Штамм лактобактерий enterococcus faecalis - продуцент молочной кислоты и антибиотических веществ
Владельцы патента RU 2696083:
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Горский государственный аграрный университет" (RU)
Изобретение относится к биотехнологии. Штамм лактобактерий Enterococcus faecalis К-45(5-2018), обладающий способностью продуцировать молочную кислоту и антибиотические вещества, депонирован во Всероссийской Коллекции Промышленных Микроорганизмов под регистрационным номером ВКПМ В-13049. Штамм лактобактерий Enterococcus faecalis ВКПМ В-13049 может быть использован для производства кисломолочных напитков.
Изобретение относится к биотехнологии, в частности может быть использовано в пищевой промышленности.
Известен штамм Enterococcus faecium ВКПМ В-9071 (патент №2533154 от 17.09.2014 г.), полученный на доступных питательных средах и применяемый в качестве бактериальной закваски при приготовлении молочнокислых продуктов, характеризуемый высокой скоростью сквашивания молока.
Однако данный штамм обладает более низкой антагонистической активностью, по сравнению с предлагаемым штаммом.
Техническое решение - выделение высокопродуктивного нового местного штамма лактобактерий путем селекции.
Технический результат - получение чистой культуры молочнокислого микроорганизма Enterococcus faecalis ВКПМ В-13049, выделенный из содержимого пищеварительного тракта косули кавказской в РСО-Алания путем многократных перевивок на питательных средах.
Идентификацию штамма проводили по методике Банниковой Л.А. и методом ПЦР-диагностики.
Этапы и результаты генетических исследований.
а) Секвенирование участков последовательности, кодирующей ген 16S рРНК.
б) Анализ последовательностей гена, кодирующего 16S рРНК.
По результатам проведенного анализа секвенсов вариабельных участков генов, кодирующих 16S рРНК и анализа филогенетического родства, построенного с использованием типовых штаммов близкородственных бактерий тестируемый штамм наиболее близок к виду Enterococcus faecalis (99%) и депонирован во Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (ВКПМ) ГосНИИГенетика под номером ВКПМ В-13049.
Свойства штамма Enterococcus faecalis ВКПМ В-13049:
- диплококки;
- образуют мелкие колонии на MRS-агаре.
- скорость сквашивания молока 8-9 часов.
- предел кислотообразования - 138°Т.
- продукты, синтезируемые штаммом - молочная кислота и антибиотические вещества.
- диаметр зоны подавления роста Staphylococcus aureus - 28 мм;
- диаметр зоны подавления роста Escherichia coli - 27 мм.
Определение антибиотической активности штамма Enterococcus faecalis ВКПМ В-13049 проводили на плотной питательной среде (МПА) методом диффузии в агар.
Способ, условия и состав сред для длительного хранения штамма -лиофилизация; хранение при температуре 4-6°С; питательные среды: MRS; Rogosa et. al.; молоко с мелом; молоко с дрожжевым автолизатом, глюкозой, лакмусом, печеночным экстрактом и СаСО3.
Способ, условия и состав сред для размножения штамма - при температуре 37°С - среды: MRS; обезжиренное молоко, несоленая подсырная молочная сыворотка с содержанием не менее 4,0% сахара.
Оптимальные условия и состав среды для ферментации - температура 37°С; среды: MRS, несоленая подсырная молочная сыворотка с содержанием не менее 4,0% сахара; молоко коровье.
Предлагаемый новый штамм Enterococcus faecalis ВКПМ В-13049, выделенный из содержимого пищеварительного тракта косули кавказской в РСО-Алания, хорошо приспособлен к местным условиям. Неприхотлив в культивировании и хранении, обладает низкой предельной кислотностью и высокой скоростью свертывания молока, что позволяет повысить экономическую эффективность при производстве (за счет ускорения производственного процесса и увеличения срока годности готовой продукции).
Штамм проявляет высокую антагонистическую способность по отношению к условно-патогенной и патогенной микрофлоре.
Предлагаемый новый штамм лактобактерий Enterococcus faecalis ВКПМ В-13049 обладает высокой биологической активностью и может применяться для коррекции микрофлоры пищеварительного тракта.
Штамм лактобактерий Enterococcus faecalis ВКПМ В-13049 - продуцент молочной кислоты, антибиотических веществ и компонент закваски для производства кисломолочных напитков.