Способ отбора противовоспалительных средств с использованием рассчитанных энергий взаимодействия с ферментами циклооксигеназ 1 и 2

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для отбора противовоспалительных средств, что позволяет осуществлять поиск биологически активных веществ с противовоспалительным действием в рядах производных антраниловой кислоты: N-замещенные антраниловые кислоты (1 ряд); гидразиды и амиды N-ацилантраниловых кислот (2 ряд); ариламиды N-ацил-М-алкенилантраниловых кислот (3 ряд). При этом рассчитывают энергии взаимодействия по ферментам ЦОГ 1 и 2: энергия связывания Be (ВеЦОГ1 и ВеЦОГ2) и межмолекулярная энергия Ime (ImeЦОГ1 и ImeЦОГ2), затем с помощью двух- и четырехпараметровых уравнений прогнозируют противовоспалительное действие (ПВДрассч) и отбирают соединения, у которых теоретически рассчитанное ПВД превышает 30%, выбранные соединения синтезируют и подтверждают расчетные данные экспериментально на лабораторных животных (ПВДэксп). Изобретение обеспечивает экспериментальные скрининговые исследования на животных не на всем объеме синтезированных веществ, а только тех, торможение отека которых превосходит 30%. 7 табл.

 

Изобретение относится к биологии и медицине и касается способа поиска новых противовоспалительных средств.

Известен способ отбора противовоспалительных средств из химических соединений, содержащих общий фармакофорный фрагмент: карбонил - фенильный радикал - вторичная или третичная аминогруппа, в котором все вещества разделены на четыре ряда: NH-замещенные антраниловые кислоты, ариламиды и гидразиды NH-алкенилантраниловых кислот, ариламиды N-ацетил-N-алкенилантраниловых кислот и аллиламиды NH-ацилантраниловых кислот [1]. Данный способ взят за прототип. Этот способ позволяет количественно определить уровень противовоспалительной активности на модели «каррагенинового отека» лапы крыс с помощью уравнений многопараметровой регрессии (четырех- и пятипараметровых).

Патентуемый способ заключается в прогнозе количественной оценки уровня экспериментального противовоспалительного действия ПВД (ПВДэксп.) с помощью многопараметровых (двух- и четырехпараметровых) уравнений зависимости ПВДэксп. от рассчитанных скоринговых функций - энергий взаимодействия с ферментами циклооксигеназ (ЦОГ) 1 и 2. Для достижения результата необходимо выполнить следующие действия:

I. Разбить 64 соединения из ряда производных антраниловой кислоты на гомологические ряды.

II. Для данных соединений экспериментально определить ПВД (ПВДэксп.) на модели «каррагенинового отека» на крысах.

III. Рассчитать энергии взаимодействия по ферментам ЦОГ 1 и 2 для каждого соединения.

IV. Составить уравнения регрессии, по которым определить теоретически рассчитанную величину противовоспалительного действия (ПВДрассч.).

V. Используя полученные уравнения регрессии (табл. 7), по структурной формуле выбрать соединения, торможение отека которых превышает 30%.

VI. Оценить качество прогноза ПВДрассч. с ПВДэксп..

Предлагаемая в способе последовательность действий над структурными формулами химических соединений, лабораторными животными и расчетными уравнениями позволяет получить технический результат - способ количественной прогнозной оценки уровня ПВД, который заключается в уменьшении затрат на синтез и сокращении числа химических соединений для испытания на биологическую активность.

Патентуемый способ предусматривает изучение связи данных ПВДэксп. с рассчитанными параметрами: энергия связывания Be (ВеЦОГ1 и ВеЦОГ2) и межмолекулярная энергия Ime (ImeЦОГ1 и ImeЦОГ2) по ферментам ЦОГ 1 и 2. Расчет параметров проводили методом молекулярной стыковки (докинга) с помощью программы AutoDock 4, которая использует в качестве мишеней кристаллографические копии ферментов, полученные рентгеноструктурным анализом и представленные в виде pdb-файлов, взятых из базы данных Brookhaven Protein Data Bank: ЦОГ 1 (PDB ID code: 3N8X [2]) и ЦОГ 2: (PDB ID code: 1PXX [3]).

Все исследуемые 64 соединения обладают различным уровнем противовоспалительного действия экспериментального (ПВДэксп.) (среди которых встречаются и запатентованные), разделены на три ряда:

1) N-замещенные антраниловые кислоты (табл. 1 и 2);

2) гидразиды и амиды N-ацилантраниловых кислот (табл. 3 и 4);

3) ариламиды N-ацил-N-алкенилантраниловых кислот (табл. 5 и 6).

Исследование противовоспалительного действия ПВДэксп. выполнено на беспородных белых крысах массой 180-220 г на модели «каррагенинового отека» лапы. Исследуемые соединения в дозе 50 мг/кг вводили внутрибрюшинно в виде взвеси в 2% крахмальной слизи за 1 ч до введения каррагенина. Величину воспалительной реакции оценивали онкометрически по изменению объема воспаленной конечности через 4 ч после введения 0,1 мл 1% водного раствора каррагенина [4].

Проведен расчет энергий взаимодействия по ферментам ЦОГ 1 и 2 (ВеЦОГ1, ВеЦОГ2, ImeЦОГ1 и ImeЦОГ2) для каждого соединения.

На основе полученных данных составляют уравнения многопараметровой регрессии для соединений по каждому ряду и выбирают наиболее значимое уравнение (табл. 7).

N-Замещенные антраниловые кислоты

В таблице 1 для 22 соединений из ряда N-замещенных антраниловых кислот приведены ПВДэксп. и рассчитанные энергии взаимодействия по ферментам ЦОГ 1 и 2.

Х=Н, Y=Н, R=СН2СН=СН2, R1=Н (1); Х=Н, Y=Н, R=Н, R1=COCONHCH2CH=CH2 (2); Х=Н, Y=Н, R=Н, R1=СО (2-Фурил) (3); Х=Н, Y=Н, R=Н, R1=СОС6Н4(2-ОСН3) (4); Х=Н, Y=Н, R=Н, R1=СОСН2С6Н5 (5); Х=Br, Y=Н, R=Н, R1=CO-Ad (6); Х=Br, Y=Br, R=Н, R1=CO-Ad (7); X=H, Y=H, R=H, R1=COCH3 (8); X=H, Y=H, R=CH2CH=CClCH3, R1=СОСН3 (9); X=H, Y=H, R=CH2CH=CClCH3, R1=CO (2-Фурил) (10); X=H, Y=H, R=CH2CH=CClCH3, R1=COC6H5 (11); X=H, Y=H, R=CH2C6H5, R1=H (12); X=Br, Y=H, R=H, R1=COC6H5 (13); X=Br, Y=H, R=H, R1=CO C6H4 (3-NO2) (14); X=Br, Y=H, R=H, R1=COCH2C6H5 (15); X=Br, Y=H, R=H, R1=CO (2-Фурил) (16); X=I, Y=H, R=H, R1=COCH=CHCOOH (17); X=I, Y=H, R=H, R1=CO(n-C3H6Cl) (18); X=I, Y=H, R=H, R1=COC6H4(4-Cl) (19); X=I, Y=H, R=H, R1=COC6H4(4-CH3) (20); X=I, Y=H, R=H, R1=COCH(C6H5)2 (21); X=I, Y=H, R=H, R1=СО(2-Фурил) (22).

Затем методом пошагового включения параметров с использованием программы Statistica 6, было составлено двухпараметровое уравнение 1 (табл. 7). Установлено, что уравнение зависимости экспериментально определенного ПВД от таких параметров как энергия связывания по ферменту ЦОГ 1 (ВеЦОГ1)» и межмолекулярная энергия по ЦОГ 2 (ImeЦОГ2), имеет наибольшие значения коэффициента корреляции (R), критерия Фишера (F) и критерия оценки методом перекрестного контроля исключением по одному (Q2LOO), и минимальное значение среднеквадратичной ошибки (S):

ПВДрассч = -1,315+6,661 × ВеЦОГ1 - 9,129 × ImeЦОГ2

Уравнение 1 апробировано для теоретического расчета ПВД на 5 примерах соединений 23-27 из ряда N-замещенных антраниловых кислот (табл. 2).

Х=Н, Y=Н, R=Н, R1=СО С6Н4 (4-NO2) (23); Х=Н, Y=Н, R=СН2СН=CClCH3, R1=СОСН2С6Н5 (24); Х=Н, Y=Н, R=СН2СН=CClCH3, R1=COC6H4(4-NO2) (25); Х=Br, Y=Н, R=Н, R1=СО С6Н4 (4-Br) (26); Х=I, Y=Н, R=Н, R1=СОС6Н5 (27).

Вначале были проведены расчеты энергий взаимодействия по ферментам ЦОГ 1 и 2: ВеЦОГ1 и ImeЦОГ2, и на их основе было рассчитано ПВДрассч., а затем результаты расчетов были подтверждены экспериментально на лабораторных животных и определена ПВДэксп..

Расчет прогнозируемого ПВД (ПВДрассч.) для 5 соединений показал, что целесообразно провести синтез 3 соединений: 24, 25 и 27, интервал ПВДрассч. которых будет лежать от 32,99% до 35,37%. При исследовании на лабораторных животных определено ПВДэксп., которое составляет 46,85%, 41,90% и 37,35%, соответственно.

Для оценки качества прогноза ПВД (ПВДрассч.) составлено линейное уравнение взаимосвязи с экспериментальными значениями ПВД (ПВДэксп.):

ПВДрассч. = 0,28 × ПВДэксп. + 22,49; Rпрогн. = 0,948.

Линейная зависимость уравнения с коэффициентом корреляции (Rпрогн. = 0,948), показывает очень высокую степень связи ПВДрассч. с ПВДэксп..

Таким образом, уравнение 1 можно использовать для прогнозирования ПВД в ряду N-замещенных антраниловых кислот.

Гидразиды и амиды N-ацилантраниловых кислот

В таблице 3 для 24 соединений из ряда гидразидов и амидов N-ацилантраниловых кислот приведены ПВДэксп. и рассчитанные энергии взаимодействия по ферментам ЦОГ 1 и 2.

Х=Н, Y=H, R1-СООС2Н5, R2=NHNHCOCOOC2H5 (1); Х=Н, Y=H, R1=CONHCH2CH=CH2, R2=NHNH2 (2); X=H, Y=H, R1=CONHCH2CH=CH2, R2=NHCH2CH=CH2 (3); X=H, Y=H, R1=COOH, R2=NHCH2CH=CH2 (4); X=H, Y=H, R1=CONHCH2CH=CH2, R2 = NH(CH2)2N(C2H5)2 (5); X=H, Y=H, R1=COOC2H5, R2=NHCH2CH=CH2 (6); X=H, Y=H, R1=CONHCH2CH=CH2, R2=NHCH2C(CH3)3 (7); X=Br, Y=Br, R1=CH3, R2=NHNH2 (8); X=Br, Y=Br, R1=CH3, R2=NHCH3 (9); X=Br, Y=Br, R1=CH3, R2=NHCH2CH2OH (10); X=Br, Y=Br, R1=CH3, R2=NH(CH2)2CH(CH3)2 (11); X=Br, Y=Br, R1=CH3, R2=NHCH2C6H5 (12); X=H, Y=H, R1=Ad, R2=NHCH2CH=CH2 (13); X=Br, Y=H, R1=CH2CH2COOH, R2=NH2 (14); X=Br, Y=H, R1=CH=CHCOOH, R2=NH2 (15); X=Br, Y=H, R1=C2H4Cl, R2=NH2 (16); X=Br, Y=H, R1=C(CH3)=CH2, R2=NH2 (17); X=Br, Y=H, R1=CH2Cl, R2=NHC6H5 (18); X=Br, Y=H, R1=CH3, R2=NH2 (19); X=Br, Y=H, R1=CH2Cl, R2=NH2 (20); X=Br, Y=H, R1=CH2CH2CH2Cl, R2=NH2 (21); X=Br, Y=H, R1=CH2Cl, R2=NHCH2CH=CH2 (22); X=Br, Y=H, R1=CH2CH2Cl, R2=NHCH2CH=CH2 (23); X=I, Y=H, R1=CH2C6H5, R2=NHCH2C6H5 (24).

Затем методом пошагового включения параметров с использованием программы Statistica 6, было составлено двухпараметровое уравнение 2 (табл. 7). Установлено, что уравнение зависимости экспериментально определенного ПВД от таких параметров как энергия связывания по ферментам ЦОГ 1 и 2: ВеЦОГ1 и ВеЦОГ2, имеет наибольшие значения коэффициента корреляции (R), критерия Фишера (F) и критерия оценки методом перекрестного контроля исключением по одному (Q2LOO), и минимальное значение среднеквадратичной ошибки (S):

ПВДрассч. = -60,487-5,642 × ВеЦОГ1 - 10,263 × ВеЦОГ2

Уравнение 2 апробировано для теоретического расчета ПВД на 7 примерах соединений 25-31 из ряда гидразидов и амидов N-ацилантраниловых кислот (табл. 4).

Х=Н, Y=H, R1=СООС2Н5, R2=NHC6H11 (циклогексил) (25); X=H, Y=H, R1=CONHCH2CH=CH2, R2=NH(CH2)2CH(CH3)2 (26); X=Br, Y=Br, R1=CH3, R2=NHCH2CH=CH2 (27); X=Br, Y=H, R1=CH2C6H5, R2=NHC6H5 (28); X=H, Y=H, R1=CH2Cl, R2=NHCH2CH=CH2 (29); X=H, Y=H, R1=CONHCH2CH=CH2, R2=NHCH2CH2OH (30); X=H, Y=H, R1=CONHCH2CH=CH2, R2=NHCH2C6H5 (31).

Вначале были проведены расчеты энергий взаимодействия по ферментам ЦОГ 1 и 2: ВеЦОГ1 и ВеЦОГ2, и на их основе было рассчитано ПВДрассч., а затем результаты расчетов были подтверждены экспериментально на лабораторных животных и определена ПВДэксп..

Расчет прогнозируемого ПВД (ПВДрассч.) для 7 соединений, показал, что экспериментально синтезировать целесообразно 6 соединений 25-30, интервал ПВДрассч. которых будет лежать от 35% до 64,20%. При исследовании на лабораторных животных определено ПВДэксп., которое для соединений 25-30 составляет 32,4%, 35,60%, 33,10%, 44,45%, 39,85% и 39%, соответственно.

Для оценки качества прогноза ПВД (ПВДрассч.) составлено линейное уравнение взаимосвязи с экспериментальными значениями ПВД (ПВДэксп.):

ПВДрассч. = 1,011 × ПВДэксп. + 8,788; Rпрогн. = 0,796.

Линейная зависимость уравнения с коэффициентом корреляции (Rпрогн. = 0,796), показывает высокую степень связи ПВДрассч. с ПВДэксп..

Таким образом, уравнение 2 можно использовать для прогнозирования ПВД ряду гидразидов и амидов N-ацилантраниловых кислот.

Ариламиды N-ацил-N-алкенилантраниловых кислот

В таблице 5 для 18 соединений из ряда ариламидов N-ацил-N-алкенилантраниловых кислот приведены ПВДэксп. и рассчитанные энергии взаимодействия по ферментам ЦОГ 1 и 2.

R1=C6H4(4-Br), R2=Ad, R3=CH2CH=CH2 (1); R1=C6H4(4-Br), R2=Ad, R3=CH2CH=CClCH3 (2); R1=C6H4(4-Cl), R2=CH3, R3=CH2CH=CH2 (3); R1=C6H4(4-Br), R2=CH3, R3=CH2CH=CH2 (4); R1=C6H4(4-Br), R2=2-фурил, R3=CH2CH=CH2 (5); R1=C5H3(4-Br) 2-N, R2=CH3, R3=CH2CH=CClCH3 (6); R1=C6H4(2-CH3), R2=CH3, R3=CH2CH=CClCH3 (7); R1=C6H4(4-CH3), R2=CH3, R3=CH2CH=CClCH3 (8); R1=C6H4(4-OCH3), R2=CH3, R3=CH2CH=CClCH3 (9); R1=C6H5, R2=CH2Cl, R3=CH2CH=CClCH3 (10); R1=C6H5, R2=C2H5, R3=CH2CH=CClCH3 (11); R1=C6H4(3-CH3), R2=C6H5, R3=CH2CH=CH2 (12); R1=C6H5, R2=2-фурил, R3=CH2CH=CClCH3 (13); R1=C6H4(3-СН3), R2=H, R3=CH2CH=CClCH3 (14); R1=C6H4(4-CH3), R2=H, R3=CH2CH=CClCH3 (15); R1=C6H4(4-Br), R2=H, R3=CH2CH=CClCH3 (16); R1=C6H4(4-Cl), R2=H, R3=CH2CH=CClCH3 (17); R1=C6H4(4-OCH3), R2=H, R3=CH2CH=CClCH3 (18).

Затем методом пошагового включения параметров с использованием программы Statistica 6, было составлено четырехпараметровое уравнение 3 (табл. 7). Установлено, что уравнение зависимости экспериментально определенного ПВД по ферментам ЦОГ 1 и 2 от таких параметров как энергия связывания (ВеЦОГ1 и ВеЦОГ2) и межмолекулярная энергия (ImeЦОГ1 и ImeЦОГ2), имеет наибольшие значения коэффициента корреляции (R), критерия Фишера (F) и критерия оценки методом перекрестного контроля исключением по одному (Q2LOO), и минимальное значение среднеквадратичной ошибки (S):

ПВДрассч. = -65,639 - 0,067 × ВеЦОГ1 - 0,071 × ImeЦОГ1 - 1,752 × ВеЦОГ2 - 10,111 × ImeЦОГ2

Уравнение 3 апробировано для теоретического расчета ПВД на 6 примерах, соединениях 19-24 из ряда ариламидов N-ацил-N-алкенилантраниловых кислот (табл. 6).

R16Н4(4-Br), R26Н4(4-СН3), R3=СН2СН=СН2 (19); R1=C6H4(4-Br), R2=СН3, R3=СН2СН=CClCH3 (20); R16Н5, R2=СН3, R3=CH2CH=CClCH3 (21); R16Н4(3-СН3), R2=СН3, R3=СН2СН=CClCH3 (22); R16Н4(2-СН3), R2=Н, R3=СН2СН=CClCH3 (23); R16Н4(3-СН3), R2=CH2Cl, R3=СН2СН=СН2 (24).

Вначале были проведены расчеты энергий взаимодействия по ферментам ЦОГ 1 и 2: ВеЦОГ1, ВеЦОГ2, ImeЦОГ1, ImeЦОГ2, и на их основе было рассчитано ПВДрассч., а затем результаты расчетов были подтверждены экспериментально на лабораторных животных и определена ПВДэксп..

Расчет прогнозируемого ПВД (ПВДрассч.) для 6 соединений, показал, что экспериментально синтезировать целесообразно 5 соединений 20-24, интервал ПВДрассч. которых будет лежать от 37,10% до 52,81%. При исследовании на лабораторных животных определено ПВДэксп., которое составляет 40,40%, 57,30%, 49,70%, 59,00% и 58,40%, соответственно.

Для оценки качества прогноза ПВД (ПВДрассч.) составлено линейное уравнение взаимосвязи с экспериментальными значениями ПВД (ПВДэксп.):

ПВДрассч. = 0,518 × ПВДэксп. + 19,844; Rпрогн. = 0,865.

Линейная зависимость уравнения с коэффициентом корреляции (Rпрогн. = 0,865), показывает высокую степень связи ПВДрассч. с ПВДэксп..

Таким образом, уравнение 3 можно использовать для прогнозирования ПВД в ряду ариламидов N-ацил-N-алкенилантраниловых кислот.

Предлагаемый способ экономически выгоден и прост, так как позволяет по структурной формуле рассчитать энергии взаимодействия по ферментам циклооксигеназ 1 и 2, и с достаточно высокой достоверностью спрогнозировать уровень ПВД (по R 0,843÷0,920, F 18,01÷29,61, S 6,97÷9,84 по уравнениям 1-3 (табл. 7) и по методу перекрестной проверки исключением по одному (Q2LOO) 0,61÷0,74). В отличие от патента [1], где используются четырех- и пятипараметровые уравнения регрессии, выборки составлены на примерах от 8 до 9 соединений и апробированы по 1 соединению для каждого ряда, в данном способе предлагаются двухпараметровые уравнения 1 и 2 и четырехпараметровое уравнение 3, уравнения составлены на примере от 18 до 24 соединений в каждом ряду и апробированы на примере от 5 до 7 соединений. Описанный принцип отбора противовоспалительных средств можно использовать и для других рядов химических соединений.

Литература

1. Патент 2242754. Рос. Федерация. Способ отбора противовоспалительных средств / Коркодинова Л.М., Вахрин М.И., Данилов Ю.Л., Фешин В.П., Марданова Л.Г. №2003115080; заявл. 20.05.2003; опубл. 20.11.2004.

2. Sidhu R.S., Lee, J.Y., Yuan С.. Comparison of Cyclooxygenase-1 Crystal Structures: Cross-Talk between Monomers Comprising Cyclooxygenase-1 Homodimers. // Journal Biochemistry., 49: 7069-7079 (2010).

3. Rowlinson S.W., Kiefer J.R.. A Novel Mechanism of Cyclooxygenase-2 Inhibition Involving Interactions with Ser-530 and Tyr-385. // Journal Biol. Chem., 278: 45763-45769 (2003).

4. Тринус Ф.П., Клебанов Б.М., Кондратюк В.И. Методические рекомендации по экспериментальному (доклиническому) изучению нестероидных противовоспалительных фармакологических веществ. М., Минздрав СССР, с. 16 (1983).

Способ отбора противовоспалительных средств, отличающийся тем, что позволяет осуществлять поиск биологически активных веществ с противовоспалительным действием в рядах производных антраниловой кислоты: N-замещенные антраниловые кислоты (1 ряд); гидразиды и амиды N-ацилантраниловых кислот (2 ряд); ариламиды N-ацил-М-алкенилантраниловых кислот (3 ряд), у которых рассчитывают энергии взаимодействия по ферментам ЦОГ 1 и 2: энергия связывания Be (ВеЦОГ1 и ВеЦОГ2) и межмолекулярная энергия Ime (ImeЦОГ1 и ImeЦОГ2), затем с помощью двух- и четырехпараметровых уравнений следующих видов:

1 ряд: ПВДрассч= -1,315 + 6,661 × ВеЦОГ1 - 9,129 × Ime ЦОГ2 (R=0,843, F=23,49, S=6,97, Q2LOO=0,61) (1);

2 ряд: ПВДрассч= -60,487 - 5,642 × ВеЦОГ1 - 10,263 × ВеЦОГ2 (R=0,859, F=29,61, S=9,84, Q2LOO=0,61) (2);

3 ряд: ПВДрассч= -65,639 - 0,067 × ВеЦОГ1 - 0,071 × ImeЦОГ1 - 1,752 × ВеЦОГ2 - 10,111 × ImeЦОГ2 (R=0,920, F=18,01, S=8,14, Q2LOO=0,74) (3);

прогнозируют противовоспалительное действие (ПВДрассч) и отбирают соединения, у которых теоретически рассчитанное ПВД превышает 30%, выбранные соединения синтезируют и подтверждают расчетные данные экспериментально на лабораторных животных (ПВДэксп).



 

Похожие патенты:
Изобретение относится к медицине, а именно к фармацевктике, и может быть использовано для отбора производных антраниловой кислоты, обладающих противовоспалительным действием.

Изобретение относится к области медицины, в частности к определению лекарственного препарата метформин в смешанной слюне пациента, страдающего сахарным диабетом. Для этого 100 мкл интактной слюны переносится в микропробирки объемом 1,2 мл, добавляется 10 мкл раствора внутреннего стандарта в концентрации 1000 нг/мл, затем перемешивается на шейкере при 1200 об/мин в течение 2 мин, после чего проводится осаждение белков добавлением 300 мкл охлажденного до -20°С ацетонитрила, затем производится перемешивание на шейкере при 1200 об/мин в течение 4 мин, полученную смесь центрифугируют при 4000 об/мин при температуре +4°С в течение 15 минут, после чего надосадочная жидкость в количестве 50 мкл смешивается со 150 мкл воды и помещается в планшеты для определения концентрации метформина методом высокоэффективной жидкостной хроматографии, при этом линейный диапазон определения лекарственного препарата метформина составляет от 5 до 1600 нг/мл.

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности, а именно к способу количественного определения флавоноидов в листьях тополя черного. Способ количественного определения флавоноидов в листьях тополя черного, заключающийся в предварительном получении водно-спиртового извлечения из растительного сырья путем экстракции 1 г точной навески измельченного до размера частиц 1 мм растительного сырья 70%-ным этиловым спиртом, в пересчете на вещество флавоноидной природы, методом дифференциальной спектрофотометрии в отношении «сырье-экстрагент» - 1:30, при этом определение флавоноидов проводят при длине волны 414 нм в пересчете на рутин и абсолютно сухое сырье рассчитывают по формуле где х - содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин, %; D - оптическая плотность испытуемого раствора; Dо - оптическая плотность раствора Государственного стандартного образца рутина; m - масса сырья, г; mо - масса Государственного стандартного образца рутина, г; W - потеря в массе при высушивании, %; в случае отсутствия стандартного образца рутина целесообразно использовать теоретическое значение его удельного показателя поглощения, равное 240, где х - содержание суммы флавоноидов в пересчете на рутин, %; D - оптическая плотность испытуемого раствора; m - масса сырья, г; 240 - удельный показатель поглощения Государственного стандартного образца рутина при 414 нм; W - потеря в массе при высушивании, %.

Изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к иммуногенным эпитопам URLC10, и может быть использовано в медицине для лечения пациента, страдающего раком.

Группа изобретений относится к фармацевтике и может быть использована для определения количественного содержания аскорбиновой кислоты (АК) в лекарственных средствах (ЛС).

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и может быть использовано в центрах контроля качества лекарственных средств и контрольно-аналитических лабораториях при проведении количественного определения суммы флавоноидов в траве монарды дудчатой ( fisiulosa L.).

Изобретение относится к химико-фармацевтической промышленности и может быть использовано для определения влажности воздушно-сухого лекарственного растительного сырья плодов расторопши пятнистой.

Группа изобретений относится к области биотехнологии. Предложен способ анализа поведения веществ in vitro, устройство для анализа поведения молекул, а также средство для испытания вещества in vitro.

Изобретение относится к способу высокопроизводительной тестовой (HTT) высокоэффективной жидкостной хроматографии для тестирования образцов фармацевтических композиций.

Изобретение относится к фармацевтическому анализу, а именно к анализу материалов с помощью оптических средств. Способ количественного определения лекарственных средств группы вастатинов заключается в растворении анализируемой пробы при комнатной температуре и перемешивании до полного растворения, обработке аликвотной части приготовленного раствора химическими реактивами с последующим фотоэлектроколориметрированием полученных окрашенных растворов, количественном определении лекарственных средств группы вастатинов по калибровочным графикам, при этом анализируемую пробу растворяют в метаноле, аликвотную часть приготовленного раствора обрабатывают метанольным раствором сульфата никеля в концентрированной соляной кислоте при комнатной температуре, экстрагируют выделившийся окрашенный осадок хлороформом, сушат над безводным сульфатом натрия и фотоэлектроколориметрируют при длине волны 590 нм.

Изобретение относится к медицине и может быть использовано для отбора противовоспалительных средств, что позволяет осуществлять поиск биологически активных веществ с противовоспалительным действием в рядах производных антраниловой кислоты: N-замещенные антраниловые кислоты ; гидразиды и амиды N-ацилантраниловых кислот ; ариламиды N-ацил-М-алкенилантраниловых кислот. При этом рассчитывают энергии взаимодействия по ферментам ЦОГ 1 и 2: энергия связывания Be и межмолекулярная энергия Ime, затем с помощью двух- и четырехпараметровых уравнений прогнозируют противовоспалительное действие и отбирают соединения, у которых теоретически рассчитанное ПВД превышает 30, выбранные соединения синтезируют и подтверждают расчетные данные экспериментально на лабораторных животных. Изобретение обеспечивает экспериментальные скрининговые исследования на животных не на всем объеме синтезированных веществ, а только тех, торможение отека которых превосходит 30. 7 табл.

Наверх