Способ определения антиокислительной активности липидов

 

ь

ОПИСАИЯЕ изовvexr.ния ""6566 4

Союз Советскик

Социалисткческик

Республик (61) Дополнительное к авт. саид-ву (22) Заявлено119777 (23) 2509763/28-13 (A 61 8 10/ОО

G 01 И 33/1б

Государственный комитет

СССР ио делам изобретений и открытий (23) Приоритет (53) УДК 6м-о03. .215 (088 . 8) Опубликовано 150479. Бюллетень И914

Дата опубликования описания 1504,79 (72) Авторы изобретения и. левицкий, л.и. 1вафран и е.к. Рукевич

Одесский научно-исследовательский институт стоматологии ( 71) Заявители и Бассейновая санэпидемстанция Черноморского водздравотдела

{54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТИОКИСЛИТЕЛЬНОЙ AKTHBBOCTH

ЛИПИДОВ

Изобретение относится к фармакологии.

Известен способ определения антиокислительной активности липидов путем спектрофотометрического измерения продуктов реакции взаимодействия липидов с субстратом {1).

Однако известный способ является недостаточно чувствительным.

Цель изобретения — повышение чувствительности способа.

{ь „- а1„) .2 и,р.p g где {аЭ вЂ” ЬЭа ) — разница концентраций йода;

Цель достигается тем, что по пред-, лагаемому способу в качестве субстрата используют йодистоводородную 15 кислоту, причем реакцию взаимодействия проводят в присутствии 5-10%-ного раствора органической кислоты, а образование продуктов реакции измеряют при длине волны 350-360 нм.

2Î

Определение антиокислительной активности производят на спектрофотометре СФ†- 4А при длине волны 353 нм.

В кювету спектрофотометра, снабженного термостатируюшим устройствот{, способным поддерживать температуру в о камере измерения 30 С, наливают 1 мл смеси {СН СООН + хлороформ), l мл

-раствора KJ на спирте, 1 мл Н О на спирте, прогревают до ЗОО С в течение . ь-10 мин, а затем прибавляют 0,2 мл раствора антиоксиданта.

Показания прибора записывают на первой и одиннадцатой минутах.

Концентрация реактивов KT на этаноле — 0,01 И; На02 на этаноле

0,008 И; смесь: уксусная кислота— хлороформ 1:5 °

Контрольную пробу готовят следуюшим образом: берут 1,0 мл хлороформ— уксусной кислоты, 1,0 мл 0,01 N раствора 1Ы и 1,0 мл Н О + 0,2 мл растворителя, на котором приготовлен раствор антиоксиданта.

Разница в оптической плотности между опытным и контрольным измерениями соответствует эффективности действия антиоксиданта.

Расчет количества йода производят по калибровочной кривой, построенной с использованием различных концентраций йода.

Формула расчета антиокислнтельной активности

6$6614 4 да антйоксидантов (токоферола, глута:тиона 9 -SH н аскорбиновой кис- лоты) .

0,002

Токоферол

0,032

6,80

Глутатион

К-SH

0,016

0,16

10,0

Аскорбиновая кислота

0,096 1,6

0,06

Предлагаемый способ обеспечивает высокую чувствительность, хорошую 25 воспроизводимость, а также прост в исполнении.

Формула изобретения

ЗО

Способ определения антиокислительной активности лицидов путем спектрофотометрического измерения продуктов реакции взаимодействия липидов с субстратом,о т л и ч а ю ц и и с я тем, "что, с целью повышения чувствительСоставитель С. Малютина

Техред С.Мигай Корректор Ид Муска, е актор В. Трубченко

Заказ 1630/3

Тираж 671 Подписное

ЦНИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035 Москва, Ж-35 Раушская наб. д. 4/5

Филиал ППП Патент, r. Ужгород, ул. Проектная, 4

3,2 — обший объем инкубационной смеси!

n — разведение антиоксиданта1

10 — время инкубации1

0,2 — объем антиоксиданта.

Пример. Проведено определение антиокислительной активности ряДанные определения антиокислитель ной активности этих веществ представ,лены в таблице, ности способа, в качестве субстрата используют йодистоводородную кислоту, причем реакцию взаимодействия проводят в присутствии 5-10%-ного раствора органиче=кой. кислоты, а образование продуктов реакции измеряют при длине волны 350-360 нм.

Источники информации, принятые во внимание при экспертизе

1. Перекиснс е окисление липидов в биологических мембранах, М., 1972, с. 247-248.