Способ прогнозирования риска прогрессии рецидивирующих цервикальных интраэпителиальных неоплазий низкой степени онкогенного риска, ассоциированных с папилломавирусной инфекцией


G01N2800/50 - Исследование или анализ материалов путем определения их химических или физических свойств (разделение материалов вообще B01D,B01J,B03,B07; аппараты, полностью охватываемые каким-либо подклассом, см. в соответствующем подклассе, например B01L; измерение или испытание с помощью ферментов или микроорганизмов C12M,C12Q; исследование грунта основания на стройплощадке E02D 1/00;мониторинговые или диагностические устройства для оборудования для обработки выхлопных газов F01N 11/00; определение изменений влажности при компенсационных измерениях других переменных величин или для коррекции показаний приборов при изменении влажности, см. G01D или соответствующий подкласс, относящийся к измеряемой величине; испытание

Владельцы патента RU 2748719:

Федеральное государственное бюджетное учреждение "Уральский научно-исследовательский институт охраны материнства и младенчества" Министерства здравоохранения Российской Федерации (ФГБУ "НИИ ОММ" Минздрава России) (RU)

Изобретение относится к области медицины, в частности к гинекологии, и предназначено для прогнозирования риска прогрессии рецидивирующих цервикальных интраэпителиальных неоплазий низкой степени онкогенного риска, ассоциированных с папилломавирусной инфекцией. В биоптатах шейки матки проводят оценку колониестимулирующего фактора макрофагов M-CSF, плазматических клеток CD138 в строме, Т-лимфоцитов CD3 и натуральных киллеров CD56 в цервикальном эпителии. Вычисляют прогностический индекс PI по формуле PI = 0,095 × Х1 + 0,053 × Х2 + 0,782 × Х3 – 0,387 × Х4 – 5,789. При PI более 0 делают заключение о высоком риске прогрессии рецидивирующей цервикальной интраэпителиальной неоплазии низкой степени онкогенного риска в высокую. При PI менее 0 прогнозируют низкий риск. Изобретение позволяет прогнозировать прогрессирование патологического процесса у женщин с рецидивирующими цервикальными интраэпителиальными неоплазиями низкой степени онкогенного риска и риск перехода в высокую степень онкогенного риска. 1 табл., 2 пр.

 

Изобретение относится к области медицины, а именно к гинекологии, и может быть использовано для оценки риска прогрессии рецидивирующих цервикальных интраэпителиальных неоплазий низкой степени онкогенного риска (LSIL), ассоциированных с папилломавирусной инфекцией в предраковое состояние (высокую степень онкогенного риска – HSIL). Изобретение обеспечивает возможность повышения эффективности лечения женщин с LSIL, за счет выбора персонифицированной коррекции иммунологических нарушений.

В настоящее время отмечается тенденция к увеличению частоты цервикальных интраэпителиальных неоплазий высокой степени онкогенного риска (HSIL), несмотря на достаточно хорошо оптимизированную систему скрининга. Вероятно, подобная ситуация связана не только с отсутствием специфических клинических проявлений и высокой распространенностью папилломовирусной инфекции (ПВИ), но и нарушением работы определенных звеньев иммунитета. Существующие на сегодняшний день методы лечения ВПЧ-ассоциированных цервикальных интраэпителиальных неоплазий, не всегда дают долгосрочный эффект. В связи с этим проводится активный поиск путей воздействия на иммунитет, что является чрезвычайно важным для снижения не только рецидивирования, но и малигнизации данной патологии.

По данным литературы, у женщин репродуктивного возраста цервикальные интраэпителиальные неоплазии (SIL) занимают от 10,7% до 38,8% в структуре гинекологических заболеваний [Аксель Е. М. Заболеваемость и смертность от злокачественных новообразований органов женской репродуктивной системы в России. Онкогинекология. 2015;1:6–15; Давыдов М. И., Д. И. Максимович, Заридзе Д. Г. Динамика заболеваемости и смертности от злокачественных новообразований в России. Вестник РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН. 2015; 26:1-5]. Кроме того, ряд исследований показывает, что резко выраженная дисплазия шейки матки в 0,2-0,4% случаев в течение 1 года прогрессирует с развитием карцином [Motamedi M., Böhmer G, Neumann H.H., Wasielewski R.CIN IIl esionsandregression: retrospective analysis of 635 cases. BMCInfectDis. 2015;21(15):541].

В Российской Федерации по состоянию на 2018 г. рак шейки матки занимает 5-е место в структуре онкопатологии, несмотря на то, что для предотвращения данного заболевания активно внедряются скрининг и профилактические мероприятия [Каприн А.Д., Старинский В.В., Петрова Г.В. Злокачественные новообразования в России в 2018 году (заболеваемость и смертность), М.: МНИОИ им. П.А. Герцена - филиал ФГБУ «НМИРЦ» Минздрава России. 2019; 250].

Именно с вирусом папилломы человека (ВПЧ) связано 9% всех новых случаев рака шейки матки (РШМ) у женщин [Каприн А.Д., Старинский В.В., Петрова Г.В. Состояние онкологической помощи населению России в 2016 году. М: МНИОИ им. П.А.Герцена – филиал ФГБУ НМИЦР. 2017; 236; Тихомиров А.Л., Сарсания С.И., Филатова Г.А. Вирус папилломы человека: от понимания иммунопатогенеза к рациональной тактике ведения. Gynecology. 2018; 20(3): 5–11] Данные исследований по анализу результатов длительно текущих ВПЧ–ассоциированных SIL показали, что при цервикальных интраэпителиальных неоплазиях низкой степени онкогенного риска (LSIL) наблюдаются достаточно высокие показатели регресса до 57%, прогрессирование процесса зарегистрировано в 11%, персистенция в 32% и лишь в 1% случаев отмечена онкотрансформация. При HSIL показатели менее позитивные, так как регресс предракового процесса наблюдается только в 32% случаев, при этом, малигнизация происходит в 12% случаев [Абакарова П.А., Прилепская В.Н. ВПЧ-ассоциированные заболевания шейки матки. Возможности комплексной терапии. Гинекология. 2017;19(5): 4-9; Сухих Г.Т., Прилепская В.Н. Профилактика рака шейки матки: руководство для врачей. Изд. 3-е, Москва: МЕД пресс-информ. 2012; 190].

Достаточно активно проводят исследования относительно углубленной оценки параметров состояния иммунной системы в крови при ВПЧ-ассоциированных цервикальных интраэпителиальных неоплазиях. По результатам которых, анализ уровня экспрессии маркеров (CD3, CD4, CD8, CD4/CD8, CD20, CD16), цитокинов (ИФН-γ, ФНО-α), иммуноглобулинов (IgG, IgА, IgМ) демонстрирует отклонения показателей Т-клеточного иммунитета [Доброхотова, Ю.Э., Венедиктова М.Г., Гришин И.И., Саранцев А.Н., Зыков А.Е., Хасан А.Ш., Панова Н.П., Савина Ю.А., Морозова К.В. Комплексный подход к лечению вирусиндуцированого истинного предрака шейки матки. Эффективная фармакотерапия. 2016;22:10-15; Доброхотова Ю.Э., Венедиктова М.Г., Саранцев А.Н., Морозова К.В., Суворова В.А. Комплексный подход к лечению вирусиндуцированого истинного предрака шейки матки. Лечебное дело. 2016;4:52-56]. Обобщая данные многочисленных исследований в этом направлении, можно сделать вывод, что именно от ответной реакции организма хозяина на внедрение вируса и будет зависеть степень риска развития SIL и рака шейки матки. Это в свою очередь определяется индивидуальным генетическим портретом иммунной системы и прежде всего ее реактивностью в плане локальной защиты органов урогенитального тракта [Доброхотова Ю.Э., Венедиктова М.Г., Гришин И.И., Саранцев А.Н. , Морозова К.В., Луценко Н.Н. Эффективность комплексного подхода к лечению дисплазии эпителия шейки матки умеренной и тяжелой степени на фоне инфицирования вирусом папилломы человека. Фарматека.2015;3:44-47; Einstein M.H., Schiller J.T., Viscidi R.P., Strickler H.D., Coursaget Р., Tan Т., Halsey N., Jenkins D. Clinician’s guide to human papillomavirus immunology: knowns and unknowns. Lancet Infec Dis. 2009;9(6):347-356; Stanley M. A practitioner’s guide to understanding immunity to human papillomavirus.USObstet.Gynecol.2009;4(1):10-15]. Однако характер иммунного ответа определяется тем, по какому пути он будет происходить Th1 или Th2. Кроме того, именно дисбаланс Th1 или Th2, приводит к развитию не только аутоиммунных, но и хронических процессов, их прогрессированию, что позволяет ожидать более тяжелое и осложненное течение вирусного процесса при переключении c клеточного иммунитета на гуморальный [Абрамовских О.С, Зиганшин О.Р., Летяева О.И, Телешева Л.Ф. Иммунологические методы исследования в диагностике папилломавирусной инфекции. Вестник последипломного медицинского образования. 2014; 4: 78-79; Кишкун А.А. Иммунологические исследования и методы диагностики инфекционных заболеваний в клинической практике. М. [б.и.]. 2009; 712; Черешнев В.А., Шмагель К.В. Иммунология: учебник. 4-е изд., перераб. и доп. М: НП «Центр стратегического партнерства». 2014; 520].

Также необходимо отметить, что по данным литературы, именно хроническое воспаление, вне зависимости от вирусной или бактериальной природы, достаточно тесно связано с развитием и онкотрансформацией цервикальных интраэпителиальных неоплазий [Белокриницкая Т.Е., Фролова Н.И., Тарбаева Д.А., Глотова Е.Ю., Золотарева А.А., Мальцева Т.В. Ассоциации генитальных инфекций и вируса папилломы человека как конфаундинг-факторы цервикальной интраэпителиальной неоплазии.DoctorRu. 2015;2(12):14–17; Пестрикова Т.Ю., Панфилова Ю.О. Чувствительность патогенной микрофлоры цервикального канала к антибактериальным препаратам у пациенток с хроническим цервицитом и ВПЧ. Гинекология. 2015; 7(1): 18 – 21; Reid G., Hons B.S. Modulating the Vaginal Microbiome: The Need for a Bridge between Science and Practice.SeminReprodMed. 2014;32(1):28–34].

В патентной литературе описан «Способ прогнозирования предраковых заболеваний шейки матки у женщин с папилломавирусной инфекцией» (патент на изобретение RU 2310 197,опубликован: 10.11.2007). Он заключается в иммуногистохимическом исследовании с оценкой PCNA, BCL-2 в биоптатах шейки матки женщин с папилломавирусной инфекцией и последующим расчетом коррелятивного индекса пролиферации (КИП). По данным авторов, результаты КИП более 114,0 у пациентов с CINI демонстрируют высокий риск перехода в CINII, а при цифрах КИП выше 208,0 в CINIII или онкотрансформацию.

Известен также «Способ тактики ведения пациенток с умеренными дисплазиями шейки матки» (патент на изобретение RU 2 704 798 C1,опубликован: 31.10.2019), где предлагается выполнение прицельной точечной биопсии шейки матки с проведением иммуногистохимического исследования и определением экспрессии маркеров Ki-67, CK7. По данным авторов, данный способ позволяет прогнозировать течение CIN II.

Недостатками вышеописанных способов является отсутствие учета иммунологических предикторов, что не дает возможность выработать тактику ведения пациентов с целью снижения рисков прогрессирования неопластического процесса и его онкотрансформации, снижая эффективность применения данных методов.

Наиболее близким аналогом (прототипом) является «Способ использования иммунологических маркеров для прогноза прогрессии цервикальных интраэпителиальных неоплазий, ассоциированных с папилломавирусной инфекцией» (патент на изобретение RU 2520 746 C1, опубл. 31.10.2019). Он заключается в определении иммунологических показателей в крови и цервикальном секрете пациента.

Недостатками этого способа, при достаточно широком спектре иммунологических показателей, является отсутствие возможности оценить путь (механизм) развития хронического воспалительного процесса, тесно связанного с возникновением и онкотрансформацией цервикальных интраэпителиальных неоплазий, что затрудняет выбор корректной иммуномодулирующей терапии и тем самым ограничивает возможности адекватных мероприятий по снижению рисков прогрессирования неопластического процесса.

Задачей изобретения является разработка способа прогнозирования риска прогрессии рецидивирующих цервикальных интраэпителиальных неоплазий низкой степени онкогенного риска, ассоциированных с папилломавирусной инфекцией на основании данных иммуногистохимического исследования биоптата шейки матки.

Технический результат: заявляемый способ позволяет прогнозировать прогрессирование патологического процесса у женщин с рецидивирующими LSIL и риск перехода в высокую степень онкогенного риска.

Указанный технический результат достигается тем, что заявляется способ прогнозирования риска прогрессии рецидивирующих цервикальных интраэпителиальных неоплазий низкой степени онкогенного риска, ассоциированных с папилломавирусной инфекцией на основании иммуногистохимических данных, полученных с использованием двухэтапного стрептавидин-биотин-пероксидазного метода отличающийся тем, что в биоптатах шейки матки проводят оценку уровня экспрессии колониестимулирующего фактора макрофагов (M-CSF), плазматических клеток (CD138) в строме, а также Т-лимфоцитов (CD3) и натуральных киллеров (CD56) в цервикальном эпителии с последующим вычислением прогностического индекса (PI) по формуле:

PI = 0,095 Х1+0,053× Х2+0,782× Х3 – 0,387× Х4 – 5,789, где

Х1 – количество CD3 клеток, %;

Х2 – количество CD138 клеток в строме, %;

Х3 – количество CD56 клеток, %;

Х4 – количество M-CSF клеток в строме, %;

5,789 – константа.

При PI более 0 делают заключение о высоком риске прогрессии рецидивирующей цервикальной интраэпителиальной неоплазии низкой степени онкогенного риска в высокую. При PI менее 0 прогнозируют низкий риск прогрессии в HSIL.

Способ осуществляют следующим образом: после гистологического исследования, на полученных парафиновых срезах, проводится иммуногистохимическое исследование по стандартной методике с окраской растворами антител фирмы «Bond RTU Primary» США, специфичных к одному из исследуемых маркеров (CD3, CD56, CD138, M-CSF).

Проявление реакции осуществляется системой визуализации «Dako Cytomation». Для визуализации первичных антител используют безбиотиновую систему детекции Super Sensitive Polymer-HPR Detection System (Biogenex). Оценка полученных результатов осуществлялась по степени флюоресценции и количеству образованных комплексов «антиген-антитело» в процентном эквиваленте. Подсчет количества позитивных клеток выполняют при увеличении ×400 не менее чем в 10 полях зрения.

Для M-CSF процент положительных клеток подсчитывают следующим образом: 0, окрашивание отсутствует; (1), 1–10%; (2) 11–50%; (3) 51–80%; и (4) 81–100%. Окончательный показатель иммунореактивности рассчитывают путем умножения показателя интенсивности окрашивания на показатель положительного процента клеток в диапазоне от 0 до 12, где 0 обозначает отсутствие иммунореактивности, 1–4 обозначает слабую иммунореактивность, 5–8 обозначает умеренную иммунореактивность и 9–12 указывает на сильную иммунореактивность.

Для выполнения поставленной задачи проведено когортное сравнительное исследование женщин с ВПЧ-ассоциированными цервикальными интраэпителиальными неоплазиями низкой (LSIL, n=40) и высокой (НSIL, n=40) степенью онкогенного риска, включая подгруппы с рецидивирующим течением заболевания.

Методом пошагового дискриминантного анализа с исключением переменных определены наиболее значимые иммуногистохимические параметры биоптатов шейки матки, определяющие принадлежность (таблица 1).

Таблица 1

Discriminant Function Analysis Summary (ПатентШмакова) Step 4, N of vars in model: 4; Grouping: NewVar (2 grps) Wilks' Lambda: ,49758 approx. F (4,37)=9,3400 p< ,0000
Wilks&apos; Partial F-remove p-level Toler. 1-Toler.
CD138 строма 0,612058 0,812960 8,51268 0,005966 0,968513 0,031487
CD3 0,641591 0,775539 10,70877 0,002314 0,928100 0,071900
CD56 0,574893 0,865516 5,74909 0,021658 0,930582 0,069418
Мф строма 0,560176 0,888254 4,65475 0,037531 0,958383 0,041617

Количество шагов - 4

Число переменных в модели: 4

Последняя введенная переменная: Макрофаги (M-CSF) строма F (1,37) = 4,654747 р<, 0375, Лямбда Уилкса: ок. 4975786 F (4,37) = 9,340028 р <, 0000.

С помощью выявленных показателей была разработана математическая модель позволяющая прогнозировать прогрессирование данного патологического процесса у женщин с рецидивирующими LSIL и переход в высокую степень онкогенного риска (НSIL), отличающаяся тем, что в биоптатах шейки матки проводят оценку уровня экспрессии колониестимулирующего фактора макрофагов (M-CSF), плазматических клеток (CD138) в строме, а также Т-лимфоцитов (CD3) и натуральных киллеров (CD56) в цервикальном эпителии с последующим вычислением прогностического индекса (PI) по формуле:

PI = 0,095 × Х1+0,053× Х2+0,782× Х3 – 0,387 × Х4 – 5,789, где

Х1 – количество CD3 клеток, %;

Х2 – количество CD138 клеток в строме, %;

Х3 – количество CD56 клеток, %;

Х4 – количество M-CSF клеток в строме, %;

5,789 – константа.

При PI более 0 делают заключение о высоком риске прогрессии рецидивирующей цервикальной интраэпителиальной неоплазии низкой степени онкогенного риска в высокую. При PI менее 0 прогнозируют низкий риск прогрессии в HSIL.

Чувствительность метода составляет 75%, специфичность – 92,3%, эффективность – 83,7% .

Клинические примеры

Пример 1. Н. 32 года. Обратилась на первичный прием в связи с наличием LSIL (CIN I) по результатами цитологического исследования. Гинекологический анамнез: 1 год назад получала консервативное лечение по поводу папиллома-вирусной инфекции (ВПЧ 18, 33 генотипов) и LSIL (CIN I), с контрольным цитологическим исследованием сразу после окончания лечения без патологии.

На первичном приеме молекулярно-биологический анализ выявил наличие вируса папилломы человека 18, 33 генотипов в клинически значимой концентрации. Данные кольпоскопии продемонстрировали аномальные признаки 1 степени тяжести на фоне зоны трансформации 1 типа. Пациентке выполнена прицельная мультифокальная биопсия шейки матки. Гистологическое заключение: LSIL (CIN I). При ИГХ исследовании: CD3-70%, CD138 в клетках стромы – 83%, CD56-0,5%, M-CSF в клетках стромы – 4.

По формуле определили значение прогностического индекса:

PI = 0,095× 70+0,053× 83+0,782× 0,5 – 0,387 × 4 – 5,789 = 4,103

PI>0, что свидетельствовало о высоком риске прогрессии цервикальной интраэпителиальной неоплазии низкой степени онкогенного риска в высокую.

Был поставлен клинический диагноз: слабовыраженная дисплазия шейки матки.

Пациентке была рекомендована противовирусная и иммуномодулирующая терапия согласно результатам иммуногистохимического исследования, которое она не провела. Через год цитологическое исследование выявило HSIL (CIN II), данные молекулярно-генетического исследования – обнаружен ВПЧ 18, 33 генотипов.

Пример 2. О. 24 лет. Обратилась на первичный прием в связи с наличием LSIL (CIN I) по результатами цитологического исследования. Гинекологический анамнез: 1 год назад получала консервативное лечение по поводу ВПЧ-инфекции 45 генотипа и LSIL (CIN I), с контрольным цитологическим исследованием сразу после окончания лечения без патологии.

На первичном приеме молекулярно-биологический анализ выявил наличие вируса папилломы человека 31 генотипа в клинически значимой концентрации. Данные кольпоскопии продемонстрировали аномальные признаки 1 степени тяжести на фоне зоны трансформации 1 типа. Пациентке выполнена прицельная мультифокальная биопсия шейки матки. Гистологическое заключение: CIN I. При иммуногистохимическом исследовании: CD3-32%, CD138 в клетках стромы – 0,5%, CD56-0,5%, M-CSF в клетках стромы – 9.

По формуле определили значение прогностического индекса:

PI = 0,095× 32+0,053× 0,5+0,782× 0,5 – 0,387 × 9 – 5,789 = - 5,814

PI<0, что свидетельствует о низком риске прогрессии цервикальной интраэпителиальной неоплазии низкой степени онкогенного риска в высокую.

Был поставлен клинический диагноз: слабовыраженная дисплазия шейки матки. Пациентке была назначена противовирусная и иммуномодулирующая терапия, которую она успешно прошла. Через год женщина пришла на прием с результатами цитологического исследования, который вновь демонстрировал LSIL (CIN I), молекулярно-биологическое исследование – вирус папилломы человека не обнаружен.

Источники информации

1. Аксель Е.М. Заболеваемость и смертность от злокачественных новообразований органов женской репродуктивной системы в России. Онкогинекология. 2015;1:6–15.

2. Давыдов М.И., Д.И. Максимович, Заридзе Д.Г. Динамика заболеваемости и смертности от злокачественных новообразований в России. Вестник РОНЦ им. Н.Н.Блохина РАМН. 2015;26:1—5.

3. Motamedi M., Böhmer G, Neumann H.H., Wasielewski R. CIN III lesions and regression: retrospective analysis of 635 cases. BMC Infect Dis. 2015;21(15):541.

https://doi.org/10.1186/s12879-015-1277-1 

4. Каприн А.Д., Старинский В.В., Петрова Г.В. Злокачественные новообразования в России в 2018 году (заболеваемость и смертность). М.: МНИОИ им. П.А. Герцена - филиал ФГБУ «НМИРЦ» Минздрава России. 2019;250.

5. Каприн А.Д., Старинский В.В., Петрова Г.В. Состояние онкологической помощи населению России в 2016 году. М: МНИОИ им. П.А.Герцена – филиал ФГБУ НМИЦР. 2017; 236.

6. Тихомиров А.Л., Сарсания С.И., Филатова Г.А. Вирус папилломы человека: от понимания иммунопатогенеза к рациональной тактике ведения. Gynecology. 2018; 20(3):5–11.

7. Абакарова П.А., Прилепская В.Н. ВПЧ-ассоциированные заболевания шейки матки. Возможности комплексной терапии. Гинекология. 2017;19(5): 4-9.

8. Сухих Г.Т., Прилепская В.Н. Профилактика рака шейки матки: руководство для врачей. Изд. 3-е. Москва: МЕДпресс-информ. 2012;190.

9. Доброхотова, Ю.Э., Венедиктова М.Г., Гришин И.И., Саранцев А.Н., Зыков А.Е., Хасан А.Ш., Панова Н.П., Савина Ю.А., Морозова К.В. Комплексный подход к лечению вирусиндуцированого истинного предрака шейки матки. Эффективная фармакотерапия. 2016;22:10-15.

10. Доброхотова Ю.Э., Венедиктова М.Г., Саранцев А.Н., Морозова К.В., Суворова В.А. Комплексный подход к лечению вирусиндуцированого истинного предрака шейки матки. Лечебное дело. 2016;4:52-56.

11. Доброхотова Ю.Э., Венедиктова М.Г., Гришин И.И., Саранцев А.Н. , Морозова К.В., Луценко Н.Н. Эффективность комплексного подхода к лечению дисплазии эпителия шейки матки умеренной и тяжелой степени на фоне инфицирования вирусом папилломы человека. Фарматека. 2015;3:44-47.

12. Einstein M.H., Schiller J.T., Viscidi R.P., Strickler H.D., CoursagetР., Tan Т., Halsey N., Jenkins D. Clinician’s guide to human papillomavirus immunology: knowns and unknowns. Lancet Infec Dis. 2009;9(6):347-356. https://doi.org/10.1016/s1473-3099(09)70108-2

13. Stanley M. A practitioner’s guide to understanding immunity to human papillomavirus. USObstet. Gynecol. 2009;4(1):10-15.

14. Абрамовских О.С, Зиганшин О.Р., Летяева О.И, Телешева Л.Ф. Иммунологические методы исследования в диагностике папилломавирусной инфекции. Вестник последипломного медицинского образования. 2014;4:78-79.

15. Кишкун А.А. Иммунологические исследования и методы диагностики инфекционных заболеваний в клинической практике. М. [б.и.]. 2009;712.

16. Черешнев В.А., Шмагель. К.В. Иммунология: учебник. 4-е изд., перераб. и доп. М: НП «Центр стратегического партнерства». 2014;520.

17. Белокриницкая Т.Е., Фролова Н.И., Тарбаева Д.А., Глотова Е.Ю., Золотарева А.А., Мальцева Т.В. Ассоциации генитальных инфекций и вируса папилломы человека как конфаундинг-факторы цервикальной интраэпителиальной неоплазии. DoctorRu. 2015;2(12):14–17.

18. Пестрикова Т.Ю., Панфилова Ю.О. Чувствительность патогенной микрофлоры цервикального канала к антибактериальным препаратам у пациенток с хроническим цервицитом и ВПЧ. Гинекология. 2015; 7(1):18 – 21.

19. Reid G., Hons B.S. Modulating the Vaginal Microbiome: The Need for a Bridge between Science and Practice. SeminReprodMed. 2014;32(1):28–34.

Способ прогнозирования риска прогрессии рецидивирующих цервикальных интраэпителиальных неоплазий низкой степени онкогенного риска, ассоциированных с папилломавирусной инфекцией, отличающийся тем, что в биоптатах шейки матки проводят оценку колониестимулирующего фактора макрофагов M-CSF, плазматических клеток CD138 в строме, а также Т-лимфоцитов CD3 и натуральных киллеров CD56 в цервикальном эпителии с последующим вычислением прогностического индекса PI по формуле:

PI = 0,095 × Х1 + 0,053 × Х2 + 0,782 × Х3 – 0,387 × Х4 – 5,789,

где Х1 – количество CD3 клеток, %;

Х2 – количество CD138 клеток в строме, %;

Х3 – количество CD56 клеток, %;

Х4 – уровень иммунореактивности колониестимулирующего фактора макрофагов M-CSF, баллы;

где иммунореактивность рассчитывают путем умножения показателя интенсивности окрашивания на показатель положительного процента клеток в диапазоне от 0 до 12 баллов: 0 обозначает отсутствие иммунореактивности, 1–4 обозначает слабую иммунореактивность, 5–8 обозначает умеренную иммунореактивность и 9–12 указывает на сильную иммунореактивность;

5,789 – константа,

при PI более 0 делают заключение о высоком риске прогрессии рецидивирующей цервикальной интраэпителиальной неоплазии низкой степени онкогенного риска в высокую, при PI менее 0 прогнозируют низкий риск.



 

Похожие патенты:

Настоящее изобретение относится к области иммунологии. Предложены способ получения поликлональных антител против пресепсина, композиция антител для обнаружения сепсиса или способствующая обнаружению или диагностике сепсиса.

Предложенная группа изобретений относится к области медицины. Предложены способ обнаружения модифицированного основания в молекуле двуцепочечной нуклеиновой кислоты и способ идентификации по меньшей мере одного соединения, способного предотвращать взаимодействие белка с его сайтом связывания.

Изобретение касается способа определения аффинности связывания лекарственного средства с его мишенью, включающий следующие стадии: определение доли свободного лекарственного средства или свободной мишени в образце, содержащем лекарственное средство, мишень и нековалентные комплексы лекарственное средство-мишень в интервале концентраций лекарственного средства при постоянной концентрации мишени, где доля свободного лекарственного средства остается постоянной, посредством определения на основе результата иммуноанализа доли свободного лекарственного средства в образце, содержащем лекарственное средство, мишень и комплексы лекарственное средство-мишень, по меньшей мере для двух разных отношений лекарственное средство : мишень в образце и, если определенная доля свободного лекарственного средства не сравнима для всех использованных отношений лекарственное средство : мишень, тогда отношение лекарственное средство : мишень в образце уменьшают, и образец подвергают повторному анализу посредством такого же иммуноанализа, или определения на основе результата иммуноанализа доли свободной мишени в образце, содержащем лекарственное средство, мишень и комплексы лекарственное средство-мишень, по меньшей мере для двух разных отношений лекарственное средство : мишень в образце, и, если определенная доля свободной мишени не сравнима для всех использованных отношений лекарственное средство : мишень, тогда отношение лекарственное средство : мишень в образце увеличивают и образец подвергают повторному анализу посредством такого же иммуноанализа, и проведение расчета на основе доли свободного лекарственного средства или проведение расчета на основе доли свободной мишени, определенных на предыдущей стадии, аффинности связывания лекарственного средства с его мишенью, где «сравнимый» означает относительное различие (% Разл.) двух определенных значений менее чем 100%, а «несравнимый» означает относительное различие (% Разл.) двух определенных значений больше чем 100%, где % Разл., рассчитанное согласно следующей формулы % Разл.
Изобретение относится к области медицины, в частности к биохимии, фармакологии, биологии, и может быть использовано для тестирования биологически активных веществ с учетом групповой принадлежности крови.
Изобретение относится к медицине, в частности к травматологии. .

Изобретение относится к медицине, а именно к дерматологии и к внутренним болезням. .

Изобретение относится к медицине и касается способа оценки экспрессии Phosphatase and Tensin Homolog (PTEN) в железах и строме эндометрия, где определение экспрессии рецепторов PTEN отдельно в железах и строме после постановки реакции с использованием двухэтапного стрептавидин-биотин-пероксидазного метода и демаскировки антигена проводят с использованием программного обеспечения для виртуального микроскопа с последующим вычислением балла H-Score; изображения анализируют с использованием программного обеспечения; на фото образцов выделяют области, отдельно для стромы и железистой ткани, и пиксельное измерение иммунореактивности проводят с использованием цветового пространства Lab × (яркость [L] и двух цветовых каналов желто-синий и красно-зеленый), затем с помощью команды Analyze → Measure анализируют площадь выделенных пикселей и рассчитывают их процент от общей площади биопрепарата.

Изобретение относится к области биотехнологии. Описан способ спектрометрического определения концентрации рибонуклеопротеина вируса бешенства по оценке количества молекул вирусной РНК, выделенных из полных частиц вируса бешенства после их штаммоспецифического связывания (NРНК ВБ), на основании линейной функции зависимости NРНК ВБ от содержания рибонуклеопротеина вируса бешенства в вирусной суспензии.
Изобретение относится к области медицины, а именно к травматологии, ортопедии и иммунологии, и может быть использовано для прогнозирования развития нестабильности компонентов эндопротеза у пациентов с дегенеративно-дистрофическими заболеваниями крупных суставов при их замене на искусственный.
Группа изобретений относится к области медицины, а именно к патоморфологии, гинекологии и репродуктологии и может быть использовано для оценки степени выраженности хронического эндометрита (ХЭ) у женщин с маточным фактором бесплодия после неудач экстракорпорального оплодотворения (ЭКО) в анамнезе.
Наверх