Консервант для анатомических препаратов


A01N1/00 - Консервирование тел людей или животных, или растений или их частей; биоциды, например дезинфектанты, пестициды, гербициды (препараты для медицинских,стоматологических или гигиенических целей A61K; способы или устройства для дезинфекции или стерилизации вообще, или для дезодорации воздуха A61L); репелленты или аттрактанты (приманки A01M 31/06; лекарственные препараты A61K); регуляторы роста растений (соединения вообще C01,C07,C08; удобрения C05; вещества, улучшающие или стабилизирующие состояние почвы C09K 17/00)

Владельцы патента RU 2717657:

Федеральное государственное бюджетное учреждение науки Удмуртский федеральный исследовательский центр Уральского отделения Российской академии наук (RU)

Изобретение относится к медицине и фармации. Консервант для анатомических препаратов, предназначенный для хранения изолированных органов и тканей с целью открытой демонстрации студентам и школьникам в процессе их обучения анатомии, включает 3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамат, щелочной буфер, соль щелочного металла и дистиллированную воду. В качестве буфера он содержит трис(гидроксиметил)аминометан, в качестве соли щелочного металла - натрия хлорид, при этом компоненты содержатся при следующем соотношении, мас. %: 3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамат - 0,0145-0,0195; натрия хлорид - 0,9; трис(гидроксиметил)аминометан - 0,6; вода дистиллированная - остальное, при рН 7,4, осмотической активности 280-300 мОсмоль/л воды и температуре 0 - +25°С. Изобретение позволяет осуществлять длительное хранение и многократную открытую демонстрацию изолированных органов и тканей с целью использования их в учебном процессе в виде анатомических препаратов.

 

Изобретение относится к медицине и фармации, в частности к области нормальной и патологической анатомии человека и животных, и может быть использовано для длительного хранения изолированных органов с целью использования их в учебном процессе в виде анатомических препаратов.

Известен консервант для анатомических препаратов, представляющий собой 1-10% водный раствор бензоата натрия (RU 2591982)

Недостатком известного средства является короткий срок его хранения. Дело в том, что водный раствор бензоата натрия сохраняет свое качество в комнатных условиях при температуре до +25°С не более 30 суток (ПРИКАЗ Минздрава РФ от 16.07.97 N 214 "О КОНТРОЛЕ КАЧЕСТВА ЛЕКАРСТВЕННЫХ СРЕДСТВ, ИЗГОТОВЛЯЕМЫХ В АПТЕКАХ" ///С:Users/User/Desktor//УСЛОВИЯ%20ХРАНЕНИЯ%20И%20РЕЖИМ% 20СТЕРИЛИЗАЦИИ%20ЛЕКАРСТВЕННЫХ%20СРЕДСТВ, %20ИЗГОТОВЛЕННЫХ%20B%20АПТЕКАХ%20&lt%3B1&gt%3B%20ПРИКАЗ%20Минздрава%20РФ%20от%2016.07.97%20N%20214%20_ O%20КОНТРОЛЕ%20КАЧЕСТВА%20ЛЕКАРСТВЕННЫХ%20СРЕДСТВ,%20ИЗГОТОВЛЯЕМЫХ%20В%20АПТЕКАХ_html. Найдено в Интернете 12.02.2019).

Кроме этого, недостатком известного средства является низкая эффективность, а именно - низкая фунгицидная и бактерицидная активность. Низкую обеззараживающую активность раствора бензоата натрия, доказывает то, что в медицине водный раствор бензоата натрия используется для обеззараживания много десятилетий в очень высокой концентрации. Например, для достижения обеззараживающего действия при абсцессе легкого и при гнойном бронхите препарат используется в виде раствора 15% бензоата натрия (https://dic.academic.ru/dic.nsf/meditem/1355. Найдено в Интернете 12.02.2019).

В то же время, известно, что растворы наиболее сильных обеззараживающих средств обладают обеззараживающим действием при наличии биоцидных средств в концентрациях, меньше 1%. Поэтому средства, растворы которых обладают обеззараживающим действием при наличии биоцидных средств в концентрациях, превышающих 1%, являются слабыми обеззараживающими средствами. В связи с этим, известное средство, представляющее собой водный раствор бензоата натрия в концентрациях, превышающих 1%, является слабым обеззараживающим средством.

Кроме этого, растворы солей натрия с концентрациями, превышающими 10%, обладают дегидратирующей активностью. Это обусловлено тем, что наличие в воде неорганических солей натрия в концентрации более 2% придает раствору высокую осмотическую активность, превышающую 300 мОсмоль/л воды. В связи с этим раствор 10% бензоата натрия является гипертоническим, поэтому при длительном локальном взаимодействии с тканями и органами человека и животных такой раствор вытягивает из них воду, что изменяет величину массы и объема анатомического препарата, его гистологию и морфологию [1].

Еще одним недостатком известного консерванта является его низкая точность, так как известный консервант имеет значение концентрации основного ингредиента в диапазоне 1-10%. Дело в том, что локальная противогрибковая, противомикробная и антисептическая активность фармакологических средств определяется величиной их концентрации. При этом проявляется следующая закономерность локальной фармакодинамики: сила обеззараживающего действия антисептических и дезинфицирующих средств прямо пропорциональна величине их концентрации. Поэтому растворы 1% бензоата натрия обладают более слабым обеззараживающим действием, чем растворы 10% бензоата натрия. Следовательно, известный консервант не обеспечивает одинаковую обеззараживающую активность растворам бензоата натрия в диапазоне концентраций 1-10%.

Помимо этого, недостатком известного средства является низкая точность осмотической активности раствора, поскольку растворы солей натрия со значениями концентрации ингредиентов в диапазоне 1 - 10% не обеспечивают изоосмотическую активность водному его раствору в пределах 280-300 мОсмоль/л воды [2].

Более того, раствор 1-1,5% бензоата натрия имеет осмотическую активность меньше 280 мОсмоль/л воды, то есть является гипотоническим, а растворы 5-10% бензоата натрия имеют осмотическую активность больше 300 мОсмоль/л воды, то есть являются гипертоническими. Поэтому раствор 1% бензоата натрия способствует набуханию клеток и увеличивает объем и массу тканей и органов, а растворы 5-10% бензоата натрия способствуют уменьшению объема клеток и уменьшают объем и массу тканей и органов.

Следовательно, при локальном взаимодействии растворы 1-1,5% натрия бензоата моделируют отек клеток и тканей, вызывают набухание консервируемых органов, способствуют разрыву набухших клеток, что нарушает морфологию и структуру анатомического препарата. С другой стороны, растворы 5-10% бензоата натрия обладают гипертонической активностью, поэтому при локальном взаимодействии моделируют обезвоживание клеток и тканей, вызывают сморщивание изолированных органов, тканей и их клеток, нарушают морфологию и структуру, а также способствуют дряблости анатомического препарата.

Помимо этого, известное средство не обеспечивает стабильность еще одного своего свойства, а именно - локальной температуры. В связи с этим, средство может иметь какую угодно температуру. В частности, средство может иметь локальную температуру вплоть до +100°С. Однако такая температура вызывает температурную денатурацию и может буквально сварить анатомический препарат при его хранении в кипятке. С другой стороны, средство может иметь температуру ниже 0°С. Такая низкая температура может вызвать замораживание внутритканевой воды и кристаллизацию воды в тканях анатомического препарата, что вызывает необратимое повреждение морфологии и гистологии органов и тканей.

Таким образом, недостатком известного средства является то, что средство не обеспечивает наличие определенной концентрации бензоата натрия в растворе, не обеспечивает раствору осмотическую активность в диапазоне 280-300 мОсмоль/л воды, щелочность при рН 7,4 и локальную температуру в диапазоне 0 - +25°С. В связи с этим средство может являться как гипоосмотическим, так и гиперосмотическим, может быть кислым (иметь рН менее 7,0) или щелочным (иметь величину рН более 7,0), горячим вплоть до температуры кипения, или замершим (иметь температуру ниже 0°С). Причем, бензоат натрия не обладает необходимой буферной активностью. Поэтому при хранении раствор бензоата натрия не имеет стабильную щелочную активность. Такая неточность физико-химических свойств известного средства не обеспечивает ему стабильные консервирующие свойства и стабильную сохранность эстетического результата хранения анатомического препарата.

Известен консервант анатомических препаратов, состоящий из 600,0 мл глицерина чистого, 300,0 г уксуснокислого калия и 1000 мл воды (дистиллированной) [3].

Недостатком известного средства является низкая эффективность, безопасность и точность, так как средство не обеспечивает раствору осмотическую активность в диапазоне 280-300 мОсмоль/л воды, щелочность при рН 7,4 и локальную температуру в диапазоне 0 - +25°С. Дело в том, что глицерин и ацетат калия обладают щелочной активностью, которая в их комбинированных растворах может достигать значений рН 9.0-10.0. В частности, лакмусовая бумажка, опущенная в известный раствор, приобретает фиолетовый цвет, что указывает на щелочность со значением рН 9.0-10.0.

Кроме этого, калия ацетат обладает слабой буферностью. Однако известный раствор не сохраняет значение своей щелочности стабильным и одинаковым при хранении, поскольку буферная активность раствора калия ацетата слабая. К тому же, раствор готовится без контроля рН, что не обеспечивает ему определенную щелочность.

Дополнительно к этому известное средство обладает высокой осмотической активностью. Введение в 1000 мл дистиллированной воды 600 мл глицерина и уксуснокислого калия в массе 300 г придает раствору гипертоническую активность. В связи с этим известное средство вытягивает воду из анатомического препарата, обезвоживает его клетки, ткани и органы, а также уменьшает величину их массы и объема при хранении. Следствием обезвоживающего действия средства является сморщивание анатомического препарата и существенное изменение гистологии и морфологии его тканей.

Помимо этого, известное средство не обеспечивает стабильность локальной температуры. В связи с этим, средство может иметь какую угодно температуру. В частности, средство может иметь чрезмерно высокую локальную температуру (вплоть до +100°С). Однако такая высокакя температура вызывает температурную денатурацию и может буквально сварить анатомический препарат при его хранении в кипятке. С другой стороны, средство может иметь чрезмерно низкую температуру (ниже 0°С). Такая чрезмерно низкая температура может вызвать замораживание внутритканевой воды и кристаллизацию воды в тканях анатомического препарата, что вызывает необратимое повреждение морфологии и гистологии органов и тканей.

Таким образом, недостатком известного средства является то, что оно не обеспечивает раствору осмотическую активность в диапазоне 280-300 мОсмоль/л воды, щелочность при рН 7,4 и локальную температуру в диапазоне 0 - +25°С. В этих условиях средство может являться гиперосмотическим, чрезмерно щелочным (иметь величину рН более 9,0), горячим вплоть до температуры кипения, или замершим (иметь температуру ниже 0°С). Такая неточность физико-химических свойств известного средства не обеспечивает ему стабильные консервирующие свойств и высокий эстетический результат хранения анатомического препарата.

Известен раствор, содержащий 0-0,1% 3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамата (IPBC), предназначенный для защиты от плесени и грибков злободневных продуктов и косметики (https://en.wikipedia.org/wiki/Iodopropynyl_butylcarbamate. Найдено в Интернете 12.02.2019).

Недостатком известного средства является низкая эффективность, безопасность, точность и узкий спектр применения. Дело в том, что средство не предназначено для консервации изолированных органов и тканей тела человека и животных с целью последующей многократной открытой демонстрации анатомических препаратов в процессе обучения студентов и школьников анатомии человека и/или животных.

К тому же, известное средство имеет низкую точность, так как допускает использование растворов с концентрацией основного действующего вещества в диапазоне значений 0-0,1%. Иными словами, известное средство допускает наличие водного раствора, в котором 3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамат (IPBC) растворим в концентрации, близкой к 0, то есть в гомеопатической концентрации. Однако гомеопатические препараты не обеспечивают фунгицидное и бактериоцидное действие, поэтому не защищают биологические ткани от плесени и грибкового заражения. Поэтому известное средство не обеспечивает обеззараживание и длительное хранение изолированных органов и тканей человека и животных при нормальной комнатной температуре с целью их многократного изъятия из раствора для визуального осмотра студентами и школьниками при изучении анатомии.

Кроме этого, известное средство, а именно - раствор 0-0,1% 3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамата, не обеспечивает осмотическую активность в диапазоне 280-300 мОсмоль/л воды, так как известное средство имеет осмотическую активность менее 28 мОсмоль/л воды. В связи с этим известное средство является гипотоническим. Поэтому это средство при длительном локальном взаимодействии с органами и тканями человека и животных увеличивает в них содержание воды, увеличивает объем их клеток, органов и тканей, что нарушает гистологию и морфологию органов и тканей.

Кроме этого, известное средство не обладает щелочной буферностью, поэтому не обеспечивает консервирующему раствору рН 7,4 при его хранении. Более того, раствор консерванта имеет неизвестную щелочность.

Помимо этого, известное средство не обеспечивает стабильность локальной температуры. В связи с этим, средство может иметь чрезмерно высокую локальную температуру (вплоть до +100°С). Однако такая высокая температура вызывает температурную денатурацию и может буквально сварить анатомический препарат при его хранении в кипятке. С другой стороны, средство может иметь чрезмерно низкую температуру (ниже 0°С). Такая чрезмерно низкая температура может вызвать замораживание внутритканевой воды и кристаллизацию воды в тканях анатомического препарата, что вызывает необратимое повреждение морфологии и гистологии органов и тканей.

Таким образом, недостатком известного средства является то, что оно не обеспечивает раствору осмотическую активность в диапазоне 280-300 мОсмоль/л воды, щелочность при рН 7,4 и локальную температуру в диапазоне 0 - +25°С. Поэтому известное средство может являться гиперосмотическим, чрезмерно щелочным (иметь величину рН более 9,0), горячим вплоть до температуры кипения, или замершим (иметь температуру ниже 0°С). Такая неточность физико-химических свойств известного средства не обеспечивает ему стабильные консервирующие свойств и высокий эстетический результат хранения анатомического препарата

Известен водорастворимый консервант 3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамат (iodopropynyl butylcarbamate; 3-Iodo-2-propynyl N-butylcarbamate; 3-Iodo-2-propynyl butylcarbamate; Iodocarb; IPBC), имеющий химическую формулу C8H12INO2, представляющий собой белый порошок (http://www.fengchengroup.net/chemicals/featured-chemicals/iodopropynyi-butylcarbamate-ipbc-iodopropynyl.html Найдено в Интернет 12.02.2019).

Недостатком средства является узкая сфера применения, низкая безопасность, эффективность и точность. Дело в том, что оно не предназначено для консервации и хранения изолированных органов и тканей с целью открытой демонстрации анатомических препаратов студентам и школьникам во время изучения анатомии человека и животных, поскольку не является водным раствором. Обсыпание изолированных органов и тканей сухим порошком основного действующего вещества (IPBC) вызывает обезвоживание и сморщивание анатомических препаратов, что нарушает их гистологию и морфологию. Дегидратирующее действие известного средства обусловлено высокой концентрацией и осмотической активностью действующего вещества в растворе, который образуется по неведению из воды, вытягиваемой средством из клеток и тканей, так как средство обладает осмотической активностью. К тому же средство обладает защелачивающим действием, которое растет по мере увеличения концентрации средства в растворе. В связи с этим первоначально средство имеет высокую осмотическую активность из-за высокой концентрации средства в растворе. Затем объем воды, вытянутой из биологического объекта, растет, вода уменьшает концентрацию растворенного в ней ингредиента и снижает осмотическую активность раствора. В связи с этим известное средство обладает высокой и нестабильной осмотической и щелочной активностью. Такие физико-химические свойства обеспечивают средству высокую физико-химическую агрессивность, которая в итоге нарушает гистологию и морфологию анатомического препарата, поскольку высокая щелочная и осмотическая активность омыляет липидные и белково-липидные комплексы, включая мембраны клеток [4].

Известен трис(гидроксиметил)аминометана - натрия хлорида буферный раствор рН 7,4, который готовится растворением в 500 мл воды 6,08 г трис(гидроксиметил)аминометана, 8,77 г натрия хлорида и 10,0 г альбумина бычьего и доведением щелочности раствора до рН 7,4 потенциометрически с помощью хлористоводородной кислоты концентрированной. Затем доводят объем раствора водой до 1000,0 мл (Фармакопея РФ. ОФС.1.3.0003.15 Буферные растворы. (https://pharmacopoeia.ru/ofs-1-3-0003-15-bufernye-rastvory/. Найдено в Интернете 15.02.2019).

Недостатком известного средства является узкий диапазон применения, низкая эффективность, безопасность и точность. Дело в том, что средство не предназначено для хранения и открытой демонстрации анатомического препарата. Известное средство обладает низкой противогрибковой и противомикробной активностью. Оно не относится к антисептикам и к дезинфицирующим средствам. Поэтому при длительном хранении анатомического препарата не защищает его от грибкового и микробного повреждения.

Задача изобретения - расширение сферы применения, повышение эффективности, безопасности и точности за счет осмотической, щелочной и температурной активности в диапазонах физиологических значений.

Поставленная цель достигается за счет водного изотонического и изощел очного раствора 3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамата, трис(гидроксиметил)аминометана и натрия хлорида, сохраняющего массу, объем, эластичность (упругость), анатомическую и гистологическую целостность структуры анатомического препарата и эстетический результат при его хранении и открытой демонстрации в комнатных условиях при температуре 0 - +25°С без образования в нем плесени и без его грибкового и микробного инфицирования.

Сущность предложенного консерванта для анатомических препаратов, предназначенного для хранения изолированных органов и тканей с целью открытой демонстрации студентам и школьникам в процессе их обучения, включающего 3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамат, щелочной буфер, соль щелочного металла и дистиллированную воду заключается в том, что в качестве буфера используется трис(гидроксиметил)аминометан, в качестве соли щелочного металла используется натрия хлорид, при этом компоненты содержатся при следующем соотношении (мас. %):

3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамат - 0,0145-0,0195;

натрия хлорид - 0,9;

трис(гидроксиметил)аминометан - 0,6;

вода дистиллированная - остальное, при рН 7,4, осмотической активности 280-300 мОсмоль/л воды и локальной температуре 0 - +25°С.

Введение в раствор заявленного консерванта 0,0145-0,0195% 3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамата расширяет сферу применения, повышает точность, безопасность и эффективность средства, поскольку обеспечивает создание консервирующего раствора, в котором 3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамат содержится в диапазоне концентраций, обеспечивающем эффективную биоцидную активность, достаточную для подавления роста и размножения грибов и других микроорганизмов при сохранении массы, объема, а также тканевой и органной целостности анатомического препарата, и высокую безопасность раствора для людей. Дело в том, что в заявленном растворе концентрация 3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамата не превышает 0,02%. В то же время, наличие в растворе 3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамата в концентрации 0,02% является максимально допустимой концентрацией этого средства в растворах, разрешенных для применения в роли гигиенических средств, контактирующих с кожей человека. Поэтому заявленное средство исключает хроническое отравление обслуживающего и обучающегося персонала при многократных контактах их с раствором и с анатомическим препаратом. Отсутствие опасности острого и хронического отравления людей при контакте с раствором консерванта расширяет допуск к обучению анатомии людей посредством открытой демонстрации им влажного анатомического препарата с возможностью безопасного взятия его в руки. В частности, беременные девушки тоже могут быть среди обучающихся анатомии.

Наличие в водном растворе 0,0145-0,0195% 3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамата, обладающего надежной антисептической активностью, обеспечивает стерильность заявленному средству и стерильность погруженному в него анатомическому препарату. Поэтому заявленный консервант исключает грибковое и микробное разрушение анатомического препарата при его хранении и открытой демонстрации.

Наличие в заявленном водном растворе 0,9% натрия хлорида обеспечивает заявленному раствору консерванта базовую изотоническую активность, равную 285 мОсмоль/л воды. Выбор в роли осмотического компонента именно натрия хлорида объясняется тем, что натрия хлорид является главным естественным осмотическим компонентом в организме человека и животных. Именно хлорид натрия обеспечивает в нем нормальную осмотическую активность в пределах 280-300 мОсмоль/л воды в плазме крови, в лимфе, в клеточной и межклеточной жидкости.

Остальные ингредиенты заявленного раствора консерванта придают ему суммарную осмотическую активность не более 10 мОсмоль/л воды. В связи с этим заявленный раствор лекарственного средства имеет суммарную осмотическую активность не менее 285 и не более 295 мОсмоль/л воды, то есть обладает нормальной осмотической активностью, присущей для плазмы крови и межклеточной жидкости в тканях человека и теплокровных животных в норме, то есть в диапазоне физиологических значений.

Наличие в заявленном растворе 0,6% трис(гидроксиметил)аминометана обеспечивает консервирующему раствору нужную щелочную буферную активность, обеспечивающую стабильное значение рН 7,4 при хранении и открытой демонстрации анатомического препарата. Дело в том, что именно трис(гидроксиметил)аминометан рекомендуется использовать в роли буфера для биохимических, биофизических и физиологических лабораторных исследований функциональной и морфологической активности изолированных органов, их тканей, клеток и субклеточных органелл. Кроме этого, именно трис(гидроксиметил)аминометан вводят в роли щелочного буфера в состав консервирующих растворов, предназначенных для консервации жизнеспособных изолированных органов (RU 2025973).

Щелочная активность заявленного консерванта при значении рН 7,4 является физиологической нормой для большинства органов и тканей человека и теплокровных животных. Поэтому заявленный консервирующий раствор с рН 7,4 обеспечивает нормальную щелочную среду, сохраняющую структуру тканей при хранении изолированных органов и тканей, то есть обеспечивает щелочность в диапазоне физиологических значений.

Сохранение в заявленном растворе локальной температуры в диапазоне 0 - +25°С исключает, с одной стороны, замораживание анатомического препарата и его разрушение кристаллами внутритканевой воды, а с другой стороны исключает кипение раствора, сгущение его вследствие чрезмерного испарения воды при кипении, приобретение раствором гиперосмотической активности, термическую варку анатомического препарата и термическое ухудшение эстетического результата его хранения.

В связи с указанной осмотической, щелочной и температурной активностью средство моделирует своими физико-химическими свойствами жидкую и естественную артериальную, венозную кровь, лимфу и межуточную жидкость. Поэтому при помещении изолированных органов и/или тканей в заявленный раствор, он обеспечивает локальное физико-химическое взаимодействие с анатомическим препаратом в диапазоне физиологических значений. При этом состав заявленного средства и контролируемые физико-химические свойства обеспечивают ему стабильность осмотической, щелочной активности при хранении и консервации помещенного в него анатомического препарата.

Разработанный консервирующий раствор может быть применен для длительного хранения приготовленного анатомического препарата и многократной его открытой демонстрации студентам и школьникам во время изучения анатомии.

Следовательно, заявленное консервирующее средство расширяет диапазон применения, повышает эффективность, безопасность и точность, поскольку физико-химические свойства средства моделируют соответствующие свойства жидких сред организма, а именно - моделирует оптимальную осмотическую, щелочную и температурную жидкую среду, стабилизирующую сохранность анатомической и гистологической целостности приготовленного анатомического препарата при его хранении и открытой демонстрации обучающимся.

Пример. Проведены лабораторные исследования изолированной четырехглавой мышцей бедра свиньи. Мышца была приобретена в фирменном магазине Сюмсинского мясокомбината республики Удмуртия. Кусок мышцы имел массу 200 г. В условиях лаборатории купленный кусок мышцы промыли водой из-под крана, удалили кровь со всей поверхности, выделили 1 прободающую артерию (a. perforantes) и соответствующие вены, через которые произвели инъекционное инфильтрирование мышцы бальзамирующим раствором, содержащим 7% формалина с добавлением тимола из расчета 1 г на 10 литров, после чего погрузили мышцу целиком в этот раствор при температуре +25°С, налитый в кастрюлю из нержавеющей стали, и закрыли емкость крышкой. После этого емкость с мышцей, погруженной в раствор, поместили в шкаф на 30 дней при температуре +25°С. Через 30 дней достали кусок мышцы, промыли его водой из-под крана, осушили с помощью ветоши и приготовили из цельного куска изолированные кусочки кубической формы с длиной ребер 1 см. Кусочки были приготовлены с помощью 2-х лезвий бритв, закрепленных на расстоянии 10 мм параллельно друг другу и перпендикулярно основанию (в роли основания использовали зубную щетку).

Выбрали 15 изолированных кусочков четырехглавой мышцы бедра свиньи. Перед началом исследований определяли массу и объем каждого кусочка. Массу кусков определяли взвешиванием на аналитических весах, объем кусков определяли по объему воды, вытесненной из мерной колбы при погружении в нее кусочка.

Было проведено 3 серии опытов.

В первой серии опытов взяли 5 кусочков мышцы и погрузили их полностью в 50 мл водного раствора 10% бензоата натрия при температуре +25°С (серия опытов №1);

Во второй серии опытов взяли 5 других кусочков мышцы и поместили их в 50 мл раствора, приготовленного из 600,0 мл глицерина чистого, 300,0 г уксуснокислого калия и 1000 мл воды (дистиллированной) при температуре +25°С (серия опытов №2);

После этого все емкости с растворами, в которые были полностью погружены все кусочки мышц, были герметично закрыты и поставлены в темный шкаф для консервации на 30 суток при температуре +25°С.

Через 30 суток емкости с консервируемыми изолированными кусочками мышц были открыты и было изучено состояние растворов и кусочков мышцы. Анализ содержимого показал следующее.

В первой емкости поверхность жидкости (раствор 10% бензотата натрия) и стенки емкости были покрыты плесенью.

Во второй емкости на границе поверхности жидкости со стенкой (раствор, приготовленный из 600,0 мл глицерина чистого, 300,0 г уксуснокислого калия и 1000 мл дистиллированной воды) имелась зона, покрытая плесенью.

В третьей емкости раствор (заявленный раствор) был прозрачен, стенки емкости были чистыми, плесени не было.

После этого все кусочки были поочередно изъяты из консервирующих растворов, разделены на 3 группы (по 5 кусочков в каждой группе), помещены в отдельные емкости со свежей водопроводной водой при температуре +25°С на 1 минуту для промывания. Затем все кусочки были высушены с помощью марлевых тампонов, после чего были определены значения их объемов и масс.

При этом были получены следующие результаты.

В первой серии опытов исходная масса и объем кусочков составляли 1,085210±0,08 г и 0,992±0,08 мл (Р≤0,05, n=5), а через 30 суток консервации в растворе масса и объем этих кусочков составили 1,045500±0,09 г и 0,981±0,07 мл (Р≤0,05, n=5). Следовательно, изолированные кусочки скелетной мышцы бедра свиньи при консервации в водном растворе 10% бензоата натрия уменьшились в объеме и в массе.

Во второй серии опытов исходная масса и объем кусочков составляли 1,077644±0,08 г и 1,005±0,06 мл (Р≤0,05, n=5), а через 30 суток нахождения в растворе масса и объем этих кусочков составили 1,029500±0,07 г и 0,898±0,06 мл (Р≤0,05, n=5). Следовательно, изолированные кусочки скелетной мышцы свиньи при консервации в растворе, приготовленном из 600,0 мл глицерина чистого, 300,0 г уксуснокислого калия и 1000 мл дистиллированной воды уменьшились в объеме и в массе.

В третьей серии опытов исходная масса и объем кусочков составляли 1,055000±0,06 г и 1,090±0,05 мл (Р≤0,05, n=5), а через сутки нахождения в растворе масса и объем этих кусочков составили 1,066450±0,06 г и 1,085±0,05 мл (Р≤0,05, n=5). Следовательно, изолированные кусочки скелетной мышцы свиньи после консервации в растворе, приготовленном на дистиллированной воде и включающем 0,0145-0,0195% 3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамата, 0,9% натрия хлорида и 0,6% трис(гидроксиметил)аминометана при щелочной активности со значением рН 7,4, осмотической активности со значением 290 мОсмоль/л воды при температуре +25°С сохранили исходный объем и в массу.

Полученные результаты свидетельствуют о том, что раствор, приготовленный на дистиллированной воде и включающий 0,0145-0,0195% 3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамата, 0,9% натрия хлорида и 0,6% трис(гидроксиметил)аминометана при щелочной активности со значением рН 7,4, осмотической активности со значением 290 мОсмоль/л воды при температуре +25°С является самым безопасным и эффективным консервирующим средством и обеспечивает профилактику грибкового заражения и появления плесени, а также стабильность сохранения массы и объема анатомического препарата при его хранении в условиях комнатной температуры.

Таким образом, консервирующий раствор, представляющий собой водный раствор, содержащий 0,0145-0,0195% 3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамата, 0,9% натрия хлорида и 0,6% трис(гидроксиметил)аминометана в дистиллированной воде при щелочности со значением рН 7,4, осмотической активности 280-300 мОсмоль/л воды и локальной температуре, (раствор №1), обладает фунгицидным, массосохраняющим и объемосохраняющим действием на анатомический препарат, приготовленный из изолированной скелетной мышцы свиньи, при полном погружении анатомического препарата в консервирующий раствор. Погружение готового анатомического препарата в заявленный раствор приводит к сохранению воды в нем и к сохранению массы и объема анатомического препарата. При этом средство оказывает фунгицидное и бактериоцидное действие на анатомический препарат, стерилизует его, что предотвращает инфицирование тканей препарата в нестерильных условиях. Кроме этого, средство обладает нормальной щелочной активностью, которая сохраняет эластичность липидно-белковых комплексов, составляющих основу всех мембран в анатомическом препарате.

Следовательно, предложенное средство, содержащее 0,0145-0,0195% 3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамат, 0,9% натрия хлорида и 0,6% трис(гидроксиметил)аминометана в дистиллированной воде при щелочности со значением рН 7,4, осмотической активности 280-300 мОсмоль/л воды и локальной температуре 0 - +25°С, сохраняет массу, объем и структуру анатомического препарата при хранении и многократной открытой демонстрации препарата без образования в нем плесени и без его грибкового и микробного инфицирования.

Изобретение расширяет сферу применения, повышает эффективность, безопасность и точность за счет осмотической, щелочной и локальной температурной активности в диапазонах физиологических значений.

Источники информации

1. Ураков А.Л., Уракова Н.А., Ловцова Л.В., Сорокина Ю.А., Занозина О.В. Осмотическая активность и безопасность инъекционных форм нестероидных противовоспалительных препаратов. Экспериментальная и клиническая фармакология. 2018. Т. 81. №10. С.15 - 19.

2. Urakov A. L. The change of physical-chemical factors of the local interaction with the human body as the basis for the creation of materials with new properties. of Silicate Based and Composite Materials. 2015. V. 67, No. 1. P. 2-6).

3. Гончаров, Руководство по препарированию и изготовлению анатомических препаратов. 2002. С. 118-120. (https://studfiles.net/preview/5769894/page:12/ Найдено в Интернете 19.01.2019).

4. Urakov A., Urakova N., Chernova L. Possibility of dissolution and removal of thick pus due to the physical-chemical characteristics of the medicines. Journal of Materials Science and Engineering B. 2013. V. 3. N 11. P. 714-720.

Консервант для анатомических препаратов, предназначенный для хранения изолированных органов и тканей с целью открытой демонстрации студентам и школьникам в процессе их обучения анатомии, включающий 3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамат, щелочной буфер, соль щелочного металла и дистиллированную воду, отличающийся тем, что в качестве буфера используется трис(гидроксиметил)аминометан, в качестве соли щелочного металла используется натрия хлорид, при этом компоненты содержатся при следующем соотношении, мас. %:

3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамат - 0,0145-0,0195;

натрия хлорид - 0,9;

трис(гидроксиметил)аминометан - 0,6;

вода дистиллированная – остальное;

при рН 7,4, осмотической активности 280-300 мОсмоль/л воды и температуре 0 - +25°С.



 

Похожие патенты:

Изобретение относится к консервированию культуры клеток. Для замораживания клеток-предшественников периферической крови (КППК) производят выделение свежезаготовленного концентрата ядерных клеток (КЯК), смешивание КЯК с криоконсервантом Гекмодиолит (ГД) в полимерном криопакете (ПК) в равных пропорциях, его герметизацию, маркировку, укладку ПК в металлический пенал-холдер, КППК в присутствии ГД от плюс 4°С до минус 80°С по трехступенчатой программе в электрических холодильниках с установленной температурой изотермической холодовой адаптации клеток (TA), причем на первом этапе замораживания холдер с КППК помещают на 10 мин в электроморозильник с TA плюс 4±1°С, на втором этапе холдер переносят на 10 мин в электроморозильник с TA минус 7±1°С, на третьем этапе холдер переносят в электроморозильник с TA минус 28±1°С, выдерживают в этих условиях в течение 25 мин, после чего переносят в хранилище-морозильник с температурой минус 80±2°С для полного замораживания клеточной взвеси и длительной консервации.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к улучшению размораживания банков клеток, замораживанию клеток яичника китайского хомячка (СНО), композиции для замораживания клеток СНО и банку клеток.

Изобретение относится к медицине, а именно к технологии замораживания клеток-предшественников периферической крови с криоконсервантом Гекмолит. Замораживание клеток-предшественников периферической крови (КППК) проводят поэтапно: производят смешивание его с концентратом КППК в равных пропорциях в одноразовом пластиковом контейнере, затем его герметизируют, паспортизируют, помещают в металлический пенал-холдер, после чего осуществляют поэтапное замораживание клеточной взвеси от плюс 4°С до минус 80°С в электрических рефрижераторах с регулируемой установкой температуры холодовой адаптации клеток, размораживание в водяной бане до температуры плюс 2÷4°С в клеточной взвеси, при этом на первом этапе замораживания контейнеры с суспензией КППК выдерживают 10 минут в электрическом морозильнике, с установленной температурой плюс 4°С, на втором этапе биообъект переносят в электроморозильник с температурой минус 28±1°С, выдерживают в этих условиях в течение 25 мин, после чего биообъект переносят в морозильник-хранилище с температурой минус 80±2°С для окончательного замораживания и длительной криоконсервации КППК.

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к питательной среде для транспортировки клеток для дальнейшего цитологического и иммуноцитохимического исследования.

Изобретение относится к медицине. Средство для гипотермической консервации трансплантата роговицы включает ингредиенты при следующем их соотношении, мас.%: Среда 199 с солями Хэнкса 41,15 Среда F-12 с Hepes 25,00 Среда DMEM с Hepes 25,00 L-глутамин 0,145 Хондроидина сульфат А 1,00 Декстран-40 5,70 Антибиотик-антимикотик (Пенициллин- Стрептомицин- Амфотерицин В) 2,00 Триметазидина дигидрохлорид 0,005 Изобретение позволяет осуществить фармакологическую защиту клеточных мембран кератоцитов и эндотелия роговицы в процессе холодового хранения, содействовать восстановлению поврежденных структур, защите трансплантата роговицы от гипоксического и гипотермического стрессов, и как следствие, предупреждить развитие энергодефицитного состояния в результате снижения внутриклеточной концентрации аденозинтрифосфата, а также пролонгировать сроки консервации без существенного снижения плотности эндотелиальных клеток.

Изобретение относится к способу получения костного имплантата и может быть использовано в медицине. Предложен способ получения костного имплантата на основе стерильного деорганифицированного костного матрикса, включающий механическую обработку кости фрезерованием с учетом направления остеонных структур кости в среде охлажденного до 4°С стерильного раствора, удаление органической фазы из костной заготовки, инкубацию деминерализованного костного матрикса в растворе сангвиритрина для его иммобилизации с последующей 2-этапной комбинированной стерилизацией озоно-кислородной смесью с концентрацией озона 6-8 мг/л, продолжительностью 10-20 мин в проточном режиме на первом этапе и радиационным облучением потоком быстрых электронов с величиной поглощенной дозы 11-15 кГр герметично упакованных образцов на втором этапе.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к нерегламентирорванному замораживанию клеток-предшественников периферической крови. Способ включает приготовление раствора криоконсерванта, для чего берут раствор Dimethylsulfoxide («Sigma-Aldrich», France) высокой степени очистки (≥99,99%) с ПП 0,200-0,220, в условиях гипотермии добавляют его в раствор для инфузий из натрия хлорида 2,25 г и воды для инъекций до 250 мл в пластиковом контейнере до получения концентрации DMSO 10% и производят смешивание его с концентратом аферезных клеток-предшественников периферической крови в равных пропорциях, замораживание от плюс 17÷ плюс 25°С до минус 80°С в режиме трехступенчатой программы в электрических рефрижераторах с установленной контрольной температурой изотермической холодовой адаптации на каждом этапе замораживания.

Изобретение относится к биотехнологии, а именно к безопасному хранению и транспортировке трансплантируемого охлажденного сердца животных под давлением консервирующей газовой среды и мобильному устройству для этого.

Изобретение относится к области биотехнологии. Данный способ витрификации ооцитов млекопитающих может быть успешно применён к сельскохозяйственным животным, в частности для крупного рогатого скота (КРС).

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для получения гамма-глобулиновой и альбуминовой фракций плазмы крови с помощью химических дезинфектантов.

Изобретение относится к медицине и фармации. Консервант для анатомических препаратов, предназначенный для хранения изолированных органов и тканей с целью открытой демонстрации студентам и школьникам в процессе их обучения анатомии, включает 3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамат, щелочной буфер, соль щелочного металла и дистиллированную воду. В качестве буфера он содержит трисаминометан, в качестве соли щелочного металла - натрия хлорид, при этом компоненты содержатся при следующем соотношении, мас. : 3-йодопроп-2-ин-1-ил бутилкарбамат - 0,0145-0,0195; натрия хлорид - 0,9; трисаминометан - 0,6; вода дистиллированная - остальное, при рН 7,4, осмотической активности 280-300 мОсмольл воды и температуре 0 - +25°С. Изобретение позволяет осуществлять длительное хранение и многократную открытую демонстрацию изолированных органов и тканей с целью использования их в учебном процессе в виде анатомических препаратов.

Наверх