Способ улучшения функции мочевого пузыря
Группа изобретений относится к медицине и фармации. Предложено применение i) уридина и/или эквивалента, выбранного из группы, состоящей из дезоксиуридина, уридин фосфатов, нуклеинового основания урацила и/или ацилированных производных уридина и/или сложных эфиров и (ii) n-3 полиненасыщенных жирных кислот (PUFA) для производства композиции для восстановления или улучшения функции мочевого пузыря у субъекта, имеющего нарушенную функцию мочевого пузыря и где субъектом является пациент, который страдает, выздоравливает от, и/или страдал неврологическим нарушением и соответствующий способ лечения указанного нарушения. Технический результат состоит в сокращении (с 12 до 2 дней) сроков восстановления рефлекторной способности мочевого пузыря к опорожнению на модели статистического сдавливания спинного мозга на уровне Т12 грудного отдела позвоночника. 2 н. и 19 з.п. ф-лы, 2 табл., 2 пр.
Изобретение относится к области лечебного питания, и более конкретно, относится к композициям, используемым для улучшения функции мочевого пузыря. В предпочтительном аспекте изобретение относится к улучшению функции мочевого пузыря у пациентов, страдающих неврологическим нарушением.
ПРЕДПОСЫЛКИ СОЗДАНИЯ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Нарушение функции мочевого пузыря, дисфункция мочевого пузыря или недержание мочи является распространенной и серьезной проблемой, которая может оказывать сильное влияние на жизнь человека. Основной причиной нарушения функции мочевого пузыря является нарушение иннервации мочевого пузыря, которое часто связано с неврологическими нарушениями, такими как повреждение головного мозга, повреждение спинного мозга, повреждение крестцового сплетения и повреждение периферических нервов. Эти неврологические нарушения могут приводить к нарушению иннервации мочевого пузыря. Поскольку необходима координация между центрами, ответственными за мочеиспускание, повреждение любого из этих участков часто приводит к нейрогенной дисфункции мочевого пузыря.
Нарушение функции мочевого пузыря неврологического происхождения также может быть названо «нейрогенным мочевым пузырем». Любое поражение нервной системы, например, на уровне головного мозга, спинного мозга, крестцового сплетения или периферических нервов может являться причиной дисфункции мочевого пузыря.
Нормальное функционирование мочевого пузыря регулируется за счет синергического взаимодействия мышц детрузора и сфинктера мочевого пузыря. Обычно они имеют две функции, а именно: сбор и удержание мочи, и опорожнение мочевого пузыря без остатка, когда это необходимо. Мышца детрузора состоит из гладких мышечных волокон, которые могут сокращаться, способствуя опорожнению мочевого пузыря. При растяжении стенок мочевого пузыря посылается сигнал парасимпатической нервной системе о том, что мочевой пузырь полон, и, следовательно, необходимо сокращение детрузора для выпускания избытка мочи. Внутренние и внешние уретральные сфинктеры обычно находятся в состоянии сокращения, предотвращая опорожнение мочевого пузыря, и расслабляются для выпускания мочи. Внутренний сфинктер контролируется автономно, а внешний сфинктер может контролироваться сознательно. Как детрузор, так и сфинктер, могут находиться в состоянии расслабления или сокращения.
Дисфункция мочевого пузыря, главным образом, может быть отнесена к 2 категориям: неспособность к удержанию и неспособность к опорожнению. Неспособность к удержанию, в основном, является результатом гиперрефлексивного детрузора или арефлексивного сфинктера. Неспособность к опорожнению, в основном, возникает в результате арефлексивного детрузора и гиперрефлексивного сфинктера.
Парасимпатическая иннервация мочевого пузыря обеспечивается эфферентными нервными волокнами, исходящими из области S2-S4 крестцового сплетения и направляющимися к мочевому пузырю в составе тазового нерва. Парасимпатическая стимуляция вызывает сокращение детрузора и, следовательно, сокращение мочевого пузыря, приводящее к эвакуации мочи. Симпатические эфферентные нервные волокна исходят из области T11-L2 и направляются к мочевому пузырю и уретре в составе подчревного нерва. B-адренергические рецепторы в теле мочевого пузыря вызывают расслабление гладкомышечных клеток, в то время как A-рецепторы в основании мочевого пузыря и уретре вызывают сокращение этих клеток. Соматические эфферентные волокна исходят из области S1-S4 крестцового сплетения и проходят в составе срамного нерва, иннервируя внешний уретральный сфинктер, который может контролироваться сознательно.
Координация функционирования мочевого пузыря и сфинктера-детрузора происходит в головном мозге, в центре мочеиспускания в варолиевом мосту, который при активации способствует расслаблению уретрального сфинктера. Этот центр напрямую взаимодействует с центрами мочеиспускания в крестцовом сплетении, координируя мочеиспускание, для которого необходимо расслабление сфинктера и сокращение детрузора. Центр мочеиспускания в крестцовом сплетении получает сигналы при растяжении мочевого пузыря (то есть, сигнал о том, что пузырь полон) и запускает рефлекторное опорожнение. Центр мочеиспускания в варолиевом мосту развивается по мере взросления ребенка, так что человек приобретает способность контролировать опорожнение и не опорожнять мочевой пузырь рефлекторно. Сознательный контроль мочеиспускания осуществляется в медиальном отделе лобной доли и мозолистом теле головного мозга.
В настоящее время не существует эффективного лечения неврологических нарушений функции мочевого пузыря.
В течение последнего десятилетия уридин, холин и n-3 жирные кислоты, такие как докозагексаеновые кислоты (DHA), привлекли внимание в качестве активных компонентов для лечения когнитивной дисфункции и возрастного нарушения памяти (AAMI), смотри, например, WO 2007/089703 (Massachusetts Institute of Technology) и WO 2009/002165 (N.V. Nutricia). Эти соединения являются скорость-лимитирующими предшественниками в синтезе фосфатидов мембран. Согласно приведенным выше публикациям, считается, что за счет улучшения синтеза фосфатидов мембран можно улучшать когнитивную функцию или память. Эффекты на мембранные фосфолипиды связаны с увеличением содержания специфических пре- и постсинаптических белков.
В WO 2013/066165 и WO 2013/066167 (N.V. Nutricia) описан препарат, содержащий (i) одно или более из уридина и цитидина, либо их соли, фосфаты, ацильные производные или сложные эфиры, и (ii) липидную фракцию, содержащую по меньшей мере одну из докозагексаеновой кислоты (22:6; DHA), эйкозапентаеновой кислоты (20:5; EPA) и докозапентаеновой кислоты (22:5; DPA) или их сложные эфиры. Функции узнавания и исполнения, такие как скорость обработки информации, познавательная и ментальная гибкость, внимание, визуальный поиск и переключение при выполнении когнитивных задач, могут быть улучшены при введении композиции, в частности, у пациентов с болезнью Альцгеймера или с деменцией. В WO 2012/125020 описан аналогичный препарат для использования в предотвращении или лечении неврологической травмы, травматического повреждения головного мозга, церебрального паралича и травмы спинного мозга, действие которого направлено на выживание нейронов. Также было показано, что тот же препарат вызывает усиление образования и функции мембран в клинических испытаниях с участием пациентов, страдающих болезнью Альцгеймера (AD) (Scheltens et al. в Alzheimer's & Dementia 2010, 6, 1-10, и в J. Alzheimers Dis. 2012, 31, 225-236).
От повреждения спинного мозга (SCI) страдает значительное количество людей во всем мире. Несмотря на рост показателей выживаемости благодаря успехам в области экстренной медицинской помощи, имеет место нехватка нейропротективных или нейрорегенеративных методов лечения, и многие пациенты с SCI страдают на протяжении всей жизни от моторных и сенсорных нарушений. Это оказывает существенное влияние на качество и среднюю продолжительность жизни пациентов, а также влечет за собой увеличение бремени расходов на здравоохранение.
Обзор эффективности n-3 жирных кислот для контроля и улучшения состояния при травме спинного мозга приведен в статье Michael-Titus et al. (в Trends in Neurosciences, 2014, 37, 30-38). В статье Figueroa et al. (в J. Neurotrauma, 2013, 30, 853-868) описано, что профилактическое введение n-3 полиненасыщенных жирных кислот (PUFA) приводит к улучшению показателей функционального восстановления функции мочевого пузыря после повреждения спинного мозга.
СУЩНОСТЬ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Авторы изобретения неожиданно обнаружили, что композиция, содержащая уридин и/или его эквивалент и n-3 PUFA, эффективна для улучшения функции мочевого пузыря, в частности, улучшения функции мочевого пузыря у пациентов, которые страдают, выздоравливают от, и/или страдали неврологическим нарушением. Без привязки к конкретной теории, считается, что смесь уридина и n-3 PUFA может улучшать неврологическую функцию мочевого пузыря и связь между мочевым пузырем и головным мозгом за счет поддержания регенеративных процессов, происходящих, например, после повреждения спинного мозга. Пример показывает, что композиция по изобретению действительно приводит к значительному улучшению функции мочевого пузыря. Функция мочевого пузыря восстанавливается значительно быстрее после введения композиции по изобретению.
Таким образом, настоящее изобретение относится к способу восстановления или улучшения функции мочевого пузыря у субъекта, включающему введение субъекту композиции, содержащей (i) уридин и/или его эквивалент и (ii) n-3 PUFA. Можно также сказать, что изобретение относится к применению (i) уридина и/или его эквивалента и (ii) n-3 PUFA для производства композиции, предназначенной для восстановления или улучшения функции мочевого пузыря у субъекта.
Иными словами, изобретение относится к композиции, применяемой для восстановления или улучшения функции мочевого пузыря у субъекта, содержащей (i) уридин и/или его эквивалент и (ii) n-3 PUFA. Изобретение также относится к сочетанию (i) уридина и/или его эквивалента и (ii) n-3 PUFA, применяемому для восстановления или улучшения функции мочевого пузыря у субъекта.
В первом предпочтительном варианте осуществления уридин и/или его эквивалент, упомянутый в контексте изобретения, представляет собой уридина монофосфат. Во втором предпочтительном варианте осуществления n-3 PUFA выбирают из EPA и/или DHA, предпочтительно, по меньшей мере DHA. В третьем предпочтительном варианте осуществления композиция дополнительно содержит одно или более из холина, витамина(ов) группы B, при этом указанный витамин(ы) группы B предпочтительно включает или представляет собой по меньшей мере фолиевую кислоту, более предпочтительно, по меньшей мере фолиевую кислоту и витамин B6, а также антиоксидантов. В четвертом предпочтительном варианте осуществления композиция содержит по меньшей мере холин. В наиболее предпочтительном варианте осуществления композиция дополнительно содержит холин, фолиевую кислоту, витамин B6, антиоксиданты и фосфолипиды. В пятом предпочтительном варианте осуществления субъект является пациентом, который страдает, выздоравливает и/или страдал от неврологического нарушения, предпочтительно в результате повреждения спинного мозга. В шестом предпочтительном варианте осуществления композиция содержит в 100 мл: (i) 400-800 мг УМФ; (ii) n-3 PUFA, включающие (a) 100-500 мг EPA и (b) 900-1500 мг DHA; (iii) 50-600 мг фосфолипидов; (iv) 200-600 мг холина; (v) витамины группы B, включающие (a) 1-5 мкг витамина B12, (b) 0,5-3 мг витамина B6 и (c) 200-600 мкг фолиевой кислоты; и (vi) антиоксиданты, включающие (a) 20-60 мг витамина E (альфа-TE), (b) 60-100 мг витамина C и (c) 40-80 мкг селена. В седьмом предпочтительном варианте осуществления композиция представляет собой жидкость или твердое вещество, которое может быть восстановлено в жидкости.
ПОДРОБНОЕ ОПИСАНИЕ ИЗОБРЕТЕНИЯ
Настоящее изобретение относится к способу улучшения (нарушенной) функции мочевого пузыря у субъекта, включающему введение композиции указанному субъекту, при этом указанная композиция содержит (i) уридин и/или его эквивалент и (ii) n-3 PUFA. Предпочтительно, композиция по изобретению дополнительно содержит одно или более из холина и витамина(ов) группы B, предпочтительно, также содержит антиоксиданты, более предпочтительно, также содержит фосфолипиды.
Альтернативно, изобретение также относится к композиции, применяемой для улучшения (нарушенной) функции мочевого пузыря у субъекта, при этом указанная композиция является такой, как отмечено выше и более подробно описано ниже в настоящем документе. Кроме того, изобретение относится к применению (i) уридина и/или его эквивалента и (ii) n-3 PUFA в производстве композиции для улучшения (нарушенной) функции мочевого пузыря у субъекта, при этом указанная композиция является такой, как отмечено выше и более подробно описано ниже в настоящем документе.
Компоненты (i) и (ii) присутствуют в терапевтически эффективных количествах.
Композиция
Способ или применение композиции, используемой в соответствии с изобретением, включает введение композиции по изобретению. Композиция по изобретению может быть использована в качестве фармацевтического препарата или питательного продукта.
В одном аспекте композиция по изобретению может быть использована в качестве фармацевтического препарата, содержащего один или более фармацевтически приемлемых материалов-носителей. Такой препарат может содержать суточную дозу, определенную ниже, в одной или более единичных дозах. Единичная доза может находиться в жидкой форме или в твердой форме, при этом в последнем случае суточная доза может быть обеспечена одной или более твердыми единичными дозами, например, в одной или более капсулах, или таблетках. Фармацевтический препарат, предпочтительно для энтерального введения, может представлять собой твердый или жидкий галенов препарат. Примерами твердых галеновых препаратов являются таблетки, капсулы (например, твердые или мягкие желатиновые капсулы), пилюли, саше, порошки, гранулы и тому подобное, содержащие активные ингредиенты в сочетании с общепринятыми галеновыми носителями. Можно использовать любой общепринятый материал-носитель. Материал-носитель может представлять собой органический или неорганический инертный материал-носитель, подходящий для перорального введения. Подходящие носители включают воду, желатин, гуммиарабик, лактозу, крахмал, стеарат магния, тальк, растительные масла, и тому подобное. Кроме того, можно вносить добавки, такие как вкусо-ароматические добавки, консерванты, стабилизаторы, эмульгаторы, буферы и тому подобное, в соответствии с принятой практикой составления фармацевтических препаратов. Хотя отдельные активные ингредиенты удобно вводить в одной композиции, их также можно вводить в отдельных единичных дозах.
В предпочтительном аспекте композиция по изобретению может быть использована в качестве питательного продукта, например, в виде питательной добавки, например, в виде добавки к обычной диете, в виде обогатителя, добавляемого к обычной диете, или в виде полноценного питательного продукта. Питательный продукт предпочтительно содержит по меньшей мере один компонент, предпочтительно все компоненты, выбранные из группы жиров, белков и углеводов. Понятно, что питательный продукт отличается от фармацевтического препарата наличием питательных компонентов, обеспечивающих питательные вещества для субъекта, которому вводят композицию, в частности, наличием белка, жира, усваиваемых углеводов и пищевых волокон. Он также может содержать такие ингредиенты, как минералы, витамины, органические кислоты и вкусо-ароматические добавки. Хотя термин «питательный продукт» часто используется в литературе, он означает питательный продукт с фармацевтическим компонентом или для фармацевтических целей. Таким образом, питательная композиция по изобретению также может быть использована в питательном продукте.
В одном варианте осуществления продукт содержит липидную фракцию и по меньшей мере одно из углеводов и белков, при этом липидная композиция обеспечивает от 20 до 50% энергетической ценности пищевого продукта. В одном варианте осуществления пищевой продукт представляет собой жидкую композицию, содержащую от 0,8 до 1,4 ккал на мл.
Композиция по изобретению, как правило, представляет собой энтеральную композицию, то есть, предназначенную для перорального введения. Ее предпочтительно вводят в жидкой форме. Предпочтительно, композиция содержит воду, в которой остальные компоненты растворены или суспендированы.
Таким образом, композиция предпочтительно представляет собой жидкость или твердое вещество (как правило, порошок или таблетку, предпочтительно порошок), которое может быть восстановлено в жидкости, предпочтительно в воде, с получением жидкой композиции. Дозы компонентов, приведенные ниже, могут, например, представлять собой суточную дозу или концентрацию в расчете на 100 мл. Последний вариант также применим к восстанавливаемым твердым веществам, и доза должна быть определена после восстановления в жидкости.
Уридин
Настоящая композиция содержит (i) уридин и/или его эквивалент. Эквиваленты уридина известны в данной области и, как правило, включают дезоксиуридин (дезоксирибозил урацил), уридин фосфаты (УМФ, дУМФ, УДФ, УТФ), нуклеиновое основание урацил, ацилированные производные уридина (например, C1-6 ацилированный уридин) и/или сложные эфиры (например, C1-6 алканоатный сложный эфир). Композиция предпочтительно содержит компонент (i), выбранный из уридина (рибозил урацила), дезоксиуридина (дезоксирибозил урацила), уридин фосфатов (УМФ, дУМФ, УДФ, УТФ), нуклеинового основания урацила, ацилированных производных уридина и их смесей, более предпочтительно, уридин фосфат, выбранный из уридина монофосфата (УМФ), уридин дифосфата (УДФ) и уридин трифосфата (УТФ). Наиболее предпочтительно, композиция содержит УМФ, поскольку УМФ наиболее эффективно поглощается организмом. Таким образом, включение УМФ в настоящую композицию позволяет достигать высокой эффективности при самой низкой дозе и/или при введении малого объема композиции субъекту.
Предпочтительно, по меньшей мере 50 мас.% компонента (i) обеспечивается за счет УМФ, более предпочтительно, по меньшей мере 75 мас.%, наиболее предпочтительно по меньшей мере 95 мас.%. Дозы, которые необходимо вводить, для удобства приведены применительно к УМФ. Таким образом, количество источника уридина удобно рассчитывать, используя молярный эквивалент количества УМФ.
Настоящий способ предпочтительно включает введение уридина (кумулятивное количество уридина и его эквивалентов) в количестве (a) 0,1-6 г в сутки, предпочтительно 0,2-3 г в сутки, более предпочтительно 0,4-2 г в сутки, и/или (b) 0,1-6 г на 100 мл (жидкой) композиции, предпочтительно 0,2-3 г на 100 мл (жидкой) композиции, более предпочтительно 0,4-2 г на 100 мл (жидкой) композиции. В расчете на общую массу композиции уридин предпочтительно составляет по меньшей мере 0,1 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере 0,7 мас.%, наиболее предпочтительно по меньшей мере 2,5 мас.%, и/или не более 5 мас.%, более предпочтительно не более 3 мас.%, наиболее предпочтительно не более 2,5 мас.%.
Цитидин
Помимо, или вместо, уридина композиция также может содержать цитидин и/или его эквивалент. Эквиваленты цитидина известны в данной области и, как правило, включают дезоксицитидин (дезоксирибозил цитозин), цитидин фосфаты (ЦМФ, дЦМФ, ЦДФ, ЦТФ), нуклеиновое основание цитозин, ацилированные производные цитидина (например, C1-6 ацилированный цитидин) и/или сложные эфиры (например, C1-6 алканоатный сложный эфир). В одном варианте осуществления композиция содержит одно или более, выбранное из цитидина, цитидин фосфата (ЦМФ, ЦДФ, ЦТФ, предпочтительно ЦМФ), также можно использовать цитиколин (ЦДФ-холин).
Настоящий способ предпочтительно включает введение цитидина (кумулятивное количество цитидина и его эквивалентов) в количестве (i) 0,1-6 г в сутки, предпочтительно 0,2-3 г в сутки, более предпочтительно 0,4-2 г в сутки, и/или (ii) 0,1-6 г на 100 мл (жидкой) композиции, предпочтительно 0,2-3 г на 100 мл (жидкой) композиции, более предпочтительно 0,4-2 г на 100 мл (жидкой) композиции. В расчете на общую массу композиции цитидин предпочтительно составляет по меньшей мере 0,1 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере 0,7 мас.%, наиболее предпочтительно по меньшей мере 2,5 мас.%, и/или не более 5 мас.%, более предпочтительно не более 3 мас.%, наиболее предпочтительно не более 2,5 мас.%.
n-3 PUFA
Настоящая композиция содержит (ii) n-3 полиненасыщенную жирную кислоту (PUFA), предпочтительно n-3 LC-PUFA. В контексте настоящего изобретения LC-PUFA (длинноцепочечные PUFA) имеют длину цепи 18 или более атомов углерода.
Компонент (ii) предпочтительно выбирают из докозагексаеновой кислоты (22:6; DHA), эйкозапентаеновой кислоты (20:5; EPA), докозапентаеновой кислоты (22:5 ω-3; DPA) и их смесей, предпочтительно компонент является по меньшей мере одним из DHA и EPA. Предпочтительно, настоящая композиция содержит по меньшей мере DHA, более предпочтительно DHA и EPA. EPA превращается в DPA (ω-3), что увеличивает последующее превращение DPA в DHA. Таким образом, настоящая композиция предпочтительно содержит значительное количество EPA, с целью дальнейшей стимуляции образования DHA in vivo. Компонент (ii), предпочтительно DHA и/или EPA, предпочтительно предоставляют в виде триглицеридов, диглицеридов, моноглицеридов, свободных жирных кислот, либо их солей или сложных эфиров, фосфолипидов, лизофосфолипидов, глицериновых эфиров, липопротеинов, церамидов, гликолипидов или их сочетаний. Предпочтительно, настоящая композиция содержит по меньшей мере DHA в форме триглицерида. Подходящие источники n-3 PUFA, n-3 LC-PUFA и/или DHA включают тунцовый жир, (другой) рыбий жир, богатые DHA алкиловые сложные эфиры, масло из водорослей, желток яйца или фосфолипиды, обогащенные n-3 LC-PUFA, например, фосфатидилсерин-DHA.
DHA предпочтительно вводят в количестве 500-5000 мг в сутки, более предпочтительно 750-4000 мг в сутки, наиболее предпочтительно 1000-3000 мг в сутки. Содержание DHA в композиции по изобретению предпочтительно является таким, что суточное потребление DHA пациентом составляет 50-1000 мг DHA на кг общей массы тела пациента, более предпочтительно 100-800 мг/кг, более предпочтительно 250-700 мг/кг, наиболее предпочтительно 350-600 мг/кг. В случае ее введения, EPA предпочтительно вводят в количестве 500-5000 мг в сутки, более предпочтительно 750-4000 мг в сутки, наиболее предпочтительно 1000-3000 мг в сутки. Эти количества EPA используют, если ее вводят отдельно или, предпочтительно, в сочетании с DHA.
В случае присутствия и DHA, и EPA, массовое отношение DHA к EPA предпочтительно превышает 1, более предпочтительно составляет от 2:1 до 10:1, более предпочтительно от 3:1 до 8:1. Что касается суточных доз, настоящий способ предпочтительно включает введение 500-5000 мг n-3 LC-PUFA (более предпочтительно DHA+EPA+DPA, наиболее предпочтительно DHA+EPA) в сутки, более предпочтительно 750-4000 мг в сутки, наиболее предпочтительно 1000-3000 мг в сутки.
Что касается единичной дозы, доля n-3 LC-PUFA (более предпочтительно DHA+EPA+DPA, наиболее предпочтительно DHA+EPA) от общего содержания жирных кислот составляет предпочтительно 5-95 мас.%, более предпочтительно 10-80 мас.%, наиболее предпочтительно 15-70 мас.%. Настоящая композиция предпочтительно содержит 5-95 мас.% DHA от общего содержания жирных кислот, предпочтительно 10-75 мас.% DHA от общего содержания жирных кислот, более предпочтительно 10-60 мас.% DHA от общего содержания жирных кислот. Настоящая композиция предпочтительно содержит 5-95 мас.% EPA от общего содержания жирных кислот, предпочтительно 10-75 мас.% EPA, наиболее предпочтительно 15-60 мас.% от общего содержания жирных кислот.
От общей массы композиции n-3 PUFA предпочтительно составляет по меньшей мере 0,1 мас.%, более предпочтительно по меньшей мере 0,8 мас.%, наиболее предпочтительно по меньшей мере 1,4 мас.%, и/или не более 5 мас.%, более предпочтительно не более 3 мас.%, наиболее предпочтительно не более 2,5 мас.%. От общей массы композиции DHA предпочтительно составляет 0,25-5 мас.%, более предпочтительно 0,5-2,4 мас.%, наиболее предпочтительно 0,9-1,5 мас.%. От общей массы композиции EPA предпочтительно составляет 0,05-2,5 мас.%, более предпочтительно 0,2-1,0 мас.%, наиболее предпочтительно 0,35-0,8 мас.%.
При выборе вышеприведенных количеств были учтены и оптимизированы несколько аспектов, включая вкусовые качества (более высокие уровни LC-PUFA вызывают ухудшение вкуса, что приводит к ухудшению соблюдения режима приема композиции), баланс между DHA и ее предшественниками для обеспечения эффективности при сохранении небольшого объема препаратов.
Дополнительные липидные компоненты
Помимо n-3 PUFA, композиция предпочтительно содержит дополнительные липиды, такие как n-6 PUFA или n-6 LC-PUFA (например, альфа-линоленовую кислоту (ALA), линолевую кислоту (LA)) и фосфолипиды.
Предпочтительно, содержание ALA в композиции поддерживают на низких уровнях. Поскольку композиция особенно полезна для пациентов с повреждением спинного мозга, считается, что избыточный прием жирных кислот с высокой степенью ненасыщенности приводит к повышенному риску дальнейшего повреждения травмированных тканей из-за воздействия пероксидированных PUFA, несмотря на то, что было показано, что in vivo обеспечение ALA имеет нейропротективный эффект при нейротравме (King et al. J. Neurosci. (26) 17: 4672-4680). Концентрацию ALA предпочтительно поддерживают на уровнях ниже 2,0 мас.%, более предпочтительно ниже 1,5 мас.%, в частности, ниже 1,0 мас.%, от массы всех жирных кислот.
Концентрации LA можно поддерживать на обычных уровнях, то есть, от 20 до 30 мас.%, от массы всех жирных кислот, хотя в одном варианте осуществления концентрация LA также значительно снижена до количества менее 15 мас.% и даже менее 10 мас.%, от массы всех жирных кислот. Концентрации LA предпочтительно составляют по меньшей мере 1 мас.% от массы жирных кислот.
В одном варианте осуществления массовое отношение n-3 PUFA: n-6 PUFA в композиции по изобретению предпочтительно находится в диапазоне от 0,3 до 7, предпочтительно в диапазоне от 1,4:1 до 5,9:1, более предпочтительно в диапазоне от 3:1 до 5,5:1, наиболее предпочтительно в диапазоне от 3:1 до 5:1, в частности, менее 5:1. Количество n-6 LC-PUFA предпочтительно составляет менее 50 мас.%, предпочтительно в диапазоне от 5 до 40 мас.%, более предпочтительно 8-30 мас.%, от общей массы жирных кислот в композиции.
Настоящая композиция может дополнительно содержать фосфолипиды. Предпочтительно, в композиции по изобретению присутствует/присутствуют один или более фосфолипидов. Один или более фосфолипидов выбирают из группы, состоящей из фосфатидной кислоты (PA), фосфатидилэтаноламина (PE), фосфатидилхолина (PC), фосфатидилсерина (PS) и фосфоинозитидов (PI). Настоящая композиция предпочтительно содержит по меньшей мере один фосфолипид в количестве от 0,01 до 1 грамма на 100 мл, более предпочтительно от 0,05 до 0,5 граммов на 100 мл, наиболее предпочтительно от 80 до 600 мг на 100 мл. По меньшей мере один фосфолипид предпочтительно представляет собой лецитин.
Дополнительные компоненты
Композиция по изобретению может содержать дополнительные компоненты, например, одно или более, выбранное из холина и витамина(ов) группы B, предпочтительно и то, и другое, и более предпочтительно, также антиоксиданты. Присутствие одного или более, предпочтительно всех, из холина, витамина(ов) группы B, в частности, фолиевой кислоты и витамина B6, а также антиоксидантов, в частности, витамина C и/или E, является предпочтительным, поскольку было высказано предположение, что повреждение спинного мозга приводит к пищевой недостаточности этих компонентов (Fraser, 2014). Вследствие этого, присутствие в композиции холина, витамина(ов) группы B, в частности, витамина B12, и антиоксидантов, в частности, селена, витамина C и/или E, может способствовать общему укреплению здоровья пациентов с повреждением спинного мозга.
Холин
Настоящая композиция предпочтительно содержит холин. Холин может присутствовать как таковой, или в виде эквивалента холина в форме, например, соли или сложного эфира, или в виде любого их сочетания. Соль холина предпочтительно выбирают из холина хлорида, холина битартрата или холина стеарата. Сложный эфир холина предпочтительно выбирают из фосфатидилхолина и лизофосфатидилхолина.
Настоящий способ предпочтительно включает введение более 50 мг холина в сутки, предпочтительно 80-3000 мг холина в сутки, более предпочтительно 100-2000 мг холина в сутки, наиболее предпочтительно 150-1000 мг холина в сутки. Настоящая композиция предпочтительно содержит от 80 мг до 3000 мг холина на 100 мл жидкой композиции, предпочтительно от 100 мг до 2000 мг холина на 100 мл, предпочтительно от 200 мг до 1000 мг холина на 100 мл композиции, наиболее предпочтительно от 200 мг до 600 мг холина на 100 мл. Вышеприведенные значения относятся к холину, количества эквивалентов или источников холина могут быть рассчитаны с учетом молярного эквивалента холина.
Витамины группы B
Настоящая композиция может дополнительно содержать один или более витаминов группы B. Витамин группы B выбирают из группы, включающей витамин B1 (тиамин), витамин B2 (рибофлавин), витамин B3 (ниацин или ниацинамид), витамин B5 (пантотеновую кислоту), витамин B6 (пиридоксин, пиридоксаль или пиридоксамин, или пиридоксин гидрохлорид), витамин B7 (биотин), витамин B9 (фолиевую кислоту или фолат) и витамин B12 (разные кобаламины). Эта группа включает функциональные эквиваленты. Термин «витамин B12» охватывает все эквиваленты кобаламина, известные в данной области. Предпочтительно, витамины группы B в контексте изобретения включают по меньшей мере один, более предпочтительно по меньшей мере два витамина, выбранные из группы, включающей витамин B6, витамин B12 и витамин B9. Более предпочтительно, композиция содержит по меньшей мере витамин B6 и/или B9, наиболее предпочтительно витамин B6, B9 и B12.
Витамин группы B следует вводить в эффективной дозе, которая зависит от типа используемого витамина группы B. В качестве общего правила, соответствующую минимальную или максимальную дозу можно выбирать на основе известных диетических рекомендаций, например, рекомендаций Института медицины (IOM) Национальной академии наук США или Научного продовольственного комитета (научного комитета ЕС), информации, раскрытой в настоящем документе, и, необязательно, ограниченного количества рутинных тестов. Минимальная доза может быть основана на расчетной средней потребности (EAR), хотя и более низкая доза может быть эффективной. Максимальная доза, как правило, не превышает допустимые максимальные уровни потребления (UL) в соответствии с рекомендациями IOM.
В случае присутствия в композиции по изобретению, витамин B6, как правило, присутствует в количестве, которое обеспечивает суточную дозу в диапазоне от 0,1 до 100 мг, в частности, в диапазоне от 0,5 до 25 мг, более конкретно, в диапазоне от 0,5 до 5 мг. Настоящая композиция предпочтительно содержит 0,1-100 мг витамина B6 на 100 г (жидкого) продукта, более предпочтительно 0,5-5 мг витамина B6 на 100 г (жидкого) продукта, более предпочтительно 0,5-5 мг витамина B6 на 100 г (жидкого) продукта.
В случае присутствия в питательной композиции или лекарственном средстве, витамин B9, как правило, присутствует в количестве, которое обеспечивает суточную дозу в диапазоне от 50 до 5000 мкг, в частности, в диапазоне от 100 до 1000 мкг, более конкретно, в диапазоне от 200 до 800 мкг. Настоящая композиция предпочтительно содержит 50-5000 мкг витамина B9 на 100 г (жидкого) продукта, более предпочтительно 100-1000 мкг витамина B9 на 100 г (жидкого) продукта, более предпочтительно 200-800 мкг фолиевой кислоты на 100 г (жидкого) продукта. Витамин B9 может присутствовать в виде фолата, который включает фолиевую кислоту, фолиновую кислоту, метилированные, метенилированные и формилированные формы фолатов, их соли или сложные эфиры (например, C1-6 алкиловый сложный эфир), а также их производные с одной или более глутаминовой кислотой, и все либо в восстановленной, либо в окисленной форме. Предпочтительно, витамин B9 предоставляют в виде фолиевой кислоты.
В случае присутствия в композиции по изобретению, витамин B12, как правило, присутствует в количестве, которое обеспечивает суточную дозу в диапазоне от 0,5 до 100 мкг, в частности, в диапазоне от 1 до 10 мкг, более конкретно, в диапазоне от 1,5 до 5 мкг. Настоящая композиция предпочтительно содержит 0,5-100 мкг витамина B12 на 100 г (жидкого) продукта, более предпочтительно 1-10 мкг витамина B12 на 100 г (жидкого) продукта, более предпочтительно 1,5-5 мкг витамина B12 на 100 г (жидкого) продукта.
Антиоксиданты
Настоящая композиция может дополнительно содержать антиоксиданты, предпочтительно выбранные из витамина C, витамина E и селена. Особенно предпочтительно, если композиция содержит как витамин C, так и витамин E, наиболее предпочтительно, композиция по изобретению содержит витамин C, витамин E и селен. Антиоксиданты предпочтительно включают в композицию по изобретению, поскольку они способны предотвращать окислительное повреждение в травмированном участке, возникающее из-за пищевых PUFA.
Витамин C включает его функциональные эквиваленты, и может присутствовать в количестве, которое обеспечивает суточную дозу в диапазоне от 20 до 2000 мг, в частности, в диапазоне от 30 до 500 мг, более конкретно, в диапазоне от 75 до 150 мг. В одном варианте осуществления витамин C присутствует в диапазоне количеств 20-2000 мг, в частности, в диапазоне 30-500 мг, более конкретно, в диапазоне 75-150 мг на 100 мл композиции.
«Витамин E» означает соединения, которые, как известно в данной области, имеют активность витамина E, как правило, токоферол и/или его эквивалент. Витамин E может присутствовать в количестве, которое обеспечивает суточную дозу в диапазоне от 10 до 300 мг, в частности, в диапазоне от 30 до 200 мг, более конкретно, в диапазоне от 35 до 100 мг. Витамин E в таких количествах предотвращает окислительное повреждение в травмированном участке, возникающее из-за пищевых PUFA, присутствующих в композиции по изобретению. В одном варианте осуществления токоферол и/или его эквивалент присутствует в диапазоне количеств 10-300 мг, в частности, в диапазоне 30-200 мг, более конкретно, в диапазоне 35-100 мг на 100 мл композиции. Используемый в настоящем описании термин «токоферол и/или его эквивалент» охватывает токоферолы (например, альфа- и гамма-), токотриенолы, их фармацевтические и/или приемлемые для питания производные, а также любое их сочетание. Вышеприведенные значения относятся к эквивалентам альфа-токоферола (альфа-TE), как принято в данной области.
Настоящая композиция предпочтительно содержит селен. Антиоксидантная активность селена успешно предотвращает и/или ингибирует повреждения в головном мозге. Предпочтительно, композиция содержит 0,01-5 мг селена на 100 мл жидкого продукта, предпочтительно 0,02-0,1 мг селена на 100 мл жидкого продукта. Количество селена, вводимое в сутки, предпочтительно превышает 0,01 мг, более предпочтительно, составляет 0,01-0,5 мг.
С учетом вышесказанного, композиция по изобретению предпочтительно содержит уридин и/или его эквивалент, n-3 LC-PUFA DHA и EPA, фосфолипиды, холин, фолиевую кислоту, витамин B12 и витамин B6, в любых из вышеупомянутых форм, эквивалентов или производных. Композиция предпочтительно содержит уридин и/или УМФ, n-3 LC-PUFA DHA и EPA, фосфолипиды, холин, фолиевую кислоту, витамин B12, витамин B6, витамин C, витамин E и селен, в любых из вышеупомянутых форм, эквивалентов или производных.
В особенно предпочтительном варианте осуществления композиция по изобретению содержит в расчете на суточную дозу или на 125 мл жидкости:
(i) 400-1000 мг, предпочтительно 500-700 мг, более предпочтительно примерно 625 мг УМФ,
(ii-a) 100-500 мг, предпочтительно 200-400 мг, более предпочтительно примерно 300 мг EPA,
(ii-b) 900-2000 мг, предпочтительно 950-1300 мг, более предпочтительно примерно 1200 мг DHA,
(iii) 50-600 мг, предпочтительно 60-200 мг, более предпочтительно примерно 106 мг фосфолипидов,
(iv) 200-800 мг, предпочтительно 300-500 мг, более предпочтительно примерно 400 мг холина,
(v-a) 1-5 мкг, предпочтительно 2-4 мкг, более предпочтительно примерно 3 мкг витамина B12,
(v-b) 0,5-3 мг, предпочтительно 0,5-2 мг, более предпочтительно примерно 1 мг витамина B6,
(v-c) 200-800 мкг, предпочтительно 300-500 мкг, более предпочтительно примерно 400 мкг фолиевой кислоты,
(vi-a) 20-80 мг, предпочтительно 30-50 мг, более предпочтительно примерно 40 мг витамина E (эквивалентов альфа-токоферола (альфа-TE)),
(vi-b) 60-150 мг, предпочтительно 60-90 мг, более предпочтительно примерно 80 мг витамина C, и
(vi-c) 40-100 мкг, предпочтительно 45-65 мкг, более предпочтительно примерно 60 мкг селена.
В особенно предпочтительном варианте осуществления композиция по изобретению содержит в расчете на суточную дозу или на 125 мл жидкости:
(i) 600-1500 мг, предпочтительно 700-1050 мг, более предпочтительно примерно 940 мг УМФ,
(ii-a) 150-750 мг, предпочтительно 320-600 мг, более предпочтительно примерно 450 мг EPA,
(ii-b) 1000-3000 мг, предпочтительно 1400-2000 мг, более предпочтительно примерно 1800 мг DHA,
(iii) 75-900 мг, предпочтительно 110-300 мг, более предпочтительно примерно 160 мг фосфолипидов,
(iv) 300-1200 мг, предпочтительно 450-750 мг, более предпочтительно примерно 600 мг холина,
(v-a) 1,5-7,5 мкг, предпочтительно 4-6 мкг, более предпочтительно примерно 4,5 мкг витамина B12,
(v-b) 0,75-4,5 мг, предпочтительно 1,2-3 мг, более предпочтительно примерно 1,5 мг витамина B6,
(v-c) 300-1200 мкг, предпочтительно 450-750 мкг, более предпочтительно примерно 600 мкг фолиевой кислоты.
(vi-a) 30-120 мг, предпочтительно 45-75 мг, более предпочтительно примерно 60 мг витамина E (эквивалентов альфа-токоферола (альфа-TE)),
(vi-b) 70-225 мг, предпочтительно 90-135 мг, более предпочтительно примерно 120 мг витамина C, и
(vi-c) 50-150 мкг, предпочтительно 65-100 мкг, более предпочтительно примерно 80 мкг селена.
Применение
Композиция по изобретению предназначена для восстановления или улучшения (нарушенной) функции мочевого пузыря или улучшения восстановления функции мочевого пузыря у субъекта. Настоящее применение также можно назвать стимуляцией (восстановления) функции мочевого пузыря или контроля мочевого пузыря, улучшением восстановления функции мочевого пузыря или контроля мочевого пузыря, улучшением автономной функции мочевого пузыря, лечением и/или предотвращением недержания мочи, лечением и/или предотвращением подтекания мочевого пузыря. В контексте изобретения «предотвращение» также можно называть «уменьшением риска или вероятности». В контексте настоящего изобретения нарушение функции мочевого пузыря может иметь любую форму, такую как недержание (например, императивное недержание, недержание вследствие переполнения мочевого пузыря), спастический мочевой пузырь, задержка мочевыделения, гипоконтрактильный мочевой пузырь, частое мочеиспускание, ноктурия, гиперактивный мочевой пузырь, снижение или утрата ощущения (наполненного) мочевого пузыря, повышенное удержание остаточной мочи после мочеиспускания.
Нарушение функции мочевого пузыря предпочтительно связано с, или вызвано, неврологическим нарушением. В предпочтительном варианте осуществления нарушение функции мочевого пузыря предпочтительно связано с, или вызвано, повреждением спинного мозга или травматическим повреждением головного мозга, наиболее предпочтительно, повреждением спинного мозга. Иными словами, композиция по изобретению предназначена для улучшения (нарушенной) функции мочевого пузыря после повреждения спинного мозга или травматического повреждения головного мозга, наиболее предпочтительно, после повреждения спинного мозга. Иными словами, композиция по изобретению предназначена для улучшения (нарушенной) функции мочевого пузыря у пациента, который страдает, выздоравливает и/или страдал от неврологического нарушения, в частности, в результате повреждения спинного мозга или травматического повреждения головного мозга, наиболее предпочтительно, в результате повреждения спинного мозга.
В предпочтительном варианте осуществления субъект является пациентом, который страдает, выздоравливает и/или страдал от неврологического нарушения, предпочтительно, пациентом, который страдает от неврологического нарушения. В контексте данного варианта осуществления такое применение также можно назвать «лечением и/или предотвращением нейрогенной дисфункции мочевого пузыря» или «лечением и/или предотвращением нейрогенного мочевого пузыря».
Неврологическое нарушение может представлять собой любое повреждение в нервной системе пациента, такое как повреждение головного мозга, повреждение спинного мозга, повреждение крестцового сплетения и повреждение периферических нервов. Поскольку необходима координация между центрами, ответственными за мочеиспускание, повреждение любого из этих участков часто приводит к нейрогенной дисфункции мочевого пузыря. В особенно предпочтительном варианте осуществления пациент страдает, выздоравливает и/или страдал от повреждения спинного мозга, предпочтительно, пациент страдает от повреждения спинного мозга.
Повреждение головного мозга (зона поражения находится в варолиевом мосту или выше) может приводить к нарушению или повреждению центра мочеиспускания в варолиевом мосту, тем самым вызывая потерю контроля над мочеиспусканием. Часто примитивное мочеиспускание остается незатронутым, и у человека возникает императивное недержание. Нарушение контроля над мочевым пузырем, вызванное повреждением головного мозга, как правило, принимает форму императивного недержания и спастического мочевого пузыря. Любая травма головного мозга может вызывать нарушение функции мочевого пузыря, травму головного мозга предпочтительно выбирают из инсульта, опухоли головного мозга, травматического повреждения головного мозга, болезни Паркинсона, гидроцефалии, церебрального паралича и синдрома Ши-Драгера.
Повреждение спинного мозга (зона поражения находится на участке между варолиевым мостом и крестцовым сплетением), как правило, вызывает (полный или частичный) отказ центральной нервной системы, и ее реактивация может приводить к гиперстимуляции затронутых органов и спастичности. Повреждение на уровне спинного мозга выше крестцового сплетения приводит к потере информационного взаимодействия между центром мочеиспускания в варолиевом мосту и центром мочеиспускания в крестцовом сплетении, что часто ведет к такому же типу недержания, к которому привело бы повреждение на участке выше варолиева моста. Однако на начальном этапе после повреждения спинного мозга пациент часто находится в состоянии спинального шока, что приводит к отказу рефлекторной нервной деятельности и возникновению арефлексивного детрузора. Таким образом, в течение первых нескольких недель человек неспособен к мочеиспусканию, что может быть опасным для жизни, если не принимать соответствующие меры. Через 6-8 недель к человеку возвращается способность к рефлекторному мочеиспусканию, поскольку связь с центром мочеиспускания в крестцовом сплетении остается незатронутой. Результатом этого является императивное недержание мочи. Кроме того, реактивация нервной системы может приводить к гиперстимуляции и спастичности затронутых органов, результатом чего является спастический мочевой пузырь и диссинергия между сфинктером и детрузором. Нарушение контроля мочевого пузыря, вызванное повреждением спинного мозга, как правило, принимает форму императивного недержания и спастического мочевого пузыря. Любое повреждение спинного мозга может вызывать нарушение функции мочевого пузыря, повреждение спинного мозга предпочтительно выбирают из травматического повреждения спинного мозга, параплегии, квадриплегии, рассеянного склероза и грыжи спинного мозга и мозговых оболочек.
Повреждение крестцового сплетения (зона поражения находится в крестцовом сплетении и/или нервных корешках) может вызывать трудности или даже неспособность ощущать, когда мочевой пузырь заполнен (сенсорно нейрогенный мочевой пузырь) и затруднение в мочеиспускании при ощущении полного мочевого пузыря (моторно нейрогенный мочевой пузырь). Повреждение на уровне крестцового сплетения, как правило, приводит к неспособности ощущать растяжение стенок мочевого пузыря. Сознательное или рефлекторное мочеиспускание отсутствует, результатом чего является неспособность к сокращению мочевого пузыря. Таким образом, человек неспособен к мочеиспусканию, если только не имеет место недержание вследствие переполнения мочевого пузыря (когда давление внутри мочевого пузыря превышает давление, которое сфинктер может поддерживать для сохранения способности к удержанию мочи). Нарушение контроля мочевого пузыря, вызванное повреждением крестцового сплетения, как правило, принимает форму недержания вследствие переполнения мочевого пузыря и задержки мочевыделения. Любое повреждение крестцового сплетения может вызывать нарушение функции мочевого пузыря, повреждение крестцового сплетения предпочтительно выбирают из опухоли крестцового сплетения, грыжи межпозвоночного диска, перелома тазовых костей, поясничной ламинэктомии, радикальной гистерэктомии, брюшно-промежностной экстирпации прямой кишки и синдрома «натянутого» спинного мозга.
Повреждение периферических нервов (зона поражения находится в периферических нервах) может вызывать повреждение или даже разрушение нервов, ведущих к мочевому пузырю, что, в свою очередь, приводит к потере ощущения заполнения мочевого пузыря. Повреждение на уровне периферических нервов, иннервирующих мочевой пузырь, приведет к тому, что никакие сигналы не будут поступать к мочевому пузырю и от него. Заполнение мочевого пузыря больше не ощущается, либо отсутствует способность к рефлекторному или сознательному мочеиспусканию. Как правило, у пациента отсутствует способность к сокращению детрузора (моторно нейрогенный мочевой пузырь). Нарушение контроля мочевого пузыря, вызванное повреждением периферических нервов, как правило, принимает форму недержания вследствие переполнения мочевого пузыря, задержки мочевыделения и гипоконтрактильного мочевого пузыря. Любое повреждение периферических нервов может вызывать нарушение функции мочевого пузыря, повреждение периферических нервов предпочтительно выбирают из повреждения в результате сахарного диабета, диабетической цистопатии, СПИДа, полиомиелита, синдрома Гийена-Барре, герпеса, опоясывающего герпеса, пернициозной анемии и нейросифилиса (сухотки спинного мозга).
В предпочтительном варианте осуществления неврологическое нарушение выбирают из параплегии, квадриплегии, рассеянного склероза и грыжи спинного мозга и мозговых оболочек, болезни Паркинсона, инсульта, травматического повреждения спинного мозга или травматического повреждения головного мозга. В предпочтительном варианте осуществления неврологическое нарушение представляет собой травматическое повреждение, предпочтительно, травматическое повреждение головного мозга или травматическое повреждение спинного мозга, более предпочтительно, травматическое повреждение спинного мозга. Композиция по изобретению будет особенно полезна для пациентов с повреждением спинного мозга, поскольку полное восстановление после повреждения спинного мозга почти невозможно, и симптомы сохраняются на протяжении всей жизни. Дискомфорт от потери контроля над мочевым пузырем является особенно сильным у этих пациентов.
Композиции, описанные выше, могут быть использованы в качестве лечебного питания, дополнительного питания, в качестве продуктов лечебного питания, в качестве продуктов специального медицинского назначения или в качестве питательной добавки. Такой продукт можно употреблять по одной, две или три порции по 50-250 мл в сутки; как правило, по 125 мл в сутки на протяжении периода восстановления и/или реабилитации в случае нарушений, предусмотренных по изобретению. Предпочтительные суточные дозы находятся в диапазоне 100-500 мл, более предпочтительно 125-375 мл, наиболее предпочтительно 200-300 мл.
Предпочтительно, композицию вводят энтерально. Введение осуществляют предпочтительно по меньшей мере один раз в сутки, хотя альтернативные режимы введения могут быть рассчитаны на основании приведенных значений.
Примеры
Пример 1
В данном исследовании использовали взрослых самок крыс Sprague-Dawley (~250 г). У всех животных повреждали спинной мозг в грудном отделе позвоночника на уровне T12 (T12) с использованием модели статического сдавливания (Nystrom et al., Acta Neurologica Scandinavica, 1998, 78, 460-6; Huang et al., European Journal of Neuroscience, 2007, 23, 273-8). После хирургической операции крыс регулярно осматривали для выявления любых неблагоприятных эффектов и ежедневно взвешивали в течение первых двух недель после травмы, а затем два раза в неделю. В течение первой недели после хирургической операции мочевой пузырь у животных проверяли дважды в день и, при необходимости, проводили его опорожнение вручную, а затем повторяли процедуру один раз в день до восстановления рефлекса опорожнения мочевого пузыря.
Перед хирургической операцией крыс рандомизировали на контрольную группу и группу диеты по изобретению. Крысы в контрольной группе получали обычный корм AIN-93 M для крыс (N=9), в то время как крысы в экспериментальной группе получали диету по изобретению, включающую тот же корм для крыс, но с добавками в суточной дозе 450 мг/кг (N=9), в течение 4 недель. Обе диеты были изоэнергетическими и отвечали всем основным диетическим требованиям. Они содержали стандартную смесь витаминов (AIN-93-VX) и смесь минералов (AIN-93-MX). Композиции в двух диетах отличались по используемым жировым смесям, а также по числу дополнительных питательных добавок, включающих холин, витамины группы B, антиоксиданты, уридина монофосфат (УМФ) и лецитин. Подробный состав диет представлен в таблицах 1 и 2. Для предотвращения окисления липидов все диеты хранили при -20°C до использования. Животные получали свой корм в виде твердых гранул. Все крысы из обеих групп лечения получали свежие гранулы корма ежедневно. Лечение с помощью диеты начинали сразу после восстановления от операции, после того, как крыс возвращали в их клетки содержания; в каждую клетку помещали максимум по 4 крысы. Количество съеденного корма в каждой клетке регистрировали ежедневно. Среднее суточное потребление корма было сходным во всех группах лечения.
Таблица 1: Диетическая композиция (в г на 100 г композиции)
| Контрольная диета | Диета по изобретению | |
| кукурузный крахмал | 35,6 | 31,3 |
| казеин (>85% белка) | 14,0 | 14,0 |
| кукурузный декстрин | 15,5 | 15,5 |
| сахароза | 10,0 | 10,0 |
| декстроза | 10,0 | 10,0 |
| пищевые волокна | 5,0 | 5,0 |
| смесь минералов (AIN-93M-MX) | 3,5 | 3,5 |
| смесь витаминов (AIN-93-VX) | 1,0 | 1,0 |
| смесь масел - соевое масло - кокосовое масло - кукурузное масло - масло DHA25 (Nippon Suisan Kaisha, LTD Tokyo, Japan) - EPA 28/12 (Biosearch Life, Granada, Spain) |
1,9 0,9 2,2 0,0 0,0 |
0,0 0,1 0,1 4,5 0,3 |
| УМФ динатрий (24% H2O) | 0,0 | 1,5 |
| dl-α-токоферил ацетат (500 МЕ/г) | 0,0 | 0,705 |
| Пиридоксин-HCl | 0,0 | 0,0053 |
| Фолиевая кислота (90%) | 0,0 | 0,0011 |
| Цианокобаламин (0,1% в манните) | 0,0 | 0,0065 |
| Холина битартрат | 0,25 | 0,25 |
| Холина хлорид | 0,0 | 0,67 |
| Натрия селенит | 0,0 | 0,00036 |
| Трет-бутилгидрохинон | 0,0008 | 0,0008 |
| L-цистин | 0,18 | 0,18 |
Таблица 2: Профиль жирных кислот (в г на 100 г композиции)
| Контрольная диета | Диета по изобретению | |
| C-18:1n9 | 1,041 | 0,656 |
| C-18:2n6 (LA) | 2,181 | 0,158 |
| C-20:4n6 (AA) | 0,00 | 0,092 |
| C-18:3n3 (ALA) | 0,107 | 0,038 |
| C-20:5n3 (EPA) | 0,00 | 0,433 |
| C-22:6n3 (DHA) | 0,00 | 1,117 |
| всего n-6 | 2,181 | 0,316 |
| всего n-3 | 0,107 | 1,663 |
| n-3/n-6 | 0,049 | 5,265 |
Статистический анализ выполняли с использованием программы GraphPad Prism версии 6 (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA). Наборы данных анализировали, используя критерий Стьюдента или двусторонний анализ ANOVA с повторными измерениями, с последующим апостериорным анализом методом апостериорных сравнений в тесте Бонферрони, когда это целесообразно. Все данные приведены в виде средних значений ± S.E.M. Различия считали статистически значимыми при P<0,05.
Сравнение результатов в группе крыс, получавших диету по изобретению, с результатами в группе крыс, получавших стандартную поддерживающую диету, показало, что способность мочевого пузыря к опорожнению восстанавливалась значительно быстрее у крыс, получавших диету по изобретению (количество дней до восстановления мочевого пузыря (контрольная диета)=8,8 ± 1,8; (диета по изобретению)=3,9 ± 1,1, P<0,05). В группе приема диеты по изобретению у четырех крыс из семи полный контроль над мочевым пузырем восстанавливался уже ко дню 2 после операции, и у всех крыс функция мочевого пузыря восстанавливалась ко дню 8. В контрольной группе только у двух крыс из 6 способность к опорожнению мочевого пузыря восстанавливалась ко дню 10 после операции, и у всех крыс функция мочевого пузыря восстанавливалась ко дню 12.
Пример 2
Жидкая композиция по изобретению, содержащая на порцию 125 мл:
| - 4,9 г жира | - 40 мг витамина E (альфа-TE) |
| - 300 мг EPA | - 80 мг витамина C |
| - 1200 мг DHA | - 60 мкг селена |
| - 106 мг фосфолипидов | - 3 мкг витамина B12 |
| - 400 мг холина | - 1 мг витамина B6 |
| - 625 мг УМФ | - 400 мкг фолиевой кислоты |
1. Применение (i) уридина и/или эквивалента, выбранного из группы, состоящей из дезоксиуридина, уридин фосфатов, нуклеинового основания урацила и/или ацилированных производных уридина и/иди сложных эфиров и (ii) n-3 полиненасыщенных жирных кислот (PUFA) для производства композиции для восстановления или улучшения функции мочевого пузыря у субъекта, имеющего нарушенную функцию мочевого пузыря и где субъектом является пациент, который страдает, выздоравливает от и/или страдал неврологическим нарушением.
2. Применение по п. 1, где субъект является пациентом, который страдает, выздоравливает и/или страдал от повреждения спинного мозга.
3. Применение по п. 1 или 2, где n-3 PUFA выбирают из эйкозапентаеновой кислоты (EPA) и/или докозагексаеновой кислоты (DHA).
4. Применение по любому из предшествующих пунктов, где композиция дополнительно содержит холин и, предпочтительно, дополнительно содержит витамин(ы) группы B.
5. Применение по любому из предшествующих пунктов, где композиция дополнительно содержит фосфолипиды, холин, витамин(ы) группы B и антиоксиданты.
6. Применение по п. 4 или 5, где композиция содержит холин, витамин B6 и фолиевую кислоту.
7. Применение по любому из предшествующих пунктов, где уридин и/или его эквивалент представляет собой уридина монофосфат.
8. Применение по любому из предшествующих пунктов, где композиция содержит в 125 мл или в одной суточной дозе:
(i) 400-800 мг уридина монофосфата (УМФ);
(ii) n-3 PUFA, включающие (a) 100-500 мг EPA и (b) 900-1500 мг DHA;
(iii) 50-600 мг фосфолипидов;
(iv) 200-600 мг холина;
(v) витамины группы B, включающие (a) 1-5 мкг витамина B12, (b) 0,5-3 мг витамина B6 и (c) 200-600 мкг фолиевой кислоты; и
(vi) антиоксиданты, включающие (a) 20-60 мг витамина E (альфа-TE), (b) 60-100 мг витамина C и (c) 40-80 мкг селена.
9. Применение по любому из предшествующих пунктов, где композиция представляет собой жидкость или твердое вещество, которое может быть восстановлено жидкостью.
10. Способ восстановления или улучшения функции мочевого пузыря у субъекта, где субъектом является пациент имеющий нарушенную функцию мочевого пузыря и где субъектом является пациент, который страдает, выздоравливает от и/или страдал неврологическим нарушением, включающий введение субъекту композиции, содержащей (i) уридин и/или его эквивалент, выбранный из группы, состоящей из дезоксиуридина, уридин фосфатов, нуклеинового основания урацила и/или ацилированных производных уридина и/или сложных эфиров и (ii) n-3 PUFA.
11. Способ по п. 10, где субъект является пациентом, который страдает, выздоравливает и/или страдал от повреждения спинного мозга.
12. Способ по п. 10 или 11, где n-3 PUFA выбирают из EPA и/или DHA.
13. Способ по любому из пп. 10-12, где в сутки вводят 500-5000 мг DHA.
14. Способ по любому из пп. 10-13, где композиция дополнительно содержит холин и, предпочтительно, дополнительно содержит витамин(ы) группы B.
15. Способ по любому из пп. 10-14, где композиция дополнительно содержит фосфолипиды, холин, витамин(ы) группы B и антиоксиданты.
16. Способ по п. 10 или 15, где композиция содержит холин, витамин B6 и фолиевую кислоту.
17. Способ по любому из пп. 10-16, где уридин и/или его эквивалент представляет собой уридина монофосфат.
18. Способ по любому из пп. 10-17, где композиция содержит в 125 мл или в одной суточной дозе:
(i) 400-800 мг УМФ;
(ii) n-3 PUFA, включающие (a) 100-500 мг EPA и (b) 900-1500 мг DHA;
(iii) 50-600 мг фосфолипидов;
(iv) 200-600 мг холина;
(v) витамины группы B, включающие (a) 1-5 мкг витамина B12, (b) 0,5-3 мг витамина B6 и (c) 200-600 мкг фолиевой кислоты; и
(vi) антиоксиданты, включающие (a) 20-60 мг витамина E (альфа-TE), (b) 60-100 мг витамина C и (c) 40-80 мкг селена.
19. Способ по любому из пп. 10-18, где композиция представляет собой жидкость или твердое вещество, которое может быть восстановлено в жидкости.
20. Способ по любому из пп. 10-19, где композицию вводят субъекту в суточной дозе 200-300 мл, где композиция содержит в 125 мл жидкости:
(i) 400-800 мг уридина монофосфата (УМФ);
(ii) n-3 PUFA, включающие (a) 100-500 мг EPA и (b) 900-1500 мг DHA;
(iii) 200-600 мг холина; и
(iv) витамины группы B, включающие (a) 1-5 мкг витамина B12, (b) 0,5-3 мг витамина B6 и (c) 200-600 мкг фолиевой кислоты.
21. Способ по п.20, где композицию вводят субъекту в суточной дозе 200-300 мл, где композиция содержит в 125 мл жидкости:
(i) 400-800 мг уридина монофосфата (УМФ);
(ii) n-3 PUFA, включающие (a) 100-500 мг EPA и (b) 900-1500 мг DHA;
(iii) 50-600 мг фосфолипидов;
(iv) 200-600 мг холина;
(v) витамины группы B, включающие (a) 1-5 мкг витамина B12, (b) 0,5-3 мг витамина B6 и (c) 200-600 мкг фолиевой кислоты; и
(vi) антиоксиданты, включающие (a) 20-60 мг витамина E (альфа-TE), (b) 60-100 мг витамина C и (c) 40-80 мкг селена.
