Клеточная линия карциномы легких мыши срх-1, предназначенная для разработки противоопухолевой вакцины

Изобретение относится к области медицинской биотехнологии и касается клеточной линии карциномы легких мыши СРХ-1, предназначенной для разработки вакцины. Опухолевая линия СРХ-1 возникла спонтанным мутированием из карциномы легких Льюиса (LLC) мышей в процессе длительного пересева. Хранится в специализированной коллекции культур клеток ЦКП «Коллекция культур клеток позвоночных» Института Цитологии РАН под номером РККК (П) 778Д. 1 пр.

 

Изобретение относится к области медицинской биотехнологии и касается клеточной линии карциномы легких мыши СРХ-1, предназначенной для разработки вакцины. Вакцины, приготовленные на основе опухолевых клеток, состоят из аллогенных, аутологичных и ксеногенных опухолевых клеток или их компонентов. Опухолевая линия СРХ-1 может быть предложена как безопасный иммуногенный субстрат для разработки препарата применяемого для лечения и профилактики карциномы у человека и млекопитающих (кошки, собаки и др.).

Цель изобретения - получение новой клеточной линии карциномы легких мыши и использование ее в разработке противоопухолевой вакцины.

Опухолевая линия СРХ-1 возникла спонтанным мутированием из карциномы легких Льюиса (LLC) мышей в процессе длительного пересева. Полученная клеточная линия обладает стабильными культуральными и морфологическими характеристиками. Хранится в Специализированной коллекции культур клеток ЦКП «Коллекция культур клеток позвоночных» Института Цитологии РАН под номером РККК (П) 778Д.

Морфологические признаки клеточной линии СРХ-1.

Культура клеток состоит из полиморфных клеток, большинство которых имеет округлую форму. Значительная часть клетки занята ядром с крупными ядрышками и крупными конденсированными зернами хроматина. Фигуры митозов наблюдается в 36,7% клеток. Цитоплазма не гомогенная.

Генетический анализ клеточной линии СРХ-1:

1. Выявлено присутствие мышиных генов раковых маркеров в хромосомной ДНК: mage А-1, GP100, тирозиназы, her2/neu, раково-эмбрионального антигена.

2. Выявлены белковые продукты экспрессии генов тирозиназы, GP100.

Культуральные свойства клеточной линии СРХ-1.

Опухолевые клетки культивируют в среде RPMI 1640, содержащей 10% эмбриональной телячьей сыворотки, 2 мМ L-глутамина, 1% HEPES, в культуральных флаконах (Costar). Клетки СРХ-1 растут в виде суспензионной культуры. Концентрация клеток при посеве - 10000 кл/мл, кратность рассева - 1:3.

Кариотипирование. Цитогенетический анализ СРХ-1 выявил сильно перестроенный кариотип, большей частью состоящий из акроцентрических хромосом, характерных для мыши, Mus museums. Клетки характеризуются полиплоидным числом хромосом, разброс по числу хромосом варьирует от 78 до 94, модальный класс выражен нечетко. Чаще встречаются клетки четырех вариантов, содержащие 88, 89, 90 и 91 хромосомы. В 22% клеток модальное число хромосом равно 88. Кариотип клеток линии СРХ-1 околотетраплоиден.

ПЦР-анализ клеточной линии СРХ-1. В линии клеток СРХ-1 присутствуют девять микросателлитов, маркирующих восемь разных хромосом мыши. Праймеры для амплификации микросателлитов видоспецифичны для мыши.

Условия криоконсервации.

Состав среды для криоконсервации: 90% инактивированная фетальная бычья сыворотка, 10% DMSO, концентрация клеток - 1,0 млн./ мл. Заморозка производится в программном замораживателе при понижении температуры на 1°/мин. Хранение клеточной линии происходит в жидком азоте при -196°С. Размораживание производится в водяной бане при 37°С. Жизнеспособность клеток после размораживания, определенная методом исключения трипанового синего и составляет 80%.

Контаминация. При длительном наблюдении бактерии и грибы в культуре не обнаружены. Тест на микоплазму отрицателен.

Пример 1. Культивирование клеточной линии СРХ-1.

СРХ-1 перевивается на самках и самцах мышей линии С57В 1/6 подкожным введением. Доза перевивки - 2×105-5×105 живых клеток в физиологическом растворе. Перевиваемость 100%. Средняя продолжительность жизни животных равна 21-31 день. При подкожной имплантации опухоль растет в виде солидного образования.

Клеточная линия карциномы легких мыши СРХ-1, предназначенная для разработки противоопухолевой вакцины, возникла спонтанным мутированием из карциномы легких Льюиса (LLC) мышей в процессе длительного пересева, обладает стабильными культуральными и морфологическими характеристиками, хранится в специализированной коллекции культур клеток ЦКП «Коллекция культур клеток позвоночных» Института Цитологии РАН под номером РККК (П) 778Д.



 

Похожие патенты:

Группа изобретений относится к области биотехнологии. Предложены штаммы споробразующих бактерий-антагонистов с антифузариозной активностью (варианты), биопрепарат для защиты сельскохозяйственных культур от фузариоза, способ изготовления биопрепарата и способ защиты сельскохозяйственных культур от фузариоза.

Изобретение относится к штамму бактерий Bacillus cereus, предназначенному для получения пробиотического препарата. Штамм бактерий Bacillus cereus (DPRK-17) депонирован в Ведомственной коллекции полезных микроорганизмов сельскохозяйственного назначения (RCAM) под номером RCAM04578.

Настоящее изобретение относится к биотехнологии и может быть использовано для культивирования бактерий Bacillus subtilis ВКПМ В-12079. Питательная среда для культивирования бактерий Bacillus subtilis ВКПМ В-12079 содержит пептон ферментативный, дрожжевой экстракт, натрий хлористый, горох шлифованный, предварительно обработанный автоклавированием, карбонат кальция, фосфат калия и дистиллированную воду при заданном соотношении компонентов.

Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложены штаммы Lactobacillus reuteri CECT-8605 и Bifidobacterium breve CECT 8606, обладающие способностью поглощать холестерин; композиция, фармацевтический продукт, корм или продукт питания, содержащие указанные штаммы; способ получения пробиотических штаммов с повышенной способностью поглощать холестерин, включающий этап инактивации клеток или этап культивирования клеток при рН от 6 до 9, и способ получения микроорганизма с повышенной способностью поглощать холестерин, включающий приведение Bifidobacterium breve CECT 8606 в контакт c белковым экстрактом из Lactobacillus reuteri CECT-8605.

Группа изобретений относится к биотехнологии. Предложены матрица, содержащая жизнеспособные непатогенные Escherichia coli, и способ получения матрицы.

Изобретение относится к штамму Lactobacillus salivarius CJLS1511, к кормовой добавке для домашних животных, содержащей указанный микроорганизм или его инактивированные бактериальные клетки, корму для домашних животных, содержащему указанную кормовую добавку, и к способу получения инактивированных бактериальных клеток указанного штамма.

Группа изобретений относится к фармацевтической микробиологии, в частности, к количественному определению стрептомицина и гентамицина в лекарственных средствах. Предложен способ количественного определения гентамицина и стрептомицина в лекарственных средствах турбидиметрическим методом и жидкая питательная среда для культивирования микроорганизмов при количественном определении гентамицина и стрептомицина в лекарственных средствах.

Изобретение относится к биотехнологии Штамм бактерий Streptomyces violascens 58-17-19, обладающий способностью синтезировать гиалуроновую кислоту, депонирован в ФГБНУ ВНИИСХМ под регистрационным номером RCAM05118.

Изобретение относится к области биотехнологии, микробиологии, экологии. С целью обеспечения эффективной очистки от различных углеводородов почв, загрязнение которых вызвано нефтью или нефтепродуктами с повышенным содержанием сернистых соединений.

Изобретение относится к биотехнологии. Предложен психротолерантный штамм мицелиального гриба Geomyces pannorum, обладающий способностью к синтезу α-амилазы при пониженном температурном оптимуме, депонированный во Всероссийской коллекции микроорганизмов Института биохимии и физиологии микроорганизмов им.

Изобретение относится к области биотехнологии, а именно к рекомбинантной клеточной CYTO-CAR-YT-Lact, проявляющей повышенную цитотоксическую активность по отношению к PSMA-позитивным раковым клеткам человека.
Наверх