Прогнозирование преэклампсии на основе определения внеклеточной днк плода в материнской крови при проведении скрининга первого триместра беременности

Изобретение относится к медицине, в частности к акушерству, и может быть использовано для прогнозирования преэклампсии на основе определения внеклеточной ДНК плода в материнской крови при проведении скрининга первого триместра беременности. Для этого проводят забор материнской крови в 11-14 недель беременности, определение уровня содержания внеклеточной пДНК путем выявления гиперметилированной части гена RASSF1A, допплерометрическое исследование кровотока в маточных артериях с определением среднего пульсационного индекса. Выявление риска развития ПЭ по представленной модели: р=1/(1+е-z), где р - вероятность развития ПЭ, е - математическая константа, равная 2.72, z определяют из уравнения бинарной логистической регрессии следующего вида: z=0.143*у1+2.138*у2-7.335, где y1 - концентрация внеклеточной ДНК плода в 11-14 недель (ГЕ/мл), у2 - средний пульсационный индекс в маточных артериях в 11-14 недель, при значении р≥0.51 имеется высокий риск развития преэклампсии. Изобретение позволяет прогнозировать преэклампсию с чувствительностью 90.0% и специфичностью 90.9% у женщин в первом триместре беременности. 3 ил, 1 табл.

 

Изобретение относится к области медицины, в частности к акушерству, и может быть использовано для прогнозирования преэклампсии у женщин в первом триместре беременности. Сущность метода состоит в заборе материнской крови для определения содержания внеклеточной ДНК плода у женщин при проведении скрининга первого триместра беременности. Прогнозируют преэклампсию по результатам уравнения р=1/(1+e-z), где е - математическая константа, равная 2.72, a z определяют из следующего уравнения бинарной логистической регрессии: z=0.143*y1+2.138*у2-7.335, где y1 - концентрация внеклеточной ДНК плода в 11-14 недель (ГЕ/мл), у2 -средний пульсационный индекс в маточных артериях в 11-14 недель. Использование заявленного метода позволяет прогнозировать преэклампсию с чувствительностью 90.0% и специфичностью 90.9% при пороговой точке отсечки 0.51. Таким образом, при значении р≥0.51 имеется высокий риск развития преэклампсии.

Изобретение относится к области медицинской диагностики и может быть использовано для прогнозирования преэклампсии у женщин в первом триместре беременности.

Преэклампсия (далее ПЭ) клинически манифестирует после 20 недели гестации или в течение 4-6 недель после родов проявлением артериальной гипертензии и/или протеинурии, нередко сочетаясь с отеками, и остается одной из главных причин материнской и перинатальной заболеваемости и смертности [1]. Единственным эффективным способом «лечения» данного осложнения является родоразрешение. Несмотря на проведение профилактических мероприятий, частота ПЭ не снижается и составляет 2-8% [2]. Данная тенденция в том числе связана с запоздалым началом профилактики ПЭ в связи с отсутствием специфических прогностических маркеров, позволяющих выявлять женщин высокого риска на раннем сроке беременности. Тем самым, в настоящее время наиболее актуальным является возможность прогнозирования ПЭ на раннем сроке гестации для своевременного начала профилактики и тщательного мониторинга в течение беременности.

Описано большое количество факторов риска развития ПЭ, основными из которых являются: возраст женщины, ПЭ в анамнезе, хроническая артериальная гипертензия, гестационный сахарный диабет, заболевания почек, аутоиммунные заболевания, метаболические нарушения, многоплодная беременность, чрезмерная прибавка массы тела во время беременности и др. [3]. Однако процент ложноположительных результатов скрининга ПЭ на основании факторов риска составляет 64.1% [4]. В большинстве работ продемонстрировано, что увеличение сосудистого сопротивления в маточных артериях ассоциируется с развитием ПЭ. Однако в результате мета-анализа более 70 исследований продемонстрирована прогностическая значимость определения допплерометрических показателей в маточных артериях только во втором триместре беременности и при ранней манифестации или тяжелом течении ПЭ [5]. Также изменение кровотока в маточных артериях характерно для других плаценто-ассоциированных осложнений беременности.

Исследовано большое количество биохимических маркеров ПЭ. При гипоксически-ишемических изменениях в плаценте и снижении парциального давления кислорода происходит избыточное высвобождение антиангиогенных белков в материнский кровоток, ключевым из которых является растворимая fms-подобная тирозинкиназа-1 (sFlt-1). Как известно, уровень sFlt-1 повышается при ПЭ, что предшествует манифестации заболевания [6]. Концентрация плацентарного фактора роста (PLGF) при нормальном течении беременности имеет тенденцию к увеличению в первом и во втором триместрах, достигая максимума к 30 неделе гестации и впоследствии уменьшается [7]. На сроке 11-13 недель уровень PLGF в крови матери снижен при анеуплоидии плода и нарушении плацентации, вследствие чего повышается риск развития ПЭ и задержки роста плода. Аналогичное изменение концентрации PLGF наблюдаются во втором и третьем триместрах [8]. Однако определение концентрации ангиогенных факторов изолированно не имеет прогностической значимости для ПЭ с чувствительностью PLGF 32% и частотой ложноположительных результатов 5% [9]. Соотношение sFlt-1 к PLGF позволяет прогнозировать 87.5% наблюдений с ПЭ с частотой ложноположительных результатов 10% только при комбинации результатов во втором и третьем триместрах беременности, что не является оптимальным для применения профилактических мероприятий в группе повышенного риска [10]. В качестве биохимических маркеров ПЭ изучены также РАРР-А, ADAM12, cystatin С, РР-13, pentraxin-3, P-selectine, ADMA, hCG, inhibin A, activing A, sEng и др. Прогностическая ценность данных маркеров не определена ввиду имеющихся различий в результатах исследований, необходимости в комбинации с другими маркерами и отсутствии значимых изменений содержания в первом триместре беременности [11].

В 1997 г. Lo и соавторы продемонстрировали наличие последовательностей внеклеточной ДНК плода (далее пДНК) в материнской крови. Известно, что основным источником пДНК является трофобласт. Попадает пДНК в материнский кровоток вследствие апоптоза клеток трофобласта. Принимая во внимание, что одним из механизмов развития ПЭ является нарушение дифференцировки трофобласта вследствие патологии плацентации и, как следствие, усиление апоптоза клеток трофобласта, пДНК изучали в качестве диагностического маркера ПЭ. Обнаружено повышение концентрации пДНК от 2-х до 5-х раз по сравнению с неосложненным течением беременности, корреляция со степенью тяжести ПЭ, дополнительное увеличение уровня при присоединении HELLP синдрома [12-18].

Наибольший интерес представляло изучение пДНК в материнской крови на ранних сроках, а именно в первом триместре беременности, с целью прогнозирования ПЭ. По данным исследований Sifakis и соавторов (2009), Illanes и соавторов (2009), Papantoniou и соавторов (2013) в 11-14 недель гестации содержание внеклеточной пДНК в материнской крови повышено только при ранней манифестации ПЭ. Напротив, Crowley и соавторы (2007), Poon и соавторы (2013), Thurik и соавторы (2016), Kim и соавторы (2016), Silver и соавторы (2017) не отметили изменения уровня внеклеточной пДНК в первом триместре беременности у женщин с ПЭ, в то время как Rolnic и соавторы (2015) продемонстрировали снижение концентрации пДНК в 11-13 недель при развитии ранней ПЭ. Таким образом, в настоящее время результаты исследований относительно прогнозирования ПЭ на основе определения внеклеточной пДНК в материнской крови на раннем сроке беременности неоднозначные. Однако известны разные маркеры пДНК, которые обуславливают ограничения в применении данного метода, имеют различную чувствительность и специфичность. Исследование пДНК в материнской крови началось с SRY и DYS-14 генов Y-хромосомы, с помощью которых возможно определение пДНК у женщин только с мужским полом плода, что ограничивает применение данной методики. В ряде исследований обнаружение пДНК было ограничено резус-принадлежностью женщины и плода - использование RHD ген в качестве маркера пДНК. Недостатком метода, основанного на выделении пДНК по определению гена maspin (SERPINB5) является высокая степень ее деградации - более 90% ДНК. В результате поисков эпигенетических маркеров клеток плода Chan и соавторы (2006) продемонстрировали, что промотор RASSF1A гена гипометилирован в клетках крови матери, но гиперметилирован в плаценте [19]. Методика обнаружения пДНК в материнской крови при помощи гена RASSF1A позволяет определять содержание пДНК у всех беременных независимо от пола плода и резус-принадлежности.

Известен патент US №8.288.100 В2, 16.10.2012 «Methods for detecting fetal DNA in a plasma or serum sample from a pregnant woman» (Yuk Ming Dennis Lo (HK), Rossa Wai Kwun Chiu (HK), Stephen Siu Chung Chim (HK), Chunming Ding (HK), Kwan Chee Chan (HK), Hing Nam Ivy Wong (HK), Ka Chun Ryan Yuen (HK)). Авторы продемонстрировали универсальность использования гена RASSF1A в качестве маркера пДНК, а также значимое различие в концентрации пДНК у женщин с ПЭ и без.

В изученной научно-медицинской и доступной патентной литературе не обнаружено способа прогнозирования ПЭ в первом триместре беременности на основе определения внеклеточной пДНК в материнской крови в сочетании с другими предикторами развития данного осложнения беременности.

Задачей настоящего исследования является разработать систему прогнозирования ПЭ на основе определения уровня содержания внеклеточной пДНК в материнской крови.

Результат использования изобретения - выделение группы высокого риска развития ПЭ с целью своевременного начала профилактики и тщательного мониторинга в течение беременности.

Согласно поставленной задаче разработана система прогнозирования ПЭ, включающая:

- забор венозной крови при проведении пренатального скрининга в 11-14 недель беременности;

- определение содержания внеклеточной ДНК плода в материнской крови;

- проведение допплерометрического исследования кровотока в маточных артериях с определением среднего пульсационного индекса в 11-14 недель;

- прогнозирование вероятности риска развития ПЭ по результатам уравнения р=1/(1+e-z),

где е - математическая константа, равная 2.72,

z - определяют из уравнения бинарной логистической регрессии следующего вида:

z=0.143*у1+2.138*у2-7.335,

где y1 - концентрация внеклеточной ДНК плода в 11-14 недель (ГЕ/мл), у2 - средний пульсационный индекс в маточных артериях в 11-14 недель.

Новизна изобретения заключается в том, что на основании уровня содержания внеклеточной пДНК в материнской крови в 11-14 недель гестации и факторов риска развития ПЭ, наиболее значимым из которых определен средний пульсационный индекс в маточных артериях при проведении скрининга первого триместра беременности, разработана модель прогнозирования ПЭ.

Проведено обследование 580 беременных от 18 до 45 лет, европеоидной расы, с одноплодной беременностью, подписавших информированное согласие на участие в исследовании. Критериями невключения для всех пациентов явились: хромосомные аномалии и пороки развития у плода и плаценты, аномалии прикрепления и расположения плаценты, онкологические заболевания, острая фаза и обострение хронических инфекционных заболеваний, аутоиммунные заболевания, проведенные инвазивные пренатальные исследования в течение беременности, женщины с трансплантированными органами.

ПЭ диагностирована в 3.4% наблюдений (20 пациенток). Среди обследованных женщин без ПЭ (560 наблюдений) отобраны 22 здоровые пациентки с неотягощенным анамнезом, неосложненным течением беременности, у которых произошли спонтанные роды на доношенном сроке гестации живым здоровым плодом, соответствующим гестационному сроку, для определения диапазона нормативных значений внеклеточной пДНК.

Методика определения внеклеточной пДНК

Забор венозной крови для определения внеклеточной пДНК производили в 11-14 недель при прохождении скрининга первого триместра беременности. Кровь в объеме 5 мл забирали с соблюдением правил асептики в вакуумные пробирки, содержащие ЭДТА, и обрабатывали в течение часа после забора. Выделяли плазму крови центрифугированием в два этапа при 4°С: первый этап - 10 мин, 200 g, второй этап - 10 мин, 4500 g. Образцы плазмы хранили при температуре -80°С. Метод определения внеклеточной пДНК основан на различиях в метилировании промотора гена RASSF1A в геноме плода и в тканях матери - в геноме плода гиперметилирован, в то время как в тканях матери гипометилирован [19]. Общую внеклеточную ДНК выделяли из 1000 мкл плазмы с использованием магнитных частиц Sileks MagNA (Силекс, Россия) согласно рекомендациям изготовителя. Полученную ДНК переосаждали этанолом с соосадителем Satellite Red (Евроген, Россия), далее разводили в 10 мкл воды. Полученный раствор ДНК использовали для проведения метилчувствительной рестрикции с использованием фермента BstUI (NEB, England) 80 Е (единиц активности). Реакцию рестрикции проводили 10 ч при 60°С. После чего ДНК осаждали этанолом с предварительным удалением рестриктаз с помощью хлороформа. Полученную ДНК растворяли в 10 мкл воды. 2 мкл полученного раствора использовали в реакции ПЦР для контроля рестрикции с праймерами к гену АСТВ. В случае отсутствия ответа оставшийся раствор ДНК использовали в реакции ПЦР с праймерами к RASSF1 для определения концентрации внеклеточной ДНК плода в плазме крови. ПЦР-анализ проводили одновременно с пятью различными концентрациями стандарта ДНК, который изготовили из ДНК, выделенной из крови с использованием магнитных частиц (Силекс, Россия). Концентрацию стандарта ДНК определили с помощью флуориметра Qubit 4 (Thermo Fisher Scientific USA). Для проведения ПЦР использовали амплификатор CFX96 (BioRad, USA). Программа ПЦР: 95°С 3 мин, 45 циклов: 95°С 10 сек, 60°С 15 сек, 72°С 30 сек. Последовательности праймеров и зондов представлены в таблице 1.

В результате полученных данных выявлено, что в 11-14 недель уровень внеклеточной пДНК достоверно выше при ПЭ по сравнению с неосложненным течением беременности. Медиана концентрации пДНК при ПЭ составляет 54.85 (29.10-131.83) ГЕ/мл, в то время как при неосложненном течении беременности - 14.15 (6.55-19.40) ГЕ/мл (р<0.001) (Фиг. 1).

Ранняя и поздняя ПЭ в изученной популяции встречались с одинаковой частотой, уровень пДНК в 11-14 недель беременности составлял 54.85 (30.33-108.09) и 51.93 (27.49-142.15) ГЕ/мл, соответственно (р>0.05).

По данным ROC-анализа концентрация внеклеточной пДНК прогнозирует развитие ПЭ с чувствительностью 85.0% и специфичностью 81.8% при уровне отсечки 22.54 ГЕ/мл (площадь под кривой 0.920, р<0.001) (Фиг. 2).

При сравнительном анализе данных допплерометрии в 11-14 недель гестации выявлено более высокое значение среднего пульсационного индекса в маточных артериях у женщин с ПЭ - медиана 1.57 (1.41-1.97) против 1.37 (1.14-1.52), р=0.026).

Использование метода логистической регрессии позволило разработать прогностическую модель развития ПЭ на основе данных внеклеточной пДНК и среднего пульсационного индекса в маточных артериях в сроке 11-14 недель беременности по формуле:

р=1/(1+е-z), где

е - математическая константа, равная 2.72,

z - определяют из уравнения бинарной логистической регрессии следующего вида:

z=0.143*у1+2.138*у2-7.335, где

y1 - концентрация внеклеточной ДНК плода в 11-14 недель (ГЕ/мл),

у2 - средний пульсационный индекс в маточных артериях в 11-14 недель.

Согласно проведенному ROC-анализу, площадь под кривой составила AUC=0.957, пороговая точка отсечки - 0.51 при уровне чувствительности 90.0% и специфичности 90.9% (р<0.001) (Фиг. 3). Следовательно, при значении р≥0.51 имеется высокий риск развития преэклампсии.

Список литературы:

1. Плацентарное ложе и преэклампсия [Текст]. / З.С. Ходжаева, Е.А. Коган, А.Д. Сафонова [и др.] // Акушерство и гинекология. - 2013. - №12. - С. 10-15.

2. Are early and late preeclampsia distinct subclasses of the disease - what does the placenta reveal? [Text]. / J.L. van der Merwe, D.R. Hall, C. Wright [et al.] // Hypertens. Pregnancy. - 2010. - Vol. 29 №4. - P. 457-467.

3. Клинико-анамнестические факторы риска развития преэклампсии у беременных [Текст]. / Н.Е. Кан, Л.Е. Беднягин, Н.В. Долгушина [и др.] // Акушерство и гинекология. - 2016. - №6. - С. 39-45.

4. Combined screening for early detection of pre-eclampsia [Text]. / H.J. Park, S.S. Shim, D.H. Cha // Int. J. Mol. Sci. - 2015. - Vol. 16 №8. - P. 17952-17974.

5. Combined screening for early detection of pre-eclampsia [Text]. / H.J. Park, S.S. Shim, D.H. Cha // Int. J. Mol. Sci. - 2015. - Vol. 16 №8. - P. 17952-17974.

6. Circulating angiogenic factors and the risk of preeclampsia [Text]. / R.J. Levine, S.E. Maynard, C. Qian [et al.] // N. Engl. J. Med. - 2004. - Vol. 350 №7. - P. 672-683.

7. Serum placental growth factor in the three trimesters of pregnancy: effects of maternal characteristics and medical history [Text]. / A. Tsiakkas, N. Duvdevani, A. Wright [et al.] // Ultrasound Obstet. Gynecol. - 2015. - Vol. 45 №5. - P. 591-598.

8. Serum placental growth factor in the three trimesters of pregnancy: effects of maternal characteristics and medical history [Text]. / A. Tsiakkas, N. Duvdevani, A. Wright [et al.] // Ultrasound Obstet. Gynecol. - 2015. - Vol. 45 №5. - P. 591-598.

9. Placental growth factor and pre-eclampsia [Text]. / K. Chau, A. Hennessy, A. Makris // J. Hum. Hypertens. - 2017. - Vol. 31 №12. - P. 782-786.

10. Screening models using multiple markers for early detection of late-onset pre-eclampsia in low-risk pregnancy [Text]. / H.J. Park, S.H. Kim, Y.W. Jung [et al.] // BMC Pregnancy Childbirth. - 2014. - №14. - P. 35.

11. Pre-eclampsia: molecular events to biomarkers [Text]. / B.K. Sahai, S. Saraswathy, T.P. Yadav [et al.] // Med. J. Armed. Forces India. - 2017. - Vol. 73. №2. - P. 167-174.

12. Elevation of both maternal and fetal extracellular circulating deoxyribonucleic acid concentrations in the plasma of pregnant women with preeclampsia [Text]. / X.Y. Zhong, H.L. Laivuori, J.C. Livingston [et al.] // Am. J. Obstet. Gynecol. - 2001. - Vol. 184. №3. - P. 414-419.

13. Hemolysis, elevated liver enzymes, and low platelet count (HELLP) syndrom as a complication of pre-eclapmsia in pregnant women increases the amount of cell-free fetal and maternal DNA in maternal plasma and serum [Text]. / D.W. Swinkels, J.B. de Kok, J.C.M. Hendriks [et al.] // Clin. Chem. - 2002. - Vol. 48. №4. - P. 650-653.

14. Cell-free fetal DNA in the plasma of pregnant women with fetal growth restriction [Text]. / A. Sekizawa, M. Jimbo, H. Saito [et al.] // Am. J. Obstet. Gynecol. - 2003. - Vol. 188. №2. - P. 480-484.

15. Quantitative aberrations of hypermethylated RASSF1A gene sequences in maternal plasma in pre-eclampsia [Text]. / D.W.Y. Tsui, K.C.A. Chan, S.S.C. Chim [et al.] // Prenat. Diagn. - 2007. - №27. - P. 1212-1218.

16. Quantification of cell free fetal DNA in maternal plasma in normal pregnancies and in pregnancies with placental dysfunction [Text]. / M.S. Alberry, D.G. Maddocks, M.A. Hadi [et al.] // Am. J. Obstet. Gynecol. - 2009. - Vol. 200. №1. - P. 98.e1-98.e6.

17. Quantification and application of the placental epigenetic signature of the RASSF1A gene in maternal plasma [Text]. / F. Zhao, J. Wang, R. Liu [et al.] // Prenat. Diagn. - 2010. №30. - P. 778-782.

18. Circulating maternal total cell-free DNA, cell-free fetal DNA and soluble endoglin levels in preeclampsia: predictors of adverse fetal outcome? A cohort study [Text]. / R.M. AbdelHalim, D.I. Ramadan, R. Zeyada [et al.] // Mol. Diagn. Ther. - 2016. №20. - P. 135-149.

19. Hypermethylated RASSF1A in maternal plasma: A universal fetal DNA marker that improves the reliability of noninvasive prenatal diagnosis [Text]. / K.C. Chan, C. Ding, A. Gerovassili [et al.] // Clin. Chem. - 2006. - Vol. 52 №12. - P. 2211-2218.

Фиг. 1.

Содержание внеклеточной ДНК плода при ПЭ и неосложненном течении беременности.

Фиг. 2.

ROC-анализ внеклеточной ДНК плода в 11-14 недель беременности.

Фиг. 3.

ROC-кривая, описывающая прогнозирование ПЭ на основании построенной модели.

Способ прогнозирования преэклампсии на основе определения внеклеточной ДНК плода в материнской крови при проведении скрининга первого триместра беременности, включающий забор материнской крови в 11-14 недель беременности, определение уровня содержания внеклеточной пДНК путем выявления гиперметилированной части гена RASSF1A, допплерометрическое исследование кровотока в маточных артериях с определением среднего пульсационного индекса и выявление риска развития ПЭ по представленной модели:

р=1/(1+е-z), где

р - вероятность развития ПЭ,

е - математическая константа, равная 2.72,

z определяют из уравнения бинарной логистической регрессии следующего вида:

z=0.143*у1+2.138*у2-7.335, где

y1 - концентрация внеклеточной ДНК плода в 11-14 недель (ГЕ/мл),

у2 - средний пульсационный индекс в маточных артериях в 11-14 недель,

при значении р≥0.51 имеется высокий риск развития преэклампсии.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к диагностике наличия ацетона в воздухе, выдыхаемом человеком. Способ контроля концентрации ацетона в воздухе, выдыхаемом человеком, включает использование корпуса, источника питания постоянного тока, спектрометра, разрядной ячейки, линии отбора пробы, оснащенной регулируемым клапаном, блока анализа и обработки, осуществление забора воздуха, выдыхаемого человеком, с последующей подачей его в линию отбора пробы, осуществление регулирования натекания воздуха, выдыхаемого человеком, через линию отбора пробы производят посредством регулируемого клапана, инициирование разряда в разрядной ячейке, понижение давления воздуха, выдыхаемого человеком, в разрядной ячейке посредством насоса прокачки, регистрацию эмиссионного спектра, осуществление нормировки эмиссионного спектра пробы воздуха, выдыхаемого человеком.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для дифференциальной диагностики жировой болезни печени алкогольного и неалкогольного генеза. Для этого на суспензию эритроцитов пациента воздействуют неоднородным переменным электрическим полем.

Изобретение относится к области медицины и может найти применение в диагностике стадии фиброза печени у пациентов с хроническим вирусным гепатитом В. Согласно предлагаемому способу, в лимфоцитах периферической крови методом ДНК-комет определяют процент повреждений ДНК, осуществляют клинический и общетерапевтический биохимический анализ крови, с использованием предсказательной математической модели по результатам анализов пациентов с хроническим вирусным гепатитом B находят коэффициенты порядковой логистической регрессии с регуляризацией, с помощью которых рассчитывают значение вспомогательных показателей esl и es2 по следующим формулам: es1 = ехр(6,354-0,019*⋅Возраст - 0,096*⋅Лейкоциты - 0,066*⋅СОЭ - 0,770*⋅%ДНК в хвосте кометы); es2 = ехр(11,944-0,019*⋅Возраст - 0,096*⋅Лейкоциты - 0,066*⋅СОЭ - 0,770*⋅%ДНК в хвосте кометы), где ехр - экспоненциальная функция; возраст - возраст пациента, лет; СОЭ - скорость оседания эритроцитов, мм/ч; лейкоциты - содержание лейкоцитов в периферической крови пациента, 109/л; % ДНК в хвосте кометы - содержание ДНК в хвосте кометы лимфоцита, %.

Изобретение относится к офтальмологии, а именно к способу прогнозирования интраоперационных геморрагических осложнений при тяжелой форме пролиферативной диабетической ретинопатии.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной медицине, и может быть использовано для прогнозирования послеоперационного спаечного процесса в эксперименте.

Группа изобретений относится к анализу на обнаружение аналита в физиологических текучих средах. Представлен способ определения концентрации глюкозы в крови с помощью системы измерения концентрации глюкозы в крови, который включает: вставку тест-полоски в разъем порта для установки полоски измерительного прибора для соединения по меньшей мере двух электродов тест-полоски с цепью измерения полоски; проведение анализа после нанесения пробы; приложение первого напряжения и измерение первого выходного значения тока; переключение первого напряжения на второе напряжение, отличное от первого напряжения; изменение второго напряжения на третье напряжение, отличное от второго напряжения; измерение второго выходного значения тока переходного токового сигнала с электродов после изменения со второго напряжения на третье напряжение; оценку тока, близкого к выходному значению установившегося тока переходного токового сигнала, после установки третьего напряжения на электродах; выведение тока, пропорционального исходной концентрации глюкозы, на основе первого тока, второго тока и оценочного тока; составление формулы коэффициента компенсации гематокрита на основе тока, пропорционального исходной концентрации глюкозы, и вычисление концентрации глюкозы из выведенного тока, пропорционального исходной концентрации глюкозы, и коэффициента компенсации гематокрита.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ диагностики рака молочной железы и рака яичников.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения содержания в крови редкоземельных элементов (РЗЭ) методом масс-спектрометрии с индуктивно связанной плазмой.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для прогнозирования риска развития артериальной гипертонии при метаболическом синдроме у практически здоровых мужчин призывного возраста.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для определения динамики изменения скорости оседания эритроцитов (СОЭ). Для этого проводят смешивание исследуемой пробы крови с антикоагулянтом.

Изобретение относится к области медицины, а именно к нефрологии, диетологии, а именно к способу скрининга белково-энергетической недостаточности у пациента, получающего лечение программным гемодиализом. Для этого определяют уровень альбумина сыворотки крови и учет стажа гемодиализной терапии, а также дополнительно определяют абсолютное число лимфоцитов сыворотки крови и путем опроса пациента устанавливают характер изменения аппетита за последние 4 недели, наличие и выраженность желудочно-кишечных симптомов, характер двигательной активности, каждый показатель оценивают в баллах согласно системе балльной оценки и при сумме баллов более 5 выявляют высокий риск наличия БЭН. Изобретение обеспечивает высокую чувствительность и специфичность скрининга БЭН у пациента, получающего лечение программным ГД, и позволяет с высокой эффективностью выявлять пациентов, нуждающихся в развернутой диагностике БЭН. 1 ил., 4 табл., 1 пр.

Изобретение относится к экспериментальной медицине, в частности к клинической лабораторной диагностике, и может быть использовано для анализа состояния стресс-реактивности организма. Способ оценки стресс реактивности организма включает проведение гематологического исследования для определения значений электрофоретической подвижности эритроцитов ЭФПЭ, концентрации малонового диальдегида МДА и активности каталазы эритроцитов крови АК. На основании значений ЭФПЭ, МДА и АК осуществляют расчет коэффициента стресс-реактивности организма КR по формуле: где KR - коэффициент стресс-реактивности, ЭФПЭК - электрофоретическая подвижность эритроцитов контрольной группы, ЭФПЭО - электрофоретическая подвижность эритроцитов группы сравнения, МДАК - концентрация малонового диальдегида в эритроцитах контрольной группы, МДАО - концентрация малонового диальдегида в эритроцитах группы сравнения, АКК - активность каталазы в эритроцитах контрольной группы, АКО - активность каталазы в эритроцитах группы сравнения. При величине коэффициента стресс-реактивности KR оценивают состояние организма по одной из следующих категорий: > 60% - высокая стресс-реактивность, 10-60% - средняя стресс-реактивность, < 10% - низкая стресс-реактивность. Использование данного способа позволяет оценить стресс-реактивность организма на основании количественного анализа гематологических показателей. 3 пр.

Изобретение относится к медицине, в частности к акушерству, и может быть использовано для прогнозирования преэклампсии на основе определения внеклеточной ДНК плода в материнской крови при проведении скрининга первого триместра беременности. Для этого проводят забор материнской крови в 11-14 недель беременности, определение уровня содержания внеклеточной пДНК путем выявления гиперметилированной части гена RASSF1A, допплерометрическое исследование кровотока в маточных артериях с определением среднего пульсационного индекса. Выявление риска развития ПЭ по представленной модели: р1, где р - вероятность развития ПЭ, е - математическая константа, равная 2.72, z определяют из уравнения бинарной логистической регрессии следующего вида: z0.143*у1+2.138*у2-7.335, где y1 - концентрация внеклеточной ДНК плода в 11-14 недель, у2 - средний пульсационный индекс в маточных артериях в 11-14 недель, при значении р≥0.51 имеется высокий риск развития преэклампсии. Изобретение позволяет прогнозировать преэклампсию с чувствительностью 90.0 и специфичностью 90.9 у женщин в первом триместре беременности. 3 ил, 1 табл.

Наверх