Способ моделирования пародонтита в эксперименте
Владельцы патента RU 2699497:
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Северо-Осетинская государственная медицинская академия" Министерства здравоохранения Российской Федерации (RU)
Изобретение относится к области медицины, а именно к экспериментальной медицине и стоматологии, предназначено для использования при изучении механизмов патогенеза острого пародонтита, а также в поиске новых методов терапии. В первые сутки крысам накладывают металлическую лигатуру, которую фиксируют к гребню альвеолярного отростка шелковой нитью, захватывают амелобластический эпителий. Со вторых по седьмые сутки, ежедневно, крыс помещают в клетки площадью 0,008 м2 на шесть часов. Причем с 1 по 7 сутки крысы находятся на высокоуглеводистой диете по Евдокимову без ограничения водного режима. Способ позволяет уменьшить длительность моделирования и получить элементы поражения, сходные по патоморфологическим и клиническим проявлениям с пародонтитом у человека. 9 ил.
Изобретение относится к области медицины, в частности к экспериментальной медицине и стоматологии, и может быть использовано для изучения механизмов патогенеза острого пародонтита, а также в поиске новых методов терапии.
Известен способ экспериментального моделирования острого пародонтита путем введения в десну вокруг шейки верхних и нижних резцов этилового спирта в концентрации 65-75% или кортикостероидного препарата в количестве 0,3-0,4 мл на инъекцию. Способ позволяет получить экспериментальную модель пародонтита с иммуносупрессией (Патент РФ №3433485). Недостатками данного способа является не характерная для человека патоморфологическая картина изменений в пародонте.
Известен способ моделирования острого пародонтита (Патент РФ №2252009, 7А 61K 6/06 A, 7G 09В 23/28 В, Бюл. №14, 20.05.2005).
Под эфирным наркозом создавали стоматологическим цементом искусственную зубную бляшку вокруг шейки верхних и нижних резцов с шероховатой поверхностью. Далее животных помещали в общую клетку площадью 0,018 м2 на особь. В течение всего времени моделирования животные получали кашицеобразную пищу, исключающую самоочищение зубов. Признаки воспаления десны (гингивита) в опытной группе наблюдали на 4-5 день эксперимента. На 20-е сутки наблюдали отечность и цианоз десны, в области резцов наблюдали появление пародонтальных карманов глубиной 1-2 мм, появление подвижности резцов 1-2 степени. Рентгенологически определяли признаки деструкции вершины межзубной перегородки.
Недостатком данного метода является длительность процесса моделирования, элементы поражения не типичны по своим патоморфологическим свойствам для пародонтита у человека.
Наиболее близким по технической сущности является способ получения модели пародонтита, который был выбран как прототип. Способ осуществляется путем наложения шелковой лигатуры в десневую борозду нижних резцов восьмиобразно (Воложин А.И., Виноградова С.И., 1991). Способ позволяет получить экспериментальную модель острого пародонтита на 7 сутки.
Недостатком прототипа является то, что элементы поражения не типичны по своим патоморфологическим свойствам для пародонтита у человека, а также отсутствие воздействия на лабораторных животных общих этиологических факторов. Это снижает достоверность моделируемой патологии.
Цель изобретения - повышение достоверности моделирования пародонтита в эксперименте, сокращение сроков моделирования и получения характерной для человека патоморфологической картины пародонтита.
Поставленная цель достигается тем, что острый пародонтит моделировали путем наложения под тиопенталовым наркозом металлической лигатуры у десневого края нижних резов восьмиобразно, которую фиксировали к гребню альвеолярного отростка шелковой нитью (острая травма пародонта), захватывая амелобластический эпителий с вестибулярной стороны. Со 2-7 сутки эксперимента каждое лабораторное животное ежедневно помещали в клетку площадью 0,008 м2 на 6 ч (иммобилизационный стресс). На всем протяжении моделирования пародонтита животным давали пшеничную кашу (35%) на молоке (30%), с добавление крахмала (20%) и сахара (15%) - высокоуглеводистая диета по А.И. Евдокимову.
Общим признаком заявляемой модели и прототипа является наложение лигатуры на нижние резцы восьмиобразно. Заявляемая модель отличается тем, что в качестве материала используют металлическую проволоку вместо шелковой нити. Получение характерной для человека клинической и патоморфологической картины достигается тем, что в предлагаемой модели пародонтит возникает под воздействием местного фактора - металлическую лигатуру фиксируют к гребню альвеолярного отростка шелковой нитью, нарушая целостность амелобластического эпителия нижних резцов крыс, где он имеет наименьшую толщину, исключая восстановление тканей пародонта его клетками, а также общих факторов - высокоуглеводистая диета и хронический иммобилизационный стресс.
Таким образом, в заявляемом способе получения модели пародонтита используется сочетание общих и местных факторов на фоне изменения реактивности организма, что соответствует современной теории возникновения пародонтита как полиэтиологичного заболевания.
Пример. Эксперимент проведен на 40 белых крысах-самцах линии Wistar массой 150 г. Содержание и уход за животными соответствовали ГОСТ 5025892. Были соблюдены этические принципы проведения Хельсинской декларации Всемирной медицинской ассоциации (1964).
Острый пародонтит моделировали путем наложения под тиопенталовым наркозом в дозе 10 мг/кг металлической лигатуры у десневого края нижних резов восьмиобразно, которую фиксировали к гребню альвеолярного отростка шелковой нитью. Со 2-7 сутки эксперимента каждое лабораторное животное ежедневно помещали в клетку площадью 0,008 м2 на 6 ч. На всем протяжении моделирования острого пародонтита животные находились на высокоуглеводистой диете по А.И. Евдокимову без ограничения водного режима. На 4 день эксперимента у животных наблюдались клинические признаки воспаления десны: отечность, кровоточивость, наличие обильного мягкого зубного налета. На 7 сутки определялись пародонтальные карманы глубиной 2 мм, появление подвижности 1 и 2 степени.
Материал для морфологического исследования - участок десны - брали на 7 сутки. Также на 1 и 7 сутки определяли микроциркуляторные показатели с помощью ультразвуковой допплерографии.
Статистическую обработку результатов производили методом вариационной статистики с использованием компьютерной программы статистического анализа Microsoft Excel (уровень значимости ≤0,05).
Сущность способа экспериментального моделирования пародонтита поясняется фотографиями процесса моделирования (Фиг. 1-4); патоморфологического исследования (Фиг. 7-9) и графиками статически обработанных данных доплерографии на 1,7 сутки моделирования (Фиг. 5-6).
Использование предлагаемого способа моделирования пародонтита в эксперименте позволит сократить длительность моделирования до 7 суток и получить элементы поражения, сходные по патоморфологическим и клиническим проявлениям с острым пародонтитом у человека.
Способ моделирования острого пародонтита в эксперименте, включающий наложение лигатуры на нижние резцы крыс, отличающийся тем, что в первые сутки крысам накладывают металлическую лигатуру, которую фиксируют к гребню альвеолярного отростка шелковой нитью, захватывают амелобластический эпителий, со вторых по седьмые сутки, ежедневно, крыс помещают в клетки площадью 0,008 м2 на шесть часов, причем с 1 по 7 сутки крысы находятся на высокоуглеводистой диете по Евдокимову без ограничения водного режима.
