Способ выделения гуанозин-5'-дифосфата

Авторы патента:

C07H19/20 - с сахаридным радикалом, этерифицированным фосфорными или полифосфорными кислотами

з .сл йлТ",. -„ ..:

ОПИС

ИЗОБРЕТЕНИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Сбюз советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №

N. Кл. С 07d 51/54

Заявлено 21.I1.1972 (№ 1751200/23-4) с присоединением заявки №

Приоритет

Опубликовано IÎ.ÕI I.1973. Бюллетень ¹ 47

Дата опубликования описания 8.IV.1974

Государственный комитет

Совета Министров СССР па делам изобретений и открытий

УДК 547.857.7.07 (0.88.8) Авторы изобретения Н. С. Тихомирова-Сидорова, Г. Е. Устюжанин и В. В. Коломейцева

Заявитель

Институт высокомолекулярных соединений АН СССР

СПОСОБ ВЫДЕЛЕНИЯ ГУАНОЗИ Н-5 -ДИ ФО СФАТА

Изобретение относится к усовершенствованному способу выделения соединения, которое применяется в биохимических исследованиях.

Известен способ выделения гуанозин-5 -дифосфата из продажного препарата, содержащего гуанозпн-5 -монофосфат и о-щепившийся неорганический фосфат. Очистку гуанозин-5 дифосфата осуществляют методом хроматографии на ионообменных смолах. Выход гуанозин-5 -дифосфата составляет 70 вЂ” 75%.

Однако известный способ обладает рядом существенных недостатков, важнейшим из которых является трудоемкость процесса очистки. Кроме того, в очищенных препаратах содержится аналитически трудоопределяемые примеси, которые мешают применению гуанозин-5 -дифосфата в биохимических исследованиях.

При осуществлении, предлагаемого способа выделения гуанозин-5 -дифосфата все это устраняется за счет различной растворимости кальциевых солей гуанозин-5 -дифосфата, гуанозин-5 -монофосфата и неорганического фосфата в спирто-солянокислом растворе.

Для упрощения технологии процесса смесь гуанозин-5 -дифосфата, гуанозин - 5 - монофосфата и неорганического фосфата подвергают обработке солями кальция, например хлористым кальцием, и полученную смесь кальциевых солей подвергают дробному осаждению из солянокислого раствора спиртом. Выход достигает 84%.

Пример. Иопользуют динатриевую соль гуанозин - 5 - дифосфата фирмы «Реанал» (Венгрия). При предварительных опытах устанавливают, что в 1 г препарата содержится

lo 417 мг (0,88 ммоль) динатрпевой соли гуанозин-5 -дифосфата, 223 мг (0,55 ммоль) динатриевой соли гуанозин-5 -монофосфата, 40 мг (0,23 ммоль) тринатриевой соли ортофосфорной кислоты, а также крпсталлогидратная во15 да, влага и другие примеси. Таким образом, примесь неорганических ортофосфатов и гуанозин-5 -монофосфатов, отнесенная к гуанозин-5 -дифосфату, составляет 28 и 67 мол% соответственно.

20 1 г препарата растворяют в 30 мл 0,1 н. соля ной кислоты и к раствору прибавляют 45 мл

0,2 М хлористого кальция в этиловом спирте.

Вы павший осадок центрифугируют, промывают спиртом, растворяют в 30 мл 0,1 М соляной

2s кислоты и переосаждают добавлением 80 мл этилового спирта. Переосаждение повторяют несколько раз. После трех переосажденнй в препарате остается менее 3% гуанозин-5 -моПредмет изобретения

Составитель В. Жестков

Редактор Т. Загребельная

Техред 3. Тараиеико Корректор В. Брыксина

Заказ 831/12 Иэд. № 299 Тираж 523 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, Ж-35, Раушская |наб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2 нофосфата и отсутствует неорганический ортофосфат. Последующее переосаждение приводит к полному удалению монофосфатов.

Для дальнейших анализов кальциевую соль гуанозин-5 -дифосфата переводят в литиевую на катионите Даузкс-50 (Li+-форма) и лиофилизуют. Собирают 330 мг (0,74 ммоль) литиевой соли гуанозин-5 -дифосфата, выход составляет 84%, считая на взятый гуанозин-5 дифосфат.

Способ выделения гуанозин-5 -дифосфата из его смеси с гуанозин-5 -.монофоофатом и отщепившимся неорганическим фосфатом, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью упрощения технологии процесса, указанную смесь подвергают обр або пке солями кальция, на1пример хлористым кальцием, и полученную смесь

10 кальциевых солей подвергают дробному осаждению из солянокислого раствора спиртом.

Способ получения меченного тритием гуанозин-5-трифосфата // 404348

Способ получения меченных тритиемнуклеози // 250147

Способ выделения аденозинтрифосфата // 236477

Фосфолипидные производные нуклеозидов и фармацевтическая композиция // 2104282

Литиевые соли (1'r,5'r)-3'-аза-3'-(азидонафталин-1- сульфамидо)-1'-(6-аминопуринил-9)-3'- дезоксигексопиранозил- 6'-ди-или-трифосфатов как специфические фотоактивируемые необратимые ингибиторы na,к-аденозинтрифосфатазы // 2130943

Соли 3'-амидопроизводных (1'r,5'r)-3'-аза-1'-(6- аминопуринил-9)-3'- дезоксигексопиранозил-6'-дифосфата в качестве специфических флуоресцентных ингибиторов миозиновой аденозин 5'-трифосфатазы // 2131435

Изобретение относится к новым химическим соединениям - солям 3'-амидопроизводных (1'R, 5'R)-3'-аза-1'-(6-аминопуринил-9)-3'-дезоксигексопиранозил- 6'-дифосфата общей формулы где или Cat+ - катион щелочного металла, в качестве специфических флуоресцентных ингибиторов миозиновой аденозин-5'-трифосфатазы (АТФазы)

N-алкил-2-замещенные атф и способ их получения // 2136693

Высокомеченные тритием коэнзим а или ацетил-коэнзим а // 2143416

Изобретение относится к органической химии и может найти применение в биохимии, в медицине, в медикобиологических исследованиях

Калиевые соли разнолигандных координационных соединений магния с гистидином, аденозин-5'-трифосфатом и креатинфосфатом, проявляющие защитное действие на миокард от ишемического повреждения // 2144922

Изобретение относится к фармакологии, в частности к металлоорганическим соединениям, обладающим биологической активностью, которые могут найти применение в разработке лекарственных средств для профилактики и лечения ишемической болезни сердца

Липидные сложные эфиры нуклеозидмонофосфатов, обладающие противоопухолевой активностью, способ их получения и лекарственное средство // 2165429

Изобретение относится к новым нуклеозидмонофосфатным производным с остатками липидных сложных эфиров общей формулы I, в которой R1, R2 представляют собой линейную или разветвленную насыщенную алкильную цепь, содержащую 1-20 атомов углерода; R3, R5 представляют собой водород, гидроксильные группы; R4 представляет собой гидроксильную группу; Х представляет собой атом серы, сульфинильную или сульфонильную группу; Y представляет собой атом кислорода; В представляет собой пуриновое и/или пиримидиновое основание при условии, что по крайней мере один из остатков R3 или R5 представляет собой водород; к их таутомерам, их оптически активным формам и рацемическим смесям, или их физиологически приемлемым солям неорганических и органических кислот и/или оснований, а также к способам их получения и к лекарственным средствам, содержащим упомянутые соединения

L-нуклеозиды, обладающие анти-hbv или анти-ebv активностью, способ ингибирования hbv или ebv инфекции // 2171809

Изобретение относится к области способов лечения заболеваний, вызванных вирусом гепатита B (называемым также HBV и вирусом Эпштейна-Барра (называемым также EBV, которые включают введение эффективного количества одного или более из активных соединений, раскрытых здесь, или их формацевтически приемлемых производных или пролекарств одного из этих соединений

Модифицированные нуклеозид-5'-трифосфаты как антивирусные агенты // 2183213

Новые нуклеозидные и олигонуклеотидные аналоги // 2233844

Изобретение относится к нуклеозидным аналогам формулы (1), в которой R1 представляет собой Н или группу, защищающую гидроксил, R2 представляет собой Н, группу, защищающую гидроксил, группу фосфорной кислоты, защищенную группу фосфорной кислоты или группу формулы P(R3)R4, в которой R3 и R4 являются одинаковыми или разными и представляют собой гидроксильную группу, защищенную гидроксильную группу, алкоксигруппу, алкилтиогруппу, цианоалкоксигруппу, аминогруппу, замещенную алкильной группой; А представляет собой алкиленовую группу, содержащую от 1 до 4 атомов углерода, и В представляет собой замещенную пурин-9-ильную группу или замещенную 2-оксопиримидин-1-ильную группу, содержащие по крайней мере один заместитель, выбранный из гидроксильной группы, защищенной гидроксильной группы, аминогруппы, защищенной аминогруппы, алкильной группы