Способ повышения клеточного иммунитета лабораторных животных

Изобретение относится к ветеринарной иммунологии, экспериментальной и клинической фармакологии, в частности к разработке способа повышения клеточного иммунитета организма, и может быть использовано в лабораторной работе по изучению клеточного иммунитета. Предложен способ повышения клеточного иммунитета лабораторных мышей. Способ включает применение биологически активного препарата, согласно изобретению в качестве препарата используют биотинилированное производное окисленного декстрана, представляющее собой конъюгат, полученный реакцией гидрозида биотина и окисленного декстрана с молекулярной массой 40-70 кДа с образованием азометиновой связи, при внутримышечном введении в дозе 5 мл/кг живого веса мыши. Предлагаемый способ позволяет изучить влияние БОД на стимуляцию клеточного иммунитета у лабораторных мышей. 5 табл.

 

Изобретение относится к ветеринарной иммунологии, экспериментальной и клинической фармакологии, в частности к разработке способа повышения клеточного иммунитета организма и может быть использовано в лабораторной работе по изучению клеточного иммунитета.

Иммунная система является основной защитной системой организма, которая контролирует поддержание гомеостаза внутренней среды и обеспечивает нормальное функционирование организма в целом.

Клеточный иммунитет - иммунные реакции, опосредуемые клетками, а не антителами или другими гуморальными факторами. В процессе клеточного иммунитета активируются макрофаги, натуральные киллеры, антиген-специфичные цитотоксические Т-лимфоциты, и в ответ на антиген выделяются цитокины. То есть клеточный иммунитетом называется - часть иммунной системы, представляющая собой комплекс взаимодействующих клеток, связанных между собой внутренними регуляторными связями посредством цитокинов.

Известен способ стимуляции гуморального и клеточного иммунитета при холодовом воздействии. Сущность способа заключается в том, что животным перед Холодовым воздействием перорально вводят препарат "Эпсорин" ежедневно в течение 5 дней в дозе 0,5 мл/кг (П РФ №2142809 от 20.12.1999, МПК A61K 35/36). Недостатком этого способа является способ введение препарата, подразумевающий индивидуальное пероральное применение каждому животному. Так же возникает потребность в дополнительном оборудовании (холодильнике и др.).

Наиболее близким решением, принятым за прототип, является способ применения композиции, обладающей иммуностимулирующим действием при сублингвальном применении (П РФ №2647455 от 31.05.2017, МПК A61K 9/50, A61K 31/7105, A61K 31/732). Сущность способа заключается в применении композиции, обладающей иммуностимулирующим действием для сублингвального применения, состоящую из двуспиральной РНК бактериофага Ф6, одноцепочечной дрожжевой РНК, пектина, лактата кальция, декстрана, хлорида натрия и воды очищенной. Данное изобретение обеспечивает стимуляцию клеточного звена иммунитета.

Однако данную композицию подразумевает сублингвальное индивидуальное применение каждому животному, что исключает одновременное применение большому количеству животных, особенно содержащихся в условиях вивария. Также данная композиция предполагает использование только в медицине, так как разработана для индивидуального применения для людей.

Задача изобретения - расширение арсенала способов повышения клеточного иммунитета лабораторных мышей.

Поставленная задача решается тем, что в способе повышения клеточного иммунитета лабораторных мышей, включающем применение биологически активного препарата, согласно изобретению в качестве препарата используют биотинилированное производное окисленного декстрана, представляющее собой конъюгат, полученный реакцией гидрозида биотина и окисленного декстрана с молекулярной массой 40-70 кДа с образованием азометиновой связи, при внутримышечном введении, в дозе 5 мл/кг живого веса мыши.

Способ осуществляется следующим образом.

Способ получения биологически активного препарата биотинилированного производного окисленного декстрана (П РФ №2537246 от 27.12.2014).

Сухой окисленный декстран с молекулярной массой 40-70 кДа предварительно растворяют в трис-ацетатном буферном растворе с рН 5,0-5,5 до концентрации 5%. Для запуска реакции в реакционную смесь добавляют гидразид биотина в качестве активного реагента в весовом соотношении с декстраном 1:(20-25) в пересчете на массу сухого вещества. Реакцию проводят при температуре 80-90°С в течение 30-60 минут. Гидразид биотина взаимодействует с карбонильными группами окисленного декстрана с образованием азометиновой связи -C=N-.

Полученный биологически активный препарат биотинилированного производного окисленного декстрана представляет собой конъюгат, в котором гидразид биотина и окисленный декстран связаны ковалентными связями. Именно наличие азометиновой связи в конъюгате гидразида биотина с окисленным декстраном обусловливает его специфические биологические свойства имитировать (моделировать) конъюгаты с лекарственными препаратами, имеющими в своей структуре первичные аминогруппы. Далее по тексту препарат обозначается «БОД». Изобретение иллюстрируется следующими примерами.

Пример 1. Определение дозировки и способ введения препарата БОД лабораторным мышам.

Для определения дозировки и способа введения были сформированы по принципу аналогов десять групп: девять опытных и одна контрольная (n=15). Животным опытной группы вводился препарат БОД по схеме, представленной в таблице 1.

Результаты влияния препарата БОД на морфологический состав клеток крови отвечающих за клеточный иммунитет представлены в таблице 2.

Из таблицы видно, что максимальное увеличение числа клеток ответственных за клеточный иммунитет отмечалось в группе с внутримышечным введением препарата в дозе 0,1 и 0,2 мл. Число моноцитов увеличилось на 58,33%, а число гранулоцитов увеличилось на 31,19 и 32,57% соответственно по сравнению с контрольной группой.

Также увеличение числа фагоцитирующих клеток отмечено в группе с подкожным введением препарата в дозе 0,1 и 0,2 мл: количество моноцитов увеличилось на 41,67%, а количество гранулоцитов - на 4,59 и 4,13% соответственно по сравнению с контрольной группой, что значительно меньше, чем в группах с внутримышечным введением.

В группе с оральным введением препарата установлено небольшое увеличение числа моноцитов (на 16,67 и 12,5% соответственно) и уменьшение числа гранулоцитов (на 13,76 и 13,30% соответственно) в сравнении с контрольной группой.

Проведенные исследования определили эффективный способ введения и дозировку БОД. Максимальное увеличение числа клеток отвечающих за клеточных иммунитет наблюдалось в группах мышей, препарат которым вводился внутримышечно в дозировке 0,1 и 0,2 мл. Применение дозировки препарата 0,2 мл не целесообразно, так как это ведет к перерасходу препарата при таких же показателях, как и при дозе 0,1 мл. При дозе менее 0,1 мл отсутствуют заметные эффекты от его применения.

Пример 2. Определение длительности применения препарата БОД лабораторным мышам.

Для определения длительности применения препарата БОД в дозе 0,1 мл (5 мл/кг) у лабораторных мышей на 7, 9 и 11 сутки опыта брали пробы крови для изучения морфологического состава. Результаты влияния длительности применения исследуемого препарата на морфологический состав клеток крови отвечающих за клеточный иммунитет представлены в таблице 3.

Максимальное увеличение числа клеток ответственных за клеточный иммунитет отмечалось в группе с внутримышечным введением препарата на 9 и 11 день введения. Число моноцитов увеличилось на 58,33 и 44,0% соответственно, а число гранулоцитов увеличилось на 31,19 и 32,26% соответственно по сравнению с контрольной группой.

Также увеличение числа фагоцитирующих клеток отмечено в группе с подкожным введением препарата на 9, 11 день введения: количество моноцитов увеличилось на 41,67 и 40,0%, а количество гранулоцитов - на 4,59 и 3,2% соответственно по сравнению с контрольной группой, что значительно меньше, чем в группах с внутримышечным введением.

В группе с оральным введением препарата установлено уменьшение числа моноцитовво (на 21,74, 16,67 и 8% соответственно) и уменьшение числа гранулоцитов (на 16,2, 13,76 и 13,82%) соответственно) в сравнении с контрольной группой.

Проведенные исследования определили длительность применения препарата БОД лабораторным мышам. Максимальное увеличение числа клеток отвечающих за клеточных иммунитет наблюдалось в группах мышей, препарат которым вводился внутримышечно 9 и 11 дней. Применение препарата 11 дней не целесообразно, так как это ведет к перерасходу препарата при таких же показателях, как и при 9 днях введения. Семь дней не достаточно для заметных эффектов от применения исследуемого препарата.

Пример 3. Влияние препарата БОД на гуморальный иммунитет.

Для определения влияние препарата БОД на гуморальный иммунитет определяли бактерицидную (БАСК) и лизоцимную (ЛАСК) активность сыворотки крови по стандартным методикам с использованием суточных культур E.coli и микроорганизмов рода Micrococcus, путем фиксирования разницы оптической плотности питательных сред с внесенной в них исследуемой сыворотки. Результаты изучения иммунологических и биохимических показателей крови представлены в таблице 4.

Установлено, что применение БОД лабораторным мышам, независимо от способа введения, не оказывает стимулирующего действия на показатели БАСК и ЛАСК. Количество общего белка, альбуминов и глобулинов в сыворотке крови животных контрольных групп, также существенно не изменяется.

По результатам исследования биохимических и иммунологических показателей сывороток крови в опытных группах в сравнении с контрольной группой можно сделать вывод, что применение БАД не оказывает влияние на гуморальный иммунитет.

Пример 4 Изучение влияния препарата БОД на активность иммунного фагоцитоза у лабораторных мышей.

Опыт проводился на 30 белых беспородных мышах, разделенных по принципу аналогов на три группы: две опытные и одну контрольную (в каждой группе по 10 мышей). Животным опытных групп препарат БОД вводился по следующей схеме:

1 группа - внутримышечное введение в дозе 0,1 мл один раз в два дня в течение 9 суток;

2 группа - внутримышечное введение препарата в дозе 0,1 мл один раз в сутки в 1 и 6 день введения.

Для оценки активности опсонизации проводили опсонофагоцитарную реакцию (ОФР) по стандартной методике. Результаты представлены в таблице 5.

Максимальные показатели фагоцитарной активности, фагоцитарного индекса и фагоцитарного числа были отмечены в группе мышей, препарат которым вводили на протяжении 10 суток с интервалом 48 часов. При этом фагоцитарная активность больше в 1,2 раза, фагоцитарный индекс больше в 1,7 раза, а фагоцитарное число больше в два раза в сравнении с контрольной группой.

Выводы:

1. Учитывая специфику содержания животных в виварии, исключающую проведение профилактических вакцинаций применение данного препарата позволит повысить уровень клеточного звена иммунитета лабораторных мышей. Так же применение данного препарата обеспечит профилактику заболеваний бактериальной этиологии маточного поголовья и молодняка вивария, а так же животных используемых для проведения исследований.

2. Данный препарат обеспечит научную базу для проведения дальнейших исследований на сельскохозяйственных животных.

Способ повышения клеточного иммунитета лабораторных мышей, включающий применение биологически активного препарата, отличающийся тем, что в качестве препарата используют биотинилированное производное окисленного декстрана, представляющее собой конъюгат, полученный реакцией гидрозида биотина и окисленного декстрана с молекулярной массой 40-70 кДа с образованием азометиновой связи, при внутримышечном введении в дозе 5 мл/кг живого веса мыши.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области биохимии, в частности к моноклональному антителу или фрагменту антитела, содержащему его антигенсвязывающий участок, которое связывается с белком фосфолипазы D4 (PLD4), а также его применению для лечения или профилактики заболевания, вызванного активированными В-клетками, для супрессии активированных В-клеток, а также для лечения заболевания, вызванного активированными В-клетками.

Настоящее изобретение относится к иммунологии. Предложены варианты человеческого нейтрализующего моноклонального антитела против IL-33, а также молекула кодирующей нуклеиновой кислоты, вектор, клетка-хозяин и способ получения упомянутых вариантов антитела.

Изобретение относится к медицине и предназначено для комплексного лечения язвенного колита. Используют ректальные суппозитории, содержащие раствор витамина Д3 водный - 1500 ME; полиэтиленгликоль 1500 - 0,3 г; полиэтиленгликоль 6000 - 0,5 г; эмульгатор Т-2 - 0,1 г; кремофор RH-40 - 1,15 г; лутрол F-127 - 0,55 г.

Настоящее изобретение относится к кристаллической соли нинтеданиба диэтансульфоната А-типа, представленной формулой (II), а также относится к кристаллической композиции и фармацевтической композиции, содержащей кристалл, и к способу их получения и применения.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к средству с иммуноукрепляющим, фунгицидным, антимикробным и вирулицидным действием для обработки среды обитания птицы.

Заявлены соединения Формулы I или их фармацевтически приемлемые соли, их содержащая фармацевтическая композиция, способы лечения и применение этих соединений для получения лекарственного средства для лечения заболеваний, опосредованных фактором D комплемента.

Изобретение относится к области фармацевтической химии, а именно к применению соединения формулы (I), где А является ОН-группой или ОСН3-группой; R является атомом водорода, СН3-группой или циклопропилметильной группой; X представляет атом кислорода, Y представляет атом кислорода или СН2-группу, Z является атомом водорода или ОН-группой.

Изобретение относится к антагонисту рецептора EP4, представляющему собой трициклическое спиро-соединение, представленное общей формулой (I), или его фармацевтически приемлемую соль, а также к фармацевтической композиции, содержащей такое соединение в качестве активного ингредиента, то есть имеющего антагонистическую активность против рецептора EP4, для профилактики и/или лечения заболеваний, вызванных активацией рецептора EP4.

Изобретение относится к соединениям формулы (I) и к их фармацевтически приемлемым солям и к применению таких соединений в качестве лекарственных средств. Технический результат: получены новые соединения, пригодные в качестве модуляторов CXCR3 рецептора.

Изобретение относится к биотехнологии. Описан полипептид для нацеливания на выделяющийся фосфатидилсерин (PtdS) клеточной мембраны, который включает: (а) домен гамма-карбоксиглутаминовой кислоты белка S, представленный в SEQ ID NO: 1, или последовательности, по меньшей мере на 95% гомологичной ей, который не содержит домен протеазы или гормон-связывающий домен; и (б) белок S EGF домена.

Изобретение относится к области медицины, а именно к онкологии, и может быть использовано для лечения опухолей глиального происхождения. Способ включает инъекцию препарата на основе гидроксида марганца(II), состоящего из глобул, имеющих в водном растворе бимодальное распределение по размерам с максимумами в районе 7-9 nm и 26-32 nm.
Изобретение относится к медицине, а именно к созданию препарата, ускоряющего заживление раневой поверхности. Технология получения данной присыпки заключается в следующем: в смеситель загружают поочередно ниже перечисленные ингредиенты (высушенные до остаточной влажности 2%, с размером частиц не более 0,5 мм): крахмал, пектин, глюкозамин, D-пантенол.

Изобретение относится к синтезу новых сульфопроизводных β-пинена, включая их гидраты, сольваты и соли, где R – радикал пинановой структуры R1 - SR; Cl; ОН;где звездочкой обозначена связь, через которую осуществляется присоединение сульфогруппы соединений формулы (I), являющихся ценными полупродуктами в органическом синтезе биологически активных веществ.

Изобретение относится к области ветеринарии, представляет собой способ профилактики расстройств пищеварения у новорожденных телят, включающий дачу новорожденным телятам микрокапсулированного полигексаметиленгуанидина гидрохлорида, начиная со вторых суток жизни два раза в день в течение 10 дней, в сочетании с санацией животноводческих помещений с помощью постоянного испарения скипидара и одномоментного испарения хлора и йода в процессе экзотермической реакции однохлористого йода с алюминием в виде проволоки с интервалом в 15 дней, отличающийся тем, что используют полигексаметиленгуанидина гидрохлорид, микрокапсулированный в пектине, который дают в утреннюю и вечернюю выпойку молозива-молока в дозе 2 мг на 10 кг массы.

Группа изобретений относится к фармацевтической промышленности, в частности к вариантам высушенных распылительной сушкой частиц для лечения или предотвращения респираторных инфекций и заболеваний, состоящих из (i) по меньшей мере 70 мас.% альгинатного олигомера и (ii) по меньшей мере 10 мас.% в сумме фосфолипида (в количестве не менее 0,5 мас.%), который является твердым при комнатной температуре, и антиадгезивного соединения (в количестве не менее 0,5 мас.%), представляющего собой гидрофобную аминокислоту, выбранную из лейцина, изолейцина, аланина, валина, фенилаланина, глицина, метионина, триптофана, пролина и их комбинаций; причем в одном из вариантов частицы дополнительно включают (iii) не более 10 мас.% вспомогательных веществ.

Группа изобретений относится к лечению заболеваний, вызванных аномальным клеточным ростом. Средство, индуцирующее гибель раковых клеток, содержит лекарственное средство, ингибирующее GST-π, и лекарственное средство, ингибирующее связанный с гомеостазом белок, выбранный из группы, состоящей из белка, регулирующего клеточный цикл, - ATM, CDC25A, p21, PRKDC, RBBP8, SKP2, MCM10, RNPC1, CCNL1, CENPH, BRSK1, MCM8, CCNB3, MCMDC1 и MYLK, белка, связанного с подавлением апоптоза, - AATF, ALOX12, ANXA1, ANXA4, API5, ATF5, AVEN, AZU1, BAG1, BCL2L1, BFAR, CFLAR, IL2, MALT1, MCL1, MKL1, MPO, MTL5, MYBL2 и MYO18A, и белка, связанного с сигнальным путем PI3K, - MTOR, IRAK1, IRS1, MYD88, NFKB1, PIK3CG, RAC1, AKT3, EIF4B, EIF4E, ILK, MTCP1, PIK3CA и SRF.
Изобретение относится к медицине, а именно к терапевтической стоматологии, и может быть использовано для лечения больных с рецидивирующими афтами полости рта. Для этого осуществляют обработку афт 0,06% раствором хлоргексидина.

Изобретение относится к области нанотехнологии, в частности к способам микрокапсуляции органических соединений. Способ микрокапсуляции нуклеината натрия заключается в том, что нуклеинат натрия микрокапсулируют в оболочку из альгината натрия путем осаждения из раствора в бутаноле в присутствии стабилизатора Е 472 с и при перемешивании при 1000 об/мин.
Изобретение относится к медицине, а именно к стоматологии, и может быть использовано при лечении воспалительных заболеваниях пульпы. Предлагаемый способ комплексной обработки системы корневого канала зуба при лечении воспалительных заболеваниях пульпы включает следующие этапы обработки корневого канала: раствором гипохлорита натрия с концентрацией 0,5-1,0% и объемом 1-15 мл; фотодинамической терапией с ультразвуковой активацией фотосенсибилизатора; дистиллированной водой; водным раствором хлоргексидина с концентрацией 0,12-1,0% и объемом 1-20 мл; при этом все этапы обработки проводят при активации ультразвуком с частотой 20-40 кГц и соблюдают временные промежутки не более 3 минут с учетом, что каждый этап обработки осуществляют от 3 до 10 минут.

Изобретение относится к фармацевтической и косметической промышленности и представляет собой смесь с улучшенной противомикробной активностью, содержащую по меньшей мере один лактатный эфир, выбранный из бутиллактата, амиллактата и бензиллактата, и п-анисовый альдегид, и/или 3-фенилпропанол, и/или п-анисовую кислоту.

Изобретение относится к области ветеринарии и представляет собой способ профилактики субклинического, клинического и хронического мастита у коров, заключающийся в однократном интрацистернальном применении коровам препарата Орбенин DC перед их запуском, отличающийся тем, что на вторые сутки после отела коров им дополнительно однократно внутримышечно вводят препарат Риботан в дозе 6 мл на 1 голову. Использование заявленного изобретения эффективно повышает результативность проводимой профилактики субклинического, клинического и хронического мастита у коров, повышает молочную продуктивность коров, снижает количество соматических клеток в молоке, повышает качество получаемого молока, сокращает сроки лечения коров с патологией молочной железы. 2 табл., 2 пр.

Изобретение относится к ветеринарной иммунологии, экспериментальной и клинической фармакологии, в частности к разработке способа повышения клеточного иммунитета организма, и может быть использовано в лабораторной работе по изучению клеточного иммунитета. Предложен способ повышения клеточного иммунитета лабораторных мышей. Способ включает применение биологически активного препарата, согласно изобретению в качестве препарата используют биотинилированное производное окисленного декстрана, представляющее собой конъюгат, полученный реакцией гидрозида биотина и окисленного декстрана с молекулярной массой 40-70 кДа с образованием азометиновой связи, при внутримышечном введении в дозе 5 млкг живого веса мыши. Предлагаемый способ позволяет изучить влияние БОД на стимуляцию клеточного иммунитета у лабораторных мышей. 5 табл.

Наверх