Способ лечения осложнений вирусных и бактериальных кератоконъюнктивитов у животных с помощью коллагенового кросслинкинга
Владельцы патента RU 2707792:
Федеральное государственное бюджетное образовательное учреждение высшего образования "Московская государственная академия ветеринарной медицины и биотехнологии - МВА имени К.И. Скрябина" (RU)
Федеральное государственное бюджетное учреждение "Национальный медицинский исследовательский центр глазных болезней имени Гельмгольца" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НМИЦ ГБ им. Гельмгольца" Минздрава России) (RU)
Изобретение относится к ветеринарной офтальмологии, в частности к способу лечения осложнений вирусных и бактериальных кератоконъюнктивитов у собак и кошек. Способ характеризуется тем, что проводят кросслинкинг роговичного коллагена (ККЛ) путем воздействия ультрафиолетового излучения А диапазона, доставляемого через оптоволоконный вывод лазерного устройства с интервалом 7-10 дней и нарастающей длительностью экспозиции от 5 до 10 минут. После каждого сеанса ККЛ и в перерывах между процедурами в конъюнктивальную полость инстиллируют попеременно антибактериальный препарат и кератопротектор 3 раза в сутки, всего в течение 21 дня. Использование изобретения позволит купировать в короткие сроки гнойное расплавление роговицы, сократить диаметр язв и эрозий. 2 пр.
Предлагаемое изобретение относится к ветеринарной офтальмологии и предназначено для лечения осложнений инфекционных кератоконъюнктивитов у собак и кошек (язв роговицы, стафиломы, гранулемы, сухого кератоконъюнктивита).
Распространенность вирусных и бактериальных инфекций увеличивается с каждым годом, что в свою очередь увеличивает частоту осложненного течения воспалительных заболеваний переднего отрезка глаза, том числе и кератопатий.
Кератопатии, приводящие к изменениям структуры роговицы, нарушениям ее трофики, а также к снижению зрительной функции являются распространенной проблемой в ветеринарной офтальмологии [Kirk N. Gelatt. Essentials of Veterinary Ophthalmology. John Wiley & Sons, 2013. - c. 518; Вильмис Д.А., Копенкин Е.П. Синдром сухого глаза как осложнение герпесвирусной офтальмоинфекции. Ветеринарная медицина. - 2007. - №2-3. - с. 29-31]. Это связано со специфическим тропизмом возбудителей респираторных заболеваний к тканям конъюнктивы и роговицы животных, вследствие чего развиваются воспалительные и хронические дегенеративные процессы в переднем отрезке глазного яблока (конъюнктиве и роговице) [William Arthur Hagan, Dorsey William Bruner. Hagan and Microbiology and Infectious Diseases of Domestic Animals: With Reference to Etiology, Epizootiology, Pathogenesis, Immunity, Diagnosis, and Antimicrobial Susceptibility. Cornell University Press, 1988. - c. 634].
Для лечения осложнений инфекционных кератоконъюнктивитов, таких как стафилома, гранулема, ползучая язва роговицы, в ветеринарной практике применяют частые инсталляции антибиотиков в конъюнктивальную полость (Ципровет, Левомицетиновые капли, Ирис, Вигамокс), противовирусных препаратов (Офтальмоферон, Зовиракс, Фелиферон, Форвет), корнеопротекторов (Баларпан, Корнерегель, Видисик) [Стекольников А.А. Сотникова Л.Ф. Ветеринарная офтальмология. СПб.: Проспект Науки, 2017.].
Известен способ лечения кератитов и кератоконъюнктивитов у мелких животных при запущенных случаях и осложнениях, который рассматривается в качестве ближайшего аналога (Усевич В. М., Усевич МН., Гурина С.В. Способ лечения кератитов и кератоконъюнктивитов у мелких животных. Патент RU №2404727, опубликован 27.11.2010 Бюл. №33). Данный способ предусматривает использование комплексного лечения, включающего динамическую электронейростимуляцию (ДЭНС) с использованием аппарата ЗооДЭНС по схеме лечения в определенных дозах в сочетании с медикаментозным лечением (сульфацилом натрия или глазными каплями ципровет, а также максидин).
Однако анализ результатов показывает, что, хотя ремиссия воспалительного процесса в переднем отрезка глаза при таком лечении отмечается у большинства животных, но при этом в ряде случаев осложнения остаются. Так, врачебная практика ветеринарных офтальмологов свидетельствует о том, что при лечении ползучей язвы роговицы в течение 2 месяцев полная прозрачность роговицы не восстанавливается, при стафиломе лечение вообще не эффективно, при гранулеме происходит лишь частичное восстановление прозрачности [Стекольников А.А. Сотникова Л.Ф. Ветеринарная офтальмология. СПб.: Проспект Науки, 2017.]. Длительность и сложность лечения, повышенный риск прогрессирования осложнений (симблефарон, глубокий язвенный кератит, перфорация роговицы) вызывает необходимость в поиске новых методов терапии осложнений кератоконъюнктивитов у кошек и других мелких животных.
Известно, что одним из эффективных методов безоперационного (нехирургического) лечения эктазий роговицы у человека является коллагеновый кросслинкинг (ККЛ), который применяется для биомеханической стабилизации роговицы и направлен на полимеризацию фибрилл стромы под влиянием фотодинамических реакций в результате взаимодействия ультрафиолета А (УФА) и раствора рибофлавина с коллагеновыми структурами роговицы [Г. Воллензак, Е.Н. Иомдина. Экспериментальное укрепление роговицы и склеры путем повышения уровня их поперечной связанности. Биомеханика глаза 2007. Сборник трудов конференции. Москва, 2007, с. 87-93. Новиков С.А., Захарова О.А., Жабрунова М.А., Белдовская Н.Ю., Онищенко Е.С. Коллагеновый кросслинкинг: новые возможности в лечении патологии роговицы. Офтальмол. ведомости. 2014. №2, с. 50-59].
В результате лечебного фотохимического и фотофизического воздействия происходит высвобождение свободных радикалов кислорода, стимулирующих увеличение количества интра- и интерфибриллярных ковалентных связей между коллагеновыми молекулами. За счет образования поперечных сшивок строма роговицы уплотняется и становится прочнее [Wollensak G. Iomdina Е. Long-term biomechanical properties of rabbit cornea after photodynamic collagen crosslinking. Acta Ophthalmologica Scandinavica, 2009: 87(1): 48-51. Бикбов M.M., Халимов A.P., Усубов Э.Л. Ультрафиолетовый кросслинкинг роговицы. Вестник РАМН. 2016; 71(3): 224-232].
Данное воздействие обладает также бактерицидным и бактериостатическим эффектом в отношении широкого спектра патогенных микроорганизмов, в частности, используется при лечении кератитов бактериальной этиологии у людей. Сначала под влиянием УФА происходит повреждение бактериальной ДНК. Затем рибофлавин, активированный УФ, вызывает химическую модификацию функциональных групп нуклеиновых кислот ДНК бактерии, делая репликацию невозможной [EyeWorld, 2010, №3, с. 39]. Результаты экспериментов in vitro свидетельствуют о том, что в ходе ККЛ происходит также изменение свойств ткани, приводящее к повышению температуры денатурации коллагена при гидротермальной обработке [Rama PI, Di Matteo F, Matuska S, Paganoni Q Spinelli A. Acanthamoeba keratitis with perforation after corneal crosslinking and bandage contact lens use. J Cataract Refract Surg. 2009 Apr; 35(4):788-91.], а также к повышению устойчивости к различным ферментам, ответственным за разрушение коллагена [Said DG, Elalfy MS, Gatzioufas Z, El-Zakzouk ES, Hassan MA, Saif MY, Zaki AA, Dua HS, Hafezi F. Collagen cross-linking with photoactivated riboflavin (PACK-CXL) for the treatment of advanced infectious keratitis with corneal melting. Ophthalmology. 2014 Jul; 121(7): 1377-82.].
Все перечисленные эффекты ККЛ в отношении ткани роговицы -повышение биомеханической прочности, повышение устойчивости к термовоздействию и устойчивости к ферментам - обеспечивают лечебный эффект ККЛ при воспалительных заболеваниях роговицы у человека.
При таком воздействии исключено поражение нижележащих структур глазного яблока (хрусталика и сетчатки). Данная методика является малоинвазивной, безболезненной, не требует общей седации, имеет короткий период реабилитации.
Известен способ лечения гнойной язвы роговицы у человека, включающий проведение деэпителизации и кросслинкинга роговицы, при котором попеременно чередуют инсталляции фотосенсибилизатора и антибиотика широкого спектра действия или противогрибкового средства, а ультрафиолетовым излучением воздействуют непосредственно на зону гнойного инфильтрата. ККЛ проводят с общепринятыми параметрами: длиной волны 365-375 нм, УФА воздействие проводят в течение 30 минут. [Каспаров А.А., Каспарова Е.А., Собкова О.И., Янг Бяо, Оганесян А.С. Способ лечения гнойной язвы роговицы. Патент RU 2635454, 13.11.2017]. При этом используют стационарную установку для ККЛ - аппарат «Opto X link corneal crosslinking system» (Бразилия), использование которого предусматривает неподвижное горизонтальное положение пациента (положение лежа) в течение всей процедуры [Каспарова Евг.А., Ян Бяо, Собкова О.И. Модифицированный кросслинкинг в лечении гнойной язвы роговицы. Клинический случай. Офтальмология. 2017; 15(3):274-277.].
Однако этот способ лечения не предназначен и не может быть применен в таком алгоритме для лечения осложнений вирусных и бактериальных кератоконъюнктивитов у животных, в частности, у собак и кошек, у которых строение органа зрения имеет свои особенности, течение заболеваний характеризуется рядом отличий от соответствующего заболевания у человека, а проведение любых лечебных процедур имеет свою специфику.
Задачей изобретения является разработка способа комплексного лечения осложнений вирусных и бактериальных кератоконъюнктивитов у собак и кошек, включающего ККЛ роговицы.
Техническим результатом является купирование в короткие сроки гнойного расплавления роговицы, сокращение диаметра и сглаживания краев язв и эрозий, эпителизация роговицы со стойкой ремиссией воспалительного процесса в переднем отрезке глаза у собак и кошек.
Технический результат достигается за счет сочетания кросслинкинга роговичного коллагена (ККЛ) с помощью ультрафиолетового излучения А-диапазона, доставляющегося через оптоволоконный вывод лазерного устройства «Импульс интенс», в определенном режиме с инсталляциями попеременно антибактериального препарата и кератопротектора.
Для ККЛ используется разработанное нами ранее мобильное лазерное устройство «Импульс интенс» (Е.Н. Иомдина, Е.П. Тарутта, В.А. Семчишен, А.А. Сианосян, С.В. Милаш. Устройство для проведения кросслинкинга склеры в экваториальной области и в области заднего полюса глаза. Патент RU на полезную модель 161372 от 29.03.2016), имеющее удобный наконечник с оптоволоконным выводом, который можно использовать в ручном режиме для локального воздействия на пораженную зону роговицы животного.
Нами были разработаны и подобраны наиболее оптимальные режимы ККЛ в сочетании с терапевтическим лечением широкого круга воспалительной патологии передней поверхности глаза у мелких животных (кошек и собак). В качестве терапевтических препаратов возможно использование принятых в ветеринарной офтальмологии препаратов. Режимы ККЛ в зависимости от диагноза
Оценку результатов исследования проводили на основании данных клинического осмотра переднего отрезка глаза и проведения каждые 5 дней функционального тестирования с применением витальных красителей (флюоресцеин, бенгальский розовый). При недостаточной эпителизации роговицы повторяли процедуру ККЛ с интервалом в 5 дней, по методике, описанной выше.
Ниже указаны ррезультаты лечения предложенным способом собак и кошек с различными видами патологии переднего отрезка глаза
В целом анализ результатов лечения выявил отличный терапевтический эффект в виде купирования гнойного расплавления роговицы, сокращения диаметра и сглаживания краев язв и эрозий, сокращения гнойно-слизистого отделяемого из конъюнктивной полости, а также эпителизации роговицы. Результаты оценки стабильности прекорнеальной слезной пленки и суммарной слезопродукции показали, что ремиссия воспалительного процесса в переднем отрезке глаза достигнута у большинства больных животных. Способ осуществляют следующим образом.
После локальной анестезии, например, с помощью инсталляций в конъюнктивальную полость раствора Алкаина, проводят кросслинкинг роговичного коллагена (ККЛ) путем воздействия ультрафиолетового излучения А диапазона, доставляемого через оптоволоконный вывод лазерного устройства. Всего проводят 3-4 процедуры с интервалом 7-10 дней и нарастающей длительностью экспозиции от 5 до 10 минут. После каждого сеанса ККЛ и в перерывах между процедурами в конъюнктивальную полость инсталлируют попеременно антибактериальный препарат и кератопротектор 3 раза в сутки, всего в течение 21 дня. Длительность УФА воздействия и интервал между повторными процедурами зависит от диагноза.
Примеры
Клинический пример 1. У кошки с диагнозом субтотальная ползучая язва роговицы проведено лечение, включающее ККЛ роговицы: инсталляции раствора рибофлавина по 1 капле в минуту в течение 20 минут. После чего через оптоволоконный вывод лазерного устройства в ручном режиме провели УФА воздействие (длина волны 370 нм, интенсивность излучения 3 мВт/см2) на роговицу, каждые 2 минуты закапывая по 1 капле раствор рибофлавина. Процедура ККЛ выполнена 3-х кратно с интервалом 7 дней нарастающей длительностью экспозиции от 5 до 10 минут на фоне инсталляций антибактериальных капель и корнеопротектора Баларпана (3 раза в день) в течение 21 дня. Через 5 дней после ККЛ роговицы отмечено существенное сокращение диаметра язвы, а через 10 дней - эпителизация роговицы.
Клинический пример 2. У кошки с диагнозом стафилома проведено лечение, включающее ККЛ роговицы 3-х кратно с интервалом 7 дней нарастающей длительностью экспозиции от 5 до 10 минут на фоне инсталляций антибактериальных капель и корнеопротектора Баларпана (3 раза в день) в течение 21 дня. Через 7 дней наблюдалось уменьшение размеров и васкуляризации стафиломы, снижение слезотечения, исчезновение признаков воспаления конъюнктивы век и склеры. Через 14 дней наблюдалось уменьшение размеров и васкуляризации стафиломы, снижение слезотечения, признаков воспаления конъюнктивы век, склеры, просветление участков роговицы, восстановление функции зрения в светлое время суток. Через 21 день наблюдали восстановление блеска, прозрачности в центральной части роговицы, отсутствие воспаления переднего отрезка глаза, восстановление сферичности роговицы и функции зрения.
Таким образом, предложенный способ, включающий ККЛ роговицы в сочетании с терапевтическим лечением, удобен для применения в ветеринарной офтальмологии и обеспечивает существенное повышение эффективности и/или сокращение сроков лечения осложнений вирусных и бактериальных кератоконъюнктивитов у собак и кошек (язв роговицы, стафиломы, гранулемы, сухого кератоконъюнктивита).
Способ лечения осложнений вирусных и бактериальных кератоконъюнктивитов у собак и кошек, характеризующийся тем, что проводят кросслинкинг роговичного коллагена (ККЛ) путем воздействия ультрафиолетового излучения А диапазона, доставляемого через оптоволоконный вывод лазерного устройства, всего 3-4 процедуры с интервалом 7-10 дней и нарастающей длительностью экспозиции от 5 до 10 минут, после каждого сеанса ККЛ и в перерывах между процедурами в конъюнктивальную полость инстиллируют попеременно антибактериальный препарат и кератопротектор 3 раза в сутки, всего в течение 21 дня.