Способ получения производных аминогликозида или их солей

 

Союз Советских

Социалмстимеских

Республик ((() 724086

ОП ИСАНИЕ

ИЗОБРЕТЕН ИЯ

К ПАТЕНТУ (61) Дополнительный к патенту (51) М. Кл, С 07 Н 15/221/

А 61 К 31/70 (22) 3alaneso 27.10.77 (21) 2535803/23-04 (23) Приоритет — (32) 28.10.76 (31) 130119/76 (33) Япония

1 авударетвенний квинтет

СССР

- вв делам неебретенкн н еткриткй (53) УДК 547.673.1, .07 (088.8) Опубликовано 25.03,80. БюллЕтень № 11

Дата опубликования описания 25 03 80

Иностранец

Кикуо Игараси (Япония) (72) Автор изобретения

Иностранная фирма

"Сионоги знд Ко, Лтд" (Япония) (71) Заявитель.":- -*

Ф (54) СПОСОБ ПОЛУЧЕНИЯ ПРОИЗВОДНЫХ АМЙ)ГОГЛИКОЗИДА

ИЛИ ИХ СОЛЕЙ

Id (сн )„

Предлагается способ получения новых производных аминогликозидов или их солей, обладающих ценными фармакологическими свойствамн и расширяющих арсенал средств воздействия на живой организм.

Пель изобретения — получение новых производных аминогликозида или их солей — достигается путем синтеза, основанного на известной реакции взаимодействия амина с N-оксисукциннмидным производным карбоновой кислоты 11).

Отптсывается способ получения производных аминогликоэида общей формулы

ag 1 16 1 7 где Я вЂ” атом водорода, низший алкил или бенэил;

Ят — аминометил, оксиметил, метиламинометил или 1-метиламиноэтил;

R,Rq и Rq — независимо друт от друга атом водорода или оксигрупла;

R4 — окси- или аминогруппа;

Не — амино- или метиламиногруппа;

Йт- оксигруппа или метил;

R8 — атом водорода, оксиметил или карба. моипоксиметил; пунктирная линия обозначает присутствие или отсутствие двойной связи;

n — целое число, принимающее значение

1или2, или их солей, заключающийся в реакции взаимодействия аминогликозида общей формулы

1 к "гм ян

5 RS

116 7 вб где Ъ|, Нр, Rq На, Rq, R(;, Rzv ня имен>г

724086

НООС ОН

3 указанные значения; пунктирная линия обозначает присутствие или отсутствие двойной связи, в котором все функциональные группы, кроме 1-аминогруппы, защищены защитными группами, с N-оксисукцйнимидным сложным эфиром карбоновой кислоты общей формулы

4 чейный при этом осадок растворяют в

46 мл воды, смешанной с ацетоном, и смесь выдерживают в течение ночи в холодильнике.

Выпавшие кристаллы собирают путем фильтрования и промывают охлажденным ацетоном, получая при этом 8,70 r N-бензил-4-оксилиперидин-4-карбоновую кислоту (84,5%), т.пл.260,5262 С (разложение) . (сн )„ где R и и имеют указанные значения, в присутствии растворителя: диметилформамида или его смеси с водой, или воды, предпочтительно в присутствии диметилформамида, при 0 — 25 С, предпочтительно при 20 — 25 С, с последующим удалением защитных групп и выделением целевого продукта в виде свободного основания или соли, Пример 1. Получение N-оксисукцинамидо-N-бензилоксикарбонил-4-оксипиперидин-4- к арбо ксилата.

А. К раствору 10,0 r (53 ммоль) N-бензилпиперидииа в 14 мл сухого тетрагидрофурана добавляют 23 мл (3,6 экв. 25% по весу) раствора цианистого водорода в тетрагидрофуране . при комнатной температуре и выдерживают полученную смесь в течение 1 ч. Растворитель и оставшиеся реагенты удаляют испарением при пониженном давлении, получают при этом

11,50 г И-бензилпиперидонциангидрида в виде бесцветного кристаллического вещества с т.пл. 79-85 С.

Б. Смесь 9,477 r (43,9 ммоль) неочищенного N-бензилпиперидонцианпщрина, полученного как описано выше, и 18,4 мл (5 экв.) концентрированной соляной кислоты нагревают на водяной бане в течение 1 ч. В ходе протекания реакции осаждается в виде кристаллов хлористый аммоний. Реакционную .смесь охлаждают, образовавшийся в виде осадка хлористый аммоний собирают путем фильтрации и промывают охлажденным ацетоном. Объединенные вместе фильтраты и полученный после -промывания раствор отгоняют до получения сухого вещества при пониженном давлении, получая в результате 12,65 г осадка .

Остаток растворяют в 65 мл воды, смешанной с 28 мл воды, содержащей 3,97 г ацетата натрия, и смесь отгоняют при пониженном давлении. Полученный осадок растирают в порошок с 150 мл ацетона и нерастворимый материал экстрагируют смесью хлороформа и метанола (9:1). Отфильтровывают нерастворимый хлористый натрий и фильтрат испаряют при пониженном давлении. ПолуКристаллы содержат 1 моль кристаллиэационной воды, которая теряется при высушивании при температуре 75 С при пониженном давлении в течение 5 ч. Вес уменьшается до 7,92 г (выход 77%).

В. Раствор 2,35 г (10 ммоль) полученной, 15 как описано выше, N-бензил-4-оксипиперидин-4-карбоновой кислоты, растворенной в смеси

20 мл воды, 20 мл метанола и 2,0 мл концентрированной соляной кислоты, подвергают каталитической пщрогенизации в атмосфере водорода в течение 23 ч в присутствии 1 г

10%-ного палладия/древесного угля. После завершения реакции катализатор удаляют путем фильтрации и промывают водным раствором метанола. Объединенные вместе фильтрат

25 и раствор, полученный после промывания, испаряют при пониженном давлении, получая при этом 1,95 г осадка в виде светло-желтых кристаллов.

Их растворяют в 15 мл воды, содержащей 1,25 r (30 ммоль) гидрата окиси натрия и 2,05 г (12 ммоль) бензилоксикарбонилхлорида добавляют в полученный раствор в течение 30 мин при комнатной температуре при перемешивании. Смесь выдерживают при

I. комнатной температуре в течение 2 ч, после чего добавляют к ней 0,5 мл 1№-ного водного раствора гидрата окиси натрия. Смесь промывают эфиром и доводят значение рН водного слоя до 2 с помощью 10%-ной соляной кислоты для того, чтобы получить маслянистый материал; который экстрагируют. эфиром. Этерифицированный раствор промывают водой и высушивают над безводным сульфатом натрия, получая при этом 2,53 г

4 (выход 9%) й-бенэилоксикарбонил-4-оксипиперидин-4-карбоновой кислоты в виде маслянистого вещества светло-желтого цвета.

Г. К суспензии 2,49 г (8,92 ммоль) N-бензилоксикарбонил-4-оксипиперидин-4-карбоновой кислоты и 1,02 г (8,92 ммоль) И-оксисукцинимида в 40 мл сухого этилацетата добавляют раствор 1,84 г (8,92 ммоль) дициклогексилкарбодиимида в 5 мл сухого этилацетата, смесь перемешивают при комнатной температуре в течение ночи, после чего охлаждают в ледяной бане. Нерастворимый материал удаляют путем фильтрации, промывают охлажденным этилацетатом. Объединенные

724086

5 вместе фильтрат и раствор, полученный в результате промывания, испаряют при пониженном давлении, получая при этом 3,34 r N-оксисукцинимидо-И-бенэилоксикарбонил-4-оксипиперидин.

Это соединение используется для последующего ацилирования без дальнейшей очистки.

Пример 2. Получение М-оксисукцинимидо-01 -1-бензилоксикарбонил-3-оксипирролидин-3-карбоксилата. о

А. К раствору 16,40 r (9,45 ммоль) 1-бензил-3-пирролидона в 5 мл тетрагидрофурана добавляют 40 мл (343 ммоль) 25%-кого раствора HCN в тетрагидрофуране, и полученную смесь выдерживают в течение 5 ч.

Растворитель и избыток реагента испаряют при пониженном давлении. Осадок растворяют в 38,5 мл концентрированной соляной кислоты и раствор нагревают на водяной бане в течение 1 ч. После охлаждения отфильтровывают осадившийся хлористый аммоний и промывают его 4 мл охлажденной соляной кислоты и затем ацетоном. Объединенные вместе фильтрат и раствор, полученный при промывании, испаряют при пониженном давлении. Осадок растворяют в 50 мл водного раствора 8 r ацетат натрия, и смесь (значение рН которой составляет 5) испаряют при пониженном давлении, Осадок растворяют в хлороформе, а нерастворимый хлористый натрий удаляют путем фильтрации и промывают хлороформом. Слой хлороформа экстрагируют

50 мл водного раствора, содержащего 4 г гидрата окиси натрия (смесь после этого имеет рН 9). Водный слой промывают один раз хлороформом, медленно абсорбируют на

200 мл амберлита TR — 120В(Н ) со скоростью

3 — 4 с на одну каплю). Колонну промывают

400 мл воды и элюируют 700 мл 1 н. гидроокиси аммония. Элюат испаряют при пониженном давлении и полученный осадок рекристаллизуют из 80 мл воды, получая при этом 12,048 г бесцветного игольчатого вещества с т.пл. 184 — 189 С (разложение). Игольчатые кристаллы содержат кристаллизационную воду, которую удаляют при 70 С и при пониженном давлении в течение двух дней, получая в результате 10,45 г DL-бенэил-3-оксипирролидин-3-карбоновой кислоты (выход 33%) .

Найдено,%: С 64,10; Н 6,94; N 6,25.

CiqHisNO> 1/5 Н О

Вычислено,%: С 6:.,17; Н- 6,90; N 6,23.

Б. К раствору 885 г (4, 0 ммоль) DL-1-бензил-3-оксипирролидин-3-карбоновой кислоты, 55 растворенных в 50%-ном водном растворе диоксана, добавляют 1 мл концентрированной соляной кислоты и смесь каталитически гидрируют в присутствии 400 мг 10%-ного пал6 ладия/древесного угля. Катализатор удаляют путем фильтрования и промывают водным раствором диоксана. Объединенные вместе фильтрат и раствор, полученный после промывания испаряют при пониженном давлении до получения осадка, который рекристаллизуют из ацетона, получая при этом 610 мг гидрохлорида DL-3-оксипирролидин-3-карбоновой кислоты в виде бесцветных призм (выход 91%), т.пл. 201 — 210 С (разложение), В. К раствору 610 мг (3,6 ммоль) гидрохлорида DL-3-оксипирролидин-3-карбоновой кислоты, растворенного в 10 мл воды, добавляют б мл водного раствора 456 мг 13 экв) гидрата окиси натрия и 750 мг (1,2 экв) бензилоксикарбонилхлорида при комнатной температуре и при перемешивании, причем смесь перемешивают в течение 2 ч. Значение рН реакционной смеси доводят до 11 с помощью 10%-ного водного раствора гидрата окиси натрия, дважды промывают эфиром, затем доводят значение рН до 2 с помощью

10%-ной соляной кислоты и трижды экстрагируют полученную смесь эфиром. Полученный экстракт сушат над безводным сульфатом натрия и испаряют при пониженном давлении до получения 800 мг осадка, который кристаллизуют нз смеси эфира и петролейного эфира, Полученные кристаллы (т,пл. 117—

133 С) рекристаллизуют из смеси эфира и хлористого метилена, получая при этом

595 мг DL-1-бензилоксикарбонил-3-оксипирролидин-3-карбоновой кислоты (выход 61,6%), т.пл. 142-144 С.

Найдено,%: С 58,86; Н 5,76; N 5,16.

С1 з Н1 s NDs

Вычйслено,%: С 58,86; Н 5,70; и 5,28.

Г. К раствору 266 мг (2,00 ммоль) 01 -1-бенилоксикарбонил-3-оксипирролидин-3-карбоновой кислоты в 30 мл этилацетата при нагревании добавляют 115 мг (1,0 ммоль) порошкообразного 1-оксисукцинимида. Сразу же после добавления выпадают бесцветные кри сталлы (206 мг, 1,0 ммоль) дициклогексикарбодиимида, Смесь перемешивают в течение

1,5 ч и выдерживают в течение ночи в холодильнике. Кристаллы собирают путем фильтрования и нерастворимый материал промывают этилацетатом. Объединенные вместе фильтрат и раствор, полученный после промывания, испаряют при пониженном давлении, получая

390 мг осадка (т.пл, 154 — 161 С). Его рекристаллизуют иэ смеси ацетона и гексана, получая при этом 277 мг й-оксисукцинимило- D L-1-бензилоксика рбонил-3-оксипирролидин-3-карбоксилата выход 76,6%, т.пл. I59-161 С.

Пример 3. Получение 1-N-(4-оксипиридин-4-карбонил) канамицина А.

К раствору 1,55 r (2,5 ммоль) 6- 11-трет- бутоксикарбонилканамицина А в 24 мл

50%-ного 1,2-диметоксиэтана прикалывают раствор 1,53 г (4,06 ммоль) И-оксисукцинимидо-N-бензилоксикарбонил-4-оксипиперидин-4-карбоксилата в 24 мл 1,2-бензилоксикарбонил-4-оксипиперидин-4-карбоксилата в 24 мл

1,2-диметоксиэтана при температуре 2 — 3 С в течение 2 ч. Смесь перемешивают при комнат

)ной температуре в течение 14,5 ч испаряют при пониженном давлении при температуре, бани ниже 35 С, получая при этом 3,2 г осадка в виде белого пенистого вещества.

Этот осадок растворяют в 20 мл 90%-ной трифторуксуснои кислоты и смесь выдержи- вают при комнатной температуре в течЕние

1 и 2/3 ч и испаряют при пониженном давлении. Осадок растворяют в 50 мл 50%-ного

aophoro раствора метанола и каталитически гидрируют в присутствии 1 r 10%-ного катализатора палладий/древесйый уголь в атмосфере водорода в течение 3 ч, После завершения реакции палладий активированный уголь удаляют .путем фильтрования и растворитель испаряют при пониженном давлении. Осадок (4,15 г) растворяют в 10 мл воды, абсорбируют в 100 мл амберлита CG -- 50 (NH4), колонку промывают 240 мл воды и элюируют 100 мл воды и 1000 мл 1 н, гидрата окиси аммония по методу градиентов (одна фракция 10 r).

Элюат (474 мг) из фракций,91 — 108 раство ряют в 10 мл воды, абсорбируют 100 мл амберлита CG — 50 (NH4), колонку промь1вают 20 мл воды и элюируют 1000 мл воды и 1000 мл lн. гидрата окиси аммония.

Элюаты (27 мг) из фракций 89 — 95 растворяют в 6 мл воды, абсорбируют на колонке

100 мл амберлита CG — 50 (NH4), промывают колонку 30 мл воды и элюируют

1000 мл воды и 1000 мл l .н. гидрата окиси аммония. Элюат (270 мг) из фракций

89 — 95 растворяют в 6 мл воды, абсорбируют на колонке 100 мл амберлита CG — 50 (МН4) и колонку промывают 30 мл воды и

+ элюируют 1000 мл воды и 0,5 н. гидрата оки си аммония. Элюагы иэ фракций 159 — 166 лиофилизируют до получения 71 кг требуемого вещества (выход 6%), (a) + 86,3 +

1,2" (с = 1,016, вода).

Тонкослойная хроматография (Кизельгель

60 Р,,4Мерк): Rg 0,45 .(система растворителя — метанол: концентрированный аммиак

1:1, для сравнения Rg А канамицина 0,25.

Пример 4. Получение 1-N-(4-оксипиперидин-4-карбонил) тобрамицина, A. К раствору 9,0 г (17,9 ммоль) дигидрата торбамицииа в 322 мл воды добавляю1

322 мл пнричина, 32 мл триэ1иламина и

724086

2,64 r (18,4 ммоль) трет-бутилоксикарбонилаэида и смесь оставляют для выдерживания при комнатной температуре в течение ночи, после чего ее испаряют при пониженном давлении при температуре 40 С.

Полученный продукт растворяют в 100 мл воды и образовавшуюся смесь испаряют при пониженном давлении. Эту операцию повторяют трижды для получения 11,95 г осадка.

>о Осадок растворяют в 60 мл воды и абсорбируют 450 мл амберлита CG — 50 (NH4).

Колонку промывают 1500 мл воды, элюируют

1000 мл воды и 1000 мл 0,1 н, гидрата окиси аммония методом градиентов и затем

4100 мг 0,1 н. гидрата окиси аммония (одна фракция 15 г).

Иэ фракции 141 — 200 получают 4,70 г 6-М-трет-бутилоксикарбонилтобрамицина (выход

46,4%), (а)" +110,3 + 1,6 (с 0,940, вода).

Найдено, о: С 47,79; Н 7,92; N 11,78.

С2ЗН4> NO 1/2 Н О

Вычислено,%: С 47,90; Н 8,00; N 12,15.

Б. К раствору 1,81 г (3,0 моль) полученного указанным способом 6-й-трет-бутил25 оксикарбонилтобрамицина, растворенного в смеси 5 мл воды и 5 мл диметилформамида, прикапывают 8 мл раствора диметилформамида, содержащего 0,748 r (3,0 ммоль)

N-бензилоксикарбонилсукцинимида, при тем30 пературе 0 — 5 С. с перемешиванием в течение

2 ч, после чего смесь перемешивают при той же самой температуре в течение ночи.

Растворитель отгоняют при пониженном давлении, получая при этом 3,17 г осадка.

Его растворяют в 40 мл воды и экстрагируют четыре раза, используя каждый раз

30 мл зтилацетата. Водный слой адсорбируют

100 мл амберлита CG — 50 (NH4) и элюируют 1700 мл воды и 1700 мл 0,05 н. раство40 ра гидрата окиси аммония по методу градиентов и затем 1500 мл 0,1 н. раствора гидрата окиси аммония (одна фракция 18 мл).

Фракции 13 — 132 обеспечивают получение

I I

877 мг 6-N-трет-бутилоксикарбонил-2-N-бензил45 оксикарбонилтобрамицина (выход 40%) . Фракции 114 — 132 лиофилиэуют и определяют физические характеристики полученного вещества, (а)D + 87,2 + 1,2 (с 1023, вода).

Найдено,%: С 51,09; H 7,47; N 9,37.

so Сэ,Н,,М,О,э 15 Н О

Вычислено,%: С 51,09; Н 7,47; N 9,61.

Тонкослойная хроматография (Кизельгель

60 Р 4Мерк): Rg 0,19 (система растворителей — иэопропиловый спирт: концентрированss ный водный раствор аммиака: хлороформ в соотношении 4:1:1), для сравнения Rg б — N- N- трет-бутилоксик арбонилтобрамицин 0,08.

В. К раствору 387 мг (0,566 ммоль) 6-N-трет-бутилоксикарбонил-2-N-бенэилокси7240

10, карбонил-тобрамицина, растворенного в 50jr -íoì водном растворе диметилформамида, прикапы- вают раствор 319 мг (0,679 ммоль) N-оксисукцинимида бензилоксикарбонил-4-оксипиперидин-4-карбоксилата в 6 мл диметилформамида при температуре 0 — 3 С с перемешиванием в течение 1 и 1/3 ч. Смесь перемешивают при той же самой температуре в течение

50 мин, а затем при комнатной температуре в течение 4 ч и испаряют при пониженном давлении, получая при этом 787 мг осадка в виде бесцветного пенистого вещества. Его растворяют в 8 мл 90%-ной трифторуксусной кислоты, полученную смесь перемешивают при комнатной температуре в течение 1,5 ч и испаряют до получения осадка, который подвергают каталитическому гидрпрованию с использованием 334 мг 5%-ного палладия/древесного угля в смеси 3 мл уксусной кислоты, 0,6 мл воды и 3 мл метанола. После завер- эц шения реакции катализатор отфильтровывают и фильтрат испаряют при пониженном давле, нии до получения 1,25 г осадка. его растворяют в 4 мл воды и адсорбируют их на колонке 30 мл амберлита CG — 50 (NH<). Ко- 25 лонку промывают 300 мл воды и элюируют вещество 1000 мл воды и 1000 мл 1 н. раствора гидрата окиси аммония по методу градиента (одна фракция 10 мл).

Элюаты (47 мг) фракций 68 — 73 растворяют в 1,5 мл воды, абсорбируют на 5 мл амберлита CG-50 (NH ), и элюируют 480 мл . воды и 480 мл 1 н, раствора гидрата окиси аммония по методу градиента (одна фракция

S мл).

Элюаты фракций 40 — 43 лиофилизуют, чтобы получить 16 мг указанного соединения ! (выход 4,9%). Тонкослойная хроматография (Кизельгель 60 F»4 Мерк): В 0,35 (система растворителя этанол: концентрированный 4о водный раствор аммиака 1:1, для сравнения

Rg тобрамицина 0,58..

Пример 5. Получение DL-1-N-(3 °

-oKcHmppowpw-3-карбонилтобрамицина.

А. Смесь 174 мг (0,3 ммоль) тетра-N-формилтобрамицина и 131 мг (1,2 экв.)

N.îксисукцинимидо-0 L-1-бензилоксикарбонил-3-оксипирролидин-3- карбоксилата, растворенных в 10 мл диметилформамида, выдерживают при комнатной температуре в течение

2 ч и затем испаряют при пониженном давлении, получая осадок, который тщательно превращают в порошок с помощью этилацетата.

Осадок, который при этом выпадает, собирают с помощью фильтрования и промывают этилацетатом. Осадок (266 мг) гидрируют

140 мг 10%-ной смеси палладия/древесного угля в 10 мл воды, 8 мл метанола и капле

86 10 уксусной кислоты. После удаления катализато ра получают 204 мг неоч:пленного тетра-N-формил-0 L-1ч- (3-оксипирролидин-3- карбонил тобрамицина.

Б, Гидролиз тетра-N-формил-01-1- (3-оксипирролидин-3-карбонил) тобрамицина 5%-ной

1соляной кислотой и метанолом (1).

К раствору, содержащему 204 мг тетра-N-формил-01 -1- N- (3-оксипирролидин-3-карбонил) тобрамицина, полученного в ходе указанной операции, в 0,22 мл воды, добавляют 1,96 мл

5%-ного раствора соляная кислота/метанол (смесь 0,55 мл концентрированной соляной кислоты и 6 мл метанола) и смесь гидрируют в масляной бане в течение 22,5 ч. После завершения реакции избыточное количество соляной кислоты удаляют путем обработки смеси 6 мл,Амберлита IR — 45. Смолу удаляют путем фильтрования и промывают водой, Объединенные .вместе фильтрат и раствор, полученный после промывания, испаряют при пониженном давлении, получая при этом

197 мг остатка. Остаток хроматографируют на колонке с 25 мл Амберлита CG — 50 (NH ) и элюируют 500 мл 1 н. раствора гидрата окиси аммония по методу градиентов. Элюаты из фракций 64 — 78 конденсируют и лиофилизуют, получая при этом 98 мг 01.-1-N- (3-оксипирролидин-3-карбонил) тобрамицина, выход в форме бикарбоната 46,4% (n)

85,2 + 1,2 (с 1,046, вода).

Тонкослойная хроматография (кизельгель

60 F,<4 Мерк): Ry 0,40 (система раствор.ителей — изопропиловый спирт: концентрированный водный раствор аммиака 1:1, для сравнения Rg тобрамицина 0 56.

Гидролиз смесью гидрата гидразина уксусной кислоты (2).

Раствор (рН 6) 206 мг полученного по указанному способу тетра-N-формил-DL-1-N(3-оксипирродидин-3-карбонил) тобрамицина, растворенного в смеси 20 мл моногидрата гидразина и 2,63 мл уксусной кислоты, на- гревают с обратным холодильником при перемешивании в течение 6 ч. Реакционную смесь разбавляют водой до 400 мл, абсорбируют 100 мл Амберлита CG — 50 (NH„), промывают 1 л воды и 1 л 0,4%-ного раствора гидрата окиси аммония, а затем элн>ируют 0,8%-ным раствором гидрата окиси аммония (одна фракция 12 мл).

Фракции 20 — 47 испаряют при понижешн;м давлении и лиофилизунп, получая лри эзом

125 мг указанного соединения (выход в ви. де ЗН СОэ соли 54,6Я). (а) + 77,0 + 1,1 (с 1,064, вода).

Найдено,9: С 40,62; Н 6,39; N 10,80.

СхзН4а1 1ь% < 3Hã СО>

Вычислено5 : С 4(),75; Н 6 57; N 10.96.

72408

ll

Это соединение идентично соединению, полученному по способу l.

Пример 6. Получение N (t-этил-3-оксипирролидин-3-карбонилтобрамицина.

Смесь l-бензилоксикарбонил-3-оксипирроли5 дин-3-карбоновой кислоты (2,090 г; 7,16 моль), 3,2,6,3"-тетра- N-формилтобрамицина (4,160 г;

7,16 ммоль), N-оксисукцинимида (910 мг) и дициклогексилкарбодиимида (1,870 г;

7,16 ммоль) растворяют в 50 мл N,N-диметил- lÎ формамида и выдерживают при комнатной температуре в течение ночи. Осажденную дициклогексилмочевину отфильтровывают и промывают 5 мл N,N-диметилформамида. К объединенным вместе фильтрату и раствору при промывании добавляют 550 мг этилацетата для того, чтобы получить осадок. Осадок собирают путем фильтрования, промывают этилацетатом, растворяют в воде и испаряют при пониженном давлении. Остаток (6,00 r) растворяют в смеси 70 мл воды и 20 мл метанола и подвергают смесь каталитическому гидрированию в присутствии 2,00 г 10%-ного палладия древесного угля при пониженном давлении. После того, как поглощается рассчитанное заранее количество газообразного водорода, катализатор отфильтровывают и промывают водой. Объединенные вместе фильтрат и раствор после промывания испаряют при пониженном давлении, получая при этом

5,30 r 1-К-(3-оксипирролидин-3-карбонил)Н

3,2,6,3-тетраформилтобрамицина в вид6 бесцветного порошка, К раствору 228 мг (0,63 ммоль) порошка, растворенного в 0,5 мл воды, добавля- 35 ют 1,0 мл ацетонитрила. Смесь разделяют на два слоя и затем делают гомогенной путем добавления 0,48 мл водного раствора ацетальдегида, полученного сразу же после дистилляции (раствор 6,77 г ацетальдегида в 50 мл 4о воды). Сразу же после этого добавляют цианборгидрид натрия при изменении величины рН раствора до 7 с помощью уксусной кислоты. После истечения 2 ч смесь концентрируют и добавляют к остатку 4 мл этилацета- 4

12 та, после чего смесь тщательно перемешивают., Полученный в результате этого порошок отфильтровывают и собирают, промывают этилацетатом, растворяют смесью из 1 мл воды изопропилового спирта, медленно абсорбируют на колонке с 13,5 г кизельгеля (выпускаемого компанией Мерк) и элюируют смесью изопропилового спирта, концентрированного раствора гидрата окиси аммония и хлороформа (2:1:1), одна фракция 10 г.

Элюаты из фракций l I — 30 испаряют и остаток растворяют в 14,6 мл воды, к которой добавляют 1,46 мл гидрата гидразина и

1,73 мл уксусной кислоты. Смесь нагревают с обратным холодильником в течение 6 ч, разбавляют 261 мл воды и абсорбируют на

73 мл амберлита CG — 50 (NHä) . .Колонку промывают 680 мл воды и затем элюируют

0„4%-ным водным раствором гидрата окиси аммония (одна фракция 10 r).

Элюаты фракций 70 — 75 обрабатывают обесцвечивающим углем, смесь отфильтровывают через фильтр из стекла пирекс и фильтрат испаряют до получения 52,2 мг указанного соединения в виде бесцветного порошка.

Его растворяют в небольшом количестве воды, доводят рН раствора до значения, равного 4,6 с помощью 0,095 н. раствора серной кислоты и испаряют при пониженном давлении.

Добавляют этанол и собирают выпадающий после этого осадок путем фильтрации, промывают этанолом, растворяют в воде, обрабатывают обесцвечивающим углем (Norit А), отфильтровывают через фильтр из пирекса, получая образец для микроанализа, и лиофилизуют до получения,103 мг соответствующего сульфата (общий выход 41,9%), (а)" + 72,5"

+I,l (с = 1,031, в воде).

Найдено,%: С 28,61; Н 6,93; N 7,93;

S 8,48.

Cg g H4 q Nq 0g q ° 2Н 3 04 . 10,5 Н, О

Вычислено,%: С 28,97; Н 7,15; К 8,06;

S 7,69.

В таблице приведены соединения, полученные аналогичным способом.

72408б

"ж с о ,) ОО

1Р М ф йо

Ч-ч

11

+! О о, t <р

+ (р

Г1 О

v о

1 ф

Ф о Я

Ч, СЧ 1 ф (й1 о О

+ «ф ф Ю о х х

Я

Г1 ф м м м о

Й о

1 о О хо ф а

12 о а

О ОО х

CV ,. ( с И

1/ о

° ОО г г ф Я м о о о

v м ц.о о х

«д а

- и юй о

М

Ц 3

Ol с3 я о

Г 4 4 0„1Л О

5.«

oZ( .1 1О М

-З11 м„ о х

5 -

: Р.р

;ф

1 ,4" о 6" са Г 4

2 оа

1Х

- Z

ОО м (» о О (ОО к Г1

° "Д оо „ ф щО о

NVZu7caVZ

° И

". х

° х а д а.° ф

Мt» ф

М оО

g о м

1О

О оО

@<@) л о

Г4

> о,ф 11 0, CO

Ж4)Z, о

О м о м

+ Ф

, 1 о о ф.б ф

° Я. о о. а

Ж 34

О о

Г1

««Х .,о "-„

О . -ж о яОх ..0) ф а

О м

„LA;о

V гч Са 0 2

1 а ь 8

Р j и .О .ф. м о

)х Й о о ф и о й

, о х х

QO

Г3

О о оО

° х о ж

Д а К t

gl („) Z

724086

16 О" чъ оо

ОО

О .. ж о 0)

О а й,О Г 3 (Г 3

CO

,) 2

С1 о

" о О ф

О а ж

Д (» ф о

ca v z о к х о

2 о .> .й х

:4 /Ъ

+ 4>

ceca О ч Щ

Ф вЂ” +3 а о о о й(lO

М «< н (О.

Е. о

И Ф

2 2

8. о!

К

Й и

Р о 43, а. 5 о

Р м

Ф ) «( О фх

Х о о 3 М (3

$ 5

О.Я 5

Д О,О

ОО . » о в О

ОО, „ О Й ий

fI 3 о, сс сч 2 ) е

5 д, t

1

1 о в3

9 д

1 ! 1 !

1

)ф Ф оо

QO

Vl. у) /) о" 8

c4 t hl

" О

0О и Е о

<ч х м о О

ЕО о" и

zO g ..

zvdmvz

И

1.

3 и о Д х

g 4 (1

Й

Иф о

Ю

z z5

Зф

724086 где Я1, В2, Вз, Rp ° Rg Rg, Rg H 118 HMPNT указанные значения, 3

В., 10

5 6

1 6 7 где R соответствует атому водорода, низшему алкилу или бензилу;

В соответствует аминометилу, оксиметилу, 5 метиламинометилу или 1- метиламиноэтилу;

R, R и R6 соответствуют независимо друг от друга атому водорода или окси;

f4 соответствует оксп или амино;

R, соответствует амино или метиламино;

В соответствует окси или метилу;

R> соответствует атому водорода, оксимстилу или карбамоилоксиметилу; пунктирная линия соответствует присутствию илп отсутствию двойной связи; 25 и соответствует целому числу, принимающему значения 1 или 2, или их солей, отличающийся тем, что аминогликозид общей формулы

1 ЗО

Кг "г" мн

liOOC ОН (CHz)tl

Составитель Г. Коннова

Техред М,Келемеш

Корректор F..Папп /

Редактор Кузнецова

Тираж 495 Подписное

Ш1ИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий

113035, Москва, Ж вЂ” 35, Раушская наб., л. 4/5

Заказ 478/46

Филиал ППП "Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4

17

Формула изобретения

1. Способ получения производных аминогликозида общей формулы l пунктирная линия соответствует присутствию ф или отсутствию двойной связи, в котором все функциональные группы, кроме 1-аминогруппы, защищены защитными группами, подвергают реакции взаимодействия с (4-оксисукцинимидным сложным эфиром карбоновой кислоты общей формулы где 8 и п имеют указанные значения, в присутствии растворителя: диметилформамида или его смеси с водой или воды, при температуре 0 — 25 С с последующими удалениями защитных групп и выделением целевого продукта в виде свободного основания или соли.

2. Способ по п. 1, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что в качестве растворителя используют диметилформамид, 3. Способ по и. 1, о т л и ч а ю щ и йс я тем, что реакцию взаимодействия осуществляют при 20 — 25 С.

Источники информации принятые во внимание прн экспертизе

1. Шредер Э., Любке К. Пептиды, ч. 1.

М., Мир, 1967, с. 116.