Способ потенцирования активности противоопухолевых цитостатических препаратов



Способ потенцирования активности противоопухолевых цитостатических препаратов
Способ потенцирования активности противоопухолевых цитостатических препаратов
Способ потенцирования активности противоопухолевых цитостатических препаратов
Способ потенцирования активности противоопухолевых цитостатических препаратов

Владельцы патента RU 2714140:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "48 Центральный научно-исследовательский институт" Министерство обороны Российской Федерации (RU)
Российская Федерация, от имени которой выступает Министерство обороны Российской Федерации (RU)

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и касается потенцирования активности цитостатического препарата. В дополнение к цитостатическому препарату цисплатину вводят микотоксин Т-2 в субтоксических дозах. Такое сочетанное введение в условиях эксперимента обеспечивает торможение роста опухоли и снижение метастазирования за счет синергетического действия указанных препаратов. 2 пр., 1 таб.

 

Предлагаемое изобретение относится к области медицинской микро-биологии и фармакологии и может быть использовано для сочетанной терапии злокачественных новообразований. Смертность от злокачественных новообразований занимает одно из первых мест в причинах смертности населения, как в РФ, так и за рубежом. В мире ежегодно регистрируют приблизительно 10 млн. случаев злокачественных новообразований, из них на развитые страны приходится около 48%, в связи с этим разработка новых противоопухолевых препаратов является актуальной задачей [Соухами Р., Тобайас Дж. Рак и его лечение //Пер. с англ. - М.: БИНОМ. Лаборатория знаний, 2009. - 437 с.].

Одним из вариантов увеличения эффективности терапии злокачественных новообразований является сочетанное применение различных препаратов, обладающих противоопухолевым действием (цитостатиков). В настоящее время список цитостатиков обширен и включает в себя несколько классов веществ с различным механизмом действия. Все имеющиеся на сегодняшний день протоколы комбинированной противоопухолевой терапии имеют свои ограничения и недостатки, связанные с токсичностью применяемых препаратов, возможностью возникновения опухолевой резистентности и др., поэтому разработка новых вариантов и схем совместного применения противоопухолевых препаратов также актуальна.

Среди биотехнологических препаратов, обладающих противоопухолевым действием, особое место занимает микотоксин Т-2. Микотоксин Т-2 в очищенном виде представляет собой бесцветные (белые или серые в зависимости от уровня очистки) кристаллы [Тутелян В.А. Микотоксины. Медицинские и биологические аспекты //АМН СССР. - М.: Медицина, 1985. - 320 с.].

Относится к низкомолекулярным соединениям - сесквитерпенам, исключительно устойчивым в физическом и химическом плане. Молекулярная масса Т-2 токсина равна 466 (химическая формула С24Н34О9), точка плавления 151°С. Хорошо хранится при комнатной температуре в течение нескольких лет, выдерживает воздействие температуры до 600°С, длительное УФ-облучение и действие других факторов внешней среды. Т-2 токсин хорошо растворяется в умеренно полярных растворителях (хлороформ, этилацетат), несколько меньше в более полярных растворителях (этанол), еще меньше - в воде.

Уровни токсических доз в зависимости от вида млекопитающего и места аппликации находятся в диапазоне 1,0-10,0 мг⋅кг-1 массы тела. Он проникает в организм через неповрежденные кожные покровы, слизистые, желудочно-кишечный тракт, органы дыхания (пути проникновения указаны в порядке снижения токсической дозы).

Исследования тонких механизмов действия Т-2 показали множественность мишеней его приложения на молекулярном, клеточном, органном, системном и организменном уровнях [Зайченко A.M. Макроциклические трихотеценовые микотоксины: биологическая активность // Современные проблемы токсикологии. - 2006. - №3. - С. 59-66]. Даже в наноколичествах он способен нарушать функции клеточных мембран, митохондрий, ингибировать синтез белка, ферментов, нуклеиновых кислот, оказывать заметное цитостатическое действие на быстроделящиеся клетки. Т-2 токсин является уникальным веществом, способным в субтоксичных дозах (1/10 ЛД50 и менее) потенцировать действие химических (разные токсиканты-цитостатики) и физических (ионизирующая радиация) факторов на организм и отдельные ткани животных, при этом сочетанное взаимодействие идет по выраженному синергидному типу, когда комбинированное действие двух веществ существенно превосходит простое суммирование действия каждого из факторов по отдельности [Кадиков И.Р. Сочетанное действие диоксидина и Т-2 токсина на организм животных и оценка эффективности лекарственных средств: дисс. канд. биол. наук. - Казань, 2008. - 108 с.].

Противоопухолевый эффект микотоксина Т-2 был отмечен еще в конце прошлого столетия, однако, ввиду высокой токсичности, данный препарат не нашел своего клинического применения. Попытки использовать микотоксин Т-2 в качестве противоопухолевого средства привели к созданию опытного целевого препарата на основе моноклональных антител и микотоксина. Такой конъюгат оказался токсичен в отношении клеток тимомы EL-4 [Anti-tumor activity of T-2 toxin-conjugated monoclonal antibody to murine thymoma / Ohtani K., Murakami H., Shibuya O. et al //Jpn. J. Exp. Med. - 1990. - Vol. 60, №2. - P. 57-65; Ohtani K., Ueno Y. Selective antitumor activity of T-2 toxin-antibody conjugates // Microbial Toxins in Foods and Feeds. - 1990. - P. 403-409].

На основании этого предлагается использовать известные противоопухолевые эффекты микотоксина Т-2 в комбинации с иными противоопухолевыми химиотерапевтическими препаратами, например цисплатином, что позволило бы за счет их синергидного действия повысить эффективность противоопухолевой терапии.

Противоопухолевое действие микотоксина Т-2 изучали на перевиваемой опухоли мышей меланомы В16, входящей в число обязательных моделей опухолей животных, которые используются при отборе новых противоопухолевых веществ [Методические указания по изучению противоопухолевой активности фармакологических веществ / Трещалина Е.М., Жукова О.С., Герасимова Г.К. и др. //Руководство по экспериментальному (доклиническому) изучению новых фармакологических веществ. - 2-изд., перераб. и доп. - М.: Медицина, 2005. - С. 637-651]. Опухолевый штамм был приобретен в Учреждении Российской академии медицинских наук «Российский онкологический научный центр имени Н.Н. Блохина РАМН» г. Москва. В качестве эталонного цитостатика использовали цисплатин - препарат алкилирующего ряда, действие которого основано на алкилировании цепей ДНК в пролиферирующих опухолевых клетках.

При получении микотоксина Т-2 использовали общепринятые методические подходы [Chemical interconversion of Т-2 and НТ-2 toxins and related com-pounds / Wei R.D., Strong F.M., Smalley E.B. et al. // Biochem. Biophys. Res. Commun. - 1971. - Vol. 45. - P. 396-4018; Smalley E.B., Caldwell R.W. New process for T-2 toxin production // Appl. Environ. Microbiol. - 1982. - Vol. 44, №2. - P. 371-375]. В опыте использовали мышей линии C57BL/6 обоего пола, массой 20-25 г. Животные были приобретены в питомнике лабораторных животных Учреждения Российской академии наук «Институт биоорганической химии им. академиков М.М. Шемякина и Ю.А. Овчинникова РАН» (ИБХ РАН), г. Пущине Опухоль трансплантировали путем подкожного введения в область передней конечности ближе к позвоночнику в объеме 0,2 мл (200 тыс. клеток) на мышь. Для оценки специфического противоопухолевого эффекта препарат микотоксина Т-2 вводили в двух дозировках трехкратно двумя курсами: 5 (1/10 ЛД50) мкг (группа 1) и 10 мкг (1/5 ЛД50) на одно животное (группа 2), трехкратно (через сутки), подкожно, через 48 часов после имплантации опухолевых клеток. Повторный курс введения препарата микотоксина Т-2 по той же схеме проводили через 14 суток.

Изучалась также возможность комбинированного применения микотоксина Т-2 и цисплатина. Препарат микотоксина Т-2 вводили по схеме, аналогичной монотерапии, в дозе 10 мкг (группа 3) и 5 мкг на одно животное (группа 4). Противоопухолевый препарат цисплатин вводили внутрибрюшинно однократно двумя курсами: через 48 часов и 14 суток после имплантации опухолевых клеток. У лабораторных животных в группе 3 препарат цисплатин использовали в дозе 50 мкг, в группе 4-25 мкг на одно животное.

Кроме того, противоопухолевый препарат цисплатин исследовался в качестве монотерапии (группа 5). Животным данной группы препарат вводился также двумя курсами (через 48 часов и 14 суток после имплантации опухолевых клеток), внутрибрюшинно однократно в дозе 50 мкг на мышь. В качестве контрольной группы (группа 6) использовали мышей той же линии без введения исследуемых препаратов.

Противоопухолевый эффект оценивали по следующим общепринятым показателям: торможению роста опухоли (ТРО), увеличению продолжительности жизни (УПЖ) и уровню метастазирования.

Расчет индекса торможения роста опухоли проводили следующим образом. Начиная с 12-14 суток с момента имплантации опухоли, проводили 3 измерения опухолевых узлов - через каждые 5-7 дней (в зависимости от интенсивности опухолевого роста). Для этого с помощью штангенциркуля определяли два размера (длину и ширину) опухолевых узлов. Объем (V, мм3) вычисляли по формуле (1):

где:

а - длина опухолевого узла, мм,

b - ширина опухолевого узла, мм.

Индекс торможения роста опухоли (ТРО) рассчитывали по формуле (2):

где:

ТРО - индекс торможения роста опухоли, %;

Vконтроля - средний объем опухоли в контрольной группе, мм3;

Vопыта - средний объем опухоли в опытной группе, мм3.

Примечание: эффект считали значимым при значении ТРО≥70%, УПЖ≥25%.

Индекс увеличения продолжительности жизни (УПЖ) рассчитывали по формуле (3):

где:

СПЖопыта - средняя продолжительность жизни животных в опытной группе, дни;

СПЖконтроля - средняя продолжительность жизни животных в контрольной группе, дни.

Изучение влияния на метастатическую активность опухоли осуществляли путем оценки доли животных с метастазами в каждой группе. Результаты эксперимента приведены в таблице 1.

Как следует из представленных в таблице данных, во всех экспериментальных группах на все сроки наблюдения отмечается существенное торможение роста опухоли. Монотерапия цисплатином приводит к сокращению размеров опухолевого узла порядка 40%, в то время как в группе животных с монотерапией микотоксином Т-2 индекс ТРО находится в районе 50-70%. С учетом того, что применение микотоксина позволяет добиться увеличения продолжительности жизни лабораторных животных и снижает долю животных с метастазами, необходимо отметить, что эффективность монотерапии препаратом микотоксина Т-2 не только не уступает эффективности монотерапии цисплатином, но и превосходит ее.

Наибольшие значения индекса ТРО наблюдаются в группах сочетанного применения цисплатина и микотоксина Т-2: в зависимости от срока наблюдения он составляет от 78,2% до 87,4%. В данных группах также отмечены наибольшие показатели продолжительности жизни лабораторных животных и наименьшие показатели метастазирования.

Таким образом, применение микотоксина Т-2 как в монотерапии, так и в сочетании с цитостатиком цисплатином ведет к развитию клинически значимого эффекта в отношении опухолевых графтов меланомы В16, что выражается в уменьшении размеров опухолевых узлов, увеличении продолжительности жизни лабораторных животных и снижении метастазирования. Все это позволяет рассматривать микотоксин Т-2 в качестве противоопухолевого препарата и средства для потенцирования противоопухолевого эффекта цисплатина.

Пример 1. Взвесь клеток меланомы В16 в количестве 200 тыс. клеток была введена мыши C57BL/6 в объеме 0,2 мл физиологического раствора хлорида натрия в область правой лопатки. На 18 сутки после перевивки объем опухоли составил 4630 мм2, на 23 сутки - 9800 мм2, на 28 сутки мышь пала. При вскрытии обнаружены метастазы в легких в количестве 9 узлов.

Пример 2. Взвесь клеток меланомы В16 в количестве 200 тыс.клеток была введена мыши C57BL/6 в объеме 0,2 мл физиологического раствора хлорида натрия в область правой лопатки. Через 48 часов после перевивки опухоли мыши ввели 50 мкг цисплатина внутрибрюшинно. В течение 3 суток животное получало по 10 мкг препарата микотоксина Т-2, через 14 дней проведен повторный курс введения микотоксина. На 18 сутки после перевивки объем опухоли составил 792 мм2, на 23 сутки - 1014 мм2, на 28 сутки - 1098 мм2, при вскрытии на 25 сутки в легких обнаружены 3 метастатических узла.

Способ подавления опухолевого роста путем введения цисплатина, отличающийся тем, что дополнительно для потенцирования цитостатического эффекта вводят микотоксин Т-2 в субтоксических дозах.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к области фармацевтики. Предложена фармацевтическая композиция для лечения рака молочной железы на основе доксорубицина в фосфолипидной матрице с размером частиц 10-20 нм, включающая фосфолипид растительного происхождения с содержанием фосфатидилхолина не менее 95%, доксорубицина гидрохлорид и мальтозу при следующем соотношении компонентов, мас.%: доксорубицина гидрохлорид - 0,9-1,1; фосфолипид - 18-22; мальтозы моногидрат - 76,9-81,1.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к иммуногенным пептидам, и может быть использовано для получения антиген-презентирующей клетки, обладающей активностью в отношении индукции цитотоксической Т-клетки (CTL), нацеленной на GPC3-экспрессирующую раковую клетку.

Настоящее изобретение относится к области иммунологии и биотехнологии. Предложены новые варианты антител или их антигенсвязывающих фрагментов, которые специфично связываются с ММР9 и содержат вариабельные области тяжелой и легкой цепей, каждая из которых характеризуется наличием по меньшей мере соответствующих CDRs1-3.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и может быть использовано для определения времени достижения максимальной концентрации фотосенсибилизатора (ФС) хлоринового ряда - хлорин е6 лизин димеглюминовая соль в тканях организма после его введения.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии и может быть использовано для персонализированного лечения больных раком желудка на основе панели молекулярно-генетических маркеров.

Изобретение относится к биохимии и медицине. Предложен способ лечения субъекта с раком толстого кишечника или раком легких, где раковые клетки экспрессируют теломеразу и характеризуются избыточной активацией теломеразы.

Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии и челюстно-лицевой хирургии, и может быть использовано для лечения начальных стадий рака полости рта и губы при глубине инвазии не более 7 мм.
Изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, урологии, и может быть использовано в способе комбинированного лечения мышечно-инвазивного рака мочевого пузыря Т3-Т4 N0-+M0, включающем проведение неоадъюватной химиотерапии по схеме - цисплатин 75 мг/м2 и гемцитабин - 1000 мг/м2 в 1-й день с повтором через каждый 21 день.

Изобретение относится к новому соединению формулы (I) или его фармацевтически приемлемой соли. Соединения обладают свойствами ингибитора Akt киназы, Rsk киназы или S6K киназы и могут быть использованы в качестве противоопухолевого средства.

Предложено соединение формулы II где: X1 - CR7; X2 выбирается из группы, содержащей N и CR10; каждый из радикалов R1, R3 и R4 независимо выбирается из группы, содержащей -Н, галогены, замещенные или незамещенные алкилы с 1-8 атомами углерода, незамещенные циклоалкилы с 3-6 атомами углерода, -C(O)NRARB, -ORA, -NRARB, -S(O)2RA, незамещенный фенил и замещенный или незамещенный оксетан или пиперазин; R2 независимо выбирается из группы, содержащей -Н, галогены, замещенные или незамещенные алкилы с 1-8 атомами углерода, незамещенные циклоалкилы с 3-6 атомами углерода, -C(O)NRARB, -ORA, -NRARB, -S(O)2RA, замещенный или незамещенный фенил и незамещенный оксетан или пиперазин; каждый из радикалов R7, R10 и R11 независимо выбирается из группы, содержащей -Н и незамещенные алкилы с 1-8 атомами углерода; каждый из радикалов R5 и R6 независимо выбирается из группы, содержащей -Н, галогены и незамещенные алкилы с 1-8 атомами углерода; каждый из радикалов R8 и R9 независимо выбирается из группы, содержащей -Н и галогены; каждый из радикалов RA и RB при наличии независимо выбирается из группы, содержащей -Н, галогены, замещенные или незамещенные алкилы с 1-8 атомами углерода, замещенные или незамещенные циклоалкилы с 3-6 атомами углерода; в тех случаях, когда в качестве X1 выбран N, в качестве X2 выбран СН, а в качестве каждого из радикалов R1, R2, R3, R4, R8, R9 и R11 выбран водорода, заместители для замещенного алкила независимо выбраны из амино, алкиламино, алкокси, алкилсульфанил, оксо (=О), гало, ацил, нитро, гидроксил, циано, тион (=S) и имино; заместители для замещенного циклоалкила независимо выбраны из галогена и незамещенного алкила с 1-8 атомами углерода, или фармацевтически приемлемая соль для ингибирования активности тубулина.
Группа изобретений относится к уходу за полостью рта. Композиция для ухода за полостью рта содержит первую композицию, содержащую абразив на основе диоксида кремния и цитрат цинка в количестве от 0,1 до 1 вес.

Настоящее изобретение относится к области биотехнологии, конкретно к иммуногенным пептидам, и может быть использовано для получения антиген-презентирующей клетки, обладающей активностью в отношении индукции цитотоксической Т-клетки (CTL), нацеленной на GPC3-экспрессирующую раковую клетку.

Изобретение относится к области биотехнологии и иммунологии. Предложен способ получения Fc-области класса IgG человека, содержащей первый вариантный полипептид Fc-области и второй вариантный полипептид Fc-области.

Настоящее изобретение относится к области иммунологии и биотехнологии. Предложены новые варианты антител или их антигенсвязывающих фрагментов, которые специфично связываются с ММР9 и содержат вариабельные области тяжелой и легкой цепей, каждая из которых характеризуется наличием по меньшей мере соответствующих CDRs1-3.

Группа изобретений относится к области медицины, а именно к офтальмологии, и предназначена для лечения офтальмологических заболеваний путем субконъюнктивального инъекционного введения.
Изобретение относится к области применения композиций для ухода за полостью рта, содержащих основную аминокислоту аргинин. Предлагаемый способ повышения или усиления экспрессии HSP27 в ткани полости рта предусматривает нанесение на ткань полости рта композиции для ухода за полостью рта, содержащей основную аминокислоту или ее соль в количестве от 0,005 вес.% до 0,02 вес.% по общему весу композиции и приемлемый для применения в полости рта носитель, при этом основная аминокислота представляет собой аргинин.
Изобретение относится к области ветеринарии, в частности к способу профилактики заболеваний дистального отдела конечностей крупного рогатого скота. Для этого на выходе доильного зала сухой копытной ванны из наполнителя в виде минеральной основы и действующего вещества в качестве действующего вещества используют травяной сбор антисептического, бактерицидного действия, состоящий из цветков ромашки аптечной, корней и стебля чистотела и тысячелистника, ноготков календулы, листьев лопуха, взятых в равном соотношении, который подвергают естественной сушке до влажности не более 12%, измельчают до порошкообразного состояния, смешивают с минеральной основой в соотношении 1:14 и перед использованием в полученную смесь добавляют древесные опилки в соотношении 2:1.

Настоящее изобретение относится к применимому в медицине и фармацевтике соединению формулы (1), композициям и продуктам на его основе, способу лечения с его использованием: (1).Предложено новое соединение (1aS,1bS,2S,4S,5aR,6S,6aS)-1a-(гидроксиметил)-4-метокси-2-(((2S,3R,4S,5S,6R)-3,4,5-тригидрокси-6-(гидроксиметил)тетрагидро-2Н-пиран-2-ил)окси)октагидрооксирено[2',3':4,5]циклопента[1,2-с]пиран-6-ил-4-гидроксибензоат, эффективное для предотвращения или облегчения аллергического заболевания, воспалительного заболевания, астмы или хронической обструктивной болезни легких, фармацевтическая композиция на его основе для получения лекарственных средств, а также функциональный пищевой продукт и пищевой продукт лечебного назначения, содержащий терапевтически эффективное количество соединения по п.

Изобретение относится к применению сополимера для стабилизации пероксидного соединения в отношении деструкции, к вариантам сополимера, к составу для отбеливания зубов, к препаративной форме, к способу стабилизации пероксидного соединения.

Изобретение относится к биохимии и медицине. Предложен способ лечения субъекта с раком толстого кишечника или раком легких, где раковые клетки экспрессируют теломеразу и характеризуются избыточной активацией теломеразы.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложено терапевтическое средство для лечения человека, имеющего рак, содержащее рекомбинантный ортопоксвирус MVA-BN и антагонист анти-PD-1, который представляет собой антитело. Предложен способ лечения человека, имеющего рак, включающий введение пациенту рекомбинантного ортопоксвируса MVA-BN и вышеуказанного антагониста. Предложенная группа изобретений обеспечивает достижение синергетического эффекта, который связан с рекомбинантным ортопоксвирусом и антагонистом анти-PD-1. 2 н. и 20 з.п. ф-лы, 23 ил., 24 пр.

Настоящее изобретение относится к медицине, а именно к онкологии, и касается потенцирования активности цитостатического препарата. В дополнение к цитостатическому препарату цисплатину вводят микотоксин Т-2 в субтоксических дозах. Такое сочетанное введение в условиях эксперимента обеспечивает торможение роста опухоли и снижение метастазирования за счет синергетического действия указанных препаратов. 2 пр., 1 таб.

Наверх