Замещенные ароматические соединения и фармацевтические композиции для предотвращения и лечения остеопороза

Группа изобретений относится к медицине. Предложено применение производных фенилуксусной кислоты или их солей для производства лекарственного средства для предотвращения и/или лечения остеопороза, применение для производства лекарственного средства для стимуляции образования костной ткани или для стимуляции ремоделирования костной ткани, применение для производства лекарственного средства для ингибирования резорбции костной ткани. Технический результат состоит в предотвращении или снижении потери костной ткани на животных моделях остеопороза и в повышении уровня коллагена в метафизе бедренной кости овариэктомированных крыс; о снижении кластогенеза судили по снижению уровня кислой фосфатазы в их крови. 3 н. и 21 з.п. ф-лы, 9 ил., 2 табл., 5 пр.

 

ОБЛАСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[001] Данное изобретение относится к области медицины. Конкретные аспекты изобретения относятся к соединениям, фармацевтическим композициям и их применению для предотвращения или лечения остеопороза.

УРОВЕНЬ ТЕХНИКИ

[002] Кости представляют собой высокодинамичную ткань, которая постоянно возобновляется и заменяется с помощью процесса, известного, как ремоделирование костной ткани. Способность костной ткани к ремоделированию позволяет обеспечить восстановление старой кости или поврежденной ткани и, чтобы строение скелета могло быть наиболее эффективно приспособлено к механическим требованиям. Ремоделирование костной ткани начинается с удаления старой кости с помощью остеокластов на этапе фазы резорбции, длящейся несколько недель. Затем в трещины, образовавшиеся в результате эрозии, мигрируют остеобласты и на протяжение трех или четырех месяцев откладывают новую костную ткань. В нормальном скелете ремоделирование костной ткани протекает при сочетании активностей остеокластов и остеобластов так, чтобы количество отложенной новой костной ткани было равным количеству удаленной костной ткани, поддерживая таким образом здоровую костную массу. Тем не менее, если резорбция костной ткани превышает её образование, происходит общая потеря костной ткани. Возникшее в следствие этого патологическое состояние, остеопороз, характеризуется излишней резорбцией костной ткани и последующей низкой массой костной ткани с повышенной ломкостью костей.

[003] Остеопороз представляет собой общий термин, используемый в отношении заболеваний костей разнообразной этиологии, которые характеризуются уменьшением костной массы в единице объема до уровня ниже того, что требуется для адекватной механической опоры (Krane, S.M. et al.,“Metabolic Bone Disease” в Harrison’s Principles of Internal Medicine, страница 1889, Издание 11 (1987)). Одна из форм остеопороза представляет собой старческий остеопороз, который является ответственным за большую часть расходов в области здравоохранения на популяцию пожилых людей (Resnick, N.M. et al.“Senile Osteoporosis Reconsidered”, JAMA 261, 1025-1029 (1989)). Две другие наиболее распространенные формы остеопороза представляют собой пре- или постменопаузальный остеопороз и вызванный кортикостероидами остеопороз. У пациентов с хронической болезнью почек (ХБП) могут развиться заболевания костей, которые могут включать остеопороз в результате изменений в минеральном обмене веществ и последующих изменениях в структуре костной ткани. Наиболее часто указанные изменения усугубляются прогрессирующей потерей функции почек. Действительно и, как обобщено в параграфе ниже, ряд патологических состояний может возникать, который повышает вероятность развития остеопороза. Остеопороз подобный остеомаляции имеет много подобных симптомов с остеопорозом, таких как потеря кальция. Остеопения относитсяк более низкой, чем нормальная плотность костной ткани, но не такой низкой, как наблюдается при остеопорозе. Считается, что она предшествует остеопорозу. Незавершенный остеогенез представляет собой врожденное поражение костей, характеризуемое ломкими костями, склонными к переломам. Мраморная болезнь представляет собой редкую наследственную болезнь, при которой кости затвердевают, но являются более ломкими, чем нормальные. Остеонекроз представляет собой заболевание, которое обусловливает смерть костной ткани и коллапс из-за нарушения кровоснабжения костной ткани. Болезнь Педжета обусловлена излишней деградацией и образованием костной ткани с последующим дезорганизованным ремоделированием костной ткани.

[004] Как известно, разнообразные заболевания и патологические состояния могут обусловливать остеопороз: аутоиммунные заболевания, которые включают ревматоидный артрит, волчанку и рассеянный склероз; нарушения со стороны желудочно-кишечного тракта, которые включают глютеиновую болезнь, воспалительное заболевание кишечника, гастрэктомию и желудочно-кишечный анастомоз; эндокринные/гормональные нарушения, которые включают диабеты, гиперпаратиреоз, тиреотоксикоз и синдром Кушинга; нарушения со стороны кроветворной системы, которые включают лейкоз, лимфому, множественную миелому, серповидно-клеточную анемию (нарушения костного мозга) и талассемию; рак, который включает рак груди и предстательной железы; неврологические нарушения, которые включают депрессию, болезнь Паркинсона и повреждение спинного мозга; заболевания органов, которые включают заболевания легких (COPD, эмфизему), печени и хроническое заболевание почек; анкилозирующий спондилоартрит; СПИД/ВИЧ; перелом кости; плохое питание, которое включает расстройства пищевого поведения и недостаточное питание; и менопаузу (пре-менопаузу и пост-менопаузу).

[005] Исторически остеобласт считался главной клеткой, контролирующей развитие остеокласта и, таким образом, резорбцию костной ткани. В настоящее время взаимодействия между клетками иммунной системы и костными клетками позволили пересмотреть представление о регуляции резорбции костной ткани. Идентификация остеокласта и его роли в разрушении костной ткани позволяет создать прицельную терапию для уменьшения резорбционной способности. Такие терапии включают применение агентов, которые могут мешать рецептору-активатору лиганда NFκB (RANKL), одному из ключевых цитокинов, способствующему дифференциации остеокласта. Это может быть достигнуто путем применения рекомбинантного Fc-остеопротегерина (Fc-OPG) или гуманизированного антитела анти-RANKL (Деносумаб), которое разрабатывается Amgen. Оба продукта показали эффективность на доклинических моделях потери костной ткани, Деносумабом проходит клинические исследования; Fc-OPG выведен из клинических иследований из-за иммунных побочных эффектов. Другие ингибиторы остеокластной активности включают бисфосфонаты, ингибиторы c-src, ингибиторы катепсина K и CLC7 ингибиторы канала-переносчика для ионов хлора (Gillespie, M.T.(2007) Arthritis Research & Therapy, Том 9, №2, стр.103-105). Следует заметить, что бисфосфонаты успешно проявили себя в ограничении потери костной ткани на моделях артрита грызунов, хотя азотсодержащие бисфосфонаты (которые влкючают алдронат, ибандронат, памидронат и золедронат) увеличивают пролиферацию γ/δ T лимфоцитов, в отличие от не содержащих азота бисфосфонатов (например, клодронат), которые её не увеличивают (Gillespie, M.T.(2007) Arthritis Research & Therapy,Том 9, №2, стр.103-105).

[006] В большинстве современных стратегий лечения есть попытка уменьшить потерю кальция костной тканью с целью замедлить манифестацию остеопороза (Dawson-Hughes, B. et al.,“A controlled trial of the effect of calcium supplementation on bone density in postmenopausal women” NEJM 323, 878-883 (1990)). Таким образм, соединения, наиболее часто применяемые для лечения остеопороза, принадлежат к классу бисфосфонатов. Они сильно связываются с костной тканью и поглащаются остеокластами для ингибирования резорбции костной ткани. Бисфосфонаты могут быть введены пероральным или внутривенным путями. Алендронат (Fosmax™, пероральный) лекарственное средство наиболее часто прописываемое для лечения постменопаузального остеопороза. Другие одобренные управлением по контролю за продуктами и лекарствами США бисфосфонаты представляют собой Ризедронат (Actonel™, пероральный), Этидронат (Didronel™, пероральный), Золедронат (Aclasta™, вливание) и Памидронат (Aredial™, вливание). Пероральное применение бисфосфонатов связано с побочными эффектами со стороны желудочно-кишечного тракта. Связанные с бисфосфонатами, побочные эффекты в общем больше включают необычные переломы в бедренной кости (берцовая кость), чем в головке кости, что является наиболее часто встречающимся местом перелома. Тем не менее, указанные переломы, связанные с долгосрочным применением бисфосфонатов, являются редкими по сравнению с частотой случаев переломов шейки бедра, связанных с остеопорозом. Тем не менее, существует обеспокоенность, что долгосрочное употреблением бисфосфонатов может приводить к сверхподавлению замены костной ткани с последующей трудностью лечения микротрещин в кости, развитием указанных трещин и в конечном счете атипичными переломами. Дополнительно, повышенный риск рака пищевода связан с долгосрочным пероральным применением бисфосфонатов. Также, сообщалось, что применение бисфосфонатов, особенно Золедроната и Алендроната, представляет собой фактор риска для мерцательной аритмии. В конечном счете, внутривенное введение бисфосфонатов для лечения рака связано с остеонекрозом челюсти.

[007] Паратиреоидный гормон (1-84 PTH) играет центральную роль в кальциевом гомеостазе и, при дробном введении, анаболический эффект на ремоделирование костной ткани. Терипаратид, одобренный управлением по контролю за продуктами и лекарствами США (Forteo), представляет собой рекомбинантную форму части (аминокислоты 1-34) PTH, применяемую для лечения остеопороза у мужчин и постменопаузальных женщин с высоким риском переломов костей. Он может найти некоторое применение без инструкций для ускорения излечивания переломов костей. Терипаратид повышает образование остеобластов и препятствует апоптозу остеобластов. Тем не менее, несмотря на анаболический эффект Терипаратида на костную ткань, его применение для лечения остеопороза контролируется благодаря высокому числу случаев остеосаркомы на моделях животных. Поэтому, Терипаратид не рекомендован для применения пациентам в повышенным риском накостных опухолей.

[008] Вследствие потенциальных побочных эффектов долгосрочной гормонозаместительной терапии (сердечнососудистые нарушения, маточные нарушения и различные виды рака, итд) она больше не рекомендуется для предотвращения остеопороза. Таким образом, это было в некоторой степени заменено введением класса лекарственных средств Селективных Модуляторов Эстрогеновых Рецепторов (СМЭР), как показано на примере Тамоксифена и Ралоксифена. Ралоксифен гидрохлорид одобрен управлением по контролю за продуктами и лекарствами США (Эвиста) для предотвращения остеопороза у постменопаузальных женщин. Причем, непосредственное сравнение с ежедневно принимаемым перорально Алендронатом (бисфосфонат) продемонстрировало, что Ралоксифен ежедневно применяемый перорально, также был эффективен для понижения риска переломов костей. Тем не менее, побочные эффекты Ралоксифена включают повышенный риск летального инсульта и венозного тромбоэмболизма. Другие побочные эффекты включают опухание ног, трудности дыхания и зрительные изменения.

[009] Деносумаб представляет собой полностью человеческое моноклональное антитело для лечения остеопороза, вызванной лечением потери костной ткани, метастазами в кости, множественной миеломы и гигантоклеточной опухоли. Деносумаб был одобрен управлением по контролю за продуктами и лекарствами США (Пролиа) для предотвращения остеопороза у постменопаузальных женщин и (Xgeva) предотвращения родственных случаев, связанных со скелетом, у пациентов с метастазами солидных опухолей. Указанное антитело связывается и ингибирует RANKL (лиганд RANK), белок, который действует в качестве первичного сигнала для удаления костной ткани в большинстве патологических состояний, сязанных с потерей костной ткани. Предшественники остеокластов (пре-остеокласты) экспрессируют рецепторы RANK. Последующее связывание RANKL индуцирует активацию рецептора и мейоз пре-остеокластов в остеокласты. Тем не менее, побочные эффекты Деносумаба включают инфекции мочевыводящих и дыхательных путей, катаракты, констипация, сыпь и боль в суставах.

[0010] Как может быть видно из вышеупомянутого, множество вариантов выбора доступно для предотвращения и/или лечения остеопороза, но с данным выбором подразумевается, что нет универсального лекарства способного предотвратить и/или вылечить остеопороз. Также из вышеупомянутого очевидно, что каждый процитированный выбор лечения сопровождается множеством побочных эффектов. Действительно, вышеупомянутые лекарственные средства одобрены для применения людям, и побочные эффекты хорошо описаны в научной литературе. Например, по субъекту остеопороза и существующим на сегодняшний день терапиям и их побочным эффектам существует относительно недавняя обзорная статья “Osteoporosis - a current view of pharmacological prevention и treatment” Das, S.Crockett, J.C.Drug Design, Development и Therapy 7, 435-448 (2013). Таким образом, существует необходимость в более универсальном, безопасном (особенно в виду увеличенной длительности жизни и, поэтому увеличенной продолжительности введения лекарств) лекарстве для предотвращения и/или лечения остеопороза. Поэтому существует необходимость в новых способах лечения.

[0011] Патент США №6372728 (2002), закрепленный за AstraZeneca AB, описывает улучшенный препарат бисфосфонатов для перорального введения, например, Алендронат. Согласно данному патенту, биодоступность при пероральном введении большинства бисфосфонатов равна 1%-10% между приемами пищи. В улучшенном составе использовали в качестве усилителя абсорбции среднецепочечный глицерид. Патент США №5070108 (1991), закрепленный за Пенсильванским университетом, заявляет о лечении остеопороза с помощью ретиноида, такого как этретинат. Хотя изначально он был одобрен управлением по контролю за продуктами и лекарствами для лечения псориаза, этретинат удалили с североамериканского рынка из-за высокого риска пороков развития. Оданакатиб представляет собой новое лекарственное средство, ингибитор фермента катепсина K, который находится на стадии клинических исследований для лечения остеопороза и метастаз в костной ткани.

[0012] Цель данного изобретения решить вопрос необходимости в новых способах лечения, соединениях и фармацевтических композициях для пациентов, страдающих от или подверженных остеопорозу.

[0013] Дополнительные отличительные признаки данного изобретения будут очевидны, исходя из обзора дискуссии, фигур и описания данного изобретения.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

[0014] Общие аспекты изобретения относятся к фармацевтическому применению соединений Формулы I в соответствии с определением в данном документе и их фармацевтически приемлемых солей.

[0015] Конкретные аспекты изобретения относятся к применению соединений и композиций для предотвращения и/или лечения остеопороза. Некоторые аспекты соединений Формулы I в соответствии с определением в данном документе и их фармацевтически приемлемых солей относятся к профилактически эффективным и/или терапевтически эффективным агентам против разнообразных форм остеопороза у субъектов. Согласно конкретным вариантам реализации изобретения, субъект страдает от или подвержен страданию от потери костной ткани, переломам кости и т.п.

[0016] Согласно конкретным вариантам реализации изобретения соединения и композиции по данному изобретению пригодны для стимуляции образования костной ткани и/или для стимуляции ремоделирования костной ткани и/или для стимуляции дифференциации и минерализации остеобластов и/или для ингибирования резорбции костной ткани.

[0017] Конкретный аспект данного изобретения относится к способу предотвращения и/или лечения остеопороза, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли, в соответствии с определением в данном документе. В некоторых вариантах реализации изобретения остеопороз выбран из группы, состоящей из постменопаузального остеопороза (первичный тип 1), первичного остеопороза типа 2, вторичного остеопороза аномально высокого остеокластогенеза, остеопороза подобного остеомаляции, остеопении, незавершённого остеогенеза, мраморной болезни, некроза кости, болезни Педжета, гипофосфатемии и их комбинаций. В конкретном варианте реализации изобретения остеопороз представляет собой постменопаузального остеопороза (первичный тип 1), первичного остеопороза типа 2 или вторичного остеопороза. В более конкретных вариантах реализации изобретения остеопороз представляет собой постменопаузальный остеопороз (первичный тип 1).

[0018] Также данное изобретение относится к способам лечения, в которых соединения по данному изобретению показывают одну или более из следующих биологических активностей у субъекта: ингибирование остеокластогенеза; стимуляцию продуцирования интерлейкина-12 (ИЛ-12) с помощью стимулированных клеток-предшественников остеокластов; уменьшение активности кислой фосфатазы в клетках костной ткани (демонстрирует уменьшение остеокластогенеза); уменьшение соотношения (RANKL/ PG соотношение) рецептора-активатора лиганда NF-κB (RANKL) относительно остеопротегерина (OPG) в костной ткани, которое указывает на уменьшение остеокластогенеза; повышение содержания коллагена в костной ткани; и модуляция (например, повышение) уровня адипонектина в сыворотке.

[0019] Согласно другому аспекту данное изобретение относится к способу предотвращения и/или уменьшения потери костной ткани, включающему стадию введения субъекту, нуждающемуся в этом, соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли в соответствии с определением в данном документе. В одном варианте реализации изобретения введение соединения уменьшает потерю кальция. В одном варианте реализации изобретения субъект болен или подвержен остеопорозу. В одном варианте реализации изобретения субъект представляет собой постменопаузальную женщину.

[0020] Согласно другому аспекту данное изобретение относится к способу ингибирования остеокластогенеза, включающему этап приведения в контакт клетки-предшественника остеокласта с соединением Формулы I или его фармацевтически приемлемой солью в соответствии с определением в данном документе, в котором соединение ингибирует дифференциацию клетки-предшественника в остеокласт.

[0021] Согласно другому аспекту данное изобретение относится к способу стимуляции продуцирования интерлейкина-12 (ИЛ-12) с помощью стимулированной клетки-предшественника остеокласта, включающему этап приведения в контакт указанной стимулированной клетки-предшественника остеокласта с соединением Формулы I или его фармацевтически приемлемой солью в соответствии с определением в данном документе, в котором повышение продуцирования ИЛ-12 измерено в присутствии соединения.

[0022] Согласно другому аспекту данное изобретение относится к способу понижения активности кислой фосфатазы в костных клетках, включающему этап приведения в контакт костных клеток с соединением Формулы I или его фармацевтически приемлемой солью в соответствии с определением в данном документе, в котором пониженная фосфатазная активность измерена в присутствии соединения.

[0023] Согласно другому аспекту данное изобретение относится к способу понижения экспрессии и/или соотношения лиганд/остеопротегерин (соотношение RANKL /OPG) активности рецептора-активатора лиганда NF-κB в костных клетках, включающему этап приведения в контакт костных клеток с соединением Формулы I или его фармацевтически приемлемой солью в соответствии с определением в данном документе.

[0024] Согласно другому аспекту данное изобретение относится к способу повышения содержания коллагена в костной ткани, включающему этап приведения в контакт костной ткани с соединением Формулы I или его фармацевтически приемлемой солью в соответствии с определением в данном документе.

[0025] Согласно другому аспекту данное изобретение относится к способу стимуляции образования костной ткани и/или стимуляции ремоделирования костной ткани и/или стимуляции дифференциации и минерализации остеобластов и/или ингибирования резорбции костной ткани, включающему этап приведения в контакт остеобластов в упомянутой костной ткани с соединением Формулы I или его фармацевтически приемлемой солью в соответствии с определением в данном документе.

[0026] Согласно другому аспекту данное изобретение относится к способу модуляции уровня адипонектина в сыворотке у субъекта, включающему этап введения субъекту, нуждающемуся в этом, соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли в соответствии с определением в данном документе. В одном варианте реализации изобретения субъект страдает ожирением и/или диабетом.

[0027] Дополнительные аспекты данного изобретения относится к способам, упомянутым выше в данном документе, дополнительно включающим этап сопутствующего введения лекарственного средства, выбранного из группы, состоящей из:бисфосфонатов, Оданакатиба, Алендроната, Ризедроната, Этидроната, Золедроната, Памидроната, Терипаратида, Тамоксифена, Ралоксифена и Деносумаба.

[0028] Другой родственный аспект данного изобретения относится к фармацевтическим композициям, содержащим соединения Формулы I для производства лекарственного средства, например, лекарственного средства для предотвращения и/или лечения остеопороза. Один конкретный пример представляет собой фармацевтическую композицию для предотвращения или лечения остеопороза, содержащую соединение Формулы I в соответствии с определением в данном документе и фармацевтически приемлемый носитель. Другой конкретный пример представляет собой фармацевтическую композицию для применения при предотвращении или лечении остеопороза, содержащую соединение, указанное в Таблице 1, и более конкретно, фармацевтическую композицию, содержащую Соединение I и/или Соединение XXXI. Родственный аспект относится к способам предотвращения и/или лечения остеопороза, включающим введение пациенту терапевтически эффективного количества фармацевтической композиции в соответствии с определением в данном документе.

[0029] Согласно другому аспекту данное изобретение относится к соединению Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли в соответствии с определением в данном документе или композиции, содержащей то же самое, для применения при предотвращении и/или лечения остеопороза.

[0030] Дополнительные аспекты данного изобретения будут очевидны специалисту в данной области техники, исходя из следующего подробного описания, формулы изобретения и обобщений в данном документе.

КРАТКОЕ ОПИСАНИЕ ГРАФИЧЕСКИХ МАТЕРИАЛОВ

[0031] Фиг. 1 представляет собой панель с графическими материалами, иллюстрирующими действие Соединения I на ЛПС-индуцированный остеокластогенез в клетках RAW264,7, согласно Примеру 2.

[0032] Фиг. 2 представляет собой гистограмму, демонстрирующую, что Соединение I вызывает продуцирование ИЛ-12 в ЛПС-стимулированных клетках RAW264,7, согласно Примеру 2.

[0033] Фиг. 3 представляет собой линейную диаграмму, демонстрирующую действие Соединения I на массу тела овариэктомированных (OVX) крыс, согласно Примеру 3.

[0034] Фиг. 4 представляет собой панель гистограмм, демонстрирующую действие Соединения I на содержания кальция в моче овариэктомированных (OVX) крыс, согласно Примеру 4.

[0035] Фиг. 5 представляет собой панель гистограмм, демонстрирующую действие Соединения I на активность кислой фосфатазы в сыворотке овариэктомированных (OVX) крыс, согласно Примеру 4.

[0036] Фиг. 6 представляет собой гистограмму, демонстрирующую действие Соединения I на мРНК экспрессию RANKL/OPG остеокластного маркера в большеберцовой кости овариэктомированной (OVX) крысы, согласно Примеру 4.

[0037] Фиг. 7 представляет собой гистограмму, демонстрирующую действие Соединения I на содержание коллагена в метафизе бедренной кости крысы, согласно Примеру 4.

[0038] Фиг. 8 представляет собой панель графических материалов, иллюстрирующих действие Соединения I на содержание коллагена в метафизе бедренной кости крысы, согласно Примеру 4.

[0039] Фиг. 9 представляет собой точечный график, демонстрирующий, что Соединение XIV повышает уровень адипонектина в сыворотке, маркер модуляции образования и ремоделирования костной ткани, согласно Примеру 5.

ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ СУЩНОСТИ ИЗОБРЕТЕНИЯ

В настоящем изобретении описаны соединения Формулы I, их фармацевтически приемлемые соли, содержащие их композиции и их применение. Разнообразные варианты реализации данного изобретения включают:

A) Соединения по данному изобретению

[0040] Согласно одному аспекту данное изобретение относится к разнообразным способам фармацевтического применения соединения Формулы I или его фармацевтически приемлемой соли:

,

где

A представляет собой C₅ алкил, C₆ алкил, C₅ алкенил, C₆ алкенил, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ или CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃ , в которых n равен 3 или 4; или предпочтительно представляет собой C₅ алкил, C₅ алкенил, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ или CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃, в которых n равен 3; или предпочтительно представляет собой C₆ алкил, C₆ алкенил, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ или CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃, в котором n равен 4; или предпочтительно представляет собой неразветвленную цепь C₅ алкила, C₆ алкила, C₅ алкенила, C₆ алкенила, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ или CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃, в которых n равен 3 или 4; или предпочтительно представляет собой неразветвленную цепь C₅ алкила, C₅ алкенила, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ или CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃ , в которых n равен 3;

R₁ представляет собой H, F или OH; или предпочтительно представляет собой H или OH;

R₂ представляет собой H, F, OH, C₅ алкил, C₆ алкил, C₅ алкенил, C₆ алкенил, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ или CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃, в которых n равен 3 или 4; или предпочтительно представляет собой H, F, OH, C₅ алкил, C₅ алкенил, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ или CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃ , в котором n равен 3; или предпочтительно представляет собой H, F, OH, C₆ алкил, C₆ алкенил, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ или CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃, в котором n равен 4; или предпочтительно представляет собой H, F, OH, неразветвленную цепь C₅ алкила, C₆ алкила, C₅ алкенила, C₆ алкенила, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ или CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃, в которых n равен 3 или 4; или предпочтительно представляет собой H, F, OH, неразветвленную цепь C₅ алкила, C₅ алкенила, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ или CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃ , в которых n равен 3; или предпочтительно представляет собой H, OH, F или C₅ алкил; или предпочтительно представляет собой H, OH, F или неразветвленную цепь C₅ алкила;

R₃ представляет собой H, F, OH или CH₂Ph; или предпочтительно представляет собой H, F или OH; или предпочтительно представляет собой H или OH;

R₄ представляет собой H, F или OH; или предпочтительно представляет собой H или OH;

Q представляет собой

1) (CH₂)_mC(O)OH, где m равен 1 или 2,

2) CH(F)-C(O)OH,

3) CF₂-C(O)OH или

4) C(O)-C(O)OH.

[0041] Согласно конкретному варианту реализации изобретения A представляет собой C₅ алкил или C₆ алкил.

[0042] Согласно конкретному варианту реализации изобретения R₁ представляет собой H или OH.

[0043] Согласно конкретному варианту реализации изобретения R₂ представляет собой H, F, OH, C₅ алкил или C₆ алкил.

[0044] Согласно конкретному варианту реализации изобретения R₃ представляет собой H или OH.

[0045] Согласно конкретному варианту реализации изобретения R₄ представляет собой H или OH.

[0046] Согласно конкретному варианту реализации изобретения Q представляет собой:

1) (CH₂)_mC(O)OH, где m равен 1 или 2,

2) CH(F)-C(O)OH или

3) CF₂-C(O)OH.

[0047] Согласно конкретному варианту реализации изобретения Q представляет собой:

1) (CH2)_mC(O)OH где m равен 1,

2) CH(F)-C(O)OH,

3) CF₂-C(O)OH или

4) C(O)-C(O)OH.

[0048] Согласно конкретному варианту реализации изобретения Q представляет собой:

1) (CH₂)_mC(O)OH где m равен 1,

2) CH(F)-C(O)OH или

3) CF₂-C(O)OH.

[0049] Согласно конкретному варианту реализации изобретения Q представляет собой (CH₂)_mC(O)OH, где m равен 1 или 2.

[0050] Согласно другому варианту реализации изобретения соединение Формулы I, где A представляет собой C₅ алкил или C₆ алкил; R₁ представляет собой H, F или OH; R₂ представляет собой H, F, OH, C₅ алкил или C₆ алкил; R₃ представляет собой H, OH или CH₂Ph; R₄ представляет собой H, F или OH; и Q представляет собой (CH₂)_mC(O)OH, где m равен 1 или 2.

[0051] Согласно другому варианту реализации изобретения соединение Формулы I; где A представляет собой C₅ алкил; R₁ представляет собой H; R₂ представляет собой H или C₅ алкил; R₃ представляет собой H; R₄ представляет собой H; и Q представляет собой (CH₂)_mC(O)OH, где m равен 1.

[0052] Соединения Формулы I соответствуют любым комбинациям A, Q, R₁, R₂, R₃ и R₄ или их конкретному, или их предпочтительному варианту реализации изобретения, которые однозначно предусмотрены данным изобретением.

[0053] В контексте данного документа термин “алкил” предназначен включать неразветвленную цепь насыщенной алифатической углеводородной группы, имеющей определенное число атомов углерода, расположенных линейно.

[0054] В контексте данного документа под термином “алкенил” подразумевают ненасыщенную неразветвленную цепь углеводородных групп, имеющих определенное число атомов углерода и в которой по меньшей мере два атома углерода связаны друг с другом двойной связью и имеют, как E, так и Z конфигурацию и их комбинации.

[0055] Примеры соединений Формулы I включают, но не ограничиваются ими, Соединения от I до XXIV, нижеперечисленные в Таблице 1. В предпочтительном варианте реализации изобретения соединение представлено кислотной формой или фармацевтически приемлемой солью любого из Соединений от I до XXIV.

Таблица 1:Иллюстративные примеры соединений Формулы I

[0056] Заявители описали соединения, структура которых родственна структуре некоторых соединений по данному изобретению. Ссылка дана для примера соединений, описанных в международных патентных публикациях № WO 2010/127448, WO 2010/127440 и WO 2014/138906, которые включены в данный документ в полном объеме посредством ссылки. Соответственно, в конкретных вариантах реализации изобретения любое одно или все Соединения, описаннные в указанных патентных заявках, исключено(ны) из объема данного изобретения.

Соли

[0057] В контексте данного документа под термином “фармацевтически приемлемая соль” подразумевают основно-аддитивную соль. Примеры фармацевтически приемлемых солей также описаны, например, в Berge et al.,“Pharmaceutical Salts”, J.Pharm.Sci.66, 1-19 (1977). Фармацевтически приемлемые соли могут быть синтезированы традиционно принятыми химическими методами из исходного агента, который содержит кислотный фрагмент. В общем, такие соли получают, вводя в реакцию формы свободной кислоты указанных агентов со стехиометрическим количеством подходящего основания в воде или в органическом растворителе, или в смеси обоих. Соли могут получать in situ во время финального выделения или очистки агента или путем отдельной реакции очищенного соединения по данному изобретению в форме свободной кислоты с соответствующим желаемым основанием, и выделения соли, образованной таким образом.

[0058] Фармацевтически приемлемая соль соединений Формулы I может быть выбрана из группы, состоящей из основно-аддитивных солей натрия, калия, кальция, магния, лития, аммония, марганца, цинка, железа или меди. В предпочтительных вариантах реализации изобретения фармацевтически приемлемая соль соединений по данному изобретению может представлять собой натриевую, калиевую, кальциевую, магниевую или литиевую соль. Более предпочтительно фармацевтически приемлемая соль представляет собой натриевую соль.

[0059] Все кислотные, солевые и другие ионные и неионные формы, описанных соединений, включены в виде соединений по данному изобретению. Например, если в данном документе соединение проиллюстрировано в форме кислоты, то формы солей указанного соединения также включены. Аналогичным образом, если в данном документе соединение проиллюстрировано в виде соли, формы кислоты также включены.

Пролекарства

[0060] В некоторых вариантах реализации изобретения, соединения по данному изобретению представлены общей Формулой I, в которой заявленные соединения присутствуют в форме, содержащей свободную карбоксильную группу, также могут включать все фармацевтически приемлемые соли, такие их изостерические эквиваленты, как тетразольные формы и формы их пролекарства. Примеры последних включают фармацевтически приемлемые сложные эфиры или амиды, полученные по реакции спиртов или аминов, включая аминокислоты, со свободными кислотами, определенными Формулой I.

Хиральность

[0061] Соединения по данному изобретению, их фармацевтически приемлемые соли или пролекарства, могут содержать один или более ассиметрических центров, хиральных осей и хиральных плоскостей и могут, таким образом, приводить к образованию энантиомеров, диастереомеров и других стереоизомерных форм и могут быть определены с помощью терминов абсолютной стереохимии, таким как (R)- или (S)-. В данном изобретении предусмотрено, что оно включает все возможные изомерные, также как, их рацемические и оптически чистые формы. Оптически активные (+) и (-), (R)- и (S)-, изомеры могут получать, используя хиральные синтоны или хиральные реагенты или быть разделены, используя принятые методики, такие как обращенно-фазная ВЭЖХ. Рацемические смеси могут быть получены и затем разделены на индивидуальные оптические изомеры или указанные оптические изомеры могут получать с помощью хирального синтеза. Энантиомеры могут быть разделены с помощью методов известных специалистам в данной области техники, например, с помощью образования диастереомерных солей, которые могут быть разделены путем кристаллизации, газо-жидкостной или жидкостной хроматографией, селективной реакции одного энантиомера с энантиомер-специфичным реагентом. Специалистам в данной области техники будет понятно, что если методом разделения желаемый энантиомер превращается в другое химическое соединение, то требуется дополнительная стадия для образования желаемой энантиометрической формы. Как альтернативный вариант, определенные энантиомеры могут быть синтезированы с помощью ассиметрического синтеза, используя оптически активные реагенты, субстраты, катализаторы или растворители или путем превращения одного энантиомера в другой, используя ассиметрическое превращение.

[0062] Некоторые соединения по данному изобретению могут находиться в цвиттер-ионной форме и данное изобретение включает цвиттер-ионные формы указанных соединений и их смеси.

Гидраты

[0063] В дополнение, соединения по данному изобретению также могут существовать в гидратированной и безводной формах. Гидраты любой из формул, описанных в данном документе, включены в виде соединений по данному изобретению, которые могут существовать в виде формы моногидрата или полигидрата.

B) Методы получения

[0064] В общем, все соединения по данному изобретению могут получать принятыми методами, используя легкодоступные и/или традиционно получаемые исходные вещества, реагенты и принятные синтетические методики. Особый интерес представляет работа Hundertmark, T.; Littke, A.F.; Buchwald, S.L.; Fu, G.C.Org.Lett.12, 1729-1731 (2000).

[0065] Иллюстративный раздел ниже предлагает общие схемы и конкретные, но не ограничивающие, примеры для синтеза Соединений I-XXIV.

C) Применение в фармацевтических целях

[0066] Как указано и проиллюстрировано в данном документе, соединения по данному изобретению обладает благоприятными фармацевтическими свойствами и по отношению к субъектам указанные соединения могут быть пригодными для применения фармацевтических целях. Применение в медицинских и фармацевтических целях, предусмотренное изобретателями, включает, но не ограничивается ими, предовтращение и/или лечение разнообразных форм остеопороза. В контексте данного документа термин “остеопороз” относится к прогрессирующему заболеванию костной ткани, которое характеризуется понижением массы и плотности костной ткани, которые могут приводить к повышенному риску переломов кости. Термин “остеопороз” охватывает первичный остеопороз типа 1 или постменопаузальный остеопороз (наиболее часто встречается у женщин после менопаузы), первичный остеопороз типа 2 (встречается как у женщин, так и у мужчин обычно после 75 лет), и вторичный остеопороз (который может появляться в любом возрасте, форму, которая обусловлена благоприятствующими ей хроническими медицинскими проблемами или длительное употребление лекарственных средств, таких как глюкокортикоиды (заболевание может далее называться стероидный или глюкокортикоидный остеопороз)). В контексте данного документа, “остеопороз” также включает заболевания костной ткани, включающие потерю массы и/или плотности костной ткани, такие как аномально высокий остеокластогенез, остеопороз подобный остеомаляции, остеопения, незавершённый остеогенез, мраморная болезнь, некроз кости, болезнь Педжета, гипофосфатемия и их комбинаций.

[0067] Как известно, разнообразные заболевания и патологические состояния могут обусловливать остеопороз, и данное изобретение может быть пригодным для предотвращения и/или лечения остеопороза, связанного, прямо или косвенно, с одной или более указанных причин:

• Аутоиммунные заболевания, которые включают ревматоидный артрит, волчанку и рассеянный склероз;

• Нарушения со стороны желудочно-кишечного тракта, которые включают глютеиновую болезнь, воспалительное заболевание кишечника, гастрэктомию и желудочно-кишечный анастомоз;

• Эндокринные/Гормональные нарушения, которые включают диабеты, гиперпаратиреоз, тиреотоксикоз и синдром Кушинга;

• Нарушения со стороны кроветворной системы, которые включают лейкоз, лимфому, множественную миелому, серповидно-клеточную анемию (нарушения костного мозга) и талассемию;

• Рак, который включает рак груди и предстательной железы;

• Неврологические растройства, которые включают депрессию, болезнь Паркинсона и повреждение спинного мозга;

• Заболевания органов, которые включают заболевания легких (COPD, эмфизему), печени и хроническое заболевание почек (ХБП);

• Анкилозирующий спондилоартрит;

• СПИД/ВИЧ;

• Перелом кости;

• Плохое питание, которое включает расстройства пищевого поведения и недостаточное питание; и

• Пре- и постменопаузный остеопороз и кортикостероидный остеопороз.

[0068] В одном варианте реализации изобетения остеопороз представляет собой первичный остеопороз типа 1 или постменопаузальный остеопороз. В другом варианте реализации изобретения остеопороз представляет собой первичный остеопороз типа 2.

[0069] Термин “субъект” включает живые организмы, в которых может возникать остеопороз или которые подвежены такому заболеванию. Термин “субъект” включает животных, таких как млекопитающие или птицы. Предпочтительно, субъект представляет собой млекопитающее, включающее, но не ограничивающиеся ими, человека, лошадь, собаку и кота. В некоторых вариантах реализации изобретения мышь исключена из перечня млекопитающих. Более предпочтительно, субъект представляет собой человека. Более предпочтительно, человек представляет собой пациента, нуждающегося в лечении человека. В предпочтительных вариантах реализации изобретения, субъект представляет собой человека, имеющего или страдающего от любого из следующих патологических состояний: первичный тип 1 остеопороз, постменопаузальный остеопороз, менопауза (пре-менопауза и пост-менопауза), первичный остеопороз типа 2, возраст более 75 лет, перелом кости, остеопороз, благоприятствующие хронические медицинские проблемы или заболевание, длительное применение лекарственных средств, таких как глюкокортикоиды, аномально высокий остеокластогенез, остеопороз подобный остеомаляции, остеопения, незавершённый остеогенез, мраморная болезнь, некроз кости, болезнь Педжета, гипофосфатемия и их комбинации. В предпочтительном варианте реализации изобретения субъект представляет собой постменопаузальную женщину.

[0070] В контексте данного документа, “предотвращающий” или “предотвращение” относится к по меньшей мере уменьшению вероятности риска (подверженности) развития заболевания или нарушения (т.е. обусловливания не развития по меньшей мере одного клинического симптома заболевания у пациента, который может быть подвержен влиянию или предрасположен заболеванию, но еще не испытывал или не показал симптомов заболевания). Биологические и физиологические параметры для идентифицирования таких пациентов предложены в данном документе и хорошо известны врачам. В предпочтительных вариантах реализации изобретения, “предотвращающий” или “предотвращение” относится к предотвращению уменьшения массы и/или плотности костной ткани и/или уменьшения риска перелома кости.

[0071] Термины “лечение” или “лечащий” пациента включает применение или введение соединения по данному изобретению субъекту (или применение или введение соединения по данному изобретению в клетку или ткань, полученную от субъекта) с целью отсрочки, стабилизации, лечения, исцеления, ослабления симптомов, облегчения, изменения, излечивания, меньшего ухудшения, купирования, улучшения или воздействия на заболевание или патологическое состояние, симптом заболевания или патологического состояния или риск (или подверженность) заболеванию или патологическому состоянию. Термин “лечащий” относится к любому проявлению успеха лечения или купирования симптома повреждения, патологии или патологического состояния, включая любой объективный или субъективный параметр, такой как ослабление боли или выраженности симптома, ремиссия; понижение скорости ухудшения; уменьшение тяжести заболевания; стабилизация, ослабление симптомов или воздействие на повреждение, патологию или патологическое состояние, которое делает их более легко переносимыми субъектом; замедление скорости дегенирации или ухудшения; воздействие на конечную точку дегенерации, которое делает ее менее тяжело протекающей; или улучшения физического или интеллектуального самочувствия субъекта. В некоторых вариантах реализации изобретения термин “лечащий” может включать повышение средней продолжительности жизни субъекта и/или отсрочку до того, как дополнительное лечение потребуется. В предпочтительных вариантах реализации изобретения “лечение” или “лечащий” относится к увеличению массы и/или плотности костной ткани, и/или повышенной исцеляемости перелома кости.

[0072] Более того, в некоторых вариантах реализации изобретения соединения по данному изобретению применяют в качестве монотерапии для предотвращения и/или лечения остеопороза. В других вариантах реализации изобретения соединения по данному изобретению применяют в комбинации с уже одобренными для таких целей лекарственными средствами, включающими, но не ограничивающимися ими, лекарственные средства, применяемые для лечения остеопороза. Примеры известных относящихся к остеопорозу агентов, которые могут применяться в комбинации с соединениями по данному изобретению, включают, но не ограничиваются ими, бисфосфонаты, Оданакатиб, Алендронат, Ризедронат, Этидроната, Золедронат, Памидронат, Терипаратид, Тамоксифен, Ралоксифен и Деносумаб.

[0073] Соответственно, способы лечения по данному изобретению также могут включать совместное введение по меньшей мере одного соединения по данному изобретению или его фармацевтически приемлемой соли, вместе с введением другого терапевтически эффективного агента. Поэтому, дополнительный аспект данного изобретения относится к способам лечения субъекта сопутствующей терапией, включающим введение, нуждающемуся в этом субъекту, эффективного количества первого и второго агента, причем первый агент находится в соответствии с определением Формулы I и второй агент предназначен для предотвращения или лечения любого одного из нарушений или заболеваний перечисленных выше в данном документе. В контексте данного документа, под термином “сопутствующий” или “сопутствующе” в фразах “сопутствующая терапия” или “совместно с” включает введение первого агента в присутствии второго агента. Способ сопутствующей терапии включает способы, в которых первый, второй, третий или дополнительные агенты вводят совместно. Способ сопутствующей терапии также включает способы, в которых первый или дополнительный агенты вводят в присутствии второго или дополнительных агентов, причем второй или дополнительные агенты, например, могут быть уже предварительно введены. Способ сопутствующей терапии могут выполнять поэтапно различные исполнители. Например, один исполнитель может вводить субъекту первый агент, тогда как второй исполнитель может вводить субъекту второй агент и этапы введения могут быть выполнены в одно и то же время или приблизительно одно и то же время, или быть разнесены по времени с момента введения первого агента (и/или дополнительные агенты) до введения второго агента (и/или дополнительные агенты). Исполнитель и субъект могут представлять собой одно и то же существо (например, человека).

[0074] Соответственно, данное изобретение также относится к способу предотвращения, уменьшения или устранения симптома или осложнения одного из вышеперечисленных заболеваний или патологических состояний. Способ под данному изобретению включает этап введения, нуждающемуся в этом субъекту, первой фармацевтической композиции, содержащей по меньшей мере одно соединение по данному изобретению и второй фармацевтической композиции, содержащей один или более дополнительных активных компонентов, в которых все активные компоненты вводят в количестве достаточном для ингибирования, уменьшения или устранения одного или более симптомов или осложнений заболевания или патологического состояния, которые требуется вылечить. В одном аспекте изобретения введение первой и второй фармацевтических композиций разведено во времени на по меньшей мере около две минуты. Предпочтительно, первый агент представляет собой соединение Формулы I, в соответствии с определением в данном документе, или его фармацевтически приемлемую соль, например, натриевую соль. Второй агент может быть выбран из перечня соединений, перечисленных выше (например, агентов или лекарств, применяемых для предовтращения и/или лечения остеопороза).

Ингибирование остеокластогенеза

[0075] Остеокласты представляют собой тип костной клетки, который резорбирует костную ткань. На молекулярном уровне остеокласт разбирает на части костную ткань с помощью секреции кислоты и коллагеназы. Данный процесс известен как резорбция костной ткани. Остеокластогенез относится к дифференциации клеток-предшественников остеокластов в остеокласты. При предовтращении и/или лечении остеопороза желательно уменьшить остеокластогенез.

[0076] Остеобласт представляет собой тип клеток, который синтезирует костную ткань. Остеобласты образуются из мезенхимальных стволовых клеток. При предотвращении и/или лечения остеопороза желательно стимулировать остеобластную дифференциацию

[0077] Как проиллюстрировано далее в примерах в данном документе, соединения по данному изобретению способны ингибировать и/или уменьшать остеокластогенез. Это продемонстрировано, например: отсутствием клеток TRAP (Пример 2; Фиг. 1); сильной стимуляцией продуцирования ИЛ-12 в ЛПС-стимулированных клетках RAW264,7 (Примеры 2 и 3); уменьшением потери кальция in vivo (Пример 4, Фиг. 4); уменьшением активности кислой фосфатазы in vivo (Пример 4, Фиг. 5); понижением мРНК экспрессии RANKL/OPG in vivo (Пример 4, Фиг. 6); увеличением содержания коллагена in vivo (Пример 4, Фиг. 7 и 8); и повышением уровня адипонектина в сыворотке (Пример 5, Фиг. 9).

[0078] Данные результаты свидетельствуют о способности соединений по данному изобретению предотвращать/лечить остеопороз путем ингибирования и/или уменьшения активности остеокластов.

[0079] Данные результаты также демонстрируют способность соединений по данному изобретению предотвращать и/или уменьшать потерю костной массы, включая, но не ограничиваясь ею, потерю кальция. Соответственно, данные результаты дополнительно свидетельствуют о способности соединений по данному изобретению предотвращать/лечить остеопороз путем стимуляции остеобластной дифференциации.

Стимуляция продуцирования интерлейкина-12 (ИЛ-12)

[0080] Как проиллюстрировано далее в примерах в данном документе, соединения по данному изобретению стимулируют продуцирование ИЛ-1 2 в присутствии ЛПС. Данные результаты свидетельствуют о способности указанных соединений предотвращать и/или лечить остеопороз, вследствие стимуляции ИЛ-12. Это подтверждается научной литературой, в которой сообщается, что ИЛ-12 оказывает непосредственный ингибирующий эффект на остеокластогенез.

[0081] Соответственно, в некоторых вариантах реализации изобретения, соединения и композиции по данному изобретению пригодны стимуляции продуцирования интерлейкина-12 (ИЛ-12), включая, но не ограничиваясь ими, продуцирование клетки-предшественника остеокласта.

Уменьшение активности кислой фосфатазы

[0082] Как проиллюстрировано далее в примерах в данном документе, соединения по данному изобретению уменьшают ферментную активность кислой фосфатазы, измеренную в сыворотке овариэктомированных крыс. Данные результаты свидетельствуют о способности указанных соединений предотвращать и/или лечить остеопороз вследствие уменьшения ферментной активности кислой фосфатазы.

[0083] Соответственно, в некоторых вариантах реализации изобретения, соединения и композиции по данному изобретению пригодны для уменьшения активности кислой фосфатазы в клетках костной ткани.

Уменьшение экспрессии рецептора-активатора лиганда NF-κB (RANKL)

[0084] Как проиллюстрировано далее в примерах в данном документе, соединения по данному изобретению уменьшают мРНК экспрессию RANKL, измеренную в большеберцовой кости овариэктомированных крыс. Данные результаты свидетельствуют о способности указанных соединений предотвращать и/или лечить остеопороз в результате уменьшения экспрессии и/или биологической активности RANKL.

[0085] Соответственно, в некоторых вариантах реализации изобретения, соединения и композиции по данному изобретению пригодны для уменьшения экспрессии и/или активности RANKL в клетках костной ткани.

Повышение содержания коллагена

[0086] Как проиллюстрировано далее в примерах в данном документе, соединения по данному изобретению повышают содержание коллагена в костной ткани, измеренной в метафизе бедренной кости овариэктомированных крыс. Данные результаты свидетельствуют о способности указанных соединений предотвращать и/или лечить остеопороз, как было продемонстрировано путем повышения содержания коллагена в костной ткани.

[0087] Соответственно, в некоторых вариантах реализации изобретения, соединения и композиции по данному изобретению пригодны для повышения содержания коллагена в живой костной ткани.

Повышение уровеня адипонектина

[0088] Как проиллюстрировано в примерах ниже, соединения по данному изобретению повышают уровень адипонектина, измеренного в сыворотке мышей с ожирением больных диабетом. Данные результаты свидетельствуют о способности указанных соединений предотвращать и/или лечить остеопороз путем стимуляции образования костной ткани, ремоделирования и минерализации и/или путем ингибирования резорбции костной ткани.

[0089] Соответственно, в некоторых вариантых реализации изобретения, соединения и композиции по данному изобретению пригодны для стимуляции образования костной ткани и/или для стимуляции ремоделирования костной ткани и/или для стимуляции дифференциации и минерализации остеобластов и/илидля ингибирования резорбции костной ткани.

D) Фармацевтические композиции и препараты

[0090] Родственный аспект данного изобретения относится к фармацевтическим композициям, содержащим терапевтически эффективное количество описанных выше одного или более соединений по данному изобретению (например, соединения Формулы I). Как было указано выше, фармацевтические композиции по данному изобретению могут быть пригодны: для предотвращения и/или лечения остеопороза; для ингибирования остеокластогенеза; для стимуляции продуцирования интерлейкина-12 (ИЛ-12) с помощью стимулированных клеток-предшественников остеокластов; для уменьшения активности кислой фосфатазы в клетках костной ткани; для уменьшения экспрессии рецептора-активатора лиганда NF-κB (RANKL) в клетках костной ткани; для повышения содержания коллагена в костной ткани, для стимуляции образования костной ткани; для стимуляции ремоделирования костной ткани; для стимуляции минерализации костной ткани; и/или для ингибирования резорбции костной ткани.

[0091] В контексте данного документа термином “терапевтически эффективное количество” количество соединения, которое, при введении субъекту для лечения или предотвращения конкретного нарушения, заболевания или патологического состояния, является достаточным для оказания эффекта, такого как лечение или предовтращения такого нарушения, заболевания или патологического состояния. Дозировки и терапевтически эффективные количества могут изменяться например, в зависимости от разнообразия факторов, включающих активность специфически примененного агента, возраст, массу тела, общее состояние здоровья, пол и диету субъекта, время введения, путь введения, скорость экскреции и любую комбинацию лекарств, в соответствующих случаях, эффект которых лечащий врач желает, чтобы вещество имело на субъекта (например, суммарный или частичный ответ, который можно засвительствовать по факторам, включающим увеличение массы и/или плотности костной массы (или сокращение их уменьшения), снижение риска перелома кости итд), свойства соединений (например, биодоступность, стабильность, активность, токсичность итд.), и конкретное нарушение(я) от которых страдает субъект. Дополнительно, терапевтически эффективное количество может зависеть от параметров крови субъекта (например, уровня кальция, липидограммы, уровней инсулина, гликемии), тяжести болезненного состояния, функции органов или основного заболевания или осложнений. Такие подходящие дозы могут быть определены, используя любые доступные анализы, включая анализы, описанные в данном документе. Когда одно или более соединений по данному изобретению будут введены людям, врач может, например, прописать относительно низкую дозу вначале, последовательно повышая дозу до тех пор, пока не будет получен подходящий ответ на лечение. Вводимая доза будет исключительно оставлена на усмотрение врача-онколога. В общем, тем не менее, предусмотрено, что доза соединений по данному изобретению может находится в диапазоне от около 1 до около 50 мг/кг в день для человека. В выбранных вариантах реализации изобретения диапазон может быть равен между 1 и 30 мг/кг в день для человека. В выбранных вариантах реализации изобретения диапазон может быть равен между 1 и 20 мг/кг в день для человека. В выбранных вариантах реализации изобретения диапазон может быть равен между 5 и 18 мг/кг в день для человека. В выбранных вариантах реализации изобретения диапазон может быть равен между 1 и 18 мг/кг в день для человека.

[0092] В контексте данного документа термин “фармацевтическая композиция” относится к наличию по меньшей мере одного соединения по данному изобретению Формулы I, в соответствии с определением в данном документе, и по меньшей мере одного фармацевтически приемлемого носителя, разбавителя, несущей среды или вспомогательного средства. В контексте данного документа под термином “фармацевтически приемлемый носитель”, “фармацевтически приемлемый разбавитель” или “фармацевтически приемлемое вспомогательное вещество” подразумевают, без ограничения, любой адьювант, носитель, вспомогательное вещество, глидант, подсластитель, разбавитель, консервант, краситель/окрашивающее средство, интенсификатор вкусоароматических свойств, поверхностно-активное вещество, увлажняющее средство, диспергирующее средство, суспендирующее средство, стабилизатор, изотоническое средство, растворитель, эмульсификатор или инкапсулирующее средство, такое как липосома, циклодекстрины, инкапсулирующие полимерные системы доставки или полиэтиленгликолевые матрица, пригодные для применения для субъектов, предпочтительно людям. Предпочтительно это относится к соединению или композиции, которые одобрены или заслуживают одобрения федеральным или правительственным регуляторным органом или перечислено в Фармакопее США или других общепризнанных фармакопеях для применения для животных и более конкретно для людей. Фармацевтически приемлемые несущие среды могут представлять собой растворитель или дисперсионную среду, содержащую, например, воду, этанол, многоатомный спирт (например, глицерин, пропиленгликоль и жидкий полиэтиленгликоль), их пригодные смеси и растительные масла. Дополнительные примеры фармацевтически приемлемых несущих сред включают, но не ограничиваются ими: воду для инъекций (Фармакопея США); водные несущие среды, такие как, но не ограничивающиеся ими, физиологический раствор, раствор для инъекций Рингера, инъекционный раствор декстрозы, раствор для инъекций, содержащий декстрозу и хлорид натрия раствор для инъекций и лактатный раствор Рингера для инъекций; смешивающиеся с водой несущие среды, такие как, но не ограничивающиеся ими, этиловый спирт, полиэтиленгликоль и полипропиленгликоль; и неводные несущие среды, такие как, но не ограничивающиеся ими, кукурузное масло, хлопковое масло, арахисовое масло, сезамовое масло, этилолеат,изопропилмиристат и бензилбензоат. Предотвращение воздействия микроорганизмов может быть достигнуто прибавлением антибактериальных и противогрибковых средств, например, парабенов, хлорбутанола, фенола, аскорбиновой кислоты, тимеросала и т.п. Во многих случаях в композиях включены изотонические средства, например, сахара, хлорид натрия или многоатомные спирты, такие как маннит и сорбит. Пролонгированная абсорбция инъекционных препаратов может быть обеспечена путем включения в композицию агента, замедляющего абсорбцию, например, моностеарата алюминия или желатина.

[0093] Композиция по данному изобретению может включать одно или более соединений Формулы I в соответствии с определением в данном документе или их фармацевтически приемлемых производных, солей, пролекарств, аналогов и изомеров или энантиомеров.Препараты активного соединения могут получать для обеспечения фармацевтической композиции в форме, пригодной для энтерального, мукозального (включая сублингвальное, ингаляционное и ректальное), парентерального (включая внутримышечное, внутрикожное, подкожное и внутривенное) или наружного (включая мази, кремы или лосьены) введения. Препарат может быть представлен, где это целесообразно, в отдельной дозированной лекарственной форме и может быть получен любым из методов, хорошо известным в области фармацевтических препаратов. Все методы включают стадию приведения в контакт активного фармацевтического компонента с жидкими носителями или мелкодисперстными твердыми носителями или ими обоими, по мере необходимости. Где это целесообразно, описанные выше препараты могут быть адаптированы для того, чтобы обеспечивать замедленное высвобождение активного фармацевтического компонента. Применение известных в данной области техники препаратов с замедленным высвобождением включает болюстное вливание, продолжительное вливание, биосовместимые полимеры или липосомы.

E) Комплекты

[0094] Соединение(я) по данному изобретению могут быть упакованы как часть комплекта, необязательно включающего контейнер (например, упаковочный, коробку, флакон, итд).Комплект может использоваться в коммерческих целях согласно способам, описанным в данном документе, и может включать инструкции для применения в способе по данному изобретению. Дополнительный комплект компонентов может включать кислоты, основания, буферные средства, неорганические соли, растворители, антиоксиданты, консерванты или металлохелаторы. Дополнительный комплект компонентов содержится в виде чистых композиций или в виде водных или органических растворов, которые включают в состав один или более дополнительных компонентов комплекта. Любые или все компоненты комплекта необязательно дополнительно содержат буферы.

[0095] Соединение(я) по данному изобретению могут или не могут вводить пациенту в одно и то же время или одним и тем же путем введения. Поэтому, способы по данному изобретению охватывают комплекты, которые, когда их применяет практикующий врач, могут упростить введение пациенту соответствующих количеств двух или более активных компонентов.

[0096] Типичный комплект по даному изобретению содержит единичную лекарственную форму по меньшей мере одного соединения по данному изобретению Формулы I в соответствии с определением в данном документе или его фармацевтически приемлемую соль и единичную лекарственную форму по меньшей мере одного дополнительного активного компонента. Примеры дополнительных активных компонентов, которых могут применять совместно с соединениями по данному изобретению, включают, но не ограничиваются ими, любые указанные выше лекарства (например, лекарства, применяемые для лечения остеопороза), которых могут применять в комбинации с соединением(ями) по данному изобретению.

[0097] Комплекты по данному изобретению дополнительно могут содержать фармацевтически приемлемые несущие среды, которых могут применять для введения одного или более активных компонентов. Например, если активный компонент предлагается в твердой форме, которая должна быть перерастворена для парентерального введения, комплект может содержать герметически закрытый контейнер или пригодную несущую среду, в которой активный компонент может быть растворен с образованием идеального стерильного раствора, пригодного для парентерального введения. Примеры фармацевтически приемлемых несущих сред предлагаются выше.

ПРИМЕРЫ

[0098] Следующие примеры дополнительно иллюстрируют применение данного изобретения на практике, но не предназначены для его ограничения.

Пример 1:Экспериментальные методы получения некоторых иллюстративных примеров соединений

[0099] Все ВЭЖХ хроматограммы и масс-спектры записаны на приборе HP 1100 LC-MS Agilent™, используя аналитические колонки C18 (250 × 4,6 мм, 5 микрон) с градиентом в течение 5 мин 15-99% CH₃CN-H₂O с 0,01% ТФА в качестве элюента и потоком 2 мл/мин.

Соединение I:Синтез натриевой соли (3-пентилфенил)уксусной кислоты, используя модифицированную методику реакции Соногаширы

Стадия 1

[00100] К раствору/суспензии 3-бромфенилуксусной кислоты (5,02 г, 23,33 ммоль) в этаноле (100 мл) при комнатной температуре прибавили концентрированную серную кислоту(1 мл). Бесцветное твердое вещество затем перемешивали в течение ночи при 80°C. Раствор концентрировали при пониженном давлении. Остаток разбавили этилацетатом (25 мл), водой (25 мл) и две фазы разделили. Водную фазу экстрагировали этилацетатом (2 × 25 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (20 мл). Объединенные органические фазы промыли насыщенным раствором NaHCO₃ (2 × 25 мл), насыщенным водным раствором хлорида натрия (25 мл) и сушили над сульфатом натрия. После фильтрования раствор выпарили досуха. Это дало получить светло-желтое масло (5,4 г, 95%).¹H-ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 1,26 (т, J = 4,7 Гц, 3H), 3,57 (с, 2H), 4,15 (к, J = 7,0 и 14,3 Гц, 2H), 7,17-7,26 (м, 2H), 7,38-7,44 (м, 1H), 7,44 (д, J = 1,56 Гц, 1H).

Стадия 2

[00101] Смесь этил-(3-бромфенил)ацетата (0,3 г, 1,24 ммоль) и гидрата фторида тетрабутиламмония (0,97 г, 3,72 ммоль) обработали PdCl₂(PPh₃)₂ (26 мг, 0,037 ммоль; 3 моль %) и 1-пентином (367 мкл, 3,72 ммоль) в герметично закрытой пробирке. Пробирку нагревали при 80°C в течение 2 ч. Смесь обработали водой и экстрагировали диэтиловым эфиром. Органический экстракт сушили над сульфатом натрия, отфильтровали и выпарили в вакууме с получением сырого продукта. Очистка на колонке (силикагель) Biotage™ 25 M с элюированием этилацетат/гексан от 0:1 до 2:98 дала этил-(3-(пентин-1-ил)фенил)ацетат в виде бледно-желтого масла (0,23 г, 79%).

Стадия 3

[00102] К этил[3-[пентин-1-ил]фенил]-ацетату (0,23 г, 0,98 ммоль) в этаноле (5 мл) в атмосфере азота прибавили Pd на угле (10%, 25 мг, 10% мас./мас.). Смесь интенсивно перемешивали в атмосфере водорода при комнатной температуре в течение ночи. Раствор отфильтровали и палладий/уголь промыли этанолом (20 мл). Фильтрат концентрировали с силикагелем. Сырой продукт очистили с помощью флэш--хроматографии, используя смесь 10% гексан/ этилацетат. Получили прозначное масло (0,21 г, 90%).

Стадия 4

[00103] К раствору указанного сложного эфира (0,2 г, 0,9 ммоль) в тетрагидрофуране (5 мл), метаноле (1,5 мл) и воде (1,5 мл) при 0°C прибавили гидроксид лития (0,09 г, 3,6 ммоль). Реакционную смесь перемешивали в течение ночи при комнатной температуре. Нерастворимый осадок отфильтровали и фильтрат концентрировали при пониженном давлении. Затем остаток обработали 2 M HCl и экстрагировали этилацетатом. Органическую фазу сушили над сульфатом натрия и выпарили при пониженном давлении. Сырой материал очистили на колонке (силикагель) 40 L Biotage, используя в качестве элюента этилацетат/гексан (от 0:10 до 4:6). Это дало получить чистую (3-пентилфенил)уксусную кислоту (0,19 г, 99%) в виде белого клейкого твердого вещества.¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ 0,90 (т, J = 7,0 Гц, 3H), 1,28-1,38 (м, 4H), 1,61 (кт, J = 7,6 Гц, 15,0 Гц, 2H), 2,58 (т, J = 7,6 Гц, 2H), 3,56 (с, 2H), 7,07 (м, 3H), 7,20 (м, 1H); НРМС (ЭС): m/z 207 (MH⁺); ВЭЖХ:4 мин.

Стадия 5

[00104] К перемешиваемому раствору кислоты (0,19 г, 0,82 ммоль) в этаноле (4 мл) и воде (1 мл) прибавили гидрокарбонат натрия (0,07 г, 0,82 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель выпарили и белое клейкое твердое вещество растворили в воде и лиофилизировали раствор. Это дало получить чистую натриевую соль (3-пентилфенил)уксусной кислоты (0,17 г, 92%) в виде белого твердого вещества. т.пл.110-112°C; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ 0,89 (т, J = 6,8 Гц, 3H), 1,28-1,37 (м, 4H), 1,60 (кт, J = 7,4 Гц, 15,0 Гц, 2H), 2,56 (т, J = 7,6 Гц, 2H), 3,43 (с, 2H), 6,96 (м, 1H), 7,12 (м, 3H); НРМС (ЭС): m/z 207 ((MH⁺); ВЭЖХ:4 мин.

Соединение II:Натриевая соль 3-(3-пентилфенил)пропионовой кислоты

[00105] Указанное выше соединение получили так же, как и Соединение I, исходя из этилового эфира 3-оксо-3-бромфенилпропионовой кислоты. Кето-группу и двойную связь одновременно восстановили, используя палладий/уголь в этаноле в атмосфере водорода. Белое твердое вещество; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 7,14-7,10 (м, 1H), 7,04-7,00 (м, 2H), 6,95-6,93 (м, 1H), 2,88-2,84 (м, 2H), 2,55 (т, J = 7,4 Гц, 2H), 2,44-2,40 (м, 2H), 1,63-1,55 (м, 2H), 1,35-1,28 (м, 4H), 0,90 (м, 3H); ¹³C ЯМР (101 МГц, CD₃OD):δ 179,3, 141,2, 140,8, 126,7, 126,4, 124,0, 123,8, 38,6, 34,2, 31,2, 29,9, 29,8, 20,9, 11,7; НРМС (ЭС): m/z 203 (MH⁺-CO-NaOH); ВЭЖХ:4,5 мин.

Соединение III:Натриевая соль 3-(3-бутилфенил)пропионовой кислоты

Стадия 1

[00106] В круглодонную колбу (250 мл) поместили навеску изофталевого альдегида (1,0 г, 7,5 ммоль), с последующим прибавлением дихлорметана (100 мл). Через делительную воронку с переливом при комнатной температуре прибавили метил-(трифенил-фосфоранилиден)ацетат (2,7 г, 8,2 ммоль) в дихлорметане (25 мл). Реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Смесь отфильтровали через небольшой слой силикагеля и промыли дихлорметаном (150 мл). Затем растворитель выпарили при пониженном давлении и сырой продукт использовали на следующей стадии без дополнительной очистки.

Стадия 2

[00107] Бромид пропилтрифенилфосфония (3,2 г, 8,2 ммоль) поместили в круглодонную колбу в атмосфере азота и прибавили сухой ТГФ (5 мл). Колбу охладили на бане лед/ацетон (-10°С) и медленно прибавили н-бутиллитий (2,5 М в гексане, 3,28 мл, 8,2 ммоль). При перемешивании в течение 30 минут смесь окрасилась в темный цвет. Сырую реакционную смесь из предыдущей стадии в сухом ТГФ (5 мл) поместили на баню лед/ацетон (-10°С) в атмосфере азота. Раствор фосфония медленно прибавили к раствору альдегида при -10°С и медленно нагревали реакционную смесь до комнатной температуры и перемешивали в течение 4 ч. Прибавили насыщенный раствор хлорида аммония (10 мл) и экстрагировали органическую фазу этилацетатом (Зх). Органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и прибавили силикагель для получения сухой смеси для нанесения на колонку. Соединение очистили с помощью SP1 (этилацетат/гексан). Это дало получить ожидаемый продукт (8,8 г, 54%). ХН ЯМР (400 МГц, CDC13): 5 7, 70-7, 65 (м, 1Н), 7, 45-7, 24 (м, 4,5Н), 6,45-6, 28 (м, 2,5Н), 5,70-5,67 (м, 0,5Н), 3,78 (м, ЗН), 2,34-2,20 (м, 2Н), 1,10-1,03 (м, ЗН).

Стадия 3

[00108] В круглодонную колбу (25 мл) поместили ненасыщенный сложный эфир (140 мг, 0,65 ммоль), растворили в этилацетате (10 мл). К данному раствору прибавили 10% палладий на активированном угле Pd/C

(10 мг). Колбу закрыли септой и наверх поместили шар с водородом. Колбу продули трижды водородом и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение ночи. Твердое вещество отфильтровали через Celite™, прибавили силикагель и получили сухую смесь для нанесения на колонку. Очистка с помощью флэш-хроматографии, используя 0-20% этилацетат/гексан, дала желаемый продукт (124 мг, 87%). НРМС (ЭС): m/z 221 (МН+); ВЭЖХ:5,0 мин.

Стадия 4

[00109] В круглодонную колбу поместили сложный эфир (124 мг, 0,56 ммоль) с последующим прибавлением метанола (4 мл) и гидроксида лития (118 мг, 2,8 ммоль). Прибавили воду (1 мл) и нагревали реакционную смесь при 50°С при перемешивании в течение 17 ч. Реакционную смесь перенесли в делительную воронку, подкислили НС1 (1М) до рН ниже, чем 4, и экстрагировали этилацетатом (Зх). Органическую фазу сушили над безводным сульфатом натрия, отфильтровали и выпарили. Сырой материал очистили с помощью ВЭЖХ/Waters. Это дало получить белое твердое вещество (80 мг, 70%). 1Н ЯМР (400 МГц, CD3OD):8 7,16-7,12 (м, 1Н), 7,01-6,96 (м, ЗН), 2,88-2,84 (м, 2Н), 2, 57-2, 53 (м, 4Н), 1, 60-1, 52 (м, 2Н), 1,37-1,28 (м, 2Н), 0,91(т, ЗН, J=7,3 Гц); НРМС (ЭС): m/z 205 (М-Н); ВЭЖХ:4,2 мин.

Стадия 5

[00110] В колбу (20 мл) поместили кислоту (80 мг, 0,39 ммоль) с последующим прибавлением ЫаНСОз (33 мг, 0,39 ммоль) и воды (8 мл). К смеси прибавили ацетонитрил (3 мл) и реакционную смесь обрабатывали ультразвуком, нагревали и перемешивали до тех пор, пока все твердое вещество не расторилось. Раствор отфильтровали через полиамидный фильтр. Погружением сосуда в баню сухой лёд/ацетон воду перевели в твердое состояние и раствор лиофилизировали в течение ночи. Это дало получить желаемый продукт в виде белого твердого вещества.¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ 7,14-7,10 (м, 1H), 7,04-6,93 (м, 3H), 2,88-2,84 (м, 2H), 2,57-2,54 (м, 2H), 2,44-2,40 (м, 4H), 1,61-1,53 (м, 2H), 1,39-1,30 (м, 2H), 0,93(т, 3H, J = 7,3Гц);¹³C ЯМР (101 МГц, CD₃OD): δ 142,7, 142,4, 128,2, 128,0, 125,6, 125,4, 125,3, 40,1, 35,5, 33,9, 32,7, 22,2, 13,1; НРМС (ЭС): m/z 251,0 (м, MNa⁺), 229,0 (w, MH⁺), 189,2 (100%, ацилиевый ион [M - Na⁺ + 2H⁺ -H2O]); ВЭЖХ:4,1 мин.

Соединение IV: Натриевая соль E-(3-пент-1-енил-фенил)уксусной кислоты.

[00111] Указанное выше соединение получили так же, как и Соединение I, исходя из метилового эфира E-(3-пент-1-енил-фенил)уксусной кислоты. Последний получили по реакции метилового эфира 3-бромфенилуксусной кислоты с пинаколовым эфиром транс-1-пентенилбороновой кислоты в условиях реакции Сузуки. Белое твердое вещество; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ = 7,32 (с, 1H), 7,11-7,18 (м, 3H), 6,35 (д, J = 15,7 Гц, 1H), 6,20-6,27 (м, 1H), 3,44 (с, 2H), 2,19 (м, 2H), 1,45-1,54 (м, 2H), 0,96 (т, J = 7,4, 3H); ¹³C ЯМР (101 МГц, CD₃OD):δ = 179,26, 138,25, 137,92, 130,32, 130,04, 128,06, 127,59, 126,60, 123,52, 45,21, 35,06, 22,52, 12,89; НРМС (ЭС): m/z 205 (MH⁺); ВЭЖХ:4,1 мин.

Соединение V: Натриевая соль 2-(3-(Гекс-1-енил)фенил)уксусной кислоты.

[00112] Указанное выше соединение получили по реакции Сузуки метил-2-(3-бромфенил)ацетата и пинаколового эфира (E)-гекс-1-енилбороновой кислоты, как было указано для Соединения VII; с последующим гидролизом сложного эфира и образованием натриевой соли, как было указано для Соединения I. Белое твердое вещество: ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ 7,33 (с, 1H), 7,12-7,19 (м, 3H), 6,35 (д, J = 15,8 Гц, 1H), 6,20 (дт, J = 15,8, 6,8 Гц, 1H), 3,46 (с, 2H), 2,17-2,22 (м, 2H), 1,33-1,49 (м, 4H), 0,93 (т, J = 7,2 Гц, 3H); ¹³C ЯМР (101 МГц, CD₃OD):δ 179,35, 138,27, 137,95, 130,27, 130,16, 128,10, 127,61, 126,64, 123,56, 45,24, 32,66, 31,67, 22,16, 13,22; НРМС (ЭС): m/z 263,1 (100%, M + Na⁺); ВЭЖХ : 4,4 мин.

Соединение VI: Натриевая соль 2-(3-Гексилфенил)уксусной кислоты

[00113] Указанное выше соединение получили по реакции Сузуки метил-2-(3-бромфенил)ацетата и пинаколового эфира (E)-гекс-1-енилбороновой кислоты, как было указано для Соединения VII; с последующим гидрированием, гидролизом сложного эфира и образованием натриевой соли, как было указано для Соединения I. Белое твердое вещество; ¹H ЯМР (400 МГц, D₂O):δ 7,14 (дд, J = 7,8, 7,6 Гц, 1H), 7,01 (с, 1H), 7,00 (д, J = 7,8 Гц, 1H), 6,96 (д, J = 7,6 Гц, 1H), 3,34 (с, 2H), 2,46 (д, J = 7,5 Гц, 2H), 1,41-1,48 (м, 2H), 1,10-1,18 (м, 6H), 0,70 (т, J = 6,8 Гц, 3H); ¹³C ЯМР (101 МГц, D₂O):δ 181,23, 143,98, 137,46, 129,47, 128,73, 126,63, 126,48, 44,58, 35,14, 31,12, 30,94, 28,23, 22,13, 13,53; НРМС (ЭС): m/z 265 (100%, M + Na⁺); ВЭЖХ:4,6 мин.

Соединение VII: Натриевая соль 3-гидрокси-5-пентилфенилуксусной кислоты

Стадия 1

[00114] Раствор метил [3,5-дигидроксифенил]ацетата (2,1 г, 11,5 ммоль) в ацетоне (100 мл) обработали карбонатом калия (2,4 г, 17,4 ммоль), иодидом калия (383 мг, 2,31 ммоль) и бензилбромидом (1,5 мл, 12,7 ммоль) и перемешивали смесь при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавили водой и экстрагировали дихлорметаном (x3). Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом натрия и выпарили в вакууме. Сырой материал очистили на колонке (силикагель) Biotage™ 40M, элюируя 40% этилацетат/гексан с получением метил-[3-бензилокси-5-гидроксифенил]ацетата (1,0 г, 33%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 7,32-7,42 (м, 5H), 6,48 (д, J = 1,4 Гц, 1H), 6,38-6,39 (м, 2H), 4,99 (с, 2H), 3,69 (с, 3H), 3,53 (с, 2H).

Стадия 2

[00115] Раствор бензилового эфира (1,04 г, 3,8 ммоль) в дихлорметане (15 мл) при 0°C обработали N-фенил-бис(трифторсульфонил)имидом (1,40 г, 3,9 ммоль) и затем медленно прибавили триэтиламин (0,6 мл, 4,1 ммоль). Реакционную смесь перемешивали при 0°Cв течение 1 ч, и затем при комнатной температуре в течение 1 ч. Реакционную смесь разбавили водой и затем экстрагировали диэтиловым эфиром (x 2). Объединенные органические экстракты промыли 1M водным раствором гидроксида натрия, водой (x 2) и насыщенным водным раствором хлорида натрия, затем сушили над сульфатом натрия, отфильтровали и выпарили в вакууме с получением сырого продукта. Очистка на колонке (силикагель) Biotage™ 40M, элюируя 25% этилацетат/гексан, дала метил-[3-бензилокси-5-трифторметансульфонилоксифенил]ацетат (1,2 г, 79%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 7,36-7,46 (м, 5H), 6,98 (с, 1H), 6,97 (с, 1H), 6,84 (с, 1H), 5,06 (с, 2H), 3,72 (с, 3H), 3,63 (с, 2H).

Стадия 3

[00116] Раствор пинаколового эфира E-1-пентен-1-илбороновой кислоты (0,8 г, 3,9 ммоль) в диметоксиэтане (5 мл) обработали раствором трифлата (1,2 г, 3,0 ммоль) в диметоксиэтане (5 мл). Раствор обработали палладием (0) (0,7 г, 0,6 ммоль) и 2M водным раствором карбоната натрия (1,3 мл, 2,6 ммоль). Затем смесь нагревали при 90°C в течение 3 дней. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и отфильтровали через Celite™. Фильтрат выпарили в вакууме и сырой материал очистили на колонке (силикагель) Biotage™ 25M, элюируя 5% этилацетат/гексан, с получением метил-[3-бензилокси-5-[пент-1-енил]фенил]ацетата (0,4 г, 40%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 7,36-7,47 (м, 5H), 6,90-6,92 (м, 2H), 6,79 (дд, J = 2,0, 2,0 Гц, 1H), 6,35 (д, J = 15,9 Гц, 1H), 6,24 (дт, J = 15,9, 6,8 Гц, 1H), 5,07 (с, 2H), 3,70 (с, 3H), 3,59 (с, 2H), 2,20 (тд, J = 7,4, 6,8 Гц, 2H), 1,51 (дт, J = 7,4 Гц, 2H), 0,98 (т, J = 7,4 Гц, 3H).

Стадия 4

[00117] Раствор алкена (0,4 г, 1,2 ммоль) в этаноле (13 мл) обработали 1% палладием на угле (40 мг). Смесь перемешивали в атмосфере водорода (1 атм.) при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь отфильтровали, выпарили в вакууме, и очистили на колонке (силикагель) Biotage™ 25S, элюируя 15% этилацетат/гексан, с получением метил-[3-гидрокси-5-пентилфенил]ацетата (0,3 г, 93%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 6,64 (с, 1H), 6,58-6,60 (м, 2H), 3,70 (с, 3H), 3,55 (с, 2H), 2,51 (т, J = 7,7 Гц, 2H), 1,55-1,59 (м, 2H), 1,28-1,34 (м, 4H), 0,88 (т, J = 7,0 Гц, 3H).

Стадия 5

[00118] Раствор сложного эфира (0,3 г, 1,3 ммоль) в этаноле (12 мл) обработали водой (3 мл) и гидроксидом лития (155 мг, 6,4 ммоль), и интенсивно перемешивали смесь при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь разбавили водой (100 мл); промыли дихлорметаном; затем подкислили 1M водным раствором соляной кислоты до pH 1 и экстрагировали дихлорметаном (x 3). Объединенные органические экстракты сушили над сульфатом натрия (0,3 г, 95%). Указанный материал использовали без дополнительной очистки.¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 6,66 (с, 1H), 6,58-6,59 (м, 2H), 3,55 (с, 2H), 2,52 (т, J = 7,7 Гц, 2H), 1,55-1,59 (м, 2H).

Стадия 6

[00119] Раствор кислоты (0,27 г, 1,23 ммоль) в этаноле (6 мл) и воде (6 мл) обработали гидрокарбонатом натрия (0,1 г, 1,2 ммоль), и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение нескольких часов. Растворитель концентрировали в вакууме, и раствор разбавили водой, отфильтровали (0,2 мкм), и лиофилизировали с получением [3-гидрокси-5-пентилфенил]ацетата натрия в виде белого твердого вещества (0,3 г, 95%). т.пл. 63-66°C; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ 6,63 (с, 1H), 6,58 (с, 1H), 6,42 (с, 1H), 3,36 (с, 2H), 2,48 (т, J = 7,6 Гц, 2H), 1,55-1,62 (м, 2H), 1,26-1,38 (м, 4H), 0,89 (т, J = 6,8 Гц, 3H); ¹³C ЯМР (101 МГц, CD₃OD):δ 177,79, 155,31, 142,36, 137,62, 119,08, 111,66, 111,18, 43,70, 34,17, 29,95, 29,56, 20,87, 11,64; НРМС (ЭС): m/z 445,2 (2M - 2Na⁺ + 3H⁺), m/z 223 (M - Na⁺ + 2H⁺); ВЭЖХ:3,5 мин.

Соединение VIII:Натриевая соль 2-(4-гидрокси-3-пентилфенил)уксусной кислоты

[00120] Указанное выше соединение получили по реакции Сузуки бензил-2-(4-(бензилокси)-3-бромфенил)ацетата и пинаколового эфира (E)-пент-1-енилбороновой кислоты, как было указано для примера VII; с последующим гидрированием. Белое твердое вещество; т.пл. 192-195°C; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ 7,01 (д, J = 2,3 Гц, 1H), 6,93 (дд, J = 8,2, 2,3 Гц, 1H), 6,64 (д, J = 8,2 Гц, 1H), 3,35 (с, 2H), 2,53 (т, J = 7,7 Гц, 2H), 1,54-1,61 (м, 2H), 1,30-1,37 (м, 4H), 0,90 (т, J = 7,2 Гц, 3H); ¹³C ЯМР (101 МГц, CD₃OD):δ 180,25, 153,20, 130,54, 128,80, 128,76, 127,10, 114,49, 44,45, 31,84, 30,10, 29,73, 22,52, 13,31; НРМС (ЭС): m/z 245,2 (55%, MH⁺), 177,4 (100%, M - CO₂Na); ВЭЖХ:1,9 мин.

Соединение IX: Натриевая соль 2-(2-гидрокси-3-пентилфенил)уксусной кислоты

Стадия 1

[00121] Раствор 2-(2-гидроксифенил)уксусной кислоты (3,00 г, 19,7 ммоль) в метаноле (40 мл) обработали серной кислотой (0,95 мл, 17,8 ммоль) и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 18 часов. Реакционную смесь разбавили этилацетатом (250 мл), и раствор промыли водой (2 x 150 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (150 мл); сушили над сульфатом натрия; отфильтровали и выпарили в вакууме с получением сырого продукта. Перекристаллизация из горячего гексана дала метил-2-(2-гидроксифенил)ацетат (2,83 г, 87%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 7,20 (ддд, J = 7,7, 7,4, 1,8 Гц, 1H), 7,09-7,11 (м, 1H), 6,94 (дд, J = 8,0, 1,2 Гц, 1H), 6,88 (ддд, J = 7,4, 7,4, 1,2 Гц, 1H), 3,75 (с, 3H), 3,69 (с, 2H).

Стадия 2

[00122] Раствор метил-2-(2-гидроксифенил)ацетата (1,00 г, 6,0 ммоль), трифенилфосфина (2,37 г, 9,0 ммоль) и пент-1-ен-3-ола (0,78 г, 9,0 ммоль) в тетрагидрофуране (30 мл) охладили до 0°C в атмосфере азота и по каплям прибавляли диизопропилазодикарбоксилат (1,86 мл; 9,0 мл) в течение 10 минут. Затем реакционную смесь нагревали до 60°C в течение 21,5 часов. Растворитель выпарили в вакууме и остаток экстрагировали 5% этилацетатом в гексане. Экстракт отфильтровали и выпарили в вакууме с получением сырого продукта. Очистка на системе Biotage™ SP1 (120 г силикагелевый картридж), элюируя 0-3% этилацетатом в гексане, дала метил-2-(2-(пент-1-ен-3-илокси)фенил)ацетат (0,39 г, 28%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 7,21-7,26 (м, 1H), 7,20 (д, J = 7,6 Гц, 1H), 6,91 (ддд, J = 7,4, 7,4, 1,0 Гц, 1H), 6,87 (д, J = 8,0 Гц, 1H), 5,84 (ддд, J = 17,4, 10,7, 6,0 Гц, 1H), 5,26 (д, J = 17,4 Гц, 1H), 5,22 (д, J = 10,7 Гц, 1H), 4,63 (дт, J = 6,0, 6,0 Гц, 2H), 3,70 (с, 3H), 3,68 (с, 2H), 1,71-1,87 (м, 2H), 1,02 (т, J = 7,5 Гц, 3H); ¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃):δ 172,58,.156,28, 137,75, 131,19, 128,50, 123,87, 120,52, 116,66, 113,18, 79,76, 52,00, 36,61, 28,71, 9,62.

Стадия 3

[00123] Раствор метил-2-(2-(пент-1-ен-3-илокси)фенил)ацетата (0,24 г, 1,0 ммоль) в N-метил-2-пирролидоне (1,0 мл) облучали микроволновым излучением в Biotage Initiator при 180°C в течение 30 минут, затем в течение 15 минут. Раствор разбавили этилацетатом (25 мл), затем промыли водой (4 x 25 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (25 мл); сушили над сульфатом натрия; отфильтровали и выпарили в вакууме с получением сырого продукта. Очистка на системе Biotage™ SP1 (40 г силикагелевый картридж), элюируя 0-7% этилацетатом в гексане, дала метил-(E)-2-(2-гидрокси-3-(пент-2-енил)фенил)ацетат (0,89 г, 37%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 7,09 (с, 1H), 7,08 (дд, J = 7,4, 1,6 Гц, 1H), 7,01 (дд, J = 7,6, 1,6 Гц, 1H), 6,85 (дд, J = 7,6, 7,4 Гц, 1H), 5,59-5,70 (м, 2H), 3,75 (с, 3H), 3,69 (с, 2H), 3,41 (д, J = 4,7 Гц, 2H), 2,04-2,11 (м, 2H), 1,01 (т, J = 7,4 Гц, 3H); ¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃):δ 174,31, 153,53, 134,44, 129,86, 129,32, 128,62, 127,13, 121,08, 120,82, 52,79, 37,59, 34,17, 25,77, 13,97.

Стадия 4

[00124] Метил-(E)-2-(2-гидрокси-3-(пент-2-енил)фенил)ацетат (0,14 г, 0,6 ммоль) гидрировали, как было указано для Соединения I, стадии 3, но используя в качестве растворителя метанол, с получением метил-2-(2-гидрокси-3-пентилфенил)ацетат (0,11 г, 76%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 7,57 (с, 1H), 7,11 (дд, J = 7,4, 1,6 Гц, 1H), 6,96 (дд, J = 7,4, 1,6 Гц, 1H), 6,84 (дд, J = 7,4, 7,4 Гц, 1H), 3,76 (с, 3H), 3,70 (с, 2H), 2,68 (т, J = 7,8 Гц, 2H), 1,61-1,67 (м, 2H), 1,36-1,43 (м, 4H), 0,93 (т, J = 7,0 Гц, 3H); ¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃):δ 175,01, 153,48, 131,75, 129,98, 128,75, 120,74, 120,60, 53,01, 38,30, 32,10, 30,50, 29,91, 22,87, 14,34.

Стадия 5

[00125] Метил-2-(2-гидрокси-3-пентилфенил)ацетат (0,11 г, 0,5 ммоль) прогидролизовали как было указано для Соединения I, стадии 4, используя ацетонитрил/вода (4:1) в качестве растворителей, с получением 2-(2-гидрокси-3-пентилфенил)уксусной кислоты (0,57 г, 57%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 8,70 (уш.с., 1H), 7,09 (дд, J = 7,6, 1,6 Гц, 1H), 6,98 (дд, J = 7,4, 1,6 Гц, 1H), 6,84 (дд, J = 7,6, 7,4 Гц, 1H), 3,68 (с, 2H), 2,62 (т, J = 7,8 Гц, 2H), 1,57-1,65 (м, 2H), 1,31-1,40 (м, 4H), 0,91 (т, J = 7,0 Гц, 3H); ¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃):δ 179,89, 152,79, 130,92, 130,04, 128,98, 121,08, 120,24, 37,74, 32,02, 30,34, 29,78, 22,80, 14,30.

Стадия 6

[00126] 2-(2-Гидрокси-3-пентилфенил)уксусную кислоту (22 мг, 0,098 ммоль) превратили в натриевую соль, как было указано для Соединения I, стадии 5 с получением 2-(2-гидрокси-3-пентилфенил)ацетата натрия (24 мг, 98%).¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ 6,91 (дд, J = 7,5, 1,6 Гц, 1H), 6,87 (дд, J = 7,5, 1,6 Гц, 1H), 6,66 (дд, J = 7,5, 7,5 Гц, 1H), 3,49 (с, 2H), 2,59 (т, J = 7,7 Гц, 2H), 1,55-1,62 (м, 2H), 1,28-1,38 (м, 4H), 0,90 (т, J = 7,0 Гц, 3H); ¹³C ЯМР (101 МГц, CD₃OD):δ 180,26, 154,27, 130,75, 128,21, 127,90, 124,24, 119,23, 42,91, 31,83, 30,21, 29,82, 22,51, 13,29; НРМС (ЭС отрицательный): m/z 220,8 (100%, M -Na⁺); СВЭЖХ (Система A):5,0 мин. СВЭЖХ Система A: Подвижная фаза A = 10 мМ водный раствор формиата аммония; подвижная фаза B = ацетонитрил; неподвижная фаза = HSS T3 колонка; градиент = 5-100% B в A в течение 10 минут.

Соединение X: Натриевая соль 2-(3-фтор-5-пентилфенил)уксусной кислоты

Стадия 1

[00127] Раствор 3-бром-5-фторбензойной кислоты (2,74 г, 12,5 ммоль) в тетрагидрофуране (6 мл) при 0°C в атмосфере азота, обрабатывали малыми порцями комплекса боран-тетрагидрофуран (1M, 15 мл, 15 ммоль) в течение 12 мин, и затем перемешивали реакционную массу при 0°C в течение 70 минут, и при комнатной температуре в течение 22 ч. Реакционную смесь погасили прибавлением метанола (10 мл) и метанольную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч, и затем выпарили в вакууме, с совместным выпариванием из метанола, затем из этилацетата, с получением сырого продукта. Материал растворили в этилацетате (200 мл), и раствор промыли 0,5M водным гидроксидом натрия (200 мл), и насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл); затем сушили над сульфатом натрия; отфильтровали и выпарили в вакууме с получением 3-бром-5-фторбензилового спирта (1,79 г, 67%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 7,29 (с, 1H), 7,15 (ддд, J_HF = 8,2 Гц, J_HH = 2,2, 1,8 Гц, 1H), 7,00-7,02 и 7,02-7,04 (дм, J_HF = 9,2 Гц, J_HH = неразрешенный, 1H), 4,66 (с, 2H), 2,04 (уш.с., 1H); ¹⁹F ЯМР (377 МГц, CDCl₃):δ -111,05 (дд, J_HF = 9,3, 8,0 Гц, 1F); ¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃):δ 162,87 (д, J_CF = 250,6 Гц), 145,42 (д, J_CF = 6,9 Гц), 125,45 (д, J_CF = 3,1 Гц), 122,69 (д, J_CF = 9,2 Гц), 118,01 (д, J_CF = 24,6 Гц), 112,51 (д, J_CF = 21,5 Гц), 63,60 (д, J_CF = 2,3 Гц).

Стадия 2

[00128] Раствор 3-бром-5-фторбензилового спирта (1,79 г, 8,39 ммоль) и трифенилфосфина (3,65 г, 10,10 ммоль) в дихлорметане (45 мл), обрабатывали малыми порциями тетрабромуглерода (3,34 г, 10,10 ммоль) в течение 10 мин и затем перемешивали реакционную массу при комнатной температуре в течение ночи. Растворитель выпарили в вакууме, и остаток обработали диэтиловым эфиром (50 мл). Полученную белую суспензию перемешивали при комнатной температуре и затем отфильтровали через Celite™. Остаток промыли диэтиловым эфиром (2 x 50 мл), и объединенный фильтрат и промывные фракции выпарили в вакууме с получением сырого продукта. Очистка пропусканием через слой силикагеля, элюируя 2% этилацетат/гексан, дала 3-бром-5-фторбензилбромид (2,21 г, 98%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 7,33 (с, 1H), 7,18 (ддд, J_HF = 8,2 Гц, J_HH = 2,0, 2,0 Гц, 1H), 7,05 (ддд, J_HF = 9,0 Гц, J_HH = 1,8, 1,6 Гц, 1H), 4,38 (с, 2H); ¹⁹F ЯМР (377 МГц, CDCl₃):δ от -110,19 до -110,14 (м, 1F); ¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃):δ 162,67 (д, J_CF = 252,1 Гц), 141,61(д, J_CF = 8,5 Гц), 128,17 (д, J_CF = 3,1 Гц), 122,94 (д, J_CF = 10,0 Гц), 119,39 (д, J_CF = 24,6 Гц), 115,34 (д, J_CF = 22,3 Гц), 31,31 (д, J_CF = 2,3 Гц).

Стадия 3

[00129] Суспензию цианида натрия (0,38 г, 7,73 ммоль) в воде (0,35 мл) обработали раствором 3-бром-5-фторбензилбромида (1,38 г, 5,15 ммоль) в диметилформамиде (2,6 мл) и нагревали реакционную смесь при 75°C в герметично закрытой пробирке в течение 3 ч. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и разделили между этилацетатом (50 мл) и 2,5% масса/объем водным раствором гидрокарбоната натрия (100 мл). Водную фазу экстрагировали дополнительнеой порцией этилацетата (50 мл); и объединенные экстракты промыли водой (2 x 50 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл); сушили над сульфатом натрия; отфильтровали и выпарили в вакууме с получением сырого продукта. Очистка на колонке (силикагель) Biotage™ 40iM, элюируя 10% этилацетат/гексан, дала получить 2-[3-бром-5-фторфенил]ацетонитрил (0,64 г, 58%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 7,26-7,28 (м, 1H), 7,17-7,19 и 7,19-7,21 (дм, J_HF = 8,0 Гц, J_HH = неразрешенный, 1H), 6,98-7,00 & 7,00-7,02 (дм, J_HF = 8,8 Гц, J_HH = неразрешенный, 1H), 3,73 (с, 2H); ¹⁹F ЯМР (377 МГц, CDCl₃):δ -109,46 (дд, J_HF = 8,0, 8,0 Гц, 1F); ¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃):δ 162,90 (д, J_CF = 252,1 Гц), 133,95 (д, J_CF = 8,5 Гц), 127,24 (д, J_CF = 3,8 Гц), 123,53 (д, J_CF = 10,0 Гц), 119,22 (д, J_CF = 23,8 Гц), 117,00, 114,50 (д, J_CF = 23,1 Гц), 23,30 (д, J_CF = 1,5 Гц).

Стадия 4

[00130] Раствор арилбромида (0,55 г, 2,58 ммоль) и пинаколового эфира (E)-1-пентен-1-илбороновой кислоты (0,61 г, 3,13 ммоль) в диметоксиэтане (13 мл) обработали раствором карбонатом натрия (0,55 г, 5,17 ммоль) в воде (3 мл). Из раствора удалили кислород с помощью азота и обработали тетракис(трифенилфосфин)палладием (0,15 г, 0,13 ммоль; 5 моль %). Затем смесь нагревали при 90°C в герметично закрытой пробирке в течение 17 ч. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и разделили между этилацетатом (50 мл) и 1M водным раствором соляной кислоты (50 мл). Органическую фазу промыли насыщенным водным раствором хлорида натрия (30 мл); сушили над сульфатом натрия; отфильтровали и выпарили в вакууме с получением сырого продукта. Очистка на колонке (силикагель) Biotage™ 40iM, элюируя (3%) этилацетат/гексан, дала получить (E)-2-[3-фтор-5-[пент-1-енил]фенил]ацетонитрил (0,43 г, 82%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 7,04 (с, 1H), 6,97 (ддд, J_HF = 9,8 Гц, J_HH = 2,0, 1,5 Гц, 1H), 6,82-6,85 (м, 1H), 6,31 (д, J = 15,8 Гц, 1H), 6,25 (ддд, J = 15,8, 5,9, 0 Гц, 1H), 3,68 (с, 2H), 2,18 (тд, J = 7,2, 5,4 Гц, 2H), 1,49 (кт, J = 7,4, 7,4 Гц, 2H), 0,95 (т, J = 7,4 Гц, 3H); ¹⁹F ЯМР (377 МГц, CDCl₃):δ -112,93 (дд, J_HF = 10,6, 9,3 Гц, 1F); ¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃):δ 163,43 (д, J_CF = 246,0 Гц), 141,44 (д, J_CF = 8,5 Гц), 133,99, 132,37 (д, J_CF = 8,5 Гц), 128,42 (д, J_CF = 2,3 Гц), 121,60 (д, J_CF = 3,1 Гц), 117,66, 113,40 (д, J_CF = 23,1 Гц), 112,21 (д, J_CF = 22,3 Гц), 35,22, 23,49 (д, J_CF = 2,3 Гц), 22,51, 13,94.

Стадия 5

[00131] Раствор производной фенилацетонитрила (0,43 г, 2,10 ммоль) в метаноле (42 мл) обработали водным раствором гидроксида натрия (5M; 21 мл, 105 ммоль) и смесь нагревали при 75°C в герметично закрытой пробирке в течение 4,5 ч. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и погасили 6M водным раствором соляной кислоты (21 мл); перемешивали при комнатной температуре в течение 10 мин; затем экстрагировали этилацетатом (2 x 75 мл). Органический экстракт промыли насыщенным водным раствором хлорида натрия (75 мл); сушили над сульфатом натрия; отфильтровали и выпарили в вакууме с получением сырого продукта. Очистка на колонке (силикагель) Biotage™ 40iM, элюируя 70% этилацетат/гексан, дала получить метиловый эфир желаемого продукта (0,09 г, 18%) и ~95% чистую (E)-2-[3-фтор-5-[пент-1-енил]фенил]уксуснцю кислоту (0,22 г, 48%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 11,17 (уш.с., 1H), 7,02 (с, 1H), 6,98 (ддд, J_HF = 9,8 Гц, J_HH = 2,0, 1,8 Гц, 1H), 6,85 (ддд, J_HF = 9,0 Гц, J_HH = 1,8, 1,6 Гц, 1H), 6,33 (д, J = 15,8 Гц, 1H), 6,25 (дт, J = 15,8, 6,4 Гц, 1H), 3,62 (с, 2H), 2,17-2,22 (м, 2H), 1,51 (кт, J = 7,4, 7,4 Гц, 2H), 0,96 (т, J = 7,4 Гц, 3H); ¹⁹F ЯМР (377 МГц, CDCl₃):δ -114,10 (дд, J_HF = 9,3, 9,3 Гц, 1F).

Стадия 6

[00132] Раствор частично очищенной кислоты (0,28 г, 1,26 ммоль) в ацетоне (5 мл) обработали карбонатом калия (0,26 г, 1,90 ммоль), иодидом калия (0,04 г, 0,25 ммоль) и бензилбромидом (0,18 мл, 1,5 ммоль) и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 18 ч. Реакционную смесь разделили между этилацетатом (25 мл) и 1M водным раствором соляной кислоты (25 мл). Затем органическую фазупромыли насыщенным водным раствором хлорида натрия (25 мл); сушили над сульфатом натрия; отфильтровали и выпарили в вакууме с получением сырого продукта. Очистка на колонке (силикагель) Biotage™ 40iM, элюируя 5% этилацетат/гексан, дала бензил-(E)-2-[3-фтор-5-[пент-1-енил]фенил]ацетат (0,3 г, 75%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 7,32-7,40 (м, 5H), 7,03 (с, 1H), 6,97 (ддд, J_HF = 10,0 Гц, J_HH = 2,3, 1,5 Гц, 1H), 6,86 (ддд, J_HF = 9,0 Гц, J_HH = 2,0, 1,7 Гц, 1H), 6,33 (д, J = 15,8 Гц, 1H), 6,23 (дт, J = 15,8, 6,5 Гц, 1H), 5,16 (с, 2H), 3,64 (с, 2H), 2,17-2,23 (м, 2H), 1,52 (кт, J = 7,4, 7,4 Гц, 2H), 0,97 (т, J = 7,4 Гц, 3H); ¹⁹F ЯМР (377 МГц, CDCl₃):δ -114,34 (дд, J_HF = 9,3, 9,3 Гц, 1F); ¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃):δ 171,08, 163,32 (д, J_CF = 244,4 Гц), 140,65 (д, J_CF = 7,7 Гц), 136,17 (д, J_CF = 8,5 Гц), 135,93, 133,05, 128,95 (д, J_CF = 3,1 Гц), 128,84, 128,52 (д, J_CF = 9,2 Гц), 128,48, 123,09 (д, J_CF = 2,3 Гц), 114,78 (д, J_CF = 22,3 Гц), 111,46 (д, J_CF = 22,3 Гц), 67,04, 41,26 (д, J_CF = 1,5 Гц), 35,27, 22,63, 14,00.

Стадия 7

[00133] Раствор бензилового сложного эфира (0,16 г, 0,50 ммоль) в этилацетате (2 мл) обработали палладием на угле (1% мас./мас. Pd; 15 мг). Смесь дегазировали водородом и перемешивали в 1 атм. водорода при комнатной температуре в течение ночи. Реакционную смесь отфильтровали и выпарили в вакууме с получением 2-[3-фтор-5-пентилфенил]-уксусной кислоты (0,11 г, 97%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 11,47 (уш.с., 1H), 6,89 (с, 1H), 6,81-6,86 (м, 2H), 3,62 (с, 2H), 2,60 (т, J = 7,8 Гц, 2H), 1,58-1,66 (м, 2H), 1,28-1,41 (м, 4H), 0,92 (т, J = 6,8 Гц, 3H); ¹⁹F ЯМР (377 МГц, CDCl₃):δ -114,34 (дд, J_HF = 9,3, 9,3 Гц, 1F); ¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃):δ 178,15, 163,08 (д, J_CF = 246,0 Гц), 145,02 (д, J_CF = 7,7 Гц), 135,04 (д, J_CF = 8,5 Гц), 125,49 (д, J_CF = 2,3 Гц), 114,49 (д, J_CF = 20,8 Гц), 113,83 (д, J_CF = 22,3 Гц), 41,01 (д, J_CF = 1,5 Гц), 35,87 (д, J_CF = 1,5 Гц), 31,67, 31,03, 22,74, 14,24.

Стадия 8

[00134] Раствор кислоты (0,11 г, 0,49 ммоль) в этаноле (3 мл) обработали раствором гидрокарбоната натрия (0,041 г, 0,49 ммоль) в воде (0,75 мл) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 17 ч. Этанол выпарили в вакууме и остаток водного сиропа разбавили водой (10 мл), отфильтровали (0,2 мкм), и лиофилизировали с получением 2-[3-фтор-5-пентилфенил]ацетата натрия в виде белого твердого вещества (0,12 г, 99%). т.пл.120-123°C; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ 6,94 (с, 1H), 6,87 (ддд, J_HF = 9,8 Гц, J_HH = 2,0, 2,0 Гц, 1H), 6,70 (ддд, J_HF = 10,0 Гц, J_HH = 2,0, 2,0 Гц, 1H), 3,45 (с, 2H), 2,56 (т, J = 7,7 Гц, 2H), 1,58-1,63 (м, 2H), 1,26-1,39 (м, 4H), 0,90 (т, J = 7,0 Гц, 3H); ¹⁹F ЯМР (377 МГц, CD₃OD):δ -117,54 (дд, J_HF = 10,0, 10,0 Гц, 1F); ¹³C ЯМР (101 МГц, CD₃OD):δ 178,66, 163,04 (д, J_CF = 242,9 Гц), 145,07 (д, J_CF = 7,7 Гц), 140,42 (д, J_CF = 8,5 Гц), 125,03 (д, J_CF = 2,3 Гц), 112,99 (д, J_CF = 22,3 Гц), 112,30 (д, J_CF = 20,8 Гц), 44,96, 35,53 (д, J_CF = 1,5 Гц), 31,46, 31,00, 22,45, 13,30; ВЭЖХ:1,2 мин.

Соединение XI:Натриевая соль 2-(2-фтор-3-пентилфенил)уксусной кислоты

[00135] Указанное выше соединение получили так же, как и Соединение X, исходя из 3-бром-2-фторбензойной кислоты. Белое твердое вещество; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ 7,13 (ддд, J_HF = 7,0 Гц, J_HH = 7,4, 1,9 Гц, 2H), 7,03 (ддд, J_HF = 7,0 Гц, J_HH = 7,4, 1,9 Гц, 1H), 6,97 (дд, J_HH = 7,4, 7,4 Гц, 1H), 3,51 (д, J_HF = 1,4 Гц, 2H), 2,61 (т, J = 7,6 Гц, 2H), 1,56-1,63 (м, 2H), 1,28-1,40 (м, 4H), 0,90 (т, J = 6,9 Гц, 3H); ¹³C ЯМР (101 МГц, CD₃OD):δ 178,21, 159,70 (д, J_CF = 242,9 Гц), 129,07 (д, J_CF = 4,6 Гц), 128,88, 128,43 (д, J_CF = 5,4 Гц), 125,02 (д, J_CF = 17,7 Гц), 123,31 (д, J_CF = 4,6 Гц), 37,89 (д, J_CF = 3,8 Гц), 31,55, 29,98, 28,91 (д, J_CF = 3,1 Гц), 22,41, 13,26; ¹⁹F ЯМР (377 МГц, CD₃OD):δ от-126,09 до-126,05 (м, 1F); НРМС (ЭС): m/z 220,0 (M - CO₂Na + ацетонитрил), 179,4 (M - CO₂Na); ВЭЖХ:1,2 мин.

Соединение XII:Натриевая соль 2-(4-фтор-3-пентилфенил)уксусной кислоты

[00136] Указанное выше соединение получили из метил-2-(3-бром-4-фторфенил)ацетата по реакции Сузуки, как было указано для Соединения VII; с последующим гидрированием, гидролизом сложного эфира и образованием соли, как было указано для Соединения I. Исходный сложный эфир получили по реакции 2-(3-бром-4-фторфенил)уксусной кислоты с метанолом в присутствии серной кислоты. Белое твердое вещество; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ 7,16 (дд, J_HF = 7,4 Гц, J_HH = 2,3 Гц, 2H), 7,08 (ддд, J_HF = 5,0 Гц, J_HH = 8,3, 2,3 Гц, 1H), 6,88 (дд, J_HF = 10,1 Гц, J_HH = 8,3 Гц, 1H), 3,40 (с, 2H), 2,59 (т, J = 7,7 Гц, 2H), 1,55-1,63 (м, 2H), 1,28-1,40 (м, 4H), 0,90 (т, J = 7,0 Гц, 3H); ¹³C ЯМР (101 МГц, CD₃OD):δ 179,12, 159,88 (д, J_CF = 240,6 Гц), 133,88 (д, J_CF = 3,8 Гц), 131,26 (д, J_CF = 4,6 Гц), 128,78 (д, J_CF = 16,1 Гц), 127,96 (д, J_CF = 8,5 Гц), 114,26 (д, J_CF = 23,1 Гц), 44,38, 31,51, 30,00, 28,76 (д, J_CF = 1,5 Гц), 22,36, 13,18; ¹⁹F ЯМР (377 МГц, CD₃OD):δ от -126,45 до -126,40 (м, 1F); НРМС (ЭС): m/z 225,2 (M - Na⁺ + 2H⁺); ВЭЖХ:1,9 мин.

Соединение XIII:Натриевая соль (RS)-2-фтор-2-(3-пентилфенил)уксусной кислоты

[00137] Указанное выше соединение получили из этил-2-фтор-2-(3-пентилфенил)ацетата, как было указано для Соединения I.Сложный эфир получили по реакции этил-2-(3-пентилфенил)ацетата с диизопропиламидом лития и N-фторбензолсульфонимидом при -78°C в тетрагидрофуране. Белое твердое вещество; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ 7,34 (с, 1H), 7,30 (дд, J = 7,6, 1,4 Гц, 1H), 7,24 (дд, J = 7,6, 7,6 Гц, 1H), 7,13 (дд, J = 7,4, 1,0 Гц, 1H), 5,53 (д, J_HF = 51,3 Гц, 1H), 2,60 (т, J = 7,7 Гц, 2H), 1,59-1,65 (м, 2H), 1,27-1,39 (м, 4H), 0,76 (т, J = 6,9 Гц, 3H); ¹³C ЯМР (101 МГц, CD₃OD):δ 173,73 (д, J_CF = 23,9 Гц), 141,34, 136,37 (д, J_CF = 20,0 Гц), 126,79 (д, J_CF = 2,3 Гц), 126,40, 125,41 (д, J_CF = 5,4 Гц), 122,84 (д, J_CF = 5,4 Гц), 90,34 (д, J_CF = 183,4 Гц), 34,13, 29,91, 29,65, 20,85, 11,64; ¹⁹F ЯМР (377 МГц, CD₃OD):δ -168,83 (д, J_HF = 51,7 Гц, 1F); НРМС (ЭС отрицательный): m/z 223,0 (100%, M - Na⁺); ВЭЖХ:4,1 мин.

Соединение XIV:2-[3,5-Дипентилфенил] ацетат натрия

Стадия 1

[00138] Суспензию метил-2-[3,5-дигидроксифенил]ацетата (1,00 г, 5,49 ммоль) и N-фенил-бис(трифторметилсульфонил)имида (4,31 г, 12,1 ммоль) в дихлорметане (20 мл) при 0°C в атмосфере азота обработали триэтиламином (1,68 мл, 12,1 ммоль). Получили прозрачный раствор. Реакционную смесь затем перемешивали в атмосфере азота при 0°C в течение 2 ч и при комнатной температуре в течение 21 ч. Реакционную смесь разбавили этилацетатом (100 мл) и промыли 0,5M водным раствором гидроксида натрия (2 x 100 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (75 мл); затем сушили над сульфатом натрия; отфильтровали и выпарили в вакууме с получением сырого продукта. Очистка на колонке (силикагель) Biotage™ 40iM, элюируя этилацетат/гексан от 0:1 до 1:9, дала метил-2-[3,5-бис(трифторметилсульфонилокси)фенил]ацетат (2,23 г, 91%) в виде бледно-желтого масла.¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 7,32 (д, J = 2,2 Гц, 2H), 7,18 (дд, J = 2,2, 2,2 Гц, 1H), 3,72 (с, 5H); 19F ЯМР (377 МГц, CDCl₃):δ -73,20 (с, 3F); ¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃):δ 170,05, 149,48, 139,01, 122,95, 118,87 (к, JCF = 320,5 Гц), 114,42, 52,62, 40,29.

Стадия 2

[00139] Раствор арилбис(трифлата) (2,23 г, 4,99 ммоль) и пинаколового эфира (E)-1-пентен-1-илбороновой кислоты (2,45 г, 12,5 ммоль) в 1,2-диметоксиэтане (25 мл) обработали раствором карбоната натрия (1,59 г, 15,0 ммоль) в воде (8 мл). Из раствора убрали кислород с помощью азота и затем обработали тетракис(трифенилфосфин)палладием (0,58 г, 0,50 ммоль). Смесь нагревали при 90°C в герметично закрытой пробирке в течение 17 ч. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и разделили между этилацетатом (200 мл) и 1M водным раствором соляной кислоты (150 мл). Органическую фазу промыли 5% водным раствором гидрокарбоната натрия (150 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (150 мл); затем сушили над сульфатом натрия; отфильтровали и выпарили в вакууме с получением сырого продукта. Очистка на колонке (силикагель) Biotage™ 40iL, элюируя этилацетат/гексан от 0:1 до 3:97, дала получить метил-2-[3,5-ди[(E)-1-пент-1-енил]фенил] ацетат в виде неразделимой смеси с избытком пинаколового эфира (E)-1-пентен-1-илбороновой кислоты 10:4 (1,12 г, 61%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 7,21 (с, 1H), 7,10 (д, J = 1,3 Гц, 2H), 6,34 (д, J = 15,8 Гц, 1H), 6,22 (дд, J = 15,8, 6,7 Гц, 1H), 3,65 (с, 3H), 3,55 (с, 2H), 2,18 (тдд, J = 6,8, 6,8, 1,0 Гц, 2H), 1,49 (кт, J = 7,4, 7,2 Гц, 2H), 0,96 (т, J = 7,4 Гц, 3H); ¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃):δ 172,04, 138,59, 134,47, 131,34, 129,97, 125,57, 122,75, 52,07, 41,32, 35,39, 22,77, 13,97.

Стадия 3

[00140] Раствор ненасыщенного соединения (1,12 г, 78,5% мас./мас., 3,07 ммоль) в этилацетате (1 мл) и метаноле (1 мл) обработали палладием на угле (10% мас./мас. Pd; 0,12 г). Смесь дегазировали водородом и перемешивали при 1 атм водорода при комнатной температуре в течение 22 ч. Реакционную смесь отфильтровали и выпарили в вакууме с получением метил-2-[3,5-дипентилфенил]ацетата в виде неразделимой смеси с пинаколовым эфиром пентилбороновой кислоты 10:4 (0,86 г, 76%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 6,93 (с, 3H), 3,70 (с, 3H), 3,59 (с, 2H), 2,58 (т, J = 7,9 Гц, 2H), 1,58-1,66 (м, 2H), 1,32-1,38 (м, 4H), 0,91 (т, J = 6,8 Гц, 3H).

Стадия 4

[00141] Раствор метилового эфира (0,86 г, 79% мас./мас., 2,34 ммоль) в ацетонитриле (24 мл) обработали раствором гидроксида лития (0,28 г, 11,7 ммоль) в воде (6 мл) и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 22 ч. Реакционную смесь погасили 1M водным раствором соляной кислоты (55 мл) и затем экстрагировали этилацетатом (100 мл). Органический экстракт промыли насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл); затем сушили над сульфатом натрия; отфильтровали и выпарили в вакууме с получением сырого продукта. Очистка на колонке с диоксидом кремния SiliaSep, элюируя этилацетат/гексан от 0:1 до 1:4, дала получить 2-[3,5-дипентил]фенил] уксусной кислоты в виде бесцветного масла (0,55 г, 84%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 6,99 (с, 3H), 3,65 (с, 2H), 2,63 (т, J = 7,8 Гц, 2H), 1,64-71 (м, 2H), 1,36-1,44 (м, 4H), 0,97 (т, J = 6,9 Гц, 3H); ¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃):δ 178,96, 143,55, 133,21, 127,93, 127,06, 41,47, 36,13, 31,94, 31,47, 22,86, 14,34.

Стадия 5

[00142] Раствор кислоты (0,48 г, 1,75 ммоль) в этаноле (12 мл) обработали раствором гидрокарбонат натрия (0,15 г, 1,75 ммоль) в воде (3 мл) и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 3 дней. Этанол выпарили в вакууме, и остаток водного сиропа разбавили водой (50 мл), отфильтровали (PES, 0,2 мкм), и лиофилизировали с получением 2-[3,5-дипентилфенил]ацетата натрия в виде белого твердого вещества (0,52 г, количественный). т.пл. 225-230°C; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD + D₂O):δ 6,92 (с, 2H), 6,76 (с, 1H), 3,41 (с, 2H), 2,50 (т, J = 7,5 Гц, 2H), 1,52-1,59 (м, 2H), 1,23-1,33 (м, 4H), 0,85 (т, J = 6,9 Гц, 3H); ¹³C ЯМР (101 МГц, CD₃OD + D₂O):δ 179,99, 142,66, 137,63, 126,66, 126,16, 45,11, 35,61, 31,36, 31,19, 22,41, 13,47; НРМС (ЭС): m/z 277,5 (w, [M - Na+ + 2H+]), 231,1 (100%, тропилиевый ион из потери карбоксильной группы); ВЭЖХ:3,0 мин.

Соединение XV:Натриевая соль 2-(3,5-дигексилфенил)уксусной кислоты

[00143] Указанное выше соединение получили из пинаколового эфира (E)-гекс-1-енилбороновой кислоты, как было указано для Соединения XIV. Белое твердое вещество; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ 6,96 (с, 2H), 6,79 (с, 1H), 3,43 (с, 2H), 2,54 (д, J = 7,7 Гц, 4H), 1,55-1,63 (м, 4H), 1,28-1,36 (м, 12H), 0,89 (т, J = 6,8 Гц, 6H); 13C ЯМР (101 МГц, CD₃OD):δ 179,68, 142,38, 137,82, 126,55, 126,07, 45,30, 35,87, 31,83, 31,67, 29,02, 22,61, 13,42; НРМС (ЭС): m/z 322,0 (100%, M - Na+ + H+ + NH₄+) и 259,0 (35%, M - CO₂Na); СВЭЖХ (Система A):8,9 мин. СВЭЖХ Система A: Подвижная фаза A = 10 мМ водный раствор гидрокарбоната натрия; подвижная фаза B = ацетонитрил; неподвижная фаза = колонка HSS T3; градиент = 5-100% B в A на протяжении 10 минут.

Соединение XVI:Натриевая соль 2-(2-гидрокси-3,5-дипентилфенил)уксусной кислоты

Стадия 1

[00144] Раствор 2,4-дибром-6-(бромометил)фенола (3,5 г, 10,0 ммоль) в ацетонитриле (17 мл) обработали раствором цианида натрия (2,5 г, 50,0 ммоль) и реакционную смесь нагревали при 100°C при кипячении с обратным холодильником в течение 1 ч. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и вылили в воду (100 мл). 1M водным раствором соляной кислоты pH привели к от 10 до 8 и экстрагировали смесь этилацетатом (3 x 250 мл). Объединенные экстракты промыли 1M водным раствором соляной кислоты (250 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (250 мл); сушили над сульфатом натрия; отфильтровали и выпарили в вакууме с получением сырого продукта. Экстракция ацетоном; фильтрование и выпаривание в вакууме дали получить 2-(3,5-дибром-2-гидроксифенил)ацетонитрил (2,6 г, 90%).¹H ЯМР (400 МГц, d6-ацетон):δ 8,75 (уш.с., 1H), 7,69 (д, J = 2,3 Гц, 1H), 7,54 (д, J = 2,3 Гц, 1H), 3,92 (с, 2H); ¹³C ЯМР (101МГц, d6-ацетон):δ 151,31, 134,51, 131,92, 122,80, 117,43, 111,89, 111,53, 18,70.

Стадия 2

[00145] 2-(3,5-Дибром-2-гидроксифенил)ацетонитрил (2,6 г, 9,0 ммоль) обработали смесью серной кислоты (2,5 мл), уксусной кислоты (2,5 мл) и воды (2,5 мл), и нагревали реакционную смесь при 125°C при кипячении с обратным холодильником в течение 2 ч. Реакционную смесь охладили до комнатной температуры и вылили в смесь льда (50 мл) и воды (50 мл) и затем перемешивали до тех пор, пока лёд не расплавился. Смесь экстрагировали этилацетатом (250 мл); и затем экстракт промыли водой (100 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (100 мл); сушили над сульфатом натрия; отфильтровали и выпарили в вакууме с получением сырой 2-(3,5-дибром-2-гидроксифенил)уксусной кислоты (3,1 г). Указанный материал непосредственно использовали на следующей стадии без дополнительной очистки или характеризации.

Стадия 3

[00146] Раствор сырой 2-(3,5-дибром-2-гидроксифенил)уксусной кислоты (3,1 г, 9,0 ммоль) в метаноле (17 мл) обработали серной кислотой (0,43 мл, 8,1 ммоль) и перемешивали реакционную смесь при температуре окружающей среды в течение 16 ч. Метанол выпарили в вакууме и остаток растворили в этилацетате (270 мл). Раствор промыли вода (2 x 200 мл) и насыщенным водным раствором хлорида натрия (130 мл); сушили над сульфатом натрия; отфильтровали и выпарили в вакууме с получением сырого продукта. Очистка на системе Biotage™ SP1 (120 г силикагелевый картридж), элюируя 0-20% этилацетатом в гексане, дала получить метил-2-(3,5-дибром-2-гидроксифенил)ацетат (1,4 г, 49%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 7,52 (д, J = 2,2 Гц, 1H), 7,23 (д, J = 2,2 Гц, 1H), 6,42 (уш.с., 1H), 3,72 (с, 3H), 3,65 (с, 2H); 13C ЯМР (101 МГц, CDCl₃):δ 172,06, 150,60, 133,74, 133,50, 123,94, 112,62, 111,77, 52,78, 36,61.

Стадия 4

[00147] Раствор метил-2-(3,5-дибром-2-гидроксифенил)ацетата (0,5 г, 1,54 ммоль) в ацетоне (5 мл) обработали карбонатом калия (0,26 г, 1,86 ммоль), иодидом калия (0,05 г, 0,32 ммоль) и бензилбромидом (0,20 мл, 1,7 ммоль) и перемешивали реакционную смесь при комнатной температуре в течение 1 ч. Ацетон выпарили в вакууме и остаток разделили между этилацетатом (50 мл) и 1M водным раствором соляной кислоты (50 мл). Органическую фазу промыли насыщенным водным раствором хлорида натрия (50 мл); сушили над сульфатом натрия; отфильтровали и выпарили в вакууме с получением сырого продукта. Очистка на системе Biotage™ SP1 (40 г силикагелевый картридж), элюируя 0-10% этилацетатом в гексане, дала получить метил 2-(2-(бензилокси)-3,5-дибромфенил)ацетат (0,6 г, 95%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 7,67 (д, J = 2,4 Гц, 1H), 7,48-7,51 (м, 2H), 7,37 (д, J = 2,4 Гц, 1H), 7,34-7,43 (м, 3H), 4,99 (с, 2H), 3,66 (с, 3H), 3,60 (с, 2H); 13C ЯМР (101 МГц, CDCl₃):δ 171,26, 153,79, 136,56, 135,38, 133,57, 132,04, 128,82, 128,64, 128,52, 118,69, 117,56, 75,53, 52,50, 35,86.

Стадия 5

[00148] Метил-2-(2-(бензилокси)-3,5-дибромфенил)ацетат (0,3 г, 0,73 ммоль) и пинаколовый эфир (E)-пент-1-енилбороновой кислоты (0,4 г, 1,79 ммоль) ввели в реакцию сочетания, как было указано для Соединения I, стадии 2, с получением метил- 2-(2-(бензилокси)-3,5-ди((E)-пент-1-енил)фенил)ацетата (0,21 мг, 72%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 7,50 (д, J = 7,2 Гц, 2H), 7,44 (дд, J = 7,2, 7,2 Гц, 2H), 7,43 (д, J = 2,1 Гц, 1H), 7,38 (дд, J = 7,2, 7,2 Гц, 1H), 7,18 (д, J = 2,1 Гц, 1H), 6,72 (д, J = 15,8 Гц, 1H), 6,39 (д, J = 15,8 Гц, 1H), 6,32 (дт, J = 15,8, 7,0 Гц, 1H), 6,22 (дт, J = 15,8, 6,8 Гц, 1H), 4,87 (с, 2H), 3,69 (с, 3H), 3,67 (с, 2H), 2,20-2,29 (м, 4H), 1,50-1,60 (м, 4H), 1,01 (т, J = 7,3 Гц, 3H), 1,00 (т, J = 7,4 Гц, 3H); 13C ЯМР (101 МГц, CDCl₃):δ 172,49, 153,59, 137,58, 134,35, 132,91, 131,91, 130,84, 129,53, 128,78, 128,32, 128,30, 128,24, 127,26, 125,21, 123,89, 75,89, 52,21, 35,94, 35,74, 35,42, 22,87, 22,77, 14,07, 14,06.

Стадия 6

[00149] Метил-2-(2-(бензилокси)-3,5-ди((E)-пент-1-енил)фенил)ацетат (0,2 г, 0,53 ммоль) гидрировали, как было указано для Соединения I, стадии 3, с получением метил-2-(2-гидрокси-3,5-дипентилфенил)ацетата (0,12 г, 73%).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 7,37 (с, 1H), 6,92 (д, J = 2,1 Гц, 2H), 6,77 (д, J = 2,1 Гц, 1H), 3,76 (с, 3H), 3,67 (с, 2H), 2,65 (т, J = 7,8 Гц, 2H), 2,51 (т, J = 7,8 Гц, 2H), 1,58-1.66 (м, 4H), 1,31-1,41 (м, 8H), 0,93 (т, J = 7,0 Гц, 3H), 0,92 (т, J = 6,9 Гц, 3H); 13C ЯМР (101 МГц, CDCl₃):δ 175,01, 151,27, 135,14, 131,48, 129,92, 128,52, 120,30, 52,95, 38,35, 35,34, 32,15, 31,86, 31,74, 30,61, 30,03, 22,87, 22,83, 14,34, 14,31.

Стадия 7

[00150] Метил-2-(2-гидрокси-3,5-дипентилфенил)ацетат (0,2 г, 0,53 ммоль) гидролизовали, как было указано для Соединения I, стадии 4, с получением сырого продукта, смешанного с лактонизированным материалом. Небольшую порцию очистили на системе Biotage™ SP1 (120 г силикагелевый картридж), элюируя 0-100% этилацетатом в гексане, с получением 2-(2-гидрокси-3,5-дипентилфенил)уксусной кислоты (13,5 мг).¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 10,5 (уш.с., 1H), 6,89 (д, J = 2,2 Гц, 1H), 6,78 (д, J = 2,2 Гц, 1H), 6,32 (уш.с., 1H), 3,66 (с, 2H), 2,58 (т, J = 7,9 Гц, 2H), 2,48 (т, J = 7,8 Гц, 2H), 1,52-1.63 (м, 4H), 1,26-1,37 (м, 8H), 0,90 (т, J = 7,0 Гц, 3H), 0,88 (т, J = 6,8 Гц, 3H).

Стадия 8

[00151] 2-(2-Гидрокси-3,5-дипентилфенил)уксусную кислоту (13,5 мг, 0,046 ммоль) превратили в натриевую соль, как было указано для Соединения I, стадии 5, с получением 2-(2-гидрокси-3,5-дипентилфенил)ацетата натрия (11 мг, 77%).¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ 6,72 (д, J = 2,0 Гц, 1H), 6,69 (д, J = 2,0 Гц, 1H), 3,46 (с, 2H), 2,56 (т, J = 7,6 Гц, 2H), 2,44 (т, J = 7,6 Гц, 2H), 1,50-1.61 (м, 4H), 1,25-1,37 (м, 8H), 0,90 (т, J = 6,8 Гц, 3H), 0,88 (т, J = 7,0 Гц, 3H); 13C ЯМР (101 МГц, CD₃OD):δ 180,33, 151,94, 133,47, 130,37, 128,21, 127,81, 123,99, 42,90, 34,97, 31,81, 31,60, 31,40, 30,25, 29,88, 22,51, 22,45, 13,29, 13,24; НРМС (ЭС отрицательный): m/z 291,2 (100%, M - Na+); СВЭЖХ (Система B):7,7 мин. СВЭЖХ Система B: Подвижная фаза A = 0,1% водный раствор муравьиной кислоты; подвижная фаза B = 0,1% муравьиная кислота в ацетонитриле; неподвижная фаза = колонка HSS T3; градиент = 5-100% B в A на протяжении 10 минут.

Соединение XVII: Натриевая соль 2-(3,5-дигексил-2-гидроксифенил)уксусной кислоты

[00152] Указанное выше соединение получили так же, как и Соединение XVI, используя пинаколовый эфир (E)-гекс-1-енилбороновой кислоты. ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ 6,72 (д, J = 2,0 Гц, 1H), 6,69 (д, J = 2,0 Гц, 1H), 3,46 (с, 2H), 2,56 (т, J = 7,6 Гц, 2H), 2,44 (т, J = 7,5 Гц, 2H), 1,50-1.60 (м, 4H), 1,27-1,37 (м, 12H), 0,89 (т, J = 6,6 Гц, 3H), 0,88 (т, J = 6,80 Гц, 3H); НРМС (ЭС отрицательный): m/z 319 (100%, M - Na+); СВЭЖХ (Система B):8,7 мин. СВЭЖХ Система B: Подвижная фаза A = 0,1% водный раствор муравьиной кислоты; подвижная фаза B = 0,1% муравьиная кислота в ацетонитриле; неподвижная фаза = колонка HSS T3; градиент = 5-100% B в A на протяжении 10 минут.

Соединение XVIII:Натриевая соль 2-(4-гидрокси-3,5-дипентилфенил)уксусной кислоты

[00153] Указанное выше соединение получили так же, как и Соединение XVI, из 2-(3,5-дибром-4-гидроксифенил)уксусной кислоты. ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ 6,87 (с, 2H), 3,33 (с, 2H), 2,55 (т, J = 7,7 Гц, 4H), 1,53-1.61 (м, 4H), 1,31-1,37 (м, 8H), 0,90 (т, J = 7,0 Гц, 6H); НРМС (ЭС отрицательный): m/z 291,1 (100%, M - Na+); СВЭЖХ (Система B):6,8 мин. СВЭЖХ Система B: Подвижная фаза A = 0,1% водный раствор муравьиной кислоты; подвижная фаза B = 0,1% муравьиная кислота в ацетонитриле; неподвижная фаза = колонка HSS T3; градиент = 5-100% B в A на протяжении 10 минут.

Соединение XIX:Натриевая соль 2-(3,5-дигексил-4-гидроксифенил)уксусной кислоты

[00154] Указанное выше соединение получили так же, как и Соединение XVI, из 2-(3,5-дибром-4-гидроксифенил)уксусной кислоты и пинаколового эфира (E)-гекс-1-енилбороновой кислоты. ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ 6,72 (д, J = 2,0 Гц, 1H), 6,69 (д, J = 2,0 Гц, 1H), 3,46 (с, 2H), 2,56 (т, J = 7,6 Гц, 2H), 2,44 (т, J = 7,5 Гц, 2H), 1,50-1,60 (м, 4H), 1,27-1,37 (м, 12H), 0,89 (т, J = 6,6 Гц, 3H), 0,88 (т, J = 6,8 Гц, 3H); НРМС (ЭС отрицательный): m/z 319,1 (100%, M - Na+); СВЭЖХ (Система B):7,6 мин. СВЭЖХ Система B: Подвижная фаза A = 0,1% водный раствор муравьиной кислоты; подвижная фаза B = 0,1% муравьиная кислота в ацетонитриле; неподвижная фаза = колонка HSS T3; градиент = 5-100% B в A на протяжении 10 минут.

Соединение XX:Натриевая соль 2-(4-Фтор-3,5-дигексилфенил)уксусной кислоты

[00155] Указанное выше соединение получили так же, как и Соединение XVI, исходя из 3,5-дибром-4-фторбензилбромида и пинаколового эфира (E)-гекс-1-енилбороновой кислоты. 3,5-Дибром-4-фторбензилбромид получили бромированием 3,5-дибром-4-фтортолуола N-бромсукцинимидом и азобисизобутиронитрилом в ацетонитриле при 80°C. ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ 6,98 (д, JHF = 7,0 Гц, 2H), 3,38 (с, 2H), 2,57 (т, J = 7,7 Гц, 4H), 1,54-1,61 (м, 4H), 1,28-1,37 (м, 12H), 0,89 (т, J = 6,7 Гц, 6H); 19F ЯМР (377 МГц, CD₃OD):δ -132,17 (д, JHF = 6,6 Гц, 1F); 13C ЯМР (101 МГц, CD₃OD):δ 179,44, 158,11 (д, JCF = 239,8 Гц), 133,26 (д, JCF = 3,8 Гц), 128,73 (д, JCF = 5,4 Гц), 128,56 (д, JCF = 16,9 Гц), 44,52, 31,69, 30,35 (д, JCF = 1,5 Гц), 28,98, 28,97 (д, JCF = 3,1 Гц), 22,51, 13,29; НРМС (ЭС отрицательный): m/z 321,0 (100%, M - Na+); СВЭЖХ (Система B):9,2 мин. СВЭЖХ Система B: Подвижная фаза A = 0,1% водный раствор муравьиной кислоты; подвижная фаза B = 0,1% муравьиная кислота в ацетонитриле; неподвижная фаза = колонка HSS T3; градиент = 5-100% B в A на протяжении 10 минут.

Соединение XXI:Натриевая соль 2-(4-Фтор-3,5-дипентилфенил)уксусной кислоты

[00156] Указанное выше соединение получили так же, как и Соединение XVI, исходя из 3,5-дибром-4-фторбензилбромида. ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ 6,98 (д, JHF = 6,8 Гц, 2H), 3,37 (с, 2H), 2,57 (т, J = 7,6 Гц, 4H), 1,54-1,62 (м, 4H), 1,28-1,37 (м, 8H), 0,90 (т, J = 7,0 Гц, 6H); 19F ЯМР (377 МГц, CD₃OD):δ -132,34 (д, JHF = 6,6 Гц, 1F); 13C ЯМР (101 МГц, CD₃OD):δ 179,41, 158,10 (д, JCF = 239,8 Гц), 133,26 (д, JCF = 3,8 Гц), 128,72 (д, JCF = 4,6 Гц), 128,56 (д, JCF = 16,9 Гц), 44,51, 31,54, 30,07, 28,92 (д, JCF = 3,1 Гц), 22,38, 13,22; НРМС (ЭС отрицательный): m/z 293,0 (100%, M - Na+); СВЭЖХ (Система B):8,4 мин. СВЭЖХ Система B: Подвижная фаза A = 0,1% водный раствор муравьиной кислоты; подвижная фаза B = 0,1% муравьиная кислота в ацетонитриле; неподвижная фаза = колонка HSS T3; градиент = 5-100% B в A на протяжении 10 минут.

Соединение XXII:Натриевая соль 2-(2-Бензил-3,5-дипентилфенил)уксусной кислоты

[00157] Указанное в заголовке соединение получили, как было указано для Соединения XIV, из метил-2-(2-бензил-3,5-ди((E)-пент-1-енил)фенил)ацетата. Последнее изолировали в виде побочного продукта (выход 1,1%) в масштабе загрузки Соединения XIV. ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ 7,17 (дд, J = 7,3, 7,3 Гц, 2H), 7,09 (дд, J = 7,3, 7,3 Гц, 1H), 6,97-6,99 (м, 3H), 6,86 (д, J = 1,8 Гц, 1H), 4,13 (с, 2H), 3,40 (с, 2H), 2,55 (т, J = 7,7 Гц, 2H), 2,49 (т, J = 7,8 Гц, 2H), 1,59-1,67 (м, 2H), 1,31-1,45 (м, 6H), 1,21-1,26 (м, 4H), 0,91 (т, J = 7,0 Гц, 3H), 0,82 (т, J = 7,0 Гц, 3H); ¹³C ЯМР (101 МГц, CD₃OD):δ 179,48, 141,46, 141,24, 140,47, 137,46, 133,70, 128,36, 128,05, 127,86, 127,75, 125,42, 43,25, 35,54, 33,90, 33,61, 31,86, 31,65, 31,25, 30,96, 22,49, 22,40, 13,31, 13,23; НРМС (ЭС отрицательный): m/z 365,0 (20%, M - Na⁺), 321,1 (100%, M - CO₂Na); СВЭЖХ (Система B):9 мин.(СВЭЖХ Система B: Подвижная фаза A = 0,1% водная муравьиная кислота; подвижная фаза B = 0,1% муравьиная кислота в ацетонитриле; неподвижная фаза = HSS T3; градиент = 5-100% B в A на протяжении 10 мин.)

Соединение XXIII: 2-[3,5-Ди[(E)-пент-1-енил]фенил]ацетат натрия

[00158] Указанное в заголовке соединение получили, используя методику аналогичную указанной для Соединение XIV, но без стадии гидрирования. т.пл. 226-30°C; ¹H ЯМР (400 МГц, CD₃OD):δ 7,18 (д, J = 1,2 Гц, 2H), 7,11 (д, J = 1,2 Гц, 1H), 6,34 (д, J = 15,9 Гц, 2H), 2,23 (дт, J = 15,9, 6,7 Гц, 2H), 3,44 (с, 2H), 2,14-2,19 (м, 4H), 1,49 (тк, J = 7,4, 7,4 Гц, 4H), 0,95 (т, J = 7,3 Гц, 6H); ¹³C ЯМР (101МГц, CD₃OD):δ 179,41, 138,34, 138,06, 130,30, 130,16, 125,26, 121,60, 45,24, 35,10, 22,55 и 12,98; НРМС (режим отрицательных ионов): m/z 271 (w, [M - Na⁺]), 227,2 (100%, [M - Na⁺- CO₂]); СВЭЖХ:8 мин. (СВЭЖХ; Условия растворитель A = 0,1% муравьиная кислота в воде; Растворитель B = 0,1% муравьиная кислота в ацетонитриле; Градиент:5-100% B в A на протяжении 10 мин при 0,7 мл/мин.)

Соединение XXIV:3-[3,5-Дипентилфенил]пропаноат натрия

[00159] Указанное в заголовке соединение получили, используя методику аналогичную указанной для Соединения XIV, исходя из 3-[3,5-дибромфенил]пропановой кислоты. т.пл. 211-217°C; ¹H ЯМР (400 МГц, CDCl₃):δ 6,73 (с, 1H), 6,68 (с, 2H), 2,73-2,77 (м, 2H), 2,42-2,46 (м, 2H), 2,38 (т, J = 7,8 Гц, 4H), 1,43-1,51 (м, 4H), 1,19-1,28 (м, 8H), 0,83 (т, J = 6,9 Гц, 6H); ¹³C ЯМР (101 МГц, CDCl₃):δ 182,55, 142,93, 141,85, 125,96, 125,77, 39,80, 36,13, 32,77, 31,99, 31,47, 22,79 & 14,27; НРМС (режим отрицательных ионов): m/z 289,4 (100%, [M - Na⁺]); СВЭЖХ:9 мин.(СВЭЖХ: Условия растворитель A = 0,1% муравьиная кислота в воде, растворитель B = 0,1% муравьиная кислота в ацетонитриле, Градиент:5-100% B в A на протяжении 10 мин при 0,7 мл/мин.

Пример 2: Действие соединений на ЛПС-стимулированные клетки RAW264,7; предшественника остеокласта.

[00160] ЛПС, полученный из бактерий продукт клеточных стенок, долго считали главным фактором в развитии потери костной ткани. ЛПС играет важную роль к резорбции костной ткани, которое включает задействование воспалительных клеток, синтез цитокинов (таких как интерлейкин-6 (ИЛ-6), ИЛ-12 и фактор некроза опухоли-a (TNF-a)), и активацию образования и дифференциации остеокластов .

[00161] Клетки RAW264,7 представляют собой предшественники остеокластов и могут быть дифференциированы с помощью нескольких факторов, включающих рецептор-активатор лиганда NF-κB (RANKL) или липополисахариды (ЛПС). Остеокласты характеризуются высокой экспрессией или устойчивой к тартрату кислой фосфатазой (TRACP) и матричной металлопротеиназой-9 (MMP-9), которые могут быть использованы в качестве маркеров остеокластов. Было показано, что клетки RAW264,7, инкубированные в присутствии каприновой кислоты, приводили к повышению продуцирования ИЛ-12 и уменьшения фосфатазы (TRAP)-положительных клеток (TRAP экспрессия, маркер дифференциации остеокластов) (Wang et al.,J.Biol.Chem.(2006), Том281, №.45, стр.,34457-64). Более того, ЛПС сильно повышало регуляцию уровней мРНК индуцируемой синтазы оксида азота (iNOS) и продуцирования оксида азота (NO), тогда как каприновая кислота ингибировала их. Дополнительно, каприновая кислота также ингибировала мРНК экспрессию моноцитарного хемоаттрактантного белка -1 (MCP-1) .

[00162] Действие выбранных соединений на TRAP (остеокластный маркер) и ИЛ-12 исследовали на клетках RAW264,7, клеточной линии мышиных клеток-предшественников остеокластов по сравнению с каприновой кислотой, в качестве положительного контроля уменьшения остеокластогенеза (Park et al.(2011) PLOS One Том 6, номер 11, 8 страниц). Клетки RAW264,7 дифференциировали путем инкубации с ЛПС (1 мкг/мл) в присутствии или отсутствии каприновой кислоты или Соединения I. На дни 3-5 образование остеокластов оценивали, используя окрашивание устойчивой к тартрату кислой фосфатазы (TRAP).

[00163] Фиг. 1 иллюстрирует действие ЛПС на остеокластогенез в клетках RAW264,7, как было продемонстрировано путем высокой экспрессии TRAP (темное окрашивание). Инкубация с каприновой кислотой и Соединением I указывает на различный фенотип. который наблюдают на контрольных и ЛПС-индуцированных клеток и не наблюдают на клетках TRAP, указывающий на то, что клетки не дифференциируются в остеокласты.

[00164] Также сообщалось, что каприновая кислота повышает продуцирования ИЛ-12 в ЛПС-стимулированных RAW264,7 (Wang et al.,J.Biol.Chem.(2006), Том 281, №.45, стр.,34457-64). Поскольку каприновая кислота также известна в качестве ингибитора остеокластогенеза, то провели эксперимент для определения способно ли Соединение I стимулировать повышение продуцирования ИЛ-12. Клетки RAW264,7 культивировали с 100 нг/мл ЛПС в присутствии или в отсутствии соединений в течение 21 часов в увлажненной атмосфере 95% воздух-5% диоксид углерода при 37°С. Концентрацию ИЛ-12 в культурной среде измерили, используя ИФА ИЛ-12 в соответствии с рекомендациями производителя (BD Biosciences). Фиг. 2 иллюстрирует сильную стимуляцию продуцирования ИЛ-12 в ЛПС-стимулированных клеток RAW2 64,7 в присутствии разнообразных концентраций Соединения I.

Пример 3: Действие соединения Формулы I на продуцирования ИЛ-12 в ЛПС-стимулированных клетках RAW264,7; предшественнике остеокласта.

[00165] Также сообщается, что ИЛ-12 ингибирует образование остеокластов (Horwood и al.(2001) J. of Immunology, том 166, №.8, стр. 4915-4921). Как было продемонстрировано в Примере 1, ЛПС-стимулированные RAW2 64,7, инкубированные в присутствии Соединение I, повышают ИЛ-12 и уменьшают остеокластогенез (TRAP), in vitro анализ продуцирования ИЛ-12 применили для скрининга потенциальных ингибиторов остеокластогенеза. В Таблице 2 представлено действие иллюстративных примеров соединений Формулы I на продуцирование ИЛ-12.Все указанные соединения вызвали значительное увеличение продуцирования ИЛ-12.

[00166] Таблица 2: Действие иллюстративных примеров соединения Формулы I на продуцирование ИЛ-12

[00167] Данные результаты демонстрируют, что протестированные соединения вызвали продуцирование ИЛ-12 в присутствии ЛПС.Способность продуцировать ИЛ-12 означает, что соединения Формулы I могут быть пригодны для предотвращения и/или лечения остеопороза, как следствие стимуляции ИЛ-12. Это подтверждается упомянутыми выше ссылками в Примерах 1 и 2, в которых сообщается, что ИЛ-12 имеет непосредственный ингибирующий эффект на остеокластогенез.

Пример 4: Действие Соединения I на уменьшение остеопороза на модели овариэктомированной крысы.

[00168] Хотя при сравнении с людьми, скелетная масса крыс остается более стабильной на протяжении периода их жизни, с помощью овариэктомии крыс у них можно вызвать дефицит половых гормонов и стимулировать ускорение потери костной ткани, которые происходят у женщин после менопаузы. Вызванная овариэктомией потеря костной ткани у крысы и постменопаузальная потеря костной ткани имеют много аналогичных характеристик. Указанные характеристики включают: повышенную скорость замены костной ткани с резорбцией превышающей образование; исходную быструю фазу потери костной ткани с последующей более медленной фазой; большую потерю губчатой, чем трубчатой костной ткани; пониженное всасывание кальция в кишечнике; некоторую защиту против потери костной ткани благодаря ожирению; и аналогичный ответ со стороны скелета на терапию эстрогеном, тамоксифеном, бисфосфонатами, паратиреоидным гормоном кальцитонином и упражнением. Указанный широкий диапазон аналогий является веским доказательством в пользу того, что изучение на модели потери костной ткани овариэктомированных крыс пригодно для изучения проблем, которые соответствуют постменопаузальной потери костной ткани.

[00169] Крыс Спрага-Доули (250 г) подвергли овариэктомии (OVX) на 0 день. Крыс лечили путем кормления через желудочный зонд Соединением I (200 мг/кг) с 14 дня по 68 день. Оценка различных параметров (массы тела, потери кальция, маркеров остеокластов (мРНК экспрессии RANKL и TRAP), содержания коллагена и гистологии) выполнена на 68 день.

[00170] Фиг. 3 иллюстрирует повышение массы тела у овариэктомированных крыс (аналогичным "постменопаузальному ожирению"). Соединение I уменьшило вызванное овариэктомией ожирение.

[00171] Фиг. 4 иллюстрирует действие Соединения I на потерю кальция у овариэктомированных крыс.Потеря кальция обнаружена в моче овариэктомированных крыс от 28 дня до 56 дня. Соединение I значительно уменьшило потерю кальция у овариэктомированных крыс.

[00172] Более того, известно, что активность кислой фосфатазы в сыворотке указывает на остеокластогенез (Park et al.(2011) PLOS One Том 6, номер 11, стр.1-8).Активность кислой фосфататзы измерили и указанная активность значительно повышена у овариэктомированных крыс от 28 дня до 56 дня (Фиг. 5). Тем не менее, Соединение I понижает активность кислой фосфатазы в сыворотке овариэктомированных крыс (Фиг. 5), понижение указывает на успешное понижение остеокластогенеза.

[00173] Фиг. 6 представляет эффект Соединения I на соотношение мРНК экспрессии RANKL/OPG на 68 день в большеберцовой кости крысы. Как было проиллюстрировано мРНК экспрессия RANKL/OPG была повышена у крыс с развивающимся остеопорозом, тогда как она понижалась при лечении Соединением I; понижение указывает на успешное уменьшение остеокластогенеза.

[00174] Как следствие потери костной ткани содержание коллагена уменьшалось. Данное явление наблюдали у овариэктомированных крыс. Соединение I повысило содержание коллагена в метафизе бедренной кости овариэктомированных крыс, свидетельствуя об уменьшении потери массы костной ткани (Фиг. 7).

[00175] Фиг. 8 иллюстрирует типичные примеры изображений гистологии костной ткани метафизы бедренной кости. Соединение I понижало потерю костной массы в метафизной части бедренной кости.

Пример 5: Эффект соединения Формулы I на уровень адипонектина в сыворотке на модели мышей с ожирением, больных диабетом (db/db).

[00176] Было задокументировано, что адипонектин стимулирует образование костной ткани и ремоделирование, также как ингибирует резорбцию костной ткани, свидетельствуя о том, что адипонектин может представлять собой негативный регулятор костной массы (Lubkowska et al.(2014) Disease Markers, том 2014, Статья ID975178, 14 страниц). Также, большинство экспериментов in vitro показали, что адипонектин стимулирует дифференциацию и минерализацию остеобластов, также как экспрессию остеокальцина, который действует в качестве гормона, регулирующего метаболизм глюкозы и обмен жиров (Lubkowska et al.(2014)). Потенциальное влияние адипонектина на остеобласты и остеокласты и последовательно на ремоделирование костной ткани возможно связано с взаимосвязью между эндокринной системой и обменом жиров (Lubkowska et al.(2014)).

[00177] Для определения, могут ли выбранные соединения по данному изобретению, воздействовать на уровень адипонектина в сыворотке, использовали модель с диабетом типа II/ожирение. Вкратце, мышей db/db (6 недельного возраста односторонне нефрэктомизировали и лечили Соединением XIV на протяжении 113 дней (структура проиллюстрирована в Таблице 1 выше). Уровни адипонектина в сыворотке, определили с помощью мышиного адипонектина ферментативно связанного с комплектом иммуносорбентного анализа (Системы НИР).

[00178] Фиг. 9 иллюстрирует уровень адипонектина в сыворотке, измеренный у мышей db/db с ожирением, больных диабетом. Уровень адипонектина в сыворотке понизился для интактных мышей db/db, тогда как лечение Соединением XIV повысило уровень адипонектина до уровня ложных животных, свидетельствуя о том, что это может предотвратить или уменьшить остеопороз. Варианты Соединения XIV, конкретно соединения с аналогичной структурой, также могут повышать уровень адипонектина и предотвращать и/или уменьшать симпомы остеопороза. Неполный список химических вариантов Соединения XIV включает, но не ограничивается ими, Соединения от XV до XXIV (и любые его фармацевтически приемлемые соли) проиллюстрированные в Таблице 1 выше.

* * *

[00179] Заголовки включены а данный документ для ссылки и для помощи определения расположения некоторых разделов. Указанные заголовки не предназначены для того, чтобы ограничивать объем концепций, описаных в данном документе и данные концепции могут быть применимы к другим разделам в пределах объема всего описания. Поэтому, данное изобретение не предназначено для того, чтобы быть ограничено вариантами реализации изобретения, проиллюстрированными в данном документе, но чтобы находиться в соответствии с более широким объемом, согласующимся с принципами и новыми отличительными признаками, изложенными в данном документе.

[00180] Единичные формы включают соответствующие формы в множественном числе, если контекст ясно подразумевает обратное.

[00181] Если не указано иное, должно быть понятно, что все числа, выражающие количества компонентов, реакционные условия, концентрации, свойства, и т.п. использованные в описании и формуле изобретения, изменяются во всех случаях с термином “около”. В крайнем случае, каждый численный параметр должен быть по меньшей мере истолкован в свете численного значения сообщенных значащих цифр и с примением обычных методов округления. Соответственно, если не указано иного, численные параметры, изложенные в данном описании и прилагаемая формула изобретения являются приближениями, которые могут варьироваться, в зависимости от того, какие свойства желают получить. Несмотря на то, что численные диапазоны и параметры, изложенные в широком объеме вариантов реализации изобретения являются приблизительными, изложенные в конкретных примерах, численные значения указаны настолько точно, насколько это возможно. Любое численное значение, тем не менее, неотъемлемо содержит некоторые ошибки, возникшие в результате некоторых вариаций в экспериментах, тестовых измерениях, статистических анализах и т.п.

[00182] Понятно, что примеры и варианты реализации изобретения, описанные в данном документе, предназначены только для иллюстративных целей и, учитывая их разнообразные модификации или изменения будут предложены специалистам в данной области техники и включены в описании данного документа и объеме прилагаемой формулой изобретения.

1. Применение соединения, представленного формулой I, или его фармацевтически приемлемой соли для получения лекарственного средства для предупреждения и/или лечения остеопороза у нуждающегося в этом субъекта, где формула I представляет собой:

,

где

A представляет собой C₅ алкил, C₆ алкил, C₅ алкенил или C₆ алкенил;

R₁ представляет собой H, F или OH;

R₂ представляет собой H, F, OH, C₅ алкил, C₆ алкил, C₅ алкенил, C₆ алкенил, C(O)-(CH₂)_n-CH₃ или CH(OH)-(CH₂)_n-CH₃, где n равен 3 или 4;

R₃ представляет собой H, F, OH или CH₂Ph;

R₄ представляет собой H, F или OH;

Q представляет собой

1) (CH₂)_mC(O)OH, где m равен 1 или 2,

2) CH(F)-C(O)OH,

3) CF₂-C(O)OH или

4) C(O)-C(O)OH.

2. Применение по п. 1, где A представляет собой C₅ алкил или C₆ алкил.

3. Применение по п. 1, где R₂ представляет собой H, F, OH, C₅ алкил или C₆ алкил.

4. Применение по п. 1, где R₃ представляет собой H, OH или CH₂Ph.

5. Применение по п. 1, где Q представляет собой (CH₂)_mC(O)OH, где m равно 1 или 2.

6. Применение по п. 1, где A представляет собой C₅ алкил или C₆ алкил; R₂ представляет собой H, F, OH, C₅ алкил или C₆ алкил; R₃ представляет собой H, OH или CH₂Ph; и Q представляет собой (CH₂)_mC(O)OH, где m равно 1 или 2.

7. Применение по п. 1, где A представляет собой C₅ алкил; R₁ представляет собой H; R₂ представляет собой H или C₅ алкил; R₃ представляет собой H; R₄ представляет собой H; и Q представляет собой (CH₂)_mC(O)OH, где m равно 1.

8. Применение по п. 1, где указанное соединение выбрано из группы, включающей соединения, представленные следующими структурами:

и их фармацевтически приемлемых солей.

9. Применение по п. 8, где указанное соединение представлено следующей структурой:

,

или его фармацевтически приемлемой солью.

10. Применение по п. 8, где указанное соединение представлено следующей структурой:

или его фармацевтически приемлемой солью.

11. Применение по п. 1, где фармацевтически приемлемая соль представляет собой основно-аддитивную соль, содержащую противоион металла, выбранный из группы, состоящей из ионов натрия, калия, кальция, магния, лития, аммония, марганца, цинка, железа или меди.

12. Применение по п. 11, где фармацевтически приемлемая соль представляет собой натриевую соль.

13. Применение по любому из пп. 1-12, где остеопороз выбран из группы, включающей постменопаузальный остеопороз (первичный тип 1), первичный остеопороз типа 2, вторичный остеопороз аномально высокого остеокластогенеза, остеопороз, подобный остеомаляции, остеопению, незавершенный остеогенез, мраморную болезнь, некроз кости, костную болезнь Педжета, гипофосфатемию и их комбинации.

14. Применение по п. 13, где остеопороз представляет собой постменопаузальный остеопороз (первичный тип 1), первичный остеопороз типа 2 или вторичный остеопороз.

15. Применение по п. 13, где остеопороз представляет собой постменопаузальный остеопороз (первичный тип 1).

16. Применение соединения, представленного формулой I, или его фармацевтически приемлемой соли согласно определениям по любому из пп. 1-12 для получения лекарственного средства для предупреждения и/или уменьшения потери костной ткани у нуждающегося в этом субъекта.

17. Применение по п. 16, где указанное соединение уменьшает потерю кальция.

18. Применение по п. 16, где субъект страдает или подвержен остеопорозу.

19. Применение по любому из пп. 1-12, где субъект представляет собой постменопаузальную женщину.

20. Применение по любому из пп. 16-18, где субъект представляет собой постменопаузальную женщину.

21. Применение соединения, представленного формулой I, или его фармацевтически приемлемой соли согласно определениям по любому из пп. 1-12 для получения лекарственного средства для стимуляции образования костной ткани и/или для стимуляции ремоделирования костной ткани у нуждающегося в этом субъекта.

22. Применение по любому из пп. 1-15 и п. 19, где соединение применяют в комбинации с лекарством, выбранным из группы, состоящей из: бисфосфонатов, Оданакатиба, Алендроната, Ризедроната, Этидроната, Золедроната, Памидроната, Терипаратида, Тамоксифена, Ралоксифена и Деносумаба.

23. Применение по любому из пп. 16-18 и п. 20, где соединение применяют в комбинации с лекарством, выбранным из группы, состоящей из: бисфосфонатов, Оданакатиба, Алендроната, Ризедроната, Этидроната, Золедроната, Памидроната, Терипаратида, Тамоксифена, Ралоксифена и Деносумаба.

24. Применение по п. 21, где соединение применяют в комбинации с лекарством, выбранным из группы, состоящей из: бисфосфонатов, Оданакатиба, Алендроната, Ризедроната, Этидроната, Золедроната, Памидроната, Терипаратида, Тамоксифена, Ралоксифена и Деносумаба.