Способ выделения суммы фурокумаринов из травы болиголова пятнистого (conium maculatum l., сем. apiaceae)

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу выделения суммы фурокумаринов из травы болиголова пятнистого. Способ выделения суммы фурокумаринов из травы болиголова пятнистого (Conium maculatum L., сем. Apiaceae), в котором в качестве сырья используют траву болиголова пятнистого в количестве 100 г, которую высушивают при температуре 25°С в темном защищенном от действия света месте, измельчают, обрабатывают 300 мл н-октана при постоянном встряхивании в течение 2 часов, затем к остатку сырья добавляют 500 мл 70%-го водного раствора ацетона и настаивают в течение 4 часов, фильтруют и к фильтрату добавляют 30 мл 10%-го спиртового раствора натрия гидроксида и перемешивают в течение 15 минут, далее добавляют 100 мл 10%-го водного раствора натрия гидроксида, перемешивают и оставляют в закрытой емкости на 30 минут, затем из полученной вытяжки отделяют водный слой, к которому добавляют 100 мл 10%-го раствора хлористоводородной кислоты и перемешивают в течение 15 минут; сумму фурокумаринов извлекают добавлением 250 мл диэтилового эфира при постоянном перемешивании и высушивают в вытяжном шкафу при комнатной температуре. Вышеописанный способ позволяет выделить футокумарины из болиголова пятнистого с высоким выходом. 1 пр.

 

Способ выделения суммы фурокумаринов из травы болиголова пятнистого (Conium maculatum L., сем. Apiaceae)

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, в частности способу выделения чистых веществ из растительного сырья, и может быть использовано в фармацевтической промышленности при получении препаратов фурокумаринов из травы болиголова пятнистого.

Фурокумарины - класс соединений преимущественно природного происхождения, оказывают фотосенсибилизирующее, сосудорасширяющее, противоопухолевое, бактериостатическое и антигрибковое действие и др. [1]. В составе болиголова встречаются следующие фурокумарины: бергаптен, ксантотоксин и изопимпинеллин [2].

Известен способ получения сухого экстракта аммии зубной (патент №2171686, RU), включающий экстракцию водным этанолом из плодов аммии зубной. Экстракт после промывки сырья на первой стадии экстракции используют как экстрагент первого слива на второй стадии. Затем экстракты двух стадий объединяют, концентрируют и сушат. При этом соотношение массы исходного сырья и объема чистого экстрагента на стадиях операции экстракции составляет 1:2,4-1:2,6. Способ позволяет повысить содержание суммы хромонов в сухом экстракте.

Аммия зубная как и болиголов пятнистый относится к семейству Зонтичных (лат. Apiaceae) и является продуцентов фурокумаринов. Недостатком данного способа является получение в конечном итоге экстракта из аммии с повышенным содержанием хромонов. Так же данный способ не дает возможности получить очищенную сумму фурокумаринов.

Известен способ получения псоберана (патент №419221, SU) путем экстракции измельченного растительного сырья (листья инжира - Ficus carica) органическим растворителем, упаривания, элюирования бензолом после пропускания через колонку с адсорбентом, и очистки с последующей кристаллизацией целевого продукта.

Псоберан является смесью фурокумаринов - псоралена и бергаптена, который получают из листьев среднеазиатских сортов плодового растения инжира (Ficus carica L.). Недостатками данного способа являются использование зарубежного источника сырья (листья инжира) для получения фурокумаринов и длительного времени экстракции, что ведет к повышению стоимости конечного продукта. Кроме того, недостатком способа является использование высокотоксичных реагентов.

Известен способ получения препарата аммифурин, состоящего из смеси фурокумаринов. Аммифурин получают путем экстракции плодов аммии большой этанолом в соотношении 1:6 (при температуре 50-60°С), упаривания, осаждения водой суммы фурокумаринов, обработки водным раствором едкого натра в соотношении 1:2 с последующей экстракцией балластных веществ хлорсодержащим растворителем и подкислением фосфорной кислотой, выделившийся осадок аммифурина отфильтровывают и сушат в вакууме при 60-70°С в течение 2-3 ч., кроме этого часть фурокумаринов переходит в маточный раствор, из которого данные вещества выделяют выдерживанием раствора в течение суток при 4-6°С. Затем полученные осадки соединяют. Подобный способ позволяет выделить 58,3% от содержания суммы фурокумаринов в сырье (авторское свидетельство №1176477, СССР).

Недостатками являются трудоемкость способа, длительное время экстракции, применение температурных режимов, а именно - нагрев до 60-70°С и охлаждение до 4-6°С, а также неполное выделение фурокумаринов из источника сырья. Данный способ разработан для выделения аммифурина (суммы фурокумаринов) из семян аммии большой, в то время как предлагаемый способ направлен на выделения суммы фурокумаринов из травы болиголова пятнистого и возможен для применения с целью выделения суммы фурокумаринов из других растительных источников, содержащих данную группу биологически активных веществ.

В проанализированной патентной и научно-медицинской литературе адекватного прототипа не обнаружено.

Болиголов пятнистый (Conium maculatum L.) - растение, ядовитые свойства которого определяют алкалоиды. Содержит также жирное масло, в состав которого входят глицериды петрозелиновой и петрозелидиновой кислот, фурокумарины, флавоноиды и др. В народной медицине болиголов применяется как успокоительное, противовоспалительное и болеутоляющее средство при болезненных состояниях, сопровождающихся судорогами или спазмом внутренних органов - хорее, эпилепсии, коклюше, мигрени [3].

Задачей настоящего изобретения является разработка способа выделения суммы фурокумаринов из болиголова пятнистого, обеспечивающего максимально высокий выход готового продукта.

Поставленная задача решается путем, включающим высушивание сырья, экстракцию фурокумаринов из сырья с обработкой растворами натрия гидроксида с последующей извлечением диэтиловым эфиром, и высушиванием отличающийся тем, что в качестве сырья используется трава (100 г) болиголова пятнистого, которую высушивают при температуре 25°С в темном защищенном от действия света месте, измельчают, обрабатывают н-октаном при постоянном встряхивании в течение 2 часов, экстрагируют 70%-м водным раствором ацетона и поэтапно обрабатывают 30 мл 10%-ого спиртового раствора натрия гидроксида, 100 мл 10%-ого водного раствором натрия гидроксида, 100 мл 10%-го раствора кислоты хлористоводородной с последующей извлечением диэтиловым эфиром и высушиванием вытяжном шкафу при комнатной температуре.

Новым в предлагаемом изобретении является то, что в качестве сырья используется трава (100 г) болиголова пятнистого, которую высушивают при температуре 25°С в темном защищенном от действия света месте, измельчают, обрабатывают н-октаном при постоянном встряхивании в течение 2 часов, экстрагируют 70%-м водным раствором ацетона и поэтапно обрабатывают 30 мл 10%-го спиртового раствора натрия гидроксида, 100 мл 10%-го водного раствором натрия гидроксида, 100 мл 10%-го раствора кислоты хлористоводородной с последующей извлечением диэтиловым эфиром и высушиванием вытяжном шкафу при комнатной температуре.

Новые признаки проявили в заявляемой совокупности новые свойства явным образом не вытекающие из уровня техники в данной области и неочевидные для специалиста. Идентичной совокупности признаков не обнаружено в патентной и научно-медицинской литературе.

Предлагаемый в качестве изобретения способ может быть использован для получения суммы фурокумаринов из травы болиголова пятнистого, а также других растительных источников, содержащих данную группу биологически активных веществ.

Исходя из вышеизложенного, следует считать предлагаемое изобретение соответствующим условиям патентноспособности «Новизна», «Изобретательский уровень», «Промышленная применимость».

Изобретение будет понятно из следующего описания. Способ выделения суммы фурокумаринов из болиголова пятнистого (Conium maculatum L.), включает высушивание сырья, экстракцию фурокумаринов из сырья с обработкой растворами натрия гидроксида с последующим извлечением диэтиловым эфиром, и высушиванием, отличающийся тем, что в качестве сырья используется трава (100 г) болиголова пятнистого, которую высушивают при температуре 25°С в темном защищенном от действия света месте, измельчают, обрабатывают н-октаном при постоянном встряхивании в течение 2 часов, экстрагируют 70%-м водным раствором ацетона и поэтапно обрабатывают 30 мл 10%-го спиртового раствора натрия гидроксида, 100 мл 10%-го водного раствором натрия гидроксида, 100 мл 10%-ого раствора кислоты хлористоводородной с последующей извлечением диэтиловым эфиром и высушиванием вытяжном шкафу при комнатной температуре.

Способ осуществляется следующим образом. Траву болиголова пятнистого высушивают на открытом воздухе при температуре 25°С в темном защищенном от действия света месте. Измельчают 100 г в фарфоровой ступке до однородного состояния, полученную массу обрабатывают н-октаном при постоянном встряхивании, в течение 2 часов, сливают надосадочную жидкость и настаивают с 70%-м водным раствором ацетона. Затем извлечение фильтруют и к фильтрату последовательно приливают 30 мл 10%-го спиртового раствора натрия гидроксида, тщательно перемешивают, добавляют 100 мл 10%-го водного раствора натрия гидроксида. Далее отделяют водный слой, к которому добавляют 100 мл 10%-го раствора кислоты хлористоводородной. Затем сумму фурокумаринов извлекают добавлением 250 мл диэтилового эфира. Эфирный слой отделяют и высушивают в вытяжном шкафу при комнатной температуре.

Пример

100 г высушенного и измельченного сырья травы болиголова обрабатывали 300 мл н-октана при постоянном встряхивании в течение 2-х часов. Затем надосадочную жидкость сливали и к остатку сырья добавляли 500 мл 70%-го водного раствора ацетона и настаивали в течение 4 часов. Далее полученную водно-ацетоновую вытяжку фильтровали через бумажный фильтр и к фильтрату добавляли 30 мл 10%-го спиртового раствора натрия гидроксида, перемешивали в течение 15 минут и затем добавляли 100 мл 10% водного раствора натрия гидроксида, перемешивали и оставляли в закрытой емкости на 30 минут. Затем из полученной вытяжки с помощью делительной воронки отделяли водный слой, к которому добавляли 100 мл 10%-го водного раствора кислоты хлористоводородной, перемешивали в течение 15 минут. Извлечение суммы фурокумаринов осуществляли добавлением 250 мл диэтилового эфира при постоянном перемешивании. Эфирный слой отделяли с помощью делительной воронки и высушивали в вытяжном шкафу при комнатной температуре. Полученная сумма фурокумаринов представляла собой кристаллический порошок светло-бежевого цвета, без запаха. Выход суммы фурокумаринов составлял 0,2 г (0,2%). Разделение фурокумаринов проводили методом тонкослойной хроматографии (ТСХ) на пластинах «Сорбифилл» (ЗАО Сорбполимер, г. Краснодар). В качестве образцов сравнения использовали стандартные вещества фурокумаринов: бергаптен, ксантоксин, изопимпинеллин, а также модельную смесь на их основе (1:1:1). Идентификацию проводили по результатам хроматографической подвижности и цветовым оттенкам флуоресценции выделенных веществ до и после обработки реактивами (10% раствор NH4OH; Br2), сравнивая с модельной смесью и стандартными образцами фурокумаринов. По данным ТСХ величина Rf и цветовые оттенки флуоресценции выделенных веществ до и после обработки реактивами полностью совпадали с величиной Rf и цветовыми оттенками флуоресценции веществ модельной смеси и стандартными образцами фурокумаринов: для изопимпинелина - 0,42, бергаптена - 0,55, ксантотоксина - 0,85.

Количественный анализ суммы фурокумаринов проводили методом высокоэффективной жидкостной хроматографии на приборе системы Альянс («Waters») с детектором с фото диодной матрицей на колонке Aliance С18 (4,6×150), 5 mkm в режиме элюирования: 0,1%-я ортофосфорная кислота / ацетонитрил (78:22).

Список литературы

1. Ложкин А.В., Саканян Е.И. Природные кумарины: методы выделения и анализа / Химико-фармацевтический журнал, 2006. - Том 40., №6. - стр. 47-56 (стр. 48).

2. Meier P., Hotti Н., Rischer Н. Elicitation of furanocoumarins in poison hemlock (Conium maculatum L.) cell culture / Plant Cell Tiss Organ Cult (PCTOC), 2015. - 123., №3. - P. 443-453 (стр. 444).

3. Мазнев H.И. Энциклопедия лекарственных растений. - 3-е изд., испр. и доп.- М: Мартин, 2004. - С. 496 (стр. 102-103).

Способ выделения суммы фурокумаринов из травы болиголова пятнистого (Conium maculatum L., сем. Apiaceae), характеризующийся тем, что в качестве сырья используют траву болиголова пятнистого в количестве 100 г, которую высушивают при температуре 25°С в темном защищенном от действия света месте, измельчают, обрабатывают 300 мл н-октана при постоянном встряхивании в течение 2 часов, затем к остатку сырья добавляют 500 мл 70%-го водного раствора ацетона и настаивают в течение 4 часов, фильтруют и к фильтрату добавляют 30 мл 10%-ого спиртового раствора натрия гидроксида и перемешивают в течение 15 минут, далее добавляют 100 мл 10%-го водного раствора натрия гидроксида, перемешивают и оставляют в закрытой емкости на 30 минут, затем из полученной вытяжки отделяют водный слой, к которому добавляют 100 мл 10%-го раствора хлористоводородной кислоты и перемешивают в течение 15 минут; сумму фурокумаринов извлекают добавлением 250 мл диэтилового эфира при постоянном перемешивании и высушивают в вытяжном шкафу при комнатной температуре.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства, обладающего стресспротективной, антигипоксической и анксиолитической активностью.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения концентрата биологически активных веществ из пантов. Способ получения концентрата биологически активных веществ из пантов, согласно которому: производят отделение с пантов кожного и волосяного покрова и измельчают полученное сырье до размера 1-4 мм; проводят экстракцию сырья 70%-ным этиловым спиртом, подкисленным уксусной кислотой до рН 4,7-5,5, при соотношении между сырьем и этиловым спиртом 1÷4, при нагреве до температуры 52-62°С в течение 5-6 часов; после первой экстракции производят повторную экстракцию 35%-ным этиловым спиртом, подкисленным уксусной кислотой до рН 4,7-5,5, при соотношении между сырьем и этиловым спиртом 1÷3, при нагреве до температуры 78-80°С в течение 5-6 часов; после каждой экстракции полученную жидкость сливают и охлаждают; полученный после экстракции жмых промывают от остатков спирта, подвергают ферментации в водном растворе с папаином 0,1-0,2% к весу измельченного сырья, при соотношении между жмыхом и водным раствором 1÷5, при температуре 36-37°С в течение 7-8 часов; производят инактивирование ферментов в смеси при температуре 80-82°С в течение 1 часа и охлаждают смесь до температуры 37-39°С; отделяют от смеси жидкий гидролизат путем фильтрования и сепарирования; полученные экстракт и гидролизат смешивают, выпаривают и подвергают лиофильной сушке и затем полученный концентрат размалывают.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно способу получения коллагенового материала. Способ получения коллагенового материала включает перекисно-щелочную обработку шкур пресноводных рыб, выбранных из толстолобика, карпа, белого амура, сазана, для чего шкуры заливают смесью пероксида водорода и гидроксида натрия, выдерживают, затем обработанные таким образом шкуры промывают в проточной воде, промытые шкуры заливают раствором уксусной кислоты и выдерживают, полученную массу гомогенизируют и отправляют на сушку, которую проводят в вакуум-сублимационной машине, высушенные листы нарезаются на пластинки и герметично упаковываются при определенных условиях.

Изобретение относится к колонным массообменным аппаратам непрерывного действия и может быть использовано для экстрагирования (выщелачивания) в системе твердое тело - жидкость в пищевой, химической, фармацевтической и других отраслях промышленности.
Изобретение относится к фармацевтической, парфюмерно-косметической и пищевой промышленности, а именно к композиции на основе водной фракции углекислотного экстракта хвойной зелени.

Настоящее изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу выделения эуглобалей ряда ацилфлороглюцинол-монотерпенов из листьев эвкалипта прутовидного.

Изобретение относится к пищевой и фармацевтической промышленности, а именно к способу получения плодово-ягодного экстракта, обладающего антиоксидантной активностью.

Изобретение относится к устройствам, которые используют при сепарации, например, при выделении растворителя из гранулированного материала, пропитанного этим растворителем.

Изобретение относится к устройствам, которые используют при сепарации, например, при выделении растворителя из гранулированного материала, пропитанного этим растворителем.

Изобретение относиться к фармацевтической промышленности, а именно к способу производства биогенных препаратов. Способ производства биогенного препарата включает использование сырья из субпродуктов и боенских отходов, выдержку сырья в условиях холодильника, измельчение сырья, разведение его активным раствором гипохлорита натрия в при последующей экстракции сырья в условиях холодильника, при этом экстракцию проводят в условиях холодильника при последующем разведении экстракта гипохлоритом натрия и обработкой полученного экстракта ультразвуком, далее осуществляют фильтрацию полученного экстракта, фасовку и стерилизацию в автоклаве при определенных условиях.
Группа изобретений относится к области медицины и предназначено для профилактики и лечения грибковых и других инфекционно-воспалительных заболеваний кожи. Противогрибковое и антимикробное средство комплексного действия содержит тербинафина гидрохлорид, бензалкония хлорид, спирт, масло мятное и воду очищенную.
Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к сбору, обладающему антидиабетическим действием. Сбор, обладающий антидиабетическим действием, содержит листья стевии и семена льна в определенном количестве, где в качестве стевии используют листья сорта Рамонская сластена, выращенного в Крыму, в качестве льна используют семена сорта Северный.
Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано для профилактики и лечения воспалительных заболеваний пародонта и слизистой оболочки полости рта.
Группа изобретений относится к препарату рокурония. Инъекционный препарат рокурония в жидкой форме содержит рокуроний и буферный раствор и имеет pH 3,5 или менее, где буферный раствор содержится в концентрации от 0,015 до 0,5 M и представляет собой буферный раствор на основе глицина и соляной кислоты.
Изобретение относится к области нанотехнологии, в частности к способу получения нанокапсул, и описывает способ получения нанокапсул сухого экстракта босвеллии в оболочке из каппа-каррагинана.
Изобретение относится к области нанотехнологии, медицины и пищевой промышленности. Для получения нанокапсул сухой экстракт алоэ добавляют в суспензию каппа-каррагинана в циклогексане в присутствии 0,01 г сложного эфира глицерина с одной-двумя молекулами пищевых жирных кислот и одной-двумя молекулами лимонной кислоты в качестве поверхностно-активного вещества при перемешивании 800 об/мин, приливают 7 мл хладона-112.

Группа изобретений относится к косметологии и раскрывает безводную композицию в аэрозольной форме. Композиция содержит масляную фазу, содержащую в физиологически приемлемой среде, летучее масло, одно или несколько антиперспирантных действующих средств, выбранных из солей алюминия и/или циркония, и один или несколько водонерастворимых пленкообразующих этиленовых блок-сополимеров, выбранных из полимера поли(изоборнилакрилат/изоборнилметакрилат/изобутилакрилат/акриловая кислота), газ-вытеснитель; при этом указанная масляная фаза содержит менее 15% по весу и еще более предпочтительно менее 12% по весу нелетучего полидиметилсилоксана относительно общего веса масел.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения средства, обладающего стресспротективной, антигипоксической и анксиолитической активностью.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу получения концентрата биологически активных веществ из пантов. Способ получения концентрата биологически активных веществ из пантов, согласно которому: производят отделение с пантов кожного и волосяного покрова и измельчают полученное сырье до размера 1-4 мм; проводят экстракцию сырья 70%-ным этиловым спиртом, подкисленным уксусной кислотой до рН 4,7-5,5, при соотношении между сырьем и этиловым спиртом 1÷4, при нагреве до температуры 52-62°С в течение 5-6 часов; после первой экстракции производят повторную экстракцию 35%-ным этиловым спиртом, подкисленным уксусной кислотой до рН 4,7-5,5, при соотношении между сырьем и этиловым спиртом 1÷3, при нагреве до температуры 78-80°С в течение 5-6 часов; после каждой экстракции полученную жидкость сливают и охлаждают; полученный после экстракции жмых промывают от остатков спирта, подвергают ферментации в водном растворе с папаином 0,1-0,2% к весу измельченного сырья, при соотношении между жмыхом и водным раствором 1÷5, при температуре 36-37°С в течение 7-8 часов; производят инактивирование ферментов в смеси при температуре 80-82°С в течение 1 часа и охлаждают смесь до температуры 37-39°С; отделяют от смеси жидкий гидролизат путем фильтрования и сепарирования; полученные экстракт и гидролизат смешивают, выпаривают и подвергают лиофильной сушке и затем полученный концентрат размалывают.

Изобретение относится к медицине, а именно к терапевтической стоматологии, и может быть использовано для лечения воспалительных заболеваний пародонта. Для этого в патологические карманы и по десневому краю вводят детский фитогель для зубов и десен Кармолис.

Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для лечения пароксизмальной формы фибрилляции предсердий у пациентов с хронической сердечной недостаточностью при артериальной гипертонии.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к способу выделения суммы фурокумаринов из травы болиголова пятнистого. Способ выделения суммы фурокумаринов из травы болиголова пятнистого, в котором в качестве сырья используют траву болиголова пятнистого в количестве 100 г, которую высушивают при температуре 25°С в темном защищенном от действия света месте, измельчают, обрабатывают 300 мл н-октана при постоянном встряхивании в течение 2 часов, затем к остатку сырья добавляют 500 мл 70-го водного раствора ацетона и настаивают в течение 4 часов, фильтруют и к фильтрату добавляют 30 мл 10-го спиртового раствора натрия гидроксида и перемешивают в течение 15 минут, далее добавляют 100 мл 10-го водного раствора натрия гидроксида, перемешивают и оставляют в закрытой емкости на 30 минут, затем из полученной вытяжки отделяют водный слой, к которому добавляют 100 мл 10-го раствора хлористоводородной кислоты и перемешивают в течение 15 минут; сумму фурокумаринов извлекают добавлением 250 мл диэтилового эфира при постоянном перемешивании и высушивают в вытяжном шкафу при комнатной температуре. Вышеописанный способ позволяет выделить футокумарины из болиголова пятнистого с высоким выходом. 1 пр.

Наверх