Средство, индуцирующее продукцию интерлейкина-8

Изобретение относится к области биологии и медицины. Предложено применение кристаллического аскорбата лития общей формулы LiС6Н7О6 в качестве средства, индуцирующего продукцию интерлейкина-8. Изобретение расширяет арсенал индукторов интерлейкина-8 и может быть использовано в клеточной биологии, экспериментальной медицине, фармакологии. 1 табл., 1 пр.

 

Изобретение относится к области биологии и медицины и представляет собой новое средство, индуцирующее продукцию интерлейкина-8. Средство может быть использовано в клеточной биологии, экспериментальной медицине, фармакологии.

Провоспалительный цитокин интерлейкин-8 является одним из основных цитокинов, который стимулирует миграцию лейкоцитов в очаг инфекции и воспаления и усиливает микробицидную активность нейтрофилов - основного звена первичной (врожденной) иммунной защиты. Интерлейкин-8 (ИЛ-8, interleukin-8, IL-8, chemoattractant CXCL8) относится к группе СХС хемокинов, клетками продуцентами IL-8 являются макрофаги, лимфоциты, фибробласты, эндотелиальные клетки. Хемокины вовлечены в разнообразные физиологические процессы, которые обеспечиваются балансом между их стимулирующими и супрессирующими эффектами. Нарушение этого баланса способствует развитию патофизиологических процессов и нарушению элиминации патогена, приводящему к активации аутоиммунных реакций [1]. Усиленная продукция провоспалительных цитокинов, в том числе IL-8, способствует защите организма и особенно необходима на начальных фазах воспаления. Установлено также, что повышенная продукция IL-8 при активации механизмов врожденного иммунитета не ослабляет развитие последующих адаптивных процессов долговременной антиген-специфической иммунной защиты [2].

Известен ряд средств, стимулирующих продукцию IL-8.

Сравнительное изучение секреции IL-8 эндотелиальными клетками перевиваемой человеческой линии ECV304, которые инкубировали в присутствии отдельных цитокинов и их сочетаний, показало, что клетки отвечали на инкубацию с TNF-α трехкратным усилением секреции IL-8 [3].

В эксперименте in vitro установлено, что иммуномодуляторы пептидной структуры - ГМДП (глюкозаминилмурамилдипептид) и бестим (гамма-D-глутамил-триптофан натрия) - оказывают выраженное стимулирующее действие на секрецию IL-8 нейтрофильными гранулоцитами [4].

Известно применение раково-эмбрионального антигена для индукции IL-8 в культурах цельной крови женщин с целью выявления предраковых изменений в молочной железе. Высокая продукция IL-8, индуцированная раково-эмбриональным антигеном, и высокий коэффициент отношения уровня индуцированной продукции IL-8 к уровню спонтанной продукции в супернатантах культуры крови установлен у женщин с доброкачественной опухолью - фиброаденомой. При низких значениях этих показателей выявляют предраковые изменения в молочной железе [5].

Показано, что нейтрофильные дефензины (HNP - human neutrophil peptides) индуцируют синтез хемокина IL-8 в моноцитах, макрофагах и в цельной крови человека [6].

Задачей настоящего изобретения является расширение арсенала средств, индуцирующих продукцию IL-8.

Поставленная задача решается путем применения соли лития и аскорбиновой кислоты - аскорбата лития (LiC6H7O6) в качестве индуктора IL-8.

Различные соли лития применяются в психиатрии и наркологии в качестве нормотимиков (стабилизаторов настроения) [7]. Аскорбат лития известен как антиоксидант, и применяется в экспериментальных исследованиях, ветеринарии, в медицинской практике - как биологическая активная добавка для повышения адаптационных возможностей организма [8].

При этом в патентной и научно-медицинской литературе не обнаружено указаний на применение аскорбата лития в качестве средства, индуцирующего продукцию IL-8. Способность аскорбата лития индуцировать продукцию интерлейкина-8 впервые обнаружена и доказана экспериментально.

Вновь выявленное свойство аскорбата лития индуцировать продукцию IL-8 может быть использовано в лабораторной практике, в экспериментальных исследованиях, при работе с клеточными культурами; сочетание с известным психостабилизирующим эффектом лития делает аскорбат лития перспективным при разработке новых лекарственных средств широкого спектра, обладающих нормотимическим, антиоксидантным и иммуномодулирующим действием.

Исследование влияния аскорбата лития на продукцию IL-8 в культуре цельной крови человека проводили с использованием набора реагентов «MILLIPLEX MAP «Нитап Cytokine/Chemokine Magnetic Bead Panel» (Merck, Германия) по технологии «Luminex хМАР» на мультиплексном анализаторе MAGPIX (Luminex, USA). Спонтанную продукцию IL-8 определяли в супернатантах интактной культуры клеток крови после суточной инкубации при 37°С, индуцированную продукцию IL-8 определяли в супернатантах после суточной инкубации при 37°С культуры клеток крови с добавлением аскорбата лития.

Предлагаемое изобретение осуществляется следующим образом.

Готовятся стоковые растворы аскорбата лития и препарата сравнения - карбоната лития - в удобной для дальнейшей работы концентрации на физиологическом растворе. Цельную кровь разводят 1:1 полной средой RPMI-1640 с добавлением гентамицина; определенный объем разведенной крови вносят в лунки культурального планшета (24-Well, Eppendorf). Для получения индуцированной продукции IL-8 в параллельные лунки дополнительно вносят стоковые растворы аскорбата лития и соли сравнения карбоната лития до конечной концентрации Li+1,2 ммоль/л; пробы инкубируют в течение суток при 37°С в CO2 - инкубаторе. Параллельно в тех же условиях инкубируют клетки крови в той же среде для получения спонтанной продукции IL-8. После инкубации осторожно отбирают супернатанты, разливают по аликвотам и хранят в низкотемпературной камере при -80°С до исследования. Уровень продукции IL-8 определяют по его концентрации в супернатантах суточных культур клеток крови.

Пример 1. Супернатант суточной культуры образца периферической крови человека (№13-14): концентрация IL-8 в нагрузочной пробе с аскорбатом лития - 31,82 pg/ml; концентрация IL-8 в нагрузочной пробе с карбонатом лития - 11,27 pg/ml; концентрация IL-8 в контрольной пробе (спонтанная продукция) - 8,91 pg/ml.

Оценку влияния солей лития на продукцию IL-8 провели на образцах периферической крови человека, взятой из вены (выборка N=24). В качестве препарата сравнения использовали карбонат лития, лекарственные средства на основе которого чаще всего применяются в медицине.

Статистический анализ полученных данных проводили по критерию Манна-Уитни, определяли медиану (Me), квартили (Q1; Q3) и достоверность различия р.

Результаты представлены в таблице.

Из таблицы видно, что внесение в культуру клеток крови аскорбата лития, в отличие от соли сравнения карбоната лития, приводило к выраженному усилению продукции интерлейкина-8, и его концентрация в супернатантах нагрузочных проб с аскорбатом лития (индуцированная продукция IL-8) достоверно превышала соответствующий показатель как в контрольных пробах - спонтанная продукция IL-8 - (p1=0,0010), так и в пробах с карбонатом лития (р2=0,0036). Отношение медианы уровня индуцированной аскорбатом лития продукции IL-8 к медиане уровня спонтанной продукции составляет 2,52.

Таким образом, впервые выявлено новое свойство аскорбата лития, характеризующее его как средство, индуцирующее продукцию IL-8, что позволит расширить арсенал индукторов данного цитокина.

Список литературы

1. Москалев А.В., Рудой А.С., Апчел В.Я. Хемокины, их рецепторы и особенности развития иммунного ответа. Вестник Российской военно-медицинской академии. 2017, 2 (58). С. 182-187. https://elibrary.ru/item.asp?id=29729031).

2. Меняйло М.Е., Малащенко В.В., Шмаров В.А., Газатова Н.Д., Тодосенко Н.М., Мелащенко О.Б., Гончаров А.Г., Селедцов В.И. Прямое влияние интерлейкина-8 на активацию Т-клеток. Российский иммунологический журнал 2016; 10(2): 174-178. https://elibrary.ru/item.asp?id=26741491).

3. Соколов Д.И., Кузнецова С.А., Котов А.Ю., Симбирцев А.С., Барышников А.Ю., Полосухина Е.Р., Шейкин Ю.А., Фрейдлин И.С. Цитокиновая регуляция экспрессии адгезионных молекул ICAM-1 и продукции хемокина IL-8 эндотелиальными клетками. Медицинская иммунология. 2000, Т2, №1. С. 25-33. https://elibrary.ru/item.asp?id=913 0688

4. Нестерова И.В., Синельникова Б.Ю., Швыдченко И.Н. Пептидная регуляция продукции интерлейкина-8 нейтрофильными гранулоцитами в эксперименте in vitro. Иммунология. 2006. Т. 27. №5. С. 274-278. https://elibrary.ru/item.asp?id=9432003

5. Патент (ru) №2623857. Способ выявления предраковых изменений в молочной железе. Аутеншлюс А.И., Кунц Т.А., Карпухина К.В., Михайлова Е.С., Вараксин Н.А. Заявка: №2016125024/ 22.06.2016; опубл. 29.06.2017 Бюл. №19.

6. Чалый Ю.В., Нашкевич Н.Н. Ингибирующий эффект антагонистов рецептора Р2Х7 на продукцию интерлейкина-8 макрофагами человека в ответ на действие нейтрофильных α-дефензинов. Журнал Белорусского государственного университета. Биология. 2017. №2. С. 25-30. https://elibrary.ru/item.asp?id=36665614

7. Машковский М.Д. Лекарственные средства. 16-е изд. М.: Новая Волна, 2017. 1200 с. ISBN 978-5-7864-0287-3.

8. Громова О.А., Торшин И.Ю., Сардарян И.С., Остренко К.С., Пронин А.В., Стельмащук Е.В., Хаспеков Л.Г. Аскорбат лития улучшает адаптацию к стрессу на моделях in vitro и in vivo. Фармакокинетика и фармакодинамика. 2016. №3. С. 13-20. https://elibrary.ru/item.asp?id=28790807

Применение аскорбата лития общей формулы LiC6H7O6 в качестве средства, индуцирующего продукцию интерлейкина-8.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к лабораторной диагностике и может быть использовано для определения фибриногена при термокоагуляции цитратной плазмы и оценки его функциональности.
Изобретение относится к медицине, в частности к акушерству и гинекологии, и относится к способу определения степени тяжести преэклампсии по относительному содержанию CD16+ моноцитов в периферической крови беременных.

Изобретение относится к области медицины, а именно к способу определения относительного количества этотически трансформированных фагоцитов. Способ заключается в проведении концом размазывающей поверхности пластины по рабочей поверхности рабочего стекла, на которую наносится мазок, при этом мазок крови изготавливают равномерным по толщине в один слой эритроцитов с плотностью эритроцитов в нем 4-15 тысяч на мм2, при этом для определения количества этотически сильно трансформированных фагоцитов при приготовлении мазка в кровь добавляют альбумин в концентрации 1-5%, для определения количества всех этотически трансформированных фагоцитов образец крови для мазка смешивают с изотоническим солевым раствором, и доля крови в смеси составляет от 25% до 75%, а для определения общего количества средне и сильно этотически трансформированных фагоцитов исследуют цельную кровь; сушку мазков осуществляют в течение 5-30 с; рабочие стекла для приготовления мазков предварительно калибруют, при этом изготавливают контрольные мазки из цельной крови по меньшей мере 10 здоровых доноров, определяют общее количество этотически средне и сильно трансформированных фагоцитов в каждом мазке, и при определении их значений в пределах 1-11% не менее чем в 95% результатов и их среднеарифметическом значении в пределах 4-6% такие стекла используют для приготовления мазков; а для определения относительного количества этотически трансформированных фагоцитов в исследуемом мазке определяют количество нативных фагоцитов, и по отношению соответствующих этотически трансформированных фагоцитов к сумме этих этотически трансформированных фагоцитов и нативных фагоцитов определяют относительное количество соответствующих этотически трансформированных фагоцитов.

Изобретение относится к области биомедицинских исследований и нанотехнологий. Предложен способ определения генотоксичности наночастиц на ядерном материале эритроцитов периферической крови рыб в условиях in vitro.
Изобретение относится к области медицины, а именно к способу ранней верификации посттравматического остеомиелита у пациентов с переломами нижней челюсти. Способ включает исследование анамнестических и рентгенологических данных, определение иммунологических показателей - ФНО-α и ИЛ-17 в сыворотке крови в течение 24 часов с момента травмы и дальнейший расчет по формуле: Р=1/(1+е^-0,38*ФНО-α+4,8); Р=1/(1+е^-1,08*ИЛ-17+17,54), при Р>0,80 устанавливают высокий риск развития посттравматического остеомиелита нижней челюсти.

Изобретение относится к медицине, а именно к неврологии, и может быть использовано для оценки риска развития неблагоприятного исхода посттравматической невропатии при диафизарных переломах плечевой кости.
Изобретение относится к медицине, а именно к кардиологии, и может быть использовано для определения резистентности к двойной антитромбоцитарной терапии у пациентов с ишемической болезнью сердца.
Изобретение относится к медицине, а именно к способу прогнозирования развития липидного дистресс-синдрома у пациентов с устойчивым вирусологическим ответом на противовирусную терапию хронического вирусного гепатита С.

Изобретение относится к области медицины, а именно к инфекционным болезням и гепатологии, и предназначено для прогнозирования развития липидного дистресс-синдрома при хроническом вирусном гепатите С при отсутствии противовирусной терапии.

Изобретение относится к электрическим воздействиям в импульсной форме, таким как клеточная терапия. Система для обработки образца электрическими импульсами содержит память; дисплей; пользовательское устройство ввода; держатель образца, содержащий первый электрод и второй электрод, размещенные на противоположных сторонах держателя образца, сконфигурированного для приема контейнера для образца; схему формирования импульсов для подачи импульса на первый и второй электроды; емкостной элемент, внешний по отношению к держателю образца и включенный последовательно между схемой формирования импульсов и держателем образца; и процессор для выполнения хранящихся в памяти инструкций для управления схемой формирования импульсов, которая сконфигурирована для емкостной связи с контейнером для образца.
Изобретение относится к медицине и предназначено для лечения пациентов с эмоциогенным патологическим пищевым поведением. Предложен способ лечения тревожных расстройств у пациентов с нарушениями пищевого поведения, включающий фармакотерапию, при этом перорально вводят препарат Бак-Сет Форте курсом 2 недели.

Изобретение относится к области органической химии, а именно к гетероциклическому соединению формулы (I), к его изомерам, стереоизомерам и его фармацевтически приемлемым солям, где B - конденсированное 6,5- или 6,6-гетероароматическое бициклическое кольцо, содержащее N и необязательно 1-2 атома азота, которое необязательно замещено 1-2 заместителями, выбранными из алкила, алкокси, галогена и NR8R9; где, когда B представляет собой конденсированное 6,5-гетероароматическое бициклическое кольцо, оно связано с -CONH-CH2- через его 6-членный кольцевой компонент; W, X, Y и Z независимо выбирают из C, N и S, в результате чего кольцо представляет собой пиразол, пиррол или тиазол; где R5, R6 и R7 отсутствуют или их выбирают из H, алкила, галогена, арила, гетероарила, -NR8R9, CN, COOR8, CONR8R9, -NR8COR9, CF3 и R16; где, по меньшей мере, один из R5, R6 и R7 присутствует и его выбирают из алкила, галогена, арила, гетероарила, -NR8R9, CN, COOR8, CONR8R9, -NR8COR9, CF3 и R16; A выбирают из арила и гетероарила; R8 и R9 выбирают из H и алкила; R16 - углеродсодержащее 3-6-членное моноциклическое кольцо, которое может быть ароматическим, насыщенным или ненасыщенным неароматическим, необязательно содержащее 2 гетероатома, выбранных из N и O, где кольцо R16, в свою очередь, необязательно замещено 2 заместителями, выбранными из алкила и оксо; алкил - линейный насыщенный (C1-C6) углеводород или разветвленный насыщенный (C3-C6)углеводород; алкил необязательно замещен 1-2 заместителями, выбранными из (C1-C6)алкокси, OH, CF3 и фтора; алкокси - линейный O-связанный (C1-C6) углеводород или разветвленный O-связанный (C3-C6) углеводород; алкокси необязательно замещен одним CF3; арил представляет собой фенил; арил необязательно замещен 1 заместителем, независимо выбранным из этилендиокси, -(CH2)0-3-O-гетероарила, -(CH2)1-3-гетероарила и -(CH2)1-3-NR14R15; гетероарил представляет собой 5- или 6-членное моноциклическое ароматическое кольцо, содержащее, когда это возможно, 1-3 кольцевых элемента, независимо выбранных из N, NR8, S и O; гетероарил необязательно замещен 1-2 заместителями, выбранными из алкила, алкокси, галогена, CN, арила, -CONR10R11 и -NR10R11; R10 и R11 выбирают из H и алкила или R10 и R11 вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют углеродсодержащее 5-членное гетероциклическое кольцо, которое может быть насыщенным или ненасыщенным с 2 двойными связями и которое необязательно замещено 1-2 заместителями, выбранными из алкила и F; R14 и R15 вместе с атомом азота, к которому они присоединены, образуют углеродсодержащее 5- или 6-членное гетероциклическое кольцо, которое является ненасыщенным с 2 двойными связями и необязательно может быть оксозамещенным; или соединение формулы (I) представляет собой (1-аминоизохинолин-6-илметил)-амид 3-циклопропил-1-(6-феноксипиридин-3-илметил)-1Н-пиразол-4-карбоновой кислоты, его изомеры, стереоизомеры и его фармацевтически приемлемые соли за исключением 1-бензил-5-хлоро-3-метил-N-[(4-метилхиназолин-2-ил)]-1Н-празол-4-карбоксамида.

Изобретение относится к области органической химии и к медицине. Предложено применение тетраацетилированного производного 5-амино-4-карбамоилимидазолил-1-β-D-рибофуранозида - ((АсО)4АИКАР) в качестве селективного ингибитора протеинкиназы Сδ.

Изобретение относится к медицине и предназначено для вакцинопрофилактики сибирской язвы. Вакцинопрофилактика проводится пероральным применением эффективного количества живой сухой лиофилизированной сибиреязвенной вакцины, содержащей споры штамма B.

Изобретение относится к биомедицине, а именно к применению смесей, имитирующих цельную кровь и диагностические α-, β- и α,β-изогемагглютинирующие сыворотки для обучения студентов методикам определения групп крови по системе AB0 и резус-фактора.

Настоящее изобретение относится к носителю для доставки вещества в продуцирующие внеклеточный матрикс клетки в почке, причем носитель содержит ретиноид в качестве нацеливающего агента.

Изобретение относится к полиморфной форме соединения формулы I, формула IПолиморфная форма представляет собой форму II, и ее рентгеновская порошковая дифрактограмма имеет характеристические пики при углах дифракции 2θ, составляющих 5,5°, 11,0°, 19,7°, 20,9° и 22,6°± 0,2°.

Изобретение относится к медицине и касается применения пептида Селанк для протективного воздействия при общем охлаждении. Описано применение пептида формулы Thr-Lys-Pro-Arg-Pro-Gly-Pro (селанк) в качестве протекторного средства при профилактике и/или лечении общего охлаждения организма млекопитающего при интраназальном введении.

Способ относится к медицине, а именно к травматологии, и может быть использовано для уменьшения количества осложнений у пострадавших с тяжелой сочетанной травмой. Для этого пациенту с тяжелой сочетанной травмой в послеоперационном периоде дополнительно к лечению вводят ежесуточно внутримышечно 75 мг дерината в течение 10 суток, начиная со следующих суток после травмы.

Изобретение относится к медицине, а именно к урологии. Забирают 40 мл крови из локтевой вены в пробирки, содержащие 0,5 мл цитрата натрия.

Группа изобретений относится к медицине и фармации. Предложено применение бензола, в котором не менее 4 атомов Н замещены, и заместители R1 и R2 независимо представляют собой H, F или OH; заместитель A - (CH2)mCOOH, W(CH2)mCOOH или Y-CH(COOH)-(CH2)p-CH3, когда заместитель B - H; или B - (CH2)mCOOH, W(CH2)mCOOH или Y- CH(COOH)-(CH2)p-CH3, когда A - H; или A и B ковалентно связаны с образованием пяти- (5), шести- (6) или семи (7)-членного циклоалкила, замещенного COOH; где: Y - O, S, NH или CH2; W - О, S или NH; m = 0-2; и p = 3-7; заместитель D - CO(CH2)nCH3 или CHOH(CH2)nCH3, или О(CH2)nCH3, когда n = 2-6; и заместитель E - H или F, или его соли для получения лекарственного средства для предотвращения и/или лечения остеопороза, применение для получения лекарственного средства для стимуляции образования костной ткани и применение для получения лекарственного средства для стимуляции образования или ремоделирования костной ткани.

Изобретение относится к области биологии и медицины. Предложено применение кристаллического аскорбата лития общей формулы LiС6Н7О6 в качестве средства, индуцирующего продукцию интерлейкина-8. Изобретение расширяет арсенал индукторов интерлейкина-8 и может быть использовано в клеточной биологии, экспериментальной медицине, фармакологии. 1 табл., 1 пр.

Наверх