Способ прогнозирования рецидива эндометриоидных кист яичника

Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования риска рецидивирования эндометриоидных кист яичника. Для этого в ткани капсулы эндометриодной кисты яичника женщин определяют экспрессию рецепторов эстрадиола ER, если ER 2 балла и больше, дополнительно определяют индекс пролиферативной активности железистой ткани Ki67, и если Ki67 железы 24,5% и больше, то прогнозируют рецидив эндометриоидных кист яичника. Способ позволяет с высокой точностью прогнозировать рецидив заболевания задолго до появления клинических признаков при его высокой чувствительности и специфичностии. 1табл., 3 пр.

 

Изобретение относится к медицине, в именно к гинекологии, и найдет применение для прогнозирования риска рецидивирования эндометриоидных кист яичника.

Поражение яичников считается одним из наиболее часто встречающихся проявлений эндометриоза. Оно возникает в результате роста эктопического эндометрия в яичнике [Seo JW, Lee DY, Yoon BK, Choi D. The age related recurrence of endometrioma after conservative surgery. Eur J Obstet Gynecol Reprod Biol. 2017 Jan; 208: 81-85.]. Выявляясь у 17-44% общего количества больных с эндометриозом [Redwine DB. Ovarian endometriosis: а marker for more extensive pelvic and intestinal disease. Fertil Steril 1999; 72:310-5.], эндометриоз яичников (ЭЯ) занимает второе место среди всех локализаций этой патологии и первое в группе наружного генитального эндометриоза (НГЭ) [Адамян, Л.В. Роль современной гормонмодулирующей терапии в комплексном лечении, генитального эндометриоза / Л.В. Адамян, Е.Н. Андреева // Проблемы репродукции. - 2011. - №6. - С. 66-77].

Важной особенностью течения заболевания является рецидивирующий характер. Понятие «рецидив ЭКЯ» определено как присутствие кисты яичника диаметром 3 см в течение более двух последовательных менструальных циклов, сопровождающихся болевым синдромом в виде дисменореи, с выраженностью болевого синдрома, равной или превышающей таковую до операции [Liu X, Yuan L, Shen F, Zhu Z, Jiang H, Guo SW. Patterns of and risk factors for recurrence in women with ovarian endometriomas. ObstetGynecol 2007; 109: 1411-20.]. Рецидивы возникают как после хирургического лечения, так и на фоне гормональной терапии и после ее отмены [Possible involvement of nerve growth factor in dysmenorrhea and dyspareunia associated with endometriosis / T. Kajitani [et al.] // Endocr. J. - 2013. - Vol. 60, N 10. - P. 155-164.]. Рецидивы ЭКЯ не редкое явление, их частота сильно варьирует по Данным различных исследований, составляя от 6 до 67% [Morgante G, Ditto A, La Marca A, De Leo V. Low-dose danazol after combined surgical and medical therapy reduces the incidence of pelvic pain in women with moderate and severe endometriosis. Hum Reprod 1999; 14: 2371-4.]. Повторные хирургические вмешательства могут вызвать необратимые изменения в яичниках, приводя к истощению фолликулярного резерва [MuziiL, AchilliC, LecceF, BianchiA, FranceschettiS, MarchettiC, etal. Second surgery for recurrent endometriomas is more harmful to healthy ovarian tissue and ovarian reserve than First surgery. Fertil Steril 2015; 103: 738-43.].

Описанные выше факты говорят о том, что проблема изучения эндометриоидных кист яичников (ЭКЯ) и их рецидивов продолжает сохранять свою актуальность уже потому, что в структуре генитального эндометриоза на долю ЭКЯ приходится до 59% [How can macroscopically normal peritoneum contribute to the pathogenesis of endometriosis? / A. Fassbender [et al.] // Fertil Steril. - 2011. - V. 96, N. 3. - P. 697-699. Molecular aspects of development and regulation of endometriosis / Y.B. Aznaurova [et al.] // Reprod. Biol. Endocrinol. - 2014. - N 12. - P. 50-68.]. Рецидив эндометриоза приводит к снижению качества жизни женщин репродуктивного возраста, приводя к формированию стойкого болевого синдрома, нарушает овариальный резерв, что, в свою очередь, вызывает затруднение при выборе терапевтической тактики.

Несмотря на важность клинических факторов риска, связанных с популяцией, при прогнозировании рецидива биохимические маркеры имеют более ценное значение. Таким образом, открытие потенциально значимых биомаркеров может быть полезно клиницистам для обоснования новых подходов к диагностике и эффективному лечению.

Актуальным является поиск прогностических маркеров рецидива ЭКЯ.

В последние годы во всем мире активно разрабатываются новые нейнвазйвные методы диагностики и прогнозирования рецидивов эндометриоза с использованием высокотехнологичных методов лабораторной диагностики.

На сегодняшний день для диагностики ЭКЯ используют кроме параметров клиническая картина заболевания и данные гинекологического обследования, несколько специальных инструментальных и лабораторных методов исследования [Нажмутдинова, Д.К. Методические подходы к диагностике рецидива после операции по поводу эндометриоза яичников / Д.К. Нажмутдинова, Н.П. Матчанова, А.В. Ан // Врач-аспирант. - 2010. - Т. 39, №2. - С. 66-72]. Все большее значение в первичной диагностике эндометриоза, определении эффективности проводимой терапии, обнаружении рецидива заболевания, дифференциальной диагностике эндометриоза и злокачественной опухоли приобретает определение в крови различных маркеров неинвазивной диагностики эндометриоза [М.И. Ярмолинская, Е.Н. Русина, А.Р. Хачатурян, М.С.Флорова. Клиника и диагностика генитального эндометриоза // Журнал акушерства и женских болезней. - 2016. - Т. 65. - №5 - С., Meola J., Rosa e Silva, Blassioli D. et al. Differentially expressed genes in eutopic and ectopic endometrium of women with endometriosis, Fertility and Sterility, 2010, No. 93 (6), pp. 1750-1773.].

Чувствительность данных методов не превышает 50%, что ограничивает их клиническое использование для диагностики эндометриоза.

В настоящее время наиболее точным диагностическим методом исследования считается эндоскопия [Reis, F.M. Endometriosis: hormone regulation and clinical consequences of chemotaxis and apoptosis / F.M. Reis, F. Petraglia, R.N. Taylor // Hum. Reprod. Update. - 2013. - V. 19, N. 4. - P. 406- 418]. С помощью этого метода возможно не только обнаружить ЭКЯ, но также выполнить удаление очагов и осуществить контроль эффективности лечения эндометриоидных образований. Диагностическая точность метода составляет 92%, чувствительность и специфичность соответственно 98% и 96% [Rimbach, S. Surgical Therapy of Endometriosis: Challenges and Controversies / S. Rimbach, U. Ulrich, K.W. Schweppe // GeburtshilfeFrauenheilkd. - 2013. - Vol. 73, N 9. - P. 918-923.]. Однако данный метод непозволяет прогнозировать рецидивйрование ЭКЯ.

Окончательная верификация ЭЯ выполняется так или иначе с помощью гистологического исследования удаленных тканей кист. Все больший интерес представляет морфологическое исследование стенок ЭКЯ, при котором отмечается неоднородность морфологического строения эндометриоидных образований яичников.

Одним из способов прогнозирования эндометриоидных кист яичников является выявление и оценка следующих прогностически неблагоприятных факторов: невроз, проявляющийся в ипохондрии, раздражительной слабости, фобиях, повышенной тревожности, астении, выраженной итравертированности и интрапсихической неупорядоченности; температурный акцент более 0,6°С в органоспецифических точках влагалища; повышение средней электропроводимости в тесте Ryodoraku более 70 мкА (Гончаренко В.П. Значение психотерапии и лазеропунктуры в комплексном лечении и медицинской реабилитации больных генитальным эндометриозом. Дисс. к.м.н.. В. - 2000. - 185 с.).

Недостатком способа является невысокая, обусловленная выявлением, большей частью, общеклинических факторов риска, характерных не только при рецидивировании ЭКЯ.

Описан способ прогнозирования рецидивирования эндометриоидных кист яичников на основании регистрации повышения содержания лептина (свыше 20 нг/мл) и йнтерлейкина 6 (свыше 10 пг/мл) в сыворотке крови больных спустя 3 месяца после операции. Повышение данных показателей свидетельствует о высоком риске рецидива заболевания при отсутствии клинических и инструментальных признаков заболевания (Орлов О.Н. Клиническое значение исследования лептина и интерлейкина-6 в диагностике и лечении эндометриоза яичников. Дисс… к.м.н. М. -2005. - 131 с.).

Недостатком этого способа прогнозирования является низкая точность, обусловленная определением показателей в сыворотке крови, что менее информативно, чем определение тех же показателей в ткани эндометриоза яичников.

Описано исследование содержимого кист яичников, в частности, концентрации эстрадиода,, прогестерона, тестостерона,

лютеинизирующего и фолликулостимулирующего гормонов, пролактина, анти-р53-антител, ингибина А, интерлейкинов 1 бета, 2, 6 и 8, сосудистого эндотелиального фактора роста, основного фактора роста фибробластов, растворимой формы гена Fas. Анализ пунктатов кист яичников методом иммуноферментного анализа показал, что уровень пролиферативных процессов в кистах яичников значительно ниже, чем в доминантном фолликуле. (Дубровина СО. Анализ пунктатов кист яичников // Известия высших учебных заведений. Северо-Кавказский регион. Серия: Естественные науки. - 2006. - Т. 4, № S 25. - С. 60-65.).

Данный способ обладает рядом несовершенств: 1.Метод неспецифичен (основной фактор рост афибробластов-2 является проангиогенным фактором роста и присутствует в эутопическом и эктопическом эндометрии,он играет исключительно важную роль не только для ангиогенеза в эндометрии,но и для ангиогенеза в организме человека (Ferriani R.A., Charnock-Jones D.S., Prentice A. etal. // Hum. Reprod. - 1993. - Vol. 8. - P. 11-16. MollerB., Rasmussen С., Lindblom В., Olovsson М. // Mol. Hum. Reprod. - 2001. - Vol. 5 - P. 681-684.). 2. Ограничение возможности широкого применения метода (наличие оборудования и тест -наборов только в крупных перинатальных центрах). 3. Для выполнения метода необходим высококвалифицированный специалист.

Из существующего уровня техники известен способ прогнозирования риска рецидивирования эндометриоидной кисты яичника, включающий исследование биопрепарата, отличающийся тем, что иммуногистохимически определяют показатели экспрессии матриксной металлопротеиназы-7 и ингибитора матриксной металлопротеиназы - TIMP-4, при величине первого более 5 и второго менее 5 баллов прогнозируют рецидив эндометриоидной кисты (патент РФ№2 304 782, опубл. 20.08.2007).

Однако, как показали исследования («Матриксные металлопротеиназы Ассоциация специалистов лабораторной диагностики» .http://asld.baikal.ru/index.php?id=69&option=com_content&task=view, 16.09.2010 г.) количество вновь синтезируемых MMPs регулируется в основном на уровне транскрипции, а протеолитическая активность существующих MMPs контролируется как активацией проферментов, так и ингибированием активных ферментов эндогенными ингибиторами, α2-макроглобулином и тканевыми ингибиторами металлопротеиназ (TIMP). По специфичности ММР можно разделить на коллагеназы (ММР-1, -8 и -13), желатиназы (ММР-2 и -9) и стромелизины (ММР-3 и -10). MMPs играют важную роль в физиологических и патологических процессах, включая эмбриогенез, тканевое ремоделирование, заживление ран, воспаление, артрит и рак. Клетки некоторых опухолей сами образуют MMPs и, независимо от этого, любая опухоль является мощным индуктором образования этих протеаз. ММР-7 одна из самых маленьких MMPs, состоящая из про-домена и каталитического домена. ММР-7 экспрессируется в нормальных и патологически измененных эпителиальных клетках. ММР-7 синтезируется различными опухолями: молочной железы, толстого кишечника, простаты, желудка, верхних дыхательных путей и пищевода, легких и кожи. ММР-7 способна к утилизации большого ряда белков экстрацеллюлярного матрикса: коллагена IV типа, желатинов, ламинина, аггрекана, энтактина, эластина и верзикана. мРНК TIMP-4 экспрессируется на высоком уровне в сердце, на низком уровне в почках, поджелудочной железе, толстой кишке и тестикулах. Кроме того, экспрессия TIMP-4 нарушается при различных типах опухолей, включая рак молочной железы, шейки матки и эндометрия, глиомы и хориокарциномы.

Таким образом, очевидно, что данные маркеры нельзя отнести к специфичным и точным для прогнозирования ЭКЯ.

Известен способ диагностики эндометриоидных кист яичников, включающий исследование сыворотки крови, отличающийся тем, что у пациенток при наличии кисты яичника колориметрическим методом определяют активность аргиназы и, при ее величине 0,73 ммоль/ч/л и выше диагностируют эндометриоидные кисты яичников (патент РФ№2 480 761, 27.04.2013).

Недостаток данного способа состоит в том, что с его помощью не возможно прогнозировать рецидивирование ЭКЯ.

Таким образом, данные научной литературы свидетельствуют о неясности, спорности и недостаточной изученности многих вопросов, связанных с ранней клинической диагностикой, морфофункциональной оценкой, причинах частого рецидива заболевания ЭКЯ. Необходимость таких исследований актуальна для решения вопросов рациональной лечебной тактики, профилактики и прогнозирования рецидивов эндометриоидных образований яичников.

Наиболее близким к предлагаемому способу нами выбран способ прогнозирования риска рецидивирования эндометриоидной кисты яичника описанный в патент РФ №2304782, опубл. 20.08.2007.

Недостатки данного технического решения устраняются заявляемым изобретением.

Задачей, на решение которой направлено заявляемое изобретение является повышение точности способа прогнозирования рецидива эндометриоидной кисты яичника.

Данная задача решается за счет способа прогнозирования рецидива эндометриоидных кист яичника (ЭКЯ) путем иммуногистохимического анализа биоптата, заключающегося в том, что в ткани капсулы эндометриодной кисты яичника женщин определяют экспрессию рецепторов эстрадиола ER, если ER 2,0 баллов и больше, дополнительно определяют индекс пролиферативной активности железистой ткани Ki67, если Ki67 железы 24, 5% и больше - прогнозируют рецидив эндометриоидных кист яичника.

Техническим результатом, обеспечиваемым приведенной совокупностью признаков, является высокая точность и специфичность метода. Разработанные маркеры рецидива эндометриодных кист позволят прогнозировать рецидив заболевания после оперативного лечения, а также определить инновационные подходы к лечению

По мнению ряда авторов (Борисова Е.А., 2004; Сидорова И.С. и соавт., 2011), клинические особенности эндометриоидных кист яичников коррелируют с данными морфологических и иммуногистохимических исследований, подтверждающих генетически детерминированные два варианта течения эндометриоза - рецидивирующий и нерецидивирующий. Этот факт имеет большое практическое значение, а именно: при определении иммуногистохимических показателей в удаленной ткани эндометриоза

яичников с учетом других клинико-морфологических данных можно достоверно прогнозировать рецидивирование процесса (Адамян Л.В. с соавт., 2004; Пашкова А.В., 2004; Михалева Л.М. с соавт., 2006).

Нашими исследованиями выявлено, что уровень экспрессии рецепторов эстрадиола в первичной эндометриоидной ткани отличается от такового при рецидивирующей кисте. Так же нами установлено, что экспрессия Ki67 выражена в большей степени при рецидивах эндометриодных кист по сравнению с первичными, что свидетельствует в пользу более активной пролиферации в стенках кист при рецидиве. В патогенезе заболевания доказано участие рецепторов стероидных гормонов и белка Ki67 в эндометриоидной ткани, полученной в ходе оперативного удаления очагов в яичниках. Ki-67 представляет собой ядерный белок, тесно связанный с пролиферацией клеток, участвующий в транскрипции РНК рибосом [Scholzen Т, Gerdes J. The Ki-67 protein: from the known and the unknown. J Cell Physiol, 2000, 182(3):311-322]. Маркер Ki67 указывает на повышение пролиферативной активности клеток, таким образом, объясняя свою прямо пропорциональную взаимосвязь с тяжестью заболевания [Alif М, Anwar R, Pribadi A. Ki-67 expression is correlated with cyst size and stage of endometriosis. Indones J Obstet Gynecol, 2013, 1(3): 124-128.].

В качестве маркеров прогноза рецидива эндометриоидных кист яичников после оперативного вмешательства при отмене или отсутствии гормональной терапии в послеоперационном периоде нами предложен уровень экспрессии рецепторов эстрадиола 2,0 балла (чувствительность - 66,7%, специфичность - 76,8%) и Ki 67 в железе 24,5% (чувствительность - 93,3%, специфичность - 100,0%). Данные маркеры могут быть использованы для составления персонализованного подхода к ведению пациенток в послеоперационном периоде и назначению гормонального лечения.

Необходимыми критериями любого маркера прогноза являются -доступность, информативность, надежность. Данные требования выполняются при изучении уровня экспрессии стероидных гормонов в эндометриоидной ткани, полученной в ходе оперативного удаления очагов в яичниках, в аспекте патогенетически вовлеченных факторов.

Критерии включение в исследование:

- репродуктивный возраст,

- эхографические признаки эндометриоидных кист яичников,

- лапароскопически и морфологически подтвержденный эндометриоз яичников,

- наличие болей в нижних отделах живота и пояснице длительностью 6 месяцев и более.

Критериями исключения являлись:

- экстрагенитальный эндометриоз,

- аденомиоз,

- варикозное расширение вен малого таза,

- воспалительные заболевания органов малого таза,

- опухоли яичников другой этиологии или опухоли другой локализации,

- наличие сопутствующей декомпенсированной экстрагенитальной патологии.

В нашем исследовании мы предположили, что экспрессия рецепторов стероидных гормонов в эктопическом эндометрии может отличаться при первичном случае заболевания и рецидиве. Чтобы подтвердить или опровергнуть это предположение, нами был проведен сравнительный анализ экспрессии рецепторов эстрадиола, прогестерона и Ki67 в ткани эндометриоидных образований яичников в зависимости от случая заболевания (первичный случай или рецидив). Показатели описательной статистики результатов анализа представлены в таблице 1.

Нами было выявлено, что у пациенток с рецидивирующими ЭКЯ наблюдается повышение уровня экспрессии рецепторов эстрадиола по сравнению с первичными ЭКЯ (р=0,0001).

В нашем исследовании мы обнаружили, что экспрессия Ki67 оказалась достоверно выше в рецидивирующих ЭКЯ как в железистой (0,0001), так и в стромальной ткани (0,0001), однако Ki 67 железистой ткани достоверно выше оказался в стенке первичной кисты с рецидивом ЭКЯ по сравнению с пациентками без рецидива заболевания. Таким образом, после оперативного лечения показано исследование ИГХ профиля стенок кист для определения прогноза рецидива заболевания и выбора терапии в послеоперационном периоде.

Подробное описание способа и примеры его конкретного выполнения.

Заявляемый способ осуществлялся следующим образом. Все больные прооперированы в секреторную фазу цикла путем лапароскопического вмешательства, при котором осуществлялся забор материала для морфометрического и морфологического (иммуногистохимического и гистологического) исследований. Область получения материала была стандартизирована - стенки эндометриоидных кист.

Пациенткам после оперативного удаления кисты осуществляют иммуногистохимическое исследование стенки кисты с оценкой уровня экспрессии эстрадиола ER, если ER больше 2,0 баллов, дополнительно определяют индекс пролиферативной активности железистой ткани Ki67, если Ki67 железы больше 24, 5% - прогнозируют рецидив ЭКЯ.

Гистологическая проводка материала осуществлялась в гистопроцессоре замкнутого типа (Vip 6). Далее он заливался в парафин и на гистологических кассетах подвергался микротомированию в ротационных микротомах с толщиной среза 4 мм. Срезы обезжиривались и обезвоживались по стандартному протоколу. На последнем этапе выполнялась окраска гематоксилином-эозином.

Для обзорных целей, измерения высоты клеток эндометриоидного эпителия, площади ядер эндометриоидного эпителия и эндометриальных клеток срезы, полученные из препаратов, фиксировались в 10% нейтральном формалине.

Иммуногистохимическое исследование проводили на автоматическом гистостейнере Leica Bond МАХ, использовали следующие иммуногистохимические маркеры:

1. Моноклональные мышиные антитела к рецептору эстрадиола, клон 6F11 (readytouse) фирмы Leica;

2. Моноклональные мышиные антитела к рецептору прогестерона, клон 16 (readytouse) фирмы Leica;

3. Моноклональные мышиные антитела к Ki67 (ММ1), (readytouse) фирмы Leica.

Оценка иммуногистохимических реакций проводилась при помощи микроскопа Leica DM4000B. Уровень экспрессии иммуногистохимических маркеров оценивался полуколичественным способом в баллах: 0 - отсутствие реакции, 1 - слабая реакция, 2 - умеренная реакция, 3 - выраженная реакция маркер-позитивных клеток.

Микроскопию полученных гистологических препаратов осуществляли при 10, 20, 40-кратном увеличении с помощью светового микроскопа «LEICADM4000B».

Для прогноза рецидива эндометриодной кисты яичника после оперативного вмешательства показано проведение иммуногистохимического исследования тканей капсулы эндометриодной кисты для определения рецепторов эстрадиола и Ki67. При уровне экспрессии рецепторов эстрадиола в тканях эндометриодных кист выше 2,0 балла (чувствительность - 66,7%, специфичность - 76,8%) и Ki 67 в железе больше 24,5% (чувствительность - 93,3%, специфичность - 100,0%) можно прогнозировать в послеоперационном периоде рецидив эндометриодной кисты при отмене гормональной терапии или ее отсутствии.

Работоспособность заявляемого способа подтверждается следующими клиническими примерами:

Пример 1. Больная, П-ва, 31 лет. Была госпитализирована в гинекологическое отделение с направительным диагнозом эндометриоидная киста правого яичника. Жалоб на тянущие боли. Заключение врача ультразвуковой диагностики: ЭХО-признакиэндометриоидной кисты правого яичника. Проведена лапароскопия: удаление кисты правого яичника, вапоризация очагов эндометриоза. Диагноз подтвержден морфологически. После операции препарат в парафинном блоке был отправлен на иммуногистихимическое исследование.

Полученные данные указывают на риск развития рецидива эндометриоидной кисты яичника. Через год на профилактическом осмотре при проведении ультразвукового исследования, выявлен рецидив.

Пример 2. Больная К-на, 27 лет. Была госпитализирована в гинекологическое отделение с направительным диагнозом эндометриоидная киста левого яичника. Жалоб не предъявляла. Заключение врача ультразвуковой диагностики: ЭХО-признакиэндометриоидной кисты левого яичника. Проведена лапароскопия: удаление кисты левого яичника, вапоризация очагов эндометриоза. Диагноз подтвержден морфологически. После операции препарат в парафинном блоке был отправлен на иммуногистихимическое исследование.

Полученные данные указывают на отсутствие риска развития рецидива эндометриоидной кисты яичника. Через год на профилактическом осмотре при проведении ультразвукового исследования, никаких структурных изменений яичников не обнаружено, данных за рецидив заболевания не выявлено.

Пример 3. Больная, И-ва, 32 года. Была госпитализирована в гинекологическое отделение с направительным диагнозом эндометриоидная киста левого яичника. Жалоб на тянущие боли. Заключение врача ультразвуковой диагностики: ЭХО-признакиэндометриоидной кисты левого яичника. Проведена лапароскопия: удаление кисты левого яичника, вапоризация очагов эндометриоза. Диагноз подтвержден морфологически. После операции препарат в парафинном блоке был отправлен на иммуногистихимическое исследование.

Полученные данные указывают на риск развития рецидива эндометриоидной кисты яичника. Через год на профилактическом осмотре при проведении ультразвукового исследования, выявлен рецидив.

Таким образом, нами выявлены маркеры позволяющие прогнозировать рецидивирование эндометриоидной кисты задолго до появления клинических признаков, что делает возможным проведение своевременной терапии и предотвращение повторного возникновения эндометриоидной кисты.

Число включенных в наше исследование пациенток составило 84. Всем было выполнено оперативное лечение по поводу эндометриодных кист яичников. Все пациентки были разделены на две группы. В I группу (основную) вошли 69 (82%) женщин, имеющих в анамнезе первичные эндометриоидные кисты, во II группу были включены 15 (18%) пациенток с рецидивами эндометриоидных кист яичников.

В ходе проведенного нами исследования всем пациенткам после оперативного удаления кисты осуществляли иммуногистохимическую оценку уровня экспрессии эстрадиола ER и Ki67 железистой ткани стенки кисты. Больных разделили на группы. При оценке уровня экспрессии были получены следующие результаты (таблица 1). Показатели экспрессии рецепторов эстрадиола ER в II группе оказались -1,5 бала (1÷2), во I группе - 1(1÷1). При оценке маркера Ki67 железистой ткани были получены следующие результаты (таблица 1). Показатель Ki67 в железистой ткани в II группе оказался 35(30÷39), во I группе - 7(6÷9).

Ретроспективно: II группа - 12 пациенток- в течение года после операции возник рецидив эндометриоидной кисты, I группа - 69 пациенток -отсутствие рецидива эндометриоидной кисты (в течение года). Проводили сравнение выявленных в проспективных исследованиях показателей в двух группах.

Полученные результаты свидетельствуют о повышении уровня экспрессии рецепторов эстрадиола в II группе по сравнению со I группой (р<0,05). Одновременно с этим в стенке эндометриоидных кист яичников II группы (ER больше 1.5 баллов) установлено повышение уровня маркера Ki67 железистой ткани по сравнению с. показателем во I группе (р<0,05).

Экспрессия рецепторов эстрадиола ER и Ki67 в железистом компоненте достоверно выше был у пациенток с рецидивирующими кистами.

Путем построения Roc-кривой были найдены прогностические ИГХ маркеры рецидива ЭКЯ. Нами выявлены точки, при которых мы можем прогнозировать рецидив заболевания во время первой операции. Если уровень экспрессии эстрадиола больше двух баллов, a Ki67 в железистой ткани больше 24,5%, с высокой чувствительностью (93,3%,) и специфичностью (100%) мы можем прогнозировать развитие рецидива заболевания при отсутствии назначения гормональной терапии. При использовании предложенного способа в клинике в 80% прогноз рецидива подтвердился, что показало высокую точность и специфичность разработанного нами метода.

Заявленный способ позволяет с высокой точностью прогнозировать рецидив заболевания задолго до подавления клинических признаков, что делает возможным дает возможность разработать индивидуально подобранную длительную терапию пациенткам с данной патологией, тем самым предотвращая рецидив эндометриоидной кисты.

Способ прогнозирования рецидива эндометриоидных кист яичника путем иммуногистохимического анализа биоптата, отличающийся тем, что в ткани капсулы эндометриодной кисты яичника (ЭКЯ) женщин определяют экспрессию рецепторов эстрадиола ER, если ER 2 балла и больше, дополнительно определяют индекс пролиферативной активности железистой ткани Ki67, если Ki67 железы 24,5% и больше - прогнозируют рецидив эндометриоидных кист яичника.