Получение веществ, аналогичных заявляемому, в этих условиях не из вестно.
В предложенном способе используют другое исходное соединение—
9,10-диметоксикарбонилтрицикло/4 2
У е
2,0- /дека-3,7,9-триен, которое отличается от укаэанного соединения наличием дополнительной двойной свяСогласно изобретению, к раствору
9,10-диметоксикарбонилтрицикло/4 2
2ф
j 1
2,0 /дека-3,7,9-триена и 10-20-кратного избытка перхлората лития в органическом растворителе прибавляют 1-3 моля, .предпочтительно 2 моля кристаллического иода. Растворитель должен быть инертным по отношению к исходным реагентам, но способен растворять все исходные компоненты, и прежде всего перхлорат лития. Реакционную смесь выдержива316 4 дец-7-ена, .а кипячение реакционной с смеси в циклогексане сопровождается образованием лактона 9-иод-6-окси-4-метоксикарбонилтетрацикло/6,127 ю
I,0,0 < /деканкарбоновой-3 кислоты 2 j согласно схеме: зи в 9-положении и применены другие условия. реакции. В предложенном случае присоединение иода завершается участием не второго атома иода или а к рбметоксильиой группы, а сопровождается образованием продукта ковалентного связывания суперслабого нуклеофила -иерхлорат-аниона из перхлората лития, т.е. процесс протека-, 3S ет по схеме: ю ют при 25 С в течение 24-48 ч и промывают последовательно водой и раствором тиосульфата натрия до полного обесцвечивания раствора. После упаривания растворителя целевой продукт выделяют известным способом, например адсорбциоиной хроматографией на силикагеле. Выход желаемого вещества после выделения составляет 50 X. Строение полученного вещества подтверждено данными
ИК- и П11Р-спектроскопии. Ввиду нали-, 5 7993) чия двух разных атомов галоида, а также из-за наличия перхлоратной группы, обуславливающей нестабильность вещества при нагревании выше
I50 С, элементный анализ обычным пирохимическим методом не может быть использован. Молекулярная и кристаллическая структура установлена методом рентгеноструктурного анализа. !О
Пример 1. Смесь 300 мг (1,22 моля) 9.10-диметоксикарбонилтрицикло/4,2,2,0 /дека-3,7-9триена, 2,14 г (10 моль) перхлората лития и 508 мг (2 моля) иода is в 5 мл абсолютного эфира перемешива. ют при 25 С в течение 48 ч. Полу-. ченный раствор последовательно промывают водой (2 х 10 мл) и раствором тиосульфата натрия (10X) до пол" ур ного обесцвечивания органического слоя. Эфирный. раствор сушат хлористым кальцием, эфир упаривавт. Маслообразный остаток подвергают хроматографическому разделению на колон- у ке (силикагель, элюет-этилацетат:гек6 6 сан — 1:4), собирая фракцию с R 0,52.
Получают 312 мг (50X) 9-иод-6-перхлорато-3,4-дилетокснкарбонилтетрацикло /6,1,1 0, 0" /дец-3-ена. т.пл.
II7 — 118 С (хлороформ — гексан 1:3).
ИК-спектр (вазелиновое масло, см )!
1725, 1710 (С О), 1637 и 1610 (С С)..Спектр ПМР (СИС1, д,, м.д.):
5, 30 (IH, д, J 6,4 Гц, СНОС10з), 3,87 и 380 (6Н, 2с, 2СО СН3), 3,70 (lH, д.дд, ) 6,4, 5,4 и 1,5 Гц, С Н), 3,66 (IH, с, CHJ) и 3,402,30 (5Н, широкий м, протоны скеле та). Экспериментальный рентгеновский материал получен на автодифрактометре "Синтекс P2" (Ио Kk- излучение, 2 О - 9 - метод). Кристаллы моноклинные, а 7,952 (3), Ь 6, О! 2 (г), c - 26,235 (73, УЬ- 90,14 (3);Z - 4 C I Оь, пространственная группа P2>/и. Уточнение структуры методом нанменьщнх квадратов при --. фиксированных атомах водорода для неводороднык атомов проведено до
R 0,049. Данны связей в молекуле приведены на схеме.
6 г ар
2О
Вводимое вещество . Количество РОК 10 мононуклеарных клеток
Титры гемагглютининов (СИ) 0,57
0,46
0,46
1, 2 (2, 25-0, 15)
1,2(2,25-0, 15)
23,2(26,5-19,9) ® оно малотоксично. Оно не вызывает гибели мышей даже в такой высокой дозе как 1000 мг/кг. Для цифлофосфана бурсоставляет 500 мг/кг.
Таким образом, заявляемое вещество обладает достаточно высоким иммунодепрессивным действием, сочетающимся с крайне низкой токсичностью что отличает его от всех известных
7 7993
П р и и е р 2. В условиях, аналогичных для примера l,èý 300 мг (1,22 моля) 9,10- диметоксикарбонилтрицикло/4,2,2,02 /дека-3,7,9-триена, 4,28 г (20 молей) перхлората лития и 508 мг (2 .моля) иода в 8 мл этилацетата получают 300 мг (48X)
9-иод-б-перхлорато-3,4-диметоксикарбонилтетрацикло/6,1,1,0-, u / дец-3-ена, т. пл, 117 " 8 . 16 о
Иммунотропную активность заявляемого препарата определяли по его .способности влиять на антителообразование (титры антител) в сыворотке крови и количеству антиген " связы- 1S вающих и розеткообразующих клеток (РОК) в селезенках мышей, иммунизи рованных эритроцитами барана (эталонный тест — антиген). Эксперименты были проведены на белых мышахсамцах, весом 18 - 20 г. Животных иммунизировали внутрибрюшинным введение стандартной дозы эрнтроцитов (5" 10 клеток). На седьмой день после антигенного стимула животных забивали. От каждой мыши в отдельную пробирку собирали кровь, и сыворотке которой при помощи микротитратора "Такачи" общепринятым методом определяли титры антител (гемагглютининов). Одновременно извлекали селе- .
I зенки и готовили суспензии селезеночных клеток, в которых стандартным методом выявляли клетки, связывающие эритроциты барана и формирую- ЗЗ щие розетки, то есть розеткообраэующие клетки (РОК).
Заявляемое вещест- 3,6 (5,7-1,5) во
Заявляемое вещество+циклофосфан
Циклофосфан
Контроль
Эта иммунодепрессивная активность нового вещества сходна с действием циклофосфана, При комбинированном применении нового вещества и циклофосфана потенцирование действия циклофосфана не наблюдается.
Заявляемое вещество имеет существенное преимущество с эталонным веществом циклофосфаном в том, что
16 8
Результаты экспериментов по определению количества POK обрабатывали статистически. Титры антител выражали в виде супрессивных индексов (СИ), которые получали делени" ем средней величины los титров
2 антител в опыте на среднюю велычииу los титров антител в контроле. .2Величина индекса 0,7 и менее свиде- тельствует о наличии иммунодепрес» сивноro эффекта.
Испытываемое вещество вводили внутрибрюшинно в течение трех дней перед иммунизацией в дозе 150 мг/кг в виде суспензии в 3 Ж-ном водном растворе крахмала. Инъекцию антитела производили через 24 ч после введения испытываемого вещества. Кроме того, было изучено влияние на иммунитет комбинированного применения испытываемого вещества (150 мг/кг). и цнклофосфана (100 мг/кг), Производилось также сравнение иммунодепрессивной активности нового вещества с эталонным иммунодепрес" сантом — циклофосфаном (доз
100 мг/кг).
Результаты эксперимента, представленные в таблице, свидетельствуют о том, что заявляемое вещество проявляет иммунадепрессивную активность: снижает титры антител (СИ
О, 57), а также резко уменьшает количество РОК в селезенке.
1.Ковалев И.Е. и др.Введение в иммунофармакологию, Изд-во Казанского госуниверситета, Казань, 1972.
66Еу
Составитель Г. Андион
Техред А.Бабинец Корректор Н. И1выдкая
Редактор Т. Морозова
Заказ 652 Тиран 448
ВИНИШКИ Государственного комитета СССР по делам изобретений и открытий
113035, Москва, Ж-35", Раушская наб., д. 4/5
Подписное
Филиал ППН "патент", г. Укгород, ул. Проектная, 4
9 799 пммунодепрессивкых препаратов, кото рые, как правило, обладают высокой токснчностью.
Формула нзобретекия
1. 9-Иод-б-перхлорато-3,4-аиметоксикарбонилтетрацикло/6,1,1,0,0 7
Я,1 Ф9 дец-3-ен формулы.
Ф обладающий иммунодепрессивной активностью.
2. Способ получения соединения по п. 1; отличающийся
il 6 1О тем, что 9,10-,пиметоксикарбоннлтрицикло/4,2,2,0 /дека-3,7,9-триен подвергают взаимодействию с иодом и перхлоратом лития в инертном орга-.
S ническом растворителе при комнатной температуре.
Источники информации, принятые.во внимание при экспертизе
2. A. КоМо и др. Электрофильное присоединение в системе трицикло (4,2,2,У дека-3,7 диена. Структуры
20 и некоторые комментарии относительна природы и "участия", J. Огп. Chen.
43, (6) 11.80, 1978.
