Способ прогнозирования хронической компенсированной плацентарной недостаточности в третьем триместре беременности у женщин с цитомегаловирусной инфекцией в анамнезе

Авторы патента:

G01N33/53 - иммунологический анализ, анализ биоспецифического связывания, материалы для этого (препараты для терапевтических целей, содержащие антигены или антитела,A61K; гептены вообще, см. соответствующие рубрики в классе C07; пептиды, например протеины, вообще C07K)

G01N33/00 - Исследование или анализ материалов особыми способами, не отнесенными к предыдущим группам

Владельцы патента RU 2728679:

Федеральное государственное бюджетное научное учреждение «Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания» (RU)

Изобретение относится к медицине, а именно к акушерству. Способ прогнозирования хронической компенсированной плацентарной недостаточности в третьем триместре беременности у женщин с цитомегаловирусной инфекцией в анамнезе заключается в том, что у серопозитивных по цитомегаловирусу женщин во втором триместре беременности определяют в сыворотке крови иммуноферментным методом анализа содержание интерферона-гамма (IFN-γ) (пг/мл) (А), фактора некроза опухоли-альфа (TNF-α) (пг/мл) (B), интерлейкина-1бета (IL-1β) (пг/мл) (C) и эстриола (нмоль/л) (N), а затем прогнозируют развитие хронической компенсированной плацентарной недостаточности в третьем триместре беременности с помощью дискриминантного уравнения: D = -0,016×A -0,084×B - 0,118×C -0,123×N, где D – дискриминантная функция, и при D, равном или больше -15,33, прогнозируют отсутствие риска хронической компенсированной плацентарной недостаточности в третьем триместре беременности, при D меньше -15,33 прогнозируют развитие хронической компенсированной плацентарной недостаточности в третьем триместре беременности. Изобретение обеспечивает повышение точности прогнозирования хронической компенсированной плацентарной недостаточности. 2 пр.

Область применения: изобретение относится к медицине, а именно к акушерству, и может быть использовано для прогнозирования хронической компенсированной плацентарной недостаточности в третьем триместре беременности у женщин с цитомегаловирусной инфекцией в анамнезе.

Уровень техники

Плацентарная недостаточность – патофизиологический феномен, детерминированный морфофункциональными нарушениями в плаценте, вследствие осложнений беременности инфекционно-воспалительными заболеваниями у женщин [4, 9, 12], в том числе цитомегаловирусной инфекцией [2].

Цитомегаловирус является возбудителем одной из наиболее распространенных инфекций, из группы герпетических. К репродуктивному возрасту до 85% женщин имеют антитела к цитомегаловирусу. Среди факторов, способствующих распространению и реактивации цитомегаловируса, первое место принадлежит беременности и сопутствующей ей иммуносупрессии, что определяет высокую частоту ее осложнений и врожденных пороков развития у плода [1, 11].

Плацентарная недостаточность цитомегаловирусной этиологии характеризуется клинико-лабораторными признаками морфофункциональной недостаточности фетоплацентарной системы, выраженность которых зависит от срока беременности, формы и степени активности цитомегаловируса. Патогенетическим механизмом развития плацентарной недостаточности при герпес- и(или) цитомегаловирусной инфекции является клеточно-паренхиматозный механизм, характеризующийся развитием специфической воспалительной реакции, апоптоза трофобласта и эндотелия сосудов ворсин, что приводит к нарушениям маточно-плацентарной и плодовой гемодинамики [6, 7].

У серопозитивных по цитомегаловирусу женщин с первичной плацентарной недостаточностью ее хроническая форма развивается в 53% случаев, которая клинически проявляется внутриутробной гипоксией (40%) и задержкой роста плода (11%). Компенсированная форма хронической плацентарной недостаточности выявляется у 88% женщин серопозитивных по цитомегаловирусу. В раннем неонатальном периоде у новорожденных от этих матерей отмечается высокая заболеваемость: инфекционные болезни, специфичные для перинатального периода (34%), нарушения церебрального статуса новорожденных (25%) в форме ишемии мозга (7%), кист перивентрикулярных и сосудистых сплетений (2%), расширения боковых желудочков (18%), кальцификатов (1,5%) и дыхательных расстройств (12%). В структуре врожденных пороков развития у плода преобладают дефекты развития нервной трубки. В постнеонатальном периоде у этих детей возникают психомоторные расстройства [2].

Основными лабораторными и инструментальными методами диагностики плацентарной недостаточности являются ультразвуковая допплерометрия, кардиотокография, ультразвуковые исследования с фетометрией, определение уровня плацентарных гормонов, общей и плацентарной щелочной фосфатазы, а также биомаркеров гипоксии-ишемии [7]. Однако способов, позволяющих прогнозировать развитие хронической компенсированной плацентарной недостаточности в третьем триместре беременности у женщин с цитомегаловирусной инфекцией в анамнезе, учитывающих иммуно-гормональные критерии оценки формирования маточно-плацентарного комплекса, нет.

Выше изложенные факты определяют необходимость разработки новых способов прогнозирования хронической компенсированной плацентарной недостаточности с целью определения факторов риска и назначения лечебных мероприятий, которые позволят предупредить декомпенсированные формы маточно-плацентарной дисфункции и довести беременность до благополучного исхода.

Известны способы прогнозирования плацентарной недостаточности [3, 8], в том числе и при цитомегаловирусной инфекции [5].

Прототипом является способ доклинического прогнозирования плацентарной недостаточности [8], основными недостатками которого являются:

- не позволяет осуществлять прогноз развития компенсированной хронической плацентарной недостаточности в третьем триместре гестации у серопозитивных по цитомегаловирусу беременных женщин;

- не даёт более точную характеристику развития системного воспалительного ответа и гормональных нарушений у серопозитивных по цитомегаловирусу беременных женщин.

Указанные факторы могут быть устранены в заявляемом способе.

Техническим результатом является повышение точности прогнозирования хронической компенсированной плацентарной недостаточности.

Предлагаемый способ отличается от прототипа тем, что у серопозитивных по цитомегаловирусу женщин во втором триместре беременности определяют в сыворотке крови иммуноферментным методом анализа содержание интерферона-гамма (IFN-ɣ) (пг/мл) (А), фактора некроза опухоли-альфа (TNF-α) (пг/мл) (B), интерлейкина-1бетта (IL-1β) (пг/мл) (C) и эстриола (нмоль/л) (N). Затем прогнозируют развитие хронической компенсированной плацентарной недостаточности в третьем триместре беременности с помощью дискриминантного уравнения

D = -0,016×A -0,084×B - 0,118×C -0,123×N,

где D – дискриминантная функция, и при D равном или больше -15,33 прогнозируют отсутствие риска хронической компенсированной плацентарной недостаточности в третьем триместре беременности, при D меньше -15,33 прогнозируют развитие хронической компенсированной плацентарной недостаточности в третьем триместре беременности.

Новизна заявляемого способа заключается в определении у серопозитивных по цитомегаловирусу женщин во втором триместре беременности содержания в сыворотке крови иммуноферментным методом анализа интерферона-гамма (IFN-ɣ) (пг/мл) (А), фактора некроза опухоли-альфа (TNF-α) (пг/мл) (B), интерлейкина-1бетта (IL-1β) (пг/мл) (C) и эстриола (нмоль/л) (N), дискриминантной функции D, по отношению которой к граничному значению дискриминантной функции прогнозируют развитие хронической компенсированной плацентарной недостаточности в третьем триместре беременности.

Ранее совокупность указанных признаков в прогнозировании развития хронической компенсированной плацентарной недостаточности в третьем триместре беременности у серопозитивных по цитомегаловирусу беременных женщин во втором триместре беременности не использовалась.

Способ содержит следующие приемы:

- у серопозитивных по цитомегаловирусу беременных женщин во втором триместре беременности в сыворотке крови, взятой из локтевой вены утром натощак, определяют иммуноферментным методом анализа содержание интерферона-гамма (IFN-ɣ) (пг/мл) (А), фактора некроза опухоли-альфа (TNF-α) (пг/мл) (B), интерлейкина-1бетта (IL-1β) (пг/мл) (C) и эстриола (нмоль/л));

- с помощью дискриминантного уравнения определяют величину дискриминантной функции D = -0,016×A -0,084×B - 0,118×C -0,123×N,

Результаты проверки заявленного способа показали его эффективность. Правильный прогноз хронической компенсированной плацентарной недостаточности в третьем триместре беременности у серопозитивных по цитомегаловирусу беременных женщин во втором триместре беременности определялся в 90% случаев.

Способ содержит следующие приемы.

Пример 1. Беременная А., 27 л., находилась на стационарном лечении в гинекологическом отделении Городской клинической больницы (г. Благовещенск). Проведен общий анализ крови и анализ на TORCH-инфекции. Иммуноферментным методом анализа выявлены антитела иммуноглобулина G к цитомегаловирусу с титром 1:800, индекс авидности – 99%.

Клинический диагноз: Беременность 22 недели. Хроническая цитомегаловирусная инфекция, стадия ремиссии.

По заявленному способу содержание в сыворотке крови интерферона-гамма (IFN-ɣ) 153,8пг/мл (А), фактора некроза опухоли-альфа (TNF-α) 47,9 пг/мл (B), интерлейкина-1бетта (IL-1β) 43,2пг/мл (C) и эстриола 29,0 нмоль/л (N).

Дискриминантная функция составила -15,152, что больше значения дискриминантной функции D – -15,33. Прогнозировалось отсутствие хронической компенсированной плацентарной недостаточности в третьем триместре беременности.

На 32 неделе беременности проведено допплерометрическое исследование. Показатели допплерометрии: систоло-диастолическое отношение правой маточной артерии 1,89 (норма 1,87), левой маточной артерии 1,82 (норма 1,79), артерии пуповины 2,52 (норма 2,5), средней мозговой артерии 5,8 (норма 5,9).

Заключение: нарушений маточно-плацентарной и плодово-плацентарной гемодинамики не выявлено.

Прогноз по заявленному способу подтвердился.

Пример 2. Беременная С., 25 л., находилась на стационарном лечении в гинекологическом отделении Городской клинической больницы (г. Благовещенск). Проведен общий анализ крови и анализ на TORCH-инфекции. Иммуноферментным методом анализа выявлены антитела иммуноглобулина G к цитомегаловирусу с титром 1:800, индекс авидности – 97%.

Клинический диагноз: Беременность 22 недели. Хроническая цитомегаловирусная инфекция, стадия ремиссии.

По заявленному способу содержание в сыворотке крови интерферона-гамма (IFN-ɣ) 182,4 пг/мл (А), фактора некроза опухоли-альфа (TNF-α) 46,2 пг/мл (B), интерлейкина-1бетта (IL-1β) 40,6 пг/мл (C) и эстриола 31,2 нмоль/л (N).

Дискриминантная функция составила -15,428, что меньше значения дискриминантной функции D– -15,33. Прогнозировалась хроническая компенсированная плацентарная недостаточность в третьем триместре беременности.

На 32 неделе беременности проведено допплерометрическое исследование. Показатели допплерометрии: систоло-диастолическое отношение правой маточной артерии 3,42 (норма 1,87), левой маточной артерии 3,06 (норма 1,79), артерии пуповины 2,7 (норма 2,5), средней мозговой артерии 6,0 (норма 5,9).

Заключение: нарушение гемодинамики 1А степени (компенсированное нарушение маточно-плацентарной гемодинамики).

Прогноз по заявленному способу подтвердился.

Приведенные примеры наглядно показывают точность прогнозирования хронической компенсированной плацентарной недостаточности в третьем триместре беременности у женщин с цитомегаловирусной инфекцией в анамнезе.

Способ прошел клиническую апробацию. С его помощью проведено прогнозирование хронической компенсированной плацентарной недостаточности в третьем триместре беременности у 30 серопозитивных по цитомегаловирусу беременных женщин во втором триместре. Правильный прогноз определялся в 90% случаев, что подтверждает высокую эффективность заявляемого способа.

Используемые источники

1. Andrievskaya I.A., Lucenko M.T., Babenko O.P. Specific and non-specific factors of humoral immunity as markers for pregnancy loss in women with cytomegalovirus infection // International Journal of Biomedicine. – 2015. – Т. 5, № 4. – С. 184-187.

2. Быстрицкая Т.С., Луценко М.Т., Андриевская И.А., Квиткина И.Г. Диагностика, этиопатогенетическое лечение и профилактика плацентарной недостаточности, ассоциированной с цитомегаловирусной инфекцией: клинические рекомендации: клинические рекомендации. – Благовещенск, 2015. – 24 с.

3. Способ доклинического прогнозирования плацентарной недостаточности во втором триместре беременности при гриппе А(Н3N2), перенесенном в первом триместре гестации: Пат. 2336527 Рос. федерация: МПК G01N 33/53/И.Н.Гориков, Колосов В.П., Нахамчен Л.Г.; заявитель и патентообладатель ГУ ДНЦ ФПД СО РАМН. №2007123384/15; заявл. 21.06.2007; опубл. 20.10. 2008, Бюл. №29.

4. Акушерство: национальное руководство / под ред. Г.М. Савельевой, Г.Т. Сухих, В.Н. Серова, В.Е. Радзинского. 2-е изд., перераб. и доп. – М. 2016. – 1104 с.

5. Способ прогнозирования плацентарной недостаточности во второй половине беременности у ЦМВ-серопозитивных женщин с угрозой невынашивания ранних сроков: Пат. 2691935 Рос. федерация: МПК G01N 33/52/Луценко М.Т., Андриевская И.А., Петрова К.К..; заявитель и патентообладатель ФГБНУ Дальневосточный научный центр физиологии и патологии дыхания. №2017126346; заявл. 19.06.2019; опубл. 21.06. 2019, Бюл. №17.

6. Луценко М.Т., Андриевская И.А. Степень выраженности апоптоза в ядрах синцитиотрофобласта ворсин плаценты при герпесвирусной инфекции // Морфология. – 2009. – Т. 135, № 1. – С. 46-48.

7. Макацария А.Д., Бицадзе В.О., Хизроева Д.Х., Хамани И.В. Плацентарная недостаточность при осложненной беременности и возможности применения дипиридамола // Акушерство и гинекология. – 2016. – Т. 10, № 4. – 78-82.

8. Способ доклинического прогнозирования плацентарной недостаточности: Пат. 2148256 Рос. федерация: МПК 7 G01N 33/49/Смиренина И.В., Перстрикова Т.Ю.; заявитель и патентообладатель Дальневосточный государственный медицинский университет. №99100806/14; заявл. 01.12.1999; опубл. 04.27. 2000, Бюл. №7.

9. Стрижаков А.Н., Тимохина Т.Ф., Баев О.Р. Фетоплацентарная недостаточность: патогенез, диагностика, лечение // Вопр. гин., акуш. и перинатол. 2003. Т. 2, №2. С. 53-63.

10. Тютюнник В.Л. Тактика ведения беременных при плацентарной недостаточности инфекционного генеза // РМЖ. – 2006. – № 18 – С. 1307.

11. Цинзерлинг В.А., Мельникова В.Ф. Перинатальные инфекции. – СПб. 2002. – 352 с.

Способ прогнозирования хронической компенсированной плацентарной недостаточности в третьем триместре беременности у женщин с цитомегаловирусной инфекцией в анамнезе, заключающийся в том, что у серопозитивных по цитомегаловирусу женщин во втором триместре беременности определяют в сыворотке крови иммуноферментным методом анализа содержание интерферона-гамма (IFN-γ) (пг/мл) (А), фактора некроза опухоли-альфа (TNF-α) (пг/мл) (B), интерлейкина-1бета (IL-1β) (пг/мл) (C) и эстриола (нмоль/л) (N), а затем прогнозируют развитие хронической компенсированной плацентарной недостаточности в третьем триместре беременности с помощью дискриминантного уравнения:

D = -0,016×A -0,084×B - 0,118×C -0,123×N,

где D – дискриминантная функция, и при D, равном или больше -15,33, прогнозируют отсутствие риска хронической компенсированной плацентарной недостаточности в третьем триместре беременности, при D меньше -15,33 прогнозируют развитие хронической компенсированной плацентарной недостаточности в третьем триместре беременности.

Группа изобретений относится к области биотехнологии и медицинской микробиологии и включает три объекта: способ получения набора флуоресцирующих риккетсиальных и коксиеллезного диагностикумов, применение их для серологической диагностики риккетсиозов и коксиеллеза, способ серологической диагностики риккетсиозов и коксиеллеза.Способ получения набора флуоресцирующих диагностикумов риккетсий группы сыпного тифа (R.prowazekii, R.

Способ оценки локального иммунного ответа после вакцинации против эймериоза кур // 2727877

Изобретение относится к области ветеринарной паразитологии и касается оценки локального иммунного ответа после вакцинации против эймериоза кур. Способ включает оценку уровня секреции секреторного иммуноглобулина класса A (sIgA) в энтероцитах и sIgA секретирующих клеток в собственной пластинке слизистой оболочки кишечника непрямым методом иммуногистохимического исследования срезов замороженного материала с использованием моноклональных антител, меченных пероксидазой хрена, с последующей специфической окраской и учетом результатов с помощью подсчета количества энтероцитов с диффузным цитоплазматическим или мембрано-цитоплазматическим окрашиванием красно-коричневого цвета, интенсивности окраски клеток, объема окрашенной цитоплазмы и количества окрашенных sIgA секретирующих клеток в собственной пластинке слизистой оболочки кишечника кур с присвоением баллов от 0 до 3, где 0 баллов соответствуют отсутствию нарастания общего пула sIgA в ответ на вакцинные эймерии, что выражается в менее 20% окрашенных энтероцитов, цитоплазма которых окрашена менее чем на 10%, а интенсивность окраски слабая; 1 балл соответствует низкому уровню секреции sIgA в слизистой оболочке кишечника, что выражается в наличии 20-40% окрашенных энтероцитов, объем цитоплазмы которых окрашен на 50-70%, а интенсивность окраски является умеренной; 2 балла соответствуют среднему уровню секреции sIgA, что выражается в наличии 40-70% окрашенных энтероцитов, объем цитоплазмы которых окрашен на 50-70%, а интенсивность окраски является средней; 3 балла соответствуют выраженной степени секреции sIgA, что выражается в наличии 70-100% окрашенных энтероцитов, объем цитоплазмы которых окрашен на 70-100%, а интенсивность окраски является выраженной.

Антитело, связывающееся с карбоангидразой, и его применение // 2727682

Изобретение относится к области биохимии, в частности к антителу к CA-XII (карбоангидраза 12) или его антигенсвязывающему фрагменту, специфично связывающемуся с CA-XII, а также к фармацевтической композиции для профилактики, облегчения или лечения солидного злокачественного новообразования, экспрессирующего CA-XII, его содержащей.

Способ иммунологического определения активности туберкулезной инфекции у детей и подростков с латентной инфекцией // 2726789

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано для дифференцирования активной и латентной туберкулезной инфекции у детей и подростков.

Способ диагностики риккетсиозов группы клещевой пятнистой лихорадки, иммуноферментная диагностическая тест-система для его осуществления // 2726484

Группа изобретений относится к области клинической лабораторной диагностики, биотехнологии и медицины. Раскрыт способ получения инактивированной растворимой очищенной белково-липополисахаридной антигенной субстанции Rickettsia sibirica для приготовления основного компонента тест-системы – иммуносорбента, заключающийся в том, что инактивированный лиофилизированный цельнорастворимый антиген Rickettsia sibirica ресуспендируют, далее суспензию антигена подвергают ультразвуковой обработке с последующим центрифугированием и отбирают супернатант, затем проводят эксклюзионную хроматографию супернатанта на колонке с хроматографическим сорбентом, после чего фракции оценивают на специфическую антигенную активность в ИФА и проводят дальнейшее объединение фракций первого пика и соседних с ним, которые продемонстрировали в ИФА наилучшее соотношение средних значений оптической плотности ОП положительных контрольных образцов к средним значениям оптической плотности ОП отрицательных контрольных образцов.

Способ применения комплекса водорастворимых антигенов чумного микроба для оценки уровня противочумного иммунитета // 2725872

Изобретение относится к медицине, а именно к иммунологии, и может быть использовано при проведении оценки уровня противочумного иммунитета. Для этого применяют комплекс водорастворимых антигенов чумного микроба с концентрацией белка 4,5 мг/мл в антигенспецифических клеточных тестах in vitro с использованием технологии проточной цитометрии в качестве активатора лимфоцитов.

Способ ранней диагностики хронического тубулоинтерстициального повреждения почек у пациентов с анкилозирующим спондилитом // 2725850

Изобретение относится к области ревматологии, нефрологии, а именно к области диагностики хронического повреждения тубулоинтерстициальной ткани почек у пациентов с анкилозирующим спондилитом.

Способ окрашивания антигенов при помощи флуоресцентных антител на свежезамороженных срезах опухоли и метастазов // 2725765

Изобретение относится к медицине, а именно к способу окрашивания антигенов при помощи флуоресцентных антител на свежезамороженных срезах опухоли и метастазов. Способ окрашивания антигенов при помощи флуоресцентных антител на свежезамороженных срезах опухоли и метастазов, заключающийся в том, что используют свежезамороженные срезы, переносят их на стекла с адгезивным покрытием, подвергают процессу инкубации в 2%-ном растворе формалина, сушат на воздухе при температуре 20-26°С в течение часа; на этапе регидратации стекла с фиксированными срезами помещают в ёмкость с солевым фосфатным буфером PBS на 15 минут, после чего производят отмывку в солевом фосфатном буфере два раза по 5 минут; следом на этапе демаскировки инкубируют препараты поочередно в 1%-ном додецилсульфате натрия и в солевом фосфатном буфере в течение 15 минут, далее промывают в солевом фосфатном буфере 3 раза по 5 минут; далее на этапе блокировки на мокрые срезы наносят 1%-ный раствор бычьего сывороточного альбумина, проводят блокировку в течение 30 минут и отмывают один раз 5 минут в солевом фосфатном буфере с добавлением детергента; следом проводят этап инкубации с первичными антителами, во влажной камере при температуре 20-26°С в течение 1 часа, далее промывают срезы в фосфатном буфере 3 раза по 5 минут; далее следует этап инкубации с вторичными антителами во влажной камере в течение 1 часа, после проводят отмывку 3 раза по 5 минут; далее происходит окрашивание ядер: на стекло наносят реагент Prolong DAPI, закрывают покровным стеклом, закрепляют прозрачным лаком.

Платформа для обнаружения и анализа терапевтических агентов // 2724998

Изобретение относится к биотехнологии. Описан способ идентификации потенциальных агентов, включающий: (a) предоставление библиотеки потенциальных агентов, в которой каждый потенциальный агент присоединен к уникальному маркеру-нуклеиновой кислоте, имеющей последовательность маркера, где потенциальные агенты выбраны из группы, состоящей из белков, нуклеиновых кислот, клеток и небольших молекул, где небольшие молекулы выбраны из группы, состоящей из потенциальных ингибиторов ферментов, потенциальных антибиотиков, потенциальных противовирусных агентов, потенциальных пестицидов, потенциальных гормонов, потенциальных активаторов клеточной сигнализации, потенциальных ингибиторов клеточной сигнализации и потенциальных активаторов ферментов; (b) присоединение библиотеки потенциальных агентов к твердой подложке, включающей праймеры нуклеиновых кислот, посредством гибридизации маркеров-нуклеиновых кислот с праймерами нуклеиновых кислот с образованием массива потенциальных агентов; (c) приведение массива потенциальных агентов в контакт с агентом для скрининга, при котором один или более из потенциальных агентов массива реагирует с агентом для скрининга, где агент для скрининга реагирует с одним или более потенциальными агентами посредством связывания с одним или более потенциальными агентами или блокировки связывания между потенциальным агентом и аналитом, имеющим сродство к потенциальному агенту; (d) исследование массива во время или после контакта массива с агентом для скрининга для установления того, что по меньшей мере один потенциальный агент, находящийся в массиве, реагирует с агентом для скрининга, где исследование массива включает обнаружение агента для скрининга, который связан с одним или более потенциальными агентами, где агент для скрининга является люминесцентным, а обнаружение представляет собой обнаружение люминесценции от массива; (e) секвенирование маркеров-нуклеиновых кислот в массиве для определения последовательности маркера, который присоединен к каждому из потенциальных агентов; и (f) идентификацию по меньшей мере одного потенциального агента в массиве, который реагирует с агентом для скрининга, на основании определенной последовательности маркера.

Способ проведения косвенного температурного контроля бетонной смеси при изготовлении железобетонных конструкций с использованием инфракрасной пирометрии // 2728488

Изобретение относится к области строительства, в частности для реализации косвенного температурного контроля, может быть использовано во время проведения мониторинга состояния температуры бетонной смеси, при изготовлении железобетонных конструкций.