Способ определения устойчивости растений к фитопатогенным поражениям
Союз Советских
Социалистических
Республик
ОП ИСАНИЕ
ИЗОБРЕТЕНИЯ
К АВТОРСКОМУ СВИДЕТЕЛЬСТВУ
А 01 G 7/06 с присоединением заявки РЙ Говудврстввнньй квинтет СССР (23) Приоритет ао аелвм иэовретеиий и втхрытий Опубликовано 25 04.80. Бюллетень Рй15 Дата опубликования описания 28.04.80 (53) УДК 631 524 (088.8) (72) Авторы изобретения Ф. Н. Пирназарова, Х. Х. Сагдуллаев, H. Ф. Гимашева, А. И. Исмаилов и А. С. Садыков Институт биооргаиической химии AH Узбекской ССР (71) Заявитель ров и зависящих от степени устойчивости растений к тем или иным внешним воздействиям и поражениям 2 . Однако такой способ достаточно трудоемкий, длительный и не дает точных 5 данных. Цель изобретения — повышение точности оценки устойчивости растений к пато-гену и ускорение определения. Это достигается тем, что в качестве биохимического показателя используют показатель антиокислительной активности липидпигментного комплекса через неделю после инфиш рования, по сравнению с неинфицированным растением. На чертеже изображен график зависимости антиокислптельной активности. Способ осуществляется следующим образом. Определяют антиокислнтельную активность липидпигментного комплекса (ЛПК), выделенного из листьев определенного яруса инфицированного растения, .и сравнивают его с тем же показателем Изобретение относится к сельскому хозяйству, а именно к общим вопросам ботаники, и может быть использовано для определения устойчивости растений к фитопатогенным поражениям в селек. ционной работе. Известен способ выведения и испытания устойчивых к патогенным поражениям растений, при котором весь селективный материал выращивают в полевых условиях в течение всего периода вегетацииЯ . Однако такой способ связан с больши ми затратами труда и времени и визуальная реакция на патоген проростков или молодых растенйй не всегда позво.«ляет предугадать реакцито целого растения. Известен способ определения устойчивости растений к неблагоприятным условиям внешней среды, в том числе к фитопатогенным поражениям, по которому определяют количество токсических веществ, появляющихся в липидах растений под действием неблагоприятных факто(54) СПОСОБ ОПРЕДЕЛЕНИЯ УСТОЙЧИВОСТИ РАСТЕНИЙ К ФИТОПАТОГЕННЫМ ПОРАЖЕНИЯМ з 72878 неинфицированного растения. Лнтиокислительную активность (ЛОА) or..ðåäåëïîò методом термического окисления метилолеатной модели. Для этого ЛПК зкстрагируют и листьев смесью хлороформметанол (1: 2), растворяют в 3-4 мл 5 метилолеата с концентрацией ЛПК 10-20 мг/мл и размещают в окисли— тельных ячейках с капиллярной трубкой, помещенной в термостат. Температура о 10 окисления 80, ток кислорода — не менее 6 л/час на каждую ячейку. Одновременно с началом обесцвечивания зеленого пигмента — хлорофилла (Dnao в ацетоне < 0,3) из ячеек отбирают пробы для определения гидроперекисей. 40 Использование предлагаемого способа значительно сократит сроки и повысит эффек — тивность диагностики устойчивости растений к фитопатогенным поражениям. Кзыл-Рават 890 450 110 3120 йы айат 300 2 300 1200 2020 230 5, . 1040 1270 7 О 420 Q0 — 4-00 Кол тво гидроперекисей опреде ляется йодометрическим титрованием. Для этого точное весовое количество окисляющегося субстрата (200 мг) заливают 10 мл смеси хлороформ ледяная уксусная кислота (1:1), из сосуда удаляют воздух путем продувания 25 углекислым газом и прибавляют 1 мл насьпценного раствора KD в метаноле. Сосуд закрывают притертой пробкой и оставляют на 10-24 час в темном месте. Количество выделившихся гидроперекисей определяется по формуле: о и 22 3 Е23 TYl —2р где Р— взятая навеска окисляюшего — ы ся субстрата; N иЧ вЂ” титр и объем раствора тио— сульфата натрия. При построении кинетических кривых накопления перекисей при окислении стандартного метилолеата и метилолеата с ЛПК в зависимости от времени за величину периода индукции принимается время, в течение которого концентрация гидроперекисей станет выше 0,1 ммоль/г. 45 Величина АОА определяется по формуле со АОА = 4 где .с< — период. индукции при окислении стандартного метилолеата;. — период индукции при окислении метилолеата с ЛПК; С вЂ” концентрация ЛПК в метил— олеа;е, г/мл. При изучении ЛОЛ ЛПК листьев растений, разли п ых по устойчивости к заболевицпо в норме (ЛОЛ ) и при за— ражении (ЛОЛО), характер изменения ь ЛОА"ЛОА, -ЛОЛ„на 2-й, 5-й и 7-й дни после заражения разлитии. Для устойчивых растений на 2-й день паблюдается снижение ь ЛОА, на 5-й день — резкое увеличение, на 7-й день — устанавливается выше контроля. Для восприимчивых растений на 2 и день наблюдается повышение ь ЛОА, на 5 — и — некоторый сиад, на 7=й снижение уровня л AOA ниже контрольного. Устойчивость сорта определяют по положительной величине ь ЛОА ЛПК, измеренной па 7 — и день после ицфицкро— вания растения патогеном, восприимчивость — по аналогичной отрицательной величине,, АОЛ. Пример, Исследуют АОА ЛПК листьев хлопчатника сортов С вЂ” 4727 и Кзыл-Рават двухмссячного возраста (стадия бутонизации), выращенных в одинаковых условиях теплицы Института экспериментальной биологии ЛН УЗССР. Опытные растения инфицируют среднеагрессивным штаммом гриба ger K. @ pt p биотип 2 (3 ° 10 спор/мл), контрольные растения инъецируют равным объемом дистиллированной воды. Данные по АОА и b, ЛОА, измеренные на 2-й, 5 — и и 7 — и дни после инфицирования, приведенные в таблице, подтверждают вилто— устойчивость сорта Кзыл-Рават (ьАОАш= =500) и восприимчивость сорта С 4727 (АОА/ 7 / =400) . 72 оооо Составитель Г. Брост1ок Редактор М. Рогова Техред Н. Бабурка Корректор М. Пожо Заказ 1824/3 Тираж 723 Подписное ШЛИИПИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий 113035, Москва, Ж-35, Раушская наб., д, 4/5 Филиал ППП Патент", r. Ужгород, ул. Проектная, 4 Формула изобретения Способ определения устойчивости растений к фитопатогенным поражениям, включа1оший инфицитование растений фитопатогенами, извлечение липидпигментного комплекса и определение его биохимических показателей, О т л и ч а ю и и и с я ТЕМ > ЧТО, С ЦЕЛЬЮ ПОВЫШЕНИЯ ТОЧНОСТИ оценки устойчивости растения к патогену и ускорения Определения, в качестве биохимического показателя используют 8783 6 показатель антиокислительно и активности липидпигментного комплекса через неделю после инфицирования, по сравнен1по с неинфицированнылs растением. ИстОчники инфорл4ации> принятые во внимание при экспертизе 1. Тарр С. Основы патологии растений. — М.: Мир, 1975, с. 512-514. 10 2. Автор>-кое свидетельство СССР N 303023, кл. A 01 Н 1/04, 1970 (протот.:и) .