Способ определения предрасположенности к развитию экссудативного среднего отита

Изобретение относится к области медицины, а именно к оториноларингологии, и касается способа определения предрасположенности к развитию экссудативного среднего отита. Для этого проводят исследование периферической крови пациента. Из периферической крови выделяют моноциты. На моноцитах периферической крови определяют экспрессию Toll-подобных рецепторов, %: TLR2 и TLR4. При одновременном выполнении условий 56,1<TLR2<71,8 и 16,2<TLR4<23,7 определяют предрасположенность пациента к развитию экссудативного среднего отита. Изобретение позволяет повысить достоверность диагностирования экссудативного среднего отита. 2 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, а именно, к оториноларингологии, и может быть использовано для определения предрасположенности к развитию экссудативного среднего отита.

Актуальность проблемы экссудативного среднего отита (ЭСО) связана с ростом заболеваемости этой патологии, которая является основной причиной снижения слуха, особенно у детей. При массовых осмотрах детей в возрасте от двух до семи лет в России ЭСО обнаруживается более, чем в 30% случаев, за рубежом - в 5-25% (Aydemir, G. Otitis media with effusion in primary schools in Princes' Island, Istanbul: prevalence and risk factors / G. Aydemir, F.E. Ozkurt // J. Int. Med. Res. - 2011. - Vol. 39, No 3. - P. 866-872; Chen, Y.W. Is otitis media with effusion almost always accompanying cleft palate in children: the experience of 319 Asian patients / Y.W. Chen [et al.] // Laryngoscope. - 2012. - Vol. 122, No 1. - P. 220-224). У взрослых ЭСО встречается в 4 раза реже, чем у детей (Савенко И.В., Бобошко М.Ю., Лопотко А.И., Цвылева И.Д. Экссудативный средний отит. СПб.: Изд-во «Диалог». - 2010. -С. 6).

ЭСО относится к полиэтиологическим заболеваниям, часто связанным с сочетанием ряда факторов (Оспанова Д.А., Жумабаев Р.Б. Анализ основных методик лечения экссудативного среднего отита в мировой практике - найдено на сайте https://kaznmu.kz/press/wp-content/uploads/2017/0l.pdf). Одной из главных причин развития ЭСО являются хронические заболевания верхних дыхательных путей, в основе которых лежит недостаточность иммунной защиты, в частности - нарушения в системе врожденного иммунитета (Щербик Н.В., Климов А.В., Кологривова Е.Н., Федорова О.В., Комарова С.В. Иммунологические риски развития экссудативного среднего отита у детей с хроническим аденоидитом // Бюллетень сибирской медицины. - 2013. - Т. 12. №3. - С. 92, 95).

ЭСО в раннем детском возрасте характеризуется практически бессимптомным течением. Часто снижение слуха обнаруживается случайно и является одной из причин задержки слухоречевого развития при отсутствии характерной клиники и отоскопической картины. Заболевание может носить персистирующий - при стойкой дисфункции слуховых труб, или рецидивирующий характер. При этом число и длительность рецидивов могут варьировать. ЭСО у детей приводит к нарушению слухоречевого, языкового и интеллектуального развития, последующим трудностям в обучении, социальной дезадаптации ребенка (И. Савенко, М. Бобошко. Экссудативный средний отит у недоношенных детей первых 3 лет жизни // Врач. - 2014. - №2. - С. 56), а у взрослых - к снижению качества жизни, развитию стойкой нетрудоспособности и существенным экономическим затратам здравоохранения (Анарбаев А.А., Маткасымова А.Т., Калматов Р.К. Динамика изменений иммунологических показателей экссудата среднего уха при отите - найдено на сайте https://interactive-plus.ru/e-articles/218/Action218-80457.pdf).

Проведенным поиском по научно-медицинской и патентной литературе найден описанный в работе Тихомировой И.А. и соавт. (Тихомирова И.А., Янов Ю.К., Ларионова В.И., Частнык В.Г. Полиморфизм гена СС16 как маркер предрасположенности к развитию секреторного среднего отита // Росс, оториноларингология. - 2006. - №6 (25). - С. 10-11), способ определения предрасположенности к развитию секреторного, то есть экссудативного среднего отита, принятый нами за прототип. Проводят исследование периферической крови пациента. Из лейкоцитов крови выделяют ДНК. При наличии полиморфизма гена СС16 в ДНК, выделенной из лейкоцитов периферической крови, определяют предрасположенность к экссудативному среднему отиту.

Недостатками прототипа является сложность метода, так как для выполнения генетического исследования крови необходимо наличие молекулярно-генетической лаборатории и специально обученного персонала, а также длительность исследования, которая составляет порядка 10 дней.

Задачей предложенного изобретения является разработка простого достоверного способа определения предрасположенности к развитию ЭСО.

Техническим результатом, проявляющимся при реализации данного способа, является упрощение способа определения предрасположенности к развитию ЭСО и сокращение времени исследования.

Технический результат достигается тем, что исследуют периферическую кровь пациента. Из периферической крови выделяют моноциты. На выделенных моноцитах определяют экспрессию Toll-подобных рецепторов, %: TLR2 и TLR4. При одновременном выполнении условий 56,1<TLR2<71,8 и 16,2<TLR4<23,7 определяют предрасположенность пациента к развитию экссудативного среднего отита.

Подробное описание способа

Для определения предрасположенности к развитию экссудативного среднего отита проводят забор периферической крови пациента из локтевой вены. Из периферической крови выделяют моноциты, например, по методике Рекалде, описанной в работе Ковальчук Л.В. и соавт. (Иммунология. Практикум: учебное пособие - найдено на сайте http://kursak.net/immunologiyа-praktikum-ucheb-posobie-kovalchuk-l-v-i-dr-2010). На выделенных моноцитах определяют экспрессию Toll-подобных рецепторов, %: TLR2 и TLR4, например, по методике, описанной в работе Мамедовой Л.Н. и соавт. (Мамедова Л.Н., Тарасова Г.Н., Чумакова Е.А., Столярова И.Г. Динамическое определение Toll-рецепторов у больных с язвенным колитом // Медицинский вестник Юга России. - 2013. - С. 91). При одновременном выполнении условий 56,1<TLR2<71,8 и 16,2<TLR4<23,7 определяют предрасположенность пациента к развитию экссудативного среднего отита. Время исследования составляет порядка одного дня.

В последнее десятилетие интенсивно исследуются в норме и при патологии функции и экспрессия Toll-подобных рецепторов, играющих важную роль в активации механизмов врожденного иммунитета (Коровкина Е.С., Кажарова С.В. Роль Toll-подобных рецепторов в патогенезе воспалительных заболеваний бронхолегочный системы. Инфекция и иммунитет. -2016. - Т. 6, №2. - С. 109-116). В научно-медицинской литературе имеются сведения об исследовании экспрессии Toll-подобных рецепторов TLR2 и TLR4 у больных с рецидивом язвенного колита (Мамедова Л.Н., Тарасова Г.Н., Чумакова Е.А., Столярова И.Г. Динамическое определение Toll-рецепторов у больных с язвенным колитом // Медицинский вестник Юга России. - 2013.- С. 90). Мы решили исследовать экспрессию Toll-подобных рецепторов TLR2 и TLR4 у больных ЭСО с целью оценки роли врожденного иммунитета в развитии ЭСО и в предрасположенности к развитию экссудативного среднего отита.

Для разработки заявляемого способа нами были сформированы 2 группы: 34 больных с подтвержденным диагнозом ЭСО и контрольная группа из 31 здорового человека - всего 65 человек в возрасте от 3 до 56 лет, обратившихся в оториноларингологическое отделение Муниципального бюджетного учреждения здравоохранения Городской больницы №1 им. Н.А. Семашко, г. Ростова-на-Дону (МБУЗ). Проводили забор периферической крови из локтевой вены пациентов. Выделяли моноциты периферической крови по методике Рекалде, описанной в работе Ковальчук Л.В. и соавт. (Иммунология. Практикум: учебное пособие - найдено на сайте http://kursak.net/immunologiya-praktikum-ucheb-posobie-kovalchuk-l-v-i-dr-2010). На выделенных моноцитах определяли экспрессию Toll-подобных рецепторов, %: TLR2 и TLR4 по методике, описанной в работе Мамедовой Л.Н. и соавт. (Мамедова Л.Н., Тарасова Г.Н., Чумакова Е.А., Столярова И.Г. Динамическое определение Toll-рецепторов у больных с язвенным колитом // Медицинский вестник Юга России. - 2013. - С. 91). С помощью программы Statistica 6,0 (StatSoft Inc., США) провели статистическую обработку результатов исследования. В результате статистической обработки результатов исследования были получены статистически достоверные (р<0.05) значения экспрессии исследуемых Toll-подобных рецепторов: для контрольной группы - минимальное значение TLR2, равное 71,8%, и минимальное значение TLR4, равное 23,7%; для группы больных ЭСО - максимальное значение TLR2, равное 56,1%, и максимальное значение TLR4 для больных ЭСО, равное 16,2%. Анализ результатов исследования экспрессии Toll-подобных рецепторов TLR2 и TLR4 у больных ЭСО и в контрольной группе показал, что в области определения величин TLR2 и TLR4, соответственно, между группой больных и контрольной группой имеется «разрыв» значений, удовлетворяющий следующим условиям: 56,1<TLR2<71,8 и 16,2<TLR4<23,7. Нами была выдвинута гипотеза о том, что одновременно выполнение указанных выше условий определяет наличие предрасположенности к развитию ЭСО у пациента.

Для подтверждения этой гипотезы мы провели массовое обследование пациентов, обратившихся в ЛОР отделение. Всего было обследовано 163 пациента - 102 ребенка и 61 взрослый. У 116 пациентов, значения TLR2 составляли от 71,8% и выше, значения TLR4 - от 23,7% и выше, у 47 пациентов значения TLR2 и TLR4 одновременно удовлетворяли условиям: 56,1<TLR2<71,8 и 16,2<TLR4<23,7. Эти 47 пациентов были определены в группу риска по развитию ЭСО. Дальнейшее наблюдение за 163 пациентами показало, что у 116 пациентов ЭСО не развился, а у 47 указанных выше - развился, что подтвердила нашу гипотезу и достоверность описанных выше критериев определения предрасположенности к ЭСО.

Практическая реализуемость предложенного способа иллюстрируется следующими примерами из клинической практики.

Пример 1. Пациент Ч., 3 года, поступил в оториноларингологическое отделение для детей МБУЗ с жалобами со слов мамы на заложенность носа, затрудненное носовое дыхание, храп. Из анамнеза выяснено, что ребенок Ч. плохо дышит носом около двух лет. В течение года беспокоит частый насморк, в связи с чем неоднократно лечился в амбулаторных условиях в поликлинике по месту жительства. Пациенту Ч. была проведена эндоскопия полости носа, носоглотки, фарингоскопия, отоскопия. В носоглотке обнаружены аденоиды 2-3 степени гипертрофии с признаками хронического воспаления. При отоскопии - барабанные перепонки серые, блестящие, опознавательные знаки четкие.

Для определения предрасположенности к развитию ЭСО пациенту Ч. был проведен забор периферической крови из локтевой вены. Из периферической крови были выделены моноциты по методике Рекалде, описанной в работе Ковальчук Л.В. и соавт. (Иммунология. Практикум: учебное пособие - найдено на сайте http://kursak.net/immunologiya-praktikum-ucheb-posobie-kovalchuk-l-v-i-dr-2010). На выделенных моноцитах определили экспрессию Toll-подобных рецепторов, %: TLR2 и TLR4 по методике, описанной в работе Мамедовой Л.Н. и соавт. (Мамедова Л.Н., Тарасова Т.Н., Чумакова Е.А., Столярова И.Г. Динамическое определение Toll-рецепторов у больных с язвенным колитом // Медицинский вестник Юга России. - 2013. - С.91). Было получено: TLR2=58,4%, TLR4=17,1%. Поскольку одновременно были выполнены условия 56,1<TLR2=58,4<71,8 и 16,2<TLR4=17,1<23,7 была определена предрасположенность пациента Ч. к развитию ЭСО. Время исследования составило 1 день.

Пациенту Ч. было назначено адекватное его состоянию лечение. Несмотря на проведенные лечебно-профилактические мероприятия, у пациента Ч. развился ЭСО, что подтвердило достоверность предлагаемого нами способа.

Пример 2. Пациентка А., 20 лет, поступила в оториноларингологическое отделение для взрослых МБУЗ с жалобами на снижение слуха в левом ухе, заложенность носа. Из анамнеза известно, что в течение 3-х лет пользуется сосудосуживающими каплями в нос. В детстве - частые насморки, операция - аденотомия в 5-летнем возрасте. При поступлении в оториноларингологическое отделение для взрослых пациентке была проведена эндоскопия полости носа, носоглотки, фарингоскопия, отоскопия. При эндоскопическом осмотре в полости носа обнаружена гипертрофия нижних носовых раковин на всем протяжении, в носоглотке - гипертрофия трубных миндалин, более выраженная слева. При отоскопии - барабанные перепонки серые, блестящие, опознавательные знаки четкие.

Для определения предрасположенности к развитию ЭСО пациентке А. Был проведен забор периферической крови из локтевой вены. Из периферической крови выделены моноциты по методике Рекалде, описанной в работе Ковальчук Л.В. и соавт. (Иммунология. Практикум: учебное пособие - найдено на сайте http://kursak.net/immunologiya-praktikum-ucheb-posobie-kovalchuk-l-v-i-dr-2010). На выделенных моноцитах определяли экспрессию Toll-подобных рецепторов, %: TLR2 и TLR4 по методике, описанной в работе Мамедовой Л.Н. и соавт. (Мамедова Л.Н., Тарасова Г.Н., Чумакова Е.А., Столярова И.Г. Динамическое определение Toll-рецепторов у больных с язвенным колитом // Медицинский вестник Юга России. - 2013. - С.91). Было получено: TLR2=62,3%, TLR4=19,1%. Поскольку одновременно были выполнены условия 56,1<TLR2=62,3<71,8 и 16,2<TLR4=19,1<23,7 была определена предрасположенность пациентки А. к развитию ЭСО. Время исследования составило 1 день.

Пациентке А. было назначено адекватное ее состоянию лечение. Несмотря на проведенные лечебно-профилактические мероприятия, у пациентки А. развился ЭСО, что подтвердило достоверность предлагаемого нами способа.

С помощью заявляемого способа нами было обследовано 67 пациентов, 46 детей и 21 взрослых, в возрасте от 3 до 56 лет, поступивших в оториноларингологические отделения МБУЗ.

Для определения предрасположенности к развитию экссудативного среднего отита проводили забор периферической крови пациентов. Выделяли моноциты периферической крови по методике Рекалде, описанной в работе Ковальчук Л.В. и соавт.(Иммунология. Практикум: учебное пособие - найдено на сайте http://kursak.net/immunologiya-praktikum-ucheb-posobie-kovalchuk-l-v-i-dr-2010). На выделенных моноцитах определяли экспрессию Toll-подобных рецепторов, %: TLR2 и TLR4 по методике, описанной в работе Мамедовой Л.Н. и соавт.(Мамедова Л.Н., Тарасова Г.Н., Чумакова Е.А., Столярова И.Г. Динамическое определение Toll-рецепторов у больных с язвенным колитом // Медицинский вестник Юга России. - 2013. - С. 91). При одновременном выполнении условий 56,1<TLR2<71,8 и 16,2<TLR4<23,7 определяли предрасположенность пациента к развитию экссудативного среднего отита. Время исследования для одного пациента составило 1 день.

У 32 обследованных пациентов это условие выполнялось, поэтому у этих 32 человек была определена предрасположенность к развитию ЭСО. Дальнейшее наблюдение за этими 32 пациентами показало, что у них развился ЭСО, что подтвердило достоверность заявляемого способа.

Таким образом, предложенный способ объективен, достоверен, может быть использован для определения предрасположенности к развитию ЭСО у пациентов любого возраста, выполнен в любой иммунологической лаборатории, и по сравнению с прототипом позволяет практически в 10 раз сократить время исследования.

Способ определения предрасположенности к развитию экссудативного среднего отита, включающий исследование периферической крови пациента, отличающийся тем, что на моноцитах периферической крови определяют экспрессию Toll-подобных рецепторов, %: TLR2 и TLR4; при одновременном выполнении условий 56,1<TLR2<71,8 и 16,2<TLR4<23,7 определяют предрасположенность пациента к развитию экссудативного среднего отита.



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и предназначено для прогнозирования неблагоприятного течения увеальной меланомы. Определяют наличие экссудата и уровень абсолютного количества и относительного содержания Т-цитотоксических лимфоцитов с фенотипом CD3+ CD8+ от общего количества лимфоцитов в периферической крови.
Изобретение относится к области медицины, психиатрии, психологии и может быть использовано для выбора тактики лечения психического расстройства. Осуществляют иммунологическое, патопсихологическое и нейрофизиологическое исследования.
Изобретение относится к области биотехнологии и ветеринарной вирусологии и представляет собой способ диагностики цирковируса свиней, включающий посев культуры клеток РК-15, инфицирование ее биологическим материалом, фиксацию клеток РК-15, инкубирование последовательно со специфическими сыворотками и антисвиными меченными пероксидазой хрена иммуноглобулинами и выявление антигена цирковируса свиней по наличию темно-красного окрашивания цитоплазмы клеток, отличающийся тем, что фиксацию клеток РК-15 проводят в течение 30-40 минут в 0,01-0,02 М фосфатно-солевом буфере с рН 7,2-7,4, содержащем 1-4% параформальдегида и 0,2-0,4% нонилфенилполиэтиленгликоля, при температуре 22-24°С, затем обрабатывают последовательно 10-15 минут 0,01-0,02 М фосфатно-солевым буфером с рН 7,2-7,4, содержащим 0,3-0,4 М глицина и 1-2% казеина, затем 10-15 минут 0,3-0,6%-ной перекисью водорода, после чего наносят специфические поликлональные антитела.

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и позволяет прогнозировать прогрессирование ВИЧ-инфекции у больных, получающих антиретровирусную терапию.
Изобретение относится к медицине, а именно к гинекологии. С целью оптимизации диагностики хронического эндометрита у пациенток после прерывания неразвивающейся беременности и с неблагоприятными потерями беременности в анамнезе предлагается исследование менструальной крови на содержание в ней эндометриального белка гликоделина.

Настоящее изобретение относится соединению формулы (I) или его мезомерным формам: где mCat+ или mAn- представляет собой органический или неорганический положительно/отрицательно заряженный противоион, и m представляет собой целое число, составляющее от 0 до 2; р представляет собой целое число, составляющее от 1 до 2; q представляет собой целое число, составляющее от 1 до 5; alk представляет собой углеродную цепочку, содержащую от 1 до 5 атомов углерода; Y представляет собой О или СН2; Z представляет собой ОН; n представляет собой 0 или 1; X представляет собой ОН или О-; Ra1 представляет собой SO3- или дополнительный С6-цикл, сконденсированный с соседним атомом углерода, где дополнительный цикл содержит SO3-; Ra2 представляет собой Н; Rc1 представляет собой С1-С6 алкил; Rc2 представляет собой С1-С6 алкил или группу С1-С6 алкилсульфоновой кислоты.

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложен способ диагностики рака молочной железы и рака яичников.
Изобретение относится к области биотехнологии, молекулярной биологии и медицины. Предложен способ выделения вирусных нуклеиновых кислот из различных фракций экстраклеточных везикул.
Изобретение относится к диагностике, а именно к прогнозированию состояния плода при преждевременном разрыве плодных оболочек с 24 до 33 недель беременности. Способ прогнозирования состояния плода при преждевременном разрыве плодных оболочек с 24 до 33 недель беременности, включающий исследование околоплодных вод у беременных женщин с преждевременным разрывом околоплодных оболочек на недоношенном сроке беременности, заключающийся в том, что на 24-33 неделях беременности дополнительно проводят исследование венозной крови матери, в сыворотке крови и околоплодных водах при их излитии определяют содержание лактоферрина (ЛФ) методом твердофазного иммуноферментного анализа, уровни альфа2-макроглобулина (а2-МГ) и альфа1-антитрипсина (a1-AT) методом количественного иммуноэлектрофореза в пластинах агарозного геля с использованием исследовательских тест-систем, при концентрации в сыворотке крови а2-МГ более 2,8 г/л, a1-AT более 3,4 г/л, в околоплодных водах а2-МГ более 48,4 мг/л, ЛФ более 4,5 мг/л прогнозируют внутриутробную инфекцию у плода, а при концентрации в сыворотке крови а2-МГ менее 2,8 г/л, a1-AT менее 3,4 г/л, в околоплодных водах а2-МГ менее 48,4 мг/л, ЛФ менее 4,5 мг/л прогнозируют отсутствие внутриутробной инфекции у плода.

Изобретение относится к медицине, а именно к ветеринарии, и может быть использовано для диагностики цирковирусной болезни свиней 2 типа. Способ включает исследование биологического материала, где в качестве исследуемого объекта используют органы свиней, нарезанные в криотоме, на наличие антигена ЦВС-2 прямым иммуногистохимическим методом.

Изобретение относится к области медицины, а именно к оториноларингологии, и касается способа определения предрасположенности к развитию экссудативного среднего отита. Для этого проводят исследование периферической крови пациента. Из периферической крови выделяют моноциты. На моноцитах периферической крови определяют экспрессию Toll-подобных рецепторов, : TLR2 и TLR4. При одновременном выполнении условий 56,1<TLR2<71,8 и 16,2<TLR4<23,7 определяют предрасположенность пациента к развитию экссудативного среднего отита. Изобретение позволяет повысить достоверность диагностирования экссудативного среднего отита. 2 пр.

Наверх