Комбинированное лекарственное средство для фармакокоррекции когнитивных дисфункций после кетаминовой анестезии

Изобретение относится к фармацевтической промышленности, а именно к комбинации для фармакокоррекции когнитивных дисфункций после кетаминовой анестезии. Комбинация для фармакокоррекции когнитивных дисфункций после кетаминовой анестезии состоит из тиотриазолина и гамма-аминомасляной кислоты, где тиотриазолин и гамма-аминомасляная кислота находятся в определенном соотношении. Вышеописанная комбинация проявляет выраженные ноотропный и антиамнестический эффекты, повышая общую активность при обучении и снижая количество ошибок референтной и рабочей памяти при воспроизведении навыков обучения, что свидетельствует о высоком фармакологическом эффекте комбинации в фармакокорекции когнитивных дисфункций после кетаминовой анестезии. 1 табл., 2 пр.

 

Изобретение относится к фармации и медицине и может быть использовано в фармацевтической промышленности для производства комбинированных лекарственных средств, которые применяются для коррекции когнитивных дисфункций.

Предлагаемое средство проявляет ноотропное и антиамнестическое действие.

Область применения: анестезиология, неврология, хирургия, нейрохирургия, педиатрия, геронтология, гериатрия для уменьшения амнезии, когнитивно-мнестических расстройств в послеоперационный период, а также после использования общей анестезии.

Общая анестезия, в особенности кетаминовая, может быть причиной возникновения в послеоперационном периоде повреждений центральной нервной системы (ЦНС), среди которых особое место занимает послеоперационная когнитивная дисфункция (ПОКД), которая может развиться у больных различных возрастных групп, в том числе, и в случаях с неотягощенным психоневрологическим анамнезом. Частота ПОКД, по данным разных авторов, составляет в среднем - 36,8%, а, например, после кардиохирургических операций - до 47% (у 42% пациентов даже спустя 3-5 лет после операции). Еще раз стоит отметить, что нарушения когнитивных функций после общехирургических вмешательств, выполненных в условиях общей анестезии, наблюдаются во всех возрастных группах больных, что в дальнейшем негативно сказывается на трудоспособности пациентов даже молодого и среднего возраста при возвращении их к работе. Ранняя ПОКД является главным предиктором стойких когнитивных нарушений у лиц пожилого возраста, ухудшая качество жизни больных, затрудняя выполнение ими своих профессиональных и социальных функций. Применение кетамина у пожилых людей может ухудшать олигомеризацию и депонирование амилоидного бета-протеина и таким образом вызывать долгосрочные когнитивные эффекты. Одной из главных причин нарушения когнитивных функций после операции считают нейротоксическое действие кетамина, заключающееся в подавлении глутаматной трансмиссии, угнететении синаптогенеза, истощению энергетического баланса синапса и нарушению механизмов обратного захвата нейротрансмиттеров, а также инициированию механизмов циркуляторной ишемии (гипоциркуляция, изменение перфузии мозга, внутричерепное давление). Отмечается все возрастающий интерес к потенциальным отношениям между действием отдельных общих анестетиков и началом развития болезни Альцгеймера. Нельзя не отметить и тот факт, что в последние годы именно послеоперационная когнитивная дисфункция является основной причиной судебных исков в США к анестезиологам.

Наиболее уязвимыми к действию общих анестетиков являются функция внимания, краткосрочная память, скорость психомоторных и когнитивных реакций. Вместе с тем в литературе лишь немногие работы посвящены применению нейропротективных препаратов для профилактики и лечения нейрокогнитивных расстройств в послеоперационном периоде. Нейропротективная терапия, наряду с выбором адекватного варианта анестезии, своевременной коррекции нарушений гемодинамики, газообмена и гомеостаза, приобретает важнейшее значение для предотвращения повреждений нейронов или устранения уже возникшей когнитивной дисфункции в раннем послеоперационном периоде, когда эти изменения еще потенциально обратимы. Влияя на течение церебрального метаболизма, она предупреждает или прерывает патологические каскады, вызывающие дисфункцию или гибель нейронов.

Особое место в нейропротекции занимают препараты нейрометаболического действия - ноотропы. Ноотропы оказывают прямое активирующее влияние на обучение, улучшая память и умственную деятельность, а также повышая устойчивость мозга к агрессивным воздействиям гипоксии, травмам, интоксикации. Исследованиями в области нейрохимии было установлено, что применение общих анестетиков приводит к нарушению ГАМК-ергической системы головного мозга, снижению аффинности ГАМК-рецепторов. Все это направляет поиски фармакологов при разработке ноотропов, эффективных при ПОКД, в сторону структурных аналогов гамма-аминомасляной кислоты (ГАМК).

Наиболее распространенным и изученным среди препаратов такого действия является пирацетам, который обладает многогранной активностью. Его быстрый метаболический эффект обусловлен активацией энергетического метаболизма и окислительно-восстановительных процессов, а пролонгированный - увеличением пластичности мозговой ткани за счет повышения чувствительности рецепторов к нейротрансмиттерам.

Известен ряд комбинированных лекарственных средств, оказывающих нейропротективный эффект. В патенте Украины №31845 «Средство для лечения амнезий, нарушения мнестических и умственных функций, снижения выраженности неврологических органических симптомов и повышения физической работоспособности» (дата публикации 15.12.2000, бюл. №7), описывается комбинированный препарат, содержащий пирацетам и гамма-аминомасляную кислоту при следующем соотношении компонентов, г: пирацетам - 0,1-1,0; гамма-аминомасляная кислота (аминалон) - 0,1-0,5.

Однако известно, что применение пирацетама может привести к повышению тревожности, нарушению сна, агрессивности и т.д. Кроме того, многие клиницисты отмечают недостаточно высокую эффективность препарата. Введение пирацетама часто вызывает эпилептоформные судорожные припадки, особенно у детей. Введение пирацетама в постоперационный период часто является причиной транзиторных ишемических атак у пациентов старше 60 лет (Мазур И.А., Беленичев И.Ф., Чекман И.С.и др. Метаболитотропные препараты, - Москва: АМЛ, 2008-348 с.).

Известен препарат тиоцетам. Тиоцетам, комбинированный препарат, содержащий как активные вещества пирацетам и тиотриазолин, относится к группе цереброактивных средств, проявляет ноотропные, противоишемические и антиоксидантные свойства. Фармакологический эффект препарата обусловлен взаимопотенциирующим действием тиотриазолина и пирацетама. Пирацетам - циклическое производное ГАМК, ноотропное средство; воздействует непосредственно на головной мозг, улучшая такие функции, как обучение, память, внимание и сознание, не оказывая седативного или психостимулирующего воздействия. На нейрональном уровне пирацетам облегчает различные типы синаптической передачи, оказывая преимущественное воздействие на плотность и активность постсинаптических рецепторов. Гемореологические эффекты пирацетама связаны с его влиянием на эритроциты, тромбоциты и стенку сосудов. Тиотриазолин реагирует с активными формами кислорода и липидными радикалами за счет выраженных восстановительных свойств тиоловой группы и предупреждает возникновение активных форм кислорода путем реактивации антирадикальных ферментов: супероксиддисмутазы, каталазы и глутатионпероксидазы. Тиоцетам улучшает интегративную и когнитивную деятельность мозга, способствует процессу обучения, устраняет амнезию, повышает показатели кратковременной и долговременной памяти.

Показания препарата Тиоцетам: хроническая ишемия головного мозга; восстановительный период ишемического инсульта (в том числе у пациентов, имеющих недементное когнитивное нарушение); диабетическая энцефалопатия (https://www.vidal.ru/drugs/thiocetam_38462).

Известно также применение тиоцетама для коррекции когнитивных дисфункций в послеоперационном периоде (Послеоперационные когнитивные расстройства как осложнение общей анестезии. Значение ранней фармакологической нейропротекции / Л.В. Усенко, А.А. Криштафор, И.С. Полинчук, А.Г. Тютюнник, А.А. Усенко, Е.В. Петрашенок // Медицина неотложных состояний. - 2015. - №2. - С. 24-31). Препарат тиоцетам, как наиболее близкий по назначению и составу активных компонентов, мы считаем прототипом.

Однако, тиоцетам значительно уступает предлагаемой комбинации по степени восстановления рабочей и референтной памяти (тиоцетам влияет только на сохранность условной реакции пассивного избегания в течение 24 часов) Мазур И.А., Беленичев И.Ф., Чекман И.С.и др. Метаболитотропные препараты, - Москва: АМЛ, 2008-348 с.).

Кроме того, наличие в структуре Тиоцетама основного ингредиента - пирацетама приводит к усилению тревожности, агрессивности, бессонницы и тревожных сновидений у пациентов после кетаминовой анестезии (Belenichev I, Burlaka В, Puzyrenko A, Ryzhenko О, Kurochkin М, Yusuf J. Management of amnestic and behavioral disorders after ketamine anesthesia. Georgian Med News. 2019;(294):141-145.) Также Тиоцетам не рекомендуют пациентам после 65 лет и детям до 5 лет (Фармакологiя з основами патологii /Колесник Ю.М. та iнш. - Днiпро, 2019.- 538 с).

Общим существенным признаком прототипа и заявляемого изобретения является наличие тиотриазолина в составе предлагаемого средства.

В основу изобретения поставлена задача разработки комбинированного лекарственного средства, которое будет иметь существенно более высокую эффективность в коррекции когнитивной дисфункции после кетаминовой анестезии, а также демонстрировать значительное снижение побочных эффектов - ажитированности, бессонницы, снижать риски развития гипертонического криза, транзиторных ишемических атак, эпилептофрмных припадков, агрессивности, агрессии и т.д. по сравнению с известными средствами.

Поставленная задача решается тем, что в комбинированном лекарственном средстве для фармакокоррекции когнитивных дисфункций после кетаминовой анестезии, содержащем тиотриазолин, новым является то, что средство дополнительно содержит гамма-аминомасляную кислоту.

Новым также является то, что средство содержит гамма-аминомасляную кислоту и тиотриазолин в следующем соотношнии: гамма-аминомасляная кислота - в пределах от 1 до 5 массовых долей на 1 массовую долю тиотриазолина. Их оптимальные соотношения были установлены доклиническими исследованиями.

Новым является то, что средство имеет форму таблеток или капсул.

Причинно-следственная связь между совокупностью заявляемых признаков и техническим результатом заключается в следующем. ГАМК обеспечивает восстановление равновесия между процессами возбуждения и торможения в ЦНС за счет активации тормозной ГАМК-ергической системы и повышения уровня тормозного медиатора ГАМК. Кроме того, ГАМК восстанавливает энергозависимые трансмембранные процессы в нейроне за счет повышения уровня АТФ в шунте Робертса. ГАМК обеспечивает снижение агрессивности, ажитированности, бессонницы. ГАМК позитивно влияет на процессы обучения и сохранения памяти.

Тиотриазолин, являясь антиоксидатным и противоишемическим средством, способен регулипровать АФК/NO-зависимые механизмы клеточного сигналитета, аффинитет центральных рецепторов в т.ч. и ГАМК. Механизм действия Тиотриазолина обусловлен как наличием в его структуре тиоловой группы, обладающей высокими восстановительными и антиоксидантными свойствами (тиольные группы являются ловушкой для АФК и свободных радикалов и при митохондриальной дисфункции окисляются тиоловые группы митохондриальной поры, что приводит к формированию митохондриальной дисфункции, энергодефициту и апопотозу), так и способностью молекулы активировать компенсаторный (малат-аспартатный) шунт энергии при ишемии, при этом снижая анаэробный гликолиз и уменьшая продукцию лактата. Установлено, что тиотриазолин защищает SH-группу сайт-распознающих участков рецепторов от О₂^-, ONOO^-, предотвращая их окисление, нитрозилирование, сохраняя их сенситивность. Тиотриазолин повышает чувствительность ГАМК, глициновых, серотониновых рецепторов головного мозга к препаратам - агонистам этих рецепторов (аминалон, глицисед, триптофан, пирацетам) в условиях оксидативного стресса при эмоциональных перегрузках, нарушении мозгового кровообращения, церебральной ишемии и т.д., повышая их терапевтическую активность. Тиотриазолин обуславливает антиоксидантную модуляцию, противоишемическую, ноотропную, кардиопротективную, нейропротективную активность препаратов рецепторного и метаболитотропного типа действия и повышает эффективность базовой терапии. Тиотриазолин нормализует SS/SH-равновесие возбуждающего NMDA рецептора, снижая его гипервозбудимость.

Разрабатывая предлагаемую комбинацию, мы предполагали, что фармакологический эффект лекарственной комбинации будет обусловлен взаимопотециирующим влиянием тиотриазолина и ГАМК на усиление тормозной ГАМК-ергической системы ЦНС, снижение гипервозбудимости NMDA рецепторов, а также энергетический метаболизм головного мозга. Комбинация тиотриазолина с ГАМК будет повышать устойчивость нейронов к гипоксии за счет торможения гипервозбудимости NMDA-глутаматных рецепторов (потенцирование Red/Oxi - механизма), а также за счет усиления ГАМК-ергических свойств и повышения концентрации ГАМК в головном мозге. Комбинация тиотриазолина и ГАМК будет повышать устойчивость нейронов к гипоксии за счет усиления функционирования компенсаторных механизмов выработки АТФ. Таким образом, мы предположили, что будет иметь место взаимопотенциирующее действие тиотриазолина и ГАМК, которое должно будет проявляться и в отношении когнитивно-мнестических функций ЦНС.

Ранее ни у ГАМК, ни у тиотриазолина свойства корректировать когнитивные дисфункции после кетаминовой анестезии в доступной нам литературе описаны не были, также в литературе не встречается описание комбинации ГАМК и тиотриазолина ни в виде фиксированной лекарственной формы, ни в схеме лечения в виде отдельных препаратов, поэтому мы считаем, что такие, впервые выявленные свойства и сама предлагаемая комбинация ГАМК и тиотриазолина не вытекают явно из уровня техники.

Исходя из изученных механизмов действия обоих компонентов предлагаемого комбинированного средства, содержащего ГАМК и тиотриазолин, и предположив возможность того, что заявляемое комбинированное средство может иметь существенно более эффективное фармакологическое действие при коррекции когнитивной дисфункции после кетаминовой анестезии по сравнению с известными средствами, и значительно меньший побочный эффект, было проведено экспериментальное исследование в этом направлении.

Следует отметить, что для специалиста не является очевидной возможность использовать комбинацию таких активных компонентов, как ГАМК и тиотриазолин в одной фиксированной лекарственной форме, хотя ГАМК и тиотриазолин оказывают каждый в отдельности положительный фармакологический эффект. Как известно (Кукес В.Г. Клиническая фармакология, 4 издание, Москва, «ГЕОТАР-медиа», 2008, с. 164-169; Гилман А.Г. Клиническая фармакология по Гудману и Гилману, Москва, «Практика», 2006, с. 57), фармакодинамическое взаимодействие лекарственных средств может быть направлено как в сторону усиления их фармакологических эффектов (синергизм), так и на их ослабление (антагонизм). Т.е. в некоторых случаях лекарственные вещества действуют антагонистично или взаимно усиливают побочное или токсическое действие друг друга, что исключает возможность их одновременного применения. Фармакологическая несовместимость компонентов делают фиксированную лекарственную комбинацию неполноценной в терапевтическом отношении, а в некоторых случаях даже опасной.

Также может иметь место физическая несовместимость компонентов, которая обусловливается их физическими свойствами. Это нерастворимость, отволаживание ингредиентов и другие процессы. Практическими и термогравиметрическими исследованиями была установлена физическая совместимость компонентов предлагаемого средства - ГАМК и тиотриазолина.

К снижению или полной потере терапевтической активности комбинированной фиксированной лекарственной формы может приводить химическая несовместимость компонентов. Химическая совместимость ГАМК и тиотриазолина была установлена квантово-химическими расчетами.

Таким образом, лишь экспериментальное исследование может подтвердить или опровергнуть возможность создания определенного комбинированного лекарственного средства и наличие или отсутствие у него предполагаемой терапевтической эффективности, в нашем изобретении это сочетание ГАМК с тиотриазолином.

Говорить о положительном результате взаимодействия упомянутых компонентов комбинированного лекарственного средства можно только на основании проведенных экспериментальных исследований.

В нашей заявке приведены результаты наших оригинальных исследований заявляемой комбинации, которые являются подтверждением возможности комбинирования ГАМК и тиотриазолина в одной лекарственной форме, и высокой терапевтической активности предлагаемого препарата при фармакокоррекции когнитивных дисфункций после кетаминовой анестезии. Было изучено действие комбинаций ГАМК с тиотриазолином при следующих соотношениях: 1:1; 2:1; 3:1; 4:1 и 5:1 соответственно.

Пример 1. Нами были проведены квантово-химические расчеты, которые подтвердили возможность комбинирования действующих веществ ГАМК и тиотриазолина.

Анализ геометрии оптимизированных комплексов ГАМК и тиотриазолина показал, что они образованы за счет множественных межмолекулярных водородных связей. Для нескольких наиболее энергетически выгодных комплексов энергия образования имеет отрицательное значение, но ее величина по модулю очень мала. Только 17 комплексов ГАМК и тиотриазолина (из 625) имеют отрицательную энергию образования. Принимая во внимание разницу между энергиями взаимодействия между солью и аминокислотой, рассчитанными в приближении вакуума и с учетом влияния растворителя, сделан вывод, что в реальном растворе образование трехкомпонентных комплексов маловероятно. Все вышесказанное дает возможность комбинирования действующих веществ (ГАМК и тиотриазолина) в одной лекарственной форме.

Пример 2. Экспериментальное исследование было проведено на животных в соответствии с Директивой 2010/63EU Европейского парламента и Совета от 22 сентября 2010 года о защите животных, используемых для научных целей, а также с национальными «Общими этическими принципами экспериментов на животных» (Украина, 2001) и указаниями, изложенными в «Основных методах изучения токсичности потенциальных фармакологических препаратов» (ГФЦ Украины, К., 2000). Проведение эксперимента была одобрено Комиссией по биоэтике Запорожского государственного медицинского университета.

Исследование проведено на 80 белых беспородных крысах массой 180-190 грамм обоего пола. Животные содержались в стандартных условиях вивария (12-часовой световой цикл, температура 22°С). Для проведения экспериментов животных подвергали пищевой депривации, особенности которой описаны ниже. С целью приручения крыс перед началом эксперимента их держали в руках по 2-3 мин. в течение 5 дней, что облегчало последующие экспериментальные исследования.

Кетаминовую анестезию проводили путем введения 100 мг/кг кетамина внутрибрюшинно. По выходу животных из наркоза им в течение 10 суток параллельно обучению в лабиринте вводили изучаемые препараты в следующих дозах: комбинация ГАМК + тиотриазолин (1:1) - 250 мг/кг, комбинация ГАМК + тиотриазолин (2:1) - 250 мг/кг, комбинация ГАМК + тиотриазолин (3:1) - 250 мг/кг, комбинация ГАМК + тиотриазолин (4:1) - 250 мг/кг, комбинация ГАМК + тиотриазолин (5:1) - 250 мг/кг, пирацетам -500 мг/кг, внутрижелудочно. Группы контроля и интакта получали в течение 10 дней внутрижелудочно воду с твином -80. Препараты вводили в виде водной суспензии с Твином-80 с помощью металлического зонда раз в сутки за 60 мин. до сеанса обучения. В работе использовали субстанцию ГАМК, производства Sigma-Aldrich, США (серия 11-021), и субстанцию тиотриазолина производства ГП «Завод химических реактивов» НТК «Институт монокристаллов» НАЛ Украины (серия 2451117).

На период обучения крыс подвергали пищевой депривации. Пища была доступна ежедневно в течение 1 часа. Животных доводили до 85% исходной массы путем ограничения пищевой диеты со свободным доступом к воде. Исследование памяти проводили с помощью радиального лабиринта LE760 (AgnTho's, Sweden). Восьмилучевой радиальный лабиринт состоит из восьмиугольной платформы (длина стороны 22 см), от которой отходят пронумерованные от 1 до 8 радиальные лучи-дорожки длиной 70 см и шириной 10 см с углублениями для кормушек на конце (диаметр 2 см, глубина 1,5 см). Каждая дорожка может быть закрыта с помощью гильотинного механизма независимо друг от друга. Вся установка располагалась на высоте 70 см от пола. Исследование проводилось в полной тишине. Начиная с первого дня, животные помещались в центральную площадку лабиринта с 4-мя закрытыми лучами и 4-мя открытыми лучами, в кормушках которых размещалось 200 мг пищевых гранул. Комбинация открытых и закрытых лучей была индивидуальной и постоянной для каждого животного. В течение следующих 10-ти дней животное обучалось нахождению пищи, используя внешние визуальные ориентиры. Обучение проводилось в течение 10 минут или до нахождения животным всех четырех источников пищи. Эксперимент повторяли ежедневно двукратно с каждым животным. После эксперимента животное получало дневной рацион пищи. На 10 день животное помещалось в радиальный лабиринт с восьмью открытыми лучами-дорожками, в 4-х из которых размещалась пища согласно привычной для животного схеме. Мы оценивали референтную память (общее долгосрочное представление о структуре лабиринта и расположении пищи, которое сформировалось у животного в процессе обучения) и количество ошибок референтной памяти (первое посещение ранее закрытого луча, в котором животное никогда не находило пищу), а также рабочую память, (краткосрочное представление животного о расположении пищи в конкретном опыте) и количество ошибок рабочей памяти (повторное посещение луча, в котором животное ранее уже находило или не находило пищу). Кроме того, мы оценивали пройденное расстояние и общую двигательную активность.

Эксперименты проводились в хорошо освещенной комнате в полной тишине. При проведении экспериментов исключалось влияние внешних и внутренних визуальных, обонятельных и слуховых стимулов. Оценка поведения животных проводилась лаборантом, не осведомленным о принадлежности животного к конкретной экспериментальной группе. Захват и запись изображения проводился с помощью цветной видеокамеры SSC-DC378P (Sony, Japan). Анализ видеофайла проводился с помощью программного обеспечения Smartv 3.0 (Harvard Apparatus, USA). Статистическая обработка результатов проводилась с помощью MicrosoftExcel 2016 с пакетом статистической обработки AtteStat 12. Для оценки достоверности различий в исследуемых группах использовался критерий Краскела-Уоллиса с поправкой Данна. Достоверным считались различия при р<0,05.

При оценке специфических показателей обучения в радиальном лабиринте было обнаружено, что через 10 суток после кетаминовой анестезии у животных наблюдалась когнитивная дисфункция. Общая активность животных контрольной группы достоверно не отличалась по сравнению с группой интакта. При воспроизведении результатов обучения животных было установлено, что на 10 сутки после введения кетамина увеличивается в 4 раза количество ошибок рабочей памяти, в 2,5 раза - количество ошибок референтной памяти, что свидетельствовало о нарушении мнестических функций у животных после кетаминовой анестезии. Полученные нами данные лежат в русле концепции послеоперационной когнитивной дисфункции. Кетаминовая анестезия приводит к формированию стойкого когнитивного дефицита, а также психо-эмоциональным нарушениям - заторможенность, страх, тревожность, дезориентация, агрессивность, раздражительность.

Введение сразу после выхода животных из наркоза исследуемых комбинаций ГАМК с тиотриазолином (1:1; 2:1; 3:1; 4:1 и 5:1) и препарата сравнения - пирацетама по-разному влияло на показатели когнитивно-мнестических функций ЦНС.

Введение пирацетама (500 мг/кг) не оказывало достоверного влияния на такой показатель когнитивно-мнестических функций животных, как ошибки референтной памяти, а также на показатель общей активности при обследовании лабиринта на 10 сутки после кетаминовой анестезии. При этом введение пирацетама достоверно снижало на 13,4% количество ошибок рабочей памяти. Все это демонстрирует малоэффективность использования пирацетама с целью уменьшения когнитивной дисфункции после кетаминовой анестезии.

Введение комбинаций ГАМК с тиотриазолином (1:1; 2:1; 3:1; 4:1 и 5:1) оказывало достоверное влияние на когнитивно-мнестические функции ЦНС после кетаминовой анестезии. Так, введение комбинации ГАМК + тиотриазолин (1:1) приводило к достоверному повышению на 59,6% общей исследовательской активности и достоверному снижению ошибок рабочей памяти на 37,5% (что свидетельствует о растормаживающем действии комбинации 1:1), не оказывая достоверного влияния на количество ошибок референтной памяти. Введение комбинации ГАМК + тиотриазолин (2:1) приводило к достоверному повышению на 66,8% общей исследовательской активности (что свидетельствует об увеличении растормаживающего действия комбинации 2:1), достоверному снижению ошибок рабочей памяти на 53,3% и на 60% количества ошибок референтной памяти. Введение комбинации ГАМК + тиотриазолин (3:1) не приводило к достоверному изменению общей исследовательской активности (она снижалась по сравнению с группой, получавшей комбинации ГАМК + тиотриазолин 1:1 и 2:1 (возможно, за счет увеличения в комбинации тормозного ингредиента - ГАМК), но более значительно снижало количество ошибок рабочей памяти - на 66,7% и количество ошибок референтной памяти - на 80%. Введение комбинации ГАМК + тиотриазолин (4:1) также не приводило к достоверному изменению общей исследовательской активности (за счет увеличения в комбинации тормозного ингредиента - ГАМК), но более значительно снижало количество ошибок рабочей памяти - на 73,3% и количество ошибок референтной памяти -на 80%. Введение комбинации ГАМК + тиотриазолин (5:1) также не приводило к достоверному изменению общей исследовательской активности (за счет увеличения в комбинации тормозного ингредиента -ГАМК), но достоверно снижало количество ошибок рабочей и референтной памяти - на 60%. Таким образом, исследуемые комбинации ГАМК с тиотриазолином в соотношениях 1:1; 2:1; 3:1; 4:1 и 5:1 соответственно, проявляют выраженный ноотропный и антиамнестический эффекты, повышая общую активность при обучении и снижая количества ошибок референтной и рабочей памяти при воспроизведении навыков обучения. По силе действия все комбинации достоверно превосходят референс-препарат - пирацетам.

Таким образом, проанализировав полученные результаты проведенных исследований, можно сделать вывод, что предлагаемое комбинированное средство обеспечивает существенно более высокую активность в сравнении с известными средствами в отношении коррекции когнитивных расстройств после кетаминовой анестезии. Комбинация ГАМК с тиотриазолином в соотношении 1:1; 2:1; 3:1; 4:1 и 5:1 соответственно проявляет выраженный ноотропный и антиамнестический эффекты, повышая общую активность при обучении и снижая количество ошибок референтной и рабочей памяти при воспроизведении навыков обучения, что свидетельствует о высоком фармакологическом эффекте комбинации в фармакокорекции когнитивных дисфункций после кетаминовой анестезии.

Таблетки, содержащие ГАМК и тиотриазолин, изготавливают как без оболочки, так и покрытыми оболочкой. Получают таблетки, таблетки ядра разными способами, например, прямым прессованием, а именно, смешением порошков действующих компонентов с добавлением достаточного количества вспомогательных веществ и последующего их прессования. Также таблетки и таблетки ядра получают и методом влажной грануляции, которые включают стадию увлажнения таблеточной массы, грануляцию, регрануляцию с последующим прессованием. При получении таблеток используют разноплановые вспомогательные вещества, такие как наполнители, разрыхлители, антифрикционные вещества и другие.

Капсулы, как твердые, так и мягкие, получают путем дозирования смеси активных компонентов с добавлением в капсулы вспомогательных веществ или же без них.

Комбинация для фармакокоррекции когнитивных дисфункций после кетаминовой анестезии, состоящая из тиотриазолина и гамма-аминомасляной кислоты, где тиотриазолин и гамма-аминомасляная кислота находятся в таком соотношении: гамма-аминомасляная кислота в пределах от 1 до 5 массовых долей на 1 массовую долю тиотриазолина.