Способ моделирования термического поражения кожи степени iiia

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для моделирования термического поражения кожи степени IIIA у крысы с предварительно подготовленными участками кожи, находящейся под эфирным наркозом. Осуществляют термическое поражение кожи в течение 10 секунд дном сухой плоскодонной пробирки диаметром 18 мм, наполненной кипящей водой при 100°С, содержащей груз и имеющей общую массу 132,5 г, в проекции нижней части лопатки, симметрично с обеих сторон тела. Причем ожоги наносят поочередно, с повторным нагреванием пробирки перед нанесением второго ожога. Способ обеспечивает создание модели ожоговой травмы степени IIIA за счет одинакового у всех задействованных в эксперименте крыс, адекватного клиническим условиям поражения кожных покровов без повреждения жизнеспособности подкожных мышц. 2 ил.

 

Изобретение относится к экспериментальной фармакологии, а именно к способам моделирования патологических процессов и может быть использовано для изучения механизмов ожоговой болезни, а также разработки новых методов ее лечения.

Ожоговая травма в современных условиях остается актуальной и важной проблемой в структуре травматизма. Известны различные методики воспроизведения термического ожога с использованием разнообразных устройств для моделирования ожоговой поверхности у лабораторных животных. Известные способы моделирования ожоговой травмы в эксперименте касаются моделирования ожогов кожи различной степени тяжести.

Известен способ моделирования плоскостной раны [Louise Dunn, Hamish С. Prosser, Joanne Т. M. Tan, Laura Z. Vanags, Martin K. C., Christina A. Bursil. Murine Model of Wound Healing // Journal of Visualized Experiments. - May 2013, 75].

Известный способ заключается в том, что животным (мышам) при помощи биопсионного инструмента отмечают операционную область, после чего при помощи зажима и глазных ножниц создают рану по всей глубине кожи. Область раны ограничивают силиконовыми накладками. Однако, известный способ, прежде всего, относится к области экспериментальной фармакологии и комбустиологии, то есть предназначен для моделирования физического, а не термического поражения кожи. Кроме того, известный способ требует высоко оснащенного операционного помещения.

Существуют многочисленные научные разработки в области моделирования травматологических состояний, в частности, ран. Однако при этом вопрос экспериментального моделирования ожогов все еще остается недостаточно изученным, что делает поиск подобных моделей актуальным. Поскольку ожоги легких степеней (I и II) не требуют специализированной медицинской помощи, наиболее актуальной представляется разработка моделей ожогов III и IV степеней.

Ожог III степени - очень тяжелая и крайне болезненная травма термического характера, в той или иной степени затрагивающая все слои кожных покровов, и способная вызывать необратимые изменения на поврежденных участках. Ожоги III степени чаще всего возникают в результате пожара. В отличие от прочих ожогов, повреждения III степени характеризуются поражением всех слоев кожи и невозможностью ее самостоятельного полного восстановления.

За прототип предлагаемого изобретения выбран способ моделирования термического ожога кожи с применением контактного высокотемпературного способа (устройство на основе электропаяльника), позволяющей варьировать степень поражения кожи при обязательном гистологическом контроле. Данный метод заключается в прикладывании к предварительно депилированной коже лабораторных животных (крыс) разогретой до 200°С медной пластины размером 25×25 мм с силой 1,5 Н (Миронов А.Н., Бунатян Н.Д. Руководство по проведению доклинических исследований лекарственных средств. - М.: Гриф и К, 2012.-944 с). Недостатком описанного способа является необходимость в точном контроле температуры и давления, требующая специализированных измерительных приборов или особой подготовки персонала. Кроме того, большая площадь ожога может приводить к незапланированным осложнениям и тем самым поставить под угрозу исход эксперимента.

Задачей данного изобретения является создание модели ожоговой травмы степени IIIA, обеспечивающей одинаковое у всех задействованных в эксперименте лабораторных животных (крыс), адекватное клиническим условиям поражение кожных покровов без повреждения жизнеспособности подкожных мышц. Кроме того, предлагаемый способ не требует наличия специализированного оборудования или редко применяемых в лабораторной практике приборов, а также позволяет разрабатывать экспериментальный дизайн, соответствующий современным принципам 3R (англ. «replacement, reduction, refinement» - «замена, сокращение, усовершенствование») [Russell W.M.S., Burch R.L. The Principlesof Humane Experimental Technique / London:Methuen - 238 pp].

Поставленная задача решается тем, что у находящихся под эфирным наркозом экспериментальных животных, в частности крыс, на предварительно подготовленных (выбритых) участках кожи в нижней части лопаток, симметрично с обеих сторон тела, осуществляют термическое поражение кожи (ожог). Для этого пробирку (содержащую груз для создания общей массы пробирки 132,5 г) диаметром 18 мм, наполненную кипящей водой при 100°С, удерживают на коже в течение 10 секунд, поставив ее плоским дном. Дно пробирки должно быть сухим. Для нанесения второго ожога, на другую лопатку, пробирку повторно нагревают.

Термическое поражение кожи производится следующим образом:

Находящимся под эфирным наркозом экспериментальным мелким животным (в частности, крысам) на предварительно выбритую кожу спины в области лопаток (в проекции нижней части лопатки), отступая около 1 сантиметра от позвоночника справа и слева, наносят ожог дном плоскодонной стеклянной пробирки диаметром 18 мм, наполненной горячей водой и доведенной любым грузом до общей массы 132,5 грамма (1,3 Н) при 100°С в течение 10 секунд, что обеспечивает развитие ожога IIIA степени. Температура достигается нагревом пробирки на водяной бане. При нанесении ожога пробирку удерживают с помощью анатомического пинцета, зажима, или иного инструмента, вынимают из водяной бани и, быстро обсушив дно фильтровальной бумагой, ставят дном на кожу экспериментального животного под собственным весом. На фиг. 1 показана постановка пробирки на кожу животного. Необходимо визуально контролировать, чтобы обеспечивался полный контакт кожи со всей поверхностью дна пробирки. Время экспозиции составляет 10 секунд, после чего пробирку необходимо повторно разогреть на кипящей водяной бане перед нанесением второго ожога. Второй ожог наносится аналогичным способом с другой стороны позвоночника. Благодаря использованию грузов пробиркой на кожу создается давление одинаковой силы, а благодаря использованию воды обеспечивается теплоемкость конструкции, что в совокупности позволяет получить ожоги IIIA степени. Предполагается, что в дальнейшем на один из двух ожогов будет наноситься исследуемое вещество или с этим ожогом будут проводиться лечебные процедуры, в то время как второй ожог будет выступать в качестве внутреннего контроля, т.е. не будет подвергаться воздействию биологически активных веществ или лечебных процедур, однако может подвергаться воздействию носителя биологически активных веществ или SHAM - операции.

На фиг. 2 представлены ожоги через 12 часов после нанесения. Развитие ожогового поражения, которое впоследствии распространится на весь поврежденный участок.

Предлагаемый способ позволяет создать стабильные модели ожоговой травмы, соответствующей клиническим проявлениям ожога степени IIIA, что позволяет в дальнейшем исследовать новые методы лечения ожогов. Способ позволяет сократить количество животных, задействованных в эксперименте, а также достоверно воспроизводить развитие ожоговой травмы степени IIIA в эксперименте. Например, в стандартной схеме эксперимента по изучению противоожоговых средств следует использовать, как минимум, две группы животных - контрольную группу, не получающую лечение, и экспериментальную группу, ожоги которой обрабатываются исследуемым веществом или методом. При использовании предлагаемого способа аналогичный эксперимент возможно провести, используя только одну группу животных, каждое из которых будет иметь по два ожога, один из которых обрабатывается исследуемым веществом или методу, а второй остается без обработки. Таким образом возможно сократить число животных, используемых в эксперименте до половины, что позволяет проводить более гуманные эксперименты, а также сокращает затраты на содержание и кормление животных.

Для подтверждения полученного эффекта были проведены экспериментальные исследования на животных - лабораторных крысах-самцах линии Wistar, в возрасте 350 дней, весом 400±10 г в количестве 10 голов. В течение 10 секунд моделировали глубокий термический ожог кожи горячей водой (100°С) описанным ранее способом.

Для подтверждения развития искомой (IIIA) степени ожога было проведено гистологическое исследование кожи экспериментальных животных, для чего на 3 сутки с момента получения ожога животных подвергали эвтаназии с помощью диэтилового эфира.

Материалом для гистологических исследований были кусочки кожи размером 1,5*0,5 см, включающие центральную часть ожоговой раны и ее край с прилежащей тканью. Макропрепараты фиксировали в 10% нейтральном формалине, проводили обезвоживание в изопропиловом спирте, затем заливали в парафин. Гистологические срезы толщиной 7 мкм окрашивали гематоксилин-эозином. Полученные гистологические препараты изучали и с помощью микроскопа Zeiss.

В ходе морфологического исследования было выявлено, что через 3 суток после ожога на коже спины у крыс наблюдается две раны округлой формы размером 2,3 см с неровными краями. Поверхность ран покрыта струпом с выступающими волосяными стержнями.

Ожог, полученный описанным выше способом, сопровождается развитием сухого коагуляционного некроза кожи без гибели поверхностного слоя мышц. Кожа в участках некроза полностью утрачивает свою структуру, коллагеновые волокна собраны в большие пласты. Волосяные луковицы частично сохранены. Цитоплазма клеток базального и шиповатого слоев эпидермиса оксифильна, ядра пикнотичны, так же, как и в клетках волосяных фолликулов. Ядра клеток сальных желез резко отечны, цитоплазма оксифильна, вакуолизирована. Коллагенновые пучки дермы набухшие, оксифильно окрашены. Однако поверхностные мышцы сохраняют структуру и характерную для них окраску, четко видны ядра миосимпластов. Наблюдается инфильтрация лейкоцитами рыхлой соединительной ткани. Цитоплазма клеток базального и шиповатого слоев эпидермиса оксифильна, ядра пикнотичны, так же, как и в клетках волосяных фолликулов. Ядра клеток сальных желез резко отечны, цитоплазма оксифильна, вакуолизированна. Коллагеновые пучки дермы набухшие, оксифильно окрашены.

Полученная гистологическая картина позволяет отнести ожог к IIIA степени, который у крыс заживает посредством краевой и спонтанной эпителизации [Волкова О.В. Основы гистологии с гистологической техникой / О.В. Волкова, Ю.К. Елецкий. - М.: Медицина, 1982.-304 с].

Способ моделирования термического поражения кожи степени IIIA у крысы с предварительно подготовленными участками кожи, находящейся под эфирным наркозом, отличающийся тем, что осуществляют термическое поражение кожи в течение 10 секунд дном сухой плоскодонной пробирки диаметром 18 мм, наполненной кипящей водой при 100°С, содержащей груз и имеющей общую массу 132,5 г, в проекции нижней части лопатки, симметрично с обеих сторон тела, причем ожоги наносят поочередно, с повторным нагреванием пробирки перед нанесением второго ожога.



 

Похожие патенты:

Настоящее изобретение относится к области медицины, а именно к способу лечения эндометриоза на основании экспериментальной модели у крыс, который заключается в том, что на модели эндометриоза, полученного путем хирургического вмешательства, выполняют внутрибрюшинное введение антагониста окситоциновых рецепторов в дозировке 0,35 мг/кг каждые сутки в течение 21 дня.

Изобретение относится к медицине, а именно к вирусологии, и стоматологии, и экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для моделирования экспериментального рецидивирующего герпетического стоматита.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной онкологии, и касается способа ортотопической трансплантации фрагмента опухоли пищевода человека иммунодефицитным мышам для получения опухолевых моделей, более точно отражающих молекулярные, генетические и морфологические особенности развития рака пищевода человека.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной офтальмологии, и может быть использовано для моделирования в эксперименте рецидивирующей эрозии роговицы.

Изобретение относится к медицине, а именно экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для коррекции нарушения микроциркуляции в плаценте при ADMA-подобной модели преэклампсии.
Изобретение относится к медицине, в частности к патологической физиологии, и касается моделирования ожирения у травоядных животных в эксперименте. Животным создают режим гиподинамии.

Изобретение относится к медицине, а именно к офтальмологии, и может быть использовано в экспериментальной офтальмологии для моделирования атрофии ретинального пигментного эпителия.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии, и может быть использовано для моделирования острого панкреатита различной степени тяжести у крыс.
Изобретение относится к офтальмологии, а именно к офтальмоонкологии, и предназначено для создания модели интраокулярной ретинобластомы. Иммунодефицитным мышам линии BALB/cnude вводят суспензию клеток первичной культуры ретинобластомы, полученной при энуклеации у больного с ретинобластомой.

Группа изобретений относится к медицине, а именно к экспериментальной хирургии. Моделирование проводится на трупах мужского пола.

Изобретение относится к области генерации низкотемпературной неравновесной аргоновой плазмы при атмосферном давлении, может быть использовано для стерилизации/дезинфекции медицинского инструмента и принадлежностей, обеззараживания микроорганизмов (бактерий, спор, патогенной микрофлоры), в частности, при хранении, сушке, предпосевной обработке продукции сельского хозяйства (семян, овощей, фруктов, кормовых смесей).

Группа изобретений относится к медицинской технике, а именно к средствам для обработки кожи. Устройство для обработки кожи с использованием нетепловой плазмы содержит узел электродной головки и рукоятку, включающую в себя приводной механизм, содержащий источник питания, выполненный с возможностью генерирования указанного низковольтного электрического сигнала, при этом узел электродной головки и приводной механизм включают в себя взаимодействующие элементы, выполненные с возможностью разъемного соединения узла электродной головки с приводным механизмом и электрического соединения источника питания с трансформатором.

Группа изобретений относится к медицинской технике, а именно к средствам для обработки кожи. Устройство для обработки кожи с использованием нетепловой плазмы содержит узел электродной головки и рукоятку, включающую в себя приводной механизм, содержащий источник питания, выполненный с возможностью генерирования указанного низковольтного электрического сигнала, при этом узел электродной головки и приводной механизм включают в себя взаимодействующие элементы, выполненные с возможностью разъемного соединения узла электродной головки с приводным механизмом и электрического соединения источника питания с трансформатором.

Группа изобретений относится к медицине. Многофункциональный инструмент для высокочастотной хирургической обработки ткани содержит по меньшей мере одну камеру текучей среды для приема текучей среды, находящееся в соединении по меньшей мере с одной камерой текучей среды устройство термостатирования для нагревания, подогревания или испарения текучей среды, устройство управления температурой для управления температурой текучей среды и по меньшей мере одно расположенное на дистальном конце многофункционального инструмента и находящееся в соединении по меньшей мере с одной камерой текучей среды выходное отверстие текучей среды.

Изобретение относится к медицинскому приборостроению, в частности к способам остановки кровотечения из гастродуоденальных язв. Портативное устройство для коагуляции тканей содержит подключенные к источнику питания формирователь управляющих напряжений, связанный с управляемым генератором тока, подключенным к термоэлементу, индикатор режима и компрессор, схему сигналов управления, выполненную в виде многофункциональной кнопки управления, выходы которой подключены соответственно к формирователю управляющих напряжений, индикатору режима и источнику питания, при этом первое нажатие кнопки формирует сигнал «пуск» и обеспечивает линейное возрастание тока, второе нажатие формирует сигнал «фиксация» и обеспечивает постоянное значение тока и температуры коагуляции, третье нажатие кнопки формирует сигнал «сброс», а источник питания выполнен портативным.

Группа изобретений относится к медицине, в частности к стоматологии, и может быть использована для лечения заболеваний пародонта. Выполняют анестезию.
Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии. Под контролем лапароскопа выявляют варикозно расширенные магистральные вены, на которые накладывают мягкие зажимы на расстоянии 1 см друг от друга на 2-3 мин.

Изобретение относится к медицине, онкологии, и может быть использовано для комбинированного лечения больных первично операбельным или местно-распространенным неоперабельным раком молочной железы.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано при комбинированном лечении местнораспространенных форм рака полости носа и придаточных пазух носа с применением локальной гипертермии.

Группа изобретений относится к медицинской технике, а именно к средствам для ультразвуковой хирургии. Устройство создания высокоинтенсивных фокусированных ультразвуковых полей для неинвазивного локального разрушения биологической ткани представляет собой фазированную решетку со случайным расположением излучающих элементов в виде многоугольников, площади которых отличаются до 1% при наличии или отсутствии технологических промежутков между элементами, каждая из сторон элементов внутри решетки является смежной с одной из сторон соседних элементов.

Изобретение относится к медицине, а именно к экспериментальной фармакологии, и может быть использовано для моделирования термического поражения кожи степени IIIA у крысы с предварительно подготовленными участками кожи, находящейся под эфирным наркозом. Осуществляют термическое поражение кожи в течение 10 секунд дном сухой плоскодонной пробирки диаметром 18 мм, наполненной кипящей водой при 100°С, содержащей груз и имеющей общую массу 132,5 г, в проекции нижней части лопатки, симметрично с обеих сторон тела. Причем ожоги наносят поочередно, с повторным нагреванием пробирки перед нанесением второго ожога. Способ обеспечивает создание модели ожоговой травмы степени IIIA за счет одинакового у всех задействованных в эксперименте крыс, адекватного клиническим условиям поражения кожных покровов без повреждения жизнеспособности подкожных мышц. 2 ил.

Наверх