Моющее и чистящее средство, содержащее комбинацию амилазы и протеазы

Изобретение относится к области биотехнологии. Предложено моющее или чистящее средство, содержащее комбинацию протеазы и α-амилазы. Также изобретение относится к применению указанного средства для стирки или очистки текстильных изделий и для очистки твердых поверхностей. Изобретение обеспечивает улучшенную стабильность и эффективность протеазы в моющем или чистящем средстве, что приводит к повышению моющей способности указанного средства. 4 н. и 7 з.п. ф-лы, 1 пр.

 

Изобретение относится к моющему и чистящему средству, содержащему комбинацию ферментов из амилазы и протеазы, аминокислотные последовательности которых предпочтительно в отношении применения в моющих и чистящих средствах изменены, и любых достаточно похожих амилаз и протеаз с соответствующими изменениями. Настоящее изобретение относится также к способу и применению этих моющих и чистящих средств.

Протеазы относятся в целом к технически наиболее значимым ферментам. В случае моющих и чистящих средств они представляют собой ферменты, которые разработаны давно и содержатся практически во всех современных эффективных моющих и чистящих средствах. Они вызывают разложение загрязнений, содержащих белок, на очищаемых изделиях. Особенно важными в данном случае являются в свою очередь протеазы типа субтилизина (субтилазы, субтилопептидазы, EC 3.4.21.62), которые вследствие каталитически активных аминокислот представляют собой серин-протеазы. Они действуют в качестве неспецифических эндопептидаз и гидролизуют любые амидокислотные связи, которые находятся во внутренней части пептидов или белков. Оптимальное значение pH для них находится в большинстве случаев по существу в щелочной области. Обзор этих групп представлен, например, в статье "R. Siezen. Subtilases: Subtilisin-like Proteases, p. 75-95, "Subtilisin enzymes", издание "R. Bott and C. Betzel, New York, 1996". Субтилазы естественным образом продуцируются микроорганизмами. В связи с этим в качестве группы, наиболее значимой среди субтилаз, предпочтительно следует назвать субтилизины, продуцируемые и секретируемые некоторыми видами бацилл.

Примеры протеаз типа субтилизина, применяемых в моющих и чистящих средствах, предпочтительно представляют собой субтилизины BPN' и "Carlsberg", протеаза PB92, субтилизины 147 и 309, протеаза, происходящая из Bacillus lentus, предпочтительно из Bacillus lentus DSM 5483, субтилизин DY и термитаза, представляющая собой фермент, который в более узком смысле относится к субтилазам, а не к субтилизинам, протеиназа K и протеазы TW3 и TW7, а также варианты указанных протеаз, которые по сравнению с исходной протеазой содержат измененную аминокислотную последовательность. Протеазы целенаправленно или случайным образом изменяют способами, известными на предшествующем уровне техники, и, таким образом, оптимизируют, например, для применения в моющих и чистящих средствах. К этим способам относятся точечный мутагенез, мутагенез за счет делеций или инсерций или слияние с другими белками или частями белков. Так, например, для большинства протеаз, известных на предшествующем уровне техники, имеются варианты, оптимизированные соответствующим образом.

Другие ферменты, приемлемые для применения в моющих и чистящих средствах, представляют собой амилазы. В случае амилаз могут быть использованы синонимичные понятия, например 1,4-альфа-D-глюканглюканогидролаза или гликогеназа. Амилазы, предпочтительно приемлемые по настоящему изобретению, представляют собой α-амилазы. При этом решающее значение в отношении того, что фермент представляет собой α-амилазу в смысле настоящего изобретения, имеет его способность вызывать гидролиз α-(1-4)-гликозидных связей в амилозе крахмала.

Амилазы, известные на предшествующем уровне техники, а также, в частности, последующие варианты воплощения, улучшенные для применения в моющих или чистящих средствах, представлены в последующем описании. α-Амилаза, происходящая из Bacillus licheniformis (поставляемая как "Termamyl^®" компанией "Novozymes" или "Purastar^®ST" компанией "Danisco/Genencor"), и ее последующие варианты "Duramyl^®" и "Termamyl^®ultra" (компания "Novozymes"), "Purastar^®OxAm" (компания "Danisco/Genencor") и "Keistase^®" (компания "Daiwa Seiko Inc."), а также α-амилазы, происходящие из Bacillus amyloliquefaciens или Bacillus stearothermophilus, представляют собой приемлемые амилазы. α-Амилазу, происходящую из Bacillus amyloliquefaciens, реализует компания "Novozymes" под названием "BAN^®", а производные варианты α-амилазы, происходящей из Bacillus stearothermophilus, реализует под названиями "BSG^®" и "Novamyl^®" также компания "Novozymes". Другие известные амилазы представляют собой α-амилазу, происходящую из Bacillus sp. A 7-7 (DSM 12368), и циклодекстринглюканотрансферазу (CGT-аза), происходящую из Bacillus agaradherens (DSM 9948), а также поставляемые компанией "Novozymes" под торговым названием "Fungamyl^®" последующие варианты воплощения α-амилазы, происходящей из Aspergillus niger и A. oryzae. Другие коммерческие продукты, предпочтительно приемлемые для применения в моющих и чистящих средствах, представляют собой, например, "Amylase-LT^®" и "Stainzyme^®" или "Stainzyme ultra^®" или "Stainzyme plus^®", причем последние производятся также компанией "Novozymes". В моющих и чистящих средствах также могут быть использованы варианты этих ферментов, полученные точечными мутациями. Особенно предпочтительные амилазы описаны в международных заявках WO 00/60060, WO 03/002711, WO 03/054177 и WO 07/079938, описание которых в связи с этим специально рекомендовано или относящаяся к ним раскрытая сущность специально приведена в настоящей заявке.

Неожиданно было установлено, что α-амилаза по настоящему изобретению улучшает стабильность и функциональную способность протеазы в моющем и чистящем средстве.

Таким образом, объектом настоящего изобретения является моющее и чистящее средство, содержащее комбинацию α-амилазы и протеазы, причем α-амилаза отличается тем, что она по отношению к последовательности соответственно SEQ ID NO. 1 относительно ее общей длины идентична по меньшей мере на 89% и более предпочтительно по меньшей мере на 90, 90,5, 91, 91,5, 92, 92,5, 93, 93,5, 94, 94,5, 95, 95,5, 96, 96,5, 97, 97,5, 98, 98,5, 99, 99,5% и до 100%, а в перечне последовательности соответственно SEQ ID NO. 1 в одном или нескольких из положений 180, 181, 182, 183 и 184 имеет делецию.

Более предпочтительной является делеция в двух положениях, выбранных из положений 180+181, 181+182, 182+183 и 183+184, наиболее предпочтительными являются делеции в положениях 183+184 в перечне последовательности соответственно SEQ ID NO. 1 и особенно предпочтительными являются делеции H183*+G184*.

α-Амилаза по настоящему изобретению в перечне последовательности соответственно SEQ ID NO. 1 предпочтительно имеет также аминокислотную замену в одном или нескольких из положений 405, 421, 422 и 428. Особенно предпочтительными являются замены в положениях I405L, A421H, A422P и A428T.

В особенно предпочтительном варианте воплощения α-амилаза по настоящему изобретению в перечне последовательности соответственно SEQ ID NO. 1 имеет делеции H183*+G184* и дополнительно замены I405L, A421H, A422P и A428T.

Протеаза по настоящему изобретению содержит аминокислотную последовательность, которая по отношению к аминокислотной последовательности соответственно SEQ ID NO. 2 и/или SEQ ID NO. 3 относительно ее общей длины идентична по меньшей мере на 80% и более предпочтительно по меньшей мере на 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 90,5, 91, 91,5, 92, 92,5, 93, 93,5, 94, 94,5, 95, 95,5, 96, 96,5, 97, 97,5, 98, 98,5, 99% или на 100%.

Предпочтительной является протеаза, аминокислотная последовательность которой по отношению к аминокислотной последовательности соответственно SEQ ID NO. 2 относительно ее общей длины идентична по меньшей мере на 80% и более предпочтительно по меньшей мере на 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 90,5, 91, 91,5, 92, 92,5, 93, 93,5, 94, 94,5, 95, 95,5, 96, 96,5, 97, 97,5, 98, 98,5, 99%, а в положении 99 содержит остаток глутаминовой кислоты (E).

Особенно предпочтительной является протеаза согласно SEQ ID NO. 4.

Положения аминокислот, указанные в рамках настоящего изобретения с формулировкой "перечень последовательности соответственно SEQ ID NO. 1", понимают следующим образом: другие положения аминокислот определяются посредством выравнивания аминокислотной последовательности амилазы или протеазы по настоящему изобретению относительно аминокислотной последовательности, указанной в SEQ ID NO. 1. В дальнейшем сопоставление положений последовательности выверяется по зрелому (созревшему) белку. Это сопоставление положений следует применять, в частности, также тогда, когда в аминокислотную последовательность белка по настоящему изобретению входит большее число аминокислотных остатков по сравнению с амилазой или протеазой соответственно SEQ ID NO. 1. Исходя из указанных положений в аминокислотной последовательности, положения замен в амилазе или протеазе по настоящему изобретению представляют собой те положения, которые сопоставлены именно с этими положениями при выравнивании.

Комбинация α-амилазы и протеазы по настоящему изобретению в моющих и чистящих средствах способствует улучшенной очищающей способности моющего и чистящего средства в отношении по меньшей мере одного загрязнения, чувствительного к протеазе. α-Амилазы по настоящему изобретению оказывают действие, улучшающее эффективность, также и на протеазу, содержащуюся в моющем и чистящем средстве, и, следовательно, обеспечивают возможность, в частности, благодаря своему действию, стабилизирующему протеазу, улучшенное удаление по меньшей мере одного и предпочтительно нескольких загрязнений, чувствительных к протеазе, с текстильных изделий и/или с твердых поверхностей, например посуды. Особенно эффективную очищающую способность показывают предпочтительные варианты воплощения моющих и чистящих средств по настоящему изобретению в отношении загрязнений, содержащих кровь, например в случае загрязнения "кровь/молоко/чернила": продукт "CFT C-05", поставляемый компанией "CFT (Center For Testmaterials) B.V.", Влардинген, Нидерланды.

Благодаря предпочтительным вариантам осуществления настоящего изобретения получают моющие и чистящие средства с улучшенной очищающей способностью, направленной на загрязнения, чувствительные к протеазе.

Предпочтительные варианты воплощения комбинаций амилазы и протеазы по настоящему изобретению достигают такой эффективной очищающей способности уже при низких температурах, в частности при температуре в интервале от 10 до 60°C, предпочтительно от 15 до 50°C и более предпочтительно от 20 до 40°C. Другие предпочтительные варианты воплощения комбинаций амилазы и протеазы по настоящему изобретению достигают такой эффективной очищающей способности в широком температурном интервале, например от 15 до 90°C и предпочтительно от 20 до 60°C.

Под очищающей способностью в рамках настоящего изобретения понимают осветляющую способность в отношении одного или нескольких загрязнений, в частности, при стирке или мытье посуды. В рамках настоящего изобретения как моющее или чистящее средство, которое содержат комбинацию амилазы и протеазы, или моющий или чистящий раствор, образованный с этим средством, так и собственно протеаза и амилаза обладают соответствующей очищающей способностью. Таким образом, очищающая способность ферментов вносит свой вклад в очищающую способность средства или моющего или чистящего раствора, образованного средством. Очищающую способность предпочтительно определяют согласно дальнейшему описанию.

В случае настоящего изобретения главным образом выявляется очищающая способность протеазы, причем синергическое действие α-амилазы по настоящему изобретению косвенно показывается благодаря улучшенной очищающей способности протеазы в отношении загрязнений, содержащих протеазу.

Протеаза обладает протеолитической активностью, т.е. она способна вызывать гидролиз пептидных связей полипептида или белка, в частности, в моющем или чистящем средстве. Таким образом, протеаза представляет собой фермент, который катализирует гидролиз пептидных связей и вследствие этого в состоянии расщеплять пептиды или белки. В случае амилаз и протеаз по настоящему изобретению предпочтительно речь идет о зрелой (созревшей) амилазе/протеазе, т.е. о каталитически активном соединении без одного или нескольких сигнальных пептидов и/или пропептидов. Если не указано иное, указанные последовательности относятся также к соответствующим зрелым ферментам.

Определение идентичности последовательностей нуклеиновых кислот или аминокислотных последовательностей осуществляют посредством сравнения последовательностей. Это сравнение последовательностей базируется на разработанном и традиционно используемом на предшествующем уровне техники алгоритме BLAST (см., например, Altschul, S.F., Gish, W., Miller, W., Myers, E.W. & Lipman, D.J. (1990) "Basic local alignment search tool." J. Mol. Biol. 215:403-410, и Altschul, Stephan F., Thomas L. Madden, Alejandro A. Schaffer, Jinghui Zhang, Hheng Zhang, Webb Miller, and David J. Lipman (1997): "Gapped BLAST and PSI-BLAST: a new generation of protein database search programs"; Nucleic Acids Res., 25, p. 3389-3402) и принципиально реализуют так, чтобы похожие последовательности нуклеотидов или аминокислот в последовательностях нуклеиновых кислот или аминокислотных последовательностях сопоставлять друг с другом. Представленное в виде таблицы сопоставление соответствующих положений называют выравниванием. Другой алгоритм, применяемый на предшествующем уровне техники, представляет собой алгоритм FASTA. Сравнения последовательностей (выравнивания), в частности множественные сравнения последовательностей осуществляют, используя компьютерные программы. Например, часто используют программу серии "Clustal" (см., например, Chenna et al. (2003): Multiple sequence alignment with the Clustal series of programs. Nucleic Acid Research 31, 3497-3500), T-Coffee (см., например, Notredame et al. (2000): T-Coffee: A novel method for multiple sequence alignments. J. Mol. Biol. 302, 205-217) или программы, которые базируются на этих программах или алгоритмах. В предложенной заявке все сравнения последовательностей (выравнивания) осуществлены с компьютерной программой "Vector NTI^® Suite 10.3" (Invitrogen Corporation, 1600 Faraday Avenue, Carlsbad, Kalifornien, USA) с заданными стандартными параметрами, модуль которой "AlignX" для сравнения последовательностей основан на алгоритме "ClustalW".

Такое сравнение позволяет также сделать оценку идентичности сравненных последовательностей относительно друг друга. Она указывается, как правило, в процентах идентичности, т.е. в доле идентичных нуклеотидов или аминокислотных остатков в одних и тех же положениях или в положениях, соответствующих друг другу в выравнивании. Принятый далее термин "гомология" относится в случае аминокислотных последовательностей к консервативным заменам аминокислот, т.е. одной или нескольких аминокислот с аналогичной химической активностью, так как внутри белка они отвечают большей частью за похожую активность. В связи с этим идентичность сравненных последовательностей также может быть указана как процентная доля гомологичности или процентная доля идентичности. Данные по идентичности и/или гомологичности могут относиться к полипептидам или генам в целом или только к отдельным зонам. В связи с этим гомологичные или идентичные зоны различных последовательностей нуклеиновых кислот или аминокислотных последовательностей определяют по совпадениям в последовательностях. Такие области часто имеют идентичные функции. Они могут иметь малый размер и содержать только немногие нуклеотиды или аминокислоты. Часто такие малые зоны исполняют функции, являющиеся существенными для общей активности белка. В связи с этим может быть рациональным связывание совпадений последовательностей только с отдельными, по возможности малыми зонами. Если не указано иное, данные по идентичности или гомологичности, приведенные в настоящей заявке, относятся к общей длине соответствующей указанной последовательности нуклеиновой кислоты или аминокислотной последовательности.

Очищающую способность моющей системы определяют при условии, что моющее средство содержится с дозой от 3,5 до 6,5 г на литр моющего раствора, который содержит также протеазу и амилазу. Сравниваемые амилазы применяют с равной концентрацией (в расчете на активный белок). Очищающую способность протеазы в отношении загрязнения кровью определяют по измерению степени белизны выстиранных текстильных изделий. Стадию стирки осуществляют в течение 70 минут при температуре 40°C, причем вода имеет жесткость от 13,5 до 16,5° (немецкие градусы жесткости).

Концентрация протеазы в моющем средстве, предназначенном для этой моющей системы, составляет 0,001-0,1 масс.% и предпочтительно от 0,01 до 0,06 масс.% в расчете на активный белок. Концентрация амилазы в моющем средстве, предназначенном для этой моющей системы, составляет 0,001-0,15 масс.% и предпочтительно от 0,005 до 0,012 масс.% в расчете на активный белок.

Предпочтительное жидкое моющее средство для такой моющей системы имеет описанный далее состав (все данные указаны в массовых процентах): 0,3-0,5% ксантана, 0,2-0,4% противовспенивающего средства, 6-7% глицерина, 0,3-0,5% этанола, 4-7% FAEOS (сульфоэфир жирного спирта), 5-15% неионогенных поверхностно-активных веществ, 5-15% анионактивных поверхностно-активных веществ (LAS), 1% борной кислоты, 1-4% цитрата натрия (дигидрата), 2-4% карбоната натрия, 2-6% жирных кислот масла кокосовых орехов, 0,5-2,5% HEDP (1-гидроксиэтан-(1,1-дифосфоновая кислота)), 0-0,4% PVP (поливинилпирролидон), 0-0,15% оптического отбеливателя, 0-0,001% красителя, остаток: деминерализованная вода. Доза жидкого моющего средства предпочтительно составляет от 3,5 до 6,0 г на литр моющего раствора, например 4,7, 4,9 или 5,9 г на литр моющего раствора. Стирку предпочтительно осуществляют в интервале значений pH от 8 до 10,5 и предпочтительно от 8 до 9.

Предпочтительное порошкообразное моющее средство для такой моющей системы имеет описанный далее состав (все данные указаны в массовых процентах): 10% линейного алкилбензолсульфоната (натриевая соль), 1,5% сульфата жирного спирта C₁₂-C₁₈ (натриевая соль), 2,0% жирного спирта C₁₂-C₁₈ с 7 звеньями EO, 20% карбоната натрия, 6,5% гидрокарбоната натрия, 4,0% аморфного дисиликата натрия, 17% карбоната-пероксогидрата натрия, 4,0% TAED, 3,0% полиакрилата, 1,0% карбоксиметилцеллюлозы, 1,0% фосфоната, 27% сульфата натрия, остаток: ингибиторы пенообразования, оптический отбеливатель, отдушки. Доза порошкообразного моющего средства предпочтительно составляет от 4,5 до 7,0 г на литр моющего раствора, например и более предпочтительно 4,7 г на литр моющего раствора или 5,5, 5,9 или 6,7 г на литр моющего раствора. Стирку предпочтительно осуществляют в интервале значений pH от 9 до 11.

Степень белизны, т.е. осветление загрязнений, в качестве меры очищающей способности предпочтительно определяют оптическим способом измерения и предпочтительно фотометрически. Прибор, приемлемый для этой цели, представляет собой, например, спектрометр "Minolta CM508d". Обычно прибор, применяемый для измерения, сначала градуируют по стандарту белизны и предпочтительно по стандарту белизны, поставляемому вместе с прибором.

Концентрация белка может быть определена известным способом, например по реакции с BCA (бицинхониновая кислота; 2,2'-бихинолил-4,4'-дикарбоновая кислота) или по биуретовой реакции (A.G. Gornall, C.S. Bardawill and M.M. David, J. Biol. Chem., 177 (1948), p. 751-766). В связи с этим определение концентрации активного белка можно осуществлять титрованием активных центров с применением приемлемого необратимого ингибитора (например, фенилметилсульфонилфторида (PMSF) в случае протеаз) и определением остаточной активности (см. M. Bender et al., J. Am. Chem. Soc. 88, 24 (1966), p. 5890-5913).

Дополнительно к ранее поясненным аминокислотным изменениям амилазы и протеазы по настоящему изобретению могут иметь другие аминокислотные изменения и, в частности, аминокислотные замены, инсерции или делеции. Такие амилазы и протеазы усовершенствуют, например, целенаправленными генетическими изменениями, т.е. способами мутагенеза, и оптимизируют для заданных целей применения или в отношении специальных свойств (например, в отношении их каталитической активности, стабильности и т.д.). Кроме того, нуклеиновые кислоты по настоящему изобретению могут быть внесены в рекомбинационные смеси и, следовательно, могут быть использованы для получения амилаз и протеаз совершенно нового типа или иных полипептидов.

Цель состоит в том, чтобы в известных молекулах осуществить целенаправленные мутации, такие как замены, инсерции или делеции, для того, чтобы, например, улучшить очищающую способность ферментов по настоящему изобретению. Для этого, в частности, могут быть изменены поверхностные заряды и/или изоэлектрическая точка молекулы и благодаря этому изменено их взаимодействие с субстратом. Так, например, чистый заряд ферментов может быть изменен для того, чтобы таким образом влиять на связь с субстратом, в частности, в случае применения в моющих и чистящих средствах. Альтернативно или дополнительно благодаря одной или нескольким соответствующим мутациям может быть повышена стабильность амилазы или протеазы и благодаря этому может быть улучшена их очищающая способность. Предпочтительные свойства отдельных мутаций, например отдельных замен, могут дополняться. Поэтому амилаза или протеаза, уже оптимизированная касательно некоторых свойств, например касательно ее стабильности в отношении поверхностно-активных веществ и/или отбеливающих средств, и/или других компонентов, может быть дополнительно усовершенствована в рамках настоящего изобретения.

Для описания замен, которые точно касаются положения аминокислоты (замены аминокислоты), руководствуются следующим соглашением: сначала обозначают существующую природную аминокислоту в виде международного традиционного буквенного кода, затем обозначают соответствующее положение в последовательности и в заключение обозначают вставленную аминокислоту. Несколько замен в одной и той же полипептидной цепи отделяют друг от друга косыми чертами. В случае инсерций после положения в последовательности обозначают дополнительные аминокислоты. В случае делеций отсутствующую аминокислоту заменяют символом, например звездочкой или штрихом. Например, выражение A95G описывает замену аланина в положении 95 глицином, выражение A95AG означает инсерцию глицина после аланина в положении 95, а выражение A95* означает делецию аланина в положении 95. Эта номенклатура известна специалистам в области технологии ферментов.

Следующим объектом настоящего изобретения является моющее и чистящее средство, содержащее комбинацию α-амилазы и протеазы, причем α-амилаза отличается тем, что ее получают из амилазы по настоящему изобретению в качестве исходного соединения путем однократной или множественной консервативной аминокислотной замены. Выражение "консервативная аминокислотная замена" означает замену (обмен) одного аминокислотного остатка другим аминокислотным остатком, причем эта замена не ведет к изменению полярности или заряда по месту расположения замещенной аминокислоты, например замену неполярного аминокислотного остатка другим неполярным аминокислотным остатком. Консервативные аминокислотные замены в рамках настоящего изобретения представляют собой, например: G=A=S, I=V=L=M, D=E, N=Q, K=R, Y=F, S=T, G=A=I=V=L=M=Y=F=W=P=S=T.

Поэтому следующим объектом настоящего изобретения является моющее и чистящее средство, содержащее комбинацию α-амилазы и протеазы, причем α-амилаза отличается тем, что ее получают из амилазы по настоящему изобретению в качестве исходного соединения путем фрагментации, мутагенеза, осуществляемого за счет делеций, инсерций или замен, и она имеет аминокислотную последовательность, которая по длине по меньшей мере по 50, 60, 70, 80, 90, 100, 110, 120, 130, 140, 150, 160, 170, 180, 190, 200, 210, 220, 230, 240, 250, 260, 270, 280, 290, 300, 310, 320, 330, 340, 350, 360, 370, 380, 390, 400, 410, 420, 430, 440, 450, 460, 470, 475, 480, 482, 484 или 485 взаимосвязанным аминокислотам совпадает с исходной молекулой.

Так, например, можно делетировать по концам или в петлях фермента отдельные аминокислоты без утраты или уменьшения за счет этого протеолитической активности. Кроме того, благодаря такого рода фрагментации, мутагенезу, осуществляемому за счет делеций, инсерций или замен, можно, например, также снижать аллергенность соответствующих ферментов и, таким образом, в целом улучшать их приемлемость. Ферменты преимущественно даже после мутагенеза сохраняют свою протеолитическую активность, т.е. их протеолитическая активность соответствует по меньшей мере протеолитической активности исходного фермента. Замены также могут вызывать полезные эффекты. Аминокислоты, как по отдельности, так и в виде взаимосвязанного множества, могут быть заменены другими аминокислотами.

Амилаза по настоящему изобретению может быть стабилизирована дополнительно, в частности, за счет одной или нескольких мутаций, например замен, или за счет сочетания с полимером. Так, например, повышение стабильности при хранении и/или в течение использования, например во время стирки, ведет к тому, что ферментативная активность проявляется более длительно и, следовательно, улучшается очищающая способность. Принципиально приемлемыми являются любые возможности стабилизации, описанные на предшествующем уровне техники и/или полагаемые целесообразными. Предпочтительными являются варианты стабилизации, которая достигается собственно за счет мутаций фермента, так как варианты такой стабилизации на заключительном этапе получения фермента не требуют осуществления других технологических стадий. Изменения последовательностей, приемлемые для этой цели, известны на предшествующем уровне техники.

Другие возможности стабилизации представляют собой, например:

- изменение связи с ионами металлов, в частности мест связи с кальцием, например, за счет замен одной или нескольких аминокислот, участвующих в связи с кальцием, на одну или несколько отрицательно заряженных аминокислот и/или за счет введения изменений последовательности по меньшей мере в одной из последовательностей обеих аминокислот "аргинин/глицин";

- защита от влияния денатурирующих агентов, таких как поверхностно-активные вещества, за счет мутаций, которые вызывают изменение аминокислотной последовательности относительно или на поверхности белка;

- замена аминокислот, которые находятся вблизи N-концевого участка, такими аминокислотами, которые предположительно вступают в контакт с радикалом молекулы за счет нековалентого взаимодействия и тем самым вносят вклад в поддержание глобулярной структуры.

Предпочтительные варианты воплощения представляют собой варианты, в случае которых фермент стабилизируется несколькими способами, так чтобы многие стабилизирующие мутации действовали в порядке дополнения или синергически.

Другим объектом настоящего изобретения является амилаза согласно описанному ранее, отличающаяся тем, что она подвергнута по меньшей мере одной химической модификации. Амилазу с таким изменением обозначают как дериват, т.е. амилаза является дериватизованной.

Под дериватами в смысле настоящей заявки понимают белки, номинальная аминокислотная цепь которых была химически модифицирована. Такая дериватизация может быть осуществлена, например, in vivo за счет клетки-хозяина, которая экспрессирует белок. В связи с этим следует особенно отметить сочетания с низкомолекулярными соединениями, такими как липиды или олигосахариды. Дериватизация также может быть осуществлена in vitro, например, посредством химического превращения боковой цепи аминокислоты или благодаря ковалентному связыванию другого соединения с белком. Например, для изменения изоэлектрической точки можно связывать амины с карбоксильными группами фермента. Таким другим соединением может быть также другой белок, который, например, связывается с белком по настоящему изобретению за счет бифункциональных химических соединений. Под дериватизацией следует понимать также ковалентное связывание с макромолекулярным носителем, также как и нековалентое включение в соответствующие макромолекулярные клеточные структуры. Дериватизация может, например, влиять на специфичность к субстрату или на прочность связи с субстратом или вызывать временное блокирование ферментативной активности, когда присоединенное вещество представляет собой ингибитор. Это может быть, например, рациональным для периода хранения. Кроме того, модификации такого рода могут влиять на стабильность или ферментативную активность. Они могут также служить для того, чтобы снижать аллергенность и/или иммуногенность белка и, следовательно, снижать, например, чувствительность кожи к нему. Например, сочетания с макромолекулярными соединениями, например с полиэтиленгликолем, могут улучшить белок в отношении стабильности и/или чувствительности кожи.

Под дериватами белка по настоящему изобретению в самом широком смысле можно понимать также композиции этих белков. В зависимости от получения, переработки или состава белок может быть совмещен с различными другими веществами, например, происходящими из культур продуцирующих микроорганизмов. Белок также может быть, например, для повышения его стабильности при хранении целенаправленно смешан с другими веществами. Поэтому настоящее изобретению относится также к любым композициям белка по настоящему изобретению. Это положение действует независимо от того, проявляет ли он фактически или не проявляет в некоторых композициях эту ферментативную активность. Так, например, может требоваться, чтобы он при хранении не обладал активностью или обладал ею только в незначительной степени и развивал свою ферментативную функцию только в момент применения. Этим можно управлять, например, посредством соответствующих добавок.

К объекту настоящего изобретения относятся любые возможные виды моющих или чистящих средств, как концентраты, так и средства, применяемые в неразбавленном виде, для применения в коммерческом масштабе, в стиральных и моечных машинах или при стирке или очистке вручную. К ним относятся, например, моющие средства для текстильных изделий, ковров или природных волокон, в случае которых употребляют выражение "моющее средство". К ним также относятся, например, средства для мытья посуды в посудомоечных машинах или средства для мытья посуды вручную, или чистящие средства для твердых поверхностей, таких как металл, стекло, фарфор, керамика, кафель, камень, лакированные поверхности, пластмассы, древесина или кожа, в отношении которых употребляют выражение "чистящее средство", при этом наряду со средствами для применения вручную и в машинах для мытья посуды, например, к ним относятся также чистящие средства, стеклоочистители, ароматизированные чистящие средства для туалета и т.д. Кроме того, к моющим и чистящим средствам в рамках настоящего изобретения относят вспомогательные моющие средства, которые при ручной или машинной стирке текстильных изделий прибавляют к собственно моющему средству для достижения других эффектов. К моющим и чистящим средствам в рамках настоящего изобретения относят также средства для предварительной и дополнительной обработки текстильных изделий, например, такие средства, с которыми стираемое изделие приводят в контакт перед собственно стиркой, например для первичного растворения устойчивых загрязнений, а также относят такие средства, которые на стадии, следующей за собственно стиркой текстильных изделий, придают стираемым изделиям другие желательные свойства, такие как приятный гриф, несминаемость или незначительное накопление статического заряда. К указанным средствам относят в том числе авиважные средства.

Моющие или чистящие средства по настоящему изобретению могут содержать другие ферменты. В качестве других ферментов приемлемыми для применения являются, например, липазы или кутиназы, в частности, вследствие их активности по расщеплению триглицеридов, а также в виду того, что из соответствующих предшественников in situ получают перкислоты. К ним относятся, например, первично полученные из Humicola lanuginosa (Thermomyces lanuginosus) или усовершенствованные липазы, в частности липазы с заменой аминокислоты D96L. К ним относятся, например, первично полученные из Humicola lanuginosa (Thermomyces lanuginosus) или усовершенствованные липазы, предпочтительно липазы с одной или несколькими заменами аминокислот, исходя из указанной липазы в положениях D96L, T213R и/или N233R и более предпочтительно T213R и N233R. Приемлемыми для применения являются также, например, кутиназы, первично выделенные из Fusarium solani pisi и Humicola insolens. Приемлемыми для применения являются также липазы или кутиназы, исходные ферменты которых первично выделены из Pseudomonas mendocina и Fusarium solanii.

Средства по настоящему изобретению могут содержать также целлюлазы или гемицеллюлазы, такие как маннаназы, ксантанлиазы, пектинлиазы (= пектиназы), пектинэстеразы, пектатлиазы, ксилоглюканазы (= ксиланазы), пуллуланазы или сс-глюканазы.

Для усиления отбеливающего действия по настоящему изобретению могут быть использованы оксидоредуктазы, например оксидазы, оксигеназы, каталазы, пероксидазы, такие как гало-, хлор-, бром-, лигнин-, глюкозо- или марганецпероксидазы, диоксигеназы или лакказы (фенолоксидазы, полифенолоксидазы). Преимущественно дополнительно прибавляют предпочтительно органические и более предпочтительно ароматические соединения, взаимодействующие с ферментами, для того, чтобы усиливать активность соответствующих оксидоредуктаз, (энхансеры) или для того, чтобы в случае сильно различающихся редокс-потенциалов между окисляющими ферментами и загрязнениями обеспечивать электронный поток, (медиаторы).

В качестве других ферментов приемлемыми для применения являются также амилазы, причем приемлемыми являются все амилазы, описанные ранее.

Моющие или чистящие средства наряду с ингредиентами, описанными ранее, могут содержать вещества, обладающие очищающим действием, причем предпочтительными являются вещества из группы поверхностно-активных веществ, структурообразующих веществ, полимеров, ингибиторов разъедания стекла, ингибиторов коррозии, отдушек и ароматизаторов. Эти предпочтительные ингредиенты описаны далее более подробно.

Предпочтительный компонент моющих или чистящих средств по настоящему изобретению представляют собой неионогенные поверхностно-активные вещества, причем неионогенные поверхностно-активные вещества общей формулы R¹-CH(OH)CH₂O-(AO)_w-(A'O)_x-(A''O)_y-(A'''O)_z-R², где:

- R¹ представляет собой линейный или разветвленный, насыщенный или моно- или полиненасыщенный алкил или алкенил C_6-24;

- R² представляет собой линейный или разветвленный углеводородный радикал, содержащий от 2 до 26 атомов углерода;

- A, A', A'' и A''' независимо друг от друга представляют собой радикалы из группы -CH₂CH₂, -CH₂CH₂-CH₂, -CH₂-CH(CH₃), -CH₂-CH₂-CH₂-CH₂, -CH₂-CH(CH₃)_-CH_2-, -CH₂-CH(CH₂-CH₃);

- w, x, y и z имеют значения в интервале от 0,5 до 120, причем x, y и/или z также могут быть равны 0,

являются предпочтительными.

Благодаря прибавлению указанных ранее неионогенных поверхностно-активных веществ общей формулы R¹-CH(OH)CH₂O-(AO)_w-(A'O)_x-(A''O)_y-(A'''O)_z-R², обозначаемых в последующем описании также как "смешанный гидроксиэфир", может быть заметно улучшена очищающая способность композиции, содержащей фермент по настоящему изобретению, а именно как по сравнению с системами, которые не содержат поверхностно-активных веществ, так и по сравнению с системами, которые содержат альтернативные неионогенные поверхностно-активные вещества, например, из группы полиалкоксилированных жирных спиртов.

Благодаря применению этих неионогенных поверхностно-активных веществ, содержащих одну или несколько свободных гидроксигрупп на одном или на обоих концах алкильного радикала, стабильность ферментов, содержащихся в композициях моющих или чистящих средств по настоящему изобретению, может быть заметно улучшена.

Предпочтительными являются, в частности, содержащие закрытые концевые группы полиоксиалкилированные ниотензиды, которые согласно формуле R¹O[CH₂CH₂O]_xCH₂CH(OH)R² наряду с радикалом R¹, представляющим собой линейный или разветвленный, насыщенный или ненасыщенный, алифатический или ароматический углеводородный радикал, содержащий от 2 до 30 атомов углерода и предпочтительно от 4 до 22 атомов углерода, содержат также линейный или разветвленный, насыщенный или ненасыщенный, алифатический или ароматический углеводородный радикал R², содержащий от 1 до 30 атомов углерода, причем x имеет значение в интервале от 1 до 90, преимущественно от 30 до 80 и предпочтительно от 30 до 60.

Особенно предпочтительными являются поверхностно-активные вещества формулы R¹O[CH₂CH(CH₃)O]_x[CH₂CH₂O]_yCH₂CH(OH)R², где R¹ представляет собой линейный или разветвленный алифатический углеводородный радикал, содержащий от 4 до 18 атомов углерода, или совокупность таких радикалов, R² означает линейный или разветвленный углеводородный радикал, содержащий от 2 до 26 атомов углерода, или совокупность таких радикалов, при этом x имеет значения в интервале от 0,5 до 1,5, а y имеет значение, равное по меньшей мере 15.

К группе этих неионогенных поверхностно-активных веществ относится, например, (PO)₁-(EO)_15-40-2-гидроксиалкиловый эфир жирного спирта C_2-26, в частности (PO)₁-(EO)₂₂-2-гидроксидециловый эфир жирного спирта C_8-10.

Особенно предпочтительными являются также содержащие закрытые концевые группы полиоксиалкилированные ниотензиды формулы R¹O[CH₂CH₂O]_x[CH₂CH(R³)O]_yCH₂CH(OH)R², где R¹ и R² независимо друг от друга представляют собой линейные или разветвленные, насыщенные или моно- или полиненасыщенные углеводородные радикалы, содержащие от 2 до 26 атомов углерода, R³, независимо выбранный из -CH₃, -CH₂CH₃, -CH₂CH₂-CH₃, -CH(CH₃)₂, предпочтительно представляет собой -CH₃, а x и y независимо друг от друга имеют значения в интервале от 1 до 32, причем наиболее предпочтительными являются ниотензиды, в которых R³=-CH₃, значения x находятся в интервале от 15 до 32, а y имеет значение в интервале от 0,5 до 1,5.

Другие предпочтительно приемлемые для применения ниотензиды представляют собой содержащие закрытые концевые группы полиоксиалкилированные ниотензиды формулы R¹O[CH₂CH(R³)O]_x[CH₂]_kCH(OH)[CH₂]_jOR², где R¹ и R² представляют собой линейные или разветвленные, насыщенные или моно- или полиненасыщенные углеводородные радикалы, содержащие от 1 до 30 атомов углерода, R³ представляет собой атом H или метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, 2-бутил или 2-метил-2-бутил, x имеет значения в интервале от 1 до 30, а k и j имеют значения в интервале от 1 до 12 и преимущественно от 1 до 5. Когда значение x≥2, то все радикалы R³ в приведенной ранее формуле R¹O[CH₂CH(R³)O]_x[CH₂]_kCH(OH)[CH₂]_jOR² могут быть разными. R¹ и R² предпочтительно представляют собой линейные или разветвленные, насыщенные или ненасыщенные, алифатические или ароматические углеводородные радикалы, содержащие от 6 до 22 атомов углерода, причем радикалы, содержащие от 8 до 18 атомов C, являются особенно предпочтительными. В случае радикала R³ более предпочтительными являются атом H, -CH₃ или -CH₂CH₃. Особенно предпочтительные значения x находятся в интервале от 1 до 20 и предпочтительно от 6 до 15.

Согласно описанному ранее, все радикалы R³ в приведенной ранее формуле могут быть разными, если x≥2. В силу этого алкиленоксидное звено в квадратных скобках может варьировать. Если, например, х равно 3, то радикал R³ может быть выбран так, чтобы образовывать этиленоксидные (R³=H) или пропиленоксидные (R³=CH₃) звенья, которые могут быть соединены в любой последовательности, например: (EO)(PO)(EO), (EO)(EO)(PO), (EO)(EO)(EO), (PO)(EO)(PO), (PO)(PO)(EO) и (PO)(PO)(PO). При этом число 3 для x выбрано в качестве примера и вполне может иметь большее значение, причем размах значений возрастает с ростом значений x, например, большое число звеньев (EO) комбинируется с малым числом звеньев (PO) или наоборот.

В случае особенно предпочтительных содержащих закрытые концевые группы полиоксиалкилированных спиртов приведенной ранее формулы k=1, а j=1, так что указанная ранее формула упрощается до формулы R¹O[CH₂CH(R³)O]_xCH₂CH(OH)CH₂OR². В последней формуле R¹, R² и R³ имеют определенные ранее значения, а x означает число от 1 до 30, преимущественно от 1 до 20 и предпочтительно от 6 до 18. Особенно предпочтительными являются поверхностно-активные вещества, в случае которых радикалы R¹ и R² содержат от 9 до 14 атомов C, R³ представляет собой атом H, а x принимает значения от 6 до 15.

В качестве особенно эффективных веществ в заключение следует отметить неионогенные поверхностно-активные вещества общей формулы R¹-CH(OH)CH₂O-(AO)_w-R², где:

- R¹ представляет собой линейный или разветвленный, насыщенный или моно- или полиненасыщенный алкил или алкенил C_6-24;

- R² представляет собой линейный или разветвленный углеводородный радикал, содержащий от 2 до 26 атомов углерода;

- A представляет собой радикал из группы CH₂CH₂, -CH₂CH₂-CH₂, -CH₂-CH(CH₃);

- w означает число от 1 до 120, преимущественно от 10 до 80 и предпочтительно от 20 до 40;

К группе этих неионогенных поверхностно-активных веществ относится, например, (EO)_10-80-2-гидроксиалкиловый эфир жирного спирта C_4-22, в частности (EO)₂₂-2-гидроксидециловый эфир жирного спирта C_8-12 и (EO)_40-80-2-гидроксиалкиловый эфир жирного спирта C_4-22.

Предпочтительные моющие или чистящие средства отличаются тем, что моющее или чистящее средство содержит по меньшей мере одно неионогенное поверхностно-активное вещество, предпочтительно неионогенное поверхностно-активное вещество из группы смешанных гидроксиэфиров, причем массовая доля неионогенного поверхностно-активного вещества в общей массе моющего или чистящего средства предпочтительно составляет от 0,2 до 10 масс.%, преимущественно от 0,4 до 7,0 масс.% и предпочтительно от 0,6 до 6,0 масс.%.

Предпочтительные моющие или чистящие средства по настоящему изобретению для применения в способах машинного мытья посуды наряду с описанными ранее неионогенными поверхностно-активными веществами содержат другие поверхностно-активные вещества и предпочтительно амфотерные поверхностно-активные вещества. При этом доля анионактивных поверхностно-активных веществ в общей массе этих моющих или чистящих средств предпочтительно является ограниченной. Так, предпочтительные средства для машинного мытья посуды отличаются тем, что они в расчете на их общую массу содержат меньше 5,0 масс.%, предпочтительно меньше 3,0 масс.% и более предпочтительно меньше 2,0 масс.% анионактивного поверхностно-активного вещества. При этом от применения анионактивных поверхностно-активных веществ в более значительных количествах предпочтительно отказываются для предотвращения чрезмерного пенообразования.

Другой предпочтительный компонент моющих или чистящих средств по настоящему изобретению представляют собой комплексообразователи. Особенно предпочтительными комплексообразователями являются фосфонаты. Комплексообразующие фосфонаты наряду с 1-гидроксиэтан-1,1-дифосфоновой кислотой представляют собой ряд разных соединений, таких как, например, диэтилентриаминпентаметиленфосфоновая кислота (DTPMP). В этой заявке предпочтительно представлены, в частности, гидроксиалкан- или аминоалканфосфонаты. Среди гидроксиалканфосфонатов 1-гидроксиэтан-1,1-дифосфонат (HEDP) имеет особое значение в качестве вспомогательного структурообразователя. Его предпочтительно применяют в виде натриевой соли, причем динатриевая соль дает нейтральную реакцию, а тетранатриевая соль дает щелочную реакцию (pH=9). В качестве аминоалканфосфонатов предпочтительно приемлемыми являются этилендиаминтетраметиленфосфонат (EDTMP), диэтилентриаминпентаметиленфосфонат (DTPMP), а также их более высокие гомологи. Их предпочтительно применяют в виде натриевых солей с нейтральной реакцией, например в виде гексанатриевой соли EDTMP или в виде гепта- и октанатриевой соли DTPMP. При этом в качестве структурообразователя из класса фосфонатов предпочтительно применяют HEDP. Кроме того, аминоалканфосфонаты обладают четко выраженной способностью связывать тяжелые металлы. В соответствии с этим, в частности, когда средства содержат также отбеливатели, предпочтительным может быть применение аминоалканфосфонатов, предпочтительно DTPMP, или смесей указанных фосфонатов.

В рамках настоящей заявки предпочтительное моющее или чистящее средство содержит один или несколько фосфонатов из группы, в которую входят:

a) аминотриметиленфосфоновая кислота (ATMP) и/или ее соли;

b) этилендиаминтетраметиленфосфоновая кислота (EDTMP) и/или ее соли;

c) диэтилентриаминпентаметиленфосфоновая кислота (DTPMP) и/или ее соли;

d) 1-гидроксиэтан-1,1-дифосфоновая кислота (HEDP) и/или ее соли;

e) 2-фосфонобутан-1,2,4-трикарбоновая кислота (PBTC) и/или ее соли;

f) гексаметилендиаминтетраметиленфосфоновая кислота (HDTMP) и/или ее соли;

g) нитрилотриметиленфосфоновая кислота (NTMP) и/или ее соли.

Особенно предпочтительными являются моющие или чистящие средства, которые в качестве фосфонатов содержат 1-гидроксиэтан-1,1-дифосфоновую кислоту (HEDP) или диэтилентриаминпентаметиленфосфоновую кислоту (DTPMP). Разумеется, моющие или чистящие средства по настоящему изобретению могут содержать два разных фосфоната или более. Предпочтительные моющие или чистящие средства отличаются тем, что моющее или чистящее средство содержит по меньшей мере один комплексообразователь из группы фосфонатов, предпочтительно 1-гидроксиэтан-1,1-дифосфонат, причем массовая доля фосфоната в общей массе моющего или чистящего средства предпочтительно составляет от 0,1 до 8,0 масс.%, преимущественно 0,2 до 5,0 масс.% и предпочтительно от 0,5 до 3,0 масс.%.

Моющие или чистящие средства по настоящему изобретению могут содержать также структурообразующее вещество. При этом к структурообразующим веществам предпочтительно относятся силикаты, карбонаты, органические вспомогательные структурообразователи и - в случае отсутствия экологических противопоказаний для их применения - также фосфаты.

Органические вспомогательные структурообразующие вещества при необходимости могут содержаться в количестве до 40 масс.%, предпочтительно до 25 масс.% и преимущественно от 1 до 8 масс.%.

Среди большого числа коммерчески доступных фосфатов фосфаты щелочных металлов и в порядке особого предпочтения пентанатрийтрифосфат, Na₅P₃O₁₀ (триполифосфат натрия), или пентакалийтрифосфат, K₅P₃O₁₀ (триполифосфат калия), имеют наибольшее значение для средств по настоящему изобретению. Если в рамках настоящей заявки в моющем или чистящем средстве применяют фосфаты в качестве веществ, обладающих очищающим действием, то предпочтительные средства содержат один или несколько этих фосфатов, предпочтительно пентакалийтрифосфат, причем массовая доля фосфата в общей массе моющего или чистящего средства предпочтительно составляет от 5,0 до 40 масс.%, преимущественно от 10 от 30 масс.% и предпочтительно от 12 до 25 масс.%.

В качестве органических вспомогательных структурообразователей предпочтительно следует назвать поликарбоксилаты/поликарбоновые кислоты, полимерные поликарбоксилаты, аспарагиновую кислоту, полиацетали, декстрины, другие органические вспомогательные структурообразователи, а также фосфонаты. Классы этих веществ описаны далее.

Приемлемые органические структурообразующие вещества представляют собой, например, приемлемые для применения поликарбоновые кислоты в виде свободных кислот и/или их натриевых солей, причем под поликарбоновыми кислотами понимают карбоновые кислоты, которые содержат больше одной кислотной функциональной группы. Их примеры представляют собой лимонная, адипиновая, янтарная, глутаровая, яблочная, винная, малеиновая, фумаровая кислоты, сахарные кислоты, аминокислоты, нитрилотриуксусная кислота (NTA), а также их смеси, если применение такого типа не вызывает возражений по экологическим основаниям. Свободные кислоты наряду со своим структурообразующим действием обладают, как правило, также свойством подкисляющего компонента и служат, таким образом, также для установки более низких и мягких значений pH моющих или чистящих средств. При этом в качестве предпочтительных следует назвать лимонную, янтарную, глутаровую, адипиновую, глюконовую кислоты и любые их смеси. С особенным преимуществом в качестве структурообразующего вещества применяют лимонную кислоту или соли лимонной кислоты. Другие особенно предпочтительные структурообразующие вещества выбирают из метилглициндиуксусной кислоты (MGDA), диацетата глутаминовой кислоты (GLDA), диацетата аспарагиновой кислоты (ASDA), гидроксиэтилиминодиацетата (HEIDA), иминодисукцината (IDS) и этилендиаминдисукцината (EDDS), карбоксиметилинулина и полиаспартата.

В качестве структурообразующих веществ приемлемыми являются также полимерные поликарбоксилаты, которые представляют собой, например, соли щелочных металлов полиакриловой или полиметакриловой кислоты, например, с относительный молекулярной массой от 500 до 70 000 г/моль.

В случае молекулярных масс, указанных для полимерных поликарбоксилатов, в настоящем описании речь идет о среднемассовых молекулярных массах M_w соответствующих кислотных форм, принципиально определенных способом гельпроникающей хроматографии (ГПХ) с применением УФ-детектора. При этом измерение осуществляли по сравнению с внешним стандартом полиакриловой кислоты, который на основании своего структурного сродства с исследуемыми полимерами дает реалистические значения молекулярной массы. Эти данные заметно отличаются от данных по молекулярной массе, в случае которых в качестве стандарта используют полистиролсульфоновые кислоты. Значения молекулярных масс, измеренные по сравнению с полистиролсульфоновыми кислотами, как правило, заметно больше значений молекулярных масс, указанных в настоящем описании.

Приемлемые полимеры предпочтительно представляют собой полиакрилаты, имеющие молекулярную массу предпочтительно от 2 000 до 20 000 г/моль. Вследствие своей превосходной растворимости предпочтительными из этой группы в свою очередь могут быть полиакрилаты с короткой цепью, имеющие молекулярную массу от 2 000 до 10 000 г/моль и предпочтительно от 3 000 до 5 000 г/моль.

Приемлемыми являются также сополимерные поликарбоксилаты, предпочтительно такие, как сополимеры акриловой кислоты с метакриловой кислотой и акриловой или метакриловой кислоты с малеиновой кислотой. В качестве предпочтительно приемлемых оказались сополимеры акриловой кислоты с малеиновой кислотой, которые содержат от 50 до 90 масс.% акриловой кислоты и от 50 до 10 масс.% малеиновой кислоты. Их относительная молекулярная масса в расчете на свободные кислоты в общем случае составляет от 2 000 до 70 000 г/моль, преимущественно от 20 000 до 50 000 г/моль и предпочтительно от 30 000 до 40 000 г/моль.

Оксидисукцинаты и другие производные дисукцинатов, предпочтительно этилендиаминдисукцинат, также представляют собой другие приемлемые вспомогательные структурообразователи. При этом этилендиамин-N,N'-дисукцинат (EDDS) предпочтительно применяют в виде его натриевой или магниевой соли. В этой связи также предпочтительными являются глицериндисукцинат и глицеринтрисукцинат.

Для улучшения очищающей способности и/или для регулирования вязкости предпочтительные моющие или чистящие средства содержат по меньшей мере один гидрофобно модифицированный полимер, предпочтительно гидрофобно модифицированный полимер, содержащий карбоксигруппы, причем массовая доля гидрофобно модифицированного полимера в общей массе моющего или чистящего средства предпочтительно составляет от 0,1 до 10 масс.%, преимущественно от 0,2 до 8,0 масс.% и предпочтительно от 0,4 до 6,0 масс.%.

В дополнение к описанные ранее структурообразующим веществам в моющем или чистящем средстве могут содержаться полимеры, обладающие очищающим действием. Массовая доля полимеров, обладающих очищающим действием, в общей массе моющих или чистящих средств по настоящему изобретению для применения в машинах предпочтительно составляет от 0,1 до 20 масс.%, преимущественно от 1,0 до 15 масс.% и предпочтительно от 2,0 до 12 масс.%.

В качестве полимеров, обладающих очищающим действием, предпочтительно применяют полимеры, содержащие сульфокислотные группы, предпочтительно из группы сополимерных полисульфонатов. Эти сополимерные полисульфонаты содержат наряду с одним или несколькими мономерами, содержащими сульфокислотные группы, по меньшей мере один мономер из группы ненасыщенных карбоновых кислот.

В качестве одной или нескольких ненасыщенных карбоновых кислот с особенным преимуществом применяют ненасыщенные карбоновые кислоты формулы R¹(R²)C=C(R³)COOH, где радикалы от R¹ до R³ независимо друг от друга представляют собой -H, -CH₃, линейные или разветвленные насыщенные алкилы, содержащие от 2 до 12 атомов углерода, линейные или разветвленные, моно- или полиненасыщенные алкенилы, содержащие от 2 до 12 атомов углерода, алкилы или алкенилы, содержащие заместители -NH₂, -OH или -COOH, согласно определенному ранее или представляют собой -COOH или -COOR⁴, причем R⁴ означает насыщенный или ненасыщенный, линейный или разветвленный углеводородный радикал, содержащий от 1 до 12 атомов углерода.

Особенно предпочтительными ненасыщенными карбоновыми кислотами являются акриловая, метакриловая, этакриловая, α-хлоракриловая, α-цианоакриловая, кротоновая, α-фенилакриловая, малеиновая кислоты, малеиновый ангидрид, фумаровая, итаконовая, цитраконовая, метиленмалоновая, сорбиновая, коричная кислоты или их смеси. Разумеется, приемлемыми для применения являются также ненасыщенные дикарбоновые кислоты.

В случае мономеров, содержащих сульфокислотные группы, предпочтительными являются мономеры формулы R⁵(R⁶)C=C(R⁷)-X-SO₃H, где радикалы от R⁵ до R⁷ независимо друг от друга представляют собой -H, -CH₃, линейные или разветвленные насыщенные алкилы, содержащие от 2 до 12 атомов углерода, линейные или разветвленные, моно- или полиненасыщенные алкенилы, содержащие от 2 до 12 атомов углерода, алкилы или алкенилы, содержащие заместители -NH₂, -OH или -COOH, или представляют собой -COOH или -COOR⁴, причем R⁴ означает насыщенный или ненасыщенный, линейный или разветвленный углеводородный радикал, содержащий от 1 до 12 атомов углерода, а X означает имеющуюся в случае необходимости промежуточную группу, выбранную из -(CH₂)_n-, где n=0-4, -COO-(CH₂)_k-, где k=1-6, -C(O)-NH-C(CH₃)₂-, -C(O)-NH-C(CH₃)₂-CH₂- и -C(O)-NH-CH(CH₂CH₃)-.

Среди этих мономеров предпочтительными являются мономеры формул H₂C=CH-X-SO₃H, H₂C=C(CH₃)-X-SO₃H и HO₃S-X-(R⁶)C=C(R⁷)-X-SO₃H, в которых R⁶ и R⁷ независимо друг от друга выбраны из -H, -CH₃, -CH₂CH₃, -CH₂CH₂CH₃, -CH(CH₃)₂, а X означает имеющуюся в случае необходимости промежуточную группу, выбранную из -(CH₂)_n-, где n=0-4, -COO-(CH₂)_k-, где k=1-6, -C(O)-NH-C(CH₃)₂-, -C(O)-NH-C(CH₃)₂-CH₂- и -C(O)-NH-CH(CH₂CH₃)-.

При этом особенно предпочтительными мономерами, содержащими сульфокислотные группы, являются 1-акриламидо-1-пропансульфоновая, 2-акриламидо-2-пропансульфоновая, 2-акриламидо-2-метил-1-пропансульфоновая, 2-метакриламидо-2-метил-1-пропансульфоновая, 3-метакриламидо-2-гидроксипропансульфоновая, аллилсульфоновая, металлилсульфоновая, аллилоксибензолсульфоновая, металлилоксибензолсульфоновая, 2-гидрокси-3-(2-пропенилокси)пропансульфоновая кислоты, 2-метил-2-пропилен-1-сульфокислота, стиролсульфоновая кислота, винилсульфоновая кислота, 3-сульфопропилакрилат, 3-сульфопропилметакрилат, сульфометакриламид, сульфометилметакриламид, а также смеси указанных кислот или их водорастворимых солей.

Сульфокислотные группы могут находиться в полимерах полностью или частично в нейтрализованной форме. Применение сополимеров, содержащих частично или полностью нейтрализованные сульфокислотные группы, является предпочтительным по настоящему изобретению.

Молекулярная масса сульфосополимеров, предпочтительно применяемых по настоящему изобретению, может изменяться для того, чтобы адаптировать свойства полимеров к требуемой цели применения. Предпочтительные средства для машинного мытья посуды отличаются тем, что молекулярные массы сополимеров составляют от 2 000 до 200 000 г⋅мол^-1, преимущественно от 4 000 до 25 000 г⋅мол^-1 и предпочтительно от 5 000 до 15 000 г⋅мол^-1.

В следующем предпочтительном варианте осуществления сополимеры наряду с мономером, содержащим карбоксильные группы, и мономером, содержащим сульфокислотные группы, содержат также по меньшей мере один неионогенный, предпочтительно гидрофобный мономер. Благодаря применению этих гидрофобно модифицированных полимеров может быть улучшена, в частности, смываемость средств по настоящему изобретению для машинного мытья посуды.

Моющие или чистящие средства, содержащие сополимер, содержащий:

i) один или несколько мономеров, содержащих карбоксигруппы;

ii) один или несколько мономеров, содержащих сульфокислотные группы;

iii) один или несколько неионогенных мономеров;

являются предпочтительными по настоящему изобретению. Благодаря применению этих терполимеров смываемость средств по настоящему изобретению для машинного мытья посуды может быть улучшена относительно сравнимых средств для мытья посуды, которые содержат сульфополимеры без прибавления неионогенных мономеров.

В качестве неионогенных мономеров предпочтительно применяют мономеры общей формулы R¹(R²)C=C(R³)-X-R⁴, где радикалы от R¹ до R³ независимо друг от друга представляют собой -H, -CH₃ или -C₂H₅, X означает имеющуюся в случае необходимости промежуточную группу, выбранную из -CH₂-, -C(O)O- и -C(O)-NH-, а R⁴ представляет собой линейный или разветвленный насыщенный алкил, содержащий от 2 до 22 атомов углерода, или ненасыщенный, предпочтительно ароматический радикал, содержащий от 6 до 22 атомов углерода.

Особенно предпочтительными неионогенными мономерами являются бутен, изобутен, пентен, 3-метилбутен, 2-метилбутен, циклопентен, гексен, гексен-1, 2-метилпентен-1, 3-метилпентен-1, циклогексен, метилциклопентен, циклогептен, метилциклогексен, 2,4,4-триметилпентен-1, 2,4,4-триметилпентен-2, 2,3-диметилгексен-1, 2,4-диметилгексен-1, 2,5-диметилгексен-1, 3,5-диметилгексен-1, 4,4-диметилгексан-1, этилциклогексин, 1-октен, α-олефины, содержащие 10 или больше атомов углерода, такие как, например, 1-децен, 1-додецен, 1-гексадецен, 1-октадецен и C₂₂-α-олефин, 2-стирол, α-метилстирол, 3-метилстирол, 4-пропилстирол, 4-циклогексилстирол, 4-додецилстирол, 2-этил-4-бензилстирол, 1-винилнафталин, 2-винилнафталин, метиловый эфир акриловой кислоты, этиловый эфир акриловой кислоты, пропиловый эфир акриловой кислоты, бутиловый эфир акриловой кислоты, пентиловый эфир акриловой кислоты, гексиловый эфир акриловой кислоты, метиловый эфир метакриловой кислоты, N-(метил)акриламид, 2-этилгексиловый эфир акриловой кислоты, 2-этилгексиловый эфир метакриловой кислоты, N-(2-этилгексил)акриламид, октиловый эфир акриловой кислоты, октиловый эфир метакриловой кислоты, N-(октил)акриламид, лауриловый эфир акриловой кислоты, лауриловый эфир метакриловой кислоты, N-(лаурил)акриламид, стеариловый эфир акриловой кислоты, стеариловый эфир метакриловой кислоты, N-(стеарил)акриламид, бегениловый эфир акриловой кислоты, бегениловый эфир метакриловой кислоты и N-(бегенил)акриламид или их смеси.

Массовая доля сополимеров, содержащих сульфокислотные группы, в общей массе моющих или чистящих средств по настоящему изобретению предпочтительно составляет от 0,1 до 15 масс.%, преимущественно от 1,0 до 12 масс.% и предпочтительно от 2,0 до 10 масс.%.

Моющие или чистящие средства по настоящему изобретению могут расфасованы в форме, известной специалистам в данной области техники, например, в твердом или жидком виде, а также в виде комбинации твердой и жидкой товарных форм. В качестве твердой товарной формы предпочтительно приемлемыми являются порошки, грануляты, экструдированные или уплотненные элементы и предпочтительно таблетки.

Вещество, например композиция или средство, согласно определению по настоящему изобретению является твердым, если оно при 25°C и 1013 мбар существует в твердом агрегатном состоянии.

Вещество, например композиция или средство, согласно определению по настоящему изобретению является жидким, если оно при 25°C и 1013 мбар существует в жидком агрегатном состоянии. При этом к жидкому состоянию относится также гелеобразная форма.

Твердые, предпочтительно порошкообразные моющие или чистящие средства по настоящему изобретению наряду с ферментами по настоящему изобретению в принципе могут содержать любые известные ингредиенты, обычно применяемые в средствах такого рода, причем в средстве содержится по меньшей мере один другой ингредиент. Средства по настоящему изобретению предпочтительно могут содержать структурообразующие вещества, поверхностно-активные вещества, отбеливающие средства на основе органических и/или неорганических пероксидных соединений, активаторы отбеливания, органические растворители, смешивающиеся с водой, ферменты, хелатообразователи, электролиты, регуляторы pH и другие вспомогательные вещества, такие как оптические отбеливатели, ингибиторы посерения, регуляторы пенообразования, красители и отдушки, а также их комбинации.

В одном из вариантов воплощения моющее или чистящее средство также содержит:

- от 5 до 70 масс.% и предпочтительно от 5 до 30 масс.% поверхностно-активных веществ и/или

- от 10 до 65 масс.% и предпочтительно от 12 до 60 масс.% водорастворимого или диспергируемого в воде неорганического структурообразующего вещества и/или

- от 0,5 до 10 масс.% и предпочтительно от 1 до 8 масс.% водорастворимых органических структурообразующих веществ и/или

- от 0,01 до 15 масс.% твердых неорганических и/или органических кислот или кислых солей и/или

- от 0,01 до 5 масс.% комплексообразователя тяжелых металлов и/или

- от 0,01 до 5 масс.% ингибитора посерения и/или

- от 0,01 до 5 масс.% ингибитора маркости красителя и/или

- от 0,01 до 5 масс.% ингибитора пенообразования.

В случае необходимости средство может содержать также оптические отбеливатели предпочтительно в количестве от 0,01 до 5 масс.%.

Получение твердых средств по настоящему изобретению не представляет трудностей и может быть осуществлено известными способами, например распылительной сушкой или гранулированием, причем ферменты и возможные другие термически чувствительные ингредиенты, такие как, например, отбеливающие средства, в случае необходимости добавляют в дальнейшем отдельно. Для производства средств по настоящему изобретению с повышенной насыпной массой, преимущественно в интервале от 650 до 950 г/л, предпочтительным является способ, включающий стадию экструдирования.

Для получения твердых средств по настоящему изобретению в форме таблеток, которые являются однофазными или многофазными, одноцветными или многоцветными и предпочтительно могут состоять из одного или нескольких слоев, предпочтительно из двух слоев, предпочтительно все компоненты - в случае необходимости соответственно слои - предварительно смешивают в смесителе друг с другом и смесь посредством традиционных прессов для таблетирования, например эксцентриковых или роторных прессов, прессуют с усилием прессования в интервале приблизительно от 50 до 100 кН и предпочтительно от 60 до 70 кН. В частности, в случае многослойных таблеток предпочтительным может быть вариант, когда по меньшей мере один слой формуют предварительно. Эту стадию предпочтительно осуществляют при усилии прессования в интервале от 5 до 20 кН и предпочтительно от 10 до 15 кН. Таким образом, без проблем получают прочные и тем не менее в условиях применения достаточно быстро растворимые таблетки с прочностью на разрыв и изгиб, составляющей, как правило, от 100 до 200 Н и предпочтительно 150 Н. Изготовленная таким образом таблетка предпочтительно имеет массу от 10 до 50 г и предпочтительно от 15 до 40 г. Объемная форма таблеток может быть любой и может быть круглой, овальной или многогранной, причем возможны также промежуточные формы. Углы и кромки предпочтительно являются скругленными. Круглые таблетки предпочтительно имеют диаметр от 30 до 40 мм. В частности, размер многогранных или прямоугольных таблеток, которые преобладающим образом вносят через дозирующее устройство, например, посудомоечной машины, зависит от геометрической формы и объема дозирующего устройства. Например, в предпочтительных вариантах осуществления основание имеет размеры (от 20 до 30 мм) на (от 34 до 40 мм) и предпочтительно от 26 на 36 мм или 24 на 38 мм.

Твердое средство по настоящему изобретению предпочтительно содержит по меньшей мере один необязательно водорастворимый органический и/или неорганический структурообразователь. К водорастворимым органическим структурообразующим веществам относятся указанные ранее органические структурообразующие вещества.

В качестве водорастворимых неорганических структурообразующих веществ в случае твердых средств предпочтительно приемлемыми являются силикаты, карбонаты и фосфаты щелочных металлов, которые могут содержаться в виде щелочных, нейтральных или кислых натриевых или калиевых солей. Их примеры указаны в предыдущей части настоящей заявки.

В качестве диспергируемых в воде неорганических структурообразующих веществ предпочтительно применяют кристаллические или аморфные алюмосиликаты щелочных металлов в случае твердых средств в количестве до 50 масс.% и предпочтительно не более 40 масс.% и в случае жидких средств предпочтительно от 1 до 5 масс.%. Среди этих веществ предпочтительными являются кристаллические алюмосиликаты натрия с качеством "для моющих средств", предпочтительно цеолит A, P и в случае необходимости X, используемые по отдельности или в смеси, например в виде совместно кристаллизованного вещества из цеолитов A и X ("Vegobond^® AX", коммерческий продукт компании "Condea Augusta S.p.A."). Количество, близкое к указанной верхней границе, предпочтительно относится к твердым гранулированным средствам. Приемлемые алюмосиликаты предпочтительно не содержат частиц с крупностью зерна более 30 мкм и предпочтительно по меньшей мере на 80 масс.% состоят из частиц размером меньше 10 мкм. Их способность связывать кальций, которая может быть определена согласно немецкой заявке DE 24 12 837, находится, как правило, в интервале от 100 до 200 мг CaO на грамм.

Приемлемые заменители или частичные заменители указанного алюмосиликата представляют собой кристаллические силикаты щелочных металлов, которые могут содержаться по отдельности или в смеси с аморфными силикатами. Силикаты щелочных металлов, являющиеся приемлемыми для применения в средствах по настоящему изобретению в качестве структурообразующих веществ, предпочтительно имеют молярное соотношение оксидов щелочных металлов и SiO₂ меньше 0,95 и предпочтительно в интервале от 1:1,1 до 1:12 и могут быть аморфными или кристаллическими. Предпочтительными силикатами щелочных металлов являются силикаты натрия, предпочтительно аморфные силикаты натрия, с молярным соотношением Na₂O:SiO₂ в интервале от 1:2 до 1:2,8. В качестве кристаллических силикатов, которые могут содержаться по отдельности или в смеси с аморфными силикатами, предпочтительно применяют кристаллические слоистые силикаты общей формулы Na₂Si_xO_2x+1⋅yH₂O, где x представляет собой так называемый модуль и означает число от 1,9 до 22 и предпочтительно от 1,9 до 4, а y представляет собой число от 0 до 33, при этом предпочтительными значениями для x являются 2, 3 или 4. Предпочтительные кристаллические слоистые силикаты представляют собой силикаты, в случае которых x в указанной общей формуле принимает значение 2 или 3. Предпочтительными являются как сс-, так и γ-дисиликат натрия (Na₂Si₂O₅⋅yH₂O). Полученные из аморфных силикатов щелочных металлов, практически безводные кристаллические силикаты щелочных металлов указанной ранее общей формулы, в которой x означает число от 1,9 до 2,1, также могут быть использованы в средствах по настоящему изобретению. В следующем предпочтительном варианте воплощения средства по настоящему изобретению применяют кристаллический слоистый силикат натрия с модулем от 2 до 3, аналогичный силикату, который может быть получен из песка и карбоната натрия. В следующем предпочтительном варианте воплощения средства по настоящему изобретению применяют кристаллические силикаты натрия с модулем в интервале от 1,9 до 3,5. Кристаллические слоистые силикаты указанной ранее формулы (I) реализуются компанией "Clariant GmbH" под торговым названием Na-SKS, например: Na-SKS-1 (Na₂Si₂₂O₄₅⋅xH₂O, кенияит), Na-SKS-2 (Na₂Si₁₄O₂₉⋅xH₂O, магадиит), Na-SKS-3 (Na₂Si₈O₁₇⋅xH₂O) или Na-SKS-4 (Na₂Si₄O₉⋅xH₂O, макатит). Из этих силикатов приемлемыми в первую очередь являются Na-SKS-5 (α-Na₂Si₂O₅), Na-SKS-7 (β-Na₂Si₂O₅, натросилит), Na-SKS-9 (NaHSi₂O₅⋅3H₂O), Na-SKS-10 (NaHSi₂O₅⋅3H₂O, канемит), Na-SKS-11 (t-Na₂Si₂O₅) и Na-SKS-13 (NaHSi₂O₅) и предпочтительно Na-SKS-6 (δ-Na₂Si₂O₅). В предпочтительном варианте воплощения средства по настоящему изобретению применяют гранульную смесь из кристаллического слоистого силиката и цитрата, из кристаллического слоистого силиката и указанной ранее (со)полимерной поликарбоновой кислоты или из силиката щелочного металла и карбоната щелочного металла аналогично, например, продукту под названием "Nabion^® 15", имеющемуся в продаже.

Структурообразующие вещества содержатся в твердых средствах по настоящему изобретению предпочтительно в количестве до 75 масс.% и предпочтительно от 5 до 50 масс.%.

В качестве пероксидных соединений, приемлемых для применения в твердых средствах по настоящему изобретению, предпочтительно приемлемыми являются органические перкислоты или пероксидные соли органических кислот, такие как фталимидоперкапроновая кислота, пербензойная кислота или соли дипердодекандикарбоновой кислоты, пероксид водорода и неорганические соли, которые в условиях стирки и мытья выделяют пероксид водорода; к этим солям относятся перборат, перкарбонат, персиликат и/или персульфат, такой как кароат. Если должны быть использованы твердые пероксидные соединения, то они могут быть применены в виде порошков или гранулятов, которые также могут быть покрыты оболочкой известным в принципе способом. Если средство по настоящему изобретению содержит пероксидные соединения, то они содержатся в количестве преимущественно до 50 масс.% и предпочтительно от 5 до 30 масс.%. Может быть целесообразным прибавление малого количества известных стабилизаторов отбеливающих средств, таких как, например, фосфонаты, бораты или метабораты и метасиликаты, а также солей магния, таких как сульфат магния.

В качестве активаторов отбеливания в твердых средствах могут быть использованы соединения, которые в условиях пергидролиза образуют алифатические пероксокарбоновые кислоты, содержащие предпочтительно от 1 до 10 атомов C и предпочтительно от 2 до 4 атомов C, и/или в случае необходимости замещенную пербензойную кислоту. Приемлемыми веществами являются вещества, которые содержат O- и/или N-ацильные группы при атомах C в указанном числе и/или в случае необходимости замещенные бензоильные группы. Предпочтительными соединениями являются полиацилированные алкилендиамины, предпочтительно тетраацетилэтилендиамин (TAED), ацилированные производные триазина, предпочтительно 1,5-диацетил-2,4-диоксогексагидро-1,3,5-триазин (DADHT), ацилированные гликолурилы, предпочтительно тетраацетилгликолурил (TAGU), N-ацилимиды, предпочтительно N-нонаноилсукцинимид (NOSI), ацилированные фенолсульфонаты, предпочтительно н-нонаноил- или изононаноилоксибензолсульфонат (н- или изо-NOBS), ангидриды карбоновых кислот, предпочтительно ангидрид фталевой кислоты, ацилированные многоатомные спирты, предпочтительно триацетин, этиленгликольдиацетат, 2,5-диацетокси-2,5-дигидрофуран и енольный сложный эфир, а также ацетилированный сорбит и маннит или их описанные смеси (SORMAN), ацилированные производные сахаров, предпочтительно пентаацетилглюкоза (PAG), пентаацетилфруктоза, тетраацетилксилоза и октаацетиллактоза, а также ацетилированный, в случае необходимости N-алкилированный глюкамин и глюконолактон и/или N-ацилированные лактамы, например N-бензоилкапролактам. Также предпочтительно применяют гидрофильные замещенные ацилацетали и ациллактамы. Также могут применяться комбинации традиционных активаторов отбеливания. Активаторы отбеливания такого рода, в частности в случае присутствия указанных ранее отбеливающих средства, выделяющих пероксид водорода, могут содержаться в обычном количестве, преимущественно в количестве от 0,5 до 10 масс.% и предпочтительно от 1 до 8 масс.% в расчете на общее средство, однако они предпочтительно полностью отсутствуют при применении перкарбоновой кислоты в качестве единственного отбеливающего средства.

Дополнительно к традиционным активаторам отбеливания или вместо них в твердых средствах также могут содержаться сульфонимины и/или усиливающие отбеливание соли переходных металлов или комплексы переходных металлов в качестве так называемых катализаторов отбеливания.

К твердым формам применения по настоящему изобретению относятся экструдаты, грануляты, таблетки или капсулы, содержащие твердые средства, которые могут быть расфасованы как в крупные упаковки, так и порциями. Альтернативным образом, средство может находиться в виде сыпучего порошка предпочтительно с насыпной массой от 300 до 1200 г/л и предпочтительно от 500 до 900 г/л или от 600 г/л до 850 г/л.

Варианты воплощения по настоящему изобретению относятся к любым твердым, порошкообразным, жидким, желеобразным или пастообразным формам применения средств, которые в случае необходимости могут также состоять из нескольких фаз, а также могут находиться в уплотненной или неуплотненной форме. Другой вариант осуществления настоящего изобретения представляют собой средства, отличающиеся тем, что они находятся в виде одноупаковочной системы. Такие средства состоят предпочтительно из одной фазы. Разумеется, средства по настоящему изобретению могут также состоять из нескольких фаз, например: из двух жидких фаз, двух твердых фаз или жидкой и твердой фазы. Поэтому в следующем варианте осуществления настоящего изобретения моющие или чистящие средства отличаются тем, что они разделены по нескольким упаковкам.

Жидкие товарные формы на основе воды и/или органических растворителей могут быть сгущены и находиться в форме гелей.

Моющие или чистящие средства по настоящему изобретению предпочтительно находятся в жидкой форме. Предпочтительные моющие или чистящие средства в расчете на их общую массу содержат больше 40 масс.%, преимущественно от 50 до 90 масс.% и предпочтительно от 60 до 80 масс.% воды.

В качестве другого компонента моющие или чистящие средства по настоящему изобретению могут содержать органический растворитель. Прибавление органических растворителей благоприятно действует на стабильность ферментов и очищающую способность этих средств. Предпочтительные органические растворители выбирают из группы одно- или многоатомных спиртов, алканоламинов или гликолевых простых эфиров. Растворители предпочтительно выбирают из этанола, н-пропанола или изопропанола, бутанола, гликоля, пропан- или бутандиола, глицерина, дигликоля, пропил- или бутилдигликоля, гексиленгликоля, метилового эфира этиленгликоля, этилового эфира этиленгликоля, пропилового эфира этиленгликоля, моно-н-бутилового эфира этиленгликоля, метилового эфира диэтиленгликоля, этилового эфира диэтиленгликоля, метилового, этилового или пропилового эфира пропиленгликоля, метилового или этилового эфира дипропиленгликоля, метокси-, этокси- или бутокситригликоля, 1-бутоксиэтокси-2-пропанола, 3-метил-3-метоксибутанола, трет-бутилового эфира пропиленгликоля, а также смесей этих растворителей. Массовая доля органических растворителей в общей массе моющих или чистящих средств по настоящему изобретению предпочтительно составляет от 0,1 до 10 масс.%, преимущественно от 0,2 до 8,0 масс.% и предпочтительно от 0,5 до 5,0 масс.%. Органический растворитель, который является особенно предпочтительным и особенно активным в отношении стабилизации моющих или чистящих средств, представляет собой глицерин, а также 1,2-пропиленгликоль. По настоящему изобретению предпочтительными являются жидкие моющие или чистящие средства, которые содержат по меньшей мере один полиол предпочтительно из группы глицерина и 1,2-пропиленгликоля, причем массовая доля полиола в общей массе моющего или чистящего средства предпочтительно составляет от 0,1 до 10 масс.%, преимущественно от 0,2 до 8,0 масс.% и предпочтительно от 0,5 до 5,0 масс.%.

Другие предпочтительные органические растворители представляют собой органические амины и алканоламины. Моющие или чистящие средства по настоящему изобретению содержат амины предпочтительно в количестве от 0,1 до 10 масс.%, преимущественно от 0,2 до 8,0 масс.% и предпочтительно от 0,5 до 5,0 масс.% соответственно в расчете на их общую массу. Особенно предпочтительный алканоламин представляет собой этаноламин.

Другой предпочтительный компонент моющих или чистящих средств по настоящему изобретению представляет собой сахарный спирт (альдитол). Группа альдитолов охватывает ациклические полиолы формулы HOCH₂[CH(OH)]_nCH₂OH. К альдитолам относятся, например, маннит (маннитол), изомальтит, лактит, сорбит (сорбитол) и ксилит (ксилитол), треит, эритрит и арабит. В отношении стабильности ферментов особенно предпочтительным оказался сорбит. Массовая доля сахарного спирта в общей массе моющего или чистящего средства предпочтительно составляет от 1,0 до 10 масс.%, преимущественно от 2,0 до 8,0 масс.% и предпочтительно от 3,0 до 6,0 масс.%.

Жидкие моющие или чистящие средства по настоящему изобретению предпочтительно расфасовывают во многофазной форме, то есть в виде комбинации двух или более друг от друга отделенных разных жидких моющих или чистящих средств. Этот вид расфасовки повышает стабильность моющего или чистящего средства и улучшает его очищающую способность. Предпочтительное моющее или чистящее средство по настоящему изобретению отличается тем, что оно представляет собой одну упаковку и размещенные в этой упаковке отдельно друг от друга два жидких моющих или чистящих средства A и B, причем композиция A содержит:

a) по меньшей мере одну модифицированную протеазу по настоящему изобретению;

b) по меньшей мере один другой фермент, отличающийся от протеазы по настоящему изобретению;

c) от 10 до 84,9 масс.% одного или нескольких структурообразующих веществ;

d) от 15 до 89,9 масс.% воды;

при этом композиция B содержит:

e) от 10 до 75 масс.% одного или нескольких структурообразующих веществ;

f) от 25 до 90 масс.% воды.

Другой объект настоящего изобретения представляет собой способ очистки текстильных изделий или твердых поверхностей, отличающийся тем, что по меньшей мере на одной стадии применяют средство по настоящему изобретению.

Этот способ охватывает как очистку вручную, так и очистку в машине, причем способы с применением машины являются предпочтительными. Способы очистки текстильных изделий в общем случае отличаются тем, что на нескольких технологических стадиях различные активные очищающие вещества наносят на очищаемое изделие и после действия в течение некоторого времени смывают, или тем, что очищаемое изделие другим образом обрабатывают моющим средством или раствором или разбавленной массой этого средства. Соответствующие положения имеют силу в отношении способов очистки любых других материалов, отличающихся от текстильных изделий, и, в частности, твердых поверхностей. Любые возможные способы мытья или очистки могут включать по меньшей мере на одной из технологических стадий применение моющего или чистящего средства по настоящему изобретению или комбинации амилазы и протеазы по настоящему изобретению и, таким образом, могут представлять собой варианты осуществления настоящего изобретения. Любые обстоятельства, аспекты и варианты воплощения, описанные в отношении комбинации амилазы и протеазы по настоящему изобретению и содержащих ее средств, применимы также в отношении этого объекта настоящего изобретения. В связи с этим в данном месте особо акцентируется ссылка на описание сущности изобретения касательно соответствующего места с указанием на то, что это описание имеет силу также в отношении указанных ранее способов по настоящему изобретению.

Альтернативные варианты воплощения этого объекта изобретения представляют собой способы обработки сырья для текстиля или ухода за текстильными изделиями, в случае которых по меньшей мере на одной технологической стадии протеаза по настоящему изобретению является активной. В данном случае предпочтительными являются способы, относящиеся к сырью для текстиля, волокнам или текстильным изделиям из природных компонентов, и наиболее предпочтительными являются способы, относящиеся к шерсти или шелку.

Другой объект настоящего изобретения представляет собой применение средства по настоящему изобретению для очистки текстильных изделий или твердых поверхностей и предпочтительно такой вариант, при котором применяют комбинацию амилазы и протеазы в количестве от 40 мкг до 4 г, предпочтительно от 50 мкг до 3 г, более предпочтительно от 100 мкг до 2 г и наиболее предпочтительно от 200 мкг до 1 г.

Любые обстоятельства, аспекты и варианты воплощения, описанные в отношении протеазы по настоящему изобретению и содержащих ее средств, применимы также в отношении этого объекта настоящего изобретения. В связи с этим в данном месте особо акцентируется ссылка на описание сущности изобретения касательно соответствующего места с указанием на то, что это описание имеет силу также в отношении указанного ранее применения по настоящему изобретению.

Пример

Настоящее изобретение поясняется следующим далее примером без ограничения им объема патентной охраны.

Исследование комбинаций амилазы и протеазы по настоящему изобретению в стиральной машине

Для этого примера применяли текстильные изделия, загрязненные стандартизированным образом. Были использованы следующие загрязнения:

- кровь/молоко/тушь на хлопке: продукт № C-05, поставляемый компанией "CFT (Center For Testmaterials) B.V.", Влардинген, Нидерланды.

Комбинацию протеазы по настоящему изобретению согласно SEQ ID NO. 4 и амилазы по настоящему изобретению (смесь 1), а также сравнительную смесь, содержащую протеазу согласно SEQ ID NO. 4 и препарат "Stainzyme^®" (смесь 2) использовали для стирки в стиральной машине в порядке сравнения, причем испытания по стирке осуществляли один раз непосредственно после получения композиции моющего средства (0 недель) и один раз после хранения моющего средства в течение 16 недель (16 недель).

Применяли соответственно равные количества активного фермента. Протеазы и амилазы прибавляли после водного жидкого моющего средства (содержащего наряду с водой 5,5 масс.% 7-кратно этоксилированного жирного спирта C_12/14, 5,3 масс.% C_9-13-алкилбензолсульфоната натрия, 4,9 масс.% натриевой соли сульфоэфира жирного спирта C_12/14 с 2 звеньями EO, 1,8 масс.% лимонной кислоты, 3 масс.% жирной кислоты C_12-18, 0,1 масс.% гептанатриевой соли диэтилентриаминпентаметиленфосфоновой кислоты, 1,3 масс.% NaOH, 3,6 масс.% смеси "этанол/глицерин") с pH=8,5 и при 30°C и жесткости воды, равной 16° немецкой шкалы, в машине "Miiele W 1935" в течение общего времени, равного 70 мин, осуществляли стирку.

Осуществляли 6-кратное определение, вымывали различные маркеры загрязнения и после стирки определяли с колориметром.

Были получены следующие разности значений Y для смеси 1 по сравнению со смесью 2:

Время хранения (недели)	Разность значений Y (смесь 1 - смесь 2)
0	2,1
16	3,2

Можно четко констатировать, что моющая способность моющего средства, содержащего протеазу согласно SEQ ID NO. 4 и амилазу по настоящему изобретению, как через 0 недель, так и через 16 недель значительно превышает. В частности, обнаружено более значительное действие после хранения в течение 16 недель, что дополнительно позволяет сделать заключение о стабилизации протеазы амилазой по настоящему изобретению.

1. Моющее или чистящее средство, содержащее комбинацию α-амилазы и протеазы, причем α-амилаза отличается тем, что она по отношению к последовательности, представленной в SEQ ID NO. 1, относительно ее общей длины идентична по меньшей мере на 89% и более предпочтительно по меньшей мере на 90, 90,5, 91, 91,5, 92, 92,5, 93, 93,5, 94, 94,5, 95, 95,5, 96, 96,5, 97, 97,5, 98, 98,5, 99, 99,5% и до 100%, а в перечне последовательности, представленной в SEQ ID NO. 1, в одном или нескольких из положений 180, 181, 182, 183 и 184 имеет делеции, причем протеаза отличается тем, что она содержит аминокислотную последовательность, которая по отношению к последовательности, представленной в SEQ ID NO. 2 и/или SEQ ID NO. 3, относительно ее общей длины идентична по меньшей мере на 80% и более предпочтительно по меньшей мере на 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 90,5, 91, 91,5, 92, 92,5, 93, 93,5, 94, 94,5, 95, 95,5, 96, 96,5, 97, 97,5, 98, 98,5 и 99%.

2. Моющее или чистящее средство по п.1, причем амилаза имеет делеции по меньшей мере в двух положениях, выбранных из положений 180+181, 181+182, 182+183 и 183+184 в перечне последовательности, представленной в SEQ ID NO. 1, и наиболее предпочтительно в положениях 183+184 в перечне последовательности, представленной в SEQ ID NO. 1.

3. Моющее или чистящее средство по пп.1 и 2, причем амилаза имеет делеции H183*+G184* в перечне последовательности, представленной в SEQ ID NO. 1.

4. Моющее или чистящее средство по пп.1-3, причем амилаза в перечне последовательности, представленной в SEQ ID NO. 1, имеет также аминокислотные замены в одном или нескольких из положений 405, 421, 422 и 428.

5. Моющее или чистящее средство по пп.1-4, причем амилаза в перечне последовательности, представленной в SEQ ID NO. 1, имеет замены I405L, A421H, A422P и A428T.

6. Моющее или чистящее средство по п.1, отличающееся тем, что протеаза содержит аминокислотную последовательность, которая относительно аминокислотной последовательности, указанной в SEQ ID NO. 2, в отношении ее общей длины идентична по меньшей мере на 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 90,5, 91, 91,5, 92, 92,5, 93, 93,5, 94, 94,5, 95, 95,5, 96, 96,5, 97, 97,5, 98, 98,5 и 99%, а в положении 99 в перечне последовательности, представленной в SEQ ID NO. 2, содержит остаток глутаминовой кислоты (E).

7. Моющее или чистящее средство по пп.1-6, причем протеаза представляет собой протеазу согласно SEQ ID NO. 4.

8. Моющее или чистящее средство по пп.1-7, отличающееся тем, что протеаза содержится в количестве 0,001-0,1 масс.% и предпочтительно от 0,01 до 0,06 масс.%, а амилаза содержится в количестве от 0,001-0,15 масс.% и предпочтительно от 0,005 до 0,012 масс.% в расчете на общую массу моющего или чистящего средства.

9. Применение моющего или чистящего средства по любому из пп.1-8 для стирки текстильных изделий или очистки твердых поверхностей, таких как металл, стекло, фарфор, керамика, кафель, камень, лакированные поверхности, пластмассы, древесина или кожа.

10. Способ очистки текстильных изделий или твердых поверхностей, таких как металл, стекло, фарфор, керамика, кафель, камень, лакированные поверхности, пластмассы, древесина или кожа, отличающийся тем, что по меньшей мере на одной технологической стадии применяют моющее или чистящее средство по любому из пп.1-8.

11. Применение α-амилазы для улучшения стабильности и эффективности протеазы в моющем и чистящем средстве, где α-амилаза отличается тем, что она по отношению к последовательности, представленной в SEQ ID NO. 1, относительно ее общей длины идентична по меньшей мере на 89% и более предпочтительно по меньшей мере на 90, 90,5, 91, 91,5, 92, 92,5, 93, 93,5, 94, 94,5, 95, 95,5, 96, 96,5, 97, 97,5, 98, 98,5, 99, 99,5% и до 100%, а в перечне последовательности, представленной в SEQ ID NO. 1, в одном или нескольких из положений 180, 181, 182, 183 и 184 имеет делеции, и причем протеаза отличается тем, что она содержит аминокислотную последовательность, которая по отношению к последовательности, представленной в SEQ ID NO. 2 и/или SEQ ID NO. 3, относительно ее общей длины идентична по меньшей мере на 80% и более предпочтительно по меньшей мере на 81, 82, 83, 84, 85, 86, 87, 88, 89, 90, 90,5, 91, 91,5, 92, 92,5, 93, 93,5, 94, 94,5, 95, 95,5, 96, 96,5, 97, 97,5, 98, 98,5 и 99%.