Способ диагностики степени тяжести хронической плацентарной недостаточности у серопозитивных к цитомегаловирусу женщин

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и заключается в диагностике степени тяжести плацентарной недостаточности у серопозитивных к цитомегаловирусу женщин. Для этого после родов проводят забор плодовой части плаценты, готовят гомогенат плаценты и иммуноферментным методом анализа определяют содержание прогестерона и белка теплового шока Hsp90. При показателях прогестерона 140,34±4,52 нмоль/л и белка теплового шока Hsp90 104,71±3,06 нг/мл диагностируют компенсированную плацентарную недостаточность. При показателях прогестерона 97,30±3,46 нмоль/л и белка теплового шока Hsp90 161,26±2,91 нг/мл диагностируют субкомпенсированную плацентарную недостаточность. При показателях прогестерона 53,41±1,57 нмоль/л и белка теплового шока Hsp90 220,86±3,65 нг/мл диагностируют декомпенсированную плацентарную недостаточность. Изобретение позволяет повысить точность диагностики степени тяжести хронической плацентарной недостаточности у серопозитивных к цитомегаловирусу женщин. 3 пр.

 

Область применения: изобретение относится к медицине, в частности к акушерству, а также к области научных исследований - патологической физиологии, и предназначено для диагностики степени тяжести хронической плацентарной недостаточности у серопозитивных к цитомегаловирусу женщин.

Уровень техники

Плацентарная недостаточность - синдром, обусловленный морфофункциональными изменениями, возникающими в результате сложной компенсаторной реакции плаценты и плода в ответ на различные патологические состояния организма беременной женщины, в том числе острые или хронические инфекции [5, 6]. В настоящее время, разработаны различные системы оценки фетоплацентарного комплекса, включающие в себя неинвазивные методы ультразвуковой диагностики (УЗИ, УЗДГ, КТГ) [1], определение показателей фетоплацентарных гормонов (плацентарный лактоген, эстриол, кортизол и др.) и специфических белков беременности (хорионический гонадотропин и его β-субъединица, РАРР и др.) [4], морфологическое исследование плаценты [2, 7].

Прогностическая значимость данных способов диагностики плацентарной недостаточности показывает сильный разброс в показателях чувствительности и диагностической точности, что затрудняет выбор оптимальных методов диагностики, позволяющих более точно оценить наличие и степень тяжести плацентарной недостаточности для прогнозирования течения послеродового и раннего неонатального периода.

Указанные факторы могут быть устранены в заявляемом способе.

Техническим результатом является повышение точности диагностики степени тяжести хронической плацентарной недостаточности у серопозитивных к цитомегаловирусу женщин.

Заявляемый технический результат достигается тем, что у серопозитивных к цитомегаловирусу женщин после родов проводят забор плодовой части плаценты, готовят гомогенат плаценты и иммуноферментным методом анализа определяют содержание прогестерона и белка теплового шока Hsp90 и при показателях прогестерона 140,34±4,52 нмоль/л и белка теплового шока Hsp90 104,71±3,06 нг/мл диагностируют компенсированную плацентарную недостаточность, при показателях прогестерона 97,30±3,46 нмоль/л и белка теплового шока Hsp90 161,26±2,91 нг/мл диагностируют субкомпенсированную плацентарную недостаточность, при показателях прогестерона 53,41±1,57 нмоль/л и белка теплового шока Hsp90 220,86±3,65 нг/мл диагностируют декомпенсированную плацентарную недостаточность.

Ранее совокупность указанных признаков в диагностике степени тяжести хронической плацентарной недостаточности инфекционного генеза не использовалась.

Согласно имеющимся представлениям, прогестерон принимает активное участие в регуляции процессов децидуолизации слизистой матки, формирования плаценты и маточно-плацентарного кровотока, тонуса матки [8, 9], что необходимо для сохранения беременности. Подавляющая часть эффектов прогестерона опосредуется его рецепторами, в составе которых находится белок теплового шока 90 [3]. Точное предназначение белка теплового шока Hsp90 в поддержании рецептора прогестерона в активном состоянии для связывания с лигандом остается предметом споров. Некоторые считают, что белок теплового шока 90 является основным регулятором связывания прогестерона с рецептором и его транслокации к ядру для формирования ответной реакции гормончувствительного фрагмента ДНК [3]. Вместе с тем данных об интеграции маркеров цитомегаловирусной инфекции у женщин с показателями прогестерона и белка теплового шока Hsp90 в гомогенате плаценты в диагностике степени тяжести плацентарной недостаточности нет.

Вышеизложенное явилось основанием к исследованию в гомогенате плаценты, взятой после родов у серопозитивных к цитомегаловирусу женщин, показателей прогестерона и белка теплового шока Hsp90 для диагностики степени тяжести плацентарной недостаточности. Наши исследования позволили установить интегральные показатели прогестерона и белка теплового шока Hsp90 в гомогенате плаценты, при которых с точностью 90,9% диагностируют компенсированную, субкомпенсированную и декомпенсированную плацентарную недостаточность.

Способ осуществляют следующим образом:

У серопозитивных к цитомегаловирусу женщин проводят забор плодовой части плаценты после родов и готовят гомогенат плаценты. Для получения гомогената кусочки плаценты отмывают физиологическим раствором от клеток крови, перемешивая 15 мин на магнитной мешалке. Отмытые кусочки слегка подсушивали на фильтровальной бумаге, взвешивали и гомогенизировали до однородной массы. К полученному гомогенату добавляют физиологический раствор в объеме, равном изначальному весу ткани (на 1 г - 1 мл физиологического раствора). Взвесь помещают в пластиковые пробирки Falcon и подвергают замораживанию при -20°С в течение суток. Затем гомогенат размораживают, центрифугируют при 4000 g при температуре +4°С. Надосадочную жидкость используют для иммуноферментных исследований.

Определение показателей прогестерона и белка теплового шока Hsp90 проводят методом иммуноферментного анализа с использованием стандартных тест-систем ВСМ Diagnostics (США). Учет реакции проводят на иммуноферментном анализаторе Stat Fax-2100 (США) согласно протоколам для постановки иммуноферментного анализа от фирмы-производителя.

При показателях в гомогенате плаценты у серопозитивных к цитомегаловирусу женщин 140,34±4,52 нмоль/л и белка теплового шока Hsp90 104,71±3,06 нг/мл диагностируют компенсированную плацентарную недостаточность, при показателях прогестерона 97,30±3,46 нмоль/л и белка теплового шока Hsp90 161,26±2,91 нг/мл диагностируют субкомпенсированную плацентарную недостаточность, при показателях прогестерона 53,41±1,57 нмоль/л и белка теплового шока Hsp90 220,86±3,65 нг/мл диагностируют декомпенсированную плацентарную недостаточность.

Сущность заявляемого способа поясняется следующими примерами:

Пример 1. Беременная М., 27 л., поступила в отделение патологии беременности городской клинической больницы г. Благовещенска с направительным (предварительным) диагнозом:

Диагноз: Угрожающие преждевременные роды при сроке 35 недель беременности.

При УЗИ выявлена хроническая плацентарная недостаточность задержка роста плода I степени, при допплерометрическом исследовании -нарушение гемодинамики IA степени.

Проводилось лечение угрозы преждевременных родов и хронической плацентарной недостаточности дигидропиридиновыми производными (нифедипин).

Роды через естественные родовые пути в срок 39 недель беременности. Без осложнений. Родилась живая доношенная девочка массой тела 3040 г, длиной тела 52 см, с оценкой по шкале Апгар на 1-й минуте - 8 баллов, на 5-й минуте - 8 баллов, без признаков морфофункциональной незрелости.

Произведен забор материала плодовой части плаценты. По заявленному способу в гомогенате плаценты показатели прогестерона составили 72,2 нмоль/л и белка теплового шока Hsp90 148,3 нг/мл, что соответствует компенсированной форме хронической плацентарной недостаточности.

Заключение гистологического исследования плаценты: плацента с инволютивно-дистрофическими изменениями, соответствующими сроку гестации.

В периоде ранней адаптации и все время пребывания в отделении новорожденных ребенок был в удовлетворительном состоянии. Послеродовой период у матери протекал без осложнений.

Пример 2. Беременная А., 26 лет, поступила в отделение патологии беременности ГАУЗ АО «Благовещенская городская клиническая больница» с предварительным диагнозом: Беременность 34 недели. Хроническая плацентарная недостаточность. Задержка роста плода 1 степени.

Акушерско-гинекологический анамнез осложнен двумя медицинскими абортами при сроке 9-10 недель беременности (за 2 года до настоящей беременности).

При УЗИ выявлена задержка роста плода I степени, при допплерометрическом исследовании установлено нарушение гемодинамики IБ степени.

Проводилось медикаментозное лечение, направленное на лечение синдрома задержки роста плода и плацентарных нарушений селективными бета2-адреностимуляторами.

Родоразрешилась через естественные родовые пути в срок 39 недель беременности. Без осложнений. Родился живой доношенный мальчик массой тела 2800 г, длиной тела 49 см, с оценкой по шкале Апгар на 1-й минуте - 8 баллов, на 5-й минуте - 8 баллов, с признаками морфофункциональной незрелости, соответствующей задержке роста плода I степени.

Произведен забор материала плодовой части плаценты. По заявленному способу в гомогенате плаценты показатели прогестерона составили 53,0 нмоль/л и белка теплового шока Hsp90 177,1 нг/мл, что соответствует субкомпенсированной форме хронической плацентарной недостаточности, характеризующейся неустойчивым состоянием функций фетоплацентарного комплекса.

Заключение гистологического исследования плаценты: хроническая плацентарная недостаточность с умеренными компенсаторно-приспособительными реакциями.

В периоде ранней адаптации и все время пребывания в отделении новорожденных ребенок был в удовлетворительном состоянии. Послеродовой период у матери протекал без осложнений.

Пример 3. Беременная Е., 35 лет, поступила в отделение патологии беременности ГАУЗ АО «Благовещенская городская клиническая больница» предварительным диагнозом: Угрожающие преждевременные роды при сроке 35 недель беременности. Хроническая плацентарная недостаточность. Хроническая гипоксия плода. Задержка роста плода II степени

При ультразвуковом исследовании выявлена задержка роста плода III степени, при допплерометрическом - нарушение гемодинамики II степени.

Родоразрешена в экстренном порядке путем операции кесарево сечение. Родился живой недоношенненный мальчик массой тела 1730 г, длиной тела 38 см, с оценкой по шкале Апгар на 1-й минуте - 4 баллов, на 5-й минуте - 5 баллов, с признаками выраженной морфофункциональной незрелости.

Произведен забор материала плодовой части плаценты. По заявленному способу в гомогенате плаценты показатели прогестерона составили 45,0 нмоль/л и белка теплового шока Hsp90 248 нг/мл, что соответствует декомпенсированной форме хронической плацентарной недостаточности, характеризующейся полным истощением функциональных резервов фетоплацентарного комплекса.

Заключение гистологического исследования плаценты: хроническая плацентарная недостаточность с отсутствием компенсаторно-приспособительных реакций.

Новорожденный ребенок был переведен на второй этап лечения с последующей выпиской в удовлетворительном состоянии. Послеродовой период у матери протекал без осложнений.

Данные примеры наглядно демонстрируют возможность более точной диагностики при применении заявленного способа степени тяжести хронической плацентарной недостаточности у серопозитивных к цитомегаловирусу женщин по сравнению с применяемыми стандартными методами оценки функционального состояния фетоплацентарного комплекса в период беременности и после родов.

Использование для оценки показателей прогестерона и белка теплового шока Hps90 в гомогенате плаценты расширяет диагностические возможности метода, повышает точность диагностики, расширяя диагностические возможности морфологических и гистологических оценочных параметров, характеризующих различные патогенетические звенья хронической плацентарной недостаточности, позволяет прогнозировать течение послеродового и раннего неонатального периода.

Для предлагаемого способа диагностики степени тяжести хронической плацентарной недостаточности у серопозитивных к цитомегаловирусу женщин (с ретроспективным сопоставлением с перинатальными исходами, результатами морфологического исследования плаценты) с позиций доказательной медицины были определены чувствительность, специфичность, точность, прогностическая ценность положительного и отрицательного результатов, которые соответственно составили 76,9%, 95,2%, 90,9%, 83,3%, 93,0%, что свидетельствует о высокой информативности и достоверности предлагаемого способа диагностики.

Положительный эффект предлагаемого способа диагностики заключается в принципиально новой возможности диагностики степени тяжести хронической плацентарной недостаточности у серопозитивных к цитомегаловирусу женщин благодаря оценке неиспользуемых ранее показателей прогестерона и белка теплового шока Hps90 в гомогенате плаценты.

Способ неинвазивен, безопасен и может быть доступен для современных учреждений родовспоможения.

На дату подачи заявки заявитель не обнаружил способа диагностики с заявленной совокупностью признаков, что соответствует критерию изобретения «новизна».

По результатам интегративного анализа совокупность признаков заявляемого способа диагностики обеспечивает ему новые свойства в виде повышения точности диагностики степени тяжести хронической плацентарной недостаточности у серопозитивных к цитомегаловирусу женщин, что обеспечивает соответствие заявляемого способа критерию «изобретательский уровень».

Критерий изобретения «промышленная применимость» подтверждается тем, что заявляемый способ диагностики может быть успешно применен для подтверждения или уточнения признаков хронической плацентарной недостаточности различной степени тяжести для подбора тактики ведения послеродового и раннего неонатального периода.

Используемые источники

1. Кузнецов М.И., Ордынский В.Ф., Васильев А.Р. Анализ результатов 3-летнего применения шкалы определения плацентарной недостаточности и шкалы оценки реактивности сердечнососудистой системы плода // Ультразвуковая диагностика в акушерстве, гинекологии и педиатрии. - 2000. - №2. - С. 113-122.

2. Милованов А.П. Патология системы мать-плацента-плод: Руководство для врачей. - М: Медицина, 1999. - 448 с.

3. Смирнов А.В. Молекулярная биология прогестерона // Рос.хим. журнал им. Д.И. Менделеева. - 2005. - Т. XLIX, №1. - С. 64-74.

4. Стрижаков А.Н., Липатов И.С., Тезиков Ю.В. Плацентарная недостаточность: Патогенез. Прогнозирование. Диагностика. Профилактика. Акушерская тактика. - Самара: ООО «Офорт», 2014. -239 с.

5. Орджоникидзе Н.В., Тютюнник В.Л. Хроническая плацентарная недостаточность при бактериальной и/или вирусной инфекции // Акушерство и гинекология. - 1999. - №4. - С. 46-50.

6. Орджоникидзе Н.В. Современный алгоритм обследования женщин с вирусной и/или бактериальной инфекцией до и в период беременности // Акушерство и гинекология. - 2002. - №5. - С. 61-63.

7. Патоморфологическая характеристика отдельных звеньев системы мать-плацента-плод при преждевременных родах / Т.Ю. Пестрикова, Е.А. Юрасова, Т.М. Бутко и др. // Акушерство и гинекология. -2002.-№3. -С. 25-27.

8. Karteris Е., Zervou S., Pang Y., Dong J., Hillhouse E. Progesterone signaling in human myometrium through two novel membrane G protein - coupled receptors: potential role in functional progesterone withdrawal at term. Mol. Endocrinol. 2006;20:1519-1534.

9. da Fonseca E.B., Bittar R.E., Damiao R., Zugaib M. Prematurity prevention: the role of progesterone Curr. Opin. Obstet. Gynecol. 2009;21 (2):142-147.

Способ диагностики степени тяжести плацентарной недостаточности у серопозитивных к цитомегаловирусу женщин заключающийся в том, что после родов проводят забор плодовой части плаценты, готовят гомогенат плаценты и иммуноферментным методом анализа определяют содержание прогестерона и белка теплового шока Hsp90 и при показателях прогестерона 140,34±4,52 нмоль/л и белка теплового шока Hsp90 104,71±3,06 нг/мл диагностируют компенсированную плацентарную недостаточность, при показателях прогестерона 97,30±3,46 нмоль/л и белка теплового шока Hsp90 161,26±2,91 нг/мл диагностируют субкомпенсированную плацентарную недостаточность, при показателях прогестерона 53,41±1,57 нмоль/л и белка теплового шока Hsp90 220,86±3,65 нг/мл диагностируют декомпенсированную плацентарную недостаточность.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и может быть использовано для прогнозирования риска развития ВЭБ-ассоциированных опухолей у пациентов с острой ВЭБ-инфекцией.

Группа изобретений относится к медицине и касается способа детектирования в исследуемом образце присутствия и/или свойств связывания анализируемых антител, способных реагировать с одной или более антигенными молекулами, включающего (a) обеспечение первой антигенной молекулы, выбранной из CRF; (b) обеспечение второй антигенной молекулы, выбранной из CRF; (c) приведение первых антигенных молекул и вторых антигенных молекул в контакт с образцом с образованием комплексов, содержащих [первую антигенную молекулу]-[анализируемое антитело]-[вторую антигенную молекулу]; (d1) обеспечение средства иммобилизации и/или (d2) обеспечение второго средства мечения; и (e) обеспечение первого средства мечения; и (g) детектирование присутствия комплексов, образованных во время или после этапа (c).

Изобретение относится к диагностике, а именно к способу экспресс-диагностики пневмококковой инфекции при риносинуситах. Способ экспресс-диагностики пневмококковой инфекции при риносинуситах включает забор секрета из глубоких отделов носоглотки пациента, выявление возбудителя пневмококковой инфекции в носоглоточном секрете, при этом выявление возбудителя пневмококковой инфекции осуществляют с применением иммунохроматографической коммерческой тест-системы Binax NOW производства Alere Scarborough, Inc., CIIIA, показывающей наличие антигена Streptococcus pneumoniae в исследуемом секрете в виде двух окрашенных полос в окошке для чтения результата тест-системы.

Изобретение относится к онкологии и неврологии. Способ ранней молекулярно-биологической иммуноспецифической диагностики злокачественных заболеваний (ЗНО) или бокового амиотрофического склероза (БАС) включает в себя иммунофенотипирование мембранных антигенов гемопоэтической стволовой клетки (ГСК) обследуемого субъекта с последующим картированием и профилированием основных белковых маркеров мембранной поверхности (БММП) ГСК этого субъекта и сравнительный анализ показателей экспрессии белков полученного профиля (исследуемого профиля) с аналогичными параметрами протеомного профиля БММП ГСК (нормального профиля), если в результате сравнительного анализа исследуемого и нормального профилей устанавливают гиперэкспрессию CD81+ маркера и гипоэкспрессию CD 38+, CD33+, CD71+, CD90+, CD56+, CD19+, CD28+, CD300+ и CD2+ маркеров в исследуемом профиле по сравнению с нормальным профилем, то диагностируют онкоспецифический профиль БММП ГСК у обследуемого субъекта; если в результате сравнительного анализа исследуемого и нормального профилей устанавливают гипоэкспрессию HLA DR+, CD38+, CD13+, CD71+, CD117+, CD90+, CD50+, CD19+ маркеров и гиперэкспрессию CD56+, CD61+, CD2+, CD7+ и CD81+ маркеров в исследуемом профиле по сравнению с нормальным профилем, то диагностируют БАС-специфический профиль БММП ГСК у обследуемого субъекта.

Изобретение относится к области аналитической химии и заключается в создании пьезоэлектрического сенсора для определения лекарственных веществ фторхинолонового ряда – левофлоксацина и ципрофлоксацина.
Изобретение относится к медицине, а именно к лабораторной диагностике, и позволяет прогонозировать течение аденокарциномы легкого. Для этого проводят иммуногистохимическое исследование диагностического материала с выявлением наличия экспрессии белка р63.

Изобретение относится к патологической анатомии и может быть использовано для полуколичественной визуальной оценки синтеза регуляторного белка PDCD4 в гистологических срезах ткани иммуногистохимическим методом с детекцией в ядре и цитоплазме.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для прогнозирования эффективности применения средства для повышения относительного содержания высокодифференцированных клеток в аденокарциноме молочной железы пациента с инвазивным протоковым раком.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и может быть использовано для прогнозирования эффективности лечения преэклампсии средней тяжести у беременных женщин в сроки гестации 24-37 недель, в том числе у пациенток с хронической артериальной гипертензией.

Группа изобретений относится к области ветеринарии, а именно к диагностике, и может быть использована для выявления антигенов Toxoplasma gondii или антител к ним в сыворотке или плазме крови животных, а также в материале, полученном от животных методом биопсии, и в тканях и органах животных после убоя.

Изобретение относится к дерматологии, а именно к оценке эффективности лечения пруриго. Для этого на 10 день лечения в сыворотке венозной крови определяют концентрацию β-триптазы, и при ее значении 45 мкг/л и более эффективность лечения оценивают как низкую, а при значении менее 45 мкг/л - как высокую. Изобретение обеспечивает упрощение исследования, а также сокращение его продолжительности. 5 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и заключается в диагностике степени тяжести плацентарной недостаточности у серопозитивных к цитомегаловирусу женщин. Для этого после родов проводят забор плодовой части плаценты, готовят гомогенат плаценты и иммуноферментным методом анализа определяют содержание прогестерона и белка теплового шока Hsp90. При показателях прогестерона 140,34±4,52 нмольл и белка теплового шока Hsp90 104,71±3,06 нгмл диагностируют компенсированную плацентарную недостаточность. При показателях прогестерона 97,30±3,46 нмольл и белка теплового шока Hsp90 161,26±2,91 нгмл диагностируют субкомпенсированную плацентарную недостаточность. При показателях прогестерона 53,41±1,57 нмольл и белка теплового шока Hsp90 220,86±3,65 нгмл диагностируют декомпенсированную плацентарную недостаточность. Изобретение позволяет повысить точность диагностики степени тяжести хронической плацентарной недостаточности у серопозитивных к цитомегаловирусу женщин. 3 пр.

Наверх