Композиция водной суспензии, включающая наночастицы макролидных антибиотиков

Настоящее изобретение относится к композиции водной суспензии, включающей наночастицы макролидного антибиотика, и к ее применению. Композиция водной суспензии для лечения или предупреждения воспалительного или инфекционного заболевания глаз включает наночастицы макролидного антибиотика, в которой наночастицы имеют средний диаметр частиц, равный 300 нм или менее, и 90% диаметр, равный 1500 нм или менее, и которая в качестве поверхностно-активного вещества содержит полиоксиэтиленовое гидрогенизированное касторовое масло (НСО), а в качестве полимерного загустителя гидроксипропилметилцеллюлозу (НРМС) или метилцеллюлозу (МС). 3 н. и 4 з.п. ф-лы, 7 ил., 15 табл., 19 пр.

 

Перекрестные ссылки на имеющие отношение заявки

Данная заявка претендует на все преимущества заявки на патент Японии №2013-231796, зарегистрированный 8 ноября 2013, и раскрытие всего содержания которого включено в настоящий документ путем отсылки во всей своей полноте. Все содержание, раскрытое в процитированных патентах, заявках на патенты и литературе, включено в настоящий документ путем отсылки во всей своей полноте.

Область техники, к которой относится изобретение

Настоящее изобретение относится к композиции водной суспензии, включающей наночастицы макролидного антибиотика и к ее применению.

Уровень техники

Макролидные антибиотики, такие как эритромицин, рокситромицин, кларитромицин и азитромицин применяют, главным образом, посредством перорального введения, и существует потребность в макролидных антибиотиках в виде местных композиций, таких как инъекции, глазные капли или ушные капли. Однако эти лекарственные средства представляют собой плохо растворимые соединения, имеющие низкую растворимость, что затрудняет введение их в состав жидких композиций. Среди этих соединений, эритромицин легко растворим в метаноле, этаноле и ацетоне и малорастворим в простом эфире, но чрезвычайно плохо растворим в воде. Кларитромицин, будучи малорастворим в ацетоне и хлороформе, очень плохо растворим в метаноле, этаноле и эфире, и практически нерастворим в воде. Таким образом, кларитромицин признан практически нерастворимым не только в воде, но также плохо растворимым в органическом растворителе, применяемом для биологических экспериментов по сравнению с эритромицином, и, следовательно, его значительно сложнее приготовить в виде раствора. В качестве композиции для таких плохо растворимых лекарственных средств в композициях для местного применения, таких как инъекции, глазные капли или ушные капли, известна композиция водной суспензии, в которой суспендировано такое плохо растворимое лекарственное средство. Например, известна композиция водной суспензии для местного применения, которая содержит наночастицы (диаметр 90% или более тонкодисперсных частиц плохо растворимого лекарственного средства равен менее чем 1000 нм) плохо растворимого лекарственного средства и гранулированный дезинтегратор (Патентная литература 1). Также сообщали, что композиции в виде водной суспензии, такие как глазные капли и ушные капли, включающие плохо растворимое лекарственное средство, поливинилпирролидон и альгиновую кислоту или ее соль, имеют хорошую диспергируемость (Патентная литература 2).

Также известно, что плохо растворимые лекарственные средства имеют плохую биодоступность при пероральном введении. Для того чтобы улучшить биодоступность при пероральном введении, были проведены различные исследования по солюбилизации и суспендированию плохо растворимых лекарственных средств. Например, сообщали о том, что кларитромицин имеет повышенную растворимость, при измельчении с 2-гликозидом L-аскорбиновой кислоты (Непатентная литература 1). Кроме того сообщали, что жидкая композиция для введения наночастиц была составлена с (плохо растворимыми) частицами активного вещества, которые имели эффективный средний диаметр менее чем 2000 нм и со стабилизатором поверхности и ингибитором осмотически активного роста кристаллов, который стабилизирует и предотвращает растворение/перекристаллизацию и агрегацию активного вещества (Патентная литература 3). Также сообщали, что композиция кларитромицина, имеющая эффективный средний диаметр менее чем 2000 нм в сочетании со стабилизатором поверхности, показала более высокую растворимость и более высокую биодоступность при пероральном введении (Патентная литература 4).

Известно о различных исследованиях с формами для парентерального введения, такими как инъекции плохо растворимых лекарственных средств, таких как кларитромицин. Например, введение плохо растворимого лекарственного средства, такого как кларитромицин с помощь инъекции создает такую проблему, как боль в месте инъекции. В качестве решения этой проблемы, сообщали о способе составления липидной эмульсии (Патентная литература 5), способе встраивания плохо растворимого лекарственного средства в липосомы (Патентная литература 6) и способе инкапсулирования плохо растворимого лекарственного средства в мицеллы из желчной соли (Патентная литература 7).

С другой стороны, сообщали о том, что местное введение макролидных антибиотиков было эффективным при кератите, в особенности, при кератите, после применения LASIK, вызванном нетуберкулезными микобактериями (Непатентная литература 2). В частности, было показано, что кларитромицин был пригоден для лечения кератита, вызванного нетуберкулезными микобактериями в экспериментах на животных. Сообщалось, что кларитромицин был от четырех до восьми раз эффективнее азитромицина в отношении нетуберкулезных микобактерий. Были предприняты попытки получить составы этих лекарственных средств в композициях для местного применения, таких как глазные капли и ушные капли, и методика DuraSite (зарегистрированная торговая марка) для получения композиции позволила применять на практике глазные капли с азитромицином. Однако кларитромицин в форме глазных капель еще не был применен на практике. Касательно офтальмологической инсталляции с кларитромицином, было раскрыто, что порошок кларитромицина растворяют в метаноле и затем разводят солевым раствором, который закапывают в глаз кролика, и что введенный кларитромицин сохраняется в роговице кролика (Непатентная литература 3). Напротив, также сообщали, что кларитромицин не был обнаружен в роговице, а скорее вызывал воспаление на офтальмологической поверхности после введения суспензии кларитромицина таким же способом. В этом сообщении, суспензию кларитромицина получали суспендированием гранул кларитромицина для перорального введения в стерилизованной воде и затем разбавлением суспензии солевым раствором (Непатентная литература 4). Сообщали, что от 1 до 2% пациентов испытывали подобное раздражение в клиническом испытании с глазными каплями с азитромицином.

Что касается ушных капель, то ушные капли, включающие макролидный антибиотик, такой как кларитромицин или азитромицин в качестве эффективного ингредиента, еще практически не применяли, несмотря на сообщения, сделанные в отношении композиции ушных капель для продолжительного введения (Патентная литература 8) и композиции для макролидного антибиотика, который наносят местно и который остается на барабанной перепонке в течение длительного периода времени (Патентная литература 9).

Список процитированной литературы

Патентная литература

Патентная литература 1: Выложенный Японский патент №2007-119456

Патентная литература 2: Международная публикация № WO 2002/015878

Патентная литература 3: Международная публикация № WO 2004/006959

Патентная литература 4: Международная публикация № WO 2007/008537

Патентная литература 5: Международная публикация № WO 90/14094

Патентная литература 6: Международная публикация № WO 98/33482

Патентная литература 7: Выложенный Японский патент № Н3-169807

Патентная литература 8: Публикация нерассмотренной заявки на патент США №2013/0216609

Патентная литература 9: Международная публикация № WO 2004/050021

Непатентная литература

Непатентная литература 1: Yutaka Inoue et al., International Journal of Pharmaceutics (2007) 331:38-45

Непатентная литература 2: Joon-Young Hyon et al., Arch Ophthalmol (2004) 122:1166-1169

Непатентная литература 3: Robert H. Gross et al., Invest Ophthalmol Vis Sci (1995) 36(5):965-968

Непатентная литература 4: Jonas, J. Kuehne et al., Am J Ophthalmol (2004) 138:547-553

Раскрытие изобретения

Техническая проблема

Несмотря на различные исследования водных жидких композиций, включающих плохо растворимое лекарственное средство, до сих пор было трудно достичь применимых на практике композиций в виде водной суспензии, таких как инъекции, глазные капли и ушные капли, включающие плохо растворимое лекарственное средство, такое как кларитромицин. Следовательно, желательно, чтобы были разработаны инъекции и композиции в виде водной суспензии для местного применения, в особенности, глазные капли и ушные капли, которые предпочтительно в меньшей степени вызывают раздражение, легко стерилизуются, имеют хорошую стабильность во времени и стабильность дисперсии, и были применимы к широкому кругу плохо растворимых лекарственных средств.

Соответственно, настоящее изобретение ставит своей целью обеспечить водную суспензию, включающую макролидный антибиотик в качестве эффективного ингредиента, который в меньшей степени вызывает раздражение, легко стерилизуется и имеет хорошую стабильность во времени и стабильность дисперсии. Конкретно, настоящее изобретение ставит своей целью обеспечить практически осуществимую водную фармацевтическую композицию, такую как инъекция, глазные капли, ушные капли, капли для носа и/или ингалятор, включающую макролидный антибиотик в качестве эффективного ингредиента. В особенности, настоящее изобретение ставит своей целью обеспечить инъекцию, глазные капли, ушные капли, капли для носа и/или ингалятор, включающие макролидный антибиотик в качестве эффективного ингредиента, который имеет хорошую прозрачность, (долговременную) диспергируемость, стабильность при хранении, способность удерживаться на роговице, обладает хорошей способностью внутриглазной жидкости к перемещению и низкой раздражительностью. Настоящее изобретение дополнительно ставит своей целью обеспечить вышеописанную водную суспензию или инъекцию, глазные капли, ушные капли, капли для носа и/или ингалятор, включающие кларитромицин как макролидный антибиотик в качестве эффективного ингредиента.

Решение проблемы

Авторы настоящего изобретения провели интенсивные исследования, вследствие которых установили, что композиция водной суспензии, включающая наночастицы макролидного антибиотика и стабилизатор дисперсии, поверхностно-активное вещество, ингибитор агрегации и/или модификатор вязкости, имеет хорошую прозрачность, (долговременную) диспергируемость, стабильность при хранении, способность удерживаться на роговице и способность внутриглазной жидкости к перемещению, и, следовательно, представляет собой хорошую водную фармацевтическую композицию. В частности, авторы настоящего изобретения обнаружили, что чрезвычайно полезные эффекты проявляются, когда наночастицы макролидного антибиотика имеют средний диаметр частиц (именуемый в дальнейшем в настоящем документе как «Dv»), равный 500 нм или менее, и 90% диаметр (именуемый в дальнейшем в настоящем документе как «D90»), равный 1500 нм или менее (предпочтительно Dv равен 300 нм или менее и D90 равен 400 нм или менее, или Dv равен 200 нм или менее и D90 равен 300 нм или менее).

В одном из воплощений, настоящее изобретение относится к композиции водной суспензии, включающей наночастицы макролидного антибиотика, и предпочтительно, относится к композиции водной суспензии, в которой наночастица имеет Dv, равный 500 нм или менее, и D90, равный 1500 нм или менее. Например, композиция водной суспензии настоящего изобретения включает наночастицы макролидного антибиотика, полученные смешиванием макролидного антибиотика, физиологически приемлемой соли и/или физиологически приемлемого сахарида, физиологически приемлемого полиола и/или воды, и стабилизатора дисперсии.

Авторы настоящего изобретения дополнительно обнаружили, что вышеописанная композиция водной суспензии может быть пригодна для применения в качестве водной фармацевтической композиции с применением поверхностно-активного вещества полиоксиэтилен гидрогенизированного касторового масла и/или загустителя гидроксипропилметилцеллюлозы или метилцеллюлозы в качестве стабилизатора дисперсий. В частности, авторы настоящего изобретения обнаружили, что офтальмологическая местная композиция макролидного антибиотика, включающая полиоксиэтилен гидрогенизированное касторовое масло (НСО-60 (поверхностно-активное вещество)) и гидроксипропилметилцеллюлозу (НРМС (полимерный загуститель)) или метилцеллюлозу (МС (полимерный загуститель)) в качестве стабилизатора дисперсии имеет преимущество по следующим пунктам: взаимодействие со слизистой оболочкой роговицы и конъюнктивы можно ожидать благодаря полимерным соединениям НРМС и МС; обладание способностью удерживаться на роговице можно ожидать вследствие эффекта НРМС или МС и вследствие стабильности наночастиц в композиции; и способность внутриглазной жидкости к перемещению может быть повышена благодаря продленному времени удерживания.

Кроме того, авторы настоящего изобретения обнаружили, что растворимость макролидных антибиотиков может быть повышена путем применения наночастицы в композиции, и таким образом, величина дозы может быть снижена. Кроме того, авторы настоящего изобретения неожиданно обнаружили, что проблема раздражения, вызываемого макролидными антибиотиками, снижается благодаря применению наночастицы или композиции наночастиц настоящего изобретения. С этими результатами авторы изобретения завершили настоящее изобретение.

В одном из воплощений, настоящее изобретение относится к композиции водной суспензии, включающей наночастицы (предпочтительно наночастицы имеют Dv, равный 500 нм или менее, и D90, равный 1500 нм или менее) макролидного антибиотика. Например, настоящее изобретение охватывает композицию водной суспензии, включающей наночастицы (предпочтительно наночастицы имеют Dv, равный 500 нм или менее и D90, равный 1500 нм или менее) макролидного антибиотика и стабилизатор дисперсии. Настоящее изобретение также относится к композиции водной суспензии, в которой стабилизатор дисперсии представляет собой поверхностно-активное вещество(поверхностно-активные вещества), ингибитор(ингибиторы) агрегации и/или модификатор(модификаторы) вязкости. В предпочтительном воплощении настоящего изобретения, поверхностно-активное вещество представляет собой полиоксиэтилен гидрогенизированное касторовое масло 60, полисорбат 80, полиэтиленгликольмоностеарат и/или полиоксиэтиленполиоксипропиленгликоль, и/или ингибитор агрегации представляет собой поливиниловый спирт, полиэтиленгликоль и/или поливинилпирролидон, и/или модификатор вязкости представляет собой метилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу и/или гидроксиэтилцеллюлозу. Например, настоящее изобретение может представлять собой водную суспензию, включающую наночастицы макролидного антибактериального лекарственного средства, которое включает НСО-60 (поверхностно-активное вещество), и НРМС или МС (полимерный загуститель) в качестве стабилизатора дисперсий.

В другом воплощении, настоящее изобретение относится к водной фармацевтической композиции, включающей наночастицы макролидного антибиотика, которая необязательно включает стабилизатор дисперсии. В настоящем описании, водная фармацевтическая композиция означает водную жидкую или гелеобразную фармацевтическую композицию, и конкретно означает фармацевтическую композицию, в которой наночастицы макролидного антибиотика суспендированы в водной жидкости. Таким образом, фармацевтическая композиция, примененная в настоящем документе, означает водную фармацевтическую композицию, если не указано иное. Водная фармацевтическая композиция включает инъекции и местные композиции. Местная композиция, примененная в настоящем документе, означает водные композиции для местного применения, если не указано иное.

Конкретно, инъекция настоящего изобретения может представлять собой инъекцию для лечения или предупреждения системного или местного воспалительного заболевания или системного или местного инфекционного заболевания, и включает внутривенные инъекции, подкожные инъекции, внутримышечные инъекции, внутривенные капельные вливания и им подобные. Местная композиция включает офтальмологическую композицию для местного применения, ушную композицию для местного применения, назальную композицию для местного применения и легочную композицию для местного применения. Более конкретно, местная композиция включает фармацевтическую композицию для лечения или предупреждения воспалительных заболеваний или инфекционных заболеваний глаза, уха, носа или легких. Например, местная композиция включает глазные капли, ушные капли, капли для носа и ингаляторы. Местная композиция настоящего изобретения может предпочтительно представлять собой офтальмологическую местную композицию для лечения или предупреждения офтальмологических воспалительных заболеваний или офтальмологических инфекционных заболеваний, ушную местную композицию для лечения или предупреждения отогенных воспалительных заболеваний или отогенных инфекционных заболеваний, назальную местную композицию для лечения или предупреждения назальных воспалительных заболеваний или назальных инфекционных заболеваний или легочную местную композицию для лечения или предупреждения легочных воспалительных заболеваний или легочных инфекционных заболеваний.

Водная фармацевтическая композиция настоящего изобретения может быть применена для лечения или предупреждения воспалительного заболевания или инфекционного заболевания посредством местного введения эффективной дозы композиции нуждающемуся в этом пациенту. В одном из воплощений, настоящее изобретение относится к способу лечения или предупреждения воспалительных заболеваний или инфекционных заболеваний, включающему введение эффективной дозы композиции водной суспензии нуждающемуся в этом пациенту, в котором композиция водной суспензии включает наночастицы макролидного антибиотика и, необязательно, стабилизатор дисперсии или эффективную дозу фармацевтической композиции, включающей такую композицию водной суспензии. Например, настоящее изобретение охватывает способ лечения или предупреждения воспалительных заболеваний или инфекционных заболеваний, включающий местное введение эффективной дозы местной композиции нуждающемуся в этом пациенту, в которой местная композиция включает наночастицы макролидного антибиотика и при необходимости стабилизатор дисперсии.

Альтернативно, настоящее изобретение относится к применению наночастиц макролидного антибиотика (и при необходимости стабилизатора дисперсии) для получения водных фармацевтических композиций (например, инъекции и местные композиции). Настоящее изобретение также включает применение композиции водной суспензии, включающей наночастицы (предпочтительно наночастицы имеют Dv, равный 500 нм или менее, и D90, равный 1500 нм или менее) макролидного антибиотика (и необязательно стабилизатор дисперсии) для получения водных фармацевтических композиций (например, инъекций и местных композиций).

Термин «макролидный антибиотик», применяемый в настоящем документе, конкретно не ограничен при условии, что он представляет собой соединение, имеющее макролидный скелет, и обладает антибактериальной активностью. Макролидный скелет может представлять собой макролид с 14-16-членным кольцом, предпочтительно, макролид с 14-членным кольцом. Макролидный антибиотик может включать, например, эритромицин, кларитромицин, рокситромицин, азитромицин, джозамицин, рокситромицин и китасамицин, предпочтительно, он представляет собой эритромицин, кларитромицин и азитромицин, и наиболее предпочтительно, представляет собой кларитромицин.

Термин «композиция водной суспензии», применяемый в настоящем документе, означает водную жидкую композицию, в которой суспендированы наночастицы макролидного антибиотика, и, предпочтительно, композицию водной суспензии для медицинского применения. Композиция водной суспензии и фармацевтическая композиция настоящего документа могут быть вязкими при условии, что это не мешает применять ее в качестве фармацевтического лекарственного средства, и может также включать гелеобразные композиции в качестве жидких композиций. Композиция водной суспензии и фармацевтическая композиция настоящего документа включают инъекции и местные композиции. Термин «местный», применяемый в настоящем документе, означает часть тела, такую как пораженные участки, область вокруг пораженного участка или орган пораженного участка, и, предпочтительно, глаз, ухо, нос (верхние дыхательные пути) и легкие (нижние дыхательные пути). Термин «композиция для местного применения» означает фармацевтическую композицию для целей местного введения. Местные композиции предпочтительно представляют собой офтальмологические местные композиции (например, глазные капли), ушные местные композиции (например, ушные капли), назальные местные композиции (например, капли для носа) и легочные местные композиции (например, ингаляторы). Сама по себе композиция водной суспензии настоящего документа может представлять собой фармацевтическую композицию, вводимую в качестве фармацевтического продукта или, альтернативно, композиция водной суспензии может представлять собой компонент, который обеспечивает вводимую фармацевтическую композицию (например, необработанный ингредиент для фармацевтической композиции) путем добавления.

Композиция водной суспензии настоящего документа демонстрирует любое одно или два или более из следующих свойств: (1) невооруженным глазом не наблюдается никакого осадка, (2) прозрачность высокая, и (3) микроскопически не обнаружено агрегатов или кристаллов, предпочтительно, через 24 часа (предпочтительно, через 2 дня, 3 дня, 4 дня, 5 дней, 6 дней или 7 дней) после диспергирования путем перемешивания или ему подобного (при комнатной температуре). Композиция водной суспензии, включающая наночастицы макролидного антибиотика настоящего документа, предпочтительно такая, что невооруженным глазом не наблюдают никакого осадка, с высокой прозрачностью и агрегаты или кристаллы микроскопически не обнаруживают через 7 дней от момента запечатывания в пробирке.

Прозрачность определяли в соответствии с тестом на прозрачность, описанным в Японской фармакопее. Конкретно, прозрачность может быть определена с помощью следующей процедуры: раствор сравнения для определения непрозрачности готовили добавлением воды к 5 мл стандартной эмульсии формазина до общего объема, равного 100 мл. Тестируемую композицию водной суспензии и недавно приготовленный раствор сравнения для определения непрозрачности вливали в бесцветную пробирку из прозрачного стекла с плоским дном, имеющую внутренний диаметр 15 мм, до тех пор, пока слой раствора не достигал глубины 30 мм или 40 мм, соответственно, их наблюдали и сравнивали с вышеописанным на окрашенном в черный цвет фоне по светорассеянию. Если прозрачность тестируемой композиции водной суспензии была такой же, как у воды или примененного растворителя, или если степень непрозрачности тестируемой композиции водной суспензии была такой же или меньше, чем мутность раствора сравнения, то прозрачность определяли как высокую. Альтернативно, тестируемая композиция водной суспензии и недавно приготовленный раствор сравнения для определения непрозрачности могут быть протестированы на прозрачность с помощью спектроскопии в ультрафиолетовой и видимой области, в которой измеряли пропускание при 660 нм, применяя ячейку, имеющую длину слоя, равную 50 мм, и применяя воду или растворитель в качестве контроля. Когда пропускание тестируемой композиции водной суспензии равно или выше пропускания раствора сравнения для определения непрозрачности, прозрачность может быть определена как высокая.

В другом воплощении, местная композиция настоящего изобретения представляет собой офтальмологическую местную композицию, имеющую высокую способность удерживаться на роговице. Способность удерживаться на роговице тестируемой композиции водной суспензии может быть проанализирована в соответствии, например, со способом, описанным в работе Jonas, J. Kuehne et al., Am J Ophthalmol (2004) 138:547-553. Конкретно, тестируемая водная суспензия лекарственного средства может быть введена в глаз кролика, и измеряют концентрацию лекарственного средства в роговице. Если концентрация лекарственного средства в роговице выше, чем этот параметр, измеренный для введения стандартного раствора (например, для композиции, о которой сообщается, что она была протестирована в качестве офтальмологической композиции для местного применения, например, для кларитромицина, суспензия гранул кларитромицина в стерилизованной воде для перорального введения (смотри работу Jonas, J. Kuehne et al., Am J Ophthalmol (2004) 138:547-553), тоже самое применяют далее в настоящем документе), то способность тестируемой водной суспензии удерживаться на роговице может быть определена как высокая.

В воплощении, композиция водной суспензии настоящего изобретения представляет собой композицию водной суспензии, которая не вызывает сильного раздражения. Термин «не вызывает сильного раздражения», применяемый в настоящем документе, означает, что степень реакции на раздражение (например, воспалительные реакции, такие как покраснение, отек и/или гиперемия) при введении субъекту была меньше, чем реакции на раздражение, вызванные введением применяемой ранее водной композиции, включающей те же самые эффективные лекарственные средства. Степень раздражения тестируемой композиции водной суспензии может быть определена, например, в соответствии со способом, описанным в работе Jonas, J. Kuehne et al., Am J Ophthalmol (2004) 138:547-553, путем введения тестируемой композиции водной суспензии в глаз кролика и измерения степени воспаления в глазу. Если степень воспаления была ниже, чем для стандартного раствора (такого же, как описан выше), то раздражение, вызываемое тестируемой композицией водной суспензии, определяли как низкое. Более конкретно, раздражение, вызываемое глазными каплями, может быть определено с помощью нанесения композиции макролидного антибиотика в концентрации 1,0% в глаз от одного до 20 раз в день с интервалом от 30 минут до нескольких часов, наблюдения роговицы, радужной оболочки и конъюнктивы в следующие моменты: перед введением и через 1, 3, 5 и 24 часа после последнего введения, и расчета результатов в соответствии с критериями оценки Дрейзера (смотри OECD GUIDELINES FOR TESTING OF CHEMICALS 405 (24 Feb. 1987) Acute Eye Irritation/Corrosion).

Термин «поверхностно-активное вещество», применяемое в настоящем документе, конкретно, не ограничен, при условии, что вещество может быть введено человеку в качестве фармацевтической добавки, которая не обладает токсичностью и не препятствует активности макролидных антибиотиков. Примеры могут включать (i) неионные поверхностно-активные вещества, такие как блок-сополимеры полиоксиэтилена (именуемый в дальнейшем в настоящем документе как «РОЕ»)-полиоксипропилена (именуемый в дальнейшем в настоящем документе как «РОР»), такие как полоксамер 407, полоксамер 235 и полоксамер 188; аддукты блок-сополимеров полиоксиэтилена-полиоксипропилена и этилендиамина, такие как полоксамин; РОЕ сложные эфиры сорбита и жирных кислот, такие как РОЕ (20) монолаурат сорбита (полисорбат 20), РОЕ (20) моноолеат сорбита (полисорбат 80), и полисорбат 60; РОЕ-гидрогенизированные касторовые масла, такие как РОЕ (60)-гидрогенизированное касторовое масло; РОЕ-алкиловые эфиры, такие как РОЕ (9) лауриловый эфир; РОЕ/РОР-алкиловые эфиры, такие как РОЕ (20)-РОР (4)-цетиловый эфире; РОЕ алкилфениловые эфиры, такие как РОЕ (10)-нонилфениловый эфир; РОЕ/POP гликоли, такие как РОЕ (105)-РОР (5)-гликоль, РОЕ (120)-РОР (40)-гликоль, РОЕ (160)-РОР (30)-гликоль, РОЕ (20)-РОР (20)-гликоль, РОЕ (200)-РОР (70)-гликоль, РОЕ (3)-РОР (17)-гликоль, РОЕ (42)-РОР (67)-гликоль, РОЕ (54)-РОР (39)-гликоль и РОЕ (196)-РОР (67)-гликоль; (ii) амфотерные поверхностно-активные вещества, такие как глицин, амфотерные поверхностно-активные вещества, такие как алкиламиноэтилглицин, бетаин-ацетатные амфотерные поверхностно-активные вещества, такие как бетаин лаурил-диметиламиноуксусной кислоты, и имидазолиновые амфотерные поверхностно-активные вещества; (iii) анионные поверхностно-активные вещества, такие как фосфаты РОЕ-алкильного эфира и их соли, такие как РОЕ (10)-лаурилэфир натрия фосфат; соли N-ациламинокислоты, такие как натрия лауроилметилаланин; алкиловый эфир соли карбоновой кислоты; соли N-ацилтаурина, такие как натрия N-кокосовой кислоты N-метилтаурат; сульфонаты, такие как натрия С14-16-олефин-сульфонат; алкилсульфаты, такие как натрия лаурилсульфат; РОЕ алкилэфиров сульфаты, такие как РОЕ (3)-лаурилэфира сульфат натрия; и α-олефин-сульфонат; (iv) катионные поверхностно-активные вещества, такие как соли алкиламина; четвертичные соли алкиламмония, такие как хлорид бензалкония, хлорид бензетония; и соли алкилпиридиния, такие как цетилпиридиния хлорид, цетилпиридиния бромид. Композиция водной суспензии настоящего изобретения может содержать одно или два или более поверхностно-активных веществ. Поверхностно-активное вещество предпочтительно представляет собой полиоксиэтилен-гидрогенизированное касторовое масло 60 (НСО-60), полисорбат 80 (Tween 80), моностеарат полиэтиленгликоля (MYS-40), и/или полиоксиэтиленполиоксипропиленгликоль.

Термин «ингибитор агрегации», применяемый в настоящем документе, конкретно не ограничен при условии, что это вещество может ингибировать агрегацию макролидного антибиотика, может быть введен человеку, не обладает токсичностью и не препятствует активности макролидного антибиотика. Примеры включают алкилсульфат; соль N-алколоилметилтаурина; этанол; глицерин; пропиленгликоль; натрия цитрат; фосфолипиды, такие как глицерофосфолипид (лецитин (фосфатидилхолин) (например, очищенный лецитин соевых бобов, гидрогенизованный лецитин соевых бобов), фосфатидилсерин, фосфатидилэтаноламин, фосфатидилинозитол, фосфатидную кислоту, фосфатидилглицерин, лизофосфатидилхолин, лизофосфатидилсерин, лизофосфатидилэтаноламин, лизофосфатидилинозитол, лизофосфатидную кислоту и лизофосфатидилглицерин), и сфингофосфолипид (сфингомиелин, церамид, гликосфинголипид или ганглиозид); D-сорбитол; лактозу; ксилит; аравийскую камедь; сложный эфир сахарозы и жирных кислот; полиоксиэтилен гидрогенизированное касторовое масло; сложный эфир полиоксиэтилена и жирных кислот; полиэтиленгликоль (PEG); сложный эфир полиоксиэтилена сорбитана и жирных кислот; алкилбензола сульфонат; сульфосукцинат; полиоксиэтиленполиоксипропиленгликоль; поливинилпирролидон (PVP); поливиниловый спирт (PVA); гидроксипропилцеллюлозу (НРС); метилцеллюлозу (МС); гидроксиэтилцеллюлозу (НЕС); гидроксипропилметилцеллюлозу (НРМС); кармеллозу натрия; карбоксивиниловый полимер (CVP); N-ацил-глутамат; сополимер акриловой кислоты; сополимер метакриловой кислоты; казеин натрия; L-валин; L-лейцин; L-изолейцин; бензалкония хлорид; и бензетониума хлорид. Композиция водной суспензии настоящего изобретения может содержать один или два или более ингибиторов агрегации. Предпочтительные ингибиторы агрегации представляют собой поливиниловый спирт (PVA), полиэтиленгликоль (PEG) и/или поливинилпирролидон (PVP).

Термин «модификатор вязкости», применяемый в настоящем документе, не ограничен при условии, что вещество может модифицировать вязкость композиции водной суспензии, может быть введен человеку в качестве не обладающей токсичностью фармацевтической добавки и не препятствует активности макролидного антибиотика. Примеры могут включать полисахариды или их производные (аравийскую камедь, камедь карайи, ксантановую камедь, камедь рожкового дерева, гуаровую камедь, камедь гваяковы, семена айвы, камедь Дармана, камедь трагаканта, бензойная смола, камедь бобов рожкового дерева, казеин, агар, альгиновую кислоту, декстрин, декстран, каррагинан, желатин, коллаген, пектин, крахмал, полигалактуроновую кислоту, хитин и его производные, хитозан и его производные, эластин, гепарин, гепариноид, гепарина сульфат, гепарана сульфат, гиалуроновую кислоту, хондроитин сульфат и им подобные), церамид, производные целлюлозы (метилцеллюлозу, этилцеллюлозу, гидроксиэтилцеллюлозу, гидроксипропилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу, карбоксиметилцеллюлозу, карбоксиэтилцеллюлозу, целлюлозу, нитрат целлюлозы и им подобные), поливиниловый спирт (полностью или частично омыленный), поливинилпирролидон, макрогол, поливинилметакрилат, полиакриловую кислоту, карбоксивиниловый полимер, полиэтиленимин, полиэтиленоксид, полиэтиленгликоль, рибонуклеиновую кислоту, дезоксирибонуклеиновую кислоту, сополимер метилвинилового эфира и малеинового ангидрида и их физиологически приемлемые соли (например, натрия альгинат). Композиция водной суспензии настоящего изобретения может содержать один или два или более модификаторов вязкости. Предпочтительные модификаторы вязкости представляют собой метилцеллюлозу (МС), гидроксипропилметилцеллюлозу (НРМС) и/или гидроксиэтилцеллюлозу (НЕС).

Стабилизатор дисперсии, применяемый в настоящем документе, предпочтительно представляет собой поверхностно-активное вещество и/или загуститель, более предпочтительно, полиоксиэтилен гидрогенизированное касторовое масло, гидроксипропилметилцеллюлозу и/или метилцеллюлозу, и может представлять собой полиоксиэтилен гидрогенизированное касторовое масло и гидроксипропилметилцеллюлозу или полиоксиэтилен гидрогенизированное касторовое масло и метилцеллюлозу.

В настоящем документе, поверхностно-активное вещество, ингибитор агрегации, и/или модификатор вязкости (далее в этом абзаце настоящего документа называемые «средство»), которые также могут быть применены в качестве стабилизатора дисперсии, могут присоединиться к поверхности или могут быть адсорбированы на поверхности наночастиц макролидного антибиотика. Данные средства, добавленные до стадии измельчения, могут присоединяться к поверхности или могут быть адсорбированы на поверхности наночастиц макролидного антибиотика, таким образом, защищая наночастицы от агрегации на стадии измельчения. Кроме того, присоединение и адсорбция данных средств на поверхности наночастиц макролидного антибиотика обладают эффектом предотвращения агрегации в композиции водной суспензии. В настоящем описании, присоединение и адсорбция поверхностно-активного вещества, ингибитора агрегации и/или модификатора вязкости, примененных в качестве стабилизатора дисперсии на поверхности наночастиц макролидного антибиотика, означает, что, по меньшей мере, часть этих средств присоединяется или адсорбируется на поверхности наночастиц (способствуя модификации поверхности), но вовсе не означает отсутствие существования данных средств без присоединения или без адсорбции на поверхности в композиции водной суспензии. Другими словами, поверхностно-активное вещество, ингибитор агрегации и/или модификатор вязкости, примененные в качестве стабилизатора дисперсии, могут модифицировать поверхность наночастиц макролидного антибиотика и, следовательно, могут рассматриваться как «модификатор поверхности» макролидного антибиотика.

Макролидный антибиотик, содержащийся в композиции водной суспензии настоящего изобретения, находится в форме наночастиц. Средний диаметр частиц (Dv) макролидного антибиотика равен 500 нм или менее, предпочтительно, 400 нм или менее, 300 нм или менее, 200 нм или менее, 150 нм или менее, и наиболее предпочтительно, 145 нм или менее. Например, средний диаметр частиц макролидного антибиотика может находиться в диапазоне от 20 до 500 нм, 20 до 400 нм, 20 до 300 нм, и 20 до 200 нм, предпочтительно 50 до 400 нм, 50 до 300 нм, 50 до 200 нм, и 50 до 150 нм. 90% диаметр (D90) макролидного антибиотика равен 1500 нм или менее, предпочтительно 1200 нм или менее, 1000 нм или менее, 800 нм или менее, 700 нм или менее, 600 нм или менее, 500 нм или менее, 400 нм или менее, 300 нм или менее, 200 нм или менее, и наиболее предпочтительно 197 нм или менее. Например, 90% диаметр (D90) макролидного антибиотика может находиться в диапазоне от 50 до 1200 нм, от 50 до 1000 нм, от 50 до 800 нм и от 50 до 700 нм, предпочтительно, от 80 до 800 нм, от 80 до 700 нм, от 80 до 600 нм, от 80 до 500 нм, и более предпочтительно, от 100 до 600 нм, от 100 до 500 нм, от 100 до 400 нм и от 100 до 300 нм. Поскольку макролидный антибиотик, эффективный ингредиент, находится в форме наночастиц в композиции водной суспензии, композиция может быть стерилизована с помощью фильтра, который позволяет проводить легкую стерилизацию, не влияя на физико-химические свойства активного ингредиента.

Наночастица макролидного антибиотика, содержащаяся в композиции водной суспензии настоящего изобретения, предпочтительно представляет собой наночастицы, полученные смешиванием макролидного антибиотика, физиологически приемлемой соли и/или физиологически приемлемого сахарида, физиологически приемлемого полиола и/или воды и стабилизатора дисперсии. Более предпочтительно, наночастица макролидного антибиотика настоящего изобретения, представляет собой наночастицы, которые получают смешиванием макролидного антибиотика, физиологически приемлемой соли и/или физиологически приемлемого сахарида, физиологически приемлемого полиола и/или воды и стабилизатора дисперсии, и добавлением лецитина во время или после измельчения в порошок.

Полезные эффекты изобретения

Композиция водной суспензии, включающая наночастицы макролидного антибиотика (и стабилизатор дисперсии) настоящего изобретения, имеет хорошую прозрачность, (долговременную) диспергируемость, стабильность при хранении, способность удерживаться на роговице и способствует перемещению внутриглазной жидкости, не вызывает сильного раздражения, легко стерилизуется, обладает хорошей стабильностью во времени и стабильностью в дисперсии, и, следовательно, может быть применена в качестве фармацевтической композиции для парентерального введения.

Краткое описание чертежей

Фигура 1 представляет собой график, показывающий изменения во времени концентрации кларитромицина в плазме. На фигуре, ордината относится к концентрации кларитромицина (нг/мл) в плазме, и абсцисса означает истекшее время (часы). На фигуре, кружками обозначена 0,3%-ная наноразмерная композиция, квадратиками обозначена 1%-ная наноразмерная композиция и треугольниками обозначена 1%-ная крупноразмерная порошковая композиция.

Фигура 2 представляет собой график, показывающий изменения во времени концентрации кларитромицина во внутриглазной жидкости. На фигуре, ордината относится к концентрации кларитромицина (нг/мл) во внутриглазной жидкости, и абсцисса означает прошедшее время (часы). На фигуре, кружками обозначена 0,3% наноразмерная композиция, квадратиками обозначена 1%-ная наноразмерная композиция и треугольниками обозначена 1%-ная крупноразмерная порошковая композиция.

Фигура 3 представляет собой график, показывающий изменения во времени концентрации кларитромицина в конъюнктиве. На фигуре, ордината относится к концентрации кларитромицина (нг/мл) в конъюнктиве, и абсцисса означает прошедшее время (часы). На фигуре, кружками обозначена 0,3%-ная наноразмерная композиция, квадратиками обозначена 1%-ная наноразмерная композиция и треугольниками обозначена 1%-ная крупноразмерная порошковая композиция.

Фигура 4 представляет собой график, показывающий результаты теста эффективность лекарственного средства в соответствии с критериями оценки по Hatano et al. и Nakamura et al. Ордината относится к оценке в баллах, и абсцисса означает число дней, прошедших с момента инокуляции бактериальной жидкости. Черный кружок обозначает контрольную группу (растворитель), белый кружок обозначает группу, которой был введен AzaSite, черный треугольник обозначает группу, которой была введена композиция 0,3%-ного наноразмерного кларитромицина, белый треугольник обозначает группу, которой была введена композиция 1%-ного наноразмерного кларитромицина, и черный квадрат группу, которой была введена композиция 1%-ого кларитромицина в виде крупноразмерного порошка. Значение относится к средним значениям, и величина ошибки относится к стандартному отклонению.

Фигура 5 представляет собой график, показывающий результаты теста на эффективность лекарственного средства в соответствии с критериями оценки по Draize et al. Ордината относится к результату, и абсцисса означает число дней, прошедших с момента инокуляции бактериальной жидкости. Черный кружок обозначает контрольную группу (растворитель), белый кружок обозначает группу, которой был введен AzaSite, черный треугольник обозначает группу, которой была введена композиция 0,3%-ного наноразмерного кларитромицина, белый треугольник обозначает группу, которой была введена композиция 1%-ного наноразмерного кларитромицина, и черный квадрат группу, которой была введена композиция 1%-ого кларитромицина в виде крупноразмерного порошка. Значение относится к средним значениям, и величина ошибки относится к стандартному отклонению.

Фигура 6 представляет собой график, показывающий результаты теста на эффективность лекарственного средства в соответствии с критериями оценки по Hatano et al. и Nakamura et al. Ордината относится к результату, и абсцисса означает число дней, прошедших с момента инокуляции бактериальной жидкости. Черный кружок обозначает контрольную группу (растворитель), белый кружок обозначает группу, которой был введен AzaSite, черный треугольник обозначает группу, которой была введена композиция 0,3%-ного наноразмерного кларитромицина, белый треугольник обозначает группу, которой была введена композиция 1%-ного наноразмерного кларитромицина, и черный квадрат группу, которой была введена композиция 1%-ого кларитромицина в виде крупноразмерного порошка. Значение относится к средним значениям, и величина ошибки относится к стандартному отклонению.

Фигура 7 представляет собой график, показывающий результаты теста на эффективность лекарственного средства в соответствии с критериями оценки по Draize et al. Ордината относится к результату, и абсцисса означает число дней, прошедших с момента инокуляции бактериальной жидкости. Черный кружок обозначает контрольную группу (растворитель), белый кружок обозначает группу, которой был введен AzaSite, черный треугольник обозначает группу, которой была введена композиция 0,3%-ного наноразмерного кларитромицина, белый треугольник обозначает группу, которой была введена композиция 1%-ного наноразмерного кларитромицина, и черный квадрат группу, которой была введена композиция 1%-ого кларитромицина в виде крупноразмерного порошка. Значение относится к средним значениям, и величина ошибки относится к стандартному отклонению.

Осуществление изобретения

1. Композиция водной суспензии, включающая тонкодисперсные частицы макролидного антибиотика

Тонкодисперсная частица макролидного антибиотика может быть получена смешиванием макролидного антибиотика, физиологически приемлемой соли и/или физиологически приемлемого сахарида, физиологически приемлемого полиола и/или воды, и стабилизатора дисперсии. Тонкодисперсная частица макролидного антибиотика настоящего изобретения может быть предпочтительно получена добавлением к ней лецитина во время или после стадии измельчения.

Полиол, применяемый для получения тонкодисперсной частицы макролидного антибиотика, конкретно не ограничен при условии, что его можно принимать без каких-либо физиологических проблем. Предпочтительно, физиологически приемлемые полиолы это полиолы с плохо растворимыми солями, хорошо растворимые в воде, имеющие низкую температуру замерзания и/или высокую точку воспламенения. Для легкого удаления после измельчения в порошок, предпочтительно, чтобы физиологически приемлемый полиол хорошо растворялся в воде.

Полиол включает, например, глицерин, пропиленгликоль, полиэтиленгликоль, дипропиленгликоль и диэтиленгликоль, и предпочтительно, представляет собой пропиленгликоль или глицерин. Вязкость полиола предпочтительно равна от 1 до 100000 (мПа⋅с), более предпочтительно, от 5 до 10000 (мПа⋅с), и более предпочтительно, от 10 до 2000 (мПа⋅с).

Количество примененного полиола предпочтительно равно от 0,2 до 50 частей по массе, более предпочтительно, от 0,4 до 15 частей по массе, и более предпочтительно, от 0,6 до 10 частей по массе, по отношению к 1 части по массе органического соединения, которое надлежит измельчить. Тип примененного полиола может быть надлежащим образом определен в соответствии с растворимостью органического соединения, которое надлежит измельчить. Может быть применен один тип полиола или, альтернативно, может быть применена смесь двух или более типов полиолов.

Соль, применяемая для способа получения данного воплощения, конкретно не ограничена при условии, что ее можно принимать без каких-либо физиологических проблем. Физиологически приемлемые соли предпочтительно плохо растворимы в полиолах, хорошо растворимы в воде и/или имеют низкую гигроскопичность и подходящую твердость для тонкого измельчения в порошок органического соединения. Более предпочтительно, соль обладает двумя или более из этих свойств. Степень растворимости соли в полиоле предпочтительно равна 10% (масс./объем) или менее. Для легкого удаления соли после измельчения в порошок, соль предпочтительно имеет высокую растворимость в воде.

Предпочтительно, соль включает натрия хлорид, калия хлорид, аммония хлорид, натрия сульфат, магния сульфат, калия сульфат, кальция сульфат, натрия малат, натрия цитрат, динатрия цитрат, натрия дигидроцитрат, калия дигидроцитрат, натрия дигидрофосфат, калия дигидрофосфат, динатрия гидрофосфат и дикалия гидрофосфат. Предпочтительно, соль включает натрия хлорид, калия хлорид, магния сульфат, кальция сульфат, натрия цитрат, натрия дигидрофосфат, калия дигидрофосфат, динатрия гидрофосфат и дикалия гидрофосфат, и более предпочтительные, соль представляет собой натрия хлорид.

Диаметр частицы соли регулируют тонким измельчением или тому подобным, перед смешиванием с макролидным антибиотиком. При заблаговременном регулировании диаметра частицы соли, Dv частицы может быть равен, например, от 5 до 300 мкм, от 10 до 200 мкм, но предпочтительно, от 0,01 до 300 мкм, более предпочтительно, от 0,1 до 100 мкм и, более предпочтительно, от 0,5 до 50 мкм. Количество примененной соли предпочтительно равно от 0 до 100 частей по массе, более предпочтительно, от 0,2 до 50 частей по массе и, более предпочтительно, от 0,5 до 30 частей по массе, по отношению к 1 части по массе органического соединения. Может быть применен один тип соли или, альтернативно, может быть применено два или более типов соли в смеси.

Тонкодисперсную частицу макролидного антибиотика настоящего изобретения получают, например, путем выполнения следующих стадий в таком порядке: «стадия измельчения», «стадия смешивания с лецитином», «стадия фильтрования и промывания водой» и «стадия высушивания». «Стадия измельчения» и «стадия смешивания с лецитином» могут быть объединены в одну стадию, в которой лецитин добавляют к измельчаемым частицам во время измельчения частиц в порошок. Суспензия, включающая тонкодисперсные частицы макролидного антибиотика, предпочтительно может быть получена добавлением диспергатора, при необходимости, к тонкодисперсным частицам макролидного антибиотика, полученным с помощью любой из вышеописанных стадий, и смешиванием тонкодисперсных частиц с водой. Например, суспензия, включающая тонкодисперсные частицы макролидного антибиотика, может быть произведена путем получения тонкодисперсных частиц макролидного антибиотика посредством следующих стадий: «стадия измельчения» и «стадия смешивания с лецитином», за которыми следуют стадии: «стадия фильтрования и промывания водой» и «стадия высушивания», добавления диспергатора, при необходимости, к тонкодисперсным частицам макролидного антибиотика, и смешивания с водой. «Стадия измельчения», «стадия смешивания с лецитином», «стадия фильтрования (отделения) и промывания водой» и «стадия высушивания» подробно описаны ниже.

Стадия измельчения

В способе получения тонкодисперсных частиц макролидного антибиотика, нет особых ограничений в отношении мельницы для тонкого помола, применяемой для влажного измельчения в порошок макролидных антибиотиков при условии, что она может механически измельчать макролидные антибиотики. Мельница для тонкого помола может включать обычно применяемые мельницы, такие как смесители, двухвалковые, трехвалковые, прорезные мельницы, дробильные вальцы Гувера, смеситель распылители с дискообразным ножом и двуосные экструдеры.

Измельчение в порошок макролидного антибиотика может быть предпочтительно достигнуто путем подачи органического соединения, соли и стабилизатора дисперсии в мельницу для тонкого помола, и замешивания с постепенным добавлением к ним полиола. Вязкость во время замешивания может быть надлежащим образом определена в зависимости от типа макролидного антибиотика, который надлежит измельчить, соли и полиола. Температура измельчения в порошок может быть надлежащим образом определена в соответствии с макролидным антибиотиком, который надлежит измельчить, типа мельницы для тонкого помола и тому подобного. Температура измельчения в порошок в особенности не ограничена при условии, что она снижает плавление или разрушение макролидного антибиотика, и предпочтительно равна от -50 до 50°C, более предпочтительно, -20 до 30°C, и наиболее предпочтительно -10 до 25°C. Продолжительность измельчения в порошок также может быть определена в соответствии с макролидным антибиотиком, который надлежит измельчить, типом мельницы для тонкого помола и тому подобного. Продолжительность измельчения в порошок может быть равна, например, примерно от 0,5 до 50 часов, предпочтительно, равна от 1 до 30 часов, более предпочтительно, от 1,5 до 20 часов, и наиболее предпочтительно, от 2 до 10 часов.

Количество примененного стабилизатора дисперсии предпочтительно равно от 0,002 до 10 частей по массе, более предпочтительно, от 0,01 до 5 частей по массе, и более предпочтительно, от 0,1 до 1 частей по массе, по отношению к 1 части по массе макролидного антибиотика, который надлежит измельчить. Тип примененного стабилизатора дисперсии может быть надлежащим образом определен в соответствии с типом органического соединения, которое надлежит измельчить. Может быть применен один тип стабилизатора дисперсии или альтернативно два или более различных типа стабилизатора может быть применено в смеси.

Стадия смешивания с лецитином

Лецитин замешивают с перемешанным продуктом во время или после измельчения в порошок. Перемешанный продукт не обязательно содержит стабилизатор дисперсии. Стадия смешивания с лецитином может быть выполнена добавлением лецитина в мельнице для тонкого помола после или во время измельчения в порошок, и замешивание продолжают в той же самой мельнице для тонкого помола. Альтернативно, стадия смешивания с лецитином также может быть выполнена с применением различных устройств для смешивания (другой смеситель), путем переноса перемешанного продукта после измельчения в порошок в другой смеситель, добавления к нему лецитина и смешивания перемешанного продукта с лецитином. Количество примененного лецитина предпочтительно равно от 0,01 до 10 частей по массе, более предпочтительно, от 0,05 до 2 частей по массе, и более предпочтительно, от 0,1 до 1,0 частей по массе, по отношению к 1 части по массе макролидного антибиотика, который надлежит измельчить. Лецитин может быть добавлен отдельно или альтернативно добавлен в форме смеси с полиолом. В последнем случае, отношение смешивания (массовое отношение) полиола к лецитину равно от 1 до 10 частей по массе, более предпочтительно, от 1,5 до 5 частей по массе, и, более предпочтительно, от 2 до 4 частей по массе, по отношению к 1 части по массе лецитина.

Стадия фильтрования (отделения) и промывания водой

После смешивания с лецитином соль и полиол удаляют, при необходимости, с помощью фильтрования и промывания водой. Конкретно, перемешанный продукт после смешивания с лецитином добавляют к растворителю, который замешивают до гомогенного состояния с помощью гомогенизатора или ему подобного устройства, с последующим фильтрованием и промыванием водой, посредством чего соль и полиол могут быть удалены. Растворитель, применяемый для замешивания до гомогенного состояния перемешанного продукта, конкретно не ограничен, поскольку полиол и соль легко растворяются, а тонко измельченный макролидный антибиотик практически не растворяется, и он представляет собой физиологически приемлемый растворитель. Предпочтительно, чтобы таким растворителем была вода, но другие растворители также могут быть применены. Растворитель, отличный от воды, включает смешанные растворы воды и органического растворителя, такие как уксусная кислота, метанол или этанол. Способ фильтрования, конкретно, не ограничен и может быть выполнен с помощью хорошо известного способа фильтрования примесей, содержащихся в макролидных антибиотиках. Способ фильтрования включает способ фильтрования при пониженном давлении, способ фильтрования под давлением и способ с применением мембраны для ультрафильтрации. Соль и полиол также можно удалить как фильтрацией, так и способом отделения с помощью центрифугирования. Конкретно, в способе отделения центрифугированием, перемешанный продукт после замешивания лецитина добавляли к растворителю и перемешивали до гомогенности с помощью гомогенизатора или ему подобного устройства, и в дальнейшем мелко измельченное органическое соединение осаждали с помощью центробежного сепаратора для удаления супернатанта. Соль и полиол могут быть удалены повторением этой процедуры. Электрическая проводимость супернатанта может быть измерена для определения момента времени, в который можно остановить промывание. Более конкретно, например, если электрическая проводимость супернатанта равна 10 мкСм/см, то концентрация хлорида натрия может быть оценена как равная примерно 5 ppm. Электрическая проводимость, при которой останавливают промывание, может быть определено в соответствии со свойствами материала.

Мелко измельченные частицы макролидного антибиотика обычно имеют высокую поверхностную энергию и, следовательно, легко агрегируют. Таким образом, после удаления соли может быть добавлена добавка для ингибирования вторичной агрегации. Ингибитор вторичной агрегации включает алкилсульфат, соли N-алколоилметилтаурина, этанол, глицерин, пропиленгликоль, натрия цитрат, фосфолипиды очищенного лецитина соевых бобов, D-сорбитол, лактозу, ксилит, аравийскую камедь, сложный эфир жирной кислоты и сахарозы, полиоксиэтилен гидрогенизированное касторовое масло, сложные эфиры жирной кислоты и полиоксиэтилена, полиэтиленгликоль, сложный эфир жирной кислоты и полиоксиэтиленсорбитана, алкилбензолсульфонат, сульфосукцинат, полиоксиэтиленполиоксипропиленгликоль, поливинилпирролидон (PVP), поливиниловый спирт (PVA), гидроксипропилцеллюлозу (НРС), метилцеллюлозу (МС), гидроксиэтилцеллюлозу (НЕС), гидроксипропилметилцеллюлозу (НРМС), кармеллозу натрия, карбоксивиниловый полимер (CVP), N-ацилглутамат, сополимер акриловой кислоты, сополимер метакриловой кислоты, казеин натрия, L-валин, L-лейцин, L-изолейцин, бензалкония хлорид и бензетониума хлорид. Алкилсульфат и соль N-алколоилметилтаурина, в особенности, предпочтительны, и натрия додецилсульфат и натрия N-миристоилметилтаурат, в особенности, предпочтительны. Может быть применен один тип ингибитора вторичной агрегации, или альтернативно два или более типа ингибитора вторичной агрегации могут быть применены в смеси.

Стадия высушивания

После удаления соли и полиола из мелко измельченных частиц макролидного антибиотика (в настоящем описании, термин «удаление» означает не только тщательное удаление, но также снижение до определенной степени), при необходимости растворитель, применяемый для удаления соли и т.п., может быть удален из мелко измельченных частиц макролидного антибиотика обработкой высушиванием. Способ высушивания, конкретно, не ограничен и может представлять собой хорошо известный способ высушивания органического соединения. Способ высушивания включает способ высушивания при пониженном давлении, способ сублимационной сушки, способ распылительной сушки и способ лиофилизации из спрея. Температура, продолжительность и тому подобное для высушивания, в особенности, не ограничены, но температура предпочтительно бывает низкой для поддержания химической стабильности частиц лекарственного органического соединения и предупреждения вторичной агрегация частиц, и, следовательно, предпочтительные способ сушки представляет собой способ сушки при пониженном давлении, способ сублимационной сушки, способ распылительной сушки и способ лиофилизации из спрея.

Суспензия

Тонкодисперсные частицы макролидного антибиотика, полученные после завершения любой из следующих стадий: «стадии распыления», «стадии смешивания с лецитином», «стадии фильтрования и промывания водой» и «стадии высушивания» (например, тонкодисперсные частицы макролидного антибиотика, полученные с помощью «стадии распыления» и «стадии смешивания с лецитином»), при необходимости могут быть смешаны с диспергатором, смешаны с водой и, при необходимости, суспендированы с помощью ультразвуковой обработки.

Термин «средний диаметр частиц» или «Dv», упомянутый в настоящем документе, означает средний арифметический диаметр в распределении частиц по диаметру, измеренный с помощью динамического рассеяния света фотонно-корреляционной спектроскопии. Термин 50% диаметр (также называемый медианный диаметр, D50) относится к диаметру частицы, который, основываясь на диаметрах частицы, разделяет целевые порошки на две группы, таким образом, что получается равное количество порошков с большим диаметром и порошков с меньшим диаметром. Термин «90% диаметр» означает диаметр 90% (D90) от общего числа частиц, определенного с помощью подсчета частиц в порядке возрастания от 0% (минимум) до 100% (максимум) от общего числа частиц распределением частиц по диаметру, который измеряют вышеописанным способом измерения. Термин «10% диаметр» означает диаметр 10% (D10) от общего числа частиц, определенного с помощью подсчета частиц в порядке возрастания от 0% (минимум) до 100% (максимум) от общего числа частиц распределением частиц по диаметру, который измеряют вышеописанным способом измерения. В особенности, если композиция водной суспензии, описанная в настоящем документе, обладает вязкостью, то средний диаметр частиц (Dv) и 90% диаметр (D90) означают средний диаметр (Dv) и 90% диаметр (D90) частиц после корректировки вязкости, если не указано иное. Способ измерения с помощью динамического рассеяния света фотонно-корреляционной спектроскопии, способ вычисления распределения частиц по диаметру и способ корректировки вязкости хорошо известны в этой области техники.

2. Фармацевтическая композиция

Настоящее изобретение относится к фармацевтической композиции, включающей наночастицы макролидного антибиотика. Предпочтительно, фармацевтическая композиция настоящего изобретения представляет собой фармацевтическую композицию для парентерального введения, такую как инъекции или композиции для местного нанесения. Термин «композиция для местного применения», применяемый в настоящем документе, означает композицию для целей местного введения или композицию, подходящую для местного применения. Вид фармацевтической композиции, применяемый в настоящем документе, конкретно не ограничен, и лекарственная форма включает офтальмологическую местную композицию (например, глазные капли), ушную местную композицию (например, ушные капли), назальную местную композицию (например, капли для носа), суспензии, мази, кремы, гели, ингаляторы и инъекции (например, инъекции для внутривенного введения, инъекции для подкожного введения, инъекции для внутримышечного введения и внутривенные капельные вливания). Эти композиции могут быть составлены обычными способами. Фармацевтическая композиция настоящего изобретения предпочтительно содержит стабилизатор дисперсии. Композицию для инъекции получают суспендированием наночастиц макролидного антибиотика настоящего изобретения в воде или альтернативно наночастицы также могут быть суспендированы, при необходимости, в солевом растворе или растворе глюкозы. К этому может быть дополнительно добавлен диспергатор, буфер или консервант. Фармацевтическая композиция настоящего изобретения может быть составлена для парентерального введения, такая как инъекция для внутривенного введения, внутримышечного введения или подкожного введения или такая как внутривенные капельные вливания, трансдермальные абсорбенты, трансмукозальный абсорбенты, глазные капли, ушные капли, капли для носа или ингаляторы.

Фармацевтическая композиция настоящего изобретения может содержать физиологически приемлемые носитель (фармацевтическую добавку). Тип фармацевтических добавок, применяемых для получения фармацевтической композиции, пропорция фармацевтических добавок по отношению к эффективному ингредиенту или способ получения фармацевтической композиции может быть надлежащим образом выбран специалистом в этой области техники в зависимости от формы композиции. Применяемые фармацевтические добавки могут представлять собой неорганические или органические вещества или твердые или жидкие вещества, и их обычно добавляют в пропорции от 1% (масс.) до 90% (масс.) по отношению к массе эффективного ингредиента. Конкретные примеры таких веществ включают лактозу, глюкозу, маннитол, декстрин, циклодекстрин, крахмал, сахарозу, алюмометасиликат магния, синтетический силикат алюминия, натрия карбоксиметилцеллюлозу, гидроксипропилкрахмал, кальция карбоксиметилцеллюлозу, ионообменную смолу, метилцеллюлозу (МС), желатин, аравийскую камедь, гидроксипропилцеллюлозу (НРС), гидроксипропилметилцеллюлозу (НРМС), поливинилпирролидон (PVP), поливиниловый спирт (PVA), легкую безводную кремниевую кислоту, магния стеарат, тальк, трагакант, бентонит, вигум, титана оксид, сорбитана сложный эфир жирной кислоты, натрия лаурил сульфат, глицерин, сложный эфир глицерина и жирной кислоты, очищенный ланолин, глицерожелатин, полисорбат, Макрогол, растительные масла, воски, жидкий парафин, белый вазелин, фторуглерод, неионные поверхностно-активные вещества, пропиленгликоль, воду, бензалкония хлорид, соляную кислоту, натрия хлорид, натрия гидроксид, молочную кислоту, натрия, натрия монодигидрофосфат, натрия дигидрофосфат, лимонную кислоту, натрия цитрат, динатрия эдетат, полоксамер 407 и поликарбофил.

Композиция водной суспензии или фармацевтическая композиция настоящего изобретения может быть в комплекте, в форме набора, с внешним пакетом, контейнером, разбавителем, суспендирующим средством и/или инструкцией-вкладышем о способе составления и способе введения. Если композицию водной суспензии или фармацевтическую композицию настоящего изобретения поставляют в форме набора, то различные компоненты композиции водной суспензии или фармацевтической композиции могут быть упакованы в отдельные контейнеры и заключены в одном наборе. Альтернативно, по меньшей мере, только одна из частей компонентов композиции водной суспензии или фармацевтической композиции (по меньшей мере, включающая наночастицы макролидного антибиотика) может быть включена в набор, а другие компоненты могут быть обеспечены отдельно от набора. Если композицию водной суспензии или фармацевтическую композицию настоящего изобретения поставляют в виде набора, то необходимые компоненты могут быть предпочтительно смешаны непосредственно перед применением для получения композиции водной суспензии или фармацевтической композиции настоящего изобретения.

Например, набор настоящего изобретения может представлять собой следующий набор:

(a) набор, включающий наночастицы макролидного антибиотика для получения фармацевтической композиции, включающей наночастицы макролидного антибиотика; или

набор, включающий композицию водной суспензии, включающей наночастицы макролидного антибиотика для получения фармацевтической композиции, включающей наночастицы макролидного антибиотика,

(b) набор по п. (а), в котором средний диаметр частиц наночастиц равен 500 нм или менее и D90 диаметр частиц равен 1500 нм или менее;

(c) набор по п. (а) или (b), в котором наночастицы получают смешиванием макролидного антибиотика, физиологически приемлемой соли и/или физиологически приемлемого сахарида, физиологически приемлемого полиола и/или воды и стабилизатора дисперсии;

(d) набор по любому из п.п. (а)-(с), в котором макролидный антибиотик представляет собой эритромицин, кларитромицин, рокситромицин, азитромицин, джозамицин, рокситромицин или китасамицин;

(e) набор по любому из п.п. (a)-(d), включающий стабилизатор дисперсии;

(f) набор по п. (е), в котором стабилизатор дисперсии представляет собой поверхностно-активное вещество, ингибитор агрегации и/или модификатор вязкости;

(g) набор по п. (f), в котором поверхностно-активное вещество представляет собой полиоксиэтиленгидрогенизированное касторовое масло 60, полисорбат 80, полиэтиленгликольмоностеарат и/или полиоксиэтиленполиоксипропиленгликоль;

(h) набор по п. (f), в котором ингибитор агрегации представляет собой поливиниловый спирт, полиэтиленгликоль и/или поливинилпирролидон;

(i) набор по п. (f), в котором модификатор вязкости представляет собой метилцеллюлозу, гидроксипропилметилцеллюлозу и/или гидроксиэтилцеллюлозу;

(j) набор по любому из п.п. (a)-(i), в котором фармацевтическая композиция, включающая наночастицы макролидного антибиотика, не вызывает сильного раздражения;

(k) набор по любому из п.п. (a)-(j), включающий наночастицы макролидного антибиотика в форме композиции водной суспензии;

(l) набор по любому из п.п. (a)-(k) для получения фармацевтической композиции для парентерального введения;

(m) набор по п. (l) для получения состава композиции для инъекции или состава для местного нанесения;

(n) набор по п. (m) для получения офтальмологического состава для местного применения, ушного состава для местного применения, назального состава для местного применения или легочного состава для местного применения;

(о) набор по п. (n) для получения глазных капель, ушных капель, капель для носа или ингалятора;

(р) набор по любому из п.п. (а)-(о) для получения терапевтического лекарственного средства или профилактического лекарственного средства для лечения воспалительных заболеваний или инфекционных заболеваний глаза, уха, носа или легких.

Соответственно, в одном воплощении настоящее изобретение может представлять собой способ получения водной фармацевтической композиции, включающей наночастицы макролидного антибиотика, включающий смешивание разбавителя и композиции водной суспензии, включающей наночастицы макролидного антибиотика. Альтернативно, настоящее изобретение также может представлять собой способ получения композиции водной суспензии или водной фармацевтической композиции, которая включает наночастицы макролидного антибиотика, включающий смешивание суспендирующего средства и наночастиц макролидного антибиотика.

При приготовлении фармацевтических композиций (например, инъекций, офтальмологической местной композиции (предпочтительно, глазных капель), ушной местной композиции (предпочтительно, ушных капель), назальной местной композиции (предпочтительно, капель для носа) или легочной местной композиции (предпочтительно, ингаляторов)) настоящего изобретения, ее pH и осмотическое давление, в особенности не ограничено при условии, что они находятся в пределах, приемлемых для местных композиций, и, предпочтительно, pH равен от 5 до 9,5, более предпочтительно, pH от 6 до 9, еще более предпочтительно, pH от 7 до 9. Отношение осмотического давления композиции (мази исключают) к солевому раствору равно, например, примерно от 0,3 до 4,3, предпочтительно, примерно от 0,3 до 2,2, в особенности предпочтительно, примерно от 0,5 до 1,5. pH и осмотическое давление можно регулировать с помощью регулятора pH, средства для регуляции тоничности, соли или тому подобного с применением способа, хорошо известного в этой области техники.

В настоящем документе, суспендирующее средство и/или разбавитель могут содержать воду в качестве основного ингредиента. Кроме того, фармацевтическая композиция, суспендирующее средство и/или разбавитель при необходимости могут содержать различные добавки, такие как загуститель, поверхностно-активное вещество, консервант, дезинфицирующее средство или антибактериальное средство, регулятор pH, средство для регуляции тоничности и буфер.

Консервант и дезинфицирующее средство или антибактериальное средство включают такие средства, как сорбиновая кислота или ее соли (сорбиновая кислота, калия сорбат, натрия сорбат, триклокарбан сорбат и им подобные), параоксибензоаты (метилпарагидроксибензоат, этилпарагидроксибензоат, пропилпарагидроксибензоат, бутилпарагидроксибензоат и им подобные), акринол, метилрозанилин хлорид, бензалкония хлорид, бензетониума хлорид, цетилпиридиния хлорид, цетилпиридиния бромид, хлоргексидин или его соли, полигексаметилен бигуанид, алкилполиаминоэтилглицин, бензиловый спирт, фенилэтиловый спирт, хлорбутанол, изопропанол, этанол, феноксиэтанол, серебро на подложке из фосфата циркония, меркурохром, йодповидон, тимеросал, дегидроуксусная кислота, хлороксиленол, хлорфен, резорцин, орто-фенилфенол, изопропилметилфенол, тимол, хинокитиол, сульфамин, лизоцим, лактоферрин, триклозан, 8-гидроксихинолин, ундециловой кислота, каприловая кислота, пропионовая кислота, бензойная кислота, галокарбан, тиабендазол, полимиксин В, 5-хлор-2-метил-4-изотиозолин-3-один, 2-метил-4-изотиозолин-3-один, полилизин, дигидропероксид, полидрония хлорид, Glokill (торговое наименование: например, Glokill PQ, производится компанией «Rhodia»), полидиарилдиметил аммония хлорид, поли[оксиэтилен(диметилимино)этилен-(диметилимино)этилендихлорид], полиэтилен-полиамино-диметиламино эпихлоргидрин поликонденсаты (торговое наименование: например, Busan 1157, производится компанией «Buckman Laboratories International, Inc.»), бигуанидсоединения (Cosmosil CQ (торговое наименование, примерно 20% (масс.) содержания полигексаметиленебигуанида гидрохлорида, производится компанией «Arch Personal Care Products L.P.»), и им подобные, и их физиологически приемлемые соли.

Регулятор pH включает неорганические кислоты (соляную кислоту, серную кислоту, фосфорную кислоту, полифосфорную кислоту, борную кислоту и им подобные), органические кислоты (молочную кислоту, уксусную кислоту, лимонную кислоту, виную кислоту, яблочную кислоту, янтарную кислоту, щавелевую кислоту, глюконовую кислоту, фумаровую кислоту, пропионовую кислоту, уксусную кислоту, аспарагиновую кислоту, эпсилон-аминокапроновую кислоту, глутаминовую кислоту и аминоэтансульфоновую кислоту и им подобные), глюконолактон, аммония ацетат, неорганические основания (натрия гидрокарбонат, натрия карбонат, калия гидроксид, натрия гидроксид, кальция гидроксид и магния гидроксид, и им подобные), органические основания (моноэтаноламин, триэтаноламин, ди-изопропаноламин, три-изопропаноламин, и лизин, и им подобные), буру и их физиологически приемлемые соли.

Средство, регулирующее тоничность, включает неорганические соли (например, натрия хлорид, калия хлорид, натрия карбонат, натрия гидрокарбонат, кальция хлорид, магния сульфат, натрия дигидрофосфат, динатрия гидрофосфат, дикалия гидрофосфат, натрия тиосульфат и натрия ацетат), многоатомные спирты (например, глицерин, пропиленгликоль, этиленгликоль и 1,3-бутиленгликоль), сахариды (например, глюкозу, маннитол и сорбитол).

Буфер включает трис-буфер, боратный буфер, фосфатный буфер, карбонатный буфер, цитратный буфер, ацетатный буфер, эпсилон-аминокапроновую кислоту и аспартат. Конкретный буфер может представлять собой борную кислоту или ее соли (натрия борат, калия тетраборат, калия метаборат и им подобные), фосфорную кислоту или ее соли (натрия гидрофосфат, натрия дигидрофосфат, калия дигидрофосфат и им подобные), угольную кислоту или ее соли (натрия гидрокарбонат, натрия карбонат и им подобные), лимонную кислоту или ее соли (натрия цитрат, калия цитрат и им подобные).

Фармацевтическая композиция настоящего изобретения может быть получена с помощью хорошо известного способа. Например, композицию водной суспензии, включающей наночастицы макролидного антибактериального средства, смешивают с любыми другими компонентами в подходящем разбавителе, таком как дистиллированная вода или очищенная вода, и затем осмотическое давление и pH регулируют, как описано выше, в дальнейшем ее стерилизуют водяным паром высокого давления или фильтрацией в стерильных условиях, с последующим асептическим заполнением в вымытый и стерилизованный контейнер.

Фармацевтическая композиция настоящего изобретения может представлять собой терапевтическое лекарственное средство или профилактическое лекарственное средство против воспалительных заболеваний или инфекционных заболеваний. Например, фармацевтическая композиция настоящего изобретения может представлять собой терапевтическое или профилактическое лекарственное средство против воспалительных заболеваний или инфекционных заболеваний, вызванных инфекциями. Таким образом, настоящее изобретение охватывает композицию водной суспензии для применения в качестве лекарственного средства (терапевтического лекарственного средства или профилактического лекарственного средства против воспалительных заболеваний или инфекционных заболеваний), включающую наночастицы макролидного антибиотика и стабилизатор дисперсии.

Воспалительные заболевания или инфекционные заболевания настоящего документа охватывают системные воспалительные заболевания и инфекционные заболевания, также местные воспалительные заболевания и инфекционные заболевания. В дополнении к воспалительным заболеваниям, которые вызываются инфекциями, воспалительные заболевания включают аллергические воспалительные заболевания (например, аллергический ринит, аллергический конъюнктивит, аллергический дерматит, аллергическую экзему, аллергическую астму и аллергическую пневмонию). Системные воспалительные заболевания включают системные воспалительные заболевания и инфекционные заболевания, такие как поверхностные/глубокие кожные инфекции, лимфангит/лимфаденит, мастит, остеомиелит, тонзиллит, пневмонию, пиелонефрит, уретрит, гонококковую инфекцию, сифилис, внутриутробную инфекцию, скарлатину, дифтерию, коклюш, вторичные инфекции от внешней раны, ожога кожи, хирургического вмешательства и тому подобные, фарингит/ларингит, бронхит, вторичные инфекции от хронических заболеваний органов дыхания, перикорониты, периодонтальное воспаление, столбняк, цистит, простатит, инфекционный энтерит, воспаление челюсти, инфекционный артрит и гастрит.

Конкретно, фармацевтическая композиция настоящего изобретения может быть применена для лечения или предупреждения воспалительных заболеваний и инфекционных заболеваний глаза и различных связанных с ними состояний. Воспалительные заболевания и инфекционные заболевания глаза могут включать симптомы заболевания века, включающие блефарит, блефароконъюнктивит, мейбомит, острый или хронический ячмень, халазион, дакриоцистит, дакриоаденит и розовые угри; симптомы заболевания конъюнктивы, включающие конъюнктивит, офтальмию новорожденных и трахому; симптомы заболевания роговицы, включающие язву роговицы, поверхностный кератит и паренхиматозный кератит, кератоконъюнктивит, инородные объекты и послеоперационные инфекции; и симптомы заболевания передней камеры глаза и сосудистой оболочки глазного яблока, включающие эндофтальмит, инфекционный увеит и послеоперационные инфекции. Предупреждения инфекций включает введение фармацевтической композиции перед хирургическим лечением, таким как операция, или перед контактом с лицом, демонстрирующим симптомы инфекции. Для профилактического применения, фармацевтическая композиция может быть введена перед хирургическим лечением, таким как блефаропластика, удаление халазиона, блефарорафия, хирургическое вмешательство на канальцах и слезной дренажной системе, и другие хирургические лечения, относящиеся к векам и слезопродуцирующему аппарату; хирургическое вмешательство на конъюнктиве, включающее удаление птеригиума, пингвукула и опухолей, травматические раны, такие как трансплантация конъюнктивы, разрезы, ожоги и царапины, и лоскутная операция на конъюнктиве; хирургическое вмешательство на роговице, включающее удаление инородных объектов, кератотомию и трансплантация роговицы; рефрактивное хирургическое вмешательство, включающее фоторефрактивную процедуру; хирургическое вмешательство по поводу глаукому, включающее фильтрацию волдыря; парацентез передней камеры; иридотомию; операция по удалению катаракты; хирургия сетчатки глаза; и хирургическое вмешательство, связанное с глазодвигательными мышцами. Профилактика офтальмии новорожденных также включена в профилактику по данному описанию.

Например, фармацевтическая композиция настоящего изобретения может быть применена для лечения или предупреждения различных состояний, связанных с воспалительными заболеваниями или инфекционными заболеваниями уха. Воспалительные заболевания или инфекционные заболевания уха включают воспаление среднего уха и наружный отит. Предупреждение инфекции включает предварительную хирургическую обработку, проводимую перед операцией, и обработку перед другими состояниями, приводящими к инфекции, или перед контактом с лицом с инфекционным заболеванием. Профилактическая ситуация включает обработку перед хирургическим вмешательством, включающим внешнюю рану или повреждение уха, и обработку перед другими хирургическими вмешательствами или операциями.

Фармацевтическая композиция настоящего изобретения может быть применена для лечения или предупреждения различных состояний, связанных с воспалительными заболеваниями или инфекционными заболеваниями носа. Во всем описании, термин «нос», применен для «воспалительного заболевания или инфекционного заболевания носа» и «назальная местная композиция» включает все верхние дыхательные пути, такие как носовую полость, носоглотку, глотку и гортань. Воспалительные заболевания или инфекционные заболевания носа включают синусит, аллергические ринит и ринит.

Фармацевтическая композиция настоящего изобретения может быть применена для лечения или предупреждения различных состояний, связанных с воспалительными заболеваниями или инфекционными заболеваниями легких. Во всем описании, термин «легкие», применен для «воспалительного заболевания или инфекционного заболевания легких» и «легочная композиция для местного применения» включает все нижние дыхательные пути, такие как трахея, бронхи, бронхиолы и легкие. Воспалительные заболевания или инфекционные заболевания легких включают пневмонию, бронхит, аллергическую пневмонию и астму.

Более предпочтительно, фармацевтическая композиция настоящего изобретения может быть применена для лечения или предупреждения инфекционных заболеваний (например, инфекционных заболеваний глаза, уха, носа или легких), вызываемых самыми разнообразными бактериями или паразитами. Такой микроорганизм включает род Staphylococcus, включающий Staphylococcus aureus и Staphylococcus epidermidis; род Streptococcus, включающий Streptococcus pneumoniae и Streptococcus pyogenes, группы C, F и G Streptococci, и группу viridans Streptococcus; Haemophilus influenzae, включающие биотип III; Haemophilus ducreyi; Moraxella catarrhalis; род Neisseria, включающий Neisseria gonorrhoeae и Neisseria meningitidis; род Chlamydia, включающий Chlamydia trachomatis, Chlamydia psittaci, и Chlamydia pneumoniae; род Mycobacterium, включающий атипичные Mycobacteria, включающие внутриклеточный комплекс Mycobacterium tuberculosis и Mycobacterium tubercule bacillus, и Mycobacterium marinum, Mycobacterium fortuitum, и Mycobacterium chelonae; Bordetella pertussis; Campylobacter jejuni; Legionella pneumophila; Bacteroides bivius; Welch bacillus; виды Peptostreptococcus; Borrelia burgdorferi; Mycoplasma pneumonia; Treponema pallidum; Ureaplasma urealyticum; токсоплазмы; малярия; и нозематоз.

3. Способ лечения/предупреждения

Фармацевтическая композиция настоящего изобретения может быть применена для лечения или предупреждения воспалительного заболевания или инфекционного заболевания путем введения в эффективной дозе нуждающемуся в этом субъекту. Настоящее изобретение относится к способу лечения или предупреждения воспалительного заболевания или инфекционного заболевания, включающему введение эффективной дозы фармацевтической композиции, включающей композицию водной суспензии, включающей наночастицы макролидного антибиотика (и стабилизатор дисперсии) нуждающемуся в этом субъекту. Субъект может представлять собой любое животное, относящееся к классу млекопитающих, такое как человек; животных-компаньонов/домашних животных, таких как собака, кошка и кролик; домашних животных, таких как корова, свинья, овца и лошадь, и предпочтительно, представляет собой человека.

Величина дозы и число доз введения фармацевтической композиции настоящего изобретения в особенности не ограничено и может быть надлежащим образом выбрано по усмотрению врача в зависимости от цели предупреждения и/или лечения ухудшения состояния/прогресса подлежащего лечению заболевания, типа заболевания, состояния пациента, такого как масса тела и возраст. Величина дозы обычно равна примерно от 0,01 до 1000 мг (по массе эффективного ингредиента) в день для взрослого, и число доз может быть один раз или несколько раз в день. Путь введения представляет собой инъекцию или местное введение, включающие внутривенные инъекции, внутримышечные инъекции или подкожные инъекции, внутривенные капельные вливания, глазные капли, ушные капли, капли для носа, трансдермальное введение, трансмукозальной введение или ингаляторы.

Если фармацевтическая композиция настоящего изобретения представляет собой инъекцию, то ее можно вводить непрерывно или периодически в дозе, равной от 0,001 до 100 мг (по массе эффективного ингредиента) в день для взрослого.

Если водная фармацевтическая композиция настоящего изобретения предназначена для местного применения, то ее непосредственно вводят местно на пораженный участок, на область вокруг пораженного участка, на орган с пораженным участком или тому подобное. Например, фармацевтическая композиция настоящего изобретения может быть составлена в офтальмологическую композицию для местного применения, ушную композицию для местного применения, назальную композицию для местного применения или легочную композицию для местного применения. Фармацевтическая композиция настоящего изобретения в местной композиции может быть нанесена ежедневно или в любом числе доз после проявления местного воспалительного заболевания или инфекционного заболевания. Величина дозы может быть надлежащим образом отрегулирована в зависимости от состояния и т.п. Обычно, ее вводят в глаз от одного до 6 раз в день по примерно от 1 до 3 капель в один прием.

Далее в настоящем документе, настоящее изобретение будет описано более подробно с отсылкой к примерам, но эти примеры не предназначены для ограничения объема настоящего изобретения. Все документы, упомянутые в настоящем документе, включены во всей своей полноте путем отсылки.

Пример 1. Получение пасты измельченного кларитромицина

К 0,5 л TRI-MIX (INOUE MFG., INC.) подавали 10 г кларитромицина, имеющего средний диаметр частиц, равный 10,370 нм (температура плавления: от 217 до 220°C; Assia Chemical Industries Ltd.), 10 г измельченного натрия хлорида (средний диаметр частиц: 5 мкм), 60 г маннитола (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), 3 г поливинилпирролидона K25 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) и 5 г гидрогенизованного лецитина соевых бобов PHOSPHOLIPON 90Н (Н. Holstein Co., Ltd.) и перемешивали до гомогенности, и затем к этому добавляли 20 г глицерина, это измельчали при 5°C в течение 5-ти часов с поддержанием содержимого в пастообразном состоянии. Извлеченное количество полученной замешанной пасты было равно 93 г (выход 86%).

К 100 мг полученной замешанной пасты, добавляли 3 г 0,1% НСО-60 (Nippon Surfactant Industries Co., Ltd.) и диспергировали в течение нескольких минут с помощью ультразвукового диспергатора по типу ванны (VS-100III, AS ONE Corporation). В результате измерения распределения частиц кларитромицина по диаметру с помощью счетчика распределения частиц по диаметру (DelsaNano, Beckman Coulter, Inc.), определили, что средний диаметр частиц (Dv) был равен 144,7 нм, 10% диаметр (D10) - 81,4 нм, 50% диаметр (D50) - 124,6 нм и 90% диаметр (D90) - 197,0 нм.

Пример 2. Влияние диспергатора (поверхностно-активное вещество)

(1) Получение композиции 0,1%-ного кларитромицина (НСО-60)

После измельчения с помощью TRI-MIX, как описано в примере 1, 0,5 г смешанного с кларитромицином продукта (смешанная паста) взвешивали в стеклянном сосуде емкостью 50 мл, к нему добавляли 44 г водного раствора 0,1% НСО-60 (Nippon Surfactant Industries Co., Ltd.), и затем диспергировали в течение 1-2 минут с помощью ультразвукового диспергатора по типу ванны (VS-100III, AS ONE Corporation), с последующим дополнительным диспергированием в течение 1-ой минуты с помощью ультразвукового диспергатора для образцов (S-4000, MISONIX). В результате измерения распределения частиц кларитромицина по диаметру в водной дисперсии с помощью счетчика распределения частиц по диаметру (DelsaNano, Beckman Coulter, Inc., такой же применяли далее в настоящем документе), средний диаметр частиц (Dv) был равен 146,0 нм, 10% диаметр (D10) - 72,5 нм, 50% диаметр (D50) - 119,2 нм, и 90% диаметр (D90) - 220,3 нм.

(2) Получение композиции 0,1%-ного кларитромицина (Tween 80)

Выполняют такую же процедуру как в примере 2 (1), за исключением того, что «0,1% НСО-60 (Nippon Surfactant Industries Co., Ltd.)», примененный в вышеописанном примере 2 (1), заменяли «0,1% Tween 80 (Kanto Chemical Co., Inc.)». Распределения частиц кларитромицина по диаметру было следующим: средний диаметр частиц (Dv) был равен 198,5 нм, 10% диаметр (D10) - 84,3 нм, 50% диаметр (D50) - 154,9 нм и 90% диаметр (D90) - 291,3 нм.

(3) Получение композиции 0,1%-ного кларитромицина (MYS-40)

Выполняют такую же процедуру как в примере 2 (1), за исключением того, что «0,1% НСО-60 (Nippon Surfactant Industries Co., Ltd.)», примененный в вышеописанном примере 2 (1), заменяли «0,1% MYS-40 (Nippon Surfactant Industries Co., Ltd.)». Распределение частиц кларитромицина по диаметру было следующим: средний диаметр частиц (Dv) был равен 142,2 нм, 10% диаметр (D10) - 72,4 нм, 50% диаметр (D50) - 118,8 нм, и 90% диаметр (D90) - 208,1 нм.

Пример 3. Тест на стабильность водной дисперсии с наноразмерным кларитромицином

Примерно по 4 мл каждой из водных дисперсий наноразмерного кларитромицина, полученных по примеру 2, вливали в 9-милилитровые флаконы с завинчивающимися крышками, и после того, как крышки плотно закрывали, флаконы хранили при комнатной температуре в течение одного дня, затем их оценивали на стабильность путем визуального наблюдения и т.п. Результаты показаны в таблице 1. Полученные результаты позволяют предположить, что НСО-60 представляет собой лучший диспергатор.

Пример 4. Влияние загустителей

(1) Получение композиции 0,1%-ного кларитромицина (НРМС 60SH-50)

После измельчения с помощью TRI-MIX по примеру 1, 1 г смешанного с кларитромицином продукта (смешанная паста) взвешивали в стеклянном сосуде емкостью 50 мл, к нему добавляли 44 г водного раствора 0,1% НСО-60, и затем диспергировали в течение 1-2 минут с помощью ультразвукового диспергатора по типу ванны (VS-100III, AS ONE Corporation), с последующим дополнительным диспергированием под приложенным давлением (90 МРа) с применением гомогенизатора высокого давления (L01, Sanwa Engineering Со, Ltd.). В результате измерения распределения частиц кларитромицина по диаметру в водной дисперсии с помощью счетчика распределения частиц по диаметру, было показано, что средний диаметр частиц (Dv) был равен 154,9 нм, 10% диаметр (D10) - 77,1 нм, 50% диаметр (D50) - 113,2 нм и 90% диаметр (D90) - 224,9 нм.

К полученной водной дисперсии, добавляли 22 г водного раствора 0,9% НРМС 60SH-50, это перемешивали с помощью магнитной мешалки, и затем доводили до 89 г добавлением очищенный воды и смешивали путем перемешивания до получения конечной композиции. В результате измерения распределения частиц кларитромицина по диаметру в композиции с помощью счетчика распределения частиц по диаметру, было показано, что средний диаметр частиц (Dv) был равен 327,8 нм, 10% диаметр (D10) - 189,5 нм, 50% диаметр (D50) - 284,4 нм и 90% диаметр (D90) - 423,0 нм. Кроме того, в результате перерасчета распределения частиц по диаметру с коррекцией на вязкость, получили, что средний диаметр частиц (Dv) был равен 170,1 нм, 10% диаметр (D10) - 98,6 нм, 50% диаметр (D50) - 148,6 нм и 90% диаметр (D90) - 223,3 нм.

(2) Получение композиции 0,1%-ного кларитромицина (НРМС 60SH-4000)

Выполняли такую же процедуру как в примере 4 (1), за исключением того, что пункт «добавляли 22 г водного раствора 0,9% НРМС 60SH-50, это перемешивали с помощью магнитной мешалки», как в примере 4 (1), заменяли пунктом «добавляли 22 г водного раствора 0,9% НРМС 60SH-4000 (Shin-Etsu Chemical Co., Ltd.), и это диспергировали в течение от 1-ой минуты с помощью ультразвукового диспергатора для образцов (S-4000, MISONIX)» до получения конечной композиции. Распределения частиц по диаметру перед коррекцией вязкости были следующими: средний диаметр частиц (Dv) был равен 1017,7 нм, 10% диаметр (D10) - 441,8 нм, 50% диаметр (D50) - 818,3 нм и 90% диаметр (D90) - 1629,6 нм. Распределения частиц по диаметру после корректировки вязкости были следующими: средний диаметр частиц (Dv) был равен 219,4 нм, 10% диаметр (D10) - 98,5 нм, 50% диаметр (D50) - 183,6 нм и 90% диаметр (D90) - 370,2 нм.

(3) Получение композиции 0,1%-ного кларитромицина (НРМС 65SH-4000)

Выполняли такую же процедуру, как в примере 4 (2), за исключением того, что пункт «добавляли 22 г водного раствора 0,9% НРМС 60SH-4000», как в примере 4 (2), заменяли пунктом «добавляли 23 г водного раствора 1% НРМС 65SH-4000 (Shin-Etsu Chemical Co., Ltd.)» до получения конечной композиции. Распределения частиц по диаметру перед коррекцией вязкости были следующими: средний диаметр частиц (Dv) был равен 990,1 нм, 10% диаметр (D10) - 424,8 нм, 50% диаметр (D50) - 840,2 нм и 90% диаметр (D90) - 1565,5 нм. Распределения частиц по диаметру после корректировки вязкости были следующими: средний диаметр частиц (Dv) был равен 219,4 нм, 10% диаметр (D10) - 93,5 нм, 50% диаметр (D50) - 183,4 нм и 90% диаметр (D90) - 342,0 нм.

(4) Получение композиции 0,1%-ного кларитромицина (НРМС 90SH-4000SR)

Выполняют такую же процедуру, как в примере 4 (2), за исключением того, что пункт «добавляли 22 г водного раствора 0,9% НРМС 60SH-4000», как в примере 4 (2), заменяли пунктом «добавляли 8 г водного раствора 1% НРМС 90SH-4000SR (Shin-Etsu Chemical Co., Ltd.)» до получения конечной композиции. Распределения частиц по диаметру перед коррекцией вязкости были следующими: средний диаметр частиц (Dv) был равен 425,0 нм, 10% диаметр (D10) - 146,9 нм, 50% диаметр (D50) - 332,6 нм, и 90% диаметр (D90) - 715,6 нм. Распределения частиц по диаметру после корректировки вязкости были следующими: средний диаметр частиц (Dv) был равен 219,4 нм, 10% диаметр (D10) - 71,1 нм, 50% диаметр (D50) - 157,7 нм и 90% диаметр (D90) - 334,4 нм.

(5) Получение композиции 0,1%-ного кларитромицина (МС SM-15)

Выполняют такую же процедуру как в примере 4 (1), за исключением того, что пункт «добавляли 22 г водного раствора 0,9% НРМС 60SH-50», как в примере 4 (1), заменяли пунктом «добавляли 33 г водного раствора 1% МС SM-15 (Shin-Etsu Chemical Co., Ltd.)» до получения конечной композиции. Распределения частиц по диаметру перед коррекцией вязкости были следующими: средний диаметр частиц (Dv) был равен 325,5 нм, 10% диаметр (D10) - 158,1 нм, 50% диаметр (D50) - 271,3 нм, и 90% диаметр (D90) - 474,8 нм. Распределения частиц по диаметру после корректировки вязкости были следующими: средний диаметр частиц (Dv) был равен 167,8 нм, 10% диаметр (D10) - 81,4 нм, 50% диаметр (D50) - 141,1 нм, и 90% диаметр (D90) - 246,9 нм.

(6) Получение композиции 0,1%-ного кларитромицина (МС SM-100)

Выполняют такую же процедуру как в примере 4 (1), за исключением того, что пункт «добавляли 22 г водного раствора 0,9% НРМС 60SH-50», как в примере 4 (1), заменяли пунктом «добавляли 33 г водного раствора 1% МС SM-100 (Shin-Etsu Chemical Co., Ltd.)» до получения конечной композиции. Распределения частиц по диаметру перед коррекцией вязкости были следующими: средний диаметр частиц (Dv) был равен 608,4 нм, 10% диаметр (D10) - 258,8 нм, 50% диаметр (D50) - 499,1 нм, и 90% диаметр (D90) - 979,6 нм. Распределения частиц по диаметру после корректировки вязкости были следующими: средний диаметр частиц (Dv) был равен 199,8 нм, 10% диаметр (D10) - 81,6 нм, 50% диаметр (D50) - 160,5 нм, и 90% диаметр (D90) - 321,3 нм.

(7) Получение композиции 0,1%-ного кларитромицина (PVA-204C)

Выполняют такую же процедуру как в примере 4 (1), за исключением того, что пункт «добавляли 22 г водного раствора 0,9% НРМС 60SH-50», как в примере 4 (1), заменяли пунктом «добавляли 33 г водного раствора 2% PVA-204C (Kuraray Co., Ltd.)» до получения конечной композиции. Распределения частиц по диаметру перед коррекцией вязкости были следующими: средний диаметр частиц (Dv) был равен 197,1 нм, 10% диаметр (D10) - 109,3 нм, 50% диаметр (D50) - 169,1 нм и 90% диаметр (D90) - 268,6 нм. Распределения частиц по диаметру после корректировки вязкости были следующими: средний диаметр частиц (Dv) был равен 142,4 нм, 10% диаметр (D10) - 80,1 нм, 50% диаметр (D50) - 123,3 нм, и 90% диаметр (D90) - 196,1 нм.

(8) Получение композиции 0,1%-ного кларитромицина (PEG-4000)

Выполняют такую же процедуру как в примере 4 (1), за исключением того, что пункт «добавляли 22 г водного раствора 0,9% НРМС 60SH-50», как в примере 4 (1), заменяли пунктом «добавляли 33 г водного раствора 2% PEG-4000 (Kanto Chemical Co., Inc.)» до получения конечной композиции. Распределения частиц по диаметру перед коррекцией вязкости были следующими: средний диаметр частиц (Dv) был равен 160,6 нм, 10% диаметр (D10) - 82,1 нм, 50% диаметр (D50) - 133,1 нм и 90% диаметр (D90) - 235,6 нм. Распределения частиц по диаметру после корректировки вязкости были следующими: средний диаметр частиц (Dv) был равен 149,4 нм, 10% диаметр (D10) - 68,0 нм, 50% диаметр (D50) - 110,3 нм и 90% диаметр (D90) - 201,1 нм.

(9) Получение композиции 0,1%-ного кларитромицина (PVP K30)

Выполняют такую же процедуру как в примере 4 (1), за исключением того, что пункт «добавляли 22 г водного раствора 0,9% НРМС 60SH-50», в вышеописанном примере 4 (1), заменяли пунктом «добавляли 33 г водного раствора 4% PVP K30 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.)» до получения конечной композиции. Распределения частиц по диаметру перед коррекцией вязкости были следующими: средний диаметр частиц (Dv) был равен 212,7 нм, 10% диаметр (D10) - 108,2 нм, 50% диаметр (D50) - 176,4 нм и 90% диаметр (D90) - 309,4 нм. Распределения частиц по диаметру после корректировки вязкости были следующими: средний диаметр частиц (Dv) был равен 157,0 нм, 10% диаметр (D10) - 78,9 нм, 50% диаметр (D50) - 130,4 нм и 90% диаметр (D90) - 231,4 нм.

Пример 5. Тест на стабильность композиций

(1) Влияние загустителей на стабильность 1

Примерно 4 мл каждой из водных дисперсий наноразмерного кларитромицина, полученных по примеру 4, вливали в 9-милилитровые флаконы с завинчивающимися крышками, и после того, как крышки плотно закрывали, флаконы хранили при 40°C в течение 7-ми дней, затем их оценивали на стабильность путем визуального наблюдения и т.п. Результаты показаны в таблице 2. Полученные результаты позволяют предположить, что НРМС (60SH-50) и МС (SM15) представляет собой наилучшие загустители.

(2) Влияние загустителей на стабильность 2

Пример 5 (1) показал превосходство НРМС и МС в качестве загустителей. Дополнительный тест проводили для анализа того, как тип НРМС и МС влияет на стабильность. Примерно по 4 мл каждой из дисперсий наноразмерного кларитромицина, полученных по примеру 4, вливали в 9-милилитровые флаконы с завинчивающимися крышками, и после того, как крышки плотно закрывали, флаконы хранили при 25°C в течение 14 дней, затем их оценивали на стабильность путем визуального наблюдения и т.п. Результаты показаны в таблице 3. Результаты позволяют предположить, что все серии НРМС и серии МС, примененные по примеру 4 (2), (3), (4) и (6), подходят в качестве загустителя.

Пример 6. In vitro антибактериальный тест (тест на минимальную ингибирующую концентрацию)

(1) Получение композиции: получение композиции 0,3%-ного кларитромицина

После измельчения с помощью TRI-MIX по примеру 1, 3 г смешанного с кларитромицином продукта (смешанная паста) взвешивали в стеклянном сосуде емкостью 50 мл, к нему добавляли 10 г водного раствора 1% НСО-60, и затем диспергировали в течение 1-2 минут с помощью ультразвукового диспергатора по типу ванны (VS-100III, AS ONE Corporation), с последующим дополнительным диспергированием в течение 1-ой минуты с помощью ультразвукового диспергатора для образцов (S-4000, MISONIX). В результате измерения распределения частиц кларитромицина по диаметру в дисперсии с помощью счетчика распределения частиц по диаметру, средний диаметр частиц (Dv) был равен 246,0 нм, 10% диаметр (D10) - 103,7 нм, 50% диаметр (D50) - 196,4 нм, и 90% диаметр (D90) - 393,8 нм.

К полученной водной дисперсии, добавляли 22 г водного раствора 0,9% НРМС 60SH-50, это перемешивали с помощью магнитной мешалки, и затем доводили до 89 г очищенной водой и смешивали путем перемешивания до получения конечной композиции. В результате измерения распределения частиц кларитромицина по диаметру в композиции с помощью счетчика распределения частиц по диаметру, средний диаметр частиц (Dv) был равен 328,9 нм, 10% диаметр (D10) - 167,3 нм, 50% диаметр (D50) - 270,4 нм, и 90% диаметр (D90) - 481,2 нм. Кроме того, в результате перерасчета распределения частиц по диаметру с коррекцией на вязкость, средний диаметр частиц (Dv) был равен 162,4 нм, 10% диаметр (D10) - 82,0 нм, 50% диаметр (D50) - 133,6 нм, и 90% диаметр (D90) - 239,9 нм.

(2) Тест на минимальную ингибирующую концентрацию (MIC)

MIC тест проводили, применяя способ измерения минимальной ингибирующей концентрации (MIC) путем микроразведений культуральной среды (стандартный способ Японского общества химиотерапии). Суспензию кларитромицина, полученную по примеру 6 (1) (тестируемое вещество 1), применяли в качестве тестируемого вещества. Суспензию неизмельченного кларитромицина (тестируемое вещество 2) и раствор кларитромицина в DMSO (тестируемое вещество 3) применяли в качестве контролей для сравнения.

(2-1) Приготовление среды, содержавшей тестируемые вещества

Каждое из тестируемых веществ перед разбавлением перемешивали в течение 15 секунд или более с помощью смесителя Вортекс. Кларитромицин-содержащие образцы (тестируемые вещества 1-3) разводили средой Мюллер-Хинтона до концентрации 250 мкг/мл, и затем серийно разводили двукратно для подготовки сред, содержавших каждый образец в конечной концентрации лекарственного средства, равной от 0,012 до 25 мкг/мл, которые применяли для инокуляции Staphylococcus aureus subsp. aureus. Подобным образом, образцы разводили средой Мюллер-Хинтона до концентрации, равной 1000 мкг/мл, и затем проводили серийное двукратное разведение и получали среды, содержащие каждый образец в конечной концентрации лекарственного средства, равной от 0,049 до 100 мкг/мл, которые применяли для инокуляции Pseudomonas aeruginosa.

В микропланшете с U-образными лунками, каждую из сред, содержавшую подготовленные тестируемые вещества, распределяли по 0,1±0,02 мл на лунку. Среду свободную от лекарственного средства разливали в две лунки в качестве контроля.

(2-2) Получение бактериальной жидкости

Staphylococcus aureus subsp. aureus или Pseudomonas aeruginosa культивировали в течение ночи в среде с агаром Мюллер-Хинтона. Свежие бактерии, культивированные на чашке с агаром, суспендировали в пересчете на 0,5 McFarand (примерно 108 КОЕ/мл) со стерилизованным водным солевым раствором и дополнительно разводили в десять раз (примерно 107 КОЕ/мл) стерилизованным водным солевым раствором для получения бактериальной жидкости.

(2-3) Инокуляция и культивирование бактериальной жидкости

В каждую лунку со средой, содержавшей тестируемое вещество, или со средой, свободной от тестируемого вещества, инокулировали по 0,005 мл бактериальной жидкости Staphylococcus aureus subsp. aureus или Pseudomonas aeruginosa, полученные в вышеописанном п. (2-2) (конечное количество бактериальной жидкости: примерно 104 КОЕ/лунку). Бактериальную жидкость не засевали в часть лунок со средой, свободной от тестируемого вещества, для получения лунок негативного контроля. После инокуляции, среду культивировали при 35±1°C в течение от 18 до 24 часов.

(2-4) Определение

После подтверждения роста в контрольных лунках, содержавших среду, свободную от тестируемого вещества, определяли минимальную ингибирующую концентрацию (MIC) как минимальную концентрацию лекарственного средства, в которой рост бактерий обнаруживали невооруженным глазом. Конкретно, если невооруженным глазом наблюдали мутность или осадок с диаметром 1 мм или более, или если наблюдали два или более флоккулированных осадков, даже если осадок имел диаметр 1 мм или менее, рост определяли как положительный (+). Если невооруженным глазом не наблюдали мутность или осадок, или если наблюдали только один осадок с диаметром 1 мм или менее, рост определяли как отрицательный (-).

(3) Результаты

Результаты показаны в таблице 4. Полученные результаты позволяют предположить, что наноразмерный кларитромицин обладал антибактериальной активностью, равной активности неизмельченного кларитромицина и растворенного кларитромицина.

Пример 7. Тест на раздражение глаза

(1) Получение композиции суспензии наноразмерного кларитромицина

(1-1) Измельчение кларитромицина в порошок

К 1 л TRT-MIX (INOUE MFG., INC.), подавали 30,1 г кларитромицина, имеющего средний диаметр частиц, равный 10,370 нм (температура плавления: от 217 до 220°C; Assia Chemical Industries Ltd.), 90,1 г маннитола (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), 8,9 г поливинилпирролидона K25 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) и 12,0 г гидрогенизованного лецитина соевых бобов PHOSPHOLIPON 90Н (Н. Holstein Co., Ltd.) и перемешивали до гомогенности, а затем к этому добавляли 21,5 г глицерина, все измельчали при 5°C в течение 5-ти часов с поддержанием содержимого в пастообразном состоянии. Извлеченное количество полученной замешанной пасты было равно 136,6 г (выход 84%).

(1-2) Измерение распределения частиц наноразмерного кларитромицина по диаметру

К 100 мг полученной замешанной пасты, добавляли 3 г 0,1% НСО-60 (Nippon Surfactant Industries Co., Ltd.) и диспергировали в течение нескольких минут с помощью ультразвукового диспергатора по типу ванны (VS-100III, AS ONE Corporation). В результате измерения распределения частиц кларитромицина по диаметру с помощью счетчика распределения частиц по диаметру, показали, что средний диаметр частиц (Dv) был равен 159,7 нм.

(1-3) Получение композиции суспензии наноразмерного кларитромицина (концентрация кларитромицина 0,3%)

После измельчения с помощью TRI-MIX А, 1,25 г смешанного с кларитромицином продукта (смешанная паста) взвешивали в стеклянном сосуде емкостью 50 мл, к нему добавляли 10 г водного раствора 1% НСО-60 (Nippon Surfactant Industries Co., Ltd.), и затем диспергировали в течение 1-2 минут с помощью ультразвукового диспергатора по типу ванны (VS-100III, AS ONE Corporation), с последующим дополнительным диспергированием в течение 1-ой минуты с помощью ультразвукового диспергатора для образцов (S-4000, MISONIX). В дальнейшем, добавляли 10 г водного раствора 1% НСО-60, 17,5 г водного раствора 1% НРМС (60SH-50), 7,5 г раствора, 1 М трис-буфера и 0,75 г водного раствора 0,1% бензалкония хлорида, и общее количество доводили до 75 г добавлением очищенной воды. Смесь перемешивали в течение 30-ти минут с помощью магнитной мешалки до получения композиции суспензии наноразмерного кларитромицина (концентрация кларитромицина 0,3%).

(1-4) Получение композиции суспензии наноразмерного кларитромицина (концентрация кларитромицина 1,0%)

После измельчения в TRI-MIX А, 4,05 г смешанного с кларитромицином продукта (смешанная паста) взвешивали в химическом стакане, к нему добавляли 33,5 г водного раствора 1% НСО-60 (Nippon Surfactant Industries Co., Ltd.), и затем диспергировали в течение 1-2 минут с помощью ультразвукового диспергатора по типу ванны (VS-100III, AS ONE Corporation), с последующим диспергированием в течение 1-ой минуты с помощью ультразвукового диспергатора для образцов (S-4000, MISONIX). В дальнейшем, добавляли 17,5 г водного раствора 1% НРМС (60SH-50), 7,5 г раствора 1 М трис-буфера и 0,75 г водного раствора 0,1% бензалкония хлорида, и общее количество доводили до 75 г добавлением очищенной воды. Смесь перемешивали в течение 30 минут с помощью магнитной мешалки до получения композиции суспензии наноразмерного кларитромицина (концентрация кларитромицина 1,0%).

(1-5) Получение композиции суспензии кларитромицина в виде неизмельченного порошка (концентрация кларитромицина 1,0%)

В химическом стакане, взвешивали 0,75 г кларитромицина, к нему добавляли 33,5 г водного раствора 1% НСО-60 (Nippon Surfactant Industries Co., Ltd.), и затем диспергировали в течение 1-2 минут с помощью ультразвукового диспергатора по типу ванны (VS-100III, AS ONE Corporation), с последующим дополнительным диспергированием в течение 1-ой минуты с помощью ультразвукового диспергатора для образцов (S-4000, MISONIX). В дальнейшем, добавляли 17,5 г водного раствора 1% НРМС (60SH-50), 7,5 г раствора 1 М трис-буфера и 0,75 г водного раствора 0,1% бензалкония хлорида, и общее количество доводили до 75 г добавлением очищенной воды. Смесь перемешивали в течение 30 минут с помощью магнитной мешалки до получения композиции суспензии кларитромицина в виде неизмельченного порошка (концентрация кларитромицина 1,0%).

(2) Оценочный тест

(2-1) Раздражение глаза оценивали путем введения (а) солевого раствора; (b) композиции суспензии наноразмерного кларитромицина (концентрация кларитромицина 0,3%), (с) композиции суспензии наноразмерного кларитромицина (концентрация кларитромицина 1,0%) или (d) композиции суспензии кларитромицина в виде неизмельченного порошка (концентрация кларитромицина 1,0%), полученных в вышеописанном п. (1); или (е) AzaSite (зарегистрированная торговая марка) (положительный контроль) (концентрация азитромицина 0,3%) в глаз кролика с интервалами от 30 минут до нескольких часов, от одного до 20 раз в день, и в дальнейшем нанесения флуоресцеина на глаз для наблюдения окрашивания роговицы.

(2-2) В один глаз кролика, вводили по 50 мкл каждого из следующего: (b) композиция суспензии наноразмерного кларитромицина (концентрация кларитромицина 0,3%) и (с) композиция суспензии наноразмерного кларитромицина (концентрация кларитромицина 1,0%), полученные в вышеописанном п. (1), и раздражение глаза визуально оценивали в течение 6-ти часов. В результате, обе композиции (b) и (с) суспензии наноразмерного кларитромицина не приводили к увеличению в числе миганий, воспалению глаз и секреции, и раздражение глаза не было установлено.

(2-3) Солевой раствор вводили в один глаз кроликов в качестве контроля, и вышеописанные композиции от (b) до (е) вводили в другой глаз с интервалами от 30 минут до нескольких часов, от одного до 20 раз в день, для оценки числа миганий и раздражения глаза. Для оценки раздражения глаза, роговицу, радужную оболочку и конъюнктиву обоих глаз обследовали перед введением и через 1, 3, 5, и 24 часа после последнего введения, и результаты оценивали в баллах в соответствии с критерием оценки Дрейза.

Раздражение глаза композицией суспензии наноразмерного кларитромицина признано эквивалентным или ниже, чем раздражение глаза, вызванное AzaSite, положительным контролем.

Пример 8. Тест на эффективность лекарственного средства в модели с зараженными животными

(1) Модель инфекции роговицы готовили, делая разрез в роговицах белого кролика и в дальнейшем инокулируя Pseudomonas aeruginosa в глаз. Через несколько часов после инокуляции бактерий, в один глаз кролика наносили солевой раствор и каждую из композиций от (b) до (е), полученную по примеру 7, наносили в другой глаз, от одного до 10 раз в день в течение от 3 до 5 дней в обоих нанесениях. Через несколько часов после инокуляции бактерий, симптомы инфекции внешних поверхностей глаз обследовали каждые 24 часа в течение от 4 до 8 дней. Симптомы инфекции внешних поверхностей глаз оценивали в баллах в соответствии с критериями оценки по Hatano et al. и Nakamura et al. или критерием оценки Дрейза.

(2) Модель инфекции роговицы готовили, инокулируя Pseudomonas aeruginosa в конъюнктивальный мешок белого кролика. После подтверждения развития кератита (от 5 до 10 часов после инокуляции бактерий), в один глаз наносили солевой раствор, а в другой глаз наносили каждую из композиций от (b) до (е), полученную по примеру 7, от одного до 10 раз в день в течение от 3 до 5 дней в обоих нанесениях. Через несколько часов после инокуляции бактерий, симптомы инфекции внешних поверхностей глаз обследовали каждые 24 часа в течение от 4 до 8 дней. Симптомы инфекции внешних поверхностей глаз оценивали в баллах в соответствии с критериями оценки по Hatano et al. и Nakamura et al. или критерием оценки Дрейза.

(3) Модель инфекции роговицы готовили, делая разрез в роговице белого кролика и в дальнейшем инокулируя Staphylococcus aureus в глаз. Солевой раствор наносили в один глаз кролика, а каждую из композиций от (b) до (е), полученные по примеру 7, наносили в другой глаз, от одного до 10 раз в день в течение от 3 до 5 дней через несколько часов после инокуляции бактерий. Через несколько часов после инокуляции бактерий, симптомы инфекции внешних поверхностей глаз обследовали каждые 24 часа в течение от 4 до 8 дней. Симптомы инфекции внешних поверхностей глаз подсчитывали в баллах в соответствии с критериями оценки по Hatano et al. и Nakamura et al. или критерием оценки Дрейза.

(4) Модель инфекции роговицы готовили путем инъекции Staphylococcus aureus в интрапаренхиматозную часть роговицы белого кролика. Солевой раствор наносили в один глаз кролика, а каждую из композиций от (b) до (е), полученную по примеру 7, наносили в другой глаз, от одного до 10 раз в день в течение от 3 до 5 дней через несколько часов после инокуляции бактерий. Через несколько часов после инокуляции бактерий, симптомы инфекции внешних поверхностей глаз обследовали каждые 24 часа в течение от 4 до 8 дней. Симптомы инфекции внешних поверхностей глаз подсчитывали в баллах в соответствии с критериями оценки по Hatano et al. и Nakamura et al. или критерием оценки Дрейза.

Раздражение глаза (помутнение роговицы, пальпебральная гиперемия конъюнктивы, пальпебральный отек конъюнктивы, бульбарная гиперемия конъюнктивы) композициями суспензии наноразмерного кларитромицина по результатам визуального наблюдения признано эквивалентным или ниже, чем раздражение глаза, вызванное AzaSite, положительным контролем. Антибактериальное и противовоспалительное действие композиций суспензии наноразмерного кларитромицина признано эквивалентным или выше, чем действие AzaSite, положительного контроля.

Пример 9. Тест на эффективность лекарственного средства в модели воспаления у животных

(1) Острый отек конъюнктивы создавали путем инъекции 2%-ной арахидоновой кислоты под конъюнктиву верхнего века крысы (модель конъюнктивита). Перед инъекцией арахидоновой кислоты, каждую из композиций от (а) до (е), полученные по примеру 7, наносили на глаз от одного до нескольких раз каждые от 15 до 30 минут. Крыс забивали через 3-6 часов после инъекции арахидоновой кислоты, и участок отека отрезали вдоль границы века для измерения его массы. Снижение отношения в массе отека между группами с нанесенными композициями и группой с нанесенным солевым раствором вычисляли для оценки ингибирующего влияния на отек конъюнктивы.

(2) Острый отек конъюнктивы создавали путем инъекции 1%-ного каррагенина под конъюнктиву верхнего века крысы (модель конъюнктивита). Перед инъекцией каррагенина, каждую из композиций от (а) до (е), полученные по примеру 7, наносили на глаз от одного до четырех раз каждые 15-30 минут. Крыс забивали через 3-6 часов после инъекции каррагенина, и участок отека отрезали вдоль границы века для измерения его массы. Снижение отношения в массе отека между группами с нанесенными композициями и группой с нанесенным солевым раствором вычисляли для оценки ингибирующего влияния на отек конъюнктивы.

(3) Острый отек конъюнктивы создавали путем инъекции 1%-ного каррагенина под конъюнктиву верхнего века крысы (модель конъюнктивита). Незамедлительно после инъекции каррагенина, вводили 1%-ный эванс голубой через хвостовую вену. Перед инъекцией каррагенина, каждую из композиций от (b) до (е), полученные по примеру 7, наносили на один глаз (правый глаз) и солевой раствор наносили в другой глаз (левый глаз) от одного до четырех раз каждые 15-30 минут. Крыс забивали через 3-6 часов после инъекции каррагенина и кожу века удаляли. Полученную кожу века помещали в пробирку фирмы Falcon, туда же добавляли формамид, и затем погружали в холодильник на ночь. Количество красителя эванса голубого, содержащегося в супернатанте после центрифугирования может быть определено по оптической плотности при 620 нм с помощью спектрофотометра. Ингибирующее влияние на отек конъюнктивы оценивали, как степень ингибирования утечки красителя, уравнение показано ниже.

Степень ингибирования (%)={((утечка красителя левого глаза)-(утечка красителя правого глаза))/(утечка красителя левого глаза)}×100

(4) Острый отек конъюнктивы создавали путем инъекции 1%-ного формалина под конъюнктиву верхнего века крысы (модель конъюнктивита). Перед инъекцией формалина, каждую из композиций от (а) до (е), полученные по примеру 7, наносили на глаз от одного до четырех раз каждые 15-30 минут. Крыс забивали через 3-6 часов после инъекции формалина, и участок отека отрезали вдоль границы века для измерения его массы. Снижение отношения в массе отека между группами с нанесенными композициями и группой с нанесенным солевым раствором вычисляли для оценки ингибирующего влияния на отек конъюнктивы.

(5) Острый отек конъюнктивы создавали путем инъекции 10%-ного каолина под конъюнктиву верхнего века крысы (модель конъюнктивита). Перед инъекцией каолина, каждую из композиций от (а) до (е), полученные по примеру 7, наносили на глаз от одного до четырех раз каждые 15-30 минут. Крыс забивали через 3-6 часов после инъекции каолина, и участок отека отрезали вдоль границы века для измерения его массы. Снижение отношения в массе отека между группами с нанесенными композициями и группой с нанесенным солевым раствором вычисляли для оценки ингибирующего влияния на отек конъюнктивы.

(6) Острый отек конъюнктивы создавали нанесением 10%-ного кротонового масла в конъюнктивальный мешок крысы (модель конъюнктивита). Перед нанесением кротонового масла, каждую из композиций от (а) до (е), полученные по примеру 7, наносили на глаз от одного до четырех раз каждые 30-50 минут. Крыс забивали через 2-6 часов после последнего нанесения кротонового масла, и участок отека отрезали вдоль границы века для измерения его массы. Снижение отношения в массе отека между группами с нанесенными композициями и группой с нанесенным солевым раствором вычисляли для оценки ингибирующего влияния на отек конъюнктивы.

(7) Увеит создавали путем инъекции бычьего сывороточного альбумина в стекловидное тело кролика (первичный увеит). После снижения воспаления (27-29 дней после инъекции бычьего сывороточного альбумина в стекловидное тело), бычий сывороточный альбумин впрыскивают снова из ушной вены для возобновления увеита (вторичный увеит). Каждую из композиций от (а) до (е), полученных по примеру 7, наносили на первичный увеит и вторичный увеит с интервалами от 30 минут до нескольких часов, от одного до 6 раз в день. Группа, которой был нанесен солевой раствор, и группы, которым наносил композиции, обследовали на наличие симптомов воспаления на внешних поверхностях глаз (помутнение роговицы, пальпебральная гиперемия конъюнктивы, пальпебральный отек конъюнктивы, бульбарная гиперемия конъюнктивы) и на наличие симптомов воспаления внутренних областей глаза (гиперемия радужной оболочки, радужной оболочки морфологические изменения, мутность передней камеры глаза), которые оценивали в баллах в соответствии с критериями подсчета баллов для того чтобы применять в качестве индикатора увеита.

Определенное на основе визуального наблюдения раздражение глаза (помутнение роговицы, пальпебральная гиперемия конъюнктивы, пальпебральный отек конъюнктивы, бульбарная гиперемия конъюнктивы) под действием композиции суспензии наноразмерного кларитромицина сочли эквивалентным или сочли ниже чем раздражение глаза, вызванное под действием AzaSite (зарегистрированная торговая марка), положительный контроль. Противовоспалительные влияния композиции суспензии наноразмерного кларитромицина сочли эквивалентными или выше чем таковые для AzaSite (зарегистрированная торговая марка), положительный контроль.

Пример 10. Тест на стабильность композиции суспензии наноразмерного кларитромицина

Определенное количество, равное 6-8 г композиций суспензии наноразмерного кларитромицина (концентрации кларитромицина 0,3% и 1,0%), полученных по примеру 7 (1), взвешивали в 9-милилитровом флаконе с завинчивающейся крышкой, выдерживали в термо-гигростатах, каждый из которых выставляли на 5°C, 25°C и 40°C, для проведения теста на стабильность в течение периода, равного 14 дням. На день 7 и 14, концентрации кларитромицина определяли с помощью жидкостной хроматографии высокого давления (HPLC), и остаточное отношение определяли по сравнению с концентрацией кларитромицина в композиции незамедлительно после ее составления, которую брали в качестве 100% для оценки стабильности. Условия HPLC-анализа были следующими:

Установка: Waters alliance

Колонка: Inertsil ODS 4,6 мм×150 мм

Температура колонки: 50°C

Элюат: 20 мМ KH2PO4/CH3CN (8:2)

Длина волны детектирования: 210 нм

Результаты теста на стабильность показаны в таблице 5. Кларитромицин не разлагался, но был стабилен при каждой из температур 5°C, 25°C и 40°C на протяжении всех 14 дней.

Пример 11. Тест на интраокулярную кинетику для композиции суспензии наноразмерного кларитромицина

Следующие композиции: (b) композиция суспензии наноразмерного кларитромицина (концентрация кларитромицина 0,3%), (с) композиция суспензии наноразмерного кларитромицина (концентрация кларитромицина 1,0%) и (d) композиция суспензии кларитромицина в виде неизмельченного порошка (концентрация кларитромицина 1,0%), полученные по примеру 7 (1), или (е) AzaSite (зарегистрированная торговая марка) (положительный контроль) (концентрация азитромицина 0,3%), соответственно, наносили на глаз кроликов от одного до 10 раз с интервалами от 5 до 30 минут, и концентрацию кларитромицина во внешних тканях глаза (конъюнктиве, роговице, внутриглазной жидкости) измеряли с помощью HPLC или LC/MS/MS и т.п. через 30 минут, 1, 2, 4, и 6 часа после нанесения.

Концентрации кларитромицина в композициях суспензии наноразмерного кларитромицина в конъюнктиве, роговица и внутриглазной жидкости сочли более высокими, чем в композиции суспензии кларитромицина в виде неизмельченного порошка, и сочли эквивалентными или более высокими, чем для AzaSite, положительного контроля.

Пример 12. Получение пасты измельченного кларитромицина

К 0,5 л TRI-MIX (INOUE MFG., INC.), подавали 30 г кларитромицина, имеющего средний диаметр частиц, равный 10,370 нм (температура плавления: от 217 до 220°C; Assia Chemical Industries Ltd.), 90 г маннитола (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.), 9 г поливинилпирролидона K25 (Wako Pure Chemical Industries, Ltd.) и 12 г гидрогенизованного лецитина соевых бобов PHOSPHOLIPON 90Н (Н. Holstein Co., Ltd.) и перемешивали до гомогенности, и затем к этому добавляли 23,6 г глицерина, все измельчали при 10°C в течение 6-ти часов с поддержанием содержимого в пастообразном состоянии. Извлеченное количество полученной замешанной пасты было равно 145,8 г (выход 88,5%).

К 100 мг полученной замешанной пасты добавляли 3 г 0,1% НСО-60 (Nippon Surfactant Industries Co., Ltd.) и диспергировали в течение нескольких минут в ультразвуковом диспергаторе по типу ванны (VS-100III, AS ONE Corporation). В результате измерения распределения частиц кларитромицина по диаметру с помощью счетчика распределения частиц по диаметру, средний диаметр частиц (Dv) был равен 146,8 нм, 10% диаметр (D10) - 85,5 нм, 50% диаметр (D50) - 131,1 нм и 90% диаметр (D90) - 222,0 нм.

Пример 13. Получение пасты измельченного азитромицина

К 0,5 л TRI-MIX (INOUE MFG., INC.), подавали 5 г азитромицина дигидрата, имевшего средний диаметр частиц, равный 74,99 мкм (температура плавления: от 133 до 135°C; Tokyo Chemical Industry Co., Ltd.), 60 г натрия хлорида (Tomita Salt K30, Tomita Pharmaceutical Co., Ltd.), 8 г смеси гидрогенизованного лецитина соевых бобов (PHOSPHOLIPON 90Н, Н. Holstein Co., Ltd.)/глицерин (Junsei Chemical Co., Ltd.) (1:3) и 9,6 г глицерина, все измельчали при 5°C в течение 2-х часов с поддержанием содержимого в пастообразном состоянии. Извлеченное количество полученной замешанной пасты было равно 74,8 г (выход 90,6%).

К 100 мг полученной замешанной пасты, добавляли 5 г смешанного раствора 0,05% MYS-40 (Nippon Surfactant Industries Co., Ltd.)/0,05% PLONON 407P (NOF CORPORATION) и диспергировали в течение нескольких минут с помощью ультразвукового диспергатора по типу ванны (VS-100III, AS ONE Corporation), к этому добавляли 45 г очищенный воды, и затем содержимое диспергировали в течение нескольких минут с помощью ультразвукового диспергатора по типу ванны. В результате измерения распределения частиц азитромицина по диаметру с помощью счетчика распределения частиц по диаметру, средний диаметр частиц (Dv) был равен 147,3 нм, 10% диаметр (D10) - 88,9 нм, 50% диаметр (D50) - 130,1 нм и 90% диаметр (D90) - 188,2 нм.

Пример 14. Получение пасты измельченного рокситромицина

К 0,5 л TRI-MIX (INOUE MFG., INC.), подавали 5 г рокситромицина, имевшего средний диаметр частиц, равный 121,3 мкм (температура плавления: от 122 до 126°C; Wako Pure Chemical Industry Co., Ltd.), 60 г натрия хлорида (Oshio micron T-0, AKO KASEI CO., LTD.), 8 г смеси гидрогенизованного лецитина соевых бобов (PHOSPHOLIPON 90Н, Н. Holstein Co., Ltd.)/глицерин (Junsei Chemical Co., Ltd.) (1:3) и 9,6 г глицерина, все измельчали при 5°C в течение 2-х часов с поддержанием содержимого в пастообразном состоянии. Извлеченное количество полученной замешанной пасты было равно 81,6 г (выход 98,4%).

К 100 мг полученной замешанной пасты, добавляли 5 г смешанного раствора 0,05% MYS-40 (Nippon Surfactant Industries Co., Ltd.)/0,05% PLONON 407P (NOF CORPORATION) и диспергировали в течение нескольких минут с помощью ультразвукового диспергатора по типу ванны (VS-100III, AS ONE Corporation), к этому добавляли 25 г очищенный воды, и затем содержимое диспергировали в течение нескольких минут с помощью ультразвукового диспергатора по типу ванны. В результате измерения распределения частиц рокситромицина по диаметру помощью счетчика распределения частиц по диаметру, получили, что средний диаметр частиц (Dv) равен 234,5 нм, 10% диаметр (D10) - 119,0 нм, 50% диаметр (D50) - 195,0 нм и 90% диаметр (D90) - 341,5 нм.

Пример 15. Получение композиции суспензии 0,3%-ного наноразмерного кларитромицина

После измельчения с помощью TRI-MIX по примеру 12, 2,55 г смешанного с кларитромицином продукта (смешанная паста) взвешивали в стеклянном сосуде емкостью 50 мл, к нему добавляли 20,0 г водного раствора 1% НСО-60 и диспергировали в течение 1-2 минут с помощью ультразвукового диспергатора по типу ванны (VS-100III, AS ONE Corporation), с последующим дополнительным диспергированием в течение 1-ой минуты (30 секунд×2) с помощью ультразвукового диспергатора для образцов (S-4000, MISONIX). В результате измерения распределения частиц кларитромицина по диаметру в дисперсии с помощью счетчика распределения частиц по диаметру, было найдено, что средний диаметр частиц (Dv) равен 219,2 нм.

К вышеописанной полученной дисперсии, добавляли 20,0 г водного раствора 1% НСО-60, 35,0 г водного раствора 1% НРМС 60SH-50, 15,0 г раствора 1 М трис-буфера (pH 7,5), и 1,5 г водного раствора 0,1% бензалкония хлорида (ВАС) и перемешивали с помощью магнитной мешалки, все доводили до 150 г добавлением очищенной воды, затем путем перемешивания и смешивания получали 0,3% композицию. В результате измерения распределения частиц кларитромицина по диаметру в композиции с помощью счетчика распределения частиц по диаметру, обнаружили, что средний диаметр частиц (Dv) равен 391,9 нм, 10% диаметр (D10) - 205,3 нм, 50% диаметр (D50) - 326,1 нм и 90% диаметр (D90) - 556,5 нм.

Пример 16. Получение композиции суспензии 1,0%-ного наноразмерного кларитромицина

После измельчения с помощью TRI-MIX по примеру 12, взвешивали 5,55 г смешанного с кларитромицином продукта (смешанная паста) в стеклянном стакане, к которому добавляли 46,7 г водного раствора 1% НСО-60 и диспергировали в течение 1-2 минут с помощью ультразвукового диспергатора по типу ванны (VS-100III, AS ONE Corporation), с последующим диспергированием в течение 1-ой минуты (30 секунд×2) с помощью ультразвукового диспергатора для образцов (S-4000, MISONIX). В результате измерения распределения частиц кларитромицина по диаметру в дисперсии с помощью счетчика распределения частиц по диаметру, обнаружили, что средний диаметр частиц (Dv) равен 217,6 нм.

К вышеописанной дисперсии, добавляли 23,3 г водного раствора 1% НРМС 60SH-50, 7,5 г раствора 1 М трис-буфера (pH 7,5) и 1,0 г водного раствора 0,1% бензалкония хлорида (ВАС) и перемешивали с помощью магнитной мешалки, все доводили до 100 г добавлением очищенной воды, затем путем перемешивания и смешивания получали 1,0%-ную композицию. В результате измерения распределения частиц кларитромицина по диаметру в композиции, показали, что средний диаметр частиц (Dv) был равен 548,1 нм, 10% диаметр (D10) - 294,4 нм, 50% диаметр (D50) - 484,4 нм, и 90% диаметр (D90) - 785,6 нм.

Пример 17. Интраокулярный фармакокинетический тест для композиции суспензия наноразмерного кларитромицина

Интраокулярный фармакокинетический тест проводили, как описано ниже, применяя три типа композиций, композицию суспензии 0,3%-ного наноразмерного кларитромицина, полученную по примеру 15 (именуемую в дальнейшем в настоящем документе как 0,3%-ная наноразмерная композиция), композицию суспензии 1,0%-ного наноразмерного кларитромицина, полученную по примеру 16 (именуемую в дальнейшем в настоящем документе как 1,0%-ная наноразмерная композиция) и композицию суспензии 1,0%-ного кларитромицина в виде неизмельченного порошка (именуемую в дальнейшем в настоящем документе как 1,0%-ная крупноразмерная порошковая композиция).

Нижнее веко кролика (штамм Kbl: JW, самцы) осторожно оттягивали, по 50 мкл каждой из композиций наносили однократно в конъюнктивальный мешок левого глаза с помощью пипетки, и в дальнейшем верхние и нижние веки осторожно закрывали и удерживали в течение примерно 2 секунд. На 30 минуте, 2, 4 и 6 часу после нанесения на глаз, для измерения концентрации кларитромицина с помощью LC-MS/MS собирали плазму, глазную жидкость и конъюнктиву.

Плазму собирали следующим образом: примерно 1 мл крови собирали из ушной вены и быстро центрифугировали (4°C, 1710 х g, 3000 rpm) для получения плазмы. Полученную плазму криоконсервировали в сверхглубокой морозильной камере (-70°C или менее) до проведения анализа.

Внутриглазную жидкость и конъюнктиву собирали следующим образом. После отбора крови, кролика анестезировали с помощью внутривенного введения водного раствора пентобарбитала в ушную раковину, и затем умерщвляли кровопусканием. После тщательного промывания глаза водой для инъекций, собирали внутриглазную жидкость, а затем собирали конъюнктиву. Каждую из собранных внутриглазных жидкостей и конъюнктив взвешивали и замораживали в жидком азоте, и криоконсервировали в сверхглубокой морозильной камере (-70°C или менее) до проведения анализа.

Предварительную обработку каждого образца осуществляли следующим образом. Для плазмы, 50 мкл ацетонитрила добавляли к 20 мкл плазмы, все тщательно перемешивали и затем центрифугировали (13100 х g, 4°C, 5 минут), и 2 мкл супернатанта впрыскивали для анализа LC-MS/MS. Для глазной жидкости, 50 мкл ацетонитрила добавляли к 20 мкл глазной жидкости, все тщательно перемешивали и затем центрифугировали (13100 х g, 4°C, 5 минут), и 2 мкл супернатанта впрыскивали для анализа LC-MS/MS. Для конъюнктивы, после добавления к конъюнктиве сверхчистой воды, 9 раз, в таком же объеме, какой была масса влажной конъюнктивы, конъюнктиву гомогенизировали. К 20 мкл гомогената конъюнктивы, добавляли 50 мкл ацетонитрила, все тщательно перемешивали и затем центрифугировали (13100 х g, 4°C, 5 минут), и 2 мкл супернатанта впрыскивали для анализа LC-MS/MS.

Условия HPLC-анализа были следующими:

Колонка Inertsil ODS-4 HP (GL Sciences)
Подвижная фаза A 20 мМ формиат аммония
Подвижная фаза B ацетонитрил

Градиент Время (мин) Подвижная фаза A (%) Подвижная фаза B (%)
0,00 60 40
3,00 20 80
4,50 20 80

4,51 60 40
6,00 60 40

Скорость тока 0,2 мл/мин
Температура колонки 40°C
Температура автодозатора 4°C
Дозируемое количество 2 мкл
Время анализа 6 минут

Условия MS/MS-анализа были следующими:

Источник ионов: Ионизация электрораспылением (ESI)
Тип сканирования: Множественный мониторинг реакции (MRM)
Полярность: Положительная
Температура источника: 500°C

Ион-монитор: Соединение Q1 (m/z) Q3 (m/z)
Кларитромицин 749,00 158,00

Результаты показаны на фигурах 1-3. По сравнению с крупноразмерным порошком, наноразмерный кларитромицин имеет более высокую способность к миграции к внутриглазной жидкости и конъюнктиве, и по существу равную способность к миграции в кровь.

Пример 18. Тест на эффективность композиции суспензии наноразмерного кларитромицина 1

У кролика создавали модель язвы роговицы, и создавали конъюнктивит с помощью инфекции Staphylococcus aureus для оценки эффективности композиции суспензии наноразмерного кларитромицина (глазные капли) следующим образом.

Модель язвы роговицы создавали следующим образом. Внешние ткани глаза японского белого кролика (штамм Slc: JW/CSK, самцы) промывали солевым раствором под анестезией пентобарбиталом натрия (внутривенное введение в ушную раковину), и роговицу местно анестезировали 0,4% оксибупрокаином гидрохлорида. Глазное яблоко кролика смещали путем сжатия с помощью мерной ложки, в центре роговица делали неглубокий круговой разрез с помощью трепана, размером 6 мм в диаметре (трепан для трансплантации роговицы по Кастровьехо), и разрез, имевший форму знака «#», с двумя парами вертикальных и горизонтальных параллельных линий, достигавших интрапаренхимы роговицы, выполняли внутри кругового разреза с помощью иглы 26 G х 1/2 SB.

Бактериальную жидкость инокулировали следующим образом. Бактериальную жидкую Staphylococcus aureus (штамм АТСС25923 St. aureus) в концентрации 1×109 КОЕ/мл закапывали однократно в роговицу при 50 мкл/глаз с помощью микропипетки и наконечника. Кролику разрешали мигать, и веко осторожно массировали несколько раз. Бактериальную жидкость закапывали еще один раз, кролику разрешали мигать, и веко осторожно массировали несколько раз (на роговицу закапали 0,1 мл на глаз).

Тестируемые вещества представляли собой AzaSite (офтальмологический раствор 1%-ного азитромицина), композицию 0,3%-ного наноразмерного кларитромицина, полученную по примеру 15, композицию 1,0% наноразмерного кларитромицина, полученную по примеру 16, и композицию суспензии 1,0%-ного кларитромицина в виде неизмельченного порошка и растворитель (та же самая композиция, что и вышеописанная композиция с 0,3%-ным наноразмерным кларитромицином за исключением того, что кларитромицин не был включен).

Тестируемые вещества вводили следующим образом. Нижнее веко осторожно оттягивали и 50 мкл/глаз тестируемого вещества закапывали в конъюнктивальный мешок с помощью микропипетки и наконечник. Тестируемое вещество вводили в течение четырех дней дня, дважды (через 4 часа и 8 часов после инокуляции бактериальной жидкости) в день инокуляции бактериальной жидкости (день 1) и три раза в день (4-часовой интервал) на дни от 2 до 4.

Результат исследовали, и эффективность лекарственного средства оценивали и определяли следующим образом. Участок инфекции роговицы, роговицу, радужную оболочку и конъюнктиву обследовали один раз в день в течение 7-ми дней от дня 1 до дня 7 после инокуляции бактериальной жидкости с помощью микроскопии со щелевой лампой. Для оценки и определения эффективности лекарственного средства, применяли результаты оценки роговицы в соответствии с критериями оценки по Hatano et al. и Nakamura et al. (Таблица 7), и результаты оценки роговицы, радужной оболочки и конъюнктивы в соответствии с критериями оценки по Draize J.H. et. al. (Таблица 8). Оценку с применением критериев оценки по Draize J.H. et. al. проводили следующим образом:

Роговица = A×B×5 (Максимум 80 пунктов)

Радужная оболочка = ×5 (Максимум 10 пунктов)

Конъюнктива = (A+B+C)×2 (Максимум 20 пунктов)

Общий счет = роговица + радужная оболочка + конъюнктива (Максимум 110 пунктов)

Таблица 9 в совокупности показывает результаты в баллах участков инфекции роговицы, основываясь на критериях оценки Hatano et al. и Nakamura et al. Фигура 4 показывает изменения баллов во времени для каждого из тестируемых веществ (оценки эффективности лекарственных средств).

Таблица 10 в совокупности показывает результаты для участков инфекции роговицы, радужной оболочки глаза и конъюнктивы, основываясь на критериях оценки Draize et al. Фигура 5 показывает изменение баллов во времени для каждого из тестируемых веществ (оценки эффективности лекарственных средств).

Фигуры 4 и 5 показали, что противовоспалительное действие суспензий наноразмерного кларитромицина (глазные капли) эквивалентно или превышает действие AzaSite, положительного контроля. Композиция 1,0%-ного кларитромицина в виде неизмельченного порошка демонстрирует ослабленное противовоспалительное действие, начиная со дня 6, в то время как суспензии наноразмерного кларитромицина (глазные капли) поддерживают противовоспалительное действие в течение периода, равного 7 дням. Следовательно, было подтверждено, что нанонизация позволяет дольше сохранять эффективность лекарственного средства, чем это было возможно для крупноразмерного порошка.

Пример 19. Тест на эффективность композиции суспензии наноразмерного кларитромицина 2

Модель язвы роговицы создавали на кролике, и развитие конъюнктивита вызывали инфекцией Staphylococcus aureus для оценки эффективности лекарственного средства композиции суспензии наноразмерного кларитромицина (глазные капли). В данном примере, исследовали терапевтическое влияние отсроченного первоначального введения глазных капель в сравнении с примером 18.

Создание модели язвы роговицы, инокуляцию бактериальной жидкости и оценку, и определение эффективности лекарственного средства осуществляли таким же образом, как в примере 18. Примененные тестируемые вещества представляли собой композицию 0,3%-ного наноразмерного кларитромицина, полученную по примеру 15, и растворитель (то же самое, что и композиция 0,3%-ного наноразмерного кларитромицина за исключением того, что она не содержала кларитромицина). Число введений и т.п. в совокупности показаны в приведенной ниже таблице.

Таблицы 12 и 13 в совокупности показывают результаты в баллах участков инфекции роговицы, основываясь на критериях оценки of Hatano et al. и Nakamura et al. Фигура 6 показывает изменения баллов во времени для каждого из тестируемых веществ (оценки эффективности лекарственных средств).

Таблицы 14 и 15 в совокупности показывает результаты в баллах для участков инфекции роговицы, радужной оболочки глаза и конъюнктивы, основываясь на критериях оценки Draize et al. Фигура 7 показывает изменения баллов во времени для каждого из тестируемых веществ (оценки эффективности лекарственных средств).

Фигуры 6 и 7 показали, что эквивалентное противовоспалительное действие может быть достигнуто, даже если начальное введение глазных капель начинать с задержкой во времени (сравнение между группой 3 и группой 4 на фигуре 7). Также было подтверждено, что увеличение числа введений глазных капель может обеспечить значительно более сильное противовоспалительное действие (сравнение между группой 4 и группой 5 на фигуре 7).

1. Композиция водной суспензии для лечения или предупреждения воспалительного или инфекционного заболевания глаз, включающая наночастицы макролидного антибиотика, в которой наночастицы имеют средний диаметр частиц, равный 300 нм или менее, и 90% диаметр, равный 1500 нм или менее, и которая в качестве поверхностно-активного вещества содержит полиоксиэтиленовое гидрогенизированное касторовое масло (НСО), а в качестве полимерного загустителя гидроксипропилметилцеллюлозу (НРМС) или метилцеллюлозу (МС).

2. Композиция водной суспензии по п. 1, в которой макролидный антибиотик проявляет собой эритромицин, кларитромицин, рокситромицин, азитромицин, джозамицин, рокситромицин или китасамицин.

3. Композиция водной суспензии по п. 1, которая дополнительно включает поливиниловый спирт, полиэтиленовый спирт, лецитин и/или поливинилпирролидон в качестве ингибитора агрегации.

4. Фармацевтическая композиция для лечения или предупреждения воспалительного или инфекционного заболевания глаз, включающая композицию водной суспензии по любому из пп. 1-3 и физиологически приемлемый носитель.

5. Фармацевтическая композиция по п. 4, которая представляет собой глазные капли.

6. Фармацевтическая композиция по п. 4, в которой воспалительное или инфекционное заболевание носит системный характер.

7. Набор для лечения или предупреждения воспалительного или инфекционного заболевания глаз, содержащий композицию водной суспензии по любому из пп. 1-3, разбавитель и суспендирующий агент, упакованные в отдельные контейнеры и заключенные во внешний пакет с инструкцией-вкладышем.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к ветеринарии, в частности к препарату для лечения и профилактики заболеваний кожи и кожных покровов инфекционной этиологии крупного и мелкого рогатого скота, свиней на основе хелатов меди в виде аэрозольного спрея.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к средству антибактериальному на основе экстракта мха сфагнума. Средство, обладающее антибактериальным действием, представляет собой экстракт мха сфагнума, полученный экстракцией мха сфагнума бензиловым спиртом по Босину в трех перколяторах при настаивании сырья в каждом перколяторе в течение 12 ч.

Группа изобретений относится к области медицины, в частности к способу получения биоцидной композиции. Для этого растительное сырье, в качестве которого используют вызревшие опавшие листья высших растений поздней зрелости, высушивают, измельчают, экстрагируют водой при воздействии УФ-диапазона и ультразвука, при давлении 750-780 мм рт.ст., при температуре 22±2°С, при импульсном воздействии ультразвуком при частоте заполнения 40-69 кГц и мощности до 100 Вт и в оптическом ультрафиолетовом диапазоне 254-340 нм, после чего экстракт выпаривают при пониженном давлении, а в стадии получения экстракта, содержащего биологически активные вещества, в процессе ротационного выпаривания добавляют диоксид титана TiO2 в форме рутила при размере частиц 80 нм в таком количестве на один килограмм массы вещества, чтобы соотношение двух фаз минералов диоксида титана анатаз/рутил ≥6,0, что соответствует содержанию рутила 30±1,5 мг на килограмм массы вещества.

Изобретение относится способу получения биологически активного антисептического препарата, включающего антисептик - стимулятор Дорогова второй фракции, пыльцу, пергу, прополис, личинки трутней, подмор, с последующим проведением растворения в кислой фракции электрохимически активированной воды (аналит) рН 2,0, гомогенизации в течение 4-5 мин и настаивания в течение 14 дней, стерилизации автоклавированием, затем полученный стерильный препарат разливают по флаконам и укупоривают, при следующем соотношении компонентов в мас.%: антисептик - стимулятор Дорогова второй фракции 2,5, пыльца 2,0, перга 5,0, прополис 10,0, личинки трутней 0,5, подмор 25,0, кислая фракция электрохимически активированной воды (аналит) рН 2,0 - остальное.

Изобретение относится к животноводству и представляет собой способ получения комплексного препарата для профилактики нарушений обмена веществ, повышения резистентности организма и лечения актинобациллеза у крупного рогатого скота, включающий использование растворимых в воде неорганических солей металлов в виде сульфатов меди, кобальта, марганца и хлорида цинка с натриевой солью жирной кислоты, йода и растворителя, отличающийся тем, что дополнительно используют сульфат хрома, в качестве растворителя - растительное масло и используют водный раствор натрия стеарата, который при температуре +20°C смешивают с растворимыми в воде неорганическими солями металлов в виде сульфатов меди, кобальта, марганца, хрома и хлорида цинка, затем из образовавшегося осадка удаляют воду и растворяют его в растительном масле при температуре 90-95°С, после остывания полученного масляного раствора в нем растворяют тонко измельченный кристаллический йод при следующем соотношении компонентов, мас.

Изобретение относится к области фармацевтики и медицины, а именно к противомикробной фармацевтической композиции в форме шипучих таблеток, содержащих нитрофурал. Композиция содержит в качестве активного вещества нитрофурал, в качестве вспомогательных веществ натрия хлорид, газообразующую смесь, регулятор кислотности и связующее вещество, в указанных в формуле изобретения количествах.

Изобретение относится к области фармацевтики и медицины, а именно к противомикробной фармацевтической композиции в форме шипучих таблеток, содержащих нитрофурал. Фармацевтическая композиция содержит в качестве активного вещества нитрофурал, вспомогательные вещества - натрия хлорид, газообразующую смесь и связующее вещество в указанных в формуле изобретения количествах.

Группа изобретений относится к области медицины и фармацевтической промышленности, а именно к антисептике и дезинфекции, и предназначена для получения солюбилизированной формы хлоргексидина основания и использования указанной формы в антисептических и дезинфицирующих композициях.

Группа изобретений относится к фармацевтической промышленности, в частности к противомикробному лекарственному препарату в виде быстрорастворимых таблеток и саше.

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой штамм Brachyspira hyodysenteriae, депонированный в национальной коллекции культур микроорганизмов (Collection Nationale de Cultures de Microorganismes (CNCM)), в институте Пастера, с регистрационным номером CNCM I-4720, для применения в качестве вакцины против дизентерии свиней, где дизентерия свиней вызвана Brachyspira hyodysenteriae, и композицию вакцины против дизентерии свиней, вызванной Brachyspira hyodysenteriae, включающую штамм по п.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой фармацевтическую композиция для местного нанесения на кожу для лечении воспаления и/или отека у пациента, содержащая от 0,01% до 10% масс./масс.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности и представляет собой фармацевтическую композицию в форме геля или эмульсионного геля для местного применения, содержащую: (a) 2% натриевой соли диклофенака, (b) по меньшей мере 55% воды, (c) от 10 до 15% изопропилового спирта, (d) от 10 до 15% пропиленгликоля, (e) от 2 до 3% по меньшей мере одного гелеобразующего агента, выбранного из группы, состоящей из карбомеров, (f) от 0 до 10% жидкого липида, образующего масляную фазу, (g) от 0 до 5% по меньшей мере одного неионного поверхностно-активного вещества, и (h) основный агент для доведения pH всей композиции до 6-9, при этом все процентные содержания даны по массе, где (c) и (d) совместно составляют от 20 до 25% от композиции, и вязкость композиции находится в диапазоне от 5000 до 10000 сП.

Группа изобретений относится к фармацевтической промышленности, а именно к вариантам офтальмологической композиции и к способу лечения кератоконъюнктивита или синдрома сухого глаза путем введения человеку или другому млекопитающему эффективного количества предложенной офтальмологической композиции.

Изобретение относится к неотложной медицине, и может быть использовано для для повышения резистентности организма к гипоксии. Для этого используют средство в форме газа ксенона, иммобилизированного в носителе, причем указанное средство дополнительно содержит смесь препаратов, состоящую из: бета-блокатора пропранолола 0,099 мас.%, симпатолитика резерпина 0,020 мас.%, антагониста H1 гистаминовых рецепторов дифенгидрамина 0,099 мас.%, антиангинального препарата с противоишемическим эффектом ивабрадина 0,099 мас.%, серотонинергического средства серотонина гидрохлорида 0,099 мас.%, нейролептического средства с гипотермическим эффектом перициазина 0,079 мас.%, антитиреоидного средства пропицила 0,099 мас.%, препарата, содержащего ионы магния-магния сульфата 0,593 мас.%, остальное - фармацевтически приемлемый растворитель.

Группа изобретений относится к ветеринарии и касается вакцинных композиций. Предложены: эмульгированная вакцинная композиция для иммунизации птиц к вирусу репродуктивно-респираторного синдрома свиней (PRRS), содержащая: (i) антигены вируса PRRS, (ii) легкое минеральное масло Marcol и (iii) дисперсный адъювант, выбранный из группы, состоящей из биоразлагаемых полимерных частиц, микрочастиц или наночастиц, представляющий собой хитозан, причем антигены имеют титр выше, чем DIE50% 104/мл, её применение при приготовлении концентрированной композиции иммуноглобулинов IgY для лечения PRRS; концентрированная композиция иммуноглобулинов IgY, нейтрализующих вирус, вызывающий PRRS, способ её получения и её применение для производста лекарственного средства для лечения PRRS.

Изобретение относится к медицине, в частности к рН-чувствительному носителю для доставки лекарственного средства, способу получения рН-чувствительного носителя, рН-чувствительному лекарственному средству и композиции, и способу обработки клеток заявленным лекарственным средством и/или композицией.

Группа изобретений относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой фармацевтические композиции для лечения или профилактики неврологического повреждения после инсульта и травматического повреждения центральной нервной системы, включающие эмульсию прогестогена и/или эстрогена типа масло-в-воде, где масляный компонент включает глицериды эйкозопентановой и докозагексаеновой кислот в количестве по меньшей мере 45 вес.% от общего количества масляного компонента, и среднецепочечные триглицериды в количестве 5-50 вес.% от общего количества масляного компонента.

Изобретение относится к медицине, в частности к фармакологии. Предложена фармацевтическая композиция, включающая 1,3-диметил-5-карбоксиурацил и глицирризиновую кислоту при мольном соотношении компонентов 1,3-диметил-5-карбоксиурацил:глицирризиновая кислота, равном 1:2, с выраженным стимулирующим действием на репаративную регенерацию эпителиальной, нервной и костной тканей.

Группа изобретений относится к химико-фармацевтической промышленности и представляет собой способ лечения рака и рецидива рака у млекопитающего, включающий введение терапевтического количества композиции винкристина.

Настоящее изобретение относится к медицине, в частности к эмульсионной композиции, содержащей дифлупреднат и цинк. А также относится к способу стабилизации эмульсионной композиции, содержащей дифлупреднат, включающему добавление образующего ион цинка соединения на стадии приготовления композиции.
Настоящее изобретение относится к жидкому составу для введения никотина в виде свободного основания или его соли. Состав состоит из: (I) от 12 до 28% вес.

Настоящее изобретение относится к композиции водной суспензии, включающей наночастицы макролидного антибиотика, и к ее применению. Композиция водной суспензии для лечения или предупреждения воспалительного или инфекционного заболевания глаз включает наночастицы макролидного антибиотика, в которой наночастицы имеют средний диаметр частиц, равный 300 нм или менее, и 90 диаметр, равный 1500 нм или менее, и которая в качестве поверхностно-активного вещества содержит полиоксиэтиленовое гидрогенизированное касторовое масло, а в качестве полимерного загустителя гидроксипропилметилцеллюлозу или метилцеллюлозу. 3 н. и 4 з.п. ф-лы, 7 ил., 15 табл., 19 пр.

Наверх