Способ прогнозирования течения инфекции вируса герпеса человека 6 типа у детей

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии и инфекционным болезням, и может быть использовано для прогнозирования течения инфекции вируса герпеса человека 6 типа у детей. Для этого выявляют ДНК вируса в крови, а затем дополнительно у детей в возрасте младше 4-х лет определяют полиморфизм Mx1: -123 C>A, а у детей 4 лет и старше определяют полиморфизм CCR5: -2554 G>T. При выявлении гетерозиготного состояния СА для Mx1: -123 C>A и гомозиготного состояния GG для CCR5: -2554 G>T прогнозируют клинически манифестное течение инфекции. Способ обеспечивает определение необходимости проведения противовирусной терапии в зависимости от прогнозирования течения герпес-вирусной инфекции - ВГЧ-6. 4 пр.

 

Изобретение относится к педиатрии и инфекционным заболеваниям и предназначено для прогнозирования течения инфекции вируса герпеса человека 6 типа у детей.

Герпесвирусные инфекции являются одним из самых распространенных в человеческой популяции. Серологические маркеры 8 типов герпесвирусов, играющих доказанную роль в патологии человека, а так же выделение их ДНК и антигенов в различных средах организма встречается более, чем в 90% случаев после 60 лет жизни. Инфекция, вызванная вирусом герпеса человека 6 типа, является наиболее распространенной из всех герпесвирусных инфекций.

Инфицирование, как правило, происходит в детском возрасте и не всегда имеет манифестные клинические проявления, позволяющие ее заподозрить [Горелов АВ, Музыка АД, Мелехина ЕВ, Петухова ЕВ, Шипулина ОЮ, Домонова ЭА, и др. Инфекция вируса герпеса человека 6-го типа, у детей, госпитализированных с клиническими проявлениями острого респираторного заболевания. Эпидемиология и инфекционные болезни. Актуальные вопросы. 2017;6:16-24.]. Однако реактивация инфекции, вызванной вирусом герпеса человека 6 типа (ВГЧ-6) возможна в течение дальнейшей жизни. Выявление лабораторных показателей, свидетельствующих об активной форме ВГЧ-6 инфекции, у пациента без клинических проявлений какого-либо заболевания, ставит вопрос о назначении противовирусной терапии при бессимптомных формах инфекции.

В многочисленных исследованиях было показано, что герпесвирусные инфекции далеко не всегда имеют специфические клинические проявления, что затрудняет диагностику [Hall СВ, Caserta МТ, Schnabel KC, McDermott MP, Lofthus GK, Carnahan JA, et al. Characteristics and acquisition of human herpesvirus (HHV) 7 infections in relation to infection with HHV-6. J Infect Dis. 2006; 193(8): 1063-9].

Известен способ определения количества ДНК герпесвируса - вирусной нагрузки (ВН), в соскобе из эпителия ротоглотки методом количественной полимеразной цепной реакции (ПЦР) с установлением разделяющего значения ВН, при превышении которого делают предположение об активном течении инфекции, что определяет дальнейшую врачебную тактику (RU 26395593, 21.12.17).

Известен способ определение индекса авидности вируса герпеса 6 типа для возможности определения фазы инфекционного процесса, вызванного вирусом ВГЧ-6, длительности заболевания, установлении этиологии заболевания и выбора терапевтической тактики (RU 2596794, 10.09.16).

Известен способ определения показаний к проведению противогерпетической терапии при инфекции ВГЧ-6 у детей с острыми респираторными заболеваниями. Методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией в режиме «реального времени» определяют количество копий ДНК ВГЧ-6. При более 100 копий/105 клеток в крови определяют показания к проведению противогерпетической терапии RU 2641609, 18.01.18). По существу данный способ отражает прогнозирование течения инфекции ВГЧ-6 в зависимости от наличия копий его ДНК с соответствующим определением показаний к проведению противогерпетической терапии. Данный способ принят за ближайший аналог.

Комплексное изучение молекулярно-генетических предпосылок развития клинически манифестных форм и исходов герпесвирусных инфекций является перспективным направлением исследований. Зарубежными авторами проводились исследования полиморфизма генов, определяющих взаимодействие различных респираторных и герпесвирусов с клетками хозяина на различных стадиях инфекции. В исследовании Qing Shao и соавт. было обнаружено при изучении клеток НА 1800, инфицированных ВГЧ-6, существование нескольких генов, коррелирующих с неврологическими нарушениями, особенно CTSS, РТХ3, CHI3L1, Mx1, CXCL16, BIRC3 и BST2. Авторы считают, что важной задачей является проведение исследований по выявлению роли генов при инфекции ВГЧ-6 (Qing Shao et all. Transcriptome sequencing of neurologic diseases associated genes in HHV-6A infected human astrocyte. Oncotarget. 2016 Jul 26; 7(30): 48070-48080).

Патогенетически можно выделить несколько групп генов, отвечающих за синтез клеточных рецепторов и их сигнальных молекул для взаимодействия с вирусом; кодирующих синтез противовирусных белков; отвечающих за синтез рецепторов клеточной иммунорегуляции и цитокинов. Целый ряд неблагоприятных одиночных - нуклеотидных полиморфизмов (SNP) изучен при гриппе. При герпесвирусных инфекциях также были проведены работы по изучению роли Toll-подобных рецепторов (TLR) 3-го, 9-го и 6-го типа в развитии тяжелых форм менинго-энцефалитов ВПГ1-этиологии и клинических проявлений цитомегаловирусной инфекции (ЦМВИ). Так при сравнении полиморфизмов генов TLR3 у детей с врожденной ЦМВИ и детей того же возраста без признаков инфекции было обнаружено, что для детей с ЦМВИ характерно увеличение частоты гетерозиготных генотипов TLR3 L412F, по сравнению с неинфицированными. Дети с мутацией хотя бы в одном из аллелей L412F SNP и с гетерозиготными генотипами rs3775296 имели повышенный риск заболевания ЦМВИ. [ М, А, М, Nowakowska D, Gaj Z,ZJ, et al. Association of TLR3 L412F Polymorphism with Cytomegalovirus Infection in Children. PLoS One. 2017; 12(1): e0169420].

Вирус герпеса человека 6 типа филогенетически относится к группе β-герпесвирусов, так же как и цитомегаловирус. Это обстоятельство обусловливает схожесть рецепторных механизмов взаимодействия ВГЧ-6 с рецепторным механизмом хозяина. Существуют немногочисленные публикации, посвященные роли TLR9-пути при инициировании ВГЧ-6А-нейровоспаления, развитии розового лишая у взрослых.

Изучение индивидуальных для пациентов молекулярно-генетических предпосылок формирования клинических форм инфекции, вызванной ВГЧ-6, является новым и перспективным направлением в детской инфектологии.

Задачей предлагаемого изобретения является определение прогностического значения полиморфизма того или иного гена для развития различных клинических форм инфекции, вызванной ВГЧ-6, у детей.

Техническим результатом предлагаемого способа является определение необходимости проведения противовирусной терапии в зависимости от прогнозирования течения герпес-вирусной инфекции - ВГЧ-6 у детей.

Технический результат достигается за счет определения наличия одиночных нуклеотидных полиморфизмов генов интерферониндуцированного белка Mx1 и С-С-рецептора хемокина 5 (CCR5).

Нами было проведено комплексное исследование, в котором обследованы 392 ребенка в возрасте от 1 года до 14 лет с клиническими проявлениями острого респираторного заболевания, протекающего с поражением верхних дыхательных путей. Дополнительно все дети были обследованы на герпесвирусные инфекции (ВПГ-1, ВЭБ, ЦМВ, ВГЧ-6). Проводилось определение уровней IgM и IgG к антигенам вирусов герпеса серологическим методом (ИФА), определение ДНК герпесвирусов в мазках из ротоглотки и крови методом ПЦР с гибридизационно-флуоресцентной детекцией результатов анализа в режиме реального времени (количественный метод). В результате проведенного обследования были отобраны пациенты с активными формами инфекции, вызванной ВГЧ-6, на основании выделения ДНК ВГЧ-6.

В основную группу вошли 40 детей с клинической манифестацией инфекции, вызванной ВГЧ-6, у которых проводилось исследование генетических полиморфизмов. Клинически 16 детей (40%) основной группы имели специфические проявления инфекции ВГЧ-6 (внезапная экзантема, фебрильные судорожные приступы, инфекционный мононуклеоз), у 24 детей (60%) инфекция ВГЧ-6 протекала с клиническими проявлениями острой респираторной инфекции средней степени тяжести и поражением верхних дыхательных путей. Группа сравнения включала клинически здоровых детей, у которых в крови выявлялась ДНК ВГЧ-6 при отсутствии у них клинических проявлений инфекции на момент обследования. Этих детей наблюдали в течение 1 месяца после получения результатов анализов.

В наших более ранних исследованиях было показано, что инфекция ВГЧ-6 имеет как специфические клинические формы (фебрильные судорожные приступы, внезапная экзантема, инфекционный мононуклеоз), так и неспецифические в форме острого респираторного заболевания с лихорадочным синдромом, лимфоаденопатией и тонзиллофарингитом. На основании этого были сформированы группы детей со специфическими для ВГЧ-6 инфекциями клиническими проявлениями (n=15) и неспецифическими в виде острого респираторного заболевания (n=25). Сравнивались полиморфизмы различных генов в этих группах и в группе клинических здоровых детей.

Было проведено генетическое исследование по изучению 12 полиморфизмов различных генов, отвечающих за синтез клеточных рецепторов и их сигнальных молекул для взаимодействия с вирусом - TLR9: -1486 Т>С, TLR3 908Т>С, NLRP3 2107С>А; кодирующих синтез противовирусных белков - Mx1 G-88T, Mx1 С-123А, IFITM3 rs12252; полиморфизму генов, отвечающих за синтез рецепторов клеточной иммунорегуляции - FCGR2A His166Arg, CCR5delta32, CCR5 -2554G>T, CCR5 -2459A>G. В основе анализа лежал расчет относительных рисков развития манифестных клинических проявлений инфекции ВГЧ-6 типа у носителей неблагоприятных генотипов.

Методика SNP-генотипирование. Определение замен одиночных нуклеотидов проводили с применением модифицированного метода «примыкающих проб» [Сергеев И.В., Хаитов М.Р., Трофимов Д.Ю., Абрамов Д.Д., Грудакова Е.Г., Гончарова Е.В., Алексеев Л.П. Разработка методов для проведения широкомасштабных исследований полиморфизма генов, регулирующих различные компоненты иммунного ответа. // Физиология и патология иммунной системы, 2009. Т. 13. №4, С. 21-25.]. В состав амплификационной смеси, разработанной для реализации данного метода, помимо праймеров, фланкирующих регион содержащий SNP, входил олигонуклеотид меченый гасителем флуоресценции и два сиквенс-специфичных олигонуклеотида, соответствующих один «дикому» а другой «мутантному» варианту последовательности ДНК, несущих флуорофоры. Олигонуклеотидные пробы, соответствующие тому или иному варианту последовательности были мечены различными флуорофорами, что позволяет определять оба варианта в одной пробирке. Определение генотипа производится после ПЦР и гибридизации путем измерения уровня флуоресценции в ходе температурной денатурации дуплексов олигонуклеотидов и полученных матриц. Если анализируемый образец содержит только один вариант нуклеотидной последовательности гена, т.е. гомозиготен по данному полиморфизму, температура плавления для пробы образующей совершенный дуплекс будет существенно выше, нежели для пробы образующей несовершенный дуплекс. Если же анализируемый образец гетерозиготен (содержит два варианта нуклеотидной последовательности), оба варианта проб образуют совершенный дуплекс, поэтому температуры их плавления будут практически одинаковы.

Полимеразную цепную реакцию и определение температуры плавления олигонуклеотидных проб проводили с помощью детектирующего амплификатора ДТпрайм (ООО «НПФ ДНК-Технология», Россия). Использовали следующий температурный режим амплификации: 94°С - 10 с, 64°С - 30 с в течение 50 циклов. По завершении реакции амплификации реакционную смесь остужали до 25°С со скоростью 2°С/сек. Кривые плавления получали следующим образом: температуру реакционной смеси повышали с 25°С до 75°С с шагом 1°С, измеряя уровень флуорсценции на каждом шаге. При проверке работоспособности созданных тест-систем, в качестве референсного метода определения генотипа образцов использовали автоматическое секвенирование ДНК по Сэнгеру.

Было выявлено, что для развития клинических проявлений ВГЧ-6 инфекции у детей младше 4х лет играют роль ген интерферон-индуцированного белка Mx1 - СА для Mx1: -123 С>А, что определяет чувствительность клеток к стимулирующему действию интерферонов I типа, а в возрастной группе 4 лет и старше гомозиготный вариант GG гена С-С-рецептора хемокина 5 (CCR5: - -2554 G>T.

Это дает основания считать данные генетические маркеры определяющими для прогнозирования манифестных клинических форм инфекции вируса герпеса человека 6 типа у детей.

Способ осуществляют следующим образом.

У детей в возрасте младше 4-х лет с выявленной ДНК ВГЧ-6 в крови определяют полиморфизм гена Mx1 в позиции - 123 (замена цитозина на аденин; С>А). У детей 4 лет и старше с выявленной ДНК ВГЧ-6 в крови определяют полиморфизм гена CCR5 в позиции -2554 (замена гуанина на тимин; G>T). При выявлении гетерозиготного генотипа - СА для - Mx1: -123 С>А и гомозиготного GG для CCR5: -2554 G>T прогнозируют клинически манифестное течение инфекции. Пример 1. Тагир Ш., 2 года 10 месяцев, поступил в инфекционное отделение с жалобами на повышение температуры до 38,7С, ознобы на фоне лихорадки, однократную рвоту. За неделю до поступления в стационар перенес не тяжелое ОРВИ, получал симптоматическую терапию по месту жительства (Аквамарис в нос, Цетиризин, комплексные гомеопатиечские препараты - Афлубин), катаральные явления купировались, но до настоящего времени сохранялась субфебрильная температура в вечернее время. Накануне вечером отмечалось повышение температуры до 39,2С, клонические подрагивания конечностей без потери сознания. Данные симптомы купировались после согревания и приема Ибупрофена. Госпитализирован бригадой СМП.

При осмотре состояние средней тяжести, лихорадит до 38,5С, вялый. Кожные покровы бедные, чистые. Зев ярко гиперемирован, небные миндалины увеличены до 2 размера, покрыты белесоватым налетом, единичные везикулярные высыпания на небных дужках и миндалинах. Лимфоузлы шейных групп (задне- и передне-шейные), надключичные, подмышечные увеличены до 12 мм, до 2-3 в группе, мягкой, эластичной консистенции, безболезненные при пальпации. Дыхание через нос частично затруднено, выделений нет. Над легкими - жесткое, хрипов нет, ЧДД 27 в 1 минуту. Тоны сердца звучные, ритмичные, ЧСС 120 в 1 минуту. Язык умеренно обложен белым налетом, живот умеренно вздут, безболезненный при пальпации по ходу кишечника. Печень выступает из-под края реберной дуги на 1,5 см по средне-ключичной линии, край мягкий острый, селезенка не увеличена. Стул 1 раз в день оформленный, мочеиспускание не нарушено.

Результаты клинического анализа крови при поступлении: Нв, 122 г/л; Эрц, 5,06*1012/л; Трц, 372*109/л; Лйц, 11,52*109/л; п/я 4%; с/я 43%; эоз 1%; бзф 0%; мнц 13%, лфц 39%; СОЭ 20 мм/ч. Общий анализ мочи - без патологии. Мазок из зева на дифтерию - отрицательный. Мазок из ротоглотки на респираторные вирусы методом ПЦР - отрицательный. Мазок из зева на флору (бакпосев) Str mitis, Str.oralis 104. Исследование кала методом ПЦР на возбудители кишечных инфекций - отрицательный.

При обследовании были выявлены лабораторные маркеры активной ВГЧ-6 инфекции: ДНК ВГЧ-6 в сыворотке крови 1,34 lg копий/105 клеток и в плазме крови 5,0*102 копий/мл. В мазке из ротоглотки выделена ДНК ВГЧ-6 8,0*103 копий/мл. При серологическом исследовании выявлены IgM к ВГЧ-6 в крови.

На вторые сутки пребывания в отделении на теле появилась обильная пятнисто-папулезная сыпь.

При молекулярно-генетическом обследовании ребенка на полиморфизмы генов, отвечающих за синтез клеточных рецепторов и их сигнальных молекул для взаимодействия с вирусом (TLR9: -1486 Т>С, TLR3 908Т>С, NLRP3 2107C<А; кодирующих синтез противовирусных белков (Mx1 G-88T, Mx1 С-123A, IFITM3 rs12252); отвечающих за синтез рецепторов клеточной иммунорегуляции (FCGR2A His166Arg, CCR5delta32, CCR5 -2554G>T, CCR5 -2459A>G) было выявлено гетерозиготное состояние СА для гена - Mx1 белка (замена цитозина на тимин в позиции -123; C>A), определяющего чувствительность клеток к стимулирующему действию интерферонов I типа.

На фоне проводимой в отделении комплексной терапии самочувствие ребенка улучшилось, выписан на 5й день заболевания в удовлетворительном состоянии.

Данный пример демонстрирует развитие классической клинической формы острого заболевания (внезапная экзантема, тонзиллофарингит, отит) у мальчика младше 4х лет, вследствие острой первичной ВГЧ-6 инфекции (подтвержденной лабораторно). Причиной развития заболевания послужило не только инфицирование ВГЧ-6, но и наличие генетически обусловленной особенности строения интерферон-индуцированного противовирусного белка Mx1 (генотип СА гена Mx1: -123 C>А), приведшей к развитию манифестной формы инфекции в момент встречи с вирусом. Пример 2. Саша, П., 2 года 9 месяцев. Жалоб на момент осмотра мама не предъявляет. Объективно здоров. Перед обследованием последнее острое респираторное заболевание 8 мес.назад. В анамнезе не частые острые респираторные заболевания с поражением верхних дыхательных путей. Клинический анализ крови: НЬ - 130 г/л, Эритр. - 4,7×1012 /л, Лейкоц. -7,9×109/л, Тромбоц. - 257×109/л, п/я - 1, с/я - 26, мон. - 6, лимфоц. - 66, эозинофилы - 1, СОЭ - 4 мм/час.В сыворотке крови выделено ДНК ВГЧ-6 16 копий/105 клеток

При серологическом исследовании специфические IgM и IgG к ВГЧ-6 не обнаружены.

При динамическом наблюдении за ребенком в течение 1 месяца катаральных явлений у ребенка не наблюдалось.

При повторном обследовании через 30 дней ДНК ВГЧ-6 в мазке и крови не определялось. При серологическом исследовании специфические IgM и IgG к ВГЧ-6 не обнаружены.

При молекулярно-генетическом обследовании ребенка на одиночные полиморфизмы генов, отвечающих за синтез клеточных рецепторов и их сигнальных молекул для взаимодействия с вирусом (TLR9: -1486 Т>С, TLR3 908Т>С, NLRP3 2107С>А; кодирующих синтез противовирусных белков (Mx1 G-88T, Mx1 С-123А, IFITM3 rs12252); отвечающих за синтез рецепторов клеточной иммунорегуляции (FCGR2A His166Arg, CCR5delta32, CCR5 -2554G>T, CCR5 -2459A>G) было выявлено гомозиготное состояние СС для гена Mx1-белка (замена цитозина на аденин в позиции -123; С>А), определяющего чувствительность клеток к стимулирующему действию интерферонов I типа.

Данный клинический пример демонстрирует выявление ДНК ВГЧ-6 в крови у клинически здорового ребенка, имеющего гомозиготное состояние СС для гена Mx1: -123 С>А, что определяет структуру и функцию интерферон-индуцированного, противовирусного белка Mx1, предотвращающего развитие клинически манифестной формы инфекции ВГЧ-6.

Пример 3.

Маша А., 5 лет осмотрена на дому с жалобами на повышение температуры до 38,5С без катаральных явлений. Повышение температуры в течение 2х суток, снижается после применения жаропонижающих. Девочка наблюдается нефрологом в рождения по поводу вторичного пиелонефрита на фоне пиелоэктазии справа. Обострение процесса однократно 4 года назад. На момент осмотра общий анализ мочи без патологии.

При осмотре состояние средней тяжести, вялая, аппетит снижен, температура 37,8С после приема Ибупрофена 2 часа назад. Кожные покровы бледно-розовые, чистые. Задняя стенка глотки умеренно гиперемирована, зерниста. Небные миндалины увеличены до 2 размера, рыхлые, покрыты белесоватым налетом. Шейные лимфоузлы с обеих сторон увеличены до 20 мм, мягко-эластичной консистенции, умеренно болезненные при пальпации, до Зх в группе. Дыхание через нос умеренно затруднено, больше справа, выделений нет. Отоскопия - признаки туботита справа. Над легкими дыхание везикулярное, хрипов нет. Тоны сердца звучные ритмичные, систолический шум, РМ в 5й точке (ДХЛХ). Живот мягкий безболезненный при пальпации, печень выступает из-под края реберной дуги на 3 см по срединно-ключичной линии, край острый, мягкий; пальпируется край селезенки. Симптом Пастернацкого отрицателен с обеих сторон. Мочеиспускание свободное, безболезненное. Стул за сутки был однократно, оформленный.

Результаты клинического анализа крови при поступлении: Нв 154 г/л; Эрц 5,4*1012/л; Трц 314*109%; Лйц 17,2*109%; и/я 4%; с/я 37%; эоз 1%; бзф 0%; мнц 12%, лфц 46% (из них 12% атипичных); СОЭ 17 мм/ч. Общий анализ мочи - без патологии. Мазок из зева на дифтерию - отрицательный. Мазок из ротоглотки на респираторные вирусы методом ПЦР -отрицательный. Мазок из зева на флору (бакпосев) Str viridans, 103.

При обследовании были выявлены лабораторные маркеры активной ВГЧ-6 инфекции: ДНК ВГЧ-6 в сыворотке крови 1,8 lg копий/105 клеток и в плазме крови 2,0*102 копий/мл. В мазке из ротоглотки выделена ДНК ВГЧ-6 1,0*103 копий/мл. При серологическом исследовании выявлены IgM и IgG 1:1600 (при норме 1:250) к ВГЧ-6 в крови.

При молекулярно-генетическом обследовании ребенка на полиморфизмы генов, отвечающих за синтез клеточных рецепторов и их сигнальных молекул для взаимодействия с вирусом (TLR9: -1486 Т>С, TLR3 908Т>С, NLRP3 2107РА); кодирующих синтез противовирусных белков (Mx1 G-88T, Mx1 С-123А, IFITM3 rs12252); отвечающих за синтез рецепторов клеточной иммунорегуляции (FCGR2A His166Arg, CCR5delta32, CCR5 -2554G>T, CCR5 -2459A>G) было выявлено гомозиготное состояние GG для гена CCR5 -2554 G>T, определяющего активность хемокина 5.

На фоне проводимой в отделении комплексной терапии самочувствие ребенка улучшилось, выписана на 10 день заболевания в удовлетворительном состоянии.

Данный пример демонстрирует развитие классической клинической формы острого заболевания (инфекционный мононуклеоз ВГЧ-6 этиологии) у девочки старше 4 лет, вследствие реактивации хронической ВГЧ-6 инфекции (подтвержденной лабораторно). Причиной развития заболевания послужило не только инфицирование ВГЧ-6, но и наличие генетически обусловленной особенности строения рецептора CCR5, определяющего активность хемокина 5 (гомозиготное состояние GG для CCR5: -2554 G>T), приведшей к развитию манифестной формы инфекции.

Пример 4. София, 8 лет. Осмотрена в рамках диспансеризации в детском саду. Жалоб на момент осмотра мама не предъявляет. Объективно здорова.

Перед обследованием последнее острое респираторное заболевание 4 мес.назад.

В анамнезе не частые острые респираторные заболевания с поражением верхних дыхательных путей. Заболевание инфекционным мононуклеозом и/или внезапной экзантемой отрицает.

Клинический анализ крови: Hb - 124 г/л, Эритр. - 4,15×1012/л, Лейкоц. - 5,6×109/л, Тромбоц. - 281×109%, п/я - 1, с/я - 46, мон. - 6, лимфоц. - 44, эозинофилы - 3, СОЭ - 5 мм/час.

В сыворотке крови выделено ДНК ВГЧ-6 0,71 lg копий/105 клеток

При серологическом исследовании специфические IgM и IgG к ВГЧ-6 не обнаружены.

При динамическом наблюдении за ребенком в течение 1 месяца катаральных явлений у ребенка не наблюдалось.

При повторном обследовании через 30 дней ДНК ВГЧ-6 в мазке и крови не определялось. При серологическом исследовании специфические IgM и IgG к ВГЧ-6 не обнаружены. При молекулярно-генетическом обследовании ребенка на полиморфизмы генов, отвечающих за синтез клеточных рецепторов и их сигнальных молекул для взаимодействия с вирусом (TLR9: -1486 Т>С, TLR3 908Т>С, NLRP3 2107С>А; кодирующих синтез противовирусных белков (Mx1 G-88T, Mx1 С-123А, IFITM3 rs12252); отвечающих за синтез рецепторов клеточной иммунорегуляции (FCGR2A His166Arg, CCR5delta32, CCR5 -2554G>T, CCR5 -2459A>G) было выявлено гетерозиготное состояние GT для гена CCR5 (замена гуанина на тимин в позиции -2554; G>T), регламентирующее строение рецептора CCR5, определяющего активность хемокина 5.

Данный клинический пример демонстрирует выявление ДНК ВГЧ-6 в крови у клинически здорового ребенка, имеющего генотип GT для гена CCR5:-2554 G>T, что определяет структуру и функцию С-С-рецептора хемокина 5 и предотвращает развитие клинически манифестной формы инфекции ВГЧ-6.

Таким образом, предлагаемый способ позволяет прогнозировать клинически манифестное течение при наличии ВГЧ-6 инфекции у детей, подтвержденной наличием ДНК вируса в крови, с помощью генетических маркеров для решения вопроса о необходимости проведения противогерпетической терапии.

Способ прогнозирования течения инфекции вируса герпеса человека 6 типа у детей, включающий выявление ДНК вируса в крови, отличающийся тем, что дополнительно у детей в возрасте младше 4-х лет определяют полиморфизм гена Mx1: -123 С>А, а у детей 4 лет и старше - полиморфизм гена CCR5: -2554 G>T и при выявлении гетерозиготного состояния СА для Mx1: -123 С>А и гомозиготного состояния GG для CCR5: -2554 G>T прогнозируют клинически манифестное течение инфекции.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к медицине и касается способа выявления рака поджелудочной железы или доброкачественной опухоли поджелудочной железы путем измерения количества вариантов белка APOA2 в образце жидкости организма исследуемого индивида, который включает (А) первый этап измерения в образце количества белка APOA2-АТQ, используя антитело против конца APOA2-АТQ и антитело не против конца APOA2-АТQ; (В) второй этап измерения в образце количества белка APOA2-AT, используя антитело против конца APOA2-АТ и антитело не против конца APOA2-АТ; и (С) третий этап ввода в заданное выражение логистической регрессии измеренного значения количества белка APOA2-АТQ и измеренного значения количества белка APOA2-АТ и определения у исследуемого индивида рака поджелудочной железы или доброкачественной опухоли поджелудочной железы, если результирующее значение дискриминанта исследуемого индивида статистически достоверно отличается от значения дискриминанта нормального индивида.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложены способы детекции присутствия в образце биологической жидкости основания ДНК, связанного с внеклеточной нуклеосомой, способ оценки животного субъекта или человека в отношении пригодности для терапевтического лечения, способ наблюдения лечения животного субъекта или человека и применение основания ДНК, связанного с внеклеточной нуклеосомой, в качестве биомаркера в образце биологической жидкости для диагностики рака, причем основание ДНК выбрано из 5-метилцитозина или 5-гидроксиметилцитозина.

Данное изобретение относится к биотехнологии. Предложены способы in vitro прогнозирования риска смерти в течение одного года, основанные на использовании антител, которые связываются с растворимым белком человека, продуктом гена 2, экспрессируемым при стимуляции роста (ST2), или их антигенсвязывающих фрагментов.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложены способ обнаружения модифицированного основания в молекуле двуцепочечной нуклеиновой кислоты и способ идентификации по меньшей мере одного соединения, способного предотвращать взаимодействие белка с его сайтом связывания.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложены способ и набор для определения наличия рака у субъекта, включающий определение концентрации Hsp90α в образце плазмы субъекта.

Изобретение относится к области медицины, в частности к офтальмологии, и предназначено для прогнозирования скорости прогрессии глаукомной оптической нейропатии. В слезной жидкости определяют концентрации ММР-9 и TIMP-1 методом иммуноферментного анализа и затем рассчитывают величину их отношения.

Группа изобретений относится к области медицины. Предложены способ и набор для исследования на присутствие цитомегаловируса (CMV), вируса простого герпеса I (HSV I), вируса простого герпеса II (HSV II), вируса Эпштейна-Барра (EBV), HHV6, HHV7, HHV8, парвовируса 19, вируса гепатита В (HBV), вируса гепатита С (HCV), коксаки-вируса, вирусов иммунодефицита человека (HIV-1, HIV-2), аденоассоциированного вируса (AAV), вируса краснухи, HPV, хламидий, токсоплазмы и норовируса внутри сперматозоидов.

Изобретение относится к области медицины. Предложен способ лечения онкологических заболеваний.

Изобретение относится к медицине, а именно к клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для оценки чувствительности Mycobacterium tuberculosis к лекарственным препаратам.

Изобретение относится к области медицинской и ветеринарной микробиологии, в частности к проблеме получения эритроцитарных диагностикумов на основе сапных моноклональных антител, которые могут быть использованы для выявления антигенов возбудителя сапа в реакции непрямой гемагглютинации (РНГА).

Изобретение относится к медицине, а именно к педиатрии и инфекционным болезням, и может быть использовано для прогнозирования течения инфекции вируса герпеса человека 6 типа у детей. Для этого выявляют ДНК вируса в крови, а затем дополнительно у детей в возрасте младше 4-х лет определяют полиморфизм Mx1: -123 C>A, а у детей 4 лет и старше определяют полиморфизм CCR5: -2554 G>T. При выявлении гетерозиготного состояния СА для Mx1: -123 C>A и гомозиготного состояния GG для CCR5: -2554 G>T прогнозируют клинически манифестное течение инфекции. Способ обеспечивает определение необходимости проведения противовирусной терапии в зависимости от прогнозирования течения герпес-вирусной инфекции - ВГЧ-6. 4 пр.

Наверх