Способ получения 3'

 

ОП И САНЯ Е

ИЗОБРЕТЕНИЯ

274IIO

Союз Соеетских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства М

Кл. 12о, 26 01

Заявлено 26.V1.1969 (¹ 1343934/23-4) с присоединением заявки ¹

Приоритет

Опубликовано 24. т 1.1970. Бюллетень ¹ 21

Дата опубликования описания 13.XI.1970

МПК С 07f S/08

Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Мииистрое

СССР .

УДК 547.857,7 26.118 (088.8) Авторы изобретения

Б. П. Готтих, А. А. Краевский, П. П. Пурыгин и M. В. Дряпина

Институт молекулярной биологии АН СССР

Заявитель

СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ 3 (2 )-О-АМИНОКИСЛОТНЫХ ЭФИРОВ, ПРОИЗВОДНЫХ АДЕНОЗИНА ИЛИ АДЕНОЗИН-5 -ФОСФАТА о д

à —; о 0 гч. I,с!!со,- н—

Изобретение относится к области получения соединений, которые могут найти применение в 1(ачестве биологически акгивны; вегцеств.

11редлогкеииый способ получения 3 (2 )-ами1IoKI1c toTIII>I (Эфиров, произ!30диь1х яде:10зииа и,ш а 7e;roe!I!I-5-фосфата, обц,ei формулы где Х вЂ” Н, алкил, I;O„P, алкил НО (0) РО; R— алкил или арил; А — остаток аденииа, oclloван ня том, что аминокислоту, например феиилалаиин, подвергают взаимодействию с производны м аденозииа в среде органического растворителя, например формамида, в присутствии хлористого водорода и карбоиилдиимидазоля с последую цпм выдс леш!ем целевого продукта известными приемами.

Пример 1. Получение 3 (2 ) -0-1 -фенила;,анил-5 -тритиладеиозина и 3 (2 ) -0-1 -фснилал а пил-адеиозии а.

К раствору 16,5 лг (0,1 .11лголь) 1-феш!лаланина в 0,15,11. диметилфорх!!!мида прибавляют

0,02,11л (0,1 .11.110>гг>) 5 и. хлористого водорода в сухом эфире, 1ерез 10 11ин вносят 17,8 лгг (0.11 !к!голь) карбонилдшгмидазола, встряхивают 5 — 10 111гн и к реакционной массе прили13«10т раствор 00.9 .11г (О, 1 .11.1!0 Nb) 5 -трити I5 «дсиозиия в 0.4 .и.г абс. диметилформа мида.

Рсакциоипуlo смесь перемешивают ири комнатной температуре 2 !Qc, разбавляют 4 .ил о. лахкдсииый до 0 воды, смесь оставляют иа

15 1гин ири 0, осадок отделягот центрифугито роваиием п сушат в вакууме иад пятиокисью фосфора. Сухое вещество растворяют в 2 лл хлорОфо13 ма, наносят II« к070!1к> (38 1 с 11) с полиамидом п вещестго элюируют смесью хлороформ — гсксаи 7: 3 по объему (пример)5 110 30 л>г). Ряствэритель упаривают, и остаток сушат в эксикаторс. Выход 58.1 лг (70,бсгго).

Т. пл. 147 — 150 С. УФ-спектр: i. 259 11.11, е. 294 10 .

1-1 а йдс.но,, > . С 70,60; Н 6,88.

20 С;ЗiН;„х 0;C,;111.

Бычислсно, " EE; С 71,24; Н 6,53.

Б реакциошгую смесь аналогичной по вели !»ie загрузки после 4 — 6 час перемсшивания при 0= 1113è,71113«þò 1 игл 1 и. хлористого водород« в зфирс. перемешивг11от 5 111гн Ilp;1 0, оставлягот ЕЕ« 25 — 30 ягггн в вакууме и наносят на шесть листов легшпградскои быстрой бумаги для хр031«тогряфии. Проводя электрофорез в

3(3 б jg !10!1 1 I(C E спой 1(IIC 701С (p>1 2,5), 13ещество, 3 поглощающее в УФ-свете (Ef глицпп 1,64, Ef гистидин 1,1), элюируют 20 лл воды и эл1оат лиофилизуют.

Выход 29,2 лг (70,6 /о). Т. пл. 315 C. УФспектр:,„„к, 259 л,и, Хроматография па бумаге: система и. бутапол — вода — уксусная кислота (М 1) Rf 0,53; пзомасляпая кислота— насыщенный раствор аммония в воде (¹ 2)

10: 6 (рН 3,6), Rf 0,89; этапол — 1 М раствор уксуснокислого аммония в воде 70: 30, рН 7,5 (¹ 3), Rf 0,72. Соотношение аминокислота/нуклеозид 1: 1,19.

Лналогично синтезируют с D-фенилаланином, 1 - и D-валином, 1 -лейцпном, 1 -алаппном и др.

Пример 2. Получение 3 (2 ) -О-L-фепилаланил-аденозпн-5 -фосфата.

К. раствору 16,5 лиг (0,1 льиоль) 1-фенилаланина в 0,15 ил формампда прибавляют

0,02 ил (0,1 и.моль) 5 и. хлористого водорода в сухом эфире, через 10 иик вносят 17,8 иг (0,11 л1лоль) карбонилдпимидазола, ьстряхивают 5 — 10 лик и к реакционной массе приливают раствор 39 иг (0,1 лиоль) динатрпевой соли аденозпн-5-монофосфата в 0,35 ил абс. диметилсульфоксида. Реакционную смесь перемешивают 6 — 8 час при комнатной температуре, приливают 15 лл охлажденного до 0 ацетона, осадок отделяют центрифугированием и

3 раза промывают охлажденным ацетоном, затем эфиром. Высушенный в те-:ение часа в вакуум-экснкаторе остаток растворяют в 0,1 лл воды, наносят на лист бумаги размером

38к,19 ся и проводят электрофорез в 6Я>-пой уксусной кислоте (800 в, плотность тока

22 в/си). Полосу, поглоща1ощую в УФ-свете и двигающуюся к аноду (Н глпцип 0,7 — 0,8), элюируют 30 — 40 иг воды при 4 С, и раствор лиофилизуют. Выход 1 г 12 лг, плн 498 OL при 259 ми (21 ). УФ-спектр: i. 259 л.и (е 10800). Хроматография на бумаге в системе 1 Rf 0,38. Соотношение ампнокнслота/нуклеотид 1: 0,97.

При проведении аналогичной реакции в воде вместо диметилсульфоксида выход составил

12 — 15 /о.

Подобным способом проведен синтез с валином, аланином, лейцином, глицпном.

Пример 3. Получение 3 (2 ) -0-1 -фепнлаланил-адепизин-5 -мcòèëôосфата.

К раствору 16,5 иг (0,1 и.иоль) 1-феннлалапипа в 0,15 ил формампда прибавляют 0,02 ил

5 (0,1 и.иола) 5 и. хлористого водорода в сухом эфире, через 10 . ин вносят 17,8 иг (0,11 л,иоль) карбонилдппмидзола, встряхиваюч 5 — 10 лан и к реакционной массе приливают раствор 38,3 иг (0,1 илоль) патрпевой

10 соли аденозип-5-метплфосфата в 0,35 ил абс. диметилсульфокспда. Реакционную смесь перемешивают 6 — 8 час при комнатной температуре, приливают 15 ил охлажденного до 0 ацетона, осадок отделяют центрифугировапием

15 и 3 раза промывают охлажденным ацетоном, затем эфиром. Высушенньш в течение часа в вакуум-экспкаторе остаток растворяют в 0,1,ия воды, наносят на лист бумаги размером

38 ;19 с.и и проводят электрофорез, как в при20 мере 2. Полосу, поглощающую в УФ-свете и двигающуюся к аноду (Ef глпцпп 0,7 — 0,8), элюируют 30 — 40,ил воды прп 4 С, и раствор лпофплпзуют. Выход 1 г 12 яг, илп 331 Ol. прп 259 и.и (19 ). УФ-спектр: i.M 259 и.ик

25 (» 11300). Хроматография па бумаге в и.

ВцОН вЂ” -вода-ЛсОН 5: 3: 2 Rf 0,41. Молярная эллиптичность (Ol клешпевидного комплекса меди и основания Шиффа салицилового альдегида и 1 -валина 8800 (отрнцательная кривиз30 па) . 1 -валин, последовательно проведенный через все этапы взаимодействия в синтезе

3 (2 ) -0-1.-валпладенозпн-5 -фосфата, после превращения в аналогичное основание Шиффа показал (И) 8800. Для D-валина были получе35 ны те же самые результаты (0) 8800, но с положительной кривизной, Предмет нзооретення

4р Способ получения 3 (2 )-О-ампнокпслотных эфиров, производных аденозина илп аденозпн5 -фосфата, отличающийся тем, что oìèíoêèñлоту, например фенплаланин, подвергают взаимодействию с производным аденозпна в среде

45 органического растворителя в присутствии хлористого водорода и карбонилднпмидазола с последующим выделением целевого продукта известными приемамп.

Составитель В. Старовит

Редактор Н. Белявская Техред Л. Л. Камьииникова Корректоры: В. В. Чаклииа и Л В Юшина

Заказ 3252/19 Тираж 480 Подписное

ЦНИИПИ Комитета по делам изобрете.шй и открытий при Совете Министров СССР

Москва, Ж-3 a, 1 аушская иаб., д. 4 3

Типография, пр. Сапунова, 2