Средство на основе травы монарды дудчатой, обладающее активностью в отношении штамма burkholderia при муковисцидозе



Владельцы патента RU 2695663:

Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Самарский государственный медицинский университет" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к средству на основе травы монарды дудчатой, обладающему ингибирующей активностью в отношении штамма Burkholderia при муковисцидозе. Средство на основе травы монарды дудчатой, обладающее ингибирующей активностью в отношении штамма Burkholderia при муковисцидозе, при изготовлении которого используют 70% этиловый спирт, при этом траву монарды дудчатой настаивают на 70% этиловом спирте в соотношении «сырье - экстрагент» 1:8 в условиях дробной экстракции - дважды при комнатной температуре в течение 24 часов и получением двух извлечений, а затем при нагревании на кипящей водяной бане и получением третьего извлечения, которое объединяют с двумя первыми. Вышеописанное средство обладает выраженной ингибирующей активностью в отношении штамма Burkholderia при муковисцидозе. 1 табл.

 

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, в частности, к производству лекарственных средств из лекарственного растительного сырья, и касается получения средства из травы монарды дудчатой (Monarda fistulosa L.), обладающей активностью в отношении штаммов муковисцидоза.

Лекарственные растительные препараты широко применяются для лечения различных заболеваний, что объясняется широтой их фармакологической активности и высокой безопасностью. Поэтому очень важен поиск новых перспективных источников растительного сырья, из которых можно производить высокоэффективные лекарственные препараты (1).

Трава монарды дудчатой известна своей антибактериальной активностью за счет содержащихся в растении эфирного масла и флавоноидов и, на наш взгляд, является одним из перспективных источников биологически активных соединений для лечения бактериальных инфекций, в том числе муковисцидоза.

Муковисцидоз или кистозный фиброз - это системное наследственное заболевание, обусловленное мутацией гена. Он характеризуется поражением желез внешней секреции, тяжелыми нарушениями функций органов дыхания и желудочно-кишечного тракта.

Пациенты с диагнозом муковисцидоз имеют хроническую бактериальную инфекцию дыхательных путей и придаточных пазух носа. В связи с тем, что штаммы бактерий Burkholderia, сопровождающих это заболевание, являются генетически устойчивыми ко многим антибактериальным препаратам, поиск лекарственных препаратов для лечения муковисцидоза является актуальной проблемой (2, 3, 4, 5).

Известен масляный экстракт на основе травы монарды дудчатой, который в концентрации 30 мг/мл проявляет бактерицидное действие в отношении Staphylococcus aureus, Streptococcus faecalis, Enterobacter cloacae, Proteus vulgaris и Klebsiella pneumoniae и бактериостатическое действие в отношении Pseudomonas aeruginosa, Citrobacter freundii, Candida albicans. Масляный экстракт получают экстракцией растительным маслом при соотношении 1:10 при нагревании в течение 5 часов на водяной бане с температурой 60-70°С (6). Действующие вещества травы монарды дудчатой извлекаются растительным маслом не полностью, что приводит к их низкому выходу.

Известна настойка на спирте этиловом 70%, полученная методом мацерации и перколяции из травы монарды дудчатой, проявляющая антимикробное действие в отношении Staphylococcus aureus и Escherichia coli в концентрации 400 мкг/мл. Содержание суммы флавоноидов в полученной настойке составляет 0,55% (7).

Однако полученная настойка не лишена недостатков. Недостатком данного метода является низкий выход целевых веществ - флавоноидов - около 70%, и как следствие - низкое содержание суммы флавоноидов в препарате (0,55%), что снижает его эффективность. Кроме того, ни для масляного экстракта, ни для настойки монарды не описана активность в отношении штаммов Burkholderia, которыми инфицируются пациенты с муковисцидозом.

В качестве прототипа нами выбрана настойка травы монарды дудчатой на 70% спирте этиловом, полученная методом перколяции.

Таким образом, целью изобретения является получение средства из травы монарды дудчатой, обладающего активностью в отношении клинических штаммов, выделенных от пациентов с муковисцидозом, с более высоким содержанием суммы флавоноидов и выходом действующих веществ.

Технический результат достигается тем, что траву монарды дудчатой настаивают на 70% этиловом спирте в соотношении «сырье - экстрагент» 1:8 в условиях дробной экстракции - дважды при комнатной температуре в течение 24 часов и получением двух извлечений, а затем при нагревании на кипящей водяной бане и получением третьего извлечения, которое объединяют с двумя первыми.

Средство получают следующим образом.

В первый день в три экстрактора помещают по 1 части травы монарды дудчатой. В первый экстрактор заливают 8 объемов по отношению к сырью 70% спирта этилового (3 объема для замачивания и 5 объемов экстрагента для экстракции сырья), во второй экстрактор - 3 объема спирта этилового 70% на замачивание в течение суток.

Во второй день из первого экстрактора сливают полученное извлечение во второй экстрактор и оставляют на 24 ч при комнатной температуре. В первый экстрактор добавляют 5 объемов чистого экстрагента - спирта этилового 70%. В третьей экстрактор добавляли 3 объема спирта этилового 70% на замачивание. Экстракторы оставляют на сутки при комнатной температуре.

В третий день извлечение из второго экстрактора переливают в третьей экстрактор, а извлечение из первого экстрактора - во второй. В первый экстрактор добавляют 5 объемов чистого экстрагента и оставляют на 24 часа при комнатной температуре.

На четвертый день извлечение из третьего экстрактора собирают в приемник, извлечение из второго экстрактора переносят в третьей экстрактор. В первом экстракторе осуществляют термическую экстракцию с обратным холодильником на кипящей водяной бане в течение 30 мин, после чего остужают и переносят полученное извлечение во второй экстрактор. Второй и третий экстракторы оставляют на 24 часа при комнатной температуре. Сырье из первого экстрактора является отработанным.

В пятый день извлечение из третьего экстрактора собирают в приемник. Содержимое второго экстрактора нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 минут, после чего остужают и переносят полученное извлечение в третий экстрактор и оставляют на сутки при комнатной температуре. Сырье из второго экстрактора является отработанным.

В шестой день содержимое третьего экстрактора нагревают на кипящей водяной бане в течение 30 минут, после чего остужают и переносят полученное извлечение в приемник. Сырье из третьего экстрактора является отработанным. Извлечения объединяют.

Полученное суммарное извлечение (готовый продукт) перемешивают и оставляют на 2-3 дня при температуре не выше 10°С. Выпавший осадок отфильтровывают, полученное извлечение фасуют во флаконы темного стекла.

Получение средства на основе травы монарды дудчатой в условиях дробной эктракции, а также использование 70% этилового спирта в качестве экстрагента приводит к увеличению выхода целевых веществ, который составляет 92,0% от теоретического содержания (содержание суммы флавоноидов в траве монарды дудчатой составляет 4,31%) и к увеличению содержания суммы флавоноидов (целевые вещества) в средстве из травы монарды дудчатой, что составляет 0,78%.

Исследование запредельных параметров технологического процесса дает следующие результаты. Использование концентрации спирта ниже 70%, в частности, 60% этилового спирта, на стадии экстракции приводит к существенному снижению выхода целевых веществ (75,0% от теоретического содержания суммы флавоноидов в сырье) и, следовательно, к снижению содержания флавоноидов в настойке травы монарды дудчатой (0,62%).

Использование концентрации 80% этилового спирта также приводит еще к большему снижению выхода целевых веществ (70,0% от теоретического содержания суммы флавоноидов в сырье) и, соответственно, к снижению содержания флавоноидов в настойке травы монарды дудчатой (0,47%) (Приложение 1, таблица 1).

Полученное средство исследовали на наличие активности в отношении штаммов Burkholderia cenocepacia ST 208 и Burkholderia multivorans, полученных от пациентов с муковисцидозом. Определение минимальной ингибирующей концентрации проводили методом двойных серийных разведений в бульоне в соответствии с МУ 4.2.1890-04 (8). Учет результатов микробиологического анализа осуществлялся через 48-72 часа после инкубации при температуре 37°С. При этом проводили визуальную оценку задержки роста. Из лунок с видимой задержкой роста осуществлялся высев на питательные среды (5% кровяной агар-агар), через 24 часа отсутствие роста оценивалось как бактерицидный эффект, а появление видимого роста, но с его задержкой - как бактериостатический.

Результаты исследования показали наличие активности средства на основе травы монарды дудчатой в отношении штаммов Burkholderia, выделенных от пациентов с муковисцидозом. Вплоть до разведения 1:32 включительно наблюдается бактериостатическое действие в отношении Burkholderia cenocepacia ST 208 и Burkholderia multivorans при дальнейшем разведении рост культуры возобновляется.

Таким образом, разработанное средство, полученное описанным способом, дает следующие преимущества по сравнению с протатипом:

1. Использование в заявляемом средстве этилового спирта в концентрации 70% в соотношении «сырье-экстрагент» 1:8 в режиме модифицированной дробной экстракции позволяет повысить выход действующих веществ (флавоноиды) из травы монарды дудчатой с 70% до 92%, а также повысить содержание действующих веществ с 0,55% до 0,78%, т.е. в 1,4 раза.

2. Заявляемое средство, полученное способом модифицированной дробной мацерации, обладает активностью в отношении штаммов Burkholderia при муковисцидозе, что расширяет спектр фармакологической активности целевого продукта и создает условия для замены дорогостоящих зарубежных аналогов.

Разработанное средство может применяться в химико-фармацевтической промышленности для получения субстанций для производства лекарственных препаратов активных в отношении штаммов Burkholderia, выделенных от пациентов с муковисцидозом.

ИСТОЧНИКИ ИНФОРМАЦИИ:

1. Куркин, В.А. Фармакогнозия: Учебник для студентов фармац. вузов - Изд. 3-е, перераб. и доп./ В.А. Куркин. - Самара: ООО «Офорт», ФГБОУ ВО СамГМУ Минздрава России, 2016. - 1279 с.

2. Кондратенко О.В. Особенности биологических свойств и факторов патогенности неферментирующих грамотрицательных бактерий, выделенных от пациентов // Аспирантский вестник Поволжья. 2012. - №1-2. - С. 251-253.

3. Леншин А.В., Ильин А.В., Карапетян Е.И., Мальцева Т.А., Кочегарова Е.Ю. Муковисцидоз взрослых (клинико-рентгенологические особенности). В сборнике: Материалы VII съезда врачей-пульмонологов Сибири и Дальнего Востока (с международным участием) 2017. - С. 50-54.

4. Минько О.В., Казакова М.А., Рыжов В.М., Лямин А.В., Кондратенко О.В. Изучение противомикробный активности извлечений из листьев мяты перечной в отношении штаммов муковисцидоза: Сборник научных статей по материалам X Международного симпозиума «Фенольные соединения: фундаментальные и прикладные аспекты», Москва, 14-19 мая 2018 г. / отв. ред. Н.В. Загоскина - М.: ИФР РАН, - 2018. - С. 449-452.

5. Эседов Э.М., Гаджимирзаев Г.А., Ахмедова Ф.Д., Мурадова В.Р., Гаджимирзаева Р.Г., Меджидова Р.А., Абасова А.С.Муковисцидоз - актуальная проблема медицины // Вестник оториноларингологии. - 2016. - Т. 81, №5 - С. 15-18.

6. Патент РФ №2003105076/15, 20.02.2003. Способ получения масляного экстракта из монарды дудчатой, обладающего антимикробной активностью // Патент Российской Федерации №2244552. 2003. / Высочина Г.И., Волхонская Т.А., Якимова Ю.Л.

7. Мащенко З.Е. Фитохимическое исследование и стандартизация тимолсодержащих растений семейства Яснотковых: дис. канд. фармац. наук. Пермь, 2004. - 119 с.

8. Определение чувствительности микроорганизмов к антибактериальным препаратам. Методические указания. МУК 4.2.1890-04 // Клиническая микробиология и антимикробная химиотерапия. - 2004. - Т. 6, №4. - С. 306-359.

Средство на основе травы монарды дудчатой, обладающее ингибирующей активностью в отношении штамма Burkholderia при муковисцидозе, при изготовлении которого используют 70% этиловый спирт, отличающееся тем, что траву монарды дудчатой настаивают на 70% этиловом спирте в соотношении «сырье - экстрагент» 1:8 в условиях дробной экстракции - дважды при комнатной температуре в течение 24 часов и получением двух извлечений, а затем при нагревании на кипящей водяной бане и получением третьего извлечения, которое объединяют с двумя первыми.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения настойки из листьев тополя черного, обладающей ингибирующей активностью в отношении штаммов Burkholderia.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства, обладающего адаптогенной активностью. Способ получения лекарственного средства, обладающего адаптогенной активностью, представляющего собой сухой экстракт, полученный из следующего растительного сырья в соотношении: корневища девясила высокого 333 г, плодов облепихи крушиновидной 333 г, плодов кориандра посевного 333 г, которое измельчают на мельнице до размера частиц диаметром 1 мм и экстрагируют 50% этиловым спиртом в соотношении сырье:экстрагент, равном 1:16, при температуре 60°С и постоянном перемешивании, процесс повторяют трижды, после чего объединенные извлечения упаривают до 1/3 первоначального объема и очищают сепарированием, полученный очищенный экстракт доупаривают до 1/5 первоначального объема, высушивают в вакуумной сушилке при температуре 60°С в течение 8 ч и измельчают на мельнице пропеллерного типа.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения экстракта из травы змееголовника молдавского. Способ получения экстракта из травы змееголовника молдавского (Dracocephalum moldavica L.), содержащего флавоноиды, обладающего противовоспалительной активностью, заключающийся в экстракции измельченного сырья этиловым спиртом, фильтровании, упаривании, при этом измельченную траву змееголовника молдавского, собранную в фазе бутонизации и цветения, трижды экстрагируют 50% этиловым спиртом, при соотношении сырье:экстрагент, равном 1:10, при комнатной температуре, при подаче на каждую последующую экстракцию свежего экстрагента, равного слитому извлечению, полученные экстракты упаривают последовательно по мере поступления до объема до 1/20, водные кубовые концентраты объединяют и обрабатывают три раза хлороформом в соотношении хлороформ:водная фаза, равном 1:2, органическую фазу отделяют, а водный кубовый остаток переосаждают 96% этиловым спиртом в соотношении 1:10, выпавший осадок отстаивают, дважды промывают 96% этиловым спиртом и фильтруют с последующим высушиванием на воздухе или в вакуум-сушильном шкафу при температуре 40°С в течение 4 ч, полученный сухой остаток растворяют в дистиллированной воде с добавлением ацетона, взятых в соотношении вода:ацетон, равном 1:4, выдерживают в течение 1 часа, фильтруют, полученный фильтрат упаривают.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства, обладающего адаптогенной активностью. Способ получения лекарственного средства, обладающего адаптогенной активностью, представляет собой сухой экстракт, полученный из следующего растительного сырья в соотношении: корневищ купены душистой 20 г, корней горичника Морисона 20 г, корней пиона уклоняющегося 20 г, корней спаржи лекарственной 20 г, плодов якорцев стелющихся 20 г, которые измельчают до размера частиц диаметром 1 мм и экстрагируют 50% этиловым спиртом в соотношении сырье : экстрагент, равном 1 : (14-16), при температуре 60°С и постоянном перемешивании, процесс повторяют трижды и объединенные извлечения упаривают до 1/3 первоначального объема и очищают сепарированием, после чего очищенный экстракт доупаривают до 1/5 первоначального объема, высушивают в вакуумной сушилке при температуре 60°С в течение 8 ч и измельчают на мельнице пропеллерного типа.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к применению средства, обладающего избирательным действием на опухолевые клетки, вызывающего в них апоптоз, блокирующего развитие аутофагии и препятствующего формированию их резистентности к терапии.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения вещества, обладающего противогрибковой активностью. Способ получения вещества, обладающего противогрибковой активностью, представляющего собой 7-О-метилкемпферол, путем подготовки лекарственного растительного сырья - почек каштана конского обыкновенного (Aesculus hippocastanum L.), экстрагирования сырья органическими растворителями, упаривания и хроматографической очистки, при этом извлечение из воздушно-сухого растительного сырья проводят с использованием хлороформа в аппарате Сокслета в соотношении сырье : экстрагент 1:3, последующее выделение целевого вещества из сгущенного хлороформного извлечения осуществляют методом колоночной хроматографии на силикагеле, используя в качестве элюента смесь хлороформа и этилового спирта в соотношении 99:1 объемом 1,5 л, а дальнейшую очистку целевого вещества осуществляют путем перекристаллизации упаренных под вакуумом элюатов, содержащих 7-О-метилкемпферол, смесью хлороформа и этилового спирта.
Изобретение относится к медицине, а именно к получению сурфактанта из легких крупного рогатого скота. Для этого легкие крупного рогатого скота, освобождают от бронхов, разрезают на куски размером 30×30×30 мм, измельчают на роторно-статорном дезинтеграторе, полученный экстракт центрифугируют на проточной центрифуге при низких оборотах, после чего надосадочную жидкость выдерживают при +4°С в течение часа и повторно центрифугируют на проточной центрифуге при 22000-250000g, осадок ресуспендируют в воде, еще раз центрифугируют при 10000-15000g и осадок экстрагируют смесями хлороформа и метанола в системе хлороформ-метанол-вода 1:2:0.8.
Изобретение относится к лесохимической промышленности и может быть использовано для переработки осиновой коры с получением биологически активных кормовых добавок для животноводства.

Изобретение относится к устройствам для проведения процессов экстракции в системе жидкость - твердое тело применительно к экстракции из растительного сырья. Установка содержит вертикальный цилиндрический корпус, снабженный коаксиально установленными питающей и циркуляционной трубами.

Изобретение относится к устройствам для проведения процессов экстракции в системе жидкость - твердое тело применительно к экстракции из растительного сырья. Установка содержит вертикальный цилиндрический корпус, снабженный коаксиально установленными питающей и циркуляционной трубами.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения настойки из листьев тополя черного, обладающей ингибирующей активностью в отношении штаммов Burkholderia.

Изобретение относится к биотехнологии. Описан вектор экспрессии на основе поксвируса, который содержит молекулу(ы) нуклеиновой кислоты, кодирующую(ие) гибрид гетероолигомерных микобактериальных антигенов ESAT6 и CFP10 и предпочтительно гибрид, содержащий аминокислотную последовательность, представленную в SEQ ID NO: 1.

Изобретение относится к вариантам усовершенствованного способа получения производного диазабициклооктана формулы (VII), в том числе соединения (VII-1). Изобретение также относится к способу получения промежуточных продуктов IV и VI.

Изобретение относится к ветеринарной медицине, в частности к вакцинам ассоциированным против эшерихиоза, стрептококкоза и псевдомоноза крупного рогатого скота. Вакцина содержит при следующем соотношении компонентов, мас.%: суспензия клеток чистой культуры возбудителя эшерихиоза E.coli - 24,0-29,0; суспензия клеток чистой культуры возбудителя стрептококкоза Streptococcus galloliticus - 24,0-29,0; суспензия клеток чистой культуры возбудителя Pseudomonas aeruginosa - 24,0-29,0; глюкоза - 1,0-2,0; формалин - 1,5-2,0; гидроокись алюминия - остальное.

Группа изобретений относится к области медицины и предназначена для подавления или лечения бактериальных или грибковых инфекций. Антимикробная композиция содержит хелатирующий агент или его соли, метилсульфонилметан (MSM) и приемлемый носитель или основу для таких композиций.
Изобретение относится к области медицины, а именно к детской хирургии, и может быть использовано для ведения детей с болезнью Гиршпрунга в периоперационном периоде с включением антибактериальной профилактики.

Настоящая группа изобретений относится к медицине, а именно к нейрохирургии, и касается профилактики развития инфекционных осложнений у нейрохирургических больных с аневризматической болезнью сосудов головного мозга в остром периоде разрыва аневризмы.

Изобретение относится к новому производному триптантрина формулы 1 Соединение обладает высокой противоопухолевой активностью, повышает терапевтическую активность противоопухолевых антибиотиков, а также проявляет противовоспалительные и противомикробные свойства.

Изобретение относится к гетероциклическому соединению формулы (I) или к его фармацевтически приемлемой соли, где А является Ra(Rb)N- или RcO-; B является NH; С является SO3M, где М является Н или натрием; Ra и Rb, каждый, независимо друг от друга, являются С1-6 алкилом, формилом, бензоилом, фенилацетилом, С1-6 алкилкарбонилом, гетероциклилкарбонилом (где гетероциклил выбирают из тетрагидропирана, пиперидина, пирролидина, морфолина) или гетероарилкарбонилом (где гетероарил выбирают из фурана, пиррола и пиридина), или Ra и Rb могут быть закрыты связыванием с получением 5-6-членного гетероциклила, имеющего по крайней мере один атом азота или атом азота и атом кислорода; А является необязательно замещенным 1-2 заместителями Fn1, и Fn1, который модифицирует А, может быть дополнительно модифицирован Fn1; Rc является С1-6 алкилом или 4-6-членным гетероциклилом, содержащим один или два атома азота; Rc и В могут быть закрыты связыванием с получением 1,2-оксазолидинила или 1,2-оксазинанила; Fn1 является С1-6 алкилом, O=, С3-6 циклоалкилом или Rg-(CH2)0-3-; Rg является 4-6-членным гетероциклилом, содержащим от 1 до 2 гетероатомов, выбранных из атома азота, 5-членным гетероарилом, содержащим от 1 до 2 гетероатомов, выбранных из атома азота, RdO2S-, Re(Rf)N-, Re(Rf)NCO-, ReO- или трет-бутоксикарбонилом; Rd представляет МО-, где М представляет собой натрий; Re и Rf, каждый, независимо друг от друга, являются Н или С1-6 алкилом, или Re и Rf могут быть закрыты связыванием с получением 5-7-членного гетероциклила, содержащего 2 гетероатома, выбранных из атома азота и/или атома кислорода.

Изобретение относится к полимерному комплексу макролидного антибиотика азитромицина, представляющее собой продукт взаимодействия антибиотика азитромицина с сополимером акриламида с 2-акриламидо-2-метилпропансульфокислотой общей формулы (1), содержащий 25,5 мол.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения настойки из листьев тополя черного, обладающей ингибирующей активностью в отношении штаммов Burkholderia.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к средству на основе травы монарды дудчатой, обладающему ингибирующей активностью в отношении штамма Burkholderia при муковисцидозе. Средство на основе травы монарды дудчатой, обладающее ингибирующей активностью в отношении штамма Burkholderia при муковисцидозе, при изготовлении которого используют 70 этиловый спирт, при этом траву монарды дудчатой настаивают на 70 этиловом спирте в соотношении «сырье - экстрагент» 1:8 в условиях дробной экстракции - дважды при комнатной температуре в течение 24 часов и получением двух извлечений, а затем при нагревании на кипящей водяной бане и получением третьего извлечения, которое объединяют с двумя первыми. Вышеописанное средство обладает выраженной ингибирующей активностью в отношении штамма Burkholderia при муковисцидозе. 1 табл.

Наверх