Способ прогнозирования бесплодия у женщин с гипоталамическим синдромом

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования бесплодия у женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом. Для этого в периферической крови и аспирате из полости матки у женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом и индексом массы тела больше или равным 30 определяют показатели субпопуляций лимфоцитов CD3+CD19-, CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3-CD19+, CD3-CD(16+56+) и иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ в зависимости от дня менструального цикла, а именно на 5 и 21 день. При показателях субпопуляций лимфоцитов на 5-й день менструального цикла в периферической крови CD3+CD19- от 1,08 до 1,19×109/л, CD3+CD4+ от 0,51 до 0,55×109/л, CD3+CD8+ от 0,35 до 0,40×109/л, CD3-CD19+ от 0,38 до 0,47×109/л, CD3-CD(16+56+) от 0,37 до 0,43×109/л иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ 1,45-1,37, на 21 день менструального цикла в периферической крови CD3+CD19- от 1,20 до 1,51×109/л, CD3+CD4+ от 0,56 до 0,65×109/л, CD3+CD8+ от 0,41 до 0,45×109/л, CD3-CD19+ от 0,38 до 0,46×109/л, CD3-CD(16+56+) от 0,38 до 0,44×109/л иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ 1,36-1,22, в аспирате эндометрия на 5 день менструального цикла CD3+CD19- от 1,1 до 1,22×109/л, CD3+CD4+ от 0,54 до 0,58×109/л, CD3+CD8+ от 0,36 до 0,42×109/л, CD3-CD19+ от 0,40 до 0,49×109/л, CD3-CD(16-56+) от 0,45 до 0,54×109/л, иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ 1,59-1,21, на 21 день менструального цикла в аспирате эндометрия CD3+CD19- от 1,22 до 1,53×109/л, CD3+CD4+ от 0,54 до 0,57×109/л, CD3+CD8+ от 0,43 до 0,47×109/л, CD3-CD19+ от 0,49 до 0,55×109/л, CD3-CD(16-56+) от 0,39 до 0,46×109/л иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ 1,34-1,42 прогнозируют бесплодие у женщин с гипоталамическим синдромом. Использование данного способа позволяет прогнозировать бесплодие у женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом и индексом массы тела больше или равным 30 при помощи оценки иммунных реакций на системном и местном уровне организма женщины. 3 табл., 4 ил., 2 пр.

 

Изобретение относится к клинической медицине, в частности к специальности акушерство и гинекология, и касается поиска новых возможностей прогнозирования бесплодия у женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом и индексом массы тела больше или равно 30.

В настоящее время одним из главных факторов, ведущих к снижению рождаемости, является ухудшение репродуктивного здоровья женщин. Бесплодие представляет собой важнейшую медико-социальную проблему не только в России, но и в странах Европы и Америки. В последние годы наблюдается неуклонный рост нейроэндокринной патологии. До 18-25% женщин репродуктивного возраста страдают гипоталамическим синдромом. В большинстве случаев, без лечения, гипоталамический синдром трансформируется в нейроэндокринный синдром, на фоне которого у 25-72% женщин развивается бесплодие (Кулаков В.И., Прилепская В.Н., Радзинский В.Е. // Руководство по амбулаторно-поликлинической помощи в акушерстве и гинекологии. М.: ГЭОТАР-Медиа, - 2007. - С. 849-855). В связи с этим, необходим поиск новых методов прогнозирования нарушений репродуктивной функции при гипоталамическом синдроме у женщин.

Известен «Способ прогнозирования развития репродуктивных нарушений» (Патент РФ №2495431, опубликован 10.10.2013 г), отличающийся тем, что у женщин исследуется цервикальное отделяемое на десятый день менструального цикла, в качестве параметров определяют уровни интерлейкина 1 бета и интерферона гамма одновременно. При содержании интерлейкина 1 бета больше 38,8±3,8 пг/мл и одновременном содержании интерферона гамма больше 8,1±0,5 пг/мл прогнозируют формирование репродуктивных нарушений.

Недостатком способа является то, что исследование проводится у женщин, имеющих инфекции, передающиеся половым путем, что уже подразумевает наличие воспалительного процесса на уровне цервикального канала, а для характеристики локального иммунитета при воспалительном процессе использованы интерлейкин 1 бета и интерферон гамма, подчеркивающие инфекционную природу нарушений репродуктивной функции.

Известен способ прогнозирования репродуктивной функции у девочек с гипоталамическим синдромом пубертатного периода (Патент РФ №2438136, опубликован 27.12.2011 г.). Сущность способа заключается в том, что до и после лечения в менструальной крови определяют уровень гликоделина. При значении гликоделина 11,12 нг/мл и более после лечения патогенетическую терапию оценивают как эффективную.

Недостатком способа является то, что маркер, используемый для прогнозирования, является маркером белковообразовательной функции эндометрия и не отражает состояние клеточного иммунитета в эндометрии. Кроме того, исследование проводится в менструальной крови.

Известен способ прогнозирования репродуктивных нарушений у женщин с избыточной массой тела и ожирением (Патент РФ №2617491, опубликован 25.04.2017 г). Сущность предлагаемого способа заключается в том, что раннее прогнозирование достигается за счет определения активности NF-kB в аспирате из полости матки, при неблагоприятном прогнозе на беременность - NF-kB>6,86 пг/мл.

Недостатком данного способа является то, что определяются модулирующие процессы апоптоза, ангиогенеза, дифференцировки и пролиферации на уровне эндометрия, но не отражает состояние клеточного иммунитета.

Известен способ прогнозирования наступления беременности у женщин с трубно-перитонеальным бесплодием в программе экстракорпорального оплодотворения /Патент РФ 2523401 Опубликован 20.07.2014 г/

Сущность способа заключается в том, что перед программой ЭКО у пациентки в лютеиновую фазу цикла проводят биопсию эндометрия и определяют относительное содержание CD95+макрофагов в лейкоцитарном инфильтрате эндометрия. При значении относительного содержания CD95+макрофагов, равном 48,8% или более, прогнозируют наступление беременности, а при значении менее 48,8% - отсутствие наступления беременности.

Недостатком данного способа является то, что определяются только CD95+макрофаги в биоптате эндометрия и в программе ЭКО, без возможности естесственного наступления беременности. Отсутствует комплексная оценка состояния иммунитета на системном и локальном уровнях.

Известны способы прогнозирования и механизмы развития бесплодия у женщин: Кулаков В.И., Прилепская В.Н., Радзинский В.Е. // Руководство по амбулаторно-поликлинической помощи в акушерстве и гинекологии. М.: ГЭОТАР-Медиа, - 2007. - С. 849-855/ Крутова В.А., Б.Г. Ермошенко A.M. Чулкова, Возможности прогнозирования развития женского бесплодия // Кубанский научный медицинский вестник - 2009 - №9(114) - С. 73-80/. Жуковец И.В., Лещенко О.Я., Аталян А.В. Основные механизмы первичного бесплодия у женщин репродуктивного возраста с гипоталамической дисфункцией в пубертатном периоде Acta Biomedica scietifica - 2017, - Том 2, - № 5, Часть 1. - С. 15-19/;

Недостатком этих исследований является то, что они не отражают со стояние иммунных реакций на системном уровне и локальном уровнях в организме женщин при репродуктивных нарушениях.

Известен способ прогнозирования репродуктивных нарушений у женщин репродуктивного возраста с дисфункцией гипоталамуса /Патент РФ №2617247, опубликован 24.04.2017/. Сущность метода заключается в том, что раннее прогнозирование достигается за счет одновременного оценивания про- и противовоспалительных цитокинов (TNF-α и IL-10) в аспирате из полости матки. При неблагоприятном прогнозе на беременность TNF-α>20,2 пг/мл, IL-10<4,78 пг/мл, при неблагоприятном прогнозе на вынашивание беременности при TNF-α>18,9-20,1 пг/мл, IL-10<6,06-4,79 пг/мл.

Недостатком данного способа является определение одного про- и одного противовоспалительных интерлейкинов на локальном уровне, на 21 день менструального цикла, что не позволяет провести комплексную оценку всех звеньев иммунитета, как на локальном, так и на системном уровне и своевременно (с началом менструального цикла) провести лечебно-профилактические мероприятия до этапа планирования беременности.

Известно, что нормальное развитие и функционирование репродуктивной системы осуществляются при тесном взаимодействии иммунной и эндокринной систем. Нарушения иммунной системы сопряжены с дисфункцией репродуктивного процесса. Клетки иммунной системы участвуют в регуляции фолликулогенеза, овуляции, в формировании и регрессе желтого тела. При нарушении продукции эстрогенов в организме женщины регистрируется повышение количества CD8-лимфоцитов и низкий CD4/CD8 Роль иммунных факторов в функционировании репродуктивной системы женщин / Н.О. Мотовилова, И.Ю. Коган, Арег А. Тотолян // Уральский медицинский журнал. - 2010. - №4. - С. 117-121). Имеются сведения о том, что эстрадиол и прогестерон регулируют активность цитолитических Т-клеток (CD3, CD8), снижение которой отмечается в течение секреторной фазы. Было доказано, что иммунные клетки присутствуют повсюду в репродуктивносм тракте, а количество макрофагов, В- и Т-клеток, находящихся в эндометрии меняется в течение менструального цикла (Гадиева Ф.Г. Взаимосвязь иммунной и эндокринной систем у женщин репродуктивного возраста // Акушерство и гинекология - 2001. - №1. - С. 11-13).

Предлагаемое изобретение направлено на более раннее прогнозирование бесплодия у женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом.

Технический результат достигается тем, что в периферической крови и аспирате из полости матки у женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом и индексом массы тела больше или равном 30 определяют показатели субпопуляций лимфоцитов CD3+CD19-, CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3-CD19+, CD3-CD(16+56+) и иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ в зависимости от дня менструального цикла, а именно на 5 и 21 день, и при показателях субпопуляций лимфоцитов на 5-й день менструального цикла в периферической крови CD3+CD19- от 1,08 до 1,19×109/л, CD3+CD4+ от 0,51 до 0,55×109/л, CD3+CD8+ от 0,35 до 0,40×109/л, CD3-CD19+ от 0,38 до 0,47×109/л, CD3-CD(16+56+) от 0,37 до 0,43×109/л иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ - 1,45-1,37, на 21 день менструального цикла в периферической крови CD3+CD19- от 1,20 до 1,51×109/л, CD3+CD4+ от 0,56 до 0,65×109/л, CD3+CD8+ от 0,41 до 0,45×109/л, CD3-CD19+ от 0,38 до 0,46×109/л, CD3-CD(16+56+) от 0,38 до 0,44×109/л иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ - 1,36-1,22, в аспирате эндометрия на 5 день менструального цикла CD3+CD19- от 1,1 до 1,22×109/л, CD3+CD4+ от 0,54 до 0,58×109/л, CD3+CD8+ от 0,36 до 0,42×109/л, CD3-CD19+ от 0,40 до 0,49×109/л, CD3-CD(16-56+) от 0,45 до 0,54×109/л, иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8- - 1,59-1,21, на 21 день менструального цикла в аспирате эндометрия CD3+CD19- от 1,22 до 1,53×109/л, CD3+CD4+ от 0,54 до 0,57×109/л, CD3+CD8+ от 0,43 до 0,47×109/л, CD3-CD19+ от 0,49 до 0,55×109/л, CD3-CD(16-56+) от 0,39 до 0,46×109/л иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ - 1,34-1,42 прогнозируют бесплодие у женщин с гипоталамическим синдромом.

Для оценки клеточного звена иммунитета на системном уровне проводится определение субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови CD3+, CD4+, CD8+, CD16+, CD19+, CD56+. Для этого осуществляли забор крови из вены с помощью одноразового шприца в 2 пробирки объемом 10 мл в сухую стерильную и в стерильную пробирку, содержащую гепарин в конечной концентрации 25 ЕД в 1 мл крови на 5-й и 21-й день менструального цикла. Периферическую кровь из вены для брали натощак от 8 до 10 часов утра. В течение 1,5 часа при температуре 37С биологический материал доставляли в лабораторию.

Цельную кровь окрашивали 30 мин. в темноте с помощью моноклональных антител CD3, CD4, CD8, CD(16+56), CD19, меченых флюорохромами FITC, РЕ и PerCP/Cy5 (Becton Dickinson, DAKO) для выявления иммунокомпетентных клеток. Дтя определения целевых популяций клеток были использованы следующие сочетания моноклональных антител.

1) Периферическая кровь:

• TgG1/IgG2a/CD45 - для контроля неспецифического связывания лимфоцитов с античеловеческими антителами и выделения лимфоцитов;

• CD3/CD19/CD45 - для определения относительного содержания В-лимфоцитов [CD3-CD19+] и Т-лимоцитов [CD3+CD19-];

• CD3/CD4/CD45 - для определения относительного количества Т-хелперов [CD3+CD4+];

• CD3/CD8/CD45 - для определения относительного количества цитсггоксических Т-лимфоцитов [CD3+CD8+];

• CD3/CD(16+56)/CD45 - для определения относительного количества натуральных киллеров [CD3-CD(16+56)+].

После окрашивания образцов периферической крови производили лизис эритроцитов с использованием гипотонического лизирующего раствора (DAKO Easy Lyse). Для этого в каждую пробирку вносилось по 700 мкл готового раствора, тщательно перемешивали и инкубировали 10-12 мин. в темноте при комнатной температуре. Затем окрашенные мононуклеарные клетки отмывали от лизированных эритроцитов и несвязавшихся антител двумя последовательными центрифугированиями с раствором Хенкса в течение 5 мин. при 300 г (1000 об./мин.). Результаты учитывали на проточном цитофлюориметре ««Epics» фирмы «Beckman Coulter» (США), используя стандартные протоколы. Кроме того, вычисляли иммунорегуляторный индекс (IRI, CD4+/CD8+). Исследования проводили в течение 6 часов после взятия крови.

Оценка состояния местного клеточного иммунитета пациенткам с гипоталамическим синдромом и индексом массы тела больше или равном 30 осуществлялась в ткани эндометрия с последующим иммуногистохимическим исследованием. Ткань эндометрия получали на 5 и 21 день менструального цикла методом аспирационной биопсии с использованием Pipel (C.C.D., Франция). До 3 мл полученной ткани помещали в пробирку с 100 ЕД гепарина натрия в фосфатно-солевом буфере (ФСБ). Аспират последовательно механически измельчали и гомогенизировали путем пропускания через шприцы с уменьшающимся объемом с иглами меньшего диаметра. Затем из полученного гомогената эндометрия выделялась фракция мононуклеаров: гомогенат аккуратно наслаивался на 2 мл Ficoll-Paque, Amersham, (1,077 г/л), а затем центрифугировался 40 мин. при 450 г (1500 об./мин.). После центрифугирования в градиенте плотности опалесцирующее кольцо мононуклеаров аккуратно с помощью дозатора переносили в сухую чистую пробирку и дополнительно промывали ФСБ (центрифугирование 15 мин. при 450 г (1500 об./мин.). Мононуклеары эндометрия окрашивали 30 мин. в темноте с помощью моноклональных антител CD3, CD4, CD8, CD(16+56), CD19, CD45, меченых флюорохромами FITC, РЕ и PerCP/Cy5 (Becton Dickinson, DAKO) для выявления иммунокомпетентных клеток. Для определения целевых популяций клеток были использованы следующие сочетания моноклональных антител:

2) Аспират эндометрия:

- IgG1/IgG2a/CD45 - для контроля неспецифического связывания лимфоцитов с античеловеческими антителами и выделения лимфоцитов;

- CD3/CD4/CD45 - для определения относительного количества Т-хелперов [CD3+CD4+];

- CD3/CD8/CD45 - для определения относительного количества цитотоксических Т-лимфоцитов [CD3+CD8+];

• CD3/CD19/CD45 - для определения относительного содержания В-лимфоцитов [CD3-CD19+] и Т-лимоцитов [CD3+CD19-];

- CD3/CD(16+56+)/CD45. - для определения относительного количества натуральных киллеров [CD3-CD(16+56+)], [CD3-CD(16-56+)];

Результаты учитывали на проточном цитофлюориметре «Epics» фирмы «Beckman Coulter». (США), используя стандартные протоколы. Кроме того, вычисляли иммунорегуляторный индекс (IRI, CD4+/CD8+).

Этот способ позволяет прогнозировать бесплодие до планирования беременности и своевременно провести коррекцию выявленных нарушений. Также предложенный способ обеспечивает возможность скринингового обследования пациенток с гипоталамическим синдромом и индексом массы тела равном 30 и более, а именно прогнозировать репродуктивные нарушения, своевременно проводить коррекцию, что позволит оценить риск, ускорить реализацию генеративной функции и уменьшить материальные затраты на терапию.

Новыми признаками заявленного способа являются:

- прогнозирование бесплодия до планирования беременности;

- оценка субпопуляционного состава лимфоцитов в эндометрии (местный уровень) и периферической крови (системный уровень) одновременно;

- определение клеточного звена иммунитета на системном и местном уровнях путем определения субпопуляционного состава лимфоцитов проводится на 5 и 21 день цикла;

- определение клеточного звена иммунитета на системном и местном уровнях путем определения субпопуляционного состава лимфоцитов проводится у пациенток с гипоталамическим синдромом и индексом массы тела больше или равно 30;

- в качестве биологического материала используется венозная кровь (системный уровень регуляции иммунитета) и ткань эндометрия (местный уровень регуляции иммунитета).

В основе предложенного способа находится новое направление, полученное путем лабораторного исследования изменения содержания показателей клеточного иммунитета на системном и местном уровнях, а именно определение субпопуляционного состава лимфоцитов периферической крови CD3+, CD4+, CD8+, CD16+, CD19+, CD56+ у женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом индексом массы тела больше или равно 30 на 5 и 21 день менструального цикла по сравнению с женщинами репродуктивного возраста не имевшими нарушений в гипоталамо-гипофизарной системе (условно здоровыми).

Впервые обнаружено, что у женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом в периферической крови, на 5-й день менструального цикла, отмечается повышение субпопуляций лимфоцитов CD3+CD19-, CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3-CD19+, CD3-CD(16+56+) в периферической крови на 5-й и 21-й день цикла, причем увеличение показателей происходит к 21 дню менструального цикла. Кроме того, с увеличением веса пациенток возрастают и концентрации субпопуляций указанных лимфоцитов в крови. В эндометрии тенденция к увеличению субпопуляций лимфоцитов CD3+CD19-, CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3-CD19+, CD3-CD(16-56+). В наибольшей степени увеличиваются NK-клетки (CD3-CD(16-56+) в эндометрии, незначительно уменьшаются CD3+CD4+, на фоне повышения CD3+CD8+.

Исследование проведено у 64 женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом и 30 условно здоровых женщин с 2010 г по 2017 г на базе женской консультации и женской консультации №1 ГБУЗ АО «Городская поликлиника №8 им. Н.И. Пирогова».

При оценке уровней провоспалительных цитокинов на 5-й день менструального цикла в периферической крови и аспирате эндометрия отмечается достоверное повышение CD3+CD19- по отношению к контролю (р<0,05), также CD3+CD4+ (p<0,01), CD3-CD19+ (р<0,01), CD3-CD(16-56+) (р<0,05). Уровень CD3-CD(16-56+) в эндометрии достоверно повышался по отношению к контролю (р<0,05). Описанная тенденция отражена в таблице 1, 2, 3 и рис., где:

Фиг. 1 Динамика субпопуляции лимфоцитов в периферической крови при гипоталамическом синдроме у женщин на 5-й день менструального цикла;

Фиг. 2 Динамика субпопуляции лимфоцитов в периферической крови при гипоталамическом синдроме у женщин на 21-й день менструального цикла;

Фиг. 3 Динамика субпопуляции лимфоцитов в аспирате из полости матки при гипоталамическом синдроме у женщин на 5-й день менструального цикла

Фиг. 4 Динамика субпопуляции лимфоцитов в аспирате из полости матки при гипоталамическом синдроме у женщин на 21-й день менструального цикла

Примеры из практики:

Пример 1.

Пациентка К., 25 лет,

Жалобы на момент обследования: на нерегулярные менструации, отсутствие беременности в течение 3-х лет при регулярной половой жизни без контрацепции,

В анамнезе: менструации с 12 лет, по 4-6 дней, через 30-35 дней, с 15 лет - через 50-65 дней, нерегулярные. В репродуктивном возрасте к врачу акшеру-гинекологу не обращалась. В пубертатном периоде обращалась в ГБУЗ АО «Детская городская поликлиника №1» к детскому гинекологу. После обследования выставлен диагноз: Дисфункции гипоталамуса пубертатного периода. Вторичная олигоменорея.

Половая жизнь с 19 лет в браке, без контрацепции. Беременности не было. Объективно: ИМТ 33,5 кг/м2, стрии перламутрового цвета в области бедер и ягодиц, молочных желез. Клинический диагноз: Вторичная олигоменорея. Ожирение 1 ст. Осложненный гинекологический анамнез (дисфункция гипоталамуса в пубертатном периоде). Проведено обследование на 5-й день менструального цикла в периферической крови: CD3+CD19- - 1,15×109/л, CD3+CD4+ - 0,53×109/л, CD3+CD8+ - 0,37×109/л, CD3-CD19+ - 0,41×109/л, CD3-CD(16+56) - 0,39×109/л иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ - 1,43, на 21 день менструального цикла: CD3+CD19- - 1,44×109/л, CD3+CD4+ - 0,58×109/л, CD3+CD8+ - 0,43×109/л, CD3-CD19+ - 0,42×109/л, CD3-CD(16+56+) - 0,43×109/л иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ - 1,34. В эндометрии на 5 день менструального цикла содержание субпопуляций лимфоцитов составило: CD3+CD19- - 1,19×109/л, CD3+CD4+ - 0,55×109/л, CD3+CD8+ - 0,39×109/л, CD3-CD19+ - 0,45×109/л, CD3-CD(16-56+) - 0,49×109/л, иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ - 1,41, на 21 день менструального цикла, CD3+CD19- - 1,42×109/л, CD3+CD4+ - 0,56×109/л, CD3+CD8+ - 0,45×109/л, CD3-CD19+ - 0,52×109/л, CD3-CD(16-56+) 0,42×109/л иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ - 1,33 прогнозируют бесплодие.

После обследования пациентке была проведена патогенетическая терапия в течение 5 месяцев с рекомендациями по использованию барьерных методов контрацепции, Через 7 месяцев после лечения наступила беременность. Завершилась рождением доношенного ребенка.

Пример 2.

Пациентка С., 23 лет.

Жалобы на момент обследования: не предъявляет.

В анамнезе: менструации с 11 лет, по 5-7 дней, через 55-80 дней, нерегулярные. По поводу нарушений менструального цикла получала комбинированные оральные контрацептивы в течение 3-х лет. Половая жизнь с 20 лет. До приема комбинированных оральных контрацептивов от беременности не предохранялась. Беременность не наступала. В пубертатном периоде обращалась в ГБУЗ АО «Детская городская поликлиника №1» к детскому гинекологу. После обследования выставлен диагноз: Дисфункции гипоталамуса пубертатного периода. Первичная олигоменорея.

Объективно: ИМТ - 34,7 кг/м2, стрии перламутрового цвета в области бедер и ягодиц, молочных желез. Клинический диагноз: Первичная олигоменорея. Осложненный гинекологический анамнез (дисфункция гипоталамуса в пубертатном периоде).

Пациентке рекомендована отмена комбинированных оральных контрацептивов. Через 2 месяца, после отмены комбинированных оральных контрацептивов проведено обследование. Содержание субпопуляций лимфоцитов в периферической крови на 5-й день менструального цикла составило: CD3+CD19- - 1,16×109/л, CD3+CD4+ - 0,54×109/л, CD3+CD8+ - 0,38×109/л, CD3-CD19+ - 0,42×109/л, CD3-CD(16+56+) - 0,40×109/л иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ - 1,42, на 21 день менструального цикла: CD3+CD19- - 1,45×109/л, CD3+CD4+ - 0,57×109/л, CD3+CD8+ - 0,43×109/л, CD3-CD19+ - 0,42×109/л, CD3-CD(16+56+) - 0,44×109/л иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ - 1,32. В эндометрии на 5 день менструального цикла содержание субпопуляций лимфоцитов составило: CD3+CD19- - 1,18×109/л, CD3+CD4+ - 0,55×109/л, CD3+CD8+ - 0,39×109/л, CD3-CD19+ - 0,44×109/л, CD3-CD(16-56+) - 0,47×109/л, иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ - 1,41, на 21 день менструального цикла, CD3+CD19- - 1,43×109/л, CD3+CD4+ - 0,57×109/л, CD3+CD8+ - 0,45×109/л, CD3-CD19+ - 0,50×109/л, CD3-CD(16-56+) от 0,45×109/л иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ - 1,35 прогнозируют бесплодие.

После обследования назначена патогенетическая терапия на 6 месяцев. Через месяц после лечения наступила беременность. Завершилась рождением доношенного ребенка.

Предлагаемым способом достигается раннее прогнозирование бесплодия, т.е. до планирования беременности, что своевременно позволяет проводить коррекцию выявленных нарушений и оценить риск и ускорить реализацию генеративной функции и сократить денежные средства на терапию.

Способ прогнозирования бесплодия у женщин с гипоталамическим синдромом, заключающийся в том, что в периферической крови и аспирате из полости матки у женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом и индексом массы тела больше или равным 30 определяют показатели субпопуляций лимфоцитов CD3+CD19-, CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3-CD19+, CD3-CD(16+56+) и иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ в зависимости от дня менструального цикла, а именно на 5 и 21 день, и при показателях субпопуляций лимфоцитов на 5-й день менструального цикла в периферической крови CD3+CD19- от 1,08 до 1,19×109/л, CD3+CD4+ от 0,51 до 0,55×109/л, CD3+CD8+ от 0,35 до 0,40×109/л, CD3-CD19+ от 0,38 до 0,47×109/л, CD3-CD(16+56+) от 0,37 до 0,43×109/л иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ 1,45-1,37, на 21 день менструального цикла в периферической крови CD3+CD19- от 1,20 до 1,51×109/л, CD3+CD4+ от 0,56 до 0,65×109/л, CD3+CD8+ от 0,41 до 0,45×109/л, CD3-CD19+ от 0,38 до 0,46×109/л, CD3-CD(16+56+) от 0,38 до 0,44×109/л иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ 1,36-1,22, в аспирате эндометрия на 5 день менструального цикла CD3+CD19- от 1,1 до 1,22×109/л, CD3+CD4+ от 0,54 до 0,58×109/л, CD3+CD8+ от 0,36 до 0,42×109/л, CD3-CD19+ от 0,40 до 0,49×109/л, CD3-CD(16-56+) от 0,45 до 0,54×109/л, иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ 1,59-1,21, на 21 день менструального цикла в аспирате эндометрия CD3+CD19- от 1,22 до 1,53×109/л, CD3+CD4+ от 0,54 до 0,57×109/л, CD3+CD8+ от 0,43 до 0,47×109/л, CD3-CD19+ от 0,49 до 0,55×109/л, CD3-CD(16-56+) от 0,39 до 0,46×109/л иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+ 1,34-1,42 прогнозируют бесплодие у женщин с гипоталамическим синдромом.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится области биохимической диагностики, в частности к способам оценки концентрации антигенов при проведении анализов сыворотки крови, мочи, пищевых продуктов, образцов окружающей среды и других жидкостей с помощью иммунохроматографии.

Изобретение относится к наборам для иммунохимического анализа. Набор нанесенных на подложку-иммуночип реагентов захвата представлен видовым антигеном вируса Денге или смесью антигенов вируса Денге типов I-IV, антителом против IgM человека и моноклональными антителами против белка NS1 вируса Денге для выделения из образца и детекции ранних белков патогена; многокомпонентный конъюгат представлен смесью золей золота, связанных с антителами против IgG человека для детекции IgG, видовым антигеном вируса Денге или смесью антигенов вируса Денге типов I-IV для детекции специфических IgM и моноклональными антителами против белка NS1 вируса Денге для выделения из образца и детекции ранних белков патогена, а встроенные контроли содержат IgG человека и белок NS1 вируса Денге иммобилизованные на отдельных сегментах подложки-иммуночипа и включают сегмент с нанесенными IgG человека для контроля работоспособности антивидовых детекторных антител к выявленным антигенам и свободным от специфических белков сегментом для оценки проявляющей системы и фоновых явлений.
Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, и может быть использовано для диагностики степени тяжести вегетативных нарушений при болезни Паркинсона с помощью анализа крови.

Настоящее изобретение относится к биотехнологии. Предложены антитела и их антиген-связывающие фрагменты против ИЛ-1-бета.

Изобретение относится к области биохимии, в частности к моноклональному антителу, которое специфически связывается с вспомогательным белком рецептора человеческого интерлейкина-1 (IL1RAP).
Изобретение относится к медицине, в частности к гематологии, и может быть использовано для морфометрической оценки прогноза течения диффузной В-крупноклеточной лимфомы (ДВККЛ).

Изобретение относится к медицине, а именно к инфекционным болезням, фтизиатрии и терапии. Раскрыт способ прогнозирования летального исхода при клиническом течении коинфекции ВИЧ-туберкулез, при котором у пациентов с выявленной множественной лекарственной устойчивостью Mycobacterium tuberculosis и известным количеством CD4-лимфоцитов проводят забор образцов венозной крови, выделение плазмы крови и иммуноферментный анализ с целью определения концентрации неспецифических общих иммуноглобулинов IgE в МЕ/мл, IgM в мг/мл, IgA в мг/мл и секреторного IgA в мг/л в плазме крови, вычисляют коэффициент предикции летального исхода (КП), равный отношению произведения их концентраций к количеству CD4-лимфоцитов в 1 мкл крови и при превышении этим коэффициентом значения 200 прогнозируют летальный исход с 56,7-кратным относительным риском.

Изобретение относится к области медицины и фармацевтики, а именно к способу для прогнозирования устойчивого вирусологического ответа на терапию хронического гепатита С препаратами прямого противовирусного действия при наличии липидного дистресс-синдрома, включающему иммунологическое исследование крови с определением концентрации интерлейкина 4 и гамма-интерферона, отличающемуся тем, что пациенту однократно определяют в крови концентрации интерлейкинов 2 и 10, а также проводят биохимическое исследование крови и определяют концентрацию триглицеридов и гомоцистеина, вычисляют значение дискриминантной функции, сравнивают ее значение с константой, и при значении более 275,107 прогнозируют отсутствие устойчивого ответа, а при значении менее или равном 275,107 – стойкий вирусологический ответ.
Изобретение относится к области медицины, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования преждевременных родов при угрозе прерывания беременности.

Изобретение относится к области медицины, в частности к кардиологии, педиатрии, акушерству и гинекологии. Предложен способ прегравидарного прогнозирования риска формирования спорадических септальных врожденных пороков сердца без хромосомных заболеваний в последующих поколениях.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования невынашивания беременности у женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом и индексом массы тела меньше 30. Способ заключается в том, что в периферической крови и аспирате из полости матки у женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом и индексом массы тела меньше 30 определяют показатели субпопуляций лимфоцитов CD3+CD19-, CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3-CD19+, CD3-CD(16+56+) и иммунорегуляторный индекс CD4+/CD8+ в зависимости от дня менструального цикла, а именно на 5 и 21 день. При показателях субпопуляций лимфоцитов на 5-й день менструального цикла в периферической крови CD3+CD19- от 1,03 до 1,17×109/л, CD3+CD4+ от 0,46 до 0,48×109/л, CD3+CD8+ от 0,29 до 0,37×109/л, CD3-CD19+ от 0,35 до 0,42×109/л, CD3-CD(16+56+) от 0,35 до 0,37×109/л иммунорегуляторный индекс CD4+/CD8+ - 1,58-1,29, на 21 день менструального цикла в периферической крови CD3+CD19- от 1,18 до 1,27×109/л, CD3+CD4+ от 0,49 до 0,50×109/л, CD3+CD8+ от 0,43 до 0,45×109/л, CD3-CD19+ от 0,45 до 0,48×109/л, CD3-CD(16+56+) от 0,38 до 0,42×109/л иммунорегуляторный индекс CD4+/CD8+ -1,36-1,22, а в аспирате эндометрия на 5 день менструального цикла CD3+CD19- от 1,04 до 1,18×109/л, CD3+CD4+ от 0,47 до 0,49×109/л, CD3+CD8+ от 0,31 до 0,34×109/л, CD3-CD19+ от 0,33 до 0,41×109/л, CD3- CD(16-56+) от 0,36 до 0,40×109/л, иммунорегуляторный индекс CD4+/CD8+- 1,38-1,44, на 21 день менструального цикла в аспирате эндометрия CD3+CD19- от 1,20 до 1,29×109/л, CD3+CD4+ от 0,51 до 0,54×109/л, CD3+CD8+ от 0,45 до 0,47×109/л, CD3-CD19+ от 0,46 до 0,52×109/л, CD3-CD(16-56+) от 0,37 до 0,42×109/л иммунорегуляторный индекс - CD4+/CD8+- 1,13-1,14 прогнозируют невынашивание беременности у женщин с гипоталамическим синдромом. Использование данного способа позволяет прогнозировать невынашивание беременности у женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом при помощи оценки иммунных реакций на системном и местном уровне организма женщины. 4 ил., 3 табл., 2 пр.

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству и гинекологии, и может быть использовано для прогнозирования бесплодия у женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом. Для этого в периферической крови и аспирате из полости матки у женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом и индексом массы тела больше или равным 30 определяют показатели субпопуляций лимфоцитов CD3+CD19-, CD3+CD4+, CD3+CD8+, CD3-CD19+, CD3-CD и иммунорегуляторный индекс - CD4+CD8+ в зависимости от дня менструального цикла, а именно на 5 и 21 день. При показателях субпопуляций лимфоцитов на 5-й день менструального цикла в периферической крови CD3+CD19- от 1,08 до 1,19×109л, CD3+CD4+ от 0,51 до 0,55×109л, CD3+CD8+ от 0,35 до 0,40×109л, CD3-CD19+ от 0,38 до 0,47×109л, CD3-CD от 0,37 до 0,43×109л иммунорегуляторный индекс - CD4+CD8+ 1,45-1,37, на 21 день менструального цикла в периферической крови CD3+CD19- от 1,20 до 1,51×109л, CD3+CD4+ от 0,56 до 0,65×109л, CD3+CD8+ от 0,41 до 0,45×109л, CD3-CD19+ от 0,38 до 0,46×109л, CD3-CD от 0,38 до 0,44×109л иммунорегуляторный индекс - CD4+CD8+ 1,36-1,22, в аспирате эндометрия на 5 день менструального цикла CD3+CD19- от 1,1 до 1,22×109л, CD3+CD4+ от 0,54 до 0,58×109л, CD3+CD8+ от 0,36 до 0,42×109л, CD3-CD19+ от 0,40 до 0,49×109л, CD3-CD от 0,45 до 0,54×109л, иммунорегуляторный индекс - CD4+CD8+ 1,59-1,21, на 21 день менструального цикла в аспирате эндометрия CD3+CD19- от 1,22 до 1,53×109л, CD3+CD4+ от 0,54 до 0,57×109л, CD3+CD8+ от 0,43 до 0,47×109л, CD3-CD19+ от 0,49 до 0,55×109л, CD3-CD от 0,39 до 0,46×109л иммунорегуляторный индекс - CD4+CD8+ 1,34-1,42 прогнозируют бесплодие у женщин с гипоталамическим синдромом. Использование данного способа позволяет прогнозировать бесплодие у женщин репродуктивного возраста с гипоталамическим синдромом и индексом массы тела больше или равным 30 при помощи оценки иммунных реакций на системном и местном уровне организма женщины. 3 табл., 4 ил., 2 пр.

Наверх