Способ гистохимического выявления цинка
ОПИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕН ИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
381955
Союз Советских
Социалистических
Республик
Зависимое от авт. свидетельства №
Заявлено 21.VI.1971 (№ 1671893/31-16) с присоединением заявки №
Приоритет
Опубликовано 22.Ч.1973. Бюллетень ¹ 22
Дата опубликования описания 14Х111.1973
М. Кл. G 01п 1/30
Комитет по делам изобретений и открытий при Совете Министров
СССР
УДК 519.449.57:614.48 (088.8) т . 1
Авторы изобретения
И. В. Торопцев и В. А. Ещенко
Заявитель
СПОСОБ ГИСТОХИМИЧЕСКОГО ВЫЯВЛЕНИЯ ЦИНКА
Изобретение относится к области гистохимии.
Известен способ гистохимического выявл ения тяжелых металлов, например, цинка, путем приготовления парафиновых срезов, расправления их в воде, наклеивания на предметные стекла, высушивания, окрашивания ацетоновым раствором дитизона. Однако вода для распра вления срезов, предметные стекла и яичный белок, которым покрывают стекла, служат источником внесения в препарат экзогенного цинка, а высушивание срезов на воздухе сопровождается окислением продуктов, с которыми должен взаимодействовать реагент. Все это приводит к снижению чувствительности и точности способа.
Целью изобретения является разраоотка способа гистохимическото выявления цинка, позволяющего повысить точность гнстохимической реакции.
Поставленная цель достигается тем, что парафиновые срезы помещают в петролейный эфир, обрабатывают их в абсолютном спирте с последующим проведением через серию спиртов с понижающейся концентрацией и окрашиванием:в течение 3 час при температуре 56 С в 02%-ном водно-аммиачном растворе дитизона.
iH р и м е р. Кусочки поджелудочной железы кролика фиксируют в течение 3 час при 4 С в 70 -ном спирте, насыщенном сероводородом. Затем кусочки промывают в 70 -ном спирте и обезвоживают в серии спиртов с возрастающей концентрацией (80 -ный 4 час, 90 ный 4 час, 100 -пый 4 час). Обезвоженные кусочки выдерживают в двух сменах ксилола (по 15 лшн в каждой), в двух парафинах при
1о 56 С (по 1,5 час в каждом), после чего заливают в,парафин.
Парафиновые среды толщиной 5 — 10 мкм непосредственно с ножа переносят в петро15 лейный эфир, налитый в стаканчик. Депарафинируют срезы в течение 5 лтия, после чего в течение 5 лтик промывают в абсолютном спирте. Затем спирт сливают н заменяют
0,2%-ным водно-аммиачным раствором днти20 зона. Окраску производят в течение 3 час при
56 С в термостате в плотно закупоренном сосуде. Затем дитпзон сливают и .срезы промывают, в течение 15 мин дистиллированной водой, подкисленной уксусной кислотой (из рас25 чета 2 капли на 100 мл дистигллированной воды), далее среды промывают новой порцией дистиллированной воды, не содержащей уксусной кислоты, заключают срезы в тлицерин — желатин,,покрывают покровным стек30 лом и рассматривают в светл ом и, темном по381955
Предмет из об р е те и и я
Составитель С. Щенева
Редактор К. Шанаурова Техред T. Курнлко Корректор Г. Запорожец
Заказ 2!88713 Изд. № 1510 Тираж 755 Подписное
ЦНИИПИ Комитета по делам изобретений и открытий при Совете Министроз СССР
Москва, Ж-35, Раушская наб., д. 4/5
Типография, пр. Сапунова, 2 ле зре ния микроскопа. Рабочий раствор дитизона готовят пятикратным разбавлением дистиллированной водой основного раствора.
Для получения основного раствора к 15 мл дистиллированной воды добавляют 0,3 мл
25% -ного раствора гидроокиси аммония и
200 мг дитизона. Смесь встряхивают на водяной бане при, 70 С в течение 10 мин, затем отфильтровывают и полученный фильтрат используют для окраски.
На препаратах в цитоплазме островковых кл еток отчетливо выявляются пурпурно-красные гранулы дитизоната цинка.
Способ тистохимического выявления цинка путем приготовления .парафиновых срезов, их
5 депарафинирования и окрашивания растворами дитизона, отличающийся тем, что, с целью повышения чувствительности. гистохимической реакции, парафиновые срезы помещают в петролейный эфир, îбра батывают их в абсолют10 ном спирте с последующим проведением через серию спиртов с понижающейся концентрацией и окрашиванием в течение 3 час при температуре 56 С в 0,2%-ном возно-аммиачном растворе дитизона.
