Распыляемое средство с антибактериальным эффектом
Изобретение относится к дезинфекции воздушного пространства и поверхностей. Распыляемое средство с антибактериальным эффектом характеризуется тем, что представляет собой смесь сверхкритических экстрактов растительного сырья, при этом в состав смеси входят сверхкритические экстракты листьев эвкалипта, зверобоя, чистотела, полыни, хвои пихты и хвои сосны при следующем соотношении, мас.%: сверхкритический экстракт зверобоя 5-12, сверхкритический экстракт чистотела 2-8, сверхкритический экстракт полыни 1-7, сверхкритический экстракт хвои пихты 0,5-4, сверхкритический экстракт хвои сосны 0,05-3, сверхкритический экстракт листьев эвкалипта - остальное. Изобретение обеспечивает пролонгирование антибактериального действия летучих фитонцидов в средстве и повышение угнетения микроорганизмов за счет ведения их в исключающую контакт с кислородом жидкостную оболочку. 5 табл., 1 пр.
Изобретение относится к области средств, предназначенных для дезинфекции (обеззараживании) воздушного пространства и поверхностей в местах нахождения человека. Изобретение так же может использоваться в качестве препарата для и защиты кожи человека от неблагоприятных внешних воздействий и дыхательных путей человека путем активного лизиса вирусных, бактериальных, грибковых частиц, попадающих в воздушное пространство или на кожу человека
В частности в рамках настоящего изобретения речь идет о средстве, которое производится полностью из полноценно натурального по составу растительного сырья с выделением из них фитонцидных экстрактов. Препараты на основе фитонцидов - это препараты, содержащие фитонциды; обладают антибактериальными, противогрибковыми и противовирусными свойствами, оказывают иммуностимулирующий эффект, стимулируют процессы регенерации и заживления, положительно влияют на секреторную активность желудочно-кишечного, тракта.
Применение растительного сырья в качестве средства антибактериального воздействия на дыхательные процессы человека или на кожу человека известно давно.
Например, в настоящее время выпускается «Пихтовый экстракт хвойный (пищевой)» (не является лекарственным средством). Его использование позволяет достичь адаптогенного эффекта, активизировать иммунную систему, процессы кроветворения и регенерации тканей. Пихтовый экстракт оказывает противобактериальное и противовирусное воздействие на организм человека. Кроме того, он способствует устранению воспалительных процессов детоксикации организма, обладает гепатопротективными свойствами, является ранозаживляющим и противоожоговым средством, поддерживает деятельность сердечно-сосудистой системы, предупреждая развитие атеросклероза, инфаркта, инсульта и пр. Водный экстракт пихты сибирской содержит витамины (А, В, С, Е), микроэлементы K, Са, Mg, Р, Mn, Na, S, Fe, Si,Cl, Zn, фитонциды, комплекс растительных полифенолов, β-каротин, хлорофилл, дубильные вещества.
Фитонциды - представляют собой антибиотики природного происхождения. Они подавляют рост и развитие бактерий, микроскопических грибов, простейших, убивают их и способствуют выведению из организма, участвуют в выведении из организма солей тяжелых металлов, радионуклидов. β-каротин мощный антиоксидант, вещество которое обладает иммуностимулирующим и адаптогенным действием). Растительные полифенолы- защищает организм от агрессивного воздействия внешних факторов, помогая бороться с повреждениями клеток, которые им наносят свободные радикалы. Благодаря этой защитной функции клетки получают защиту от окисления и старения. Дубильные вещества обладают бактерицидными, вяжущими, кровоостанавливающими, а так же β-витаминными свойствами, что сказывается на противовоспалительном действии слизистой оболочки кишечника и снижении секреторной функции желудочно-кишечного тракта.
Согласно установленной практике данный экстракт применяют при функциональных и органических нарушениях функции желудка, желудочно-кишечного тракта, нарушении функции печени и пищевых отравлениях, в том числе алкогольная интоксикация. Форма приема препарата - 1 ч. л. пихтового экстракта на 0,5 стакана воды, 3 раза в день перед едой на протяжении трех-четырех недель. В реальности данный экопрепарат в своем составе содержит пихту сибирскую фруктозу, яблочную кислоту, консервант (бензоат натрия).
Каждое из применяемых в традиционной народной медицине растений имеет свои положительные качества, влияющие на регенерацию нарушенных процессов в организме. Эти свойства растений традиционно применяются в народной медицине в широком компонентном и процентном по содержанию виде от питьевых композиций до капельного применения взбрызгиванием запястий.
Если обобщить процесс воздействия на организм человека летучих фитонцидов, то можно отметить их кратковременное воздействие из-за быстрого прохождения окислительного процесса в воздухе.
Настоящее изобретение направлено на достижение технического результата, заключающегося в пролонгировании антибактериального действия летучих фитонцидов в средстве и повышении угнетения микроорганизмов за счет ведения их в исключающую контакт с кислородом жидкостную оболочку.
Указанный технический результат достигается тем, что распыляемое средство с антибактериальным эффектом представляет собой подлежащий распылению в окружающую воздушную среду для выделения при взаимодействии с кислородом воздуха фитонцидов водный раствор смешанных между собой сверхкритических экстрактов растительного сырья, при этом в состав водного раствора входят сверхкритические экстракты эвкалипта, зверобоя, чистотела, полыни, пихты и сосны при следующем соотношении, мас. %:
зверобой - 5-12%
чистотел - 2-8%
полынь - 1-7%
пихта - 0,5-4%
сосна - 0,05-3%
эвкалипт - остальное.
Указанные признаки являются существенными и взаимосвязаны с образованием устойчивой совокупности существенных признаков, достаточной для получения требуемого технического результата.
Согласно настоящего изобретения рассматривается новый состав средства для дезинфекции (обеззараживания) воздушного пространства и поверхностей в местах нахождения человека за счет мощного воздействия выделяемых растительным сырьем фитонцидов в окружающую среду.
Заявленное средство представляет собой водный раствор смешанных между собой сверхкритических экстрактов растительного сырья, которые при применении распыляют в окружающую среду или на поверхность, в том числе и на кожу человека.
В состав водного раствора входят сверхкритические экстракты эвкалипта, зверобоя, чистотела, полыни, пихты и сосны при следующем соотношении, мас. %:
зверобой - 5-12%
чистотел - 2-8%
полынь - 1-7%
пихта - 0,5-4%
сосна - 0,05-3%
эвкалипт - остальное.
В заявляемом техническом решении используются сверхкритические экстракты различных растений. Сверхкритическая экстракция - это экстракция с применением сверхкритического углекислого газа (СО2). Натуральные продукты, что особенно характерно для растительного сырья, обычно содержат большое количество разнообразных химических веществ, сильно различающихся по степени растворимости в конкретном растворителе. Поэтому экстракты одного и того же растительного сырья, полученные в результате использования различных растворителей, никогда не будут полностью идентичны. Технология сверхкритической экстракции позволяет получать концентрат биологически активных веществ (БАВ) практически с сохранением полного природного соотношения и тончайших биохимических нюансов, присущих растению. Кроме того, применение углекислого газа позволяет полностью и в щадящем режиме отделять его от экстракта, в противовес классическим растворителям (масло, спирт, пропиленгликоль), выведение которых не всегда оказывается полным. Иными словами, такие экстракты абсолютно свободны от растворителя.
Таким образом, введение в рецептуру заявленного технического решения сверхкритических экстрактов эвкалипта, зверобоя, чистотела, Польши, пихты и сосны позволяет получить антибактериальное средство для защиты обеззараживания окружающего воздуха и поверхностей в местах нахождения человека за счет формирования в воздушном пространстве при распылении водного состава выделяемых из капельного распыления при взаимодействии с кислородом фитонцидной составляющей в объеме, существенно превышающем выделение фитонцидов путем испарения экстракта или при подогреве экстракта.
Особенностью заявленного водного раствора распыляемых экстрактов растительного сырья является то, что оно биологически безопасно для человека и не имеет противопоказаний. По сути, действие распыленного состава на человека сходно с действием находящихся в воздушном пространстве фитонцидов, воспринимаемых как запах хвойного леса, или роз, или других цветов.
Фитонциды представляют собой образуемые растениями летучие биологически активные вещества, убивающие или подавляющие рост и развитие бактерий, микроскопических грибов, простейших. Фитонцидами являются все выделяемые растениями летучие вещества, в том числе и те, которые практически невозможно собрать в заметных количествах. Эти фитонциды называют также «нативными антимикробными веществами растений». Химическая природа фитонцидов существенна для их функции, но в термине «фитонциды» в явном виде не указывается. Это может быть комплекс соединений, например, терпеноидов, или других т.н. вторичных метаболитов. Характерными представителями фитонцидов являются эфирные масла, извлекаемые из растительного сырья промышленными методами.
Нативные фитонциды играют важную роль в иммунитете растений и во взаимоотношениях организмов в биогеоценозах. Выделение ряда фитонцидов усиливается при повреждении растений. Летучие фитонциды (ЛАВ) способны оказывать свое действие на расстоянии, например фитонциды листьев дуба, эвкалипта, сосны и многих др. Сила и спектр антимикробного действия фитонцидов весьма разнообразны.
Фитонциды чеснока, лука, хрена, красного перца убивают многие виды простейших, бактерий и низших грибов в первые минуты и даже секунды. Летучие фитонциды уничтожают простейших (инфузорий), многих насекомых за короткое время (часы или минуты). Фитонциды - это факторов естественного иммунитета растений (растения стерилизуют себя продуктами своей жизнедеятельности). Защитная роль фитонцидов проявляется не только в уничтожении микроорганизмов, но и в подавлении их размножения, в отрицательном хемотаксисе подвижных форм микроорганизмов, в стимулировании жизнедеятельности микроорганизмов, являющихся антагонистами патогенных форм для данного растения, в отпугивании насекомых и т.п. Гектар соснового бора выделяет в атмосферу около 5 килограммов летучих фитонцидов в сутки, можжевелового леса - около 30 кг/сут, снижая количество микрофлоры в воздухе. Поэтому в хвойных лесах (особенно в молодом сосновом бору) воздух практически стерилен (содержит лишь около 200-300 бактериальных клеток в 1 м3).
В состав водного раствора заявленного средства авторами использованы экстракты экстракты эвкалипта, зверобоя, чистотела, полыни, пихты и сосны. Данное растительное сырье выбрано в соответствии с опытом их применения в качестве угнетающих компонентов.
Так, эвкалипт обладает ярко выраженным противомикробным и противовоспалительным действием и широко применяется в комплексной терапии заболеваний верхних дыхательных путей, полости рта и глотки. Водные и спиртовые извлечения из листьев эвкалипта проявляют бактерицидный, противовирусный, фунгицидный, противопротозойный и противовоспалительный эффекты. Степень их выраженности зависит от содержания эфирного масла (0.3-4.5%). Листья растения отличаются большим содержанием эфирного масла (0,3-4,5%), причем этот показатель остается почти неизменным при высушивании. Из 20 кг листьев шаровидного эвкалипта получают около 1 л эфира. Активность основного компонента эфирного масла цинеола (65-85%) потенцируют пинены, миртенол, дубильные вещества (до 6%). При приеме внутрь и в ингаляциях препараты эвкалипта вызывают отхаркивающий, муколигический и бронхолитический эффекты, а при нанесении на кожу вяжущее, антиэкссудативное, противозудное, анестезирующее, а в более высоких концентрациях местнораздражающее действие. Хлорофиллипт, содержащий смесь хлорофиллов из листьев эвкалипта, обладает антимикробной, особенно антистафилококковой, активностью, стимулирует процессы регенерации. Компоненты эфирного масла вместе с органическими кислотами, дубильными веществами и микроэлементами марганцем, цинком, селеном повышают устойчивость тканей к гипоксии различного генеза. Эвкалипт практически незаменим в борьбе с такими патогенными микроорганизмами как стрептококки, стафилококки, дизентерийная палочка, туберкулезные микобактерии. Растение тормозит развитие трихомонад, уничтожает возбудителей малярийной лихорадки. Запах его эфирных масел не переносят кровососущие насекомые, поэтому эвкалипт применяют при укусах, чтобы снять покраснение и зуд. Дезинфицирующие и антисептические свойства эвкалипта используются также при лечении ран, язв, порезов, прыщей, ожогов, способствуя быстрому их заживлению. Растение оказывает сильный противовоспалительный эффект при гнойничковых поражениях кожных покровов, флегмонах, гнойном мастите, различных дерматологических заболеваниях, радикулите, миозите, неврите. Такой состав обуславливает целебные свойства растения при профилактике и лечении целого ряда заболеваний внутренних органов и эстетических проблем кожи.
Зверобоя продырявленного травы экстракт (Hyperici perforati herbae extract) оказывает вяжущее и противовоспалительное действие, обусловленное содержащимися флавоноидами, азуленом и эфирными маслами, а также мягким антидепрессивным, седативным и анксиолитическим действием. Благоприятно воздействует на функциональное состояние центральной и вегетативной нервной системы. Предполагается, что препарат способен угнетать активность главным образом МАО А-типа и в некоторой степени - МАО В-типа. Биофлавоноиды связываются с бензодиазепиновыми рецепторами и оказывают седативное действие. Содержит производные антрацена - главным образом гиперицин, псевдогиперицин; флавоноиды - гиперозид, кверцитин, рутин, изокверцитин, аментофлавон; ксантоны - 1,3,6,7-тетрагидрокси-ксантон; ацилхлороглуцинолы: гиперфорин с небольшими количествами адгиперфорина; эфирные масла; олигомеры; процианидины и другие катехиновые танины; производные кофеиновой кислоты, включая хлорогеновую кислоту. Благодаря высокому содержанию флавоноидов растение оказывает противовоспалительное действие. Установлено, что гиперфорин ингибирует рост грамположительных бактерий Streptococcus pyogenes и Streptococcus agalactiae. Показана эффективность гиперфорина в отношении пенициллин-резистентных штаммов и метициллин-резистентных штаммов Staphylococcus aureus. Такой состав обуславливает целебные свойства растения при профилактике и лечении целого ряда заболеваний внутренних органов и эстетических проблем кожи. В состав травы и цветков зверобоя входят углеводы, дубильные вещества, смолы, антраценовые производные (гиперицин, псевдогиперицин, протопсевдогиперицин и другие), флавоноиды (глиикозид гиперозид, рутин, кверцетин, кверцитрин, изокверцитрин и другие), эфирные масла, терпены, сесквитерпены, антоцианы, тритерпеновые сапонины, антрахиноны, каротиноиды, никотиновая и аскорбиновая кислоты, витамины Е и Р, холин, цериловый спирт, алкалоиды, минеральные и другие биологически активные соединения. Поскольку зверобой обладает противовоспалительным, антисептическим и вяжущим действием, то лечение заболеваний дыхательных путей с помощью этого средства всегда дает хороший результат. Вяжущее и противовоспалительное действие обусловлено наличием в составе растения дубильных веществ. Вместе с другими активными элементами они уничтожают некоторые микробы, устойчивые к синтетическим антибиотикам. Растение оказывает отхаркивающее действие при заболеваниях дыхательных путей.
В состав чистотела входят такие полезные компоненты: аскорбиновая кислота, разные органические кислоты, каротин, эфирные масла, флавоноиды, фитонциды и смолы. Эти вещества способны убивать различные грибки, бактерии, вирусы. Болезни дыхательных органов тоже лечатся с помощью растения. Это и насморк, и ангина, и коклюш, и бронхит, и астма, и пневмония. Наиболее известная целебная роль чистотела, о чем говорит и его название, для заболеваний кожи. Им выводят папилломы и бородавки, лечат экземы и язвы, мозоли и микозы. Растение полезно для того, чтобы избавиться от прыщей, угрей, ран, псориаза, чесотки и других подобных болезней.
Многочисленные исследования показали, что полезные свойства обусловлены наличием алкалоидов изохинолиновой подгруппы:
- Хелидонин. По своему составу напоминает морфин и папаверин.
- Гомохелидонин выступает в роли местного анестетика и судорожного яда.
- Протопин способствует снижению реакции нервной системы.
- Сангвинарин улучшает слюноотделение, а также повышает перистальтику кишечника.
Химический состав чистотела включает в себя алкалоиды, янтарную, яблочную и лимонную кислоты, витамины А и С, спирты, эфиры, дубильные вещества, минеральные вещества: Са, Mg, Zn, Se, K;
Полынь оказывает антибактериальное, укрепляющее и восстанавливающее воздействие. Смолистые вещества призваны укреплять структуру клеточной массы. Оказывает как противовоспалительное, так и заживляющее воздействие, включает в себя пальмитиновую, яблочную, янтарную, изовалериановую кислоты. По своей природе является натуральным антиоксидантом. Флавоноиды в полыни являются мощным антиоксидантом, который даже помогает смягчить воздействие радиационного облучения на организм. Из-за противовоспалительных свойств его нередко делают компонентом антигистаминных препаратов. Фитонциды в составе экстракта полыни однолетней ценят за антибактериальное воздействие, успокаивающее влияние на нервную систему.
Пихтовый хвойный экстракт помогает активизировать иммунную систему, процессы кроветворения и регенерации тканей. Пихтовый экстракт оказывает противобактериальное и противовирусное воздействие на организм человека. Кроме того, он способствует устранению воспалительных процессов детоксикации организма, обладает гепатопротективными свойствами. Пихтовый экстракт является ранозаживляющим и противоожоговым средством.
Указанное процентное содержание компонентов в составе заявленного средства получено в результате исследований опытных партий методом оценки воздействия водного раствора в распыленном состоянии экстрактов на кожу человека и на микробно-бактерийных фон. Установленные значения были признаны окончательными при получении результатов испытаний, в соответствии с которыми препарат отнесен к безвредным по отношению к человеку и его жизненным процессам. Испытания зафиксированы в августе 2020 г. Протоколом испытаний Астанинского филиала Испытательного центра АО "Национальный центр экспертизы и сертификации" (г. Астана, KZ) на соответствие безопасности парфюмерно-косметической продукции, результаты исследований приведены в таблице 1.
При этом учитывалось негативное воздействие экстрактов некоторых растений, в отношении которых выбор их содержания в составе водного раствора ограничен пределами норм по содержанию экстракта в известных препаратах и Б АД и по дозам их применения.
Так, зверобой противопоказан при беременности, лактации, повышенной восприимчивости к гиперицину или, если в анамнезе присутствует фотосенсибилизация. При параллельном применении с другими лекарственными препаратами, содержащими статины и непрямые антикоагулянты тормозит их действие.
Прием зверобоя может вызвать массу побочных действий, например, возможен зуд, сыпь, пигментация, головная боль и чрезмерная утомляемость, а также повышается чувствительность к шерсти животных, что может вызвать аллергию, и ультрафиолету, а это чревато солнечными ожогами. Длительный прием экстракта может вызвать железодефицитную анемию, тошноту, сухость во рту, запор.
А экстракт чистотела может вызывать следующие негативные последствия для здоровья. Кроме вышеперечисленных веществ в чистотеле содержаться такие токсичные составляющие, как алкалоиды, что свойственно семейству Маковых. Алкалоидами называют азотсодержащие органические соединения растительного происхождения. В малом количестве они влияют на организм человека как сильнодействующие средства, а в больших дозах - как яды. В состав чистотела входит приблизительно двадцать алкалоидов. В старом растении их обычно больше, чем в молодом. Поэтому молодое растение не такое токсичное, а его воздействие на организм - более мягкое.
Единственным растением, применение экстракта которого не имеет противопоказаний, - это эвкалипт. В связи с этим этот экстракт заявлен в позиции "остальное" при практическим применении находится в пределах 50-85%.
Использование раствора в водной форме обусловлено тем, что некоторые экстракты некоторых растений имеют тяговязкую форму. Так, сверхкритический экстракт зверобоя продырявленного представляет собой мазеподобную массу буровато-болотного цвета с характерным для растения запахом. Естественно, что применение такого экстракта в распыляемой форме не дает требуемого результата. В связи с этим в смешанном виде экстракт зверобоя разбавляется экстрактами эвкалипта и чистотела.
Отдельное действие каждого компонента заявленного средства хорошо известно, равно как и известны антибактериальные проявления экстрактов растений в используемом средстве. Однако, фитонцидное проявление каждого компонента имеет свою особенность, которая проявляется в существенной разнице по времени формирования фитонцидного облака в воздухе и по времени оказания этого антибактериального воздействия. Так же разница в том, на какие вирусные, бактериальные или грибковые частицы действует каждое конкретное растение. Фитонциды одних растений убивают микробы, т.е. обладают бактерицидными свойствами, а другие - задерживают рост и размножение микроорганизмов (И.Г. Примудрова Исследовательская работа "Влияние фитонцидов на развитие микроорганизмов", 2015 г.). По природе это разные воздействия как во времени, так и в эффективности получаемого результата (А. Милешин и В. Гарбузов "Влияние фитонцидов растений на микроорганизмы", 2013 г.).
Например, на основании многочисленных исследований, проведенных лабораторией профессора Б.П. Токина, было установлено время гибели простейших после бесконтактного воздействия фитонцидных деревьев: дуб черешчатый - 5 мин., кипарис пирамидальный - 6 мин., тисе ягодный - 6 мин., можжевельник казацкий - 7 мин., сосна обыкновенная - 10 мин., береза бородавчатая - 20 мин, тополь серебристый - 9 мин. Вместе с тем существуют различия и в фитонцидной активности у разных видов. Причем фитонциды листьев деревьев отличаются по своему противомикробному действию от плодов и т.д. Фитонцидная активность растения может изменяться в зависимости от времени года, от погоды, времени суток (утром до 8 час. и вечером после 19 час. количество фитонцидов, производимых растениями, в несколько раз меньше, чем днем).
Деревья, оказывающиеся в тени, выделяют меньше фитонцидов. В березовом и сосновом лесах больше света и больше фитонцидов, чем, например, в смешанном. На количество продуцируемых летучих веществ может влиять также температура воздуха и его влажность: в жаркую погоду концентрация фитонцидов существенно возрастает (в 1,5-1,8 раза), а при повышении влажности воздуха - уменьшается. Одни растения вырабатывают сильнолетучие фитонциды, другие - малолетучие (М. Куликова "Растительные антибиотики - фитонциды").
При подборе компонентного состава учитывалось, что защитная роль фитонцидов проявляется не только в уничтожении микроорганизмов, но и в подавлении их размножения, в стимулировании жизнедеятельности микроорганизмов, являющихся антагонистами патогенных форм для данного растения. Есть фитонциды, содержащиеся в тканях растений в растворенном виде, и летучие фракции фитонцидов, выделяемые в атмосферу, почву, воду (у водных растений). Для состава средства избирались такие растения, летучие фитонциды которых оказывать свое действие на расстоянии. Например, фитонциды листьев эвкалипта, сосны. На площади 1 га в сосновой бору выделяется за сутки около 5 кг летучих фитонцидов, можжевелового леса - ок. 30 кг, снижая количество микрофлоры в воздухе. Поэтому в хвойных лесах (особенно в молодом сосновом бору), вне зависимости от близости населенных пунктов, воздух практически стерилен (содержит лишь около 200-300 бактериальных клеток на 1 м3).
Кроме того, фитонциды растений имеют разную химическую природу. Как правило, это комплекс соединений - гликозидов, терпеноидов, дубильных и прочих веществ, не относящихся к трем основным классам природных соединений - белкам, углеводам и жирам.
Химия фитонцидов изучена недостаточно, но эти вещества являются преимущественно летучими соединениями: синильная кислота (HCN), амины, формальдегид (CH2O), бензойный альдегид, кумарины, цитраль, камфора, салициловый альдегид, гераниол и другие вещества органической природы [1]. Механизм действия летучих фитонцидов заключается в том, что они вызывают разные изменения микробной клетки, а именно: подавляют дыхание, растворяют и разрушают поверхностные слои и составные части протоплазмы (ферменты и др.). Очень важно, что микробы при длительном контакте с летучими выделениями растений не вырабатывают к ним устойчивости и дальнейшей адаптации. Спектр и сила антимикробного действия биологически активных веществ весьма разнообразны, они могут предотвращать развитие многих видов простейших, бактерий и низших грибов (.Sakagami Y. et al. "Antibacterial activity of α-mangostin against vancomycin resistant Enterococci (VRE) and synergism with antibiotics" // Phytomedicine, 2005, T. 12. - №. 3, стр. 203-208.).
Антибактериальный эффект у заявленного средства подтвержден результатами исследования антибактериальной активности заявленного средства в приведенном отношении компонентов в отношении ряда патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, проведенными Филиалом государственного бюджетного учреждения науки Пермского федерального исследовательского центра Уральского отделения Российской академии наук («ИЭГМ УрО РАН») в ноябре 2020 г., целью которого было определение бактериостатического (МПК) и бактерицидного (МБК) действия исходного концентрата заявленного средства в планктонной культуре стандартными методами согласно МУК 4.2.1890-04 на 4-х культурах микроорганизмов {.Escherichia coli, Pseudomonas aeruginosa, Staphylococcus aureus, Klebsiella pneumonia) (I этап).
Антибактериальное действие изучалось с использованием 4-х штаммов Escherichia coli 157 (депозит №240329), Pseudomonas aeruginosa АТСС 27853, Klebsiella pneumoniae АТСС 700603, Staphylococcus aureus АТСС 6538P из Государственной коллекции патогенных микроорганизмов России (ГКПМ).
Определение минимальной подавляющей концентрации (МПК) заявленного средства основывалось на принципе, что МПК - минимальная концентрация, подавляющая видимый рост исследуемого микроорганизма в бульонной культуре. Как видно из таблицы 2, для Е. coli, P. aeruginosa и K. pneumoniae минимальная концентрация средства, при которой отсутствовал рост, была 3,2% С1 с 3,2% С2. Для S. aureus МПК была 1,6% С1 с 1,6% С2 (где «+» - наличие видимого роста (ΔОП600: более 0,20); «-» - отсутствие видимого роста ((ΔОП600: менее 0,20)
Определение минимальной бактерицидной концентрации (МБК) заявленного средства проводилось из учета, что МБК (минимальная бактерицидная концентрация) - минимальная концентрация антимикробного препарата, вызывающая при исследовании in vitro полную гибель бактерий. В таблице 3 показаны результаты по определению МБК средства CITOSPRAY для бактерий (где «+» - интенсивный рост культуры на питательном агаре; «-» - не более 5 колонии на питательном агаре). Показано, что для Е. coli и S. aureus минимальная бактерицидная концентрация составила 3.2% Ос 3.2% С2, в то время как для K. pneumoniae - 12.5% С1 с 12.5% С2. В отношении P. aeruginosa бактерицидный эффект средства CITOSPRAY не выявлен.
Сравнение МПК и МБК заявленного средства (С1+С2) для бактерий позволило выявить, что для Е, coli бактерицидная и подавляющая рост концентрации были сходны, для K. pneumoniae МБК превышала МПК в 4 раза, для S. aureus - в 2 раза Для P. aeruginosa бактерицидный эффект не выявлен. Результаты представлены в таблице 4 - сравнение МПК и МБК для бактерий
А в таблице 5 представлены результаты по антибактериальному действию заявленного средства (где -«+»- присутствует;«-» - отсутствует)
Бактериостатический эффект, т.е. задерживающий рост и размножение бактерий, готового средства, отмечен для Е. coli, P. aeruginosa, K. pneumoniae, S. aureus; бактерицидный, т.е. вызывающий гибель бактерий, для Е. coli и S. aureus.
В последние десятилетия в связи с растущим уровнем резистентности микроорганизмов к антибиотикам эфирные масла растений и их компоненты представляют интерес с точки зрения антимикробной активности и использования в качестве альтернативного или комплементарного лечения инфекций у человека (Жученко Е.В., Семенова Е.Ф., Маркелова Н.Н., Шпичка А.И., Князькова А.А. Влияние эфирных масел на микроорганизмы различной таксономической принадлежности в сравнении с современными антибиотиками. Сообщение 111. Действие масел лаванды, розового дерева, эвкалипта, пихты на некоторые грамотрицательные бактерии. Известия высших учебных заведений. Поволжский регион. Естественные науки. 2015. №1 (9). стр. 30-41). Особенно этот вопрос приобретает актуальность в связи с возрастанием доли респираторных заболеваний человека в эпидемический период.
1. Бактерии Е. coli, обычно обнаруживаемые в нижних отделах кишечника теплокровных организмов, безвредные, но некоторые штаммы могут вызывать тяжелое пищевое отравление, а у ослабленных лиц - пневмонию, пиелонефрит, менингит, сепсис [4, 5, 6]. Другие грамотрицательные бактерии P. aeruginosa и K. pneumoniae также могут провоцировать инфекции легких, вызывая обострения хронических обструкций, муковисцидоза (MB) и пневмоний при искусственной вентиляции легких (ИВЛ) (Riquelme S.A., Ahn D., Prince A. Pseudomonas aeruginosa and Klebsiella pneumoniae Adaptation to Innate Immune Clearance Mechanisms in the Lung. J Innate Immun. 2018, 10(5-6), p.442-454). Кроме того, P. aeruginosa, K. pneumoniae и S. aureus выявляются у пациентов с COVID-19 при сопутствующих и вторичных инфекциях (Langford B.J., So М., Raybardhan S., Leung V., Westwood D., MacFadden D.R., Soucy J.R., Daneman N. Bacterial co-infection and secondary infection in patients with COVID-19: a living rapid review and meta-analysis. Clin Microbiol Infect. 2020S1198-743X(20)30423-7. doi: 10.1016/j5.cmi.2020.07.016).
Проведенные исследования свидетельствуют, что вирусы ослабляют иммунитет и способствуют развитию бактериальной суперинфекции, при этом заявленное средство обладает антибактериальными действиями:
- бактериостатическим действием в отношении Е. coli, P. aeruginosa, K. pneumoniae и S. Aureus,
- бактерицидным - в отношении Е. coli и S. aureus.
Распыляемое средство с антибактериальным эффектом, характеризующееся тем, что представляет собой смесь сверхкритических экстрактов растительного сырья, при этом в состав смеси входят сверхкритические экстракты листьев эвкалипта, зверобоя, чистотела, полыни, хвои пихты и хвои сосны при следующем соотношении, мас.%:
| сверхкритический экстракт зверобоя | 5-12 |
| сверхкритический экстракт чистотела | 2-8 |
| сверхкритический экстракт полыни | 1-7 |
| сверхкритический экстракт хвои пихты | 0,5-4 |
| сверхкритический экстракт хвои сосны | 0,05-3 |
| сверхкритический экстракт листьев эвкалипта | остальное |
