамиде (300 мл) и порциями при комнатной температуре добавляли гидрид натрия (2,14 г, 89,4 ммоль). Смесь перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 2 часов. Затем соединение 6-5 (30,0 г, 59,6 ммоль) добавляли к реакционной смеси и после добавления смесь перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь экстрагировали с помощью EtOAc (400 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (100 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (100 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 20:1) с получением 26 г соединения 36-2, выход: 79%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 556, 9 [М+Н+].
Стадия 2 (синтез соединения 36-3)
Никель Ренея (3,0 г) растворяли в тетрагидрофуране (1000 мл) и при комнатной температуре добавляли соединение 36-2 (26 г, 46,8 ммоль), (Вос)2O (30,6 г, 140 ммоль). В атмосфере водорода температуру повышали до 50°С и реакционную смесь перемешивали при этой температуре в течение 4 часов, затем фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и экстрагировали с помощью EtOAc (500 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (200 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (100 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 5:1) с получением продукта в виде 2 0 г соединения 36-3, выход: 70%
LCMS (ESI) масса/заряд: 627,0 [М+Н+].
Стадия 3 (синтез соединения 36-4)
Соединение 36-3 (10 г, 16,0 ммоль) растворяли в безводном тетрагидрофуране (1000 мл) и порциями при комнатной температуре добавляли борогидрид натрия (600 мг, 16,0 ммоль), метанол (1 мл). В атмосфере азота смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 10 минут.Затем температуру повышали до температуры возврата флегмы и реакционную смесь перемешивали с обратным холодильником в течение 6 часов, затем охлаждали до комнатной температуры, концентрировали при пониженном давлении. Остаток выливали в ледяную воду (1500 мл), перемешивали в течение 20 минут и экстрагировали с помощью EtOAc (400 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (200 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (100 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 5:1) с получением 7,0 г соединения 36-4, выход: 75%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 584, 9 [М+Н+].
Стадия 4 (синтез соединения 36-5)
Соединение 36-4 (6,0 г, 10,3 ммоль) растворяли в безводном DCM (500 мл) и при комнатной температуре добавляли по каплям триэтиламин (1,56 г, 15,4 ммоль), метансульфонилхлорид (2,94 г, 15,4 ммоль). После добавления температуру повышали до 45°С и смесь перемешивали в атмосфере азота в течение 6 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали при пониженном давлении и экстрагировали с помощью EtOAc (200 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (100 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (40 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 5:1) с получением 3,0 г соединения 36-5, выход: 52%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 567, 1 [М+Н+].
Стадия 5 (синтез соединения 36-6)
Соединение 36-5 (3,0 г, 5,3 ммоль) растворяли в EtOAc (10 мл) и при комнатной температуре добавляли по каплям HCl-EtOAc (50 мл). После добавления смесь перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением 2,4 г соединения 36-6, которое использовали непосредственно для следующей реакции без очистки, выход: 84%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 466,8 [М+Н+].
Стадия 6 (синтез соединения 36-7)
Соединение 36-6 (80 мг, 0,17 ммоль) растворяли в безводном DCM (5 мл) и при комнатной температуре добавляли триэтиламин (17 мг, 0,17 ммоль), параформальдегид (26 мг, 0,86 ммоль), ацетоксиборогидрид натрия (109 мг, 0,52 ммоль). После добавления температуру повышали до 45°С и смесь перемешивали в атмосфере азота в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали при пониженном давлении. Затем остаток выливали в ледяную воду (15 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (20 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (10 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (10 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 3:1) с получением 20 мг соединения 36-7, выход: 24%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 492,9 [М+Н+].
Стадия 7 (синтез соединений 36, 37)
Соединение 36-7 разделяли посредством препаративной SFC с получением хирально чистых примера 36 и примера 37.
Данные ЯМР примера 36: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,81 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,37 (d, J=3,6 Гц, 1H), 7,30 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,24 (s, 1H), 6,95 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,15 (s, 1H), 4,69 (dd, J=6,8, 11,6 Гц, 1H), 4,11-4,05 (m, 1H), 4,05-3,99 (m, 2H), 3,48-3,37 (m, 1H), 3,22-3,09 (m, 2H), 2,33 (s, 6H), 1,15 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 493,2 [M+H+].
Данные ЯМР примера 37: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,81 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,36 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,31 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,26-7,23 (m, 1H), 6,96 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,14 (s, 1H), 4,55 (dd, J=6,4, 11,2 Гц, 1H), 4,14-4,06 (m, 1H), 4,05-3,97 (m, 2H), 3,63 (dd, J=6,4, 16,4 Гц, 1H), 3,05-2,89 (m, 2H), 2,34 (s, 6H), 1,14 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 465,1 [M+H+].
Примеры 38, 39
Стадия 1 (синтез соединения 65-2)
Соединение 36-5 (350 мг, 0,7 ммоль) растворяли в безводном DCM (15 мл) и при комнатной температуре добавляли триэтиламин (211 мг, 2,0 9 ммоль), 65-1 (149 мг, 1,05 ммоль). После добавления смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи и затем концентрировали при пониженном давлении, экстрагировали с помощью EtOAc (30 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (20 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (20 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 2:1) с получением 220 мг соединения 65-2, выход: 55%. LCMS (ESI) масса/заряд: 571,1 [М+Н+].
Стадия 2 (синтез примеров 65, 66)
Соединение 65-2 (200 мг, 0,35 ммоль) растворяли в ацетонитриле (15 мл) и добавляли карбонат калия (241 мг, 1,75 ммоль), смесь перемешивали в атмосфере азота при 50°С в течение 6 часов. Реакционную смесь охлаждали и затем концентрировали при пониженном давлении, экстрагировали с помощью EtOAc (30 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (20 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (20 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении, и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 1:1), и разделяли посредством SFC с получением 49 мг соединения 65, 55 мг соединения 66. Выход: 65%.
Данные ЯМР примера 65: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,81 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,39 (d, J=3,6 Гц, 1H), 7,32 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,22 (dd, J=6,0, 8,4 Гц, 1H), 6,99 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,16 (s, 1H), 4, 80-4, 68 (m, 2H), 4,42-4, 36 (m, 2H), 4,36-4,32 (m, 1H), 4,05 (q, J=7,0 Гц, 2H), 3,68-3,58 (m, 2H), 3,54 (dd, J=7,6, 18,0 Гц, 1H), 3,39-3,29 (m, 1H), 1,13 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 537, 1 [M+H+].
Данные ЯМР примера 66: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,80 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,39 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,33 (dd, J=2,0, 8,4 Гц, 1H), 7,23 (dd, J=6,34, 8,4 Гц, 1H), 7,00-6,91 (m, 1H), 6,18 (s, 1H), 4, 77-4, 70 (m, 1H), 4,62 (d, J=12,4 Гц, 1H), 4,46 (dd, J=6,8, 12,4 Гц, 1H), 4,43-4, 35 (m, 2H), 4,06 (q, J=7,0 Гц, 2H), 3,66 (t, J=7,8 Гц, 2H), 3,54-3,39 (m, 2H), 1,14 (t, J=7,0 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 537, 1 [M+H+].
Пример 67
Стадия 1 (синтез соединения 67-1)
Соединение 23-1 (1,3 г, 2,6 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (40 мл) и воде (10 мл) и добавляли карбонат калия (717 мг, 5,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 80°С в течение 16 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта, к которому добавляли 30 мл EtOAc и 20 мл воды. Смесь экстрагировали с помощью EtOAc (20 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 400 мг соединения 67-1. Выход: 35%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 439, 8 [М+Н+].
Стадия 2 (синтез примера 67)
Соединение 67-1 (210 мг, 0,48 ммоль) растворяли в безводном DCM (10 мл) и добавляли триэтиламин (242 мг, 2,4 ммоль), а затем трифосген (210 мг, 0,72 ммоль). Смесь перемешивали при 15°С в течение 30 минут. Реакционную смесь гасили с помощью 2 0 мл воды и экстрагировали с помощью DCM (20 мл × 3). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали посредством флеш-хроматографии с получением 80 мг примера 67. Выход: 24%.
Данные ЯМР примера 67: 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 7,92 (d, J=4,5 Гц, 2Н), 7,73-7,83 (m, 1Н), 7,63 (d, J=6,5 Гц, 1H), 7,32 (t, J=7,2 Гц, 1H), 6,12 (s, 1H), 5,45 (s, 2H), 3,92-4,12 (m, 2H), 1,08 (t, J=7,0 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 466, 0 [M+H+].
Пример 68
Стадия 1 (синтез соединения 68-2)
Соединение 23-1 (500 мг, 1 ммоль) растворяли в безводном N,N-диметилформамиде (10 мл) и добавляли 68-1 (216 мг, 1 ммоль), гидрид натрия (29 мг, 1,2 ммоль). После добавления смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и затем экстрагировали с помощью EtOAc (200 мл × 3). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (200 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 120 мг продукта 68-2. Выход: 19%. LCMS (ESI) масса/заряд: 638, 1 [М+Н+].
Стадия 2 (синтез соединения 68-3)
Соединение 68-2 (120 мг, 0,19 ммоль) растворяли в толуоле (5 мл) и добавляли трифторуксусный ангидрид (21,9 мг, 0,23 ммоль). После добавления смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и затем экстрагировали с помощью DCM (100 мл × 3). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (50 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 5:1) с получением 100 мг неочищенного продукта 68-3. Выход: 100%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 526, 0 [М+Н+].
Стадия 3 (синтез соединения 68-4)
Соединение 68-3 (100 мг, 0,19 ммоль) растворяли в толуоле (5 мл) и перемешивали с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и затем экстрагировали с помощью DCM (100 мл × 3). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (50 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 60 мг неочищенного продукта 68-4. Выход: 66%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 482, 0 [М+Н+].
Стадия 4 (синтез соединения 68)
Соединение 68-4 (60 мг, 0,13 ммоль) растворяли в безводном DCM (10 мл) и добавляли HATU (56 мг, 0,16 ммоль), триэтиламин (53 мг, 0,52 ммоль). После добавления смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь экстрагировали с помощью DCM (100 мл × 3). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (50 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 5:1) с получением 50 мг продукта 68. Выход: 88%.
Данные ЯМР примера 68: 1H ЯМР (400 МГц, АЦЕТОНИТРИЛ-d3) δ: 7,82 (d, J=3,0 Гц, 1Н), 7,61 (d, J=3,3 Гц, 1Н), 7,43-7,52 (m, 2Н), 7,16 (dt, J=2,6, 8,4 Гц, 1Н), 6,20 (s, 1Н), 4,00-4,11 (m, 2Н), 3,34-3, 45 (m, 1Н), 3,19-3,31 (m, 1Н), 2,68 (t, J=7,8 Гц, 2Н), 1,13 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 464,0 [М+Н+].
Пример 69
Пример 69 получали согласно способу, который описан в примере 1.
Данные ЯМР примера 69: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,15 (s, 1Н), 7,92 (br. s., 1H), 7,45 (br. s., 1H), 7, 30-7,38 (m, 1H), 7,21 (d, J=8,0 Гц, 1H), 6,17 (s, 1H), 4,71 (br. s., 1H), 4,07-4,35 (m, 3H), 3,69 (d, J=ll,80 Гц, 1H), 3,17 (br. s., 1H), 2,41 (br. s., 1H), 2,21 (br. s., 1H), 1,21 (t, J=7,0 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 390, 1 [M+H+].
Пример 70
Пример 70 получали согласно способу, который описан в примере 1.
Данные ЯМР примера 70: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,94 (d, J=3,3 Гц, 1Н), 7,85 (d, J=3,3 Гц, 1H), 7,39-7,21 (m, 3H), 6,06 (s, 1H), 4,34 (ddd, J=3,8, 7,7, 10,8 Гц, 1H), 4,21-4,11 (m, 1H), 4,01-3,91 (m, 2H), 3,31-3,22 (m, 1H), 3,00 (td, J=9,2, 17,9 Гц, 1H), 2,14-1,98 (m, 2H), 1,06 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 406,0 [M+H+].
Пример 71
Пример 71 получали согласно способу, который описан в примере 1.
LCMS (ESI) масса/заряд: 386,1 [М+Н+].
Пример 72
Пример 72 получали согласно способу, который описан в примере 1.
Данные ЯМР примера 72: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,84 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,39 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,28-7, 33 (m, 1H), 6, 73-6,84 (m, 2H), 6,02 (s, 1H), 4, 39-4,43 (m, 1H), 4, 22-4, 32 (m, 1H), 4,05-4,11 (m, 2H), 3,31-3,37 (m, 1H), 3,00-3,04 (m, 1H), 2,09-2,21 (m, 1H), 1, 97-2,09 (m, 1H), 1,18 (t, J=7, 2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 390,0 [M+H+].
Пример 73
Пример 73 получали согласно способу, который описан в примере 1.
Данные ЯМР примера 73: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,86 (br. s., 1Н), 7,39 (d, J=15,0 Гц, 3Н), 6,99 (br. s., 2H), 5,83 (br. s., 1H), 4,05-4,50 (m, 4H), 3,34 (br. s., 1H), 2,99 (br. s., 1H), 1, 89-2, 27 (m, 2H), 1,25 (br. s., 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 372,0 [M+H+].
Пример 74
Пример 74 получали согласно способу, который описан в примере 1.
Данные ЯМР примера 74: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,85 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,41 (d, J=3,0 Гц, 1H), 6,68 (s, 1H), 5,89 (s, 1H), 4,45 (ddd, J=3,0, 8,2, 11,2 Гц, 1H), 4,20-4,30 (m, 1H), 4,07-4,18 (m, 2H), 3,34 (ddd, J=3,2, 8,4, 18,0 Гц, 1H), 2,98 (td, J=9,4, 18,3 Гц, 1H), 1,95-2,22 (m, 2H), 1,24 (t, J=7,0 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 427,9 [M+H+].
Пример 75
Стадия 1 (синтез соединения 75-2)
Соединение 75-1 (30 г, 250 ммоль) растворяли в ксилоле (500 мл) и при комнатной температуре добавляли трихлорид индия (5,5 г, 25 ммоль). После добавления смесь перемешивали при 140°С в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и экстрагировали с помощью DCM (500 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (200 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (200 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 5,1 грамма смеси 75-2, содержащей вещества в цис- и транс-конфигурации при соотношении 3:2, выход: 8%.
Данные ЯМР одной конфигурации: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,22-7,19 (m, 2,4Н), 7,09-7,05 (m, 2,4Н), 3,80 (s, 3Н), 2,41 (s, 3Н), 1,90 (s, 3Н).
Данные ЯМР другой конфигурации: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,22-7,19 (m, 1,6Н), 7,09-7,05 (m, 1,6Н), 3,53 (s, 2Н), 2,36 (s, 2Н), 2,30 (s, 2Н).
Стадия 2 (синтез соединения 75-4)
Соединение 75-3 (3,3 г, 20,4 ммоль) растворяли в N-метилпирролидоне (50 мл) и при комнатной температуре добавляли бикарбонат натрия (4,97 г, 59,2 ммоль). После добавления смесь перемешивали при 120°С в течение ночи, затем охлаждали и медленно добавляли 75-2 (5,1 г, 20,4 ммоль). После добавления реакционной смеси позволяли вступить в реакцию в условиях микроволнового излучения при 120°С в течение 30 минут. Реакционную смесь экстрагировали с помощью EtOAc (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (20 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (20 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 3:1) с получением 3, 1 г соединения 75-4, выход: 42%.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,95 (d, J=3,0 Гц, 1Н), 7,72 (br. s., 1Н), 7,56 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,46 (br. s., 2H), 7,01 (d, J=7,5 Гц, 2H), 3,94 (qdd, J=3,5, 7,0, 10,4 Гц, 2H), 2,32 (br. s., 3H), 1,93 (br. s., 3H), 1,02 (t, J=6,9 Гц, 3Н).
Стадия 3 (синтез соединения 75-5)
Соединение 75-4 (3,1 г, 8,6 ммоль) растворяли в тетрахлорметане (50 мл) и при комнатной температуре добавляли NBS (1,84 г, 10,32 ммоль), AIBN (141 мг, 0,86 ммоль). После добавления смесь перемешивали при 90°С в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали и медленно добавляли соединение 75-2 (5,1 г, 20,4 ммоль). После добавления реакционной смеси позволяли вступить в реакцию в условиях микроволнового излучения при 120°С в течение 30 минут.Реакционную смесь экстрагировали с помощью EtOAc (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (20 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (20 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 5:1) с получением 900 мг соединения 75-5, выход: 24%.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,97 (d, J=3,0 Гц, 1Н), 7,86 (br. s., 1Н), 7,69 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7, 50-7,58 (m, 2H), 7,00-7,13 (m, 2H), 4,84 (s, 2H), 3,98 (q, J=7,0 Гц, 2H), 2,11 (s, 3H), 1,03 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
Стадия 4 (синтез соединения 75-6)
Ди-трет-бутилмалонат (285 мг, 1,32 ммоль) растворяли в 10 мл безводного N,N-диметилформамида и медленно добавляли гидрид натрия (53 мг, 1,32 ммоль), смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Соединение 75-5 (480 мг, 1,1 ммоль) добавляли к реакционной смеси, смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь экстрагировали с помощью EtOAc (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (20 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (20 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 5:1) с получением 200 мг соединения 75-6, выход: 32%.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,84 (s., 1Н), 7,53-7, 63 (m, 1Н), 7,34-7,53 (m, 2Н), 7,01 (d, J=8,0 Гц, 2Н), 3,94 (q, J=7,0 Гц, 2Н), 3,74 (br. s., 1Н), 3,01-3,31 (m, 3Н), 1,86-2,04 (m, 3Н), 1,41-1,54 (m, 18Н), 1,02 (t, J=5, 8 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 574,1 [М+Н+].
Стадия 5 (синтез соединения 75-7)
Соединение 75-6 (200 мг, 0,35 ммоль) растворяли в толуоле (5 мл) и медленно добавляли трифторуксусную кислоту (798 мг, 7 ммоль). Температуру повышали до 120°С и смесь перемешивали при этой температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали при пониженном давлении и экстрагировали с помощью DCM (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (20 мл × 2) и насыщенным раствором хлорида натрия (20 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта в виде 130 мг примера 75-7, выход: 86%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 418,1 [М+Н+].
Стадия 6 (синтез соединения 75-8)
Соединение 75-6 (130 мг, 0,31 ммоль) растворяли в 10 мл сухого тетрагидрофурана и при комнатной температуре добавляли карбонилдиимидазол (147 мг, 0,91 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 15 минут и затем добавляли в раствор борогидрида натрия (118 мг, 3,1 ммоль) в 10 мл метанола. После добавления реакция протекала при комнатной температуре в течение 10 минут. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и затем экстрагировали при помощи DCM (30 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (20 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (20 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 3:1) с получением 70 мг соединения 75-8, выход: 56%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 403,9 [M+H+].
Стадия 7 (синтез примера 75)
Соединение 75-8 (70 мг, 0,17 ммоль) растворяли в 10 мл сухого DCM и при комнатной температуре добавляли триэтиламин (35 мг, 0,34 ммоль), метансульфонилхлорид (29 мг, 0,25 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 30 минут. Реакционную смесь экстрагировали с помощью DCM (30 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (20 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (20 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 3:1) с получением 50 мг примера 75, выход: 76%.
Данные ЯМР примера 75: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,84 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,46 (dd, J=5,5, 8,5 Гц, 2H), 7,38 (d, J=3,2 Гц, 1H), 6,99 (t, J=8,6 Гц, 2H), 4,21-4,39 (m, 2H), 3,98 (q, J=7,2 Гц, 2H), 3,12 (t, J=7,8 Гц, 2H), 2,06 (q, J=7,4 Гц, 2H), 1,94 (s, 3H), 1,06 (t, J=7,0 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 386,5 [M+H+].
Пример 76
Пример 76 получали согласно способу, который описан в примере 1.
Данные ЯМР примера 76: 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 8,54 (d, J=2,0 Гц, 1Н), 8,09 (dt, J=2,0, 9,2 Гц, 1H), 7,45 (dd, J=6,0, 8,4 Гц, 1H), 7,38 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,21 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,02 (s, 1H), 3,90-4,03 (m, 2H), 3,52-3,54 (m, 1H), 3, 34-3, 38 (m, 1H), 3,23-3,27 (m, 1H), 3,05-3,10 (m, 1H), 1,91-2,03 (m, 2H), 1,08 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 436, 0 [M+H+].
Пример 77
Пример 77 получали согласно способу, который описан в примере 1.
Данные ЯМР примера 77: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,56 (d, J=5,0 Гц, 1Н), 7,67 (br. s., 1H), 7,34 (dd, J=6,2, 8,2 Гц, 1H), 7,08-7,14 (m, 1H), 6,93 (dt, J=2,5, 8,2 Гц, 1H), 6,21 (s, 1H), 4,18-4,29 (m, 1H), 3,97-4,13 (m, 3H), 3,39 (ddd, J=4,0, 8,4, 18,2 Гц, 1H), 3,02-3,16 (m, 1H), 1,96-2,19 (m, 2H), 1,15 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 406,1 [M+H+].
Пример 78
Пример 78 получали согласно способу, который описан в примере 1.
Данные ЯМР примера 78: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7, 33-7,26 (m, 1Н), 7,12 (d, J=7,0 Гц, 1H), 6,98 (br. s., 1H), 6,92 (t, J=7,4 Гц, 1H), 6,84 (s, 1H), 6,20 (s, 1H), 4,21 (d, J=8,5 Гц, 1H), 4,04 (q, J=6,9 Гц, 2H), 3,96 (br. s., 1H), 3,63 (br. s., 3H), 3,44-3,31 (m, 1H), 3,10 (td, J=8,9, 17,8 Гц, 1H), 2,15-1,91 (m, 2H), 1,13 (t, J=7,0 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 403,1 [M+H+].
Пример 79
Пример 79 получали согласно способу, который описан в примере 1.
Данные ЯМР примера 79: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,29-7,33 (m, 1Н), 7,13 (dd, J=2,5, 8,8 Гц, 1H), 6,87-6,98 (m, 2H), 6,19 (s, 1H), 4,40 (ddd, J=3,5, 8,0, 11,2 Гц, 1H), 4,19-4,31 (m, 1H), 4,07 (dq, J=l,6, 7,0 Гц, 2H), 3,34-3,47 (m, 1H), 3,08 (td, J=9,2, 18,2 Гц, 1H), 2,46 (s, 3H), 2,01-2,25 (m, 2H), 1,16 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 420,1 [M+H+].
Пример 80
Стадия 1 (синтез соединения 80-1)
Соединение 4 (500 мг, 1,11 ммоль) растворяли в безводном тетрагидрофуране (10 мл) и медленно добавляли 1 мл трибромида бора. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа и затем концентрировали при пониженном давлении, экстрагировали с помощью EtOAc (50 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (30 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (30 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 5:1) с получением 400 мг продукта в виде соединения 80-1, выход: 85%.
Стадия 2 (синтез примера 80)
Соединения 80-1 (50 мг, 0,12 ммоль) растворяли в безводном тетрагидрофуране (3 мл) и медленно добавляли триэтиламин (48 мг, 0,48 ммоль), соединение 80-2 (19 мг, 0,24 ммоль). Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 2 часов и затем концентрировали при пониженном давлении, экстрагировали с помощью EtOAc (30 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (20 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (20 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 400 мг продукта примера 80, выход: 61%.
Данные ЯМР примера 80: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,76 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,32 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,29-7,26 (m, 1H), 7,23 (dd, J=2,8, 8,8 Гц, 1H), 6,93 (dt, J=2,4, 8,2 Гц, 1H), 6,15 (s, 1H), 5,19 (d, J=6,0 Гц, 1H), 5,04 (d, J=6,0 Гц, 1H), 4, 43-4, 32 (m, 1H), 4,28-4,18 (m, 1H), 3,41 (ddd, J=3,6, 8,4, 18,0 Гц, 1H), 3,19 (s, 3H), 3,06 (td, J=9,3, 18,4 Гц, 1H), 2,20-2,08 (m, 1H), 2,06-1,93 (m, 1H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 466, 0 [M+H+].
Пример 81
Пример 81 получали согласно способу, который описан в примере 80.
Данные ЯМР примера 81: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,81 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,37 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,32 (dd, J=2,6, 8,4 Гц, 1H), 7,28-7,24 (m, 1H), 6,97 (dt, J=2,6, 8,2 Гц, 1H), 6,19-6,14 (m, 1H), 5,99-5,66 (m, 1H), 4,47-4,38 (m, 1H), 4,34-4,25 (m, 1H), 4,20 (dt, J=4,0, 13,6 Гц, 2H), 3,39 (ddd, J=3,8, 8,5, 18,3 Гц, 1H), 3,08 (td, J=9,2, 18,3 Гц, 1H), 2,25-2,13 (m, 1H), 2,13-2,02 (m, 1H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 486,0 [M+H+].
Пример 82
Стадия 1 (синтез соединения 82-3) Соединение 82-1 (2,25 г, 36,9 ммоль) растворяли в метаноле (30 мл) и при комнатной температуре добавляли соединение 82-2 (5,01 г, 36,9 ммоль). Температуру повышали до 70°С и смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и медленно добавляли борогидрид натрия (1,4 г, 36,9 ммоль). После добавления температуру повышали до 70°С и смесь перемешивали в течение 2 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и экстрагировали с помощью EtOAc (30 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (50 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (100 мл × 3), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 6,0 г соединения 82-3, выход: 90%.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,24 (d, J=8,8 Гц, 2Н), 6,88 (d, J=8,8 Гц, 2Н), 3,81 (s, 3Н), 3,75 (s, 2Н), 3,65 (t, J=5,2 Гц, 2Н), 2,79 (t, J=5,2 Гц, 2Н), 2,34 (br, 2Н).
Стадия 2 (синтез соединения 82-4)
Соединение 82-3 (1,0 г, 5,5 ммоль) растворяли в ацетонитриле (30 мл) и при комнатной температуре добавляли соединение 6-5 (2,8 г, 5,5 ммоль), карбонат калия (1,5 г, 11 ммоль). После добавления смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали под давлением и экстрагировали с помощью EtOAc (30 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (50 мл × 2) и насыщенным раствором хлорида натрия (100 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 2,7 г соединения 82-4, выход: 82%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 602,9 [М+Н+].
Стадия 3 (синтез соединения 82-5)
Соединение 82-4 (2,5 г, 4,2 ммоль) растворяли в безводном DCM (20 мл) и добавляли триэтиламин (839 мг, 8,3 ммоль), метансульфонилхлорид (710 мг, 6,23 ммоль). После добавления смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 часов. Реакционную смесь экстрагировали с помощью DCM (200 мл × 3). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (200 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 2,8 г продукта 82-5, выход: 99%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 681,0 [М+Н+].
Стадия 4 (синтез соединения 82-6)
Соединение 82-5 (2,8 г, 4,1 ммоль) растворяли в ацетонитриле (30 мл) и при комнатной температуре добавляли карбонат калия (1,1 г, 8,2 ммоль). После добавления реакционную смесь нагревали до 80°С и перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали под давлением и экстрагировали с помощью EtOAc (30 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (50 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (100 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 2,0 г соединения 82-6, выход: 83%.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,93 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,84 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,58 (dd, J=2,4, 8,6 Гц, 1Н), 7,30-7,38 (m, 1Н), 7,27-7,30 (m, 1Н), 7,25 (s, 2Н), 6,91 (d, J=8,6 Гц, 2Н), 5,94 (s, 1Н), 4, 53-4,62 (m, 1Н), 4,10 (d, J=16,4 Гц, 1Н), 3,91 (dqd, J=3,6, 7,01, 13,2 Гц, 2Н), 3,70-3,75 (m, 4Н), 3,60 (s, 2Н), 3,45-3,53 (m, 1Н), 2,68-2,79 (m, 2Н), 0,98 (t, J=7,0 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 585, 0 [М+Н+].
Стадия 5 (синтез соединения 82-8)
Соединение 82-6 (420 мг, 0,7 ммоль) растворяли в безводном DCM (10 мл) и при 0°С добавляли триэтиламин (145 мг, 1,43 ммоль), соединение 82-7 (205 мг, 1,43 ммоль). Смесь перемешивали при 0°С в течение 1,5 часа и затем концентрировали при пониженном давлении. Добавляли 5 мл метанола, температуру повышали до 80°С и смесь перемешивали в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали под давлением и экстрагировали с помощью EtOAc (30 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (50 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (50 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 300 мг соединения 82-8, выход: 90%.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,82 (d, J=3,0 Гц, 1Н), 7,42-7,33 (m, 2Н), 7,28 (d, J=6,4 Гц, 1Н), 6,99 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1Н), 6,14 (s, 1Н), 4,75-4,64 (m, 1H), 4,58-4,29 (m, 2H), 4,15-3,97 (m, 2H), 3,52-3,30 (m, 2H), 3,17-3,04 (m, 1H), 1,14 (t, J=7,0 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 465, 0 [M+H+].
Стадия 6 (синтез примера 82)
Соединение 82-8 (100 мг, 0,2 ммоль) растворяли в безводном DCM (10 мл) и при комнатной температуре добавляли триэтиламин (22 мг, 0,2 ммоль), соединение 82-9 (23 мг, 0,2 ммоль). После добавления смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь гасили водой и экстрагировали с помощью DCM (30 мл × 3). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (20 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 56 мг примера 82, выход: 49%.
Данные ЯМР примера 82: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,6 (d, J=3,0 Гц, 1Н), 7,41 (d, J=3,0 Гц, 1Н), 7,35 (d, J=6,0 Гц, 1Н), 7,13-7,19 (m, 1Н), 6,96 (t, J=7,2 Гц, 1Н), 6,14 (s, 1Н), 5,23 (br. s., 1Н), 4,95-5,12 (m, 1Н), 4,69 (br. s., 1H), 4,20 (q, J=6,4 Гц, 2H), 4,03-4,15 (m, 2H), 3,92 (d, J=14,4 Гц, 2H), 3,55 (br. s., 1H), 1,30 (t, J=6, 8 Гц, 3Н), 1,17 (t, J=7,0 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 537,2 [М+Н+].
Пример 83
Пример 83 получали согласно способу, который описан в примере 82-8.
Данные ЯМР примера 83: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,82 (d, J=3, 0 Гц, 1Н), 7,42-7,33 (m, 2H), 7,28 (d, J=6,4 Гц, 1H), 6,99 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,14 (s, 1H), 4,75-4,64 (m, 1H), 4,58-4,29 (m, 2H), 4,15-3,97 (m, 2H), 3,52-3,30 (m, 2H), 3,17-3,04 (m, 1H), 1,14 (t, J=7, 0 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 465,0 [M+H+].
Пример 84
Пример 84 получали согласно способу, который описан в примере 82.
Данные ЯМР примера 84: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,84 (d, J=3,0 Гц, 1Н), 7,42 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,30-7,39 (m, 2H), 7,01 (dt, J=2,8, 8,0 Гц, 1H), 6,17 (s, 1H), 5,24 (d, J=16,6 Гц, 1H), 4,77-4,87 (m, 1H), 4,64 (d, J=16,6 Гц, 1H), 4,42 (d, J=5,0 Гц, 1H), 4,00-4,20 (m, 2H), 3,75-3,88 (m, 2H), 3,66-3,74 (m, 1H), 2,78 (d, J=5,6 Гц, 3Н), 1,17 (t, J=7,0 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 558, 1 [M+H+].
Пример 85
Пример 85 получали согласно способу, который описан в примере 82.
Данные ЯМР примера 85: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,85 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,43 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,39 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,21 (dd, J=6,0, 8,4 Гц, 1H), 6,96-7,04 (m, 1H), 6,19 (s, 1H), 5,24-5,41 (m, 1H), 5,05 (d, J=19,2 Гц, 1H), 4,77 (br. s., 1H), 4,08-4,23 (m, 2H), 3,99 (br. s., 2H), 3,82 (s, 3H), 3,56-3,67 (m, 1H), 1,21 (t, J=6,4 Гц, 3Н). LCMS (ESI) масса/заряд: 522, 8 [M+H+].
Пример 86
Пример 86 получали согласно способу, который описан в примере 82.
Данные ЯМР примера 86: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,84 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,44 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,38 (dd, J=2,4, 8,0 Гц, 1H), 7,20 (dd, J=6,0, 8,8 Гц, 1H), 6,99 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,17 (s, 1H), 5,15-4,90 (m, 2H), 4,89-4,82 (m, 1H), 4,19-4,04 (m, 2H), 3,96-3,86 (m, 1H), 3,77-3,67 (m, 2H), 2,89 (s, 3H), 1,18 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 507, 0 [M+H+].
Пример 87
Пример 87 получали согласно способу, который описан в примере 82.
Данные ЯМР примера 87: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,84 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,44 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,38 (dd, J=2,8, 8,4 Гц, 1H), 7,20 (dd, J=6,0, 8,8 Гц, 1H), 6,99 (dt, J=2,8, 8,4 Гц, 1H), 6,17 (s, 1H), 5,14-4,90 (m, 2H), 4,90-4,82 (m, 1H), 4,20-4,04 (m, 2H), 3,96-3,85 (m, 1H), 3,76-3,66 (m, 2H), 2,89 (s, 3H), 1,18 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 543, 0 [M+H+].
Пример 88
Пример 88 получали согласно способу, который описан в примере 82.
Данные ЯМР примера 88: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,84 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,42 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,38 (dd, J=2,5, 8,2 Гц, 1H), 7,20 (dd, J=6,0, 8,5 Гц, 1H), 7,00 (dt, J=2,5, 8,2 Гц, 1H), 6,18 (s, 1H), 4,99-5,20 (m, 2H), 4,88 (d, J=3,8 Гц, 1H), 4,70-4,82 (m, 1H), 3,93-4,23 (m, 4H), 3,54-3,66 (m, 1H), 2,89 (d, J=4,5 Гц, 3Н), 1,19 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 544, 0 [M+Na+].
Пример 89
Пример 89 получали согласно способу, который описан в примере 82.
Данные ЯМР примера 89: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,85 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,43 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,39 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,22-7,14 (m, 1H), 7,05-6,95 (m, 1H), 6,22-6,17 (m, 1H), 5,39-5,07 (m, 2H), 5,04-4,77 (m, 2H), 4,22-3, 95 (m, 4H), 3,80-3,50 (m, 4H), 1,20 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 522,0 [M+H+].
Пример 90
Пример 90 получали согласно способу, который описан в примере 82.
Данные ЯМР примера 90: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,83 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,41 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,36 (dd, J=2,4, 8,0 Гц, 1H), 7,14 (dd, J=6,0, 8,8 Гц, 1H), 6,98 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,18 (s, 1H), 5,02 (dd, J=2,8, 5,6 Гц, 2H), 4,97-4,77 (m, 3H), 4,48 (t, J=6, 8 Гц, 2H), 4,16-3,96 (m, 4H), 3,76-3,67 (m, 1H), 1,72 (s, 3H), 1,20-1,08 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 563,1 [M+H+].
Пример 91
Пример 91 получали согласно способу, который описан в примере 82.
Данные ЯМР примера 91: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,82 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,40 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,37 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,19 (dd, J=6,0, 8,4 Гц, 1H), 6,99 (t, J=7,2 Гц, 1H), 6,22-6,14 (m, 1H), 5, 78-5, 23 (m, 2H), 4,95-4,70 (m, 1H), 4,27-3,99 (m, 4H), 3,73-3,40 (m, 1H), 2, 04-1, 83 (m, 1H), 1,23-1,11 (m, 3H), 1,11-0,99 (m, 2H), 0,86 (s, 2H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 533,1 [M+H+].
Пример 92
Пример 92 получали согласно способу, который описан в примере 82.
Данные ЯМР примера 92: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,83 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,40 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,39-7,34 (m, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,16 (dd, J=6,0, 8,4 Гц, 1H), 6,97 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,19 (s, 1H), 5,55-5,11 (m, 2H), 4,84-4,71 (m, 1H), 4,20-4, 00 (m, 4H), 3,68-3,53 (m, 1H), 2,98 (td, J=6,8, 13,6 Гц, 1H), 1,23-1,12 (m, 9H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 535,1 [M+H+].
Пример 93
Пример 93 получали согласно способу, который описан в примере 82.
Данные ЯМР примера 93: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,84 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,43 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,38 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,21 (dd, J=6,0, 8,8 Гц, 1Н), 6,99 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,18 (s, 1H), 5,15-4,91 (m, 2H), 4,87 (td, J=4,4, 13,6 Гц, 1H), 4, 20-4, 06 (m, 2H), 4,01 (m, 1H), 3,75 (td, J=4,0, 12,0 Гц, 1H), 3,66 (m, 1H), 2,44-2,35 (m, 1H), 1,24-1,15 (m, 5H), 1,01-0,86 (m, 2H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 569,0 [M+H+].
Пример 94
Соединение 82-8 (93 мг, 0,2 ммоль) растворяли в DCM (10 мл) и добавляли соответствующий альдегид (44 мг, 0,4 ммоль), ацетоборогидрид натрия (127 мг, 0,6 ммоль) и уксусную кислоту (60 мг, 1 ммоль). Реагенты перемешивали при комнатной температуре в течение 20 минут и затем концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного вещества, которое разделяли с помощью препаративной HPLC с получением 10 мг примера 94, выход 10%.
Данные ЯМР примера 94: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,96 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,87 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,60 (dd, J=8,4, 2,4 Гц, 1H), 7,24-7,39 (m, 2H), 5,96 (s, 1H), 4, 56-4, 65 (m, 1H), 4,43 (d, J=5,6 Гц, 1H), 4,19 (d, J=16,4 Гц, 1H), 3,96 (m, 2H), 3,84 (d, J=16, 4 Гц, 1H), 3,74 (s, 2H), 3,48-3,57 (m, 1H), 2,77-2,89 (m, 2H), 2,40 (s, 3H), 1,04 (t, J=7,0 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 560, 1 [M+H+].
Пример 95
Соединение 83 (50 мг, 0,11 ммоль) растворяли в ацетонитриле (10 мл) и добавляли соединение 95-1 (45 мг, 0,33 ммоль), карбонат калия (76 мг, 0,55 ммоль). После добавления температуру повышали до 50°С и смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали с последующим фильтрованием с отсасыванием. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного вещества, которое разделяли с помощью препаративной HPLC с получением 23 мг примера 95, выход 41%.
Данные ЯМР примера 95: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,95 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,86 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,60 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,45-7,38 (m, 2H), 7,26 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,18 (br. s., 1H), 5,97 (s, 1H), 4,64-4,54 (m, 1H), 4,23 (d, J=16,6 Гц, 1H), 4,05-3,91 (m, 2H), 3,87 (d, J=16,8 Гц, 1H), 3,61-3,53 (m, 1H), 3,10 (s, 2H), 2,92-2,81 (m, 2H), 1,05 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 522,0 [M+H+].
Пример 96
Пример 96 получали согласно способу, который описан в примере 95.
Данные ЯМР примера 96: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,82 (br. s., 1Н), 7,43-7,28 (m, 3Н), 6,99 (br. s., 1H), 6,13 (br. s., 1H), 4,87 (d, J=11,2 Гц, 1H), 4,56 (d, J=15,6 Гц, 1H), 4,20-3,92 (m, 2H), 3,49 (d, J=15,6 Гц, 2H), 2,91-2,68 (m, 2H), 2,49 (br. s., 3H), 1,14 (t, J=6, 4 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 479,1 [M+H+].
Пример 97
Пример 97 получали согласно способу, который описан в примере 95.
Данные ЯМР примера 97: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,93 (d, J=3, 2 Гц, 1Н), 7,84 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,58 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,30-7,38 (m, 1H), 7,27-7, 30 (m, 1H), 7,25 (s, 2H), 6,91 (d, J=8,4 Гц, 2H), 5,94 (s, 1H), 4,53-4,62 (m, 1H), 4,10 (d, J=16,4 Гц, 1H), 3,91 (m, 2H), 3,70-3,75 (m, 4H), 3,60 (s, 2H), 3,45-3,53 (m, 1H), 2,68-2,79 (m, 2H), 0,98 (t, J=7,0 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 585,0 [M+H+].
Пример 98
Пример 98 получали согласно способу, который описан в примере 95.
Данные ЯМР примера 98: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,95 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,86 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,64-7,55 (m, 1H), 7,42-7,33 (m, 1H), 7,32-7,24 (m, 1H), 5,97 (s, 1H), 4,67-4,54 (m, 1H), 4,30 (d, J=16, 6 Гц, 1H), 4,05-3,89 (m, 3H), 3,65 (s, 3H), 3,58-3,48 (m, 3H), 3,03-2,86 (m, 2H), 1,05 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 537,1 [M+H+].
Пример 99
Пример 99 получали согласно способу, который описан в примере 95.
Данные ЯМР примера 99: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,92 (br. s., 1Н), 7,86 (br. s., 1H), 7,59 (d, J=7,2 Гц, 1H), 7,37 (br. s., 1H), 7,26 (br. s., 1H), 5,97 (s, 1H), 4,57 (br. s., 1H), 4,33-4,02 (m, 2H), 3,92 (br. s., 2H), 3,23-2,79 (m, 5H), 1,02 (br. s., 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 523,0 [M+H+].
Пример 100
Пример 100 получали согласно способу, который описан в примере 94.
Данные ЯМР примера 100: 1Н ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 8,38 (s, 1Н), 8,09 (s, 1H), 7,95 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,87 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,60 (dd, J=8,4, 2,4 Гц, 1H), 7,23-7,40 (m, 2H), 5,96 (s, 1H), 4,55-4,67 (m, 1H), 4,24 (d, J=16,4 Гц, 1H), 3,89-4,04 (m, 2H), 3,78 (d, J=16,4 Гц, 1H), 3,64 (s, 2H), 3,47-3,54 (m, 1H), 2,84 (t, J=5,6 Гц, 2H), 1,05 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 546,1 [M+H+].
Пример 101
Пример 101 получали согласно способу, который описан в примере 95.
Данные ЯМР примера 101: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,82 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,42 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,38 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,21 (dd, J=6,0, 8,8 Гц, 1H), 7,02 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,17 (s, 1H), 5,06-4,79 (m, 3H), 4,19-4,00 (m, 2H), 3,90-3,77 (m, 2H), 3, 68-3, 60 (m, 1H), 1,16 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 489, 8 [M+H+].
Пример 102
Пример 102 получали согласно способу, который описан в примере 94.
Данные ЯМР примера 102: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,82 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,41-7,33 (m, 2H), 7,29 (dd, J=6,0, 8,8 Гц, 1H), 7,02 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,15 (s, 1H), 4,87 (td, J=4,4, 12,0 Гц, 1H), 4,77 (q, J=6,4 Гц, 2H), 4,69 (q, J=6,4 Гц, 2H), 4,39 (d, J=15,8 Гц, 1H), 4,15-4,04 (m, 1H), 3,99 (qd, J=7,2, 10,8 Гц, 1H), 3,72 (quin, J=6,2 Гц, 1H), 3,56 (d, J=16,0 Гц, 1H), 3,53-3,45 (m, 1H), 2,74 (t, J=5,6 Гц, 2H), 1,13 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 521,0 [M+H+].
Пример 103
Пример 103 получали согласно способу, который описан в примере 95.
Данные ЯМР примера 103: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,85 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,44 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,39 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,19 (dd, J=6,0, 8,4 Гц, 1H), 7,01 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,19 (s, 1H), 6,17 (br. s., 1H), 5,34-5,47 (m, 2H), 4,88 (m, 1H), 4,47 (ddd, J=4,4, 7,2, 12,0 Гц, 1H), 4,14-4,23 (m, 2H), 4,05-4,13 (m, 1H), 3,93 (ddd, J=4,4, 7,6, 12,0 Гц, 1H), 3,76 (quin, J=6,4 Гц, 2H), 1,27-1,32 (m, 3H), 1,20 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 551,8 [M+H+].
Пример 104
Стадия 1 (синтез примера 104-1)
Соединение 23-1 (1,0 г, 1,99 ммоль) растворяли в безводном N,N-диметилформамиде (100 мл) и при комнатной температуре добавляли азид натрия (240 мг, 9,69 ммоль). После добавления смесь перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь экстрагировали с помощью DCM (300 мл × 3). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (2 00 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 1,1 г примера 104-1, выход: 10 0%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 466, 6 [М+Н+].
Стадия 2 (синтез примера 104-2)
Pd/C (100 мг) растворяли в 100 мл безводного тетрагидрофурана и при комнатной температуре добавляли 104-1 (1,1 г, 2,37 ммоль), Вос2O (618 мг, 2,8 4 ммоль). После добавления смесь перемешивали в атмосфере водорода (45 фунтов/кв. дюйм) при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 760 мг примера 104-2, выход: 60%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 560,9 [M+Na+].
Стадия 3 (синтез примера 104-3)
104-2 (760 мг, 1,41 ммоль) растворяли в EtOAc (5 мл) и при комнатной температуре добавляли раствор НСl в EtOAc (10 мл), смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и промывали с помощью EtOAc, фильтровали с получением 700 мг примера 104-3, выход: 97%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 462, 7 [M+Na+].
Стадия 4 (синтез примера 104-4)
104-3 (700 мг, 1,4 ммоль) растворяли в безводном DCM (10 мл) и при 0°С добавляли триэтиламин (470 мг, 4,6 ммоль), хлорацетилхлорид (0,1 мл, 1, 4 ммоль). После добавления температуру повышали до комнатной температуры и смесь перемешивали в течение 1 часа. Реакционную смесь экстрагировали с помощью DCM (100 мл × 3). Органический слой последовательно промывали водой (100 мл × 2), насыщенным солевым раствором (100 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 700 мг примера 104-4, выход: 97%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 538,7 [М+Н+].
Стадия 5 (синтез примера 104)
104-4 (110 мг, 0,21 ммоль) растворяли в ацетонитриле (2 мл) и при комнатной температуре добавляли карбонат калия (59 мг, 0,42 ммоль). После добавления температуру повышали до температуры возврата флегмы и смесь перемешивали в течение ночи. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и затем экстрагировали с помощью DCM (30 мл × 3). Органический слой последовательно промывали водой (30 мл × 2), насыщенным солевым раствором (30 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 5:1) с получением 5 мг примера 104, выход: 5%.
Данные ЯМР примера 104: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,92 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,46 (d, J=3,2 Гц, 2H), 7,36 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,05-6,97 (m, 1H), 6,97-6,90 (m, 1H), 6,00 (d, J=16,8 Гц, 1H), 5,72 (s, 1H), 5,52 (d, J=4,4 Гц, 1H), 4,42 (d, J=16,8 Гц, 1H), 4,23 (dq, J=3,2, 7,1 Гц, 2H), 3,47 (d, J=l,6 Гц, 1H), 1,28 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 478,8 [M+H+].
Пример 105
Стадия 1 (синтез примера 105-1)
Соединение 23-1 (300 мг, 0,6 ммоль) растворяли в безводном N,N-диформилацетамиде (10 мл) и при комнатной температуре добавляли метиламина гидрохлорид (405 мг, 0,6 ммоль), калия трет-бутоксид (334 мг, 2,98 ммоль). После добавления смесь перемешивали в атмосфере азота при комнатной температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь выливали в ледяную воду и экстрагировали с помощью EtOAc (100 мл × 3). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (50 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 5:1) с получением 160 мг примера 105-1, выход: 59%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 452, 9 [М+Н+].
Стадии 2, 3 (синтез примера 105)
Стадии 2, 3 примера 105 были такими же, как и в примере 104.
Данные ЯМР примера 105: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,93 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,71 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,49-7,38 (m, 2H), 7,12 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,17 (s, 1H), 5,26 (d, J=16,0 Гц, 1H), 5,06 (d, J=4,0 Гц, 2H), 4,37 (d, J=16,0 Гц, 1H), 4,09 (dq, J=3,2, 7,2 Гц, 2H), 3,11 (s, 3H), 1,15 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 492, 8 [M+H+].
Пример 106
Пример получали согласно тому же способу, что и для примера 104.
Данные ЯМР примера 106: 1Н ЯМР (400 МГц, MeOD-d4) δ: 7,95 (d, J=3,2 Гц 1Н), 7,73 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,60 (dd, J=6, 0, 8,8 Гц, 1H), 7,46 (dd, J=2,8 8,4 Гц, 1H), 7,13 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,19 (s, 1H), 5,38-5,19 (m, 2H), 5,03 (d, J=16,8 Гц, 1H), 4, 62-4, 53 (m, 2H), 4,21 (d, J=17,6 Гц, 1H) 4,16-4,03 (m, 2H), 3,80 (s, 3H), 1,16 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 550,8 [M+H+].
Пример 107
Стадия 1 (синтез соединения 107-2) Соединение 107-1 (8,0 г, 39,6 ммоль) растворяли в безводном этаноле (200 мл) и добавляли 2-бром-4-фторбензальдегид (8,0 г, 39,6 ммоль), тиазолдикарбоксамидина гидрохлорид (6,5 г, 39,6 ммоль), ацетат натрия (6,5 г, 7 9,2 ммоль). Реакционную смесь медленно нагревали до температуры возврата флегмы и реакционную смесь перемешивали с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и затем экстрагировали с помощью EtOAc (500 мл × 3). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (300 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 5,0 г продукта 107-2, выход: 25,5%. LCMS (ESI) масса/заряд: 496,0 [М+Н+].
Стадия 2 (синтез соединения 107-3)
Соединение 107-2 (5,0 г, 10,0 ммоль) растворяли в 80 мл тетрагидрофурана и 80 мл воды и добавляли LiOH (1,3 г, 30,2 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 15°С в течение 2 часов. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта. К неочищенному продукту добавляли 100 мл трет-бутилметилового эфира и воду (50 мл) с последующим медленным добавлением 1 н. НСl для регулирования рН=3 и экстракцией. Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 3,0 г соединения 107-3, выход: 37,9%.
1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ: 10,13 (s, 1Н), 7,85-7,96 (m, 2H), 7,60 (dd, J=6,4, 8,8 Гц, 1H), 7,52 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,18 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 5,96 (s, 1H), 3,88 (d, J=6,8 Гц, 2H), 0,99 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
Стадия 3 (синтез соединения 107-4)
Соединение 107-3 (3,0 г, 6,4 ммоль) растворяли в безводном DCM (60 мл) и добавляли карбонилдиимидазол (2,1 г, 12,8 ммоль). Смесь перемешивали при 15°С в течение 30 минут и затем выливали в борогидрид натрия (4,9 г, 64 ммоль) в метаноле (30 мл), перемешивали в течение 15 минут. Реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и DCM (100 мл) и экстрагировали с помощью DCM (50 мл × 3). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 1:1) с получением 1,0 г соединения 107-4, выход: 34,4%.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,59 (br. s., 1Н), 7,84 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,48-7,64 (m, 1H), 7,41 (dd, J=6,4, 8,8 Гц, 1H), 7,32 (dd, J=2,4, 8,0 Гц, 1H), 7,02 (d, J=5,6 Гц, 1H), 6,02-6,25 (m, 1H), 4,04 (d, J=7,2 Гц, 4H), 3,27-3,38 (m, 1H), 3,19 (br. s., 1H), 1,11 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
Стадия 4 (синтез примера 107)
Соединение 107-4 (200 мг, 0,44 ммоль) растворяли в безводном тетрагидрофуране (10 мл) и добавляли трифосген (196 мг, 0,66 ммоль), смесь перемешивали при 15°С в течение 10 минут. К реакционной смеси добавляли калия трет-бутоксид (1,32 мл, 1,32 ммоль, 1Mb THF), смесь перемешивали в течение 60 минут. Реакционную смесь разбавляли водой (20 мл) и DCM (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (20 мл × 3). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали с помощью препаративной пластины с силикагелем с получением неочищенного продукта, который в дальнейшем очищали посредством препаративной хроматографии с получением 11 мг примера 107, выход: 5,2%.
Данные ЯМР примера 107: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,80-7,88 (m, 1Н), 7,53 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,35-7,42 (m, 1H), 7,33 (dd, J=2,4, 8,0 Гц, 1H), 6,88-7,13 (m, 1H), 5,99-6, 27 (s, 1H), 4, 66-4, 75 (m, 1H), 4,07 (q, J=7,0 Гц, 2H), 3,30-3,68 (m, 1H), 3,01-3,09 (m, 2H), 1,13 (t, J=7,0 Гц, 3Н). LCMS (ESI) масса/заряд: 479, 9 [M+H+].
Пример 108
Стадия 1 (синтез соединения 108-3)
Соединение 108-1 (1,0 г, 4,3 ммоль) растворяли в безводном этаноле (30 мл) и добавляли 2-бром-4-фторбензальдегид (883 мг, 4,3 ммоль), тиазолдикарбоксамидина гидрохлорид (709 мг, 4,3 ммоль), ацетат натрия (1,06 г, 12,9 ммоль). Реакционную смесь медленно нагревали до температуры возврата флегмы и реакционную смесь перемешивали с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и затем экстрагировали с помощью EtOAc (40 мл × 3). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 600 мг продукта 108-3, выход: 27%. LCMS (ESI) масса/заряд: 524, 0 [М+Н+].
Стадия 2 (синтез соединения 108-4)
Соединение 108-4 (600 мг, 1,1 ммоль) растворяли в метаноле (8 мл) и воде (8 мл) и добавляли LiOH (264 мг, 11 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 15°С в течение 16 часов. Когда TLC (РЕ:ЕА; 5:1) показывала завершение реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта. К неочищенному продукту добавляли EtOAc (30 мл) и воду (20 мл) с последующим медленным добавлением 1 н. НСl для регулирования рН=1 и экстракцией с помощью EtOAc (30 мл × 3). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 400 мг соединения 10 8-4, выход: 71%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 496 [М+Н+].
Стадия 3 (синтез примера 108)
Соединение 108-4 (270 мг, 0,54 ммоль) растворяли в безводном тетрагидрофуране (10 мл) и добавляли HATU (310 мг, 0,82 ммоль), DIPEA (209 мг, 1,62 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 20°С в течение 16 часов. Когда LC-MS показывала завершение реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и затем экстрагировали с помощью EtOAc (40 мл × 3). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 66 мг примера 108, выход: 26%.
Данные ЯМР примера 108: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,78 (m, 1Н), 7,37 (d, J=3,2 Гц, 2H), 7,04 (m, 1H), 6,95 (dd, J=2,4, 8,0 Гц, 1H), 6,30 (s, 1H), 4,20-4,08 (m, 2H), 3,40-3,34 (m, 2H), 2,87 (t, J=6,4 Гц, 1H), 2,56 (d, J=7,2 Гц, 1H), 2,22-2,08 (m, 2H), 1,18 (m, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 478,0 [M+H+].
Пример 109
Стадия 1 (синтез соединения 109-2)
Соединение 109-1 (1,34 г, 5,8 ммоль) растворяли в безводном этаноле (30 мл) и добавляли 2-хлор-4-фторбензальдегид (1,08 г, 5,8 ммоль), тиазолдикарбоксамидина гидрохлорид (0,95 г, 5,8 ммоль), ацетат натрия (1,1 г, 17,4 ммоль). Реакционную смесь медленно нагревали до температуры возврата флегмы и реакционную смесь перемешивали с обратным холодильником в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и впоследствии экстрагировали с помощью EtOAc (40 мл × 3). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 5:1) с получением 1,5 г соединения 109-2, выход: 62%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 480,0 [М+Н+].
Стадия 2 (синтез соединения 109-3)
Соединение 109-2 (1,5 г, 3,1 ммоль) растворяли в тетрагидрофуране (20 мл) и воде (20 мл) и добавляли LiOH (394 мг, 9,3 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 15°С в течение 16 часов. Когда TLC (РЕ:ЕА; 5:1) показывала завершение реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением неочищенного продукта. К неочищенному продукту добавляли EtOAc (30 мл) и воду (20 мл) с последующим медленным добавлением 1 н. НСl для регулирования рН=1 и экстракцией с помощью EtOAc (3 × 30 мл). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении с получением 1,3 г соединения 109-3, выход: 93%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 452, 0 [М+Н+].
Стадия 3 (синтез соединения 109-4)
Соединение 109-3 (500 мг, 1,11 ммоль) растворяли в безводном DCM (20 мл) и добавляли карбонилдиимидазол (360 мг, 2,22 ммоль), смесь перемешивали при 15°С в течение 30 минут. Реакционную смесь выливали в борогидрид натрия (360 мг, 2,22 ммоль) в метаноле (20 мл) и перемешивали в течение 15 минут. Реакционную смесь разбавляли водой (50 мл) и DCM (100 мл) и экстрагировали с помощью DCM (50 мл × 3). Органический слой промывали насыщенным солевым раствором (30 мл × 2). Органические фазы объединяли, сушили над безводным сульфатом натрия и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении и очищали при помощи колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 3:1) с получением 300 мг соединения 109-4, выход: 61,7%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 437,9 [М+Н+].
Стадия 4 (синтез соединения 109-5)
Соединение 109-4 (300 мг, 0,68 ммоль) растворяли в безводном DCM (10 мл) и при комнатной температуре добавляли триэтиламин (206 мг, 2,04 ммоль), метансульфонилхлорид (118 мг, 1,03 ммоль). После добавления всю смесь перемешивали в атмосфере азота в течение 15 часов. Когда TLC (РЕ:EtOAc; 1:1) показала, что исходные материалы исчезли, реакционную смесь выливали в насыщенный раствор бикарбоната натрия (15 мл) и экстрагировали с помощью DCM (20 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (10 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (10 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью флеш-хроматографии с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 100:1-5:1) с получением 130 мг соединения 109-5, выход: 36,8%.
LCMS масса/заряд: 516,1 [М+Н+].
Стадия 5 (синтез примера 109)
Соединение 109-5 (130 мг, 0,25 ммоль) растворяли в безводном ацетонитриле (10 мл) и при комнатной температуре добавляли карбонат калия (69 мг, 0,5 ммоль). После добавления всю смесь перемешивали в атмосфере азота при 45°С в течение 1 часа. Когда LC-MS показала завершение реакции, смесь концентрировали в вакууме с последующим добавлением воды (10 мл) и экстракцией с помощью DCM (20 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (10 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (10 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали посредством препаративной хроматографии с получением 35 мг примера 109, выход: 33,2%.
Данные ЯМР примера 109: 1Н ЯМР (400 МГц, MeOD-d4) δ: 7,95 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,73 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,38 (dd, J=6,4, 8,8 Гц, 1H), 7,28 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,09 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,12 (s, 1H), 4,20-4,30 (m, 1H), 4,03-4,17 (m, 2H), 3,61 (td, J=6,0, 16,4 Гц, 1H), 3,44 (ddd, J=4,2, 8,0, 12,8 Гц, 1H), 3,00-3,13 (m, 1H), 2,04-2,17 (m, 1H), 1,93 (quin, J=6,8 Гц, 2H), 1,75-1,86 (m, 1H), 1,18 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS масса/заряд: 420, 0 [M+H+].
Пример 110
Стадия 1 (синтез соединения 110-2)
Соединение 110-1 (1,07 г, 3,57 ммоль) растворяли в безводном тетрагидрофуране (10 мл) и при комнатной температуре добавляли калия трет-бутоксид (400 мг, 3,57 ммоль). После добавления всю смесь перемешивали в атмосфере азота при 20°С в течение 0,5 часа с последующим добавлением примера 23-1 (600 мг, 1,19 ммоль) и всю смесь перемешивали в атмосфере азота при 20°С в течение 16 часов. Когда LC-MS показала завершение реакции, смесь концентрировали в вакууме с последующим добавлением 10 мл воды и экстракцией с помощью DCM (20 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (10 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (10 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и выпаривали досуха посредством вращения с получением 84 0 мг продукта, который непосредственно использовали на следующей стадии без очистки. Выход, 98%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 723,9 [М+Н+].
Стадия 2 (синтез соединения 110-3)
Соединение 110-2 (840 мг, 1,16 ммоль) растворяли в безводном тетрагидрофуране (10 мл) и при комнатной температуре добавляли TBAF (10 ммоль, 10 мл, 1Mb THF). После добавления всю смесь перемешивали в атмосфере азота при 20°С в течение 16 часов. Когда LC-MS показала завершение реакции, смесь концентрировали в вакууме, с последующим добавлением воды (10 мл) и экстракцией с помощью DCM (20 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (10 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (10 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали, выпаривали досуха посредством вращения и очищали посредством препаративной хроматографии (РЕ:ЕА=1:1) с получением 300 мг соединения 110-3, выход: 53%.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 9,08 (br. s., 1Н), 7,82 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,43 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,36-7,29 (m, 2H), 6,97 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,18 (s, 1H), 4,96 (d, J=2,0 Гц, 2H), 4,11-3,97 (m, 2H), 3,90 (br. s., 2H), 3,84-3,69 (m, 2H), 1,13 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 486, 0 [M+H+].
Стадия 3 (синтез соединения 110-4)
Соединение 110-3 (280 мг, 0,58 ммоль) растворяли в безводном DCM (10 мл) и при комнатной температуре добавляли триэтиламин (17 6 мг, 1,74 ммоль), метансульфонилхлорид (132 мг, 1,16 ммоль). После добавления всю смесь перемешивали в атмосфере азота в течение 15 часов. Когда TLC (РЕ:EtOAc; 1:1) показала, что исходные материалы исчезли, реакционную смесь выливали в насыщенный раствор бикарбоната натрия (15 мл) и экстрагировали с помощью DCM (20 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (10 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (10 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью флеш-хроматографии с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 3:1) с получением 150 мг соединения 110-4, выход, 46%.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 8,95 (br. s., 1Н), 7,83 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,47 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,40-7,31 (m, 1H), 7,00 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,20 (s, 1H), 5,09-4,92 (m, 2H), 4, 58-4, 44 (m, 2H), 4,13-4,00 (m, 2H), 4,00-3,90 (m, 2H), 3,17 (s, 3H), 1,15 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 564, 0 [M+H+].
Стадия 4 (синтез примера 110)
Соединение 110-4 (140 мг, 0,24 ммоль) растворяли в безводном ацетонитриле (5 мл) и при комнатной температуре добавляли калия карбонат (68 мг, 0,50 ммоль). После добавления всю смесь перемешивали в атмосфере азота при 90°С в течение 16 часов. Когда LC-MS показала завершение реакции, смесь концентрировали в вакууме с последующим добавлением 10 мл воды и экстракцией с помощью DCM (20 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (10 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (10 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали посредством препаративной хроматографии с получением 64 мг примера 110. Выход, 52%.
Данные ЯМР примера 110: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,82 (d, J=3,6 Гц, 1Н), 7,42-7,34 (m, 2Н), 7,31-7,27 (т, 1Н), 7,01 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1Н), 6,14 (s, 1Н), 5,29 (d, J=16,8 Гц, 1Н), 5,00 (d, J=16,8 Гц, 1Н), 4,80 (ddd, J=4,0, 6,8, 12,4 Гц, 1Н), 4,15-4,05 (m, 2Н), 4,04-3,97 (m, 1Н), 3,96-3,86 (m, 1Н), 3,64 (ddd, J=3,6, 6,8, 12,4 Гц, 1Н), 1,14 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 467,9 [М+1].
Пример 111
Пример получали согласно способу, который описан в примере 107.
Данные ЯМР примера 111: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,85 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,44 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,16-7,25 (m, 2Н), 6,98 (dt, J=2,2, 8,0 Гц, 1Н), 6,39 (s, 1Н), 4,55-4,72 (m, 2Н), 4,11-4,22 (m, 2Н), 3,83 (d, J=19,58 Гц, 1Н), 3,32-3,43 (m, 1Н), 1,22 (t, J=7,15 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 436,0 [М+Н+].
Пример 112
Стадия 1 (синтез соединения 112-1)
Соединение 107-4 (150 мг, 0,33 ммоль) растворяли в безводном DCM (10 мл) и при комнатной температуре добавляли триэтиламин (101 мг, 1,0 ммоль), метансульфонилхлорид (56 мг, 0,5 ммоль), смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и затем экстрагировали с помощью DCM (20 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (20 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (20 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 10:1) с получением 120 мг соединения 112-1, выход: 68%.
1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,80-7,88 (m, 1Н), 7,53 (d, J=3,01 Гц, 1Н), 7,35-7,42 (m, 1Н), 7,33 (dd, J=2,52, 8,03 Гц, 1Н), 6,88-7,13 (m, 1Н), 6,0 (s, 1Н), 4,66-4,75 (m, 1Н), 4,07 (q, J=7,04 Гц, 2Н), 3,30-3,68 (m, 1Н), 3,01-3,09 (m, 3Н), 1,99-2,06 (m, 2Н), 1,13 (t, J=7,04 Гц, 3Н).
Стадия 2 (синтез примера 112) Соединение 112-1 (100 мг, 0,19 ммоль) растворяли вацетонитриле (3 мл) и при комнатной температуре добавляли карбонат калия (52 мг, 0,38 ммоль). Температуру повышали до 45°С и смесь перемешивали при этой температуре в течение 1 часа. Реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении и затем экстрагировали с помощью DCM (20 мл × 3). Органические фазы объединяли, последовательно промывали водой (20 мл × 2), насыщенным раствором хлорида натрия (20 мл × 2), сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и очищали с помощью колоночной хроматографии на силикагеле с системой элюентов (РЕ:EtOAc = 2:1) с получением 28 мг примера 112. Выход: 34%.
Данные ЯМР примера 112: 1Н ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,84 (d, J=3,2 Гц, 1Н), 7,36-7,44 (m, 2Н), 7,31 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1Н), 6,97 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1Н), 6,17 (s, 1Н), 4,61-4,77 (m, 2Н), 4,11 (ttd, J=3,60, 7,2, 10,4 Гц, 2Н), 3,37-3,58 (m, 2Н), 1,22 (t, J=7,2 Гц, 3Н).
LCMS (ESI) масса/заряд: 435,8 [М+Н+].
Примеры 113, 114
Стадия 1 (синтез 113-3)
Соединение 113-2 (1,27 г, 7,94 ммоль) растворяли в безводном DMF (100 мл) и при 0°C добавляли по порциям NaH (238,2 мг, 5,96 ммоль, 1,5 экв.), смесь перемешивали при этой температуре в течение 15 минут. Впоследствии, к реакционной смеси добавляли 113-1 (2,0 г, 3,97 ммоль, 1,0 экв.) и реакционную смесь нагревали до 16°C и продолжали перемешивание в течение 3 часов. Реакционную смесь гасили насыщенным раствором хлорида аммония, экстрагировали с помощью EtOAc (300 мл) 3 раза и промывали водой (150 мл) 3 раза. Органические фазы сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колонки силикагеля с раствором-элюентом PE:EtOAc =3:1 с получением 1,76 г продукта, выход: 76%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 583,7 [M+H+].
Стадия 2 (синтез 113-4)
Соединение 113-3 (1,76 г, 3,02 ммоль, 1,0 экв.) растворяли в безводном THF (50 мл) и при 0°C добавляли по порциям борогидрид натрия (571 мг, 15,1 ммоль, 5,0 экв.). После добавления реакционную смесь нагревали до 60°C и смесь перемешивали в течение 18 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, гасили водой (50 мл) и экстрагировали с помощью DCM (100 мл) 3 раза. Органические фазы сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колонки силикагеля с раствором-элюентом DCM: метанол =20:1 с получением 780 мг продукта, выход: 39%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 521,7 [M+Na+].
Стадия 3 (синтез 113-5)
Соединение 113-4 (2,70 г, 5,42 ммоль, 1,0 экв.) растворяли в безводном DCM (100 мл) и при 15°C последовательно добавляли триэтиламин (1,65 г, 16,26 ммоль, 3,0 экв.), метансульфонилхлорид (7,67 г, 66,96 ммоль, 12,35 экв.). После добавления смесь перемешивали в течение 18 часов. Реакционную смесь гасили водой (100 мл) и экстрагировали с помощью DCM (200 мл) 3 раза. Органические фазы сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колонки силикагеля с раствором-элюентом DCM:метанол = 20:1 с получением 1,4 г продукта, выход: 46%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 582,0 [M+Na+].
Стадия 4 (синтез 113-6)
Соединение 113-5 (200 мг, 358,14 мкмоль, 1,0 экв.) растворяли в безводном DMA (8 мл) и при 20°C добавляли тиометоксид натрия (30 мг, 429,77 мкмоль, 1,2 экв.). После добавления смесь перемешивали в течение 3 часов. Реакционную смесь гасили водой (10 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (50 мл) 3 раза. Органические фазы сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колонки силикагеля с раствором-элюентом PE:EtOAc =3:1 с получением 160 мг продукта, выход: 88%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 512,0 [M+H+].
Стадия 5 (синтез 113, 114)
Соединение 113-6 (160 мг, 313 мкмоль, 1,0 экв.) растворяли в безводном DCM (10 мл) и при 20°C добавляли мета-хлорпербензойную кислоту (81 мг, 470 мкмоль, 1,5 экв.). После добавления смесь перемешивали в течение 3 часов с последующим дополнительным добавлением мета-хлорпербензойной кислоты (27 мг, 156 мкмоль, 0,5 экв.) и продолжали перемешивание в течение 3 часов. Реакционную смесь гасили с помощью 1 M карбоната калия (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (20 мл) 3 раза. Органические фазы сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток разделяли посредством хиральной колонки с соответствующим получением 50 мг примера 113, выход: 29%, 23 мг примера 114, выход: 13%.
Данные ЯМР примера 113: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,82 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,38 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,33 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,22 (dd, J=6,0, 8,4 Гц, 1H), 6,99 (dt, J=2,4, 8,0 Гц, 1H), 6,17 (s, 1H), 4,76 (dd, J=7,0, 12,0 Гц, 1H), 4,31 (dd, J=5,2, 11,80 Гц, 1H), 4,05 (q, J=7,0 Гц, 2H), 3,57 (dd, J=8,0, 18,0 Гц, 1H), 3,17-3,25 (m, 3H), 3,05-3,15 (m, 1H), 3,02 (s, 3H), 1,13 (t, J=7,0 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 544,1 [M+H+].
Данные ЯМР примера 114: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,82 (d, J=3,01 Гц, 1H), 7,38 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,34 (dd, J=2,4, 8,0 Гц, 1H), 7,22-7,26 (m, 1H), 6,99 (dt, J=2,4, 8,2 Гц, 1H), 6,16 (s, 1H), 4,78 (dd, J=7,6, 11,6 Гц, 1H), 4,13 (d, J=10,0 Гц, 1H), 4,02-4,10 (m, 2H), 3,83 (dd, J=7,6, 17,6 Гц, 1H), 3,23-3,35 (m, 2H), 3,05-3,13 (m, 1H), 3,04 (s, 3H), 2,88 (dd, J=10,2, 17,2 Гц, 1H), 1,16 (t, J=7,0 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 544,0 [M+H+].
Пример 115
Стадия 1 (синтез 115-3)
Соединение 115-1 (1,51 г, 3,0 ммоль, 1,0 экв.), 115-2 (4,12 г, 30 ммоль, 10,0 экв.) растворяли в ацетонитриле (10 мл) и при 20°C в атмосфере азота добавляли карбонат калия (4,15 г, 30 ммоль, 10 экв.). После добавления смесь перемешивали в течение 6 часов. Реакционную смесь концентрировали. Остаток добавляли к смеси льда с водой (вес/вес, 10 мл), перемешивали в течение 20 минут. Водную фазу экстрагировали с помощью EtOAc (20 мл) 3 раза. Органические фазы сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колонки силикагеля с получением 1,2 г продукта, выход: 71%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 561,1 [M+H+].
Стадия 2 (синтез 115)
Соединение 115-3 (168 мг, 300,2 мкмоль, 1,0 экв.), 115-4 (74 мг, 300,3 мкмоль, 1,0 экв.) растворяли в ацетонитриле (5 мл) и в атмосфере азота при 28°C добавляли карбонат калия (83 мг, 600,58 мкмоль, 2 экв.). После добавления смесь перемешивали в течение 48 часов. Реакционную смесь концентрировали. Остаток добавляли к смеси льда с водой (вес/вес, 10 мл), перемешивали в течение 20 минут. Водную фазу экстрагировали с помощью EtOAc (20 мл) 3 раза. Органические фазы сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колонки силикагеля с получением 50 мг продукта.
Данные ЯМР примера 115: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ: 7,91 (dd, J=6,2, 8,6 Гц, 1H), 7,74 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,33-7,39 (m, 2H), 7,26 (d, J=8,6 Гц, 2H), 7,12 (dt, J=2,6, 8,4 Гц, 1H), 6,90 (d, J=8,4 Гц, 2H), 6,34 (t, J=3,8 Гц, 1H), 6,19 (s, 1H), 4,80 (d, J=16,6 Гц, 1H), 3,91-4,14 (m, 2H), 3,77-3,87 (m, 4H), 3,44-3,59 (m, 5H), 3,25 (dd, J=2,4, 11,8 Гц, 1H), 2,77 (dd, J=4,2, 11,8 Гц, 1H), 1,11 (t, J=7,0 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 644,5 [M+H+].
Примеры 116, 117
Стадия 1 (синтез 116-3)
Соединение 116-1 (150 мг, 322,34 мкмоль, 1,0 экв.) растворяли в безводном DCM (10 мл) и при 20°C последовательно добавляли DBU (147 мг, 967,02 мкмоль, 3.0 экв.), 116-2 (92 мг, 644,68 мкмоль, 2,0 экв.). После добавления смесь перемешивали в течение 6 часов. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь гасили водой (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (20 мл) 3 раза. Органические фазы сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колонки силикагеля с раствором-элюентом PE:EtOAc = 100:1-1:1 с получением 87 мг продукта, выход: 27%.
Стадия 2 (синтез 116, 117)
Соединение 116-3 (87 мг, 0,15 ммоль) хирально разделяли с получением соединений 116 (8 мг), 117 (12 мг).
Данные ЯМР примера 116: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,80 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,37 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,35-7,27 (m, 2H), 6,99 (dt, J=2,3, 8,2 Гц, 1H), 6,16 (s, 1H), 4,54 (d, J=8,5 Гц, 2H), 4,50-4,44 (m, 1H), 4,31 (d, J=2,5 Гц, 1H), 4,10-4,01 (m, 2H), 3,52-3,43 (m, 1H), 3,41-3,31 (m, 1H), 3,20 (td, J=6,8, 13,6 Гц, 1H), 1,39 (d, J=6,8 Гц, 6H), 1,14 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 572,4 [M+H+].
Данные ЯМР примера 117: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,81 (br. s., 1H), 7,38 (br. s., 1H), 7,32 (d, J=7,3 Гц, 1H), 7,22 (br. s., 1H), 6,98 (br. s., 1H), 6,14 (br. s., 1H), 4,56 (d, J=6,8 Гц, 2H), 4,37 (d, J=11,0 Гц, 1H), 4,28 (d, J=6,3 Гц, 1H), 4,04 (d, J=6,8 Гц, 2H), 3,68 (dd, J=6,5, 17,6 Гц, 1H), 3,31-3,11 (m, 2H), 1,41 (d, J=5,5 Гц, 6H), 1,12 (br. s., 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 572,4 [M+H+].
Пример 118
Стадия 1 (синтез 118)
Соединение 118-1 (80 мг, 171,9 мкмоль, 1,0 экв.), 118-2 (35 мг, 343,8 мкмоль, 2,0 экв.) растворяли в безводном DMF (2 мл) и при 20°C последовательно добавляли HATU (130 мг, 343,8 мкмоль, 2,0 экв.), TEA (87 мг, 859,6 мкмоль, 5,0 экв.). После добавления смесь перемешивали в течение 2 часов. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь гасили водой (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (20 мл) 3 раза. Органические фазы сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством инструментального разделения (система с водным раствором аммиака) с получением 22 мг примера 118 в виде желтого твердого вещества, выход: 23%.
Данные ЯМР примера 118: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,83 (d, J=3,3 Гц, 1H), 7,44-7,40 (m, 1H), 7,37 (dd, J=2,5, 8,3 Гц, 1H), 7,12 (dd, J=6,0, 8,8 Гц, 1H), 6,98 (dt, J=2,5, 8,3 Гц, 1H), 6,19-6,16 (m, 1H), 5,12 (d, J=16,1 Гц, 1H), 5,01-4,79 (m, 6H), 4,25-4,01 (m, 5H), 3,74-3,62 (m, 1H), 1,23-1,12 (m, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 551,1 [M+H+].
Примеры 119, 120
Стадия 1 (синтез 119-2)
Соединение 119-1 (100 мг, 179,1 мкмоль, 1,0 экв.) растворяли в ацетонитриле (4 мл) и последовательно добавляли NH3.H2O (1 мл), йодид натрия (5 мг, 35,8 мкмоль, 0,2 экв.). После добавления смесь вступала в реакцию при 110°C в запаянной трубке в течение 5 часов. При обнаружении завершения реакции смесь охлаждали до комнатной температуры, и концентрировали при пониженном давлении с получением 60 мг неочищенного продукта, и неочищенный продукт непосредственно использовали для следующей реакции.
Стадия 2 (синтез 119, 120)
Соединение 119-1 (60 мг, 125,2 мкмоль, 1,0 экв.) растворяли в безводном DCM (3 мл) и при 20°C последовательно добавляли TEA (126 мг, 1,25 ммоль, 10 экв.), Ac2O (127 мг, 1,25 ммоль, 10 экв.). После добавления смесь перемешивали в течение 3 часов. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь гасили водой (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (20 мл) 3 раза. Органические фазы сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством инструментального разделения с получением примера 119 (10 мг), примера 120 (44 мг).
Данные ЯМР примера 119: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ : 7,81 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,38 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,33 (dd, J=2,4, 8,0 Гц, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,25 (s, 1H), 7,00 (dt, J=2,4, 8,0 Гц, 1H), 6,16 (s, 1H), 5,77 (br. s., 1H), 4,43 (dd, J=7,2, 11,6 Гц, 1H), 4,15 (dd, J=3,2, 11,6 Гц, 1H), 3,98-4,11 (m, 2H), 3,34 (t, J=6,8 Гц, 2H), 3,09-3,29 (m, 1H), 2,72 (dt, J=3,6, 7,2 Гц, 1H), 2,03 (s, 3H), 1,14 (t, J=6,8 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 522,0 [M+H+].
Данные ЯМР примера 120: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ : 7,82 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,39 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,33 (dd, J=2,4, 8,0 Гц, 1H), 7,24 (dd, J=6,4, 8,8 Гц, 1H), 6,97 (dt, J=2,4, 8,0 Гц, 1H), 6,15 (s, 1H), 5,82 (br. s., 1H), 4,41 (dd, J=7,2, 11,2 Гц, 1H), 3,96-4,20 (m, 3H), 3,52 (dd, J=7,6, 18,0 Гц, 1H), 3,42 (t, J=6,8 Гц, 2H), 2,80-2,92 (m, 1H), 2,69-2,79 (m, 1H), 2,03 (s, 3H), 1,15 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 522,0 [M+H+].
Примеры 121, 122
Примеры 121, 122 синтезировали согласно тому же способу, который описан в примерах 119, 120.
Отношение массы к заряду примера 121: LCMS (ESI) масса/заряд: 583,1 [M+H+].
Данные ЯМР примера 122: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ : 7,82 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,39 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,33 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,24 (dd, J=6,0, 8,4 Гц, 1H), 6,98 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,16 (s, 1H), 4,73 (t, J=6,4 Гц, 1H), 4,42 (dd, J=7,2, 11,2 Гц, 1H), 4,24 (dd, J=7,6, 11,6 Гц, 1H), 4,06 (dq, J=4,0, 7,2 Гц, 2H), 3,52 (dd, J=7,6, 18,0 Гц, 1H), 3,33-3,43 (m, 1H), 3,21-3,32 (m, 1H), 2,92 (dd, J=8,0, 18,0 Гц, 1H), 2,74 (quin, J=7,2 Гц, 1H), 2,38-2,52 (m, 1H), 1,20 (d, J=3,6 Гц, 2H), 1,15 (t, J=7,2 Гц, 3H), 0,96-1,09 (m, 2H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 582,9 [M+H+].
Пример 123
Стадия 1 (синтез 123)
Соединение 123-1 (20 мг, 42,98 мкмоль, 1,0 экв.) растворяли в безводном пиридине (0,5 мл) и при 20°C последовательно добавляли DMAP (10,5 мг, 85,96 мкмоль, 2,0 экв.), 123-2 (9,7 мг, 64,5 мкмоль, 1,5 экв.). После добавления смесь перемешивали в течение 0,5 часа. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь гасили водой (5 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (10 мл) 3 раза. Органические фазы сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством пластинки для препаративной хроматографии с получением 2,8 мг продукта, выход: 11%.
Данные ЯМР примера 123: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,83 (d, J=3,51 Гц, 1H), 7,40 (d, J=3,01 Гц, 1H), 7,34 (dd, J=2,51, 8,03 Гц, 1H), 7,29 (br. s., 1H), 6,99 (dt, J=2,51, 8,03 Гц, 1H), 6,18 (s, 1H), 6,11-6,40 (m, 1H), 5,31 (br. s., 1H), 4,59-4,71 (m, 1H), 4,43-4,53 (m, 2H), 4,03-4,12 (m, 2H), 3,59 (d, J=19,07 Гц, 1H), 3,40 (dd, J=6,53, 18,57 Гц, 1H), 1,16 (t, J=7,03 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 581,0 [M+H+].
Примеры 124, 125, 126, 128, 129, 130, 132, 137, 138, 140, 141, 144, 145, 148, 149, 150, 151, 153, 154, 155, 156, 158, 159, 160, 162, 163, 164, 165, 167, 168, 170, 172, 173, 174, 175 синтезировали согласно тому же способу, который описан в примере 123.
Пример 124
Данные ЯМР примера 124: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,83 (d, J=3,6 Гц, 1H), 7,41 (d, J=3,6 Гц, 1H), 7,33 (dd, J=2,6, 8,4 Гц, 1H), 7,23 (dd, J=6,0, 8,4 Гц, 1H), 6,99 (dt, J=2,6, 8,4 Гц, 1H), 6,15 (s, 1H), 6,11-6,42 (m, 1H), 5,70 (br. s., 1H), 4,53-4,62 (m, 1H), 4,39-4,53 (m, 2H), 4,00-4,10 (m, 2H), 3,69 (dd, J=7,2, 18,2 Гц, 1H), 3,27 (dd, J=6,0, 18,2 Гц, 1H), 1,13 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 581,0 [M+H+].
Пример 125
Данные ЯМР примера 125: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,84 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,41 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,24-7,28 (m, 1H), 7,15 (dd, J=2,6, 8,4 Гц, 1H), 6,96 (dt, J=2,6, 8,4 Гц, 1H), 6,19 (s, 1H), 4,76 (d, J=7,6 Гц, 1H), 4,47-4,60 (m, 2H), 4,32 (sxt, J=6,8 Гц, 1H), 4,07 (q, J=7,0 Гц, 2H), 3,68 (dd, J=7,2, 18,0 Гц, 1H), 3,19 (dd, J=6,4, 18,0 Гц, 1H), 3,09 (s, 3H), 1,15 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 499,2 [M+H+].
Пример 126
Данные ЯМР примера 126: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,84 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,41 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,33 (dd, J=6,2, 8,6 Гц, 1H), 7,16 (dd, J=2,6, 8,6 Гц, 1H), 6,98 (dt, J=2,6, 8,2 Гц, 1H), 6,20 (s, 1H), 4,72 (d, J=6,2 Гц, 1H), 4,57-4,65 (m, 1H), 4,45-4,54 (m, 1H), 4,29-4,40 (m, 1H), 4,08 (q, J=7,2 Гц, 2H), 3,47-3,56 (m, 1H), 3,32-3,43 (m, 1H), 3,08 (s, 3H), 1,17 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 521,2 [M+Na+].
Пример 127
Пример 127 синтезировали согласно тому же способу, который описан в примере 123.
Данные ЯМР примера 127: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3-d6) δ : 7,97 (d, J=2,5 Гц, 1H), 7,65 (br. s., 1H), 7,43-7,37 (m, 1H), 7,34 (dd, J=2,4, 8,2 Гц, 1H), 7,05-6,95 (m, 1H), 6,29 (s, 1H), 4,82 (br. s., 2H), 4,41 (d, J=8,8 Гц, 1H), 4,08 (q, J=7,2 Гц, 2H), 3,59-3,43 (m, 2H), 2,93 (d, J=4,5 Гц, 6H), 1,15 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 559,0 [M+H+].
Пример 128
Данные ЯМР примера 128: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ :7,85 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,42 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,23-7,28 (m, 1H), 7,15 (dd, J=2,6, 8,6 Гц, 1H), 6,96 (dt, J=2,6, 8,2 Гц, 1H), 6,18 (s, 1H), 6,12-6,43 (m, 1H), 4,39-4,64 (m, 3H), 4,01-4,12 (m, 2H), 3,70 (dd, J=7,2, 18,2 Гц, 1H), 3,28 (dd, J=6,2, 18,2 Гц, 1H), 1,15 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 535,1 [M+H+].
Пример 129
Данные ЯМР примера 129: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,82 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,45 (dd, J=8,8, 12,8 Гц, 1H), 7,41 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,25 (dd, J=6,0, 8,6 Гц, 1H), 7,16 (dd, J=2,6, 8,6 Гц, 1H), 6,96 (dt, J=2,6, 8,2 Гц, 1H), 6,15 (s, 2H), 5,19 (br. s., 1H), 4,82 (d, J=11,6 Гц, 1H), 4,29-4,42 (m, 1H), 3,93-4,16 (m, 3H), 3,37-3,56 (m, 2H), 1,15 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 529,1 [M+H+].
Пример 130
Данные ЯМР примера 130: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,83 (br. s., 1H), 7,40 (br. s., 1H), 7,33 (dd, J=2,6, 8,6 Гц, 1H), 7,25 (d, J=6,0 Гц, 1H), 6,98 (dt, J=2,6, 8,2 Гц, 1H), 6,15 (s, 1H), 4,57 (dd, J=7,0, 11,0 Гц, 1H), 3,97-4,18 (m, 3H), 3,77 (t, J=4,6 Гц, 4H), 3,66 (dd, J=7,2, 17,2 Гц, 1H), 3,15 (quin, J=7,9 Гц, 1H), 2,96 (dd, J=9,2, 17,2 Гц, 1H), 2,42-2,68 (m, 4H), 1,14 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 491,0 [M+H+].
Пример 131
Стадия 1 (синтез 131-2)
В сухой трехгорлой колбе соединение 131-1 (18,00 г, 99,43 ммоль, 1,0 экв.) растворяли в тионилхлориде (59,15 г, 497,15 ммоль, 5,0 экв.), и смесь нагревали до 80°C, перемешивали в течение 1 часа, и затем охлаждали до 50°C. Br2 (31,78 г, 198,8 ммоль, 2,0 экв.) добавляли к реакционной смеси, при 50°C смесь перемешивали в течение 40 часов. Реакционную смесь охлаждали до 30°C и осторожно добавляли безводный метанол (40 мл), затем смесь нагревали до 50°C и продолжали перемешивание в течение 1 часа. Реакционную смесь охлаждали до 25°C и концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли с помощью EtOAc и промывали насыщенным сульфитом натрия. Органическую фазу промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 20 г неочищенного продукта в виде желтого масла. Неочищенный продукт непосредственно использовали для следующей реакции.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 4,28 (q, J=6,0 Гц, 2H), 3,80 (s, 3H), 3,43 (t, J=6,0 Гц, 2H), 1,95-2,26 (m, 3H)
Стадия 2 (синтез 131)
Соединение 131-3 (80 мг, 190,1 мкмоль, 1,0 экв.) растворяли в ацетонитриле (2 мл) и при 0°C медленно и последовательно добавляли 131-2 (52,1 мг, 190,1 мкмоль, 1,0 экв.), карбонат калия (138 мг, 998,4 мкмоль, 5,25 экв.). После добавления реакционную смесь продували с помощью азота 3 раза, нагревали до 85°C и перемешивали в течение 24 часов. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством инструментального разделения (система с HCl) с получением целевого продукта.
Данные ЯМР примера 131: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ : 8,30 (s, 2H), 7,82 (dd, J=5,90, 8,66 Гц, 1H), 7,36 (dd, J=1,25, 8,53 Гц, 1H), 7,23 (dt, J=2,26, 8,28 Гц, 1H), 6,39 (d, J=10,79 Гц, 1H), 4,91-5,02 (m, 1H), 4,64-4,82 (m, 3H), 4,12-4,20 (m, 2H), 3,87-4,00 (m, 3H), 3,84 (s, 2H), 3,69-3,81 (m, 1H), 3,53 (dd, J=8,66, 17,94 Гц, 1H), 2,63 (dd, J=8,28, 13,05 Гц, 1H), 2,21-2,41 (m, 2H), 2,06-2,17 (m, 1H), 1,16 (dt, J=4,77, 7,03 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 533,1 [M+H+].
Пример 132
Данные ЯМР примера 132: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ : 8,30 (s, 1H), 8,00 (br. s., 1H), 7,94 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,86 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,36-7,50 (m, 2H) 7,79 (s, 1H), 7,15 (td, J=8,4, 2,6 Гц, 1H), 6,00 (s, 1H), 4,36 (dd, J=11,2, 6,8 Гц, 1H), 4,09-4,21 (m, 1H), 3,86-4,04 (m, 7H), 3,02 (dd, J=17,8, 6,2 Гц, 1H), 1,04 (t, J=7,0 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 565,1 [M+H+].
Пример 133
Соединение 133-2 (13,69 мг, 142,56 мкмоль, 1,2 экв.) растворяли в DCM (2 мл) и при 28°C медленно добавляли CDI (38,53 мг, 237,60 мкмоль, 2,0 экв.). Смесь перемешивали в течение 10 минут. К реакционной смеси добавляли раствор 133-1 (50 мг, 118,80 мкмоль, 1,0 экв.) в DCM (1 мл). Реакционную смесь дополнительно перемешивали в течение 20 минут. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством инструментального разделения (система с муравьиной кислотой) и можно было получить целевой продукт в виде примера 133 (12 мг, выход: 20%).
Данные ЯМР примера 133: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,84 (d, J=3,26 Гц, 1H), 7,42 (d, J=3,01 Гц, 1H), 7,30 (d, J=12,00 Гц, 1H), 7,15 (dd, J=2,51, 8,53 Гц, 1H), 6,96 (dt, J=2,64, 8,22 Гц, 1H), 6,77 (d, J=6,53 Гц, 1H), 6,21 (s, 1H), 5,95 (t, J=52,0 Гц 1H), 4,71-4,82 (m, 1H), 4,54 (d, J=5,77 Гц, 2H), 4,07 (q, J=7,19 Гц, 2H), 3,66 (dd, J=7,53, 18,32 Гц, 1H), 3,26 (dd, J=5,77, 18,32 Гц, 1H), 1,15 (t, J=7,15 Гц, 3H)
LCMS (ESI) масса/заряд: 499,2 [M+H+].
Примеры 139, 142 синтезировали согласно тому же способу, который описан в примере 133.
Примеры 134, 135, 136
Стадия 1 (синтез 134-3)
Соединение 134-1 (700 мг, 1,25 ммоль, 1,0 экв.), TEA (379 мг, 3,75 ммоль, 3,0 экв.) растворяли в безводном DCM (15 мл) и при 28°C медленно добавляли 134-2 (372 мг, 2,5 ммоль, 2 экв.). После добавления реакционную смесь продували с помощью азота 3 раза, перемешивали в течение 30 минут. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь промывали водой (10 мл) и затем экстрагировали с помощью DCM (20 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с системой элюентов PE:EtOAc＝50:1-3:1 с получением 680 мг желтого твердого вещества, выход: 81%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 672,8 [M+H+].
Стадия 2 (синтез примера 134)
Соединение 134-3 (680 мг, 1,01 ммоль, 1,0 экв.) растворяли в ацетонитриле (10 мл) и при 28°C медленно добавляли карбонат калия (700 мг, 5,07 ммоль, 5 экв.). После добавления реакционную смесь продували с помощью азота 3 раза, и затем нагревали до 90°C, и перемешивали в течение 16 часов. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток промывали водой (10 мл) и затем экстрагировали с помощью DCM (20 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с системой элюентов PE:EtOAc＝30:1-4:1 с получением 522 мг желтого твердого вещества, выход: 81%.
Данные MS примера 134: LCMS (ESI) масса/заряд: 659,1 [M+H+].
Стадия 3 (синтез примера 135)
Соединение 134 (522 мг, 824,2 мкмоль, 1,0 экв.) растворяли в безводном DCM (5 мл) и при 28°C медленно добавляли TFA (4,8 г, 42,1 ммоль, 51 экв.). После добавления реакционную смесь продували с помощью азота 3 раза и перемешивали в течение 72 часов при этой температуре. Когда LCMS показывала завершение реакции, реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и концентрировали. Остаток промывали водой (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (20 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с системой элюентов PE:EtOAc = 10:1-3:1 с получением 105 мг желтого твердого вещества, выход: 20%.
Данные ЯМР примера 135: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,90 (d, J=2,76 Гц, 1H), 7,45 (d, J=2,51 Гц, 1H), 7,40 (d, J=7,78 Гц, 1H), 7,18-7,26 (m, 1H), 7,05 (d, J=13,55 Гц, 2H), 6,24 (s, 1H), 5,48 (dd, J=4,27, 18,32 Гц, 1H), 4,86 (d, J=14,31 Гц, 1H), 4,76 (dd, J=4,39, 10,67 Гц, 1H), 4,49 (dd, J=11,17, 18,20 Гц, 1H), 4,05-4,20 (m, 2H), 1,18 (t, J=7,03 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 517,0 [M+H+].
Стадия 4 (синтез 136)
Соединение 135 (170 мг, 329,8 мкмоль, 1,0 экв.), карбонат калия (136,8 мг, 989,5 мкмоль, 5 экв.) растворяли в безводном DMF (10 мл) и при 28°C медленно добавляли йодметан (234 мг, 1,65 ммоль, 5,0 экв). После добавления реакционную смесь продували с помощью азота 3 раза и перемешивали в течение 30 минут при этой температуре. Когда LCMS показывала завершение реакции, реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток промывали водой (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (20 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с системой элюентов PE:EtOAc = 10:1-3:1 с получением 120 мг примера 136 в виде желтого твердого вещества, выход: 98%.
Данные ЯМР примера 136: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,91 (d, J=3,26 Гц, 1H), 7,45 (d, J=3,26 Гц, 1H), 7,40 (dd, J=2,51, 8,28 Гц, 1H), 7,23-7,28 (m, 1H), 7,04 (dt, J=2,51, 8,16 Гц, 1H), 6,98 (d, J=14,05 Гц, 1H), 6,25 (s, 1H), 5,32 (d, J=17,57 Гц, 1H), 4,92 (d, J=14,05 Гц, 1H), 4,76 (d, J=17,57 Гц, 1H), 4,01-4,25 (m, 2H), 2,97 (s, 3H), 1,19 (t, J=7,15 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 531,1 [M+H+].
Пример 137
Данные ЯМР примера 137: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,86 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,43 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,32-7,40 (m, 1H), 6,77-6,88 (m, 2H), 5,94 (s, 1H), 4,63-4,70 (m, 1H), 4,43-4,51 (m, 2H), 4,10 (q, J=7,0 Гц, 2H), 3,48-3,56 (m, 1H), 3,25-3,34 (m, 1H), 1,20 (t, J=7,0 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 565,2 [M+H+].
Пример 138
Данные ЯМР примера 138: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 8,09 (br. s., 1H), 7,92 (br. s., 1H), 7,71 (br. s., 1H), 6,80 (d, J=8,8 Гц, 2H), 6,50 (br. s., 1H), 6,15 (br. s., 1H), 4,79 (br. s., 1H), 4,31-4,67 (m, 2H), 4,15 (d, J=6,2 Гц, 2H), 3,72 (d, J=14,6 Гц, 1H), 3,42 (br. s., 1H), 3,02 (br. s., 3H), 1,15-1,28 (m, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 483,1 [M+H+].
Пример 139
Данные ЯМР примера 139: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,86 (d, J=3,26 Гц, 1H), 7,42 (d, J=3,01 Гц, 1H), 7,32 (d, J=12,00 Гц, 1H), 7,17 (dd, J=2,51, 8,53 Гц, 1H), 6,96 (dt, J=2,64, 8,22 Гц, 1H), 6,77 (d, J=6,53 Гц, 1H), 6,21 (s, 1H), 5,09 (d, J=5,80 Гц, 2H), 4,84 (d, J=5,80 Гц 2H), 4,71-4,82 (m, 1H), 4,55 (d, J=5,77 Гц, 2H), 4,09 (q, J=7,19 Гц, 2H), 3,66 (m, 18,32 Гц, 2H), 3,28 (dd, J=5,77, 18,32 Гц, 1H), 1,17 (t, J=7,15 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 505,2 [M+H+].
Пример 140
Данные ЯМР примера 140: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 8,14 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,60 (s, 1H), 7,13 (d, J=7,6 Гц, 1H), 7,02 (s, 1H), 6,31 (s, 1H), 4,95 (s, 1H), 4,68 (s, 1H), 4,46 (s, 1H), 4,15-4,06 (m, 2H), 3,98-3,93 (m, 1H), 3,67 (s, 2H), 1,21 (s, 12H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 525,3 [M+H+].
Пример 141
Данные ЯМР примера 141: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,99 (s, 1H), 7,77-7,70 (m, 2H), 7,10-7,08 (d, J=8,0 Гц, 1H), 6,95 (s, 1H), 6,84 (s, 1H), 6,28 (s, 1H), 4,66-4,60 (m, 2H), 4,35 (s, 1H), 4,12-4,10 (m, 1H), 3,75-3,71 (m, 1H), 3,40 (s, 1H), 3,02 (s, 3H), 1,20-1,17 (s, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 499,2 [M+H1].
Пример 142
Данные ЯМР примера 142: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ = 8,98 (s, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,73 (d, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,16 (d, J=7,6, 1H), 7,01 (s, 1H), 6,27 (s, 1H), 4,86-4,79 (m, 2H), 4,46 (s, 1H), 4,14 (m, 2H), 3,58 (s, 2H), 1,20-1,14 (m, 3H).
LCMS масса/заряд: 517,1 [M+1].
Пример 143
Стадия 1 (синтез 143-3)
Соединение 143-1 (80 мг, 190,1 мкмоль, 1,0 экв.), TEA (57,70 мг, 570,2 мкмоль, 3,0 экв.) растворяли в безводном DCM (3 мл) и при 25°C медленно добавляли 143-2 (65,6 мг, 380,1 мкмоль, 2,0 экв.). После добавления реакционную смесь продували с помощью азота 3 раза и перемешивали в течение 16 часов при этой температуре. Когда LCMS показывала завершение реакции, реакционную смесь концентрировали. Остаток промывали водой (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (20 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с системой элюентов PE:EtOAc＝10:1-3:1 с получением 25 мг желтого твердого вещества, выход: 24%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 556,8 [M+H+].
Стадия 2 (синтез примера 143)
Соединение 143-3 (25 мг, 44,9 ммоль, 1,0 экв.), моногидрат гидроокиси лития (18 мг, 448,8 мкмоль, 10 экв.) последовательно растворяли в смешанном растворе THF (1 мл) и H2O (1 мл), при 25°C смесь перемешивали в течение 1 часа. Когда LCMS показывала завершение реакции, реакционную смесь концентрировали. Остаток регулировали с помощью разбавленной HCl до pH=1, промывали водой (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (20 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством инструментального разделения (система с HCl) с получением 19 мг желтого твердого вещества, выход: 80%.
Данные MS примера 143: LCMS (ESI) масса/заряд: 543,1 [M+H+].
Пример 144
Пример 144 синтезировали согласно тому же способу, который описан в примере 123.
Данные ЯМР примера 144: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3-d) δ : 7,84 (d, J=3,01 Гц, 1H), 7,41 (d, J=3,01 Гц, 1H), 7,21-7,25 (m, 1H), 7,13 (dd, J=2,26, 8,78 Гц, 1H), 6,94 (dt, J=2,51, 8,28 Гц, 1H), 6,17 (s, 1H), 5,06 (d, J=8,03 Гц, 1H), 4,87-4,95 (m, 4H), 4,44-4,57 (m, 3H), 4,27-4,37 (m, 1H), 4,05 (q, J=7,03 Гц, 2H), 3,63 (dd, J=7,03, 18,07 Гц, 1H), 3,18 (dd, J=6,02, 18,07 Гц, 1H), 1,13 (t, J=7,03 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 541,3 [M+H+].
Пример 145
Пример 145 синтезировали согласно тому же способу, который описан в примере 123.
Данные ЯМР примера 145: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,87 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,44 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,37 (dd, J=5,6, 8,4 Гц, 2H), 7,02 (t, J=8,4 Гц, 2H), 5,84 (s, 1H), 4,65-4,46 (m, 3H), 4,34 (d, J=5,2 Гц, 1H), 4,17 (q, J=6,8 Гц, 2H), 3,49-3,40 (m, 1H), 3,36-3,27 (m, 1H), 3,04 (s, 3H), 1,26 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 465,2 [M+H+].
Пример 146
Стадия 1 (синтез 146-3)
Соединение 146-2 (1,29 г, 5,96 ммоль, 1,2 экв.) растворяли в безводном THF (300 мл) и при 25°C добавляли порциями NaH (238,4 мг, 5,96 ммоль, 1,2 экв., 60% содержание). После добавления смесь перемешивали в течение 30 минут. К реакционной смеси добавляли 146-1 (2,50 г, 4,97 ммоль, 1,0 экв.), смесь продолжали перемешивать в течение 3 часов. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь гасили водой (10 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (100 мл) 3 раза. Органические фазы сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали с помощью колонки силикагеля с раствором-элюентом PE:EtOAc =5:1 с получением 2,2 г продукта, выход: 68%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 640,1 [M+H+].
Стадия 2 (синтез 146-4)
Соединение 146-3 (2,2 г, 3,45 ммоль, 1,0 экв.) растворяли в безводном толуоле (30 мл) и при 25°C добавляли TFA (7,8 г, 69,0 ммоль, 20,0 экв.). После добавления реакционную смесь нагревали до 120°C, перемешивали в течение 5 часов. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры, концентрировали при пониженном давлении, промывали водой (50 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (100 мл) 3 раза. Органические фазы сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении с получением 2,0 г неочищенного продукта.
LCMS (ESI) масса/заряд: 483,3 [M+H+].
Стадия 3 (синтез 146-5)
Соединение 146-4 (2,0 г, 4,1 ммоль, 1,0 экв.) растворяли в безводном DCM (30 мл) и при 28°C добавляли карбонилдиимидазол (1,35 г, 8,3 ммоль, 2,0 экв.). После добавления реакционную смесь продували с помощью азота 3 раза и перемешивали в течение 30 минут при этой температуре. Когда TLC показывала завершение, реакционную смесь добавляли по каплям в раствор борогидрида натрия (1,57 г, 41,5 ммоль, 10,0 экв.) в метаноле (30 мл) и продолжали перемешивание в течение 30 минут. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь гасили разбавленной HCl, растворяли в EtOAc, промывали водой (100 мл) и затем экстрагировали с помощью EtOAc (50 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с системой элюентов PE:EtOAc = 5:1 с получением 1,04 г продукта в виде желтого масла.
LCMS (ESI) масса/заряд: 492,0 [M+Na+].
Стадия 4 (синтез 146-6)
Соединение 146-5 (1,04 г, 2,22 ммоль, 1,0 экв.) растворяли в безводном DCM (30 мл) и при 28°C последовательно добавляли TEA (673,9 мг, 6,6 ммоль, 3,0 экв.), метансульфонилхлорид (780 мг, 6,8 ммоль, 3,1 экв.). После добавления реакционную смесь перемешивали при данной температуре в течение 3 часов. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь промывали водой и экстрагировали с помощью DCM (50 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с системой элюентов PE:EtOAc = 5:1 с получением 570 мг продукта, выход: 56%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 451,0 [M+Na+].
Стадия 5 (синтез 146-7)
Соединение 146-6 (468,3 мг, 1,04 ммоль, 1,0 экв.) растворяли в тетрахлорметане (5 мл) и при 23°C последовательно добавляли NBS (277,6 мг, 1,56 ммоль, 1,5 экв.), AIBN (8,5 мг, 52. мкмоль, 0,05 экв.). После добавления реакционную смесь перемешивали при данной температуре в течение 2,5 часов. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь промывали водой и экстрагировали с помощью DCM (10 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с системой элюентов PE:EtOAc = 5:1 с получением 140 мг продукта 146-7, выход: 21%, и 150 мг 146-8, выход: 26%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 529,6 [M+H+].
Стадия 6 (синтез 146-9)
Соединение 146-7 (120 мг, 226,7 мкмоль, 1,0 экв.) растворяли в DMSO (3 мл) и при 23°C добавляли азид натрия (10 мг, 153,8 мкмоль, 0,68 экв.). После добавления реакционную смесь перемешивали при данной температуре в течение 18 часов. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь промывали водой и суспензию фильтровали. Коричневое твердое вещество промывали водой и сушили с получением 110 мг неочищенного продукта.
LCMS (ESI) масса/заряд: 491,2 [M+H+].
Стадия 7 (синтез 146-10)
Соединение 146-9 (110 мг, 223,8 мкмоль, 1,0 экв.) растворяли в этаноле (3 мл) и при 25°C добавляли Pd/C (11. мг, 223,8 мкмоль, 1,0 экв.). После добавления реакционную смесь перемешивали в атмосфере водорода (15 фунтов/кв. дюйм) в течение 16 часов. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали с получением 100 мг неочищенного продукта.
LCMS (ESI) масса/заряд: 466,9 [M+H+].
Стадия 8 (синтез примера 146)
Соединение 146-10 (100 мг, 214,9 мкмоль, 1,0 экв.) растворяли в DCM (3 мл) и при 23°C последовательно добавляли TEA (108,7 мг, 1,1 ммоль, 5,0 экв.) и метансульфонилхлорид (73,8 мг, 644,7 мкмоль, 3,0 экв.). После добавления реакционную смесь перемешивали при данной температуре в течение 1 часа. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь промывали водой и затем экстрагировали с помощью DCM (50 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством препаративной разделительной колонки с получением 6,7 мг продукта в виде белого твердого вещества, выход: 6%.
Данные ЯМР примера 146: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,84 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,40 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,35 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 7,23 (dd, J=6,4, 8,8 Гц, 1H), 6,99 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,16 (s, 1H), 5,22 (dd, J=2,0, 5,6 Гц, 1H), 4,78 (br. s., 1H), 4,54 (dd, J=8,4, 11,2 Гц, 1H), 4,38 (dt, J=5,6, 11,2 Гц, 1H), 3,99-4,16 (m, 2H), 3,19 (s, 3H), 2,84 (dd, J=5,6, 14,0 Гц, 1H), 2,12-2,25 (m, 1H), 1,14 (t, J=7,0 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 545,0 [M+H+].
Пример 147
Данные ЯМР примера 147: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 8,13 (br. s., 1H), 7,93 (br. s., 1H), 7,83 (br. s., 1H), 7,35 (d, J=6,4 Гц, 1H), 7,10 (br. s., 1H), 6,41 (br. s., 1H), 5,98 (br. s., 1H), 5,24 (br. s., 1H), 4,94 (br. s., 1H), 4,46 (br. s., 1H), 4,14 (d, J=7,0 Гц, 2H), 3,16 (s, 3H), 2,77 (br. s., 1H), 2,33 (br. s., 1H), 1,17 (t, J=6,8 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 545,0 [M+H+].
Пример 148
Данные ЯМР примера 148: 1H ЯМР (400 МГц, MeOD) δ : 8,20 (d, J=17,6 Гц, 2H), 7,43-7,52 (m, 1H), 7,28-7,38 (m, 2H), 5,83 (br. s., 1H), 4,58 (br. s., 1H), 4,36-4,45 (m, 2H), 4,14-4,24 (m, 2H), 3,76 (dd, J=6,8, 17,8 Гц, 1H), 3,24 (dd, J=7,2, 17,8 Гц, 1H), 3,07 (s, 3H), 1,24 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 483,0 [M+H+].
Пример 149
Данные ЯМР примера 149: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,82 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,40 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,23 (dd, J=6,4, 8,4 Гц, 1H), 7,14 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,93 (dt, J=2,4, 8,0 Гц, 1H), 6,16 (s, 1H), 4,81 (d, J=7,2 Гц, 1H), 4,60-4,45 (m, 2H), 4,37-4,24 (m, 1H), 3,67 (dd, J=7,2, 18,0 Гц, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,16 (dd, J=6,4, 18,0 Гц, 1H), 3,07 (s, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 485,2 [M+H+].
Пример 150
Данные ЯМР примера 150: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ : 7,98 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,88 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,63 (br. s., 1H), 7,36-7,46 (m, 2H), 7,24 (d, J=8,2 Гц, 1H), 5,88 (s, 1H), 4,44-4,54 (m, 1H), 4,20 (d, J=7,2 Гц, 2H), 3,93-4,05 (m, 2H), 3,48 (dd, J=17,4, 6,6 Гц, 1H), 3,01 (s, 4H), 1,09 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 499,2 [M+H+].
Пример 151
Данные ЯМР примера 151: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ : 7,82 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,40 (dd, J=2,6, 5,0 Гц, 2H), 7,13-7,25 (m, 2H), 6,17 (s, 1H), 4,39-4,67 (m, 2H), 4,30 (t, J=6,6 Гц, 1H), 4,05 (q, J=7,0 Гц, 2H), 3,66 (dd, J=7,2, 18,0 Гц, 1H), 3,18 (dd, J=6,6, 18,0 Гц, 1H), 3,07 (s, 3H), 1,14 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 515,1 [M+H+].
Пример 152
Данные ЯМР примера 152: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,82 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,39 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,29-7,26 (m, 1H), 7,13 (dd, J=2,4, 8,8 Гц, 1H), 6,94 (dt, J=2,4, 8,8 Гц, 1H), 6,17 (s, 1H), 4,91 (quin, J=6,4 Гц, 1H), 4,73 (d, J=7,6 Гц, 1H), 4,60-4,43 (m, 2H), 4,38-4,24 (m, 1H), 3,65 (dd, J=7,2, 17,6 Гц, 1H), 3,17 (dd, J=6,4, 18,0 Гц, 1H), 3,07 (s, 3H), 1,20 (d, J=6,4 Гц, 3H), 0,96 (d, J=6,0 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 513,1 [M+H+].
Пример 153
Данные ЯМР примера 153: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ : 10,14 (br. s., 1H), 7,97 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,87 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,53 (dd, J=6,4, 8,6 Гц, 1H), 7,40 (dd, J=2,6, 8,8 Гц, 1H), 7,15 (dt, J=2,6, 8,4 Гц, 1H), 6,02 (s, 1H), 4,24-4,60 (m, 3H), 3,82-4,09 (m, 2H), 3,54 (dd, J=7,2, 17,8 Гц, 1H), 3,15 (dd, J=5,6, 17,8 Гц, 1H), 1,05 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 553,1 [M+H+].
Пример 154
Данные ЯМР примера 154: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 9,11 (s, 1H), 7,22-7,26 (m, 1H), 7,14 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,92-7,00 (m, 1H), 6,19 (s, 1H), 5,35 (br. s., 1H), 4,65 (dd, J=6,6, 11,2 Гц, 1H), 4,45 (dd, J=6,6, 11,2 Гц, 1H), 4,30-4,39 (m, 1H), 4,06 (q, J=7,2 Гц, 2H), 3,72 (dd, J=7,2, 18,0 Гц, 1H), 3,19 (dd, J=7,2, 18,0 Гц, 1H), 3,08 (s, 3H), 1,14 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 500,1 [M+H+].
Пример 155
Данные ЯМР примера 155: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,84 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,42 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,22 (dd, J=6,0, 8,4 Гц, 1H), 7,14 (dd, J=2,6, 8,4 Гц, 1H), 6,95 (dt, J=2,6, 8,4 Гц, 1H), 6,14 (s, 1H), 4,49-4,60 (m, 2H), 4,42 (quin, J=6,6 Гц, 1H), 3,67 (dd, J=7,6, 18,6 Гц, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,30 (dd, J=6,2, 18,4 Гц, 1H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 539,3 [M+H+].
Пример 156
Данные ЯМР примера 156: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,83 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,41 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,26 (dd, J=6,0, 8,8 Гц, 1H), 7,16 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,95 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,18 (s, 1H), 4,67 (d, J=7,2 Гц, 1H), 4,63-4,55 (m, 1H), 4,53-4,44 (m, 1H), 4,38-4,26 (m, 1H), 3,70 (dd, J=7,2, 18,0 Гц, 1H), 3,63 (s, 3H), 3,20 (dd, J=6,8, 18,0 Гц, 1H), 2,62-2,46 (m, 1H), 1,32-1,21 (m, 2H), 1,16-1,04 (m, 2H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 511,2 [M+H+].
Пример 157
Соединение 157-1 (100 мг, 200,4 мкмоль, 1,0 экв.), карбонат калия (83,1 мг, 601,2 мкмоль, 3 экв.) растворяли в безводном ацетонитриле (5 мл) и при 28°C медленно добавляли йодметан (730 мг, 5,1 ммоль, 25,6 экв.). После добавления реакционную смесь продували с помощью азота 3 раза и перемешивали в течение 16 часов при этой температуре. Когда LCMS показывала завершение реакции, реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток промывали водой (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (20 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с системой элюентов PE:EtOAc = 10:1-3:1 с получением 50 мг желтого твердого вещества, выход: 49%.
Данные ЯМР примера 157: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ 7,83 (d, J=3,6 Гц, 1H), 7,42 (d, J=3,6 Гц, 1H), 7,26 (d, J=6,02 Гц, 1H), 7,15 (dd, J=2,51, 8,53 Гц, 1H), 6,96 (dt, J=2,51, 8,28 Гц, 1H), 6,18 (s, 1H), 4,82 (d, J=6,53 Гц, 1H), 4,54-4,59 (m, 1H), 4,43-4,60 (m, 1H), 4,05 (q, J=7,11 Гц, 2H), 3,53 (dd, J=7,28, 18,07 Гц, 1H), 3,32 (dd, J=6,53, 18,07 Гц, 1H), 2,93 (s, 3H), 2,90 (s, 3H) 1,13 (t, J=7,03 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 513,1 [M+H+].
Примеры 169, 182, 183, 184, 186, 188, 192 синтезировали согласно тому же способу, что и пример 157.
Пример 158
Данные ЯМР примера 158: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,84 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,41 (d, J=3,3 Гц, 1H), 7,25 (dd, J=6,0, 8,4 Гц, 1H), 7,15 (dd, J=2,5, 8,4 Гц, 1H), 6,95 (dt, J=2,5, 8,2 Гц, 1H), 6,18 (s, 1H), 4,66 (d, J=7,8 Гц, 1H), 4,61-4,53 (m, 1H), 4,52-4,43 (m, 1H), 4,35-4,24 (m, 1H), 3,68 (dd, J=7,4, 17,9 Гц, 1H), 3,63 (s, 3H), 3,24-3,08 (m, 3H), 1,43 (t, J=7,4 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 499,0 [M+H+].
Пример 159
Данные ЯМР примера 159: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,82 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,39 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,24 (dd, J=6,2, 8,4 Гц, 1H), 7,14 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,93 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,16 (s, 1H), 5,18 (d, J=6,8 Гц, 1H), 5,06 (s, 2H), 4,62 (dd, J=5,6, 11,8 Гц, 1H), 4,44 (dd, J=6,4, 11,6 Гц, 1H), 4,23-4,34 (m, 1H), 3,64 (d, J=7,2 Гц, 1H), 3,60 (s, 3H), 3,26 (dd, J=6,0, 18,2 Гц, 1H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 486,1 [M+H+].
Пример 160
Данные ЯМР примера 160: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,82 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,40 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,24 (dd, J=6,4, 8,8 Гц, 1H), 7,14 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,93 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,17 (s, 1H), 4,67 (d, J=7,0 Гц, 1H), 4,62 (dd, J=5,6, 12,0 Гц, 1H), 4,53 (q, J=5,0 Гц, 1H), 4,44 (dd, J=6,0, 12,0 Гц, 1H), 4,20 (sxt, J=6,4 Гц, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,57 (d, J=7,0 Гц, 1H), 3,23 (dd, J=6,0, 18,0 Гц, 1H), 2,74 (d, J=5,0 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 500,2 [M+H+].
Примеры 161, 166
Стадия 1 (синтез 161-3)
Соединение 161-1 (50 мг, 122,9 мкмоль, 1,0 экв.), TEA (49,7 мг, 491,56 мкмоль, 4,0 экв.) растворяли в безводном DCM (1 мл) и при 25°C медленно добавляли 161-2 (42,3 мг, 245,8 мкмоль, 2,0 экв.). После добавления реакционную смесь продували с помощью азота 3 раза и перемешивали в течение 2 часов при этой температуре. Когда LCMS показывала завершение реакции, реакционную смесь концентрировали. Остаток промывали водой (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (20 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с системой элюентов PE:EtOAc = 5:1-2:1 с получением 22 мг белого твердого вещества, выход: 33%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 543,1 [M+H+]
Стадия 2 (синтез 161)
Соединение 161-3 (22 мг, 40,5 мкмоль, 1,0 экв.) растворяли в безводном метаноле (2 мл) и при 25°C медленно добавляли борогидрид натрия (7,6 мг, 202,58 мкмоль, 5..0 экв.). После добавления реакционную смесь продували с помощью азота 3 раза и перемешивали в течение 2 часов при этой температуре. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь концентрировали. Остаток промывали водой (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (10 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с системой элюентов PE:EtOAc = 1:1-1:5 с получением 6 мг белого твердого вещества, выход: 29%.
Данные ЯМР примера 161: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,82 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,40 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,23 (dd, J=6,0, 8,4 Гц, 1H), 7,14 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,94 (dt, J=2., 8,4 Гц, 1H), 6,15 (s, 1H), 5,07 (d, J=7,6 Гц, 1H), 4,50 (d, J=6,0 Гц, 2H), 4,38-4,25 (m, 1H), 4,12 (br. s., 2H), 3,69-3,62 (m, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,42-3,29 (m, 2H), 3,22 (dd, J=6,4, 18,0 Гц, 1H), 2,80 (br. s., 1H)
LCMS (ESI) масса/заряд: 515,2 [M+H+]
Стадия 3 (синтез 166-1)
Соединение 161-3 (30 мг, 58,2 мкмоль, 1,0 экв.), TEA (17,68 мг, 174,75 ммоль, 3,0 экв.) растворяли в безводном DCM (2 мл) и при 25°C медленно добавляли метансульфонилхлорид (13 мг, 116,5 мкмоль, 2,0 экв.). После добавления реакционную смесь продували с помощью азота 3 раза и перемешивали в течение 1 часа при этой температуре. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь промывали водой (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (20 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством TLC с получением 9 мг белого твердого вещества, выход: 31%.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,82 (d, J=3,6 Гц, 1H), 7,39 (d, J=3,6 Гц, 1H), 7,22 (dd, J=6,0, 8,4 Гц, 1H), 7,13 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,93 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,60 (dd, J=10,0, 16,4 Гц, 1H), 6,34 (d, J=16,4 Гц, 1H), 6,15 (s, 1H), 6,01 (d, J=10,0 Гц, 1H), 4,96 (d, J=7,6 Гц, 1H), 4,58-4,48 (m, 1H), 4,47-4,36 (m, 1H), 4,21-4,08 (m, 1H), 3,68-3,56 (m, 4H), 3,21-3,11 (m, 1H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 497,1 [M+H+]
Стадия 4 (синтез 166)
Соединение гидрохлорид диметиламина (8,16 мг, 181,10 мкмоль, 10 экв.) растворяли в безводном THF (2 мл) и при 25°C медленно добавляли TEA (18,33 мг, 181,1 мкмоль). После добавления реакционную смесь перемешивали в течение 5 минут при этой температуре. Впоследствии, к реакционной смеси добавляли 166-1 (9 мг, 18,1 мкмоль, 1,0 экв.), смесь продолжали перемешивать в течение 15 часов. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь фильтровали. Фильтрат концентрировали. Остаток промывали водой (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (20 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством TLC с получением 4 мг белого твердого вещества, выход: 41%.
Данные ЯМР примера 166: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,82 (d, J=3,6 Гц, 1H), 7,38 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,26-7,20 (m, 1H), 7,13 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,93 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,16 (s, 1H), 4,57 (dd, J=6,4, 11,6 Гц, 1H), 4,43 (dd, J=6,0, 11,6 Гц, 1H), 4,36-4,25 (m, 1H), 3,68 (dd, J=7,2, 17,6 Гц, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,30 (d, J=6,0 Гц, 2H), 3,16 (dd, J=7,2, 18,2 Гц, 1H), 3,08-2,97 (m, 1H), 2,96-2,85 (m, 1H), 2,41 (s, 6H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 542,2 [M+H+]
Пример 162
Данные ЯМР примера 162: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,82 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,40 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,28-7,23 (m, 1H), 7,15 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,95 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,18 (s, 1H), 5,92 (d, J=6,8 Гц, 1H), 4,81-4,65 (m, 1H), 4,46 (d, J=5,8 Гц, 2H), 3,62 (s, 3H), 3,62-3,53 (m, 1H), 3,16 (dd, J=5,8, 18,1 Гц, 1H), 2,03 (s, 3H).
LCMS масса/заряд: 449,1 [M+H+].
Пример 163
Данные ЯМР примера 163: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,81 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,38 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,26-7,21 (m, 1H), 7,13 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,93 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,16 (s, 1H), 5,01 (br. s., 1H), 4,54-4,43 (m, 2H), 4,36 (d, J=5,2 Гц, 1H), 3,70 (br. s., 3H), 3,64-3,56 (m, 4H), 3,10 (dd, J=5,6, 17,6 Гц, 1H).
LCMS масса/заряд: 465,1 [M+H+].
Пример 164
Данные ЯМР примера 164: 1H ЯМР (400 МГц, MeOD-d4) δ : 8,30 (dd, J=2,4, 10,54 Гц, 2H), 7,71 (d, J=6,4 Гц, 1H), 7,54 (br. s., 1H), 7,32 (t, J=8,4 Гц, 1H), 5,87 (s, 1H), 4,61 (d, J=3,6 Гц, 1H), 4,27-4,51 (m, 2H), 3,74-3,87 (m, 1H), 3,73 (s, 3H), 3,26 (dd, J=5,6, 18,2 Гц, 1H), 3,07 (s, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 485,2 [M+H+].
Пример 165
Данные ЯМР примера 165: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,82 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,40 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,22-7,15 (m, 1H), 7,11-7,01 (m, 2H), 6,23 (s, 1H), 4,80 (d, J=7,2 Гц, 1H), 4,61-4,45 (m, 2H), 4,38-4,25 (m, 1H), 3,68 (dd, J=7,2, 18,0 Гц, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,17 (dd, J=7,2, 18,0 Гц, 1H), 3,08 (s, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 485,2 [M+H+].
Пример 167
Данные ЯМР примера 167: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,85 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,42 (d, J=3,2 Гц, 1H), 6,98-7,06 (m, 1H), 6,87-6,95 (m, 1H), 5,98 (s, 1H), 4,92 (d, J=7,6 Гц, 1H), 4,48-4,60 (m, 2H), 4,28 (sxt, J=6,8 Гц, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,55-3,62 (m, 1H), 3,13 (dd, J=6,8, 18,0 Гц, 1H), 3,07 (s, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 487,2 [M+H+].
Пример 168
Данные ЯМР примера 168: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 8,05 (br. s., 1H), 7,81 (br. s., 1H), 7,42 (br. s., 1H), 6,93 (q, J=7,8 Гц, 1H), 6,13 (s, 1H), 6,06 (br. s., 1H), 4,74 (d, J=8,0 Гц, 1H), 4,60 (d, J=12,4 Гц, 1H), 4,40 (br. s., 1H), 3,71 (s, 3H), 3,64 (br. s., 1H), 3,36 (dd, J=5,6, 18,2 Гц, 1H), 3,03 (s, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 487,2 [M+H+].
Пример 169
Данные ЯМР примера 169: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,83 (d, J=3,26 Гц, 1H), 7,40 (d, J=3,01 Гц, 1H), 7,24 (dd, J=6,02, 8,53 Гц, 1H), 7,15 (dd, J=2,51, 8,53 Гц, 1H), 6,95 (dt, J=2,51, 8,16 Гц, 1H), 6,17 (s, 1H), 4,84 (quin, J=7,40 Гц, 1H), 4,59 (dd, J=6,53, 12,05 Гц, 1H), 4,43 (dd, J=7,65, 11,92 Гц, 1H), 3,62 (s, 3H), 3,54 (dd, J=8,28, 18,32 Гц, 1H), 3,29 (dd, J=7,28, 18,32 Гц, 1H), 2,92 (d, J=12,80 Гц, 6H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 499,1 [M+H+]
Пример 170
Данные ЯМР примера 170: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,84 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,40 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,26 (dd, J=8,4, 6,40 Гц, 1H), 7,15 (dd, J=8,4, 2,26 Гц, 1H), 6,92-6,99 (m, 1H), 6,18 (s, 1H), 4,64 (d, J=5,8 Гц, 1H), 4,22-4,40 (m, 3H), 3,70-3,79 (m, 1H), 3,63 (s, 3H), 3,06-3,15 (m, 1H), 1,46 (s, 9H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 527,1 [M+H+].
Пример 171
Стадия 1 (синтез 171-3)
Соединение 171-1 (100 мг, 245,7 мкмоль, 1,0 экв.), TEA (74,6 мг, 737,3 мкмоль, 3,0 экв.) растворяли в безводном DCM (2 мл) и при 25°C добавляли 171-2 (100 мг, 368,6 мкмоль, 1,5 экв.). После добавления реакционную смесь продували с помощью азота 3 раза и перемешивали в течение 2 часов при этой температуре. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь промывали водой (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (20 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с системой элюентов PE:EtOAc = 10:1-3:1 с получением 44 мг белого твердого вещества, выход: 25%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 665,9 [M+Na+]
Стадия 2 (синтез 171)
Соединение 171-3 (20 мг, 31,05 мкмоль, 1,0 экв.) растворяли в метаноле (2 мл) и при 25°C добавляли N2H4.H2O (15,5 мг, 310,5 мкмоль, 10,0 экв.). После добавления реакционную смесь перемешивали в течение 2 часов при этой температуре. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь концентрировали. Остаток промывали водой (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (20 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством инструментального разделения (система с водн. раствором аммиака) с получением 10 мг белого твердого вещества, выход: 58%.
Данные ЯМР примера 171: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,82 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,39 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,25-7,20 (m, 1H), 7,13 (d, J=6,4 Гц, 1H), 6,99-6,88 (m, 1H), 6,15 (s, 1H), 4,50 (br. s., 2H), 4,30 (t, J=6,4 Гц, 1H), 3,71-3,54 (m, 4H), 3,35-3,13 (m, 5H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 514,1 [M+H+]
Пример 172
Данные ЯМР примера 172: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,82 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,39 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,24 (dd, J=6,4, 8,4 Гц, 1H), 7,14 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,94 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,16 (s, 1H), 5,43 (d, J=6,4 Гц, 1H), 4,53-4,62 (m, 1H), 4,44-4,52 (m, 1H), 4,29-4,41 (m, 1H), 4,13 (d, J=2,4 Гц, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,68 (dd, J=7,2, 18,07 Гц, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,22 (dd, J=6,8, 18,0 Гц, 1H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 543,1 [M+H+].
Пример 173
Данные ЯМР примера 173: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,81 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,39 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,23-7,28 (m, 1H), 7,15 (dd, J=8,6, 2,4 Гц, 1H), 6,95 (td, J=8,2, 2,4 Гц, 1H), 6,19 (s, 1H), 6,13 (d, J=7,2 Гц, 1H), 4,68-4,81 (m, 1H), 4,46 (d, J=5,6 Гц, 2H), 3,61-3,64 (m, 3H), 3,54-3,61 (m, 1H), 3,19 (dd, J=18,2, 6,0 Гц, 1H), 1,30-1,43 (m, 1H), 1,02 (br. s., 2H), 0,78 (dd, J=7,6, 3,2 Гц, 2H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 474,9 [M+H+].
Пример 174
Данные ЯМР примера 174: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,81 (d, J=3,6 Гц, 1H), 7,39 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,24 (dd, J=6,2, 8,8 Гц, 1H), 7,13 (dd, J=2,4, 8,6 Гц, 1H), 6,93 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,16 (s, 1H), 4,54 (dd, J=7,0, 11,6 Гц, 1H), 4,21 (dd, J=7,0, 11,6 Гц, 1H), 4,05-4,17 (m, 4H), 3,96-4,05 (m, 1H), 3,62-3,69 (m, 1H), 3,61 (s, 3H), 2,93-3,05 (m, 2H), 1,36 (dt, J=2,0, 7,0 Гц, 6H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 543,1 [M+H+].
Пример 175
Данные ЯМР примера 175: 1H ЯМР (400 МГц, MeOD-d4) δ : 7,91 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,69 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,44 (dd, J=6,2, 8,6 Гц, 1H), 7,21 (dd, J=2,4, 8,8 Гц, 1H), 7,06 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,12 (s, 1H), 4,50 (dd, J=6,8, 11,6 Гц, 1H), 4,28 (dd, J=6,8, 11,2 Гц, 1H), 4,14 (quin, J=7,2 Гц, 1H), 3,62-3,72 (m, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,14 (dd, J=7,2, 17,8 Гц, 1H),
LCMS (ESI) масса/заряд: 487,1 [M+H+].
Пример 176
Пример 176 синтезировали согласно тому же способу, который описан в примере 136.
Данные ЯМР примера 176: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,92 (d, J=3,26 Гц, 1H), 7,45-7,56 (m, 2H), 7,17 (dd, J=2,38, 8,16 Гц, 1H), 6,96-7,09 (m, 2H), 5,91 (s, 1H), 5,34 (s, 1H), 4,50 (d, J=13,30 Гц, 1H), 4,24 (tdd, J=3,64, 7,15, 10,67 Гц, 2H), 3,70-3,84 (m, 2H), 3,59-3,68 (m, 1H), 3,43-3,53 (m, 1H), 3,38 (s, 1H), 1,32 (br. s., 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 515,1 [M+H+].
Пример 177
Стадия 1 (синтез 177-4)
Соединение 177-1 (3,86 г, 26,36 ммоль, 1,0 экв.), 177-2 (10,0 г, 26,36 ммоль, 1,0 экв.), 177-3 (4,31 г, 26,36 ммоль, 1,0 экв.) растворяли в безводном DMF (100 мл) и при 20°C добавляли NaHCO3 (8,86 г, 105,44 ммоль, 4,00 экв.). После добавления реакционную смесь продували с помощью азота 3 раза, смесь нагревали до 60°C и перемешивали в течение 4 часов. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и фильтровали. Фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Остаток растворяли в EtOAc, промывали водой (100 мл) и затем экстрагировали с помощью EtOAc (100 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с системой элюентов DCM/MeOH=20/1, 10/1 с получением 11 г продукта в виде желтого масла, выход: 66%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 527,1 [M+H+].
Стадия 2 (синтез 177-5)
Соединение 177-4 (10,0 г, 18,97 ммоль, 1,0 экв.), NMM (2,49 г, 24,66 ммоль, 1,30 экв.) растворяли в безводном THF (50 мл) и при 0°C медленно добавляли изобутилхлорформиат (3,11 г, 22,76 ммоль, 1,2 экв.). После добавления реакционную смесь продували с помощью азота 3 раза и перемешивали в течение 30 минут при 0°C. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь фильтровали. Фильтрат медленно добавляли по каплям к водному раствору (50 мл) NaBH4 (1,4 г, 37,94 ммоль, 2,0 экв.) при 0°C. Реакционную смесь продолжали перемешивать в течение 1 часа. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь гасили разбавленной HCl, растворяли в EtOAc, промывали водой (100 мл) и затем экстрагировали с помощью EtOAc (100 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с системой элюентов PE:EtOAc = 10:1-3:1 с получением 6,6 г продукта в виде желтого твердого вещества, выход: 64%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 513,1 [M+H+].
Стадия 3 (синтез 177-6)
Соединение 177-5 (6,60 г, 12,86 ммоль, 1,0 экв.), TEA (2,60 г, 25,72 ммоль, 2,0 экв.) растворяли в безводном DCM (50 мл) и при 0°C медленно добавляли метансульфонилхлорид (1,92 г, 16,76 ммоль, 1,3 экв.). После добавления реакционную смесь продували с помощью азота 3 раза и затем нагревали до 27°C, перемешивали в течение 15 часов. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь промывали водой (100 мл) и затем экстрагировали с помощью DCM (100 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с системой элюентов PE:EtOAc = 10:1-3:1 с получением 5,6 г продукта в виде желтого твердого вещества, выход: 87%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 495,2 [M+H+].
Стадия 4 (синтез 177-7)
Соединение 177-6 (5,60 г, 11,31 ммоль, 1,0 экв.) растворяли в безводном DCM (10 мл) и при 0°C медленно добавляли к раствору HCl/EtOAc (20 мл). После добавления реакционную смесь перемешивали в течение 1 часа. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением 4,7 г желтого твердого вещества, выход: 92%. Неочищенный продукт непосредственно использовали для следующей реакции.
LCMS (ESI) масса/заряд: 394,9 [M+H+].
Стадия 5 (синтез 177-8)
Соединение 177-7 (500 мг, 1,16 ммоль, 1,0 экв.), TEA (234 мг, 2,32 ммоль, 2,0 экв.) растворяли в безводном DCM (5 мл) и при 0°C медленно добавляли метансульфонилхлорид (199 мг, 1,7 ммоль, 1,5 экв.). После добавления реакционную смесь продували с помощью азота 3 раза и затем нагревали до 27°C, перемешивали в течение 4 часов. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь промывали водой (10 мл) и затем экстрагировали с помощью DCM (10 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с системой элюентов PE:EtOAc = 10:1-3:1 с получением продукта в виде 300 мг желтого твердого вещества, выход: 52%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 473,0 [M+H+].
Стадия 6 (синтез 177)
Соединение 177-8 (300 мг, 634,26 ммоль) разделяли посредством препаративной разделительной колонки (система с муравьиной кислотой) с получением хирально чистых 57 мг примера 177 в виде белого твердого вещества, выход: 88%.
Данные ЯМР примера 177: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,85 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,43 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,12 (d, J=5,2 Гц, 1H), 6,87 (d, J=5,2 Гц, 1H), 6,14 (s, 1H), 4,89 (d, J=7,6 Гц, 1H), 4,66-4,56 (m, 1H), 4,53-4,43 (m, 1H), 4,36-4,25 (m, 1H), 3,72-3,68 (m, 3H), 3,63 (dd, J=7,2, 17,6 Гц, 1H), 3,16-3,09 (m, 1H), 3,07 (s, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 473,0 [M+H+].
Примеры 152, 178, 179, 180, 181, 185, 187, 189, 190, 191, 193, 194, 197, 198, 199, 200, 201, 202, 203, 204, 205, 206, 207, 208, 209, 210, 211, 212, 213, 214, 215, 216, 217, 218, 219, 220, 223, 224, 225, 226 синтезировали согласно тому же способу, который описан в примере 177.
Пример 178
Данные ЯМР примера 178: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,82 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,40 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,23 (dd, J=6,4, 8,8 Гц, 1H), 7,14 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,93 (dt, J=245, 8,4 Гц, 1H), 6,16 (s, 1H), 4,85 (d, J=7,6 Гц, 1H), 4,52 (dq, J=6,4, 11,6 Гц, 2H), 4,37-4,22 (m, 1H), 3,67 (dd, J=7,2, 18,0 Гц, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,17 (dd, J=7,2, 18,0 Гц, 1H), 3,10-3,04 (m, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 485,1 [M+H+].
Пример 179
Данные ЯМР примера 179: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,82 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,39 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,22-7,25 (m, 1H), 7,14 (dd, J=8,53, 2,4 Гц, 1H), 6,95 (td, J=8,2, 2,4 Гц, 1H), 6,17 (s, 1H), 5,83-6,08 (m, 1H), 4,55-4,71 (m, 2H), 4,32-4,47 (m, 1H), 3,53-3,72 (m, 6H), 3,20-3,32 (m, 1H), 3,04 (s, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 549,1 [M+H+].
Пример 180
Данные ЯМР примера 180: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 2,64 (s, 3H), 3,08 (s, 3H), 3,15 (dd, J=17,82, 7,2 Гц, 1H), 3,62 (s, 3H), 3,73 (dd, J=17,8, 7,28 Гц, 1H), 4,24-4,39 (m, 1H), 4,47-4,55 (m, 2H), 4,83 (d, J=7,6 Гц, 1H), 5,93 (s, 1H), 6,77-6,84 (m, 1H), 6,90 (dd, J=10,0, 2,51 Гц, 1H), 7,06 (dd, J=8,2, 5,77 Гц, 1H), 7,37 (d, J=3,6 Гц, 1H), 7,79 (d, J=3,0 Гц, 1H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 465,1 [M+H+].
Пример 181
Данные ЯМР примера 181: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,82 (d, J=3,6 Гц, 1H), 7,40 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,30 (dd, J=6,2, 8,8 Гц, 1H), 7,15 (dd, J=2,6, 8,8 Гц, 1H), 6,96 (dt, J=2,8, 8,4 Гц, 1H), 6,17 (s, 1H), 4,71 (d, J=6,4 Гц, 1H), 4,56-4,62 (m, 1H), 4,47-4,53 (m, 1H), 4,29-4,37 (m, 1H), 3,63 (s, 3H), 3,47-3,54 (m, 1H), 3,32-3,41 (m, 1H), 3,06 (s, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 485,0 [M+H+].
Пример 182
Данные ЯМР примера 182: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,85 (d, J=3,01 Гц, 1H), 7,43 (d, J=3,26 Гц, 1H), 7,24-7,28 (m, 1H), 7,17 (dd, J=2,26, 8,53 Гц, 1H), 6,97 (dt, J=2,51, 8,16 Гц, 1H), 6,21 (s, 1H), 4,67-4,81 (m, 2H), 4,54-4,63 (m, 1H), 4,27-4,42 (m, 2H), 3,71 (dd, J=7,65, 18,45 Гц, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,46 (dd, J=6,90, 18,45 Гц, 1H), 3,17 (s, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 524,1 [M+H+]
Пример 183
Данные ЯМР примера 183: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ : 7,98 (d, J=3,51 Гц, 1H), 7,88 (d, J=3,51 Гц, 1H), 7,51 (dd, J=8,53, 6,02 Гц, 1H), 7,43 (dd, J=8,53, 2,51 Гц, 1H), 7,18 (td, J=8,53, 2,51 Гц, 1H), 6,01 (s, 1H), 4,62-4,72 (m, 1H), 4,48-4,55 (m, 1H), 4,14-4,22 (m, 1H), 3,50-3,61 (m, 4H), 3,30 (d, J=5,52 Гц, 2H), 3,01-3,18 (m, 4H), 1,15 (t, J=7,03 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 513,1 [M+H+]
Пример 184
Данные ЯМР примера 184: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,81 (d, J=3,6 Гц, 1H), 7,37 (d, J=3,6 Гц, 1H), 7,29 (d, J=6,0 Гц, 1H), 7,14 (dd, J=8,6, 2,51 Гц, 1H), 6,94 (td, J=8,2, 2,51 Гц, 1H), 6,16 (s, 1H), 4,63 (dd, J=10,8, 8,28 Гц, 1H), 4,37-4,50 (m, 1H), 4,21 (t, J=9..0 Гц, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,93-4,02 (m, 1H), 3,48-3,59 (m, 2H), 2,98 (s, 3H), 1,38 (d, J=6,4 Гц, 6H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 527,2 [M+H+]
Пример 185
Данные ЯМР примера 185: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,83 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,40 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,19-7,24 (m, 1H), 7,14 (dd, J=3,2, 8,4 Гц, 1H), 6,94 (t, J=8,4 Гц, 1H), 6,17 (s, 1H), 4,64 (dd, J=5,2, 11,6 Гц, 1H), 4,42-4,53 (m, 1H), 4,28 (d, J=6,4 Гц, 1H), 3,88 (s, 3H), 3,57-3,63 (m, 4H), 3,22-3,33 (m, 1H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 501,1 [M+H+].
Пример 186
Данные ЯМР примера 186: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,83 (br. s., 1H), 7,42 (d, J=2,76 Гц, 1H), 7,21-7,26 (m, 1H), 7,14 (dd, J=2,13, 8,41 Гц, 1H), 6,94 (t, J=7,15 Гц, 1H), 6,15 (s, 1H), 4,65-4,75 (m, 1H), 4,46-4,52 (m, 1H), 4,42 (br. s., 1H), 4,02-4,26 (m, 2H), 3,63 (d, J=7,78 Гц, 1H), 3,58 (br. s., 3H), 3,24 (dd, J=6,90, 17,94 Гц, 1H), 3,12 (s, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 543,0 [M+H+]
Пример 187
Данные ЯМР примера 187: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 8,15 (br. s., 1H), 7,89 (br. s., 1H), 7,57 (t, J=6,4 Гц, 1H), 7,17 (d, J=7,0 Гц, 1H), 7,04 (t, J=6,8 Гц, 1H), 6,34 (br. s., 1H), 5,03 (br. s., 1H), 4,34 (br. s., 2H), 3,69 (s, 3H), 3,64 (br. s., 1H), 3,30-3,53 (m, 3H), 3,24 (t, J=7,0 Гц, 2H), 2,46 (br. s., 2H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 511,0 [M+H+].
Пример 188
Данные ЯМР примера 188: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,84 (d, J=3,26 Гц, 1H), 7,42 (d, J=3,26 Гц, 1H), 7,26 (dd, J=6,40, 8,66 Гц, 1H), 7,16 (dd, J=2,38, 8,66 Гц, 1H), 6,97 (dt, J=2,51, 8,16 Гц, 1H), 6,18 (s, 1H), 4,75 (quin, J=7,47 Гц, 1H), 4,54 (dd, J=2,38, 7,40 Гц, 2H), 3,86 (d, J=4,77 Гц, 2H), 3,67 (d, J=8,28 Гц, 1H), 3,63 (s, 3H), 3,39-3,51 (m, 2H), 3,34 (dd, J=8,03, 18,32 Гц, 1H), 3,05 (s, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 529,1 [M+H+]
Пример 189
Данные ЯМР примера 189: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,92 (d, J=7,0 Гц, 2H), 7,76 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,51-7,67 (m, 3H), 7,37 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,19 (dd, J=6,4, 8,8 Гц, 1H), 7,11 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,90 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,12 (s, 1H), 5,12 (d, J=7,0 Гц, 1H), 4,35-4,50 (m, 1H), 4,22-4,34 (m, 1H), 4,11 (sxt, J=6,8 Гц, 1H), 3,56 (s, 3H), 3,45 (dd, J=7,6, 18,0 Гц, 1H), 3,03 (dd, J=6,8, 18,0 Гц, 1H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 547,1 [M+H+].
Пример 190
Данные ЯМР примера 190: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,84 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,41 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,25 (dd, J=8,6, 6,4 Гц, 1H), 7,15 (dd, J=8,4, 2,4 Гц, 1H), 6,94 (td, J=8,4, 2,4 Гц, 1H), 6,17 (s, 1H), 4,54 (dd, J=11,6, 6,8 Гц, 1H), 4,25 (dd, J=11,2, 7,0 Гц, 1H), 3,96-4,12 (m, 1H), 3,78 (dd, J=11,6, 3,2 Гц, 6H), 3,65-3,71 (m, 1H), 3,63 (s, 3H), 2,90-3,09 (m, 2H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 515,0 [M+H+].
Пример 191
Данные ЯМР примера 191: 1H ЯМР (400 МГц, ХЛОРОФОРМ-d) δ : 8,34 (d, J=2,5 Гц, 1H), 7,34 (dd, J=6,3, 8,8 Гц, 1H), 7,31-7,27 (m, 1H), 7,12 (dd, J=2,5, 8,5 Гц, 1H), 6,97 (dt, J=2,5, 8,3 Гц, 1H), 6,22 (s, 1H), 5,02 (br. s., 1H), 4,30-4,18 (m, 1H), 3,87 (dd, J=6,3, 10,8 Гц, 1H), 3,64-3,58 (m, 4H), 3,58-3,53 (m, 1H), 3,25 (dd, J=5,8, 18,3 Гц, 1H), 3,02 (s, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 515,1 [M+H+].
Пример 192
Данные ЯМР примера 192: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,82 (d, J=3,52 Гц, 1H), 7,40 (d, J=3,01 Гц, 1H), 7,24 (dd, J=8,53, 6,02 Гц, 1H), 7,14 (dd, J=8,53, 2,51 Гц, 1H), 6,94 (td, J=8,28, 2,51 Гц, 1H), 6,17 (s, 1H), 4,79 (dt, J=14,18, 7,22 Гц, 1H), 4,65 (dd, J=12,05, 6,02 Гц, 1H), 4,59 (s, 2H), 4,41 (dd, J=12,05, 7,53 Гц, 1H), 3,62 (s, 3H), 3,54 (dd, J=18,32, 8,28 Гц, 1H), 3,32-3,39 (m, 1H), 2,87 (s, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 500,0 [M+H+]
Пример 193
Данные ЯМР примера 193: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,85 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,43 (d, J=3,0 Гц, 1H), 6,98-7,06 (m, 1H), 6,87-6,96 (m, 1H), 5,98 (s, 1H), 4,99 (d, J=7,0 Гц, 1H), 4,96 (s, 2H), 4,69 (dd, J=5,2, 11,6 Гц, 1H), 4,45 (dd, J=6,0, 12,0 Гц, 1H), 4,23-4,33 (m, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,55 (dd, J=7,0, 18,0 Гц, 1H), 3,22 (dd, J=5,6, 18,4 Гц, 1H);
LCMS (ESI) масса/заряд: 488,2 [M+H+].
Пример 194
Данные ЯМР примера 194: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 8,37 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,84 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,39-7,42 (m, 1H), 7,31-7,38 (m, 1H), 5,90 (s, 1H), 4,87 (d, J=7,2 Гц, 1H), 4,47-4,58 (m, 2H), 4,28 (qd, J=6,8, 13,6 Гц, 1H), 3,66 (s, 3H), 3,57-3,64 (m, 1H), 3,08-3,16 (m, 1H), 3,07 (s, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 452,0 [M+H+].
Пример 195
Стадия 1 (синтез 195-3)
Соединение 195-1 (100 мг, 245,7 мкмоль, 1,0 экв.) растворяли в безводном DCM (3 мл) и при 25°C добавляли 195-2 (76,2 мг, 245,8 мкмоль, 1,0 экв.). После добавления реакционную смесь перемешивали в течение 16 часов при этой температуре. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь промывали водой (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (20 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с системой элюентов PE:EtOAc = 30:1-10:1 с получением 130 мг белого твердого вещества, выход: 79%.
LCMS (ESI) масса/заряд: 649,2 [M+H+]
Стадия 2 (синтез 195)
Соединение 195-3 (130 мг, 200,2 мкмоль, 1,0 экв.) растворяли в безводном EtOAc (1 мл) и при 25°C добавляли HCl/EtOAc (730 мг, 20. ммоль, 99,87 экв.). После добавления реакционную смесь перемешивали в течение 16 часов при этой температуре. Когда LCMS показывала завершение реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении с получением 80 мг желтого твердого вещества, выход: 82%.
Данные ЯМР примера 195: 1H ЯМР (400 МГц, МЕТАНОЛ-d4) δ : 8,51-8,62 (m, 1H), 7,92 (d, J=3,26 Гц, 1H), 7,69 (d, J=3,26 Гц, 1H), 7,42 (dd, J=8,53, 6,27 Гц, 1H), 7,25 (dd, J=8,78, 2,51 Гц, 1H), 7,06 (td, J=8,34, 2,64 Гц, 1H), 6,17 (s, 1H), 4,59-4,71 (m, 2H), 4,33-4,53 (m, 2H), 3,55-3,69 (m, 4H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 449,1 [M+H+]
Пример 196
Стадия 1 (синтез 196-2)
Соединение 196-1 (500 мг, 1,2 ммоль, 1,0 экв.), BPO (327. мг, 1,35 ммоль, 1,1 экв.) растворяли в безводном THF (5 мл) и при 25°C добавляли Na2HPO4 (872 мг, 6,1 ммоль, 5,0 экв.). После добавления реакционную смесь нагревали до 50°C и перемешивали в течение 2 часов. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток промывали водой (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (20 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с системой элюентов PE:EtOAc = 1:1 с получением 130 мг красного твердого вещества, выход: 20%.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 8,05 (d, J=7,28 Гц, 2H), 7,84 (d, J=3,26 Гц, 1H), 7,60-7,69 (m, 1H), 7,51 (t, J=7,65 Гц, 2H), 7,41 (d, J=3,26 Гц, 1H), 7,31 (s, 1H), 7,14 (dd, J=2,51, 8,53 Гц, 1H), 6,94 (dt, J=2,51, 8,28 Гц, 1H), 6,19 (s, 1H), 4,79 (dd, J=3,51, 12,30 Гц, 1H), 4,44 (dd, J=6,15, 12,42 Гц, 1H), 4,12 (br. s., 1H), 3,61 (s, 3H), 3,42-3,52 (m, 2H).
Стадия 2 (синтез 196-3)
Соединение 196-2 (130 мг, 246,7 мкмоль, 1,0 экв.), метансульфонилхлорид (141 мг, 1,2 ммоль, 5,0 экв.) растворяли в пиридине (5 мл) и при 25°C добавляли DMAP (90,4 мг, 740,1 мкмоль, 3,0 экв.). После добавления реакционную смесь перемешивали в течение 16 часов при этой температуре. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток промывали водой (10 мл) и экстрагировали с помощью DCM (20 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством колоночной хроматографии с системой элюентов PE:EtOAc = 2:1 с получением 130 мг бледно-желтого твердого вещества, выход: 87%.
1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 8,02 (d, J=7,53 Гц, 2H), 7,82 (d, J=3,01 Гц, 1H), 7,66-7,73 (m, 1H), 7,47-7,56 (m, 2H), 7,36 (d, J=2,51 Гц, 1H), 7,21 (dd, J=6,53, 8,53 Гц, 1H), 7,09 (dd, J=2,51, 8,53 Гц, 1H), 6,91 (dt, J=2,51, 8,03 Гц, 1H), 5,80 (br. s., 1H), 5,00 (quin, J=6,27 Гц, 1H), 4,78 (br. s., 1H), 4,56-4,66 (m, 1H), 3,45-3,79 (m, 5H), 3,14 (s, 3H).
Стадия 3 (синтез 196)
Соединение 196-3 (130 мг, 214,85 мкмоль, 1,0 экв.), TEA (130 мг, 1,29 ммоль, 6,0 экв.) растворяли в THF (5 мл) и при 25°C добавляли хлоргидрат гидроксиламина (59,7 мг, 859,4 мкмоль, 4,0 экв.). После добавления реакционную смесь перемешивали в течение 4 часов при этой температуре. Когда TLC показывала завершение реакции, реакционную смесь концентрировали при пониженном давлении. Остаток промывали водой (10 мл) и экстрагировали с помощью EtOAc (10 мл) 3 раза. Органические фазы промывали насыщенным солевым раствором, сушили над безводным сульфатом натрия, фильтровали и концентрировали при пониженном давлении. Остаток очищали посредством инструментального разделения (система с муравьиной кислотой) с получением 14 мг белого твердого вещества, выход: 13%.
Данные ЯМР примера 196: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,85 (d, J=3,26 Гц, 1H), 7,43 (d, J=3,26 Гц, 1H), 7,24 (dd, J=6,02, 8,53 Гц, 1H), 7,16 (dd, J=2,51, 8,53 Гц, 1H), 6,95 (dt, J=2,51, 8,16 Гц, 1H), 6,18 (s, 1H), 4,64-4,77 (m, 2H), 4,39-4,51 (m, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,56 (d, J=6,78 Гц, 2H), 3,10 (s, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 501,1 [M+H+]
Пример 197
Данные ЯМР примера 197: 1H ЯМР (400 МГц, MeOD-d4) δ : 8,32 (dd, J=2,8, 12,8 Гц, 2H), 7,50-7,58 (m, 1H), 7,34-7,44 (m, 1H), 6,31 (s, 1H), 4,59 (br. s., 2H), 4,38 (d, J=2,8 Гц, 1H), 3,72-3,77 (m, 1H), 3,71 (s, 3H), 3,45 (dd, J=6,0, 18,4 Гц, 1H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 504,0 [M+H+].
Пример 198
Данные ЯМР примера 198: 1H ЯМР (400 МГц, MeOD-d4) δ : 8,29 (dd, J=2,64, 9,66 Гц, 2H), 7,52-7,59 (m, 1H), 7,38 (q, J=8,8 Гц, 1H), 6,33 (s, 1H), 4,55-4,63 (m, 1H), 4,46-4,53 (m, 1H), 4,32-4,41 (m, 1H), 3,69-3,75 (m, 1H), 3,68 (s, 3H), 3,36-3,43 (m, 1H), 3,35 (s, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 504,0 [M+H+].
Пример 199
Данные ЯМР примера 199: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 9,14 (br. s., 1H), 8,84 (d, J=4,0 Гц, 1H), 8,20 (d, J=8,0 Гц, 1H), 7,77 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,46-7,54 (m, 1H), 7,38 (d, J=2,4 Гц, 1H), 7,15-7,22 (m, 1H), 7,12 (d, J=7,0 Гц, 1H), 6,91 (t, J=7,0 Гц, 1H), 6,11 (s, 1H), 5,81 (br. s., 1H), 4,40 (d, J=5,6 Гц, 2H), 4,16 (d, J=5,2 Гц, 1H), 3,57 (s, 3H), 3,46 (dd, J=7,2, 17,6 Гц, 1H), 3,11 (dd, J=6,4, 17,8 Гц, 1H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 548,1 [M+H+].
Пример 200
Данные ЯМР примера 200: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 8,71 (d, J=4,4 Гц, 1H), 8,02-8,09 (m, 1H), 7,96 (dt, J=1,2, 7,6 Гц, 1H), 7,75 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,54 (dd, J=5,0, 7,0 Гц, 1H), 7,37 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,19 (dd, J=6,0, 8,4 Гц, 1H), 7,11 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,90 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,11 (s, 1H), 5,77 (d, J=6,4 Гц, 1H), 4,40-4,48 (m, 1H), 4,25-4,38 (m, 2H), 3,57 (s, 3H), 3,48 (dd, J=6,4, 17,8 Гц, 1H), 3,12 (dd, J=6,4, 18,0 Гц, 1H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 548,1 [M+H+].
Пример 201
Данные ЯМР примера 201: 1H ЯМР (400 МГц, MeOD-d4) δ : 8,31 (d, J=3,2 Гц, 2H), 7,62-7,52 (m, 1H), 7,46-7,34 (m, 1H), 6,35 (s, 1H), 4,67-4,55 (m, 1H), 4,51-4,36 (m, 2H), 3,83-3,64 (m, 4H), 3,36 (d, J=6,0 Гц, 1H), 3,08 (s, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 503,0 [M+H+].
Пример 202
Данные ЯМР примера 202: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,45 (s, 1H), 7,22 (dd, J=6,4, 8,4 Гц, 1H), 7,13 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,93 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,13 (s, 1H), 4,88 (d, J=7,4 Гц, 1H), 4,42-4,57 (m, 2H), 4,21-4,35 (m, 1H), 3,63-3,70 (m, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,12-3,19 (m, 1H), 3,07 (s, 3H), 2,44 (s, 3H).
[M+1] LCMS (ESI) масса/заряд: 499,1 [M+H+].
Пример 203
Данные ЯМР примера 203: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,80 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,34-7,46 (m, 3H), 7,20 (td, J=8,0, 2,4 Гц, 1H), 6,13 (s, 1H), 4,69 (d, J=7,6 Гц, 1H), 4,62 (dd, J=11,6, 6,4 Гц, 1H), 4,41-4,48 (m, 1H), 4,30-4,37 (m, 1H), 3,73 (dd, J=17,6, 7,2 Гц, 1H), 3,56 (s, 3H), 3,19 (dd, J=18,0, 7,0 Гц, 1H), 3,08 (s, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 519,3 [M+H+].
Пример 204
Данные ЯМР примера 204: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,95 (t, J=7,6 Гц, 1H), 7,75 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,58-7,67 (m, 1H), 7,37 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,32 (t, J=7,6 Гц, 1H), 7,21-7,26 (m, 1H), 7,18 (dd, J=6,0, 8,4 Гц, 1H), 7,11 (dd, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,90 (dt, J=2,4, 8,4 Гц, 1H), 6,12 (s, 1H), 5,18 (br. s., 1H), 4,30-4,46 (m, 2H), 4,20 (sxt, J=6,8 Гц, 1H), 3,57 (s, 3H), 3,48 (dd, J=7,0, 18,0 Гц, 1H), 3,07 (dd, J=7,0, 18,0 Гц, 1H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 565,3 [M+H+].
Пример 205
Данные ЯМР примера 205: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,86 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,44 (d, J=2,8 Гц, 1H), 7,23-7,28 (m, 1H), 6,76-6,89 (m, 2H), 5,99 (s, 1H), 4,64 (d, J=7,2 Гц, 1H), 4,56 (d, J=6,4 Гц, 2H), 4,27-4,36 (m, 1H), 3,66 (s, 3H), 3,59-3,65 (m, 1H), 3,14 (dd, J=18,0, 6,8 Гц, 1H), 3,10 (s, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 469,2 [M+H+].
Пример 206
Данные ЯМР примера 206: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,86 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,43 (d, J=3,0 Гц, 1H), 6,98-7,07 (m, 1H), 6,87-6,96 (m, 1H), 5,99 (s, 1H), 4,62-4,71 (m, 1H), 4,53 (d, J=6,8 Гц, 1H), 4,40-4,50 (m, 2H), 4,19 (qd, J=6,4, 12,8 Гц, 1H), 3,65 (s, 3H), 3,54 (dd, J=7,0, 18,0 Гц, 1H), 3,19 (dd, J=6,4, 18,0 Гц, 1H), 2,74 (d, J=5,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 502,2 [M+H+].
Пример 207
Данные ЯМР примера 207: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,85 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,42 (d, J=3,0 Гц, 1H), 6,97-7,08 (m, 1H), 6,85-6,96 (m, 1H), 5,99 (s, 1H), 4,53 (t, J=6,0 Гц, 2H), 4,35 (d, J=7,6 Гц, 1H), 4,13-4,23 (m, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,57 (dd, J=18,0, 7,0 Гц, 1H), 3,13 (dd, J=17,8, 6,8 Гц, 1H), 2,84 (s, 6H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 516,3 [M+H+].
Пример 208
Данные ЯМР примера 208: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,84 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,42 (d, J=3,6 Гц, 1H), 6,97-7,06 (m, 1H), 6,86-6,95 (m, 1H), 5,99 (s, 1H), 4,46-4,59 (m, 3H), 4,13-4,25 (m, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,56 (dd, J=18,0, 7,0 Гц, 1H), 3,31-3,34 (m, 4H), 3,13 (dd, J=17,8, 6,8 Гц, 1H), 1,94 (br. s., 4H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 542,1 [M+H+].
Пример 209
Данные ЯМР примера 209: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ : 7,97 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,89 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,22-7,30 (m, 2H), 5,85-6,07 (m, 3H), 4,50 (dd, J=11,2, 6,9 Гц, 1H), 4,19 (dd, J=11,2, 6,4 Гц, 1H), 3,92-4,07 (m, 1H), 3,55 (s, 3H), 3,41-3,50 (m, 1H), 3,27-3,32 (m, 1H), 3,06 (dd, J=17,8, 6,9 Гц, 1H), 1,12 (dd, J=6,4, 3,14 Гц, 6H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 530,3 [M+H+].
Пример 210
Данные ЯМР примера 210: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,84 (d, J=3,6 Гц, 1H), 7,41 (d, J=3,2 Гц, 1H), 6,98-7,08 (m, 1H), 6,84-6,96 (m, 1H), 5,99 (s, 1H), 4,55 (t, J=6,4 Гц, 2H), 4,44-4,50 (m, 1H), 4,24 (s, 1H), 4,13-4,22 (m, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,57 (dd, J=18,0, 7,2 Гц, 1H), 3,14 (dd, J=17,6, 6,8 Гц, 1H), 1,37 (s, 9H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 544,3 [M+H+].
Пример 211
Данные ЯМР примера 211: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ : 7,95 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,86 (d, J=3,2 Гц, 1H), 7,32-7,46 (m, 1H), 7,11-7,24 (m, 2H), 7,01 (t, J=7,6 Гц, 1H), 6,74 (s, 2H), 5,84 (s, 1H), 4,48 (dd, J=11,0, 6,8 Гц, 1H), 4,00-4,22 (m, 2H), 3,52 (s, 3H), 3,04 (dd, J=17,8, 7,2 Гц, 1H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 470,2 [M+H+].
Пример 212
Данные ЯМР примера 212: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,86 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,42 (d, J=3,0 Гц, 1H), 6,98-7,06 (m, 1H), 6,87-6,95 (m, 1H), 5,99 (s, 1H), 4,48-4,62 (m, 2H), 4,41 (d, J=7,6 Гц, 1H), 4,22 (qd, J=6,6, 13,2 Гц, 1H), 3,91 (t, J=7,6 Гц, 4H), 3,65 (s, 3H), 3,56 (dd, J=7,0, 18,0 Гц, 1H), 3,16 (dd, J=6,4, 18,0 Гц, 1H), 2,22 (quin, J=7,6 Гц, 2H)
LCMS (ESI) масса/заряд: 528,2 [M+H+].
Пример 213
Данные ЯМР примера 213: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,83 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,41 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,16-7,24 (m, 1H), 7,03-7,12 (m, 2H), 6,24 (s, 1H), 4,80 (d, J=7,2 Гц, 1H), 4,54-4,63 (m, 1H), 4,41-4,51 (m, 1H), 4,29 (sxt, J=7,0 Гц, 1H), 3,70 (dd, J=7,2, 17,8 Гц, 1H), 3,62 (s, 3H), 3,08-3,23 (m, 3H), 1,43 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 499,2 [M+H+].
Пример 214
Данные ЯМР примера 214: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,84 (d, J=3,6 Гц, 1H), 7,42 (d, J=3,2 Гц, 1H), 6,97-7,08 (m, 1H), 6,84-6,95 (m, 1H), 5,99 (s, 1H), 4,57-4,65 (m, 1H), 4,46-4,54 (m, 1H), 4,44 (d, J=7,2 Гц, 1H), 4,33 (t, J=6,0 Гц, 1H), 4,13-4,24 (m, 1H), 3,64 (s, 3H), 3,54 (dd, J=18,0, 7,2 Гц, 1H), 3,16 (dd, J=18,0, 6,8 Гц, 1H), 3,06 (q, J=6,8 Гц, 2H), 1,53 (d, J=7,6 Гц, 2H), 1,31-1,42 (m, 2H), 0,93 (t, J=7,2 Гц, 3H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 544,1 [M+H+].
Пример 215
Данные ЯМР примера 215: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,82 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,39 (d, J=3,6 Гц, 1H), 7,15-7,23 (m, 1H), 7,02-7,10 (m, 2H), 6,23 (s, 1H), 4,59 (d, J=7,0 Гц, 1H), 4,43-4,56 (m, 2H), 4,19 (qd, J=6,8, 13,6 Гц, 1H), 3,62-3,68 (m, 1H), 3,61 (s, 3H), 3,17 (dd, J=6,6, 18,0 Гц, 1H), 2,83 (s, 6H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 514,0 [M+H+].
Пример 216
Данные ЯМР примера 216: 1H ЯМР (400 МГц, DMSO-d6) δ : 7,96 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,87 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,24-7,40 (m, 4H), 6,95 (d, J=7,6 Гц, 1H), 6,06 (s, 1H), 4,50 (dd, J=11,2, 6,8 Гц, 1H), 4,19 (dd, J=11,2, 6,4 Гц, 1H), 4,02 (q, J=6,4 Гц, 1H), 3,52 (s, 3H), 3,48 (d, J=7,2 Гц, 1H), 3,28-3,33 (m, 1H), 3,09 (dd, J=17,8, 6,8 Гц, 1H), 1,13 (t, J=5,6 Гц, 6H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 528,2 [M+H+].
Пример 217
Данные ЯМР примера 217: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,87 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,46 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,22 (dd, J=7,8, 5,2 Гц, 1H), 7,03-7,14 (m, 2H), 6,32 (s, 1H), 5,24 (br. s., 1H), 4,50 (d, J=7,0 Гц, 1H), 4,02 (dd, J=17,8, 9,8 Гц, 2H), 3,66 (s, 3H), 3,13 (dd, J=17,8, 7,2 Гц, 1H), 1,46 (s, 9H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 507,1 [M+H+].
Пример 218
Данные ЯМР примера 218: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,89 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,65 (d, J=3,0 Гц, 1H), 7,19-7,37 (m, 2H), 7,13 (t, J=8,4 Гц, 1H), 6,18 (s, 1H), 4,53 (dd, J=6,8, 11,2 Гц, 1H), 4,33 (dd, J=6,4, 11,4 Гц, 1H), 4,11-4,28 (m, 1H), 3,66 (dd, J=7,4, 17,8 Гц, 1H), 3,59 (s, 3H), 3,17 (dd, J=7,0, 17,8 Гц, 1H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 486,1 [M+H+].
Пример 219
Данные ЯМР примера 219: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 8,35 (s, 1H), 7,28-7,36 (m, 1H), 7,03-7,13 (m, 1H), 6,88-6,98 (m, 1H), 6,01 (s, 1H), 5,46 (br. s., 1H), 5,01 (br. s., 2H), 4,19 (br. s., 1H), 3,87 (dd, J=10,8, 5,6 Гц, 1H), 3,57-3,72 (m, 4H), 3,49 (dd, J=18,0, 7,2 Гц, 1H), 3,22-3,36 (m, 1H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 518,1 [M+H+].
Пример 220
Данные ЯМР примера 220: 1H ЯМР (400 МГц, CDCl3) δ : 7,85 (d, J=3,02 Гц, 1H), 7,42 (d, J=2,76 Гц, 1H), 6,93-7,17 (m, 3H), 6,04 (s, 1H), 5,37 (d, J=6,78 Гц, 1H), 5,19 (s, 2H), 4,64 (dd, J=11,68, 5,66 Гц, 1H), 4,46 (dd, J=11,80, 6,27 Гц, 1H), 4,24-4,33 (m, 1H), 3,62 (s, 3H), 3,52-3,60 (m, 1H), 3,23 (dd, J=18,08, 6,28 Гц, 1H).
LCMS (ESI) масса/заряд: 470,0 [M+H+].
Пример 225: in vitro анализ HBV при помощи дот-блот-гибридизации
1. Цель анализа
Содержание ДНК HBV в клетках HepG2.2.15 определяли с помощью анализа посредством дот-блот-гибридизации для оценки ингибирующего действия соединения по отношению к HBV со значением EC50 в качестве показателя.
2. Материалы для экспериментов
2.1 Клеточные линии: клетки HepG2.2.15.
Среда для культивирования клеток HepG2.2.15 (DMEM/F12, Invitrogen-11330057; 10% сыворотки крови, Invitrogen-10099141; 100 ед./мл пенициллина и 10 мкг/мл стрептомицина, Invitrogen-15140122; 1% не относящейся к незаменимым аминокислоты, Invitrogen-11140076; 2 мМ L-глутамина, Invitrogen-25030081; 300 мкг/мл генетицина, Invitrogen-10131027.
2.2 Реагенты:
трипсин (I Invitrogen-25300062);
DPBS (Hyclone-SH30028.01B);
DMSO (Sigma-D2650-100ML);
96-луночный планшет для культуры клеток (Corning-3599);
CO2-инкубатор (HERA-CELL-240);
20 x SSC (Bio-serve Co. Ltd);
трис-HCl (Aldirch-154563-1KG);
NaOH (Sinopharm 10019718);
NaCl (Sinopharm 10019308);
раствор для гибридизации (Major BioTech Co.Ltd, IMMUNE GOLD-HYB-500);
буферный набор для промывания и блокирования DIG (Roche-11585762001);
антитело к дигоксигенину, конъюгированное с щелочной фосфатазой, Fab-фрагменты овцы (Roche-11093274910).
2.3 Материалы и инструменты:
положительно заряженная нейлоновая мембрана (GE-RPN2250B);
прибор с блоттинг-мембраной (Bio-Rad, 170-6545);
гибридизационная печь (HL-2000 Hybrilinker).
3. Стадии анализа и способы
3.1 Клетки HepG2.2.15 (4 x 104 клеток/лунка) высевали в 96-луночный планшет и культивировали при 37°C, 5% CO2 в течение ночи.
3.2 На 2 день соединения разбавляли в общем в 6 концентрациях с градиентом разбавления в пять раз. Соединения в разных концентрациях добавляли в лунки с культурой в двух повторностях. Конечная трансформация DMSO в культуральной среде составляла 1%. 1 мкM GLS4 использовали в качестве контроля 100% ингибирования; 1% DMSO в качестве контроля 0% ингибирования.
3.3 На 5 день осуществляли замену на свежую культуральную среду, содержащую соединение.
3.4 На 8 день и 9 день удаляли культуральную среду в лунках с культурой и клетки собирали для дот-блот-гибридизации.
В лунку с культурой добавляли лизат и осуществляли инкубирование при 37°C в течение получаса для разделения клеток; надосадочную жидкость получали путем центрифугирования и переносили в новый микропланшет; добавляли денатурирующий раствор, после достаточного перемешивания денатурированный образец переносили и отпечатывали на нейлоновую мембрану, нуклеиновую кислоту фиксировали на мембране при помощи перекрестного сшивания ультрафиолетом.
Предварительная гибридизация: мембрану инкубировали при 60°C в растворе для гибридизации в течение 1 часа.
Гибридизация: нагревали денатурированный ДНК-зонд для HBV, меченный дигоксином, и инкубировали при 60°C в течение ночи.
Промывание мембраны: дважды осуществляли промывание в условиях высокой жесткости, 3 раза осуществляли промывание в условиях пониженной жесткости.
Блокирование: инкубировали мембрану при комнатной температуре в блокирующем растворе в течение 30-60 минут.
Гибридизация: разбавляли раствор антител блокирующим раствором, в который помещали мембрану и инкубировали при комнатной температуре в течение 30-60 минут.
Выявление: мембрану промывали в детекторном буфере в течение 5 минут с последующим добавлением проявляющего раствора, прессованием и выдерживанием.
Фотографии сохраняли в формате «tiff» и уровень яркости точки измеряли при помощи программного обеспечения для измерения.
3.5 Анализ данных
3.5.1 Процент ингибирования рассчитывали: % инг. = [1-(уровень яркости точки образца -1 мкM GLS4 в уровне яркости точки l)/(контроль DMSO в уровне яркости точки -1 мкM GLS4 в уровне яркости точки l)]x100.
3.5.2 Определение EC50: концентрацию соединения для 50% ингибирования HBV (EC50) определяли путем использования программного обеспечения GraphPad Prism.
4. Результаты анализа
Результаты анализа показаны в таблице 2.
Таблица 2. Результаты тестирования EC50 с помощью анализа посредством дот-блот-гибридизации
| Тестируемые образцы (Титульное соединение) | Концентрация для 50% ингибирования HBV, значение (EC50) | Тестируемые образцы (Титульное соединение) | Концентрация для 50% ингибирования HBV, значение (EC50) |
| Пример 1 | B | Пример 84 | B |
| Пример 2 | D | Пример 85 | B |
| Пример 3 | B | Пример 86 | C |
| Пример 4 | B | Пример 87 | C |
| Пример 5 | B | Пример 88 | C |
| Пример 6 | A | Пример 89 | D |
| Пример 7 | B | Пример 90 | B |
| Пример 8 | B | Пример 91 | B |
| Пример 9 | B | Пример 92 | A |
| Пример 10 | D | Пример 93 | B |
| Пример 11 | D | Пример 94 | D |
| Пример 12 | B | Пример 95 | B |
| Пример 13 | B | Пример 96 | D |
| Пример 14 | C | Пример 97 | D |
| Пример 15 | B | Пример 98 | D |
| Пример 16 | D | Пример 99 | D |
| Пример 17 | D | Пример 100 | D |
| Пример 18 | D | Пример 101 | C |
| Пример 19 | D | Пример 102 | C |
| Пример 20 | D | Пример 103 | B |
| Пример 21 | D | Пример 104 | D |
| Пример 22 | D | Пример 105 | C |
| Пример 23 | D | Пример 106 | D |
| Пример 24 | C | Пример 107 | B |
| Пример 25 | D | Пример 108 | D |
| Пример 26 | C | Пример 109 | D |
| Пример 27 | B | Пример 110 | D |
| Пример 28 | B | Пример 111 | D |
| Пример 29 | B | Пример 112 | D |
| Пример 30 | B | Пример 113 | B |
| Пример 31 | B | Пример 114 | B |
| Пример 32 | D | Пример 115 | B |
| Пример 33 | D | Пример 116 | A |
| Пример 34 | B | Пример 117 | A |
| Пример 35 | D | Пример 118 | B |
| Пример 36 | C | Пример 119 | A |
| Пример 37 | D | Пример 120 | A |
| Пример 38 | A | Пример 121 | A |
| Пример 39 | A | Пример 122 | D |
| Пример 40 | D | Пример 123 | A |
| Пример 41 | D | Пример 124 | A |
| Пример 42 | A | Пример 125 | A |
| Пример 43 | B | Пример 126 | A |
| Пример 44 | A | Пример 127 | A |
| Пример 45 | A | Пример 128 | A |
| Пример 46 | B | Пример 129 | A |
| Пример 47 | A | Пример 130 | A |
| Пример 48 | B | Пример 131 | D |
| Пример 49 | B | Пример 132 | A |
| Пример 50 | D | Пример 133 | B |
| Пример 51 | B | Пример 134 | D |
| Пример 52 | C | Пример 135 | C |
| Пример 53 | A | Пример 136 | C |
| Пример 54 | A | Пример 137 | D |
| Пример 55 | A | Пример 138 | A |
| Пример 56 | A | Пример 139 | D |
| Пример 57 | A | Пример 140 | C |
| Пример 58 | A | Пример 141 | C |
| Пример 59 | A | Пример 142 | B |
| Пример 60 | A | Пример 143 | B |
| Пример 61 | A | Пример 144 | A |
| Пример 62 | A | Пример 145 | C |
| Пример 63 | B | Пример 146 | D |
| Пример 64 | B | Пример 147 | D |
| Пример 65 | B | Пример 148 | B |
| Пример 66 | B | Пример 149 | A |
| Пример 67 | B | Пример 150 | B |
| Пример 68 | D | Пример 151 | A |
| Пример 69 | B | Пример 152 | B |
| Пример 70 | B | Пример 153 | A |
| Пример 71 | B | Пример 154 | B |
| Пример 72 | C | Пример 155 | A |
| Пример 73 | D | Пример 156 | A |
| Пример 74 | D | Пример 157 | A |
| Пример 75 | D | Пример 158 | A |
| Пример 76 | D | Пример 159 | A |
| Пример 77 | D | Пример 160 | A |
| Пример 78 | D | Пример 161 | A |
| Пример 79 | D | Пример 162 | B |
| Пример 80 | D | Пример 163 | A |
| Пример 81 | D | Пример 164 | D |
| Пример 82 | B | Пример 165 | A |
| Пример 83 | D |
Определение биоактивности: A: EC50 ≤100 нМ; B: 100 нМ＜EC50 ≤500 нМ; C: 500 нМ＜EC50 ≤1000 нМ; D: 1000 нМ＜ EC50 ≤5000 нМ.
Заключение: соединение по настоящему изобретению показало значительное ингибирующее действие по отношению к ДНК HBV.
Пример 226: количественный in vitro анализ HBV с помощью способа qPCR
1. Цель анализа
Содержание ДНК HBV в клетках HepG2.2.15 определяли путем количественного анализа с помощью способа qPCR в реальном времени для оценки ингибирующего действия соединения по отношению к HBV со значением EC50 соединения в качестве показателя.
2. Материалы для экспериментов
2.1 Клеточные линии: клетки HepG2.2.15.
Среда для культивирования клеток HepG2.2.15 (DMEM/F12, Invitrogen-11330057; 10% сыворотки крови, Invitrogen-10099141; 100 ед./мл пенициллина и 10 мкг/мл стрептомицина, Invitrogen-15140122; 1% не относящейся к незаменимым аминокислоты, Invitrogen-11140076; 2 мМ L-глутамина, Invitrogen-25030081; 300 мкг/мл генетицина, Invitrogen-10131027.
2.2 Реагенты:
трипсин (Invitrogen-25300062);
DPBS (Hyclone-SH30028.01B);
DMSO (Sigma-D2650-100ML);
набор для выделения ДНК с высокой пропускной способностью (набор QIAamp 96 DNA Blood Kit, Qiagen-51162);
универсальный реагент-зонд для количественного анализа от FastStart (FastStart Universal Probe Master, Roche-04914058001).
2.3 Материалы и инструменты:
96-луночный планшет для культуры клеток (Corning-3599);
CO2-инкубатор (HERA-CELL-240);
оптическая уплотняющая мембрана (ABI-4311971);
96-луночный планшет для количественной ПЦР (Applied Biosystems-4306737);
прибор для флуоресцентной количественной ПЦР (система ПЦР для работы в реальном времени от Applied Biosystems-7500).
3. Стадии анализа и способы
3.1 Клетки HepG2.2.15 (4 x 104 клеток/лунка) высевали в 96-луночный планшет и культивировали при 37°C, 5% CO2 в течение ночи.
3.2 На 2 день соединения разбавляли в общем в 8 концентрациях с градиентом разбавления в три раза. Соединения в разных концентрациях добавляли в лунки с культурой в двух повторностях. Конечная трансформация DMSO в культуральной среде составляла 1%. 1 мкM GLS4 использовали в качестве контроля 100% ингибирования; 1% DMSO в качестве контроля 0% ингибирования.
3.3 На 5 день осуществляли замену на свежую культуральную среду, содержащую соединение.
3.4 На 8 день собирали культуральную среду в лунках для культуры и ДНК экстрагировали с помощью набора для выделения ДНК с высокой пропускной способностью (Qiagen-51162), см. описание продукта для конкретных стадий.
3.5 Получение реакционной смеси ПЦР показано в таблице 1.
Таблица 1. Получение реакционной смеси ПЦР
| Объект | Объем, необходимый для получения 1 лунки (мкл) | Объем, необходимый для получения 80 лунок (мкл) |
| Универсальный реагент-зонд для количественного анализа от FastStart | 12,5 | 1000 |
| Прямой праймер (10 мкмоль) | 1 | 80 |
| Обратный праймер (10 мкмоль) | 1 | 80 |
| Зонд (10 мкмоль) | 0,5 | 40 |
Последовательность прямого праймера: GTGTCTGCGGCGTTTTATCA.
Последовательность обратного праймера: GACAAACGGGCAACATACCTT.
Последовательность зонда: 5'+ FAM + CCTCTKCATCCTGCTGCTATGCCTCATC + TAMRA -3'.
3.6 В каждую лунку 96-луночного планшета для ПЦР добавляли 15 мкл реакционной смеси и затем в каждую лунку добавляли 10 мкл ДНК-образца или ДНК-стандарта HBV.
3.7 Реакционные условия ПЦР: нагревание при 95°C в течение 10 минут; затем денатурирование при 95°C в течение 15 секунд и удлинение при 60°C в течение 1 минуты, всего 40 циклов.
3.8 Анализ данных
3.8.1 Процент ингибирования рассчитывали: % инг. = [1-(количество копий ДНК в образце - количество копий ДНК в 1 мкM GLS4)/(количество копий ДНК в DMSO-контроле - количество копий ДНК в 1 мкM GLS4)]x100.
3.8.2 Определение EC50: концентрацию соединения для 50% ингибирования HBV (EC50) определяли путем использования программного обеспечения GraphPad Prism.
4. Результаты тестирования
Результаты тестирования показаны в таблице 3.
Таблица 3. Результаты тестирования EC50 с помощью анализа посредством qPCR
| Тестируемые образцы (Титульное соединение) |
Концентрация для 50% ингибирования HBV, значение (EC50) | Тестируемые образцы (Титульное соединение) |
Концентрация для 50% ингибирования HBV, значение (EC50) |
| Пример 166 | A | Пример 196 | D |
| Пример 167 | A | Пример 197 | D |
| Пример 168 | B | Пример 198 | A |
| Пример 169 | A | Пример 199 | A |
| Пример 170 | A | Пример 200 | A |
| Пример 171 | A | Пример 201 | A |
| Пример 172 | A | Пример 202 | B |
| Пример 173 | A | Пример 203 | B |
| Пример 174 | B | Пример 204 | A |
| Пример 175 | D | Пример 205 | A |
| Пример 176 | D | Пример 206 | A |
| Пример 177 | A | Пример 207 | A |
| Пример 178 | B | Пример 208 | A |
| Пример 179 | B | Пример 209 | A |
| Пример 180 | A | Пример 210 | A |
| Пример 181 | A | Пример 211 | A |
| Пример 182 | A | Пример 212 | B |
| Пример 183 | A | Пример 213 | A |
| Пример 184 | B | Пример 214 | A |
| Пример 185 | A | Пример 215 | A |
| Пример 186 | D | Пример 216 | A |
| Пример 187 | A | Пример 217 | A |
| Пример 188 | A | Пример 218 | A |
| Пример 189 | A | Пример 219 | B |
| Пример 190 | B | Пример 220 | A |
| Пример 191 | A | ||
| Пример 192 | A | ||
| Пример 193 | A | ||
| Пример 194 | D | ||
| Пример 195 | D |
Определение биоактивности: A: EC50 ≤100 нМ; B: 100 нМ＜EC50 ≤500 нМ; C: 500 нМ＜EC50 ≤1000 нМ; D: 1000 нМ＜ EC50 ≤5000 нМ.
Заключение: соединение по настоящему изобретению показало значительное ингибирующее действие по отношению к ДНК HBV.u
1. Соединение, представленное формулой (I), или его фармацевтически приемлемая соль,
где
0-2 из D11-14 отдельно и независимо выбраны из одинарной связи, -C(=O)N(Rd3)-, -N(Rd4)-, -S(=O)2N(Rd6)-, -S(=O)N(Rd7)-, -O-, -S-, -C(=O)O-, -C(=O)- или -S(=O)2-, а остальные выбраны из -C(Rd1)(Rd2)-;
L выбран из одинарной связи, -S-, -NH-, -S(=O)-, -S(=O)2-, -N(Rd4)-, -[C(Rd1)(Rd2)]0-6;
R2 выбран из 
;
D21 выбран из одинарной связи, -N(Rd4)-, -О-, причем Rd4 представляет собой водород;
R21 независимо выбран из Н, С1-4алкила, который необязательно замещен R01, причем каждый из R01 независимо выбран из F, Cl, Br, I, C1-10алкила;
R3 отдельно и независимо выбран из следующих групп, необязательно замещенных R01: 6-10-членной ароматической кольцевой группы или 5-6-членной гетероароматической кольцевой группы, содержащей атом серы или атом азота в качестве гетероатома, причем каждый из R01 независимо выбран из F, Cl, Br, I, C1-10алкила;
R4 отдельно и независимо выбран из следующих групп, необязательно замещенных R01: C1-10алкила или 5-6-членной гетероароматической кольцевой группы, содержащей атомы азота и серы или атом азота в качестве гетероатома, причем каждый из R01 независимо выбран из F, Cl, Br, I, C1-10алкила;
R3' выбран из Н, С1-4алкила;
Rd3 и Rd6-7 отдельно и независимо выбраны из Н, CN, С1-4алкила, бензила, необязательно замещенных C1-10алкокси;
Rd4 выбран из Н, С1-4алкила, CN или выбран из следующих групп, необязательно замещенных R01: -С(=O)O-С1-4алкила, -S(=O)2NH-C1-4алкила, -С(=O)-С1-4алкила, -S(=O)2-С1-4алкила, -С(=O)NH-С1-4алкила, 3-6-членного гетероциклилкарбонила, где гетероциклил имеет кислород в качестве гетероатома, -С(=O)-C3-6циклоалкила, С1-4алкил-5-6-членного гетероарила с 1-2 гетероатомами, выбранными из азота или кислорода или азота и кислорода, -S(=O)2-C3-6циклоалкила, -С1-4алкил-С(=O)NH2, -С1-4алкилфенила, -С1-4алкил-С(=O)O-С1-4алкила, -С1-4алкил-С(=O)ОН, 3-6-членного гетероциклила с кислородом в качестве гетероатома и -C(=S)NH-C1-4 алкила, причем R01 независимо выбран из NH2, С1-4алкила, С1-4алкокси;
Rd1-2 отдельно и независимо выбраны из Н, CN, ОН, NH2, СООН или выбраны из следующих групп, необязательно замещенных R01: C1-4алкила, С1-4алкилфенила, С0-4алкил-3-6-членного гетероциклила с 1-4 гетероатомами, выбранными из азота или кислорода или азота и кислорода, 3-6-членного гетероциклилкарбонила, где гетероциклил имеет 1-4 гетероатома, выбранных из азота или кислорода, или азота и кислорода, или атома азота и серы или ее сульфоксида, бензолсульфонамидо или гетероциклилсульфонамидо, где гетероциклил имеет 1-4 гетероатома, выбранных из азота или кислорода или азота и кислорода, -D01-D02-D03-H, 
;
причем каждый из R01 независимо выбран из F, Cl, Br, I, CN, ОН, NH2, С0-4алкил-С(=O)ОН, С1-4алкила, С1-4алкокси, 
, C0-4алкил-С(=O)O-С1-4алкила;
причем D01 выбран из одинарной связи, -C1-4алкил-;
D02 выбран из О, S, NH, -С(=O)-, -S(=O)2-, -С(=O)O-, -C(=O)NH-, -C(=S)NH-, -S(=O)2NH-, -S(=O)NH-, -NHC(=O)O-, -NHC(=O)NH-, -NHC(=NH)NH-, -NHS(=O)2NH-, -C(=O)NHS(=O)2-, -NHS(=O)NH-, -C(=O)NHS(=O)-, -C(=N)-, -NH-C(=N)-;
D03 выбран из одинарной связи, -C1-4алкил-, -С2-4алкенил-, -C3-6циклоалкил-, -3-6-членного гетероциклоалкил-, где гетероциклил имеет 1-2 гетероатома, выбранных из азота или кислорода или азота и кислорода, фенила, 5-6-членного гетероарила с 1-4 гетероатомами, выбранными из азота или азота и кислорода;
необязательно R3 и R3' вместе присоединены к одному и тому же атому углерода с образованием 9-членного бициклического кольца, которое необязательно замещено F.
2. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1 со структурой, представленной формулой (II)
где R31-32 отдельно и независимо выбраны из Н, F;
m, n отдельно и независимо выбраны из 1 или 2;
представляет собой одинарную связь или двойную связь;
другие параметры определены в п. 1.
3. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1 или 2, где R01 в Rd1-2 выбран из F, Cl, Br, I, OH, CN, NH2, Me, Et, 
.
4. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1 или 2, где Rd1-2 отдельно и независимо выбраны из Н, ОН, NH2, CN, -СООН или выбраны из следующих групп, необязательно замещенных 1, 2 или 3 R01: СН3, 
5. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 4, где Rd1-2 отдельно и независимо выбраны из: Н, ОН, NH2, CN, -СООН, СН3, 
6. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1 или 2, где структурная единица 
выбрана из: 
7. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 6, где структурная единица 
выбрана из: 
8. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1 или 2, где L выбран из одинарной связи, -NH-; D21 выбран из одинарной связи, -О-, -NH-; или D21 выбран из С1-4алкила, необязательно замещенного R01.
9. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 8, где R21 выбран из метила, этила, н-пропила, изопропила, фторметила, фторэтила, фторпропила, дифторметила, дифторэтила, дифторпропила.
10. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 9, где структурная единица 
выбрана из: 
11. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1 или 2, где R3 отдельно и независимо выбран из следующих групп, необязательно замещенных 1, 2 или 3 R01: фенила, пиридила, тиенила, пиразолила, пирролила, имидазолила, 1,2,3-триазолила, 1,2,4-триазолила, пиримидинила, пиразинила, 1,3,5-триазинила, нафтила;
R4 отдельно и независимо выбран из следующих групп, необязательно замещенных 1, 2 или 3 R01: пиридила, тиазолила, пиразолила, изотиазола, пирролила, имидазолила, 1,2,3-триазолила, 1,2,4-триазолила, 1,3,4-тиадиазолила, пиримидинила, пиразинила, 1,3,5-триазинила.
12. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 11, где R3 выбран из:
или R4 выбран из:
или структурная единица 
выбрана из: 
13. Соединение или его фармацевтически приемлемая соль по п. 1 или 2, выбранные из:
