Вакцина "биокон" против чумы, парвовирусного энтерита, ботулизма и псевдомоноза норок и соболей

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой вакцину против чумы, парвовирусного энтерита, ботулизма и псевдомоноза. Ассоциированная вакцина является двухкомпонентной (сухой компонент и жидкий компонент - растворитель для сухого компонента) и содержит на одну прививочную дозу (1 мл): лиофилизированную вируссодержащую жидкость штамма вируса чумы плотоядных ЭПММ со стабилизатором - титр не менее 102,2 ТЦД, суспензию адсорбированной на гидроокиси алюминия инактивированной формальдегидом культуры штамма парвовируса плотоядных "Геркулес" - титр до инактивации не менее 1:64 в РГА с эритроцитами свиньи, суспензию адсорбированной на гидроокиси алюминия инактивированной культуры штамма парвовируса плотоядных "Береговой" - титр до инактивации не менее 1:64 в РГА с эритроцитами свиньи, ботулинический адсорбированный анатоксин типа С из штамма CI. Botulinum N 365 - активность не менее 5-10 ЕС, смешанную адсорбированную суспензию Ps. Aeruginosa штаммов серотипа 6 «Вазуза», 1677-08 N 63 и "Дн"-05 N 77, взятых в равных соотношениях, - 0,6 млрд. кл. Вакцина имеет низкую реактогенность при сохранении высокой иммуногенности как для норок, так и для соболей.

 

Изобретение относится к области биотехнологии, в частности, к средствам специфической профилактики заболеваний норок и соболей, а именно к вакцине "БИОКОН" против чумы, парвовирусного энтерита, ботулизма и псевдомоноза.

Известна ассоциированная вакцина для профилактики вышеперечисленных заболеваний плотоядных, включающая суспензию инактивированной культуры штамма Virus enteritis lutreo larum "Родники-1631" с титром 1:128-512 в РГА, ботулинический адсорбированный анатоксин типа С из штамма Clostridium botulinum N 59 с активностью 5-10 ЕС/см3, смешанную суспензию Pseudomonas aeruginosa 381-П-06 N 40, 1677-08 N 63 и "ДН"-05 N 77 с концентрацией клеток 9-11 млрд/см3 и лиофилизированный вирус Virus distemper canine штамм "ЭПМ" в титре 103,4-4,0 ТЦД50/см3 с сорбит-желатозным стабилизатором (патент RU 2086260, 1994).

Однако известная ассоциированная вакцина недостаточно термостабильна.

Известна ассоциированная вакцина для профилактики вышеперечисленных заболеваний плотоядных «Бионор», содержащая на одну прививочную дозу (1 мл): штамм вируса чумы плотоядных ЭПММ со стабилизатором - титр не менее 102,2 ТЦД50/0,5 мл, суспензию адсорбированной инактивированной культуры штамма парвовируса плотоядных "Геркулес" - титр не менее 6 log2 РГА (до инактивации), ботулинический адсорбированный анатоксин типа С из штамма CI. Botulinum N 59 5-10 ЕС и смешанную адсорбированную суспензию Ps. Aeruginosa штаммов 381-П-06 Т 40, 1677-08 N 63 и "Дн"-05 N 77, взятых в равных соотношениях - 0,9 млрд. кл. (Патент RU 2150295, опубл. 2000).

Указанная вакцина разработана и широко применяется для вакцинации норок.

Накоплен положительный опыт применения вакцины для вакцинации соболя в звероводческих хозяйствах РФ. Однако вызываемые при этом поствакцинальные реакции, приводящие к некоторому снижению экономического эффекта от применения вакцины, сдерживают более широкое использование вакцины на поголовье соболя.

Задачей настоящего изобретения является разработка ассоциированной вакцины с высокой иммуногенностью и низкой реактогенностью как для норок, так и для соболей.

Указанная задача решается разработанной ассоциированной вакциной "БИОКОН", включающей лиофилизированную вируссодержащую жидкость штамма вируса чумы плотоядных ЭПММ со стабилизатором, суспензию адсорбированной на гидроокиси алюминия инактивированной формальдегидом культуры штамма парвовируса плотоядных «Геркулес», ботулинический адсорбированный анатоксин типа С из штамма Clostridiumbotulinum и смешанную адсорбированную суспензию Pseudomonasaeruginosa штаммов 1677-08 N 63 и "Дн"-05 N 77, при этом, в качестве парвовируса плотоядных вакцина дополнительно содержит суспензию адсорбированной на гидроокиси алюминия инактивированной формальдегидом культуры штамма «Береговой», в качестве ботулинического адсорбированного анатоксина типа С из штамма Clostridiumbotulinum - анатоксин типа С из штамма Clostridiumbotulinum N 365, смешанная адсорбированная суспензия Pseudomonasaeruginosa штаммов дополнительно содержит штамм серотипа 6 «Вазуза», при следующем количественном соотношении компонентов из расчета на 1 прививочную дозу (1 мл):

- лиофилизированная вируссодержащая жидкость штамма вируса чумы плотоядных ЭПММ со стабилизатором - титр не менее 102,2 ТЦД,

- суспензия адсорбированной на гидроокиси алюминия инактивированной формальдегидом культуры штамма парвовируса плотоядных "Геркулес" - титр до инактивации не менее 1:64 в РГА с эритроцитами свиньи,

- суспензия адсорбированной на гидроокиси алюминия инактивированной культуры штамма парвовируса плотоядных "Береговой" - титр до инактивации не менее 1:64 в РГА с эритроцитами свиньи,

- ботулинический адсорбированный анатоксин типа С из штамма CI. Botulinum N 365 - активность не менее 5-10 ЕС,

- смешанная адсорбированная суспензия Ps. Aeruginosa штаммов серотипа 6 «Вазуза», 1677-08 N 63 и "Дн"-05 N 77, взятых в равных соотношениях, - 0,6 млрд. кл.

Технический результат, достигаемый при использовании настоящего изобретения, заключается в получении ассоциированной вакцины с высокой иммуногенностью и низкой реактогенностью как для норок, так и для соболей за счет использования в вакцине новых штаммов парвовируса плотоядных «Береговой», Pseudomonasaeruginosa серотипа 6 «Вазуза», анатоксина типа С из штамма CI. Botulinum N 365, а также технологии их подготовки.

Ассоциированная вакцина "БИОКОН" является двухкомпонентной (сухой компонент и жидкий компонент-растворитель для сухого компонента) и содержит в своем составе следующие вирусные и бактериальные антигены:

Живой вакцинный вирус чумы плотоядных ЭПММ;

Инактивированный парвовирус плотоядных штамм «Геркулес»,

Инактивированный парвовирус плотоядых штамм «Береговой»;

Ботулинический адсорбированный анатоксин Clostridium Botulinum (Тип С);

Инактивированные Pseudomonas Aeruginosa возбудители псевдомоноза серотипов 5, 6, 8.

Штамм парвовируса плотоядных "Береговой" выделен от больной норки, хранится в коллекции ООО "Биоцентр" под названием "Береговой" и характеризуется следующими признаками:

1. Вирионы - изометрические частицы кубической симметрии размером 20-24 нм;

2. Относится к семейству Parvoviridae, род Parvovirus;

3. Эпителиотропный;

4. Агглютинирует эритроциты свиньи. Активность в РГА с эритроцитами свиньи не ниже 1:4096 ГАЕ50/50 мкл;

Вирус накапливается в культуре клеток перевиваемой линии CRFK в титре не ниже 1:1024 ГАЕ50/50 мкл;

Хранение - нативный, замороженный, рН среды 6,8-7,4, температура - минус 56°С.

После инактивации обладает иммуногенной активностью. Сохраняет иммуногенные свойства после 2 пассажей в культуре клеток CRFK.

Сохранение иммуногенной активности - не менее 5 лет.

Штамм Pseudomonasaeruginosa серотипа 6 «Вазуза» выделен от больной псевдомонозом норки. Хранится в коллекции ООО "Биоцентр" под названием "Вазуза" и характеризуется следующими признаками:

1. Культурально-морфологическими:

Грамотрицательные палочки, спор и капсул не образующие, подвижные. На твердых и жидких питательных средах через 18-24 ч продуцируют пигмент пиоцианин желтозеленого цвета и слизь, вследствие чего через 48 часов культивирования жидкие питательные среды приобретают слизистую консистенцию. На плотных питательных средах образуют круглые, разной величины колонии сероватого цвета со слегка вогнутым центром S форма, вокруг которых образуется пигментная зона. На жидких питательных средах через 12-18 ч культивирования образуется нежная сероватая поверхностная пленка, легко разбивающаяся при встряхивании;

2. Биохимическими:

На среде Гиса ферментируют без образования газа глюкозу, разжижают желатин, пептонизируют молоко, обладают каталазной активностью.

3. Антигенными:

Метод серотипирования с О-агглютинирующими псевдомонозными сыворотками: по О-антигенной структуре относятся к 06 серологическому варианту. О-антигенная принадлежность штаммов проверяется в пластинчатой реакции агглютинации на стекле с серотиповыми О-агглютинирующими псевдомонозными сыворотками согласно наставлению по их применению.

4. Вирулентными:

Лд 50 для морских свинок массой 220-250 г составляет 1,5-2,0 млрд микробных тел.

Штамм N 365 CI. Botulinum типа С характеризуется следующими признаками: Бактериальная клетка имеет форму слегка искривленной палочки с закругленными концами (0,6-0,8×3-6 мкм). Споры овальной формы, расположены субтерминально, палочки со спорой имеют характерный вид теннисной ракетки. В молодых культурах микробы окрашиваются грамположительно. В агаре с высоким столбиком образует колонии с центральным ядром. Строгий анаэроб. Образует сильнодействующий экзотоксин, патогенный для животных. Штамм получен из коллекции ФГБУ «ГИСК им Л.А. Тарасевича». Хранится и поддерживается в коллекции ООО "Биоцентр".

Данные штаммы используют для приготовления ассоциированной вакцины "БИОКОН».

Приготовление вакцины «БИОКОН» иллюстрируется следующим примером.

Пример.

Стадия А.

Подготовка штамма вируса чумы ЭПММ для приготовления вакцины.

Вирус ЭПММ культивируют в роллерных бутылях с площадью культивирования не менее 800 см3 в культуре клеток фибробластов эмбриона перепела (ЭП). При получении вируссодержащей жидкости (ВСЖ) с титром не менее 103,0 ТЦД ее объединяют со стабилизатором (сорбит, желатоза), разливают во флаконы емкостью 100 мл по 30 мл и лиофилизируют.

Контролируют специфическую активность после сушки, стерильность, безвредность, иммуногенность и термостабильность.

Стадия Б.

Подготовка штаммов парвовируса "Береговой" и «Геркулес» для приготовления вакцины.

Вирус "Геркулес" и «Береговой» культивируют раздельно в роллерных бутылях с площадью культивирования не менее 800 см3 в культуре клеток перевиваемой линии почки котенка CRFK. При получении ВСЖ с титром не менее 1:64 в РГА с эритроцитами свиньи ее инактивируют формальдегидом и адсорбируют на гидроокиси алюминия.

Стадия В.

Приготовление ассоциированной вакцины "БИОКОН".

Для приготовления одной прививочной дозы объемом 1 мл смешивают полученный на стадии Б компонент вакцины против парвовирусного энтерита из штамма «Геркулес» и штамма «Береговой» с титрами до инактивации не менее 1:64 ГАЕ каждый с инактивированным формальдегидом ботулиническим анатоксином типа С из штамма CI. botulinum N 365 с активностью 5-10 ЕС и компонентом против псевдомоноза, представляющим собой смешанную адсорбированную суспензию культур Ps. Aeruginosa «Вазуза» - 06, 1677-08 N 63 и "Дн"-05 N 77 в равных соотношениях при общем количестве микробных клеток не менее 1,8 млрд.

В полученную смесь 3-х вакцинных компонентов добавляют 3 об. % 19%-го раствора метабисульфита натрия. Полученный жидкий компонент оставляют в реакторе при непрерывном перемешивании на 24 часа. Проводят контроль на стерильность, безвредность, остаточную концентрацию формальдегида (не выше 0,001%), а также на способность при растворении сухого компонента (вакцина против чумы плотоядных) не снижать специфическую активность последнего в течение 1-го часа.

Сухой компонент вакцины против чумы плотоядных, полученный на стадии А, смешивают с жидким компонентом вакцины (стадия В) непосредственно перед использованием ассоциированной вакцины.

Применяют ассоциированную вакцину по известной схеме.

Вакцина «БИОКОН» при однократном введении в дозе 1 мл норкам и соболям вызывает через 21 день образование иммунитета к чуме плотоядных, парвовирусному энтериту, ботулизму и псевдомонозу продолжительностью 1 год. При применении вакцины «БИОКОН» наблюдается как минимум 10-кратное снижение частоты поствакцинальных реакций.

Таким образом, использование новых вакцинных штаммов обеспечивает вакцине в целом низкую реактогенность при сохранении высокой иммуногенности как для норок, так и для соболей.

Вакцина против чумы, парвовирусного энтерита, ботулизма и псевдомоноза, включающая лиофилизированную вируссодержащую жидкость штамма вируса чумы плотоядных ЭПММ со стабилизатором, суспензию адсорбированной на гидроокиси алюминия инактивированной формальдегидом культуры штамма парвовируса плотоядных «Геркулес», ботулинический адсорбированный анатоксин типа С из штамма Clostridiumbotulinum и смешанную адсорбированную суспензию Pseudomonasaeruginosa штаммов 1677-08 N 63 и "Дн"-05 N 77, отличающаяся тем, что в качестве парвовируса плотоядных вакцина дополнительно содержит суспензию адсорбированной на гидроокиси алюминия инактивированной формальдегидом культуры штамма «Береговой», в качестве ботулинического адсорбированного анатоксина типа С из штамма Clostridiumbotulinum - анатоксин типа С из штамма Clostridiumbotulinum N 365, смешанная адсорбированная суспензия Pseudomonasaeruginosa штаммов дополнительно содержит штамм серотипа 6 «Вазуза» при следующем количественном соотношении компонентов из расчета на 1 прививочную дозу (1 мл):

- лиофилизированная вируссодержащая жидкость штамма вируса чумы плотоядных ЭПММ со стабилизатором - титр не менее 102,2 ТЦД,

- суспензия адсорбированной на гидроокиси алюминия инактивированной формальдегидом культуры штамма парвовируса плотоядных "Геркулес" - титр до инактивации не менее 1:64 в РГА с эритроцитами свиньи,

- суспензия адсорбированной на гидроокиси алюминия инактивированной культуры штамма парвовируса плотоядных "Береговой" - титр до инактивации не менее 1:64 в РГА с эритроцитами свиньи,

- ботулинический адсорбированный анатоксин типа С из штамма CI. Botulinum N 365 - активность не менее 5-10 ЕС,

- смешанная адсорбированная суспензия Ps. Aeruginosa штаммов серотипа 6 «Вазуза», 1677-08 N 63 и "Дн" - 05 N 77, взятых в равных соотношениях, - 0,6 млрд. кл.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой штамм вируса ящура Aphtae epizooticae типа О, сем.

Изобретение относится к вирусологии и представляет собой способ получения вирусных частиц, включающий в себя следующие действия: а) трансфицируют клетки рыбы тремя экспрессионными векторами pTriex3, способными к экспрессии фрагментов полимеразы РНК последовательностей РВ2 SEQ ID No 7, РВ1 SEQ ID No 8 и PA SEQ ID No 9 вируса ISAV901_09, и экспрессионным вектором pCI-neo, способным к экспрессии нуклеопротеина NP SEQ ID No 10 вируса ISAV901_09; б) трансфицируют клетку из пункта (а) набором из восьми экспрессионных векторов, полученных из плазмиды pUC57, при этом каждый экспрессионный вектор содержит последовательности SEQ ID No 1, SEQ ID No 2, SEQ ID No 3, SEQ ID No 4 и SEQ ID No 5 и раздельно клонированную последовательность рекомбинантной РНК вируса ISAV901_09, полученную с использованием одной из пар праймеров, в) получают рекомбинантные вирусные частицы.

Изобретение относится к биотехнологии. Описана поливалентная вакцина от гриппа, содержащая ВПЧ, где гены гемагглютинина, нейраминидазы и M1 белка получены из штамма A/California/04/2009; ген гемагглютинина получен из штамма A/Michigan/45/2015, а гены нейраминидазы и M1 белка получены из штамма A/California/04/2009; ген гемагглютинина получен из штамма A/Novosibirsk/01/2014, а гены нейраминидазы и M1 белка получены из штамма A/California/04/2009; ген гемагглютинина получен из штамма A/HongKong/4801/2014, а гены нейраминидазы и M1 белка получены из штамма A/California/04/2009; ген гемагглютинина получен из штамма B/Phuket/3073/13, а гены нейраминидазы и M1 белка получены из штамма A/California/04/2009 или ген гемагглютинина получен из штамма B/Brisbane/60/2008, а гены нейраминидазы и M1 белка получены из штамма A/California/04/2009.

Согласно настоящему изобретению предложена комбинация, содержащая по меньшей мере онколитический вирус и один или более чем один модулятор иммунологической контрольной точки для применения для лечения пролиферативного заболевания, такого как рак.

Изобретение относится к области биотехнологии, молекулярной биологии и вирусологии. Предложен нереплицируемый, поглощаемый клеткой рабдовирус, представляющий собой вирус везикулярного стоматита, причем указанный вирус получен путем воздействия на живой вирус УФ излучением, применяемым в дозе от 100 мДж/см2 до 1000 мДж/см2, так что по меньшей мере 0,05%, но не более 80% нуклеотидов РНК вируса сшивается и/или РНК вируса расщепляется на по меньшей мере две дискретные полинуклеотидные последовательности, и при этом поверхность оболочки вирусной частицы содержит по меньшей мере 5% от числа G белков вирусной частицы дикого типа.

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой антибактериальную композицию лечебно-профилактического назначения, которая включает комбинацию стерильных, очищенных от токсинов фильтратов фаголизатов с титром каждого из бактериофагов не ниже 1010 БОЕ/мл по Грациа с неперекрывающимся спектром литической активности в отношении возбудителей сальмонеллезной и эшерихиозной инфекций, способных вызывать массовые болезни птиц, сельскохозяйственных животных и человека.

Изобретение относится к биотехнологии. Описана вирусоподобная частица для индуцирования и/или усиления иммунного ответа против антигена у млекопитающих, содержащая структурный полипептид вируса и по меньшей мере один антиген, в которой структурный полипептид вируса содержит по меньшей мере один первый сайт прикрепления, по меньшей мере один антиген содержит по меньшей мере один второй сайт прикрепления, структурный полипептид вируса и антиген соединяются через по меньшей мере один первый и по меньшей мере один второй сайт прикрепления, и структурный полипептид вируса получен из вируса Chikungunya (CHIKV) или вируса венесуэльского энцефалита лошадей (VEEV), в которой антиген не происходит из вируса CHIKV или вируса VEEV.

Изобретение относится к биотехнологии и представляет собой изолированную рабдовирусную частицу для применения в онколитической вирусной терапии у пациента с глиобластомой, где выделенная рабдовирусная частица включает геном, способный экспрессировать: белок, имеющий последовательность, которая по меньшей мере на 85% идентична SEQ ID NO: 1, белок, имеющий последовательность, которая по меньшей мере на 85% идентична SEQ ID NO: 2, белок, имеющий последовательность, которая по меньшей мере на 85% идентична SEQ ID NO: 3, белок, имеющий последовательность, которая по меньшей мере на 85% идентична SEQ ID NO: 4, и белок, имеющий последовательность, которая по меньшей мере на 85% идентична SEQ ID NO: 7.

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой бактериофаг Pas-MUP-1 семейства Myoviridae (учетный №: KCTC 12706ВР), выделенный из природы и способному специфически уничтожать клетки Pasteurella multocida, геном которого представлен нуклеотидной последовательностью SEQ.

Изобретение относится к области биотехнологии, микробиологии, экологии, охране окружающей среды. Предложен микробный препарат для утилизации углеводородных загрязнений в водной среде при температуре от +20 до -2,5°С и солености 30±10 г/л.

Изобретение относится к медицине и биотехнологии. Предложен способ получения бруцелезного антигена.
Изобретение относится к микробиологии. Питательная среда для культивирования Yersinia pestis EV, содержащая пермеат из ретентанта ферментативного гидролизата кукурузной патоки жидкой, разбавленный дистиллированной водой до показания аминного азота 0,12%, натрий хлористый, натрий фосфорнокислый 2-замещенный 12-водный, натрий сернистокислый, агар микробиологический и дистиллированную воду при заданном содержании компонентов.

Изобретение относится к микробиологии и предназначено для моделирования дормантного статуса М. tuberculosis в условиях in vitro.
Изобретение относится к микробиологии, в частности к бактериологии. Штамм Escherichia coli O144:Н45, характеризующийся отсутствием генов, кодирующих факторы патогенности, специфичных для Shigella spp.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к штамму бактерий Leptospira interrogans серогруппы Canicola серовара canicola для детекции антител к L. canocola.

Изобретение относится к области биотехнологии. Штамм Rhodococcus ruber ИЭГМ 346, обладающий способностью полностью деструктировать диклофенак натрия, депонирован в Национальном биоресурсном центре - Всероссийской коллекции промышленных микроорганизмов (НБЦ ВКПМ) ФГБУ ГосНИИгенетика НИЦ «Курчатовский институт» под регистрационным номером ВКПМ Ас-2106.

Изобретение относится к микробиологической промышленности и может быть использовано для получения белковой биомассы. Предлагается штамм бактерий Methylococcus capsulatus, депонированный во Всероссийской коллекции микроорганизмов ИБФМ им.

Изобретение относится к ветеринарии, а именно к вирусологии, и может быть использовано для получения вакцины против рота-, коронавирусной инфекции и эшерихиоза крупного рогатого скота.

Изобретение относится к области биотехнологии. Изобретение представляет собой вакцину против чумы, парвовирусного энтерита, ботулизма и псевдомоноза. Ассоциированная вакцина является двухкомпонентной и содержит на одну прививочную дозу : лиофилизированную вируссодержащую жидкость штамма вируса чумы плотоядных ЭПММ со стабилизатором - титр не менее 102,2 ТЦД, суспензию адсорбированной на гидроокиси алюминия инактивированной формальдегидом культуры штамма парвовируса плотоядных Геркулес - титр до инактивации не менее 1:64 в РГА с эритроцитами свиньи, суспензию адсорбированной на гидроокиси алюминия инактивированной культуры штамма парвовируса плотоядных Береговой - титр до инактивации не менее 1:64 в РГА с эритроцитами свиньи, ботулинический адсорбированный анатоксин типа С из штамма CI. Botulinum N 365 - активность не менее 5-10 ЕС, смешанную адсорбированную суспензию Ps. Aeruginosa штаммов серотипа 6 «Вазуза», 1677-08 N 63 и Дн-05 N 77, взятых в равных соотношениях, - 0,6 млрд. кл. Вакцина имеет низкую реактогенность при сохранении высокой иммуногенности как для норок, так и для соболей.

Наверх