Патент ссср 413191

 

4I3I9I

ОПИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕ Н ИЯ

К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ

Союз Советских

Социалистических

Республик

Зависимое от авт. свидетельства №

Заявлено 06.Ч11.1972 (№ 1806971/28-13) М. Кл. С 12k 1/00

С 12d 3/00 с присоединением заявки №

Государственный комитет

Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

1Iриоритет

Опубликовано 30.1.1974. Бюллетень № 4

Дата опубликования описания 28Х.1974

УДК 663.13(088.8) В. А. Яковлев, Г. П. Черныш, P П. Попонина, С. П. Ялышев, В. М, Буймистр, Г. К. Глушков и О. Н. Путилина

1 " " ::"",, .а

Всесоюзный научно-исследовательский витаминный институт

Авторы изобретения

Заявитель

СПОСОБ КОНТРОЛЯ ПРОЦЕССА БИОХИМИЧЕСКОГО

ОКИСЛЕНИЯ D-СОРБИТА В L-СОРБОЗУ

Изобретение относится к микробиологической промышленности.

Известен способ контроля процесса биохимического окисления D-сорбита в 1 -сорбозу рефракто-поляриметрическим методом. Для этого пробу культуральной жидкости, полученную при окислении сорбита уксуснокислыми бактериями, разбавляют, подщелачивают, добавляют к раствору азотнокислый свинец, отстаивают, фильтруют и затем анализируют.

Однако длительность подготовки пробы для анализа, а также невозможность определения жизнеспособности бактерий, влияющей на глубину и селективность процесса окисления, делают невозможным управление процессом.

Цель изобретения — повышение скорости, чувствительности и избирательности анализа.

Это достигается тем, что пробу культуральной жидкости отбирают многократно в процессе ферментации (окисления D-сорбита уксуснокислыми бактериями) через определенные промежутки времени, смешивают с люцигенипом в щелочной среде и определяют интенсивность и продолжительность хемилюминесценции, по которым судят о глубине, окисления сорбита в сорбозу и жизнеспособности оактерий.

Контроль ведут при рН, преимущественно равном 8 — 14.

К пробам культуральной жидкости, отбираемым через определенные промежутки времени, добавляют люцигенин, создают щелочную среду и определяют интенсивность и продолжительность хемилюминесценции. Зависимость интенсивности хемилюминесценции от времени процесса окисления описывается функцией

10 и-- (- — 5 )+т где у — интенсивность хемилюминесценцпи: у — у„„-; х — продолжительность процесса окисления; Р— время, нсобходнмое для достижения я п ах.

15 Определение интенсивности и продолжительности хемилюминесценции может быть осуществлено, например, с помощью приемников света, чувствительных к ультрафиолетовым и видимым лучам света. 11аиболее четкие

20 результаты анализа имеют место при рН анализируемой пробы, преимущественно равном

8 — 14.

Щелочность среды создается добавлением едких щелочей.

25 Необходимая концентрация люцигенщга в пробе зависит от объема взятой на анализ культуральной жидкости и степени ее разведения. Так при разведении 1 — 5: 100 необходим равный объем раствора люцигенина с

30 концентрацией 10 — моль/л; при разведении

413191

Предмет изобретения

Составитель Г. Голева

Редактор Л. Ксенофонтова Техред 3. Тараненко Корректор Н. Торкина

Заказ 1! 57/12 Изд. № 1205 Тираж 456 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета Совета Министров СССР по делам изобретений и открытий

Москва, 7Ê-35, Раушская иаб., д. 4/5

Типография, пр. Сапунова, 2

1 — 10:50 концентрация люцигенина должна составлять 10 — = 10 — моль/л.

Максимум хемилюминесценции в нормальных условиях достигается через 2 — 2,5 сек.

Продолжительность максимального свечения

6 — 7 сек.

Параболический ход изменения зависимости хемилюминесценции от времени окисления является показателем хода процесса окисления, а обсолютные величины максимальной интенсивности хемилюминесценции показывают состояние культуры бактерий, ее жизнеспособность. На жизнеспособность культуры указывает также продолжительность свечения. При нарушении режима окисления наблюдается продолжительное свечение () 60 сек). Для периодического процесса такая же продолжительность свечения наблюдается при глубине окисления сорбита ) 90%, 1. Способ контроля процесса биохимического окисления D-сорбита в 1 -сорбозу, включаю5 щий анализ пробы культуральной жидкости, образующейся при окислении D-сорбита уксуснокислыми бактериями, о тл и ч а ю шийся тем, что, с целью повышения скорости, чувствительности и избирательности анализа, пробу

lo культуральной жидкости для анализа отбирают многократно через определенные промежутки времени, смешивают с люцигенином в щелочной среде и определяют интенсивность и продолжительность хемилюминесценции, по

15 которым судят о глубине окисления сорбита в сорбозу и жизнеспособности бактерий.

2. Способ по п. 1, отличающийся тем, что контроль ведут при рН, преимущественно равном 8 — 14.